女性肺癌组织中Ki 67、P53表达与临床的相关性研究

女性肺癌组织中Ki 67、P53表达与临床的相关性研究
罗马长;苏永华;马志益;李友堂
【摘要】Objective To observe the correlation of Ki67 and P53 expression to clinic in female patients with lung cancer. Methods The specimens of female patients with lung cancer removed by surgery were collected. The expression of Ki67 and P53 in female patients with lung cancer were detected by immunohistochemical methods. The influence of different expression of Ki67 and P53 on prognosis was observed. Results The positive rate of Ki67 protein was 76. 79%, and the positive rate of P53 protein was 73. 21%. There were obvious statistical differences in pathological pattern of ovarian tumor, pathological stage and lymph node metastasis ( P<0. 05 ) . The expression of Ki67 was higher in advanced lung cancer, lymph node metastasis and non-adenocarcinoma. However, the study found that P53 protein expression had no statistical difference in age, pathological pattern of ovarian tumor, pathological stage and lymph node metastasis. Conclusion The expression of Ki67 protein provides effective molecular biology basis for clinical diagnosis and prognosis of female patients with lung cancer.%目的：观察女性肺癌组织中Ki67和p53表达水平与临床的关系。

方法统计手术切除的女性肺癌标本,应用免疫组织化学方法检测肺癌组织中Ki67、p53的表达水平,并随访不同表达水平的Ki67、p53对预后的影响。

结果 Ki67蛋白阳性率为76．79%, P53蛋白阳性率为73．21%,Ki67蛋白表达在女性肺癌不同病理类型、肿瘤分期、有无淋巴结转移上有显著性差异
(P<0．05),分期晚、淋巴结转移、非腺癌组表现出高Ki67表达,而本研究发现P53
表达在年龄、分期、淋巴结有无转移、女性肺癌病理类型上均无统计学差异。

结论Ki67蛋白表达对临床女性肺癌诊断和预后判断可提供有效的分子生物学依据,Ki67蛋白阳性者预后差。

【期刊名称】《临床肺科杂志》
【年(卷),期】2014(000)011
【总页数】3页(P2033-2035)
【关键词】女性肺癌;Ki67蛋白;p53蛋白;预后
【作者】罗马长;苏永华;马志益;李友堂
【作者单位】364000 福建龙岩，龙岩市第一医院呼吸科;364000 福建龙岩，龙岩市第一医院呼吸科;364000 福建龙岩，龙岩市第一医院呼吸科;364000 福建龙岩，龙岩市第一医院呼吸科
【正文语种】中文
肺癌是发病率、死亡率均很高的一种恶性肿瘤。

女性肺癌的发病率在世界上均有增高的倾向，而且呈年轻化发展［1］，近年来，大量统计资料显示，20世纪90年代开始西方发达国家男性肺癌的发病率和死亡率正在缓慢下降，而女性肺癌的发病率和死亡率仍在持续上升［2］，女性肺癌病理类型多腺癌为主，治疗上多已错过手术治疗最佳时期［3］。

现有报道中，女性肺癌的发病原因与男性有很大区别［4］，女性肺癌与主动吸烟无密切关系［5］。

而影响女性肺癌预后的因素也不尽相同，可能和患者的病理类型、有无淋巴结或远处转移、行为状态(PS评分)、病理分期、治疗方法等相关，国内外对此有不同的报道，意见不一。

