第七章吸光光度法
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例２：一束单色光通过厚度为1cm的有色溶液 后，强度减弱20%，当它通过厚度为5cm的相同 溶液时，强度将减弱（C ） A、42% B、 58% C、67% D、78%
例３、已知Fe2＋的浓度为560ug/l的溶液，显色
后在2.00cm的比色皿中测得吸光度为0.20，则 有色化合物的摩尔吸光系数为____ L·mol－1·cm－ 1.
第八章 吸光光度法
7.1 概述 基于物质对光的选择性吸收而建立的分析方
法，称为吸光光度法，包括比色法、可见、紫外 分光光度法及红外光谱法 等。
7.1.1 比色分析法和分光光度法的特点和适用范围 1.灵敏度高；测定浓度的下限一般为10-5~ 10-6mol/L 2.准确度较高；比色分析法的相对误差5%~10%， 分光光度法为2%~5%
某一物质的最大吸收波长是吸光光度分析中选择 入射光的依据。
例、下列表述不正确的是（ B ） A、吸收光谱曲线表明了吸光度随波长的变化； B、吸收光谱以波长为纵坐标，吸光度为横坐标； C、吸收光谱曲线中，最大吸收处的波长为最
大吸收波长； D、吸收光谱曲线表明了吸光物质的光吸收特性。
７.３显色反应及显色条件的选择
A lg 1 lg I0 abc
T
It
A bc
——称为光吸收定律，又叫朗伯－比耳定律。
是吸光物质在特定波长和显色测量条件下的一个特征
常数，是物质吸光能力的量度。可用于表示定量分析
方法的灵敏度。
例１：某溶液遵循光吸收定律，当浓度为C时 透光率为T，当浓度为2C，液层厚度不变时，透 光率为（D ） A、2T B、T C、 T D、T2
例2：为提高光度分析灵敏度的方法有（D ） A、增加显色剂用量 B、增加被测溶液用量 C、选择适当的参比溶液 D、选择合适的入射光
3、选择适当的参比溶液 （1）当试液、显色剂和其它试剂均无色时， ——纯溶剂（蒸馏水）做参比溶液（溶剂空白），
（２）如果显色剂无色，而试样溶液中其它离子 有色时，应选用不加显色剂的试样溶液为参比溶 液（试液空白）。 （３）当试剂、显色剂有色，而待测试液无色 时，则采用不加待测试液，按操作步骤加入显 色剂和试液配置成参比溶液。（试剂空白）
选择滤光片的原则：滤光片的颜色应与有溶 液的颜色互补。
3. 吸收池：又称为比色皿，石英玻璃制成，规格 有0.5、1、2、3、5cm等。
4. 检测器： 利用光电效应将光信号转化为电信 号的一种装置。通常用硒光电池。
5. 检流计：常用光点反射式微电计，其标尺上 有两种刻度，一是等分的百分透光度，另一 种是不等分的吸光度。
例如：CuSO4溶液呈兰色，是由于该溶液选 择性的吸收了白光中的黄色光。
又例：KMnO4溶液呈紫色，是由于溶液选择性 的吸收了白光中的绿光。
例、某溶液在阳光（白光）下呈兰色，在钠光
（黄光）下呈（ D ）
A、黄色
B、兰色
C、无色
D、黑色
7.2 吸光光度法基本原理
7.2.1 光吸收定律
当一束平行的单色光垂直通过某一溶液时， 由于溶液对光的吸收，透过光的强度必小于入射 光的强度，单色光通过溶液被吸收的程度称为吸 光度，用“A”表示。
7.1.3 光的选择吸收与溶液颜色
1.光的互补色 蓝
紫
青蓝
红
白光
青
橙
绿
黄
2.物质对光的选择吸收与物质颜色 当一束白光通过某一有色溶液时，一些波长
的光被溶液吸收，另一些波长的光则透过溶液， 透射光或反射光刺激人的视觉而使人感受到颜色， 所以溶液的颜色由透射光的波长决定。可以组成 白光的两种单色光称为互补色光，我们看到的溶 液颜色是吸收光的互补色。
有些物质本身具有明显的颜色，KMnO4，可以 直接进行比色分析。但大多数物质本身无颜色或颜 色浅，进行吸光光度分析时，须加入一种显色剂， 将被测物质转化为一种有色物质，这个反应叫显色 反应。
７.３.１显色反应的要求
１.灵敏度要高; ２.选择性要好; ３.色差大; ４、有色化合物稳定性高。
７.３.２ 显色反应的条件
7.5 测定条件的选择
1、选择适当波长的入射光
