犬瘟热病毒N蛋白基因的克隆、原核表达及其表达产物抗原性鉴定

犬瘟热病毒N蛋白基因的克隆、原核表达及其表达产物抗原
性鉴定
申卫红;马素贞;陈胜男;刘腾飞;陶玉成;简子健
【期刊名称】《新疆农业大学学报》
【年(卷),期】2010(033)002
【摘要】参考GenBank中发表的CDV N蛋白基因序列,用Oligo6.0软件设计一对特异性引物,从患犬瘟热的犬全血样品中提取总RNA,经RT-PCR扩增得到1 572 bp的基因片段,将其插入pMD18-T克隆载体中构建了pMD18-CDV N重组质粒,将其转入到大肠杆菌DH5α中,进行鉴定、测序.将目的基因与原核表达载体pGEX-4T-2连接构建了pGEX-4T-2-CDV N重组质粒,转化到大肠杆菌BL21(DE3)中,进行鉴定、测序、IPTG诱导表达.序列分析表明克隆的CDV N蛋白基因从起始密码子ATG开始到终止密码子TAA结束全长为1 572个核苷酸,与GenBank中发表的CDV N蛋白基因序列相比同源率达到93.9%～99.1%.Western-blotting 分析显示表达产物为84 kDa的融合蛋白,可被犬瘟热抗血清所识别,具有良好的抗原性.
【总页数】5页(P137-141)
【作者】申卫红;马素贞;陈胜男;刘腾飞;陶玉成;简子健
【作者单位】新疆农业大学动物医学学院,乌鲁木齐,830052;新疆农业大学动物医学学院,乌鲁木齐,830052;新疆农业大学动物医学学院,乌鲁木齐,830052;新疆农业大学动物医学学院,乌鲁木齐,830052;新疆农业大学动物医学学院,乌鲁木
齐,830052;新疆农业大学动物医学学院,乌鲁木齐,830052
【正文语种】中文
【中图分类】S851.659.5
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