细胞增殖抗原
标记物Ki67是反映细胞增殖状态的蛋白质，辨认细胞群中增生细胞的标志，能可靠而迅速地反映恶性肿瘤增殖率，与多种恶性肿瘤的发展、转移和预后有关。

p53基因具有调节DNA复制、监测细胞基因组的完整等功能，其基因突变使细胞抑制功能丧失，促进细胞生长甚至导致肿瘤的发生。

我们采用免疫组织化学方法检测
Ki67和P53蛋白在女性肺癌组织中的表达、临床意义以及预后价值。

为女性肺癌的进一步研究、临床诊疗以及预后评估提供参考。

资料与方法
一、病例资料
56例肺癌标本取自2003年1月至2013年1月行根治手术治疗的女性肺癌患者。

标本为经10%中性甲醛固定常规石蜡包埋的肺癌组织。

年龄21－78岁，平均56.8岁，其中年龄≥60岁24例，＜60岁32例。

非腺癌19例，腺癌37例。

根据UICC 2009年TNM分期标准:Ⅰ期19例，Ⅱ期4例，Ⅲ期33例;有淋巴结转
移34例，无淋巴结转移22例。

进行临床分析。

并通过电话随访，无失访。

二、免疫组织化学检测
单克隆抗体Ki67和P53及Envision TM+试剂盒(K40004)、水性封片胶购自DAKO公司。

自大体石蜡标本中切取肺癌组织病理学检查采用常规病理切片，HRP染色，苏木
素复染。

以已知阳性切片作对照，不加一抗的切片作为阴性对照。

操作步骤按免疫组化试剂盒说明书进行。

三、判定标准
Ki67、p53蛋白免疫组化阳性染色细胞表达数判断，以细胞核呈现棕黄色颗粒为
阳性。

计算每张切片阳性细胞百分率。

ki67标记指数计算方法(在高倍镜下随机选择5个视野［3］，每个视野计数细胞200个细胞，共计1000个)。

阳性细胞数
＜10%为阴性(－)，10% －25%为弱阳性(+)，26% －50%为阳性(++)、＞50%
为强阳性(+++)。

四、统计学处理
采用SPSS 17.0统计软件。

分别应用Spearman等级相关分析、χ2检验、Kaplan-Meier法，P＜0.05为差异有统计学意义。

结果
一、女性肺癌患者Ki67与P53蛋白表达情况
56例标本中，Ki67蛋白表达阳性者43例(占76.79%);P53蛋白表达阳性者41例(占73.21%)。

二、女性肺癌临床特征分别与Ki67、P53表达水平的关系(表1、2)。

表1 56例女性肺癌临床特征与Ki67表达水平的关系项目 n Ki67－ + ++ +++ P 值年龄0.526＞60 岁 24 6 9 5 4 2.23＜60岁 32 7 7 10 8肿瘤直径0.139＞3 cm 32 4 10 11 7 5.492＜3 cm 24 9 6 4 5淋巴结0.002无转移 22 10 8 2 2 15.20有转移 34 3 8 13 10病理类型0.038腺癌 37 8 15 7 7 8.427非腺癌 19 5 1 8 5病理分期0.000Ⅰ －Ⅱ期23 11 8 2 2 18.43Ⅲ期33 2 8 13 10
表2 56例女性肺癌临床特征与P53表达水平的关系项目 n P53－ + ++ +++ P 值年龄0.292＞60 岁 24 6 9 6 3 3.77＜60岁 32 9 11 3 9肿瘤直径0.864＞3 cm 32 8 12 6 6 0.739＜3 cm 24 7 8 3 6淋巴结0.303无转移 22 4 10 2 6 3.64有转移 34 11 10 7 6病理类型0.485腺癌 37 10 14 4 9 2.44非腺癌 19 5 6 5 3病理分期0.348Ⅰ －Ⅱ期23 5 11 2 5 3.30Ⅲ期33 10 9 7 7
Ki67蛋白表达在女性肺癌不同年龄组及不同肿瘤直径组之间，均无统计学差异(P ＞0.05))。

Ki67蛋白表达在女性肺癌不同病理类型、肿瘤分期、有无淋巴结转移上有显著性差异，分期晚、淋巴结转移、非腺癌组表现出高Ki67表达，而本研究发现P53表达在年龄、分期、淋巴结有无转移、女性肺癌病理类型因素上尚未达到统计学差异。

三、女性肺癌Ki67、P53蛋白表达与预后的关系
56例病例均获随访，术后1年、3年和5年的生存率分别为91.2%、33.5%和15.3%。

Ki67蛋白表达与预后有关，阳性者较阴性者预后差，而P53蛋白表达与
预后无相关(表3)。

表3 56例女性肺癌Ki67、P53蛋白表达对生存率的影响项目 n 1年生存率(%)3
年生存率(%)5年生存率(%)中位生存期(月)P 值Ki67 0.048－ 13 100.0 70.0 35.0 60 3.9+ 43 88.7 22.4 8.4 25 P53 0.865－ 15 86.7 34.0 0.0 25 0.29+ 41 89.9 34.4 9.2 30
讨论
Ki67是增殖性细胞核的标记物，代表细胞增殖水平.还是能可靠而迅速地反映恶性肿瘤增殖率的指标，其高表达是细胞增殖活跃的重要标记［6］。

近年来研究发现，Ki-67有助于肺癌病理类型的判断［7］。

在正常人体组织中，Ki67蛋白表达可发生在甲状腺皮质细胞、胸腺皮质细胞、胃肠腺体的颈黏液细胞及未分化的精细胞，而其他组织的细胞几乎无Ki67蛋白的表达。

人类多种恶性肿瘤中均存在Ki67基
因的过度表达，对此现象有两种解释:一是Ki67本身就是原癌基因，它的过度表达使细胞无限制增生而引发肿瘤;另一种是肿瘤的过度增生导致了Ki67过度表达［8］。

本研究显示Ki67蛋白的阳性率为76.79%，统计学分析证实在女性肺癌中，肿瘤分期晚、有淋巴结转移及非腺癌类型中表现出高Ki67表达状态，生存分析提示Ki67阳性女性肺癌患者生存时间较阴性者明显缩短，Ki67蛋白的表达提示预后不佳，因此，检测阳性者更应尽可能及时予以积极治疗。

P53是一种抑癌基因，
超过50%的人类肿瘤有P53基因的突变［9］。

国内外研究均发现p53抑癌基因
参与细胞增殖和分化的调控，与细胞周期和细胞增殖密切相关，有研究表示，P53基因，可与多种分子协同促进肺癌恶性进展［10］。

有研究表示，重组人p53腺
病毒注射液联合顺铂对肺癌的治疗有确切的疗效，间接说明P53基因对肺癌发生
及转归有重要的影响［11］，本研究分析显示P53表达在女性肺癌不同年龄、分期、淋巴结是否转移、肺癌不同病理类型上均无统计学意义(P＞0.05)。

研究发现p53基因表达与女性肺癌发展和预后相关性研究中p53基因表达与女性肺癌发展和预后相关性差，文献已有报告表明P53抗体与肺癌患者的平均生存期负相关;P53抗体与肺癌患者预后无关［12］。

原因除考虑与所用抗体、阳性判断标准和病例选择差异较大外，需警惕女性肺癌表现出自己的独特的生物学特性。

参考文献
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