为使实验结果有较高的灵敏度，一般择最大吸收 波长的的入射光。例如KMnO4溶液，应选用波长为 525nm的绿光为入射光。
2、控制合适的吸光度范围 在吸光度为0.2~0.8时，测定的准确度较高。
例1：光度法测定某试液时，若A＞0.8,为提高 其读数的准确度，应采取的最简便的措施是：C A、减小入射光波长 B、稀释被测液 C、改换厚度较小的比色皿 D、改换厚度较大的比色皿
28、可见吸光光度法中选择参比溶液时， 若试液无色，显色剂有色，应选（ B）
A、溶液空白 B、试剂空白 C、样品空白 D、褪色空白
7.6 吸光光度法应用 1.标准曲线法
１.显色剂用量； ２.溶液酸度； ３.温度； ４.时间 ５.溶剂
例 下列情况使测定结果偏高的是（C ） A、显色时间短、有色物未充分显色； B、酸度过高，显色剂酸效应严重； C、干扰离子与显色剂生成有色化合物 D、干扰离子与显色剂生成无色化合物
７.４分光光度计
光源
单色器
吸收池
实验证明： A lg 1 lg I 0 abc
T
It
式中 ：T ——透光率, I0—— 入射光强度；
It——透过光强度；a——吸光系数；b——液层厚
度；c——溶液浓度；
如果浓度c单位为 mol/L，液层厚度b单位为 cm,
吸光系数a用 表示，称为摩尔吸光系数，单位
为 L mol 1 cm1
1.0*103 （已知Fe的式量为55.85 ） 例４、某有色溶液在2.00cm 吸收池中，测得百
分透光率T%=50 ,若改用（1）1.00cm（2）3.00cm 厚的吸收池时，其T%和A各为多少？
(1) T%和A: 71, 0.15
(2)T%和A: 35, 0.46
７.２.２ 吸收光谱曲线
同一溶液对不同波长的光，其吸光度不同， 将不同波长的光通过某一固定溶液，测得每一波 长下的吸光度，如果以波长为横坐标，吸光度为 纵坐标，所得曲线叫吸收光谱曲线。
检测器
显示记 录系统
1.光源：通常用低压钨丝灯，或氢灯、氘等；
2.单色器：在光电比色计中常用滤光片，在 分光光度计中用棱镜或光栅。
例：用光度比色计测量CuSO4溶液的吸光度，应 选用_____颜色的滤光片，该溶液能最大程度的
吸收____C______颜色的光。
A、兰 兰
B、绿 黄
C、黄 黄
D、黄 兰
3.快速简便，应用广泛；
7.1.2 光的基本性质 光是一种电磁波，具有波动性和粒子性。
紫外区可见光ຫໍສະໝຸດ 域红外区400nm
760nm
在可见光区域各种光的波长范围： 红光 650~760nm 橙光 600~650nm 黄光 580~600nm 黄绿光 560~580nm 绿光 500~560nm 蓝绿光 480~500nm 蓝光 450~480nm 紫光 400~450nm
由图可知，（１）不同浓度
的KMnO4溶液，其最大吸
C
收波长相同，为５２５nm.
即对绿光产生最大程度的吸
B
收。
A
（２）同一物质，不同
浓度时,吸收光谱曲线形
状类似。
(3)不同物质因其分子结构不同而具有各自特征的吸收光 谱,据此可做物质的初步的定性分析;同一波长下吸光度随 浓度的增大而增大,据此可做物质的定量分析.
例３、已知Fe2＋的浓度为560ug/l的溶液，显色
后在2.00cm的比色皿中测得吸光度为0.20，则 有色化合物的摩尔吸光系数为____ L·mol－1·cm－ 1.
第八章 吸光光度法
7.1 概述 基于物质对光的选择性吸收而建立的分析方
法，称为吸光光度法，包括比色法、可见、紫外 分光光度法及红外光谱法 等。
7.1.1 比色分析法和分光光度法的特点和适用范围 1.灵敏度高；测定浓度的下限一般为10-5~ 10-6mol/L 2.准确度较高；比色分析法的相对误差5%~10%， 分光光度法为2%~5%
某一物质的最大吸收波长是吸光光度分析中选择 入射光的依据。
例、下列表述不正确的是（ B ） A、吸收光谱曲线表明了吸光度随波长的变化； B、吸收光谱以波长为纵坐标，吸光度为横坐标； C、吸收光谱曲线中，最大吸收处的波长为最
大吸收波长； D、吸收光谱曲线表明了吸光物质的光吸收特性。
７.３显色反应及显色条件的选择
A lg 1 lg I0 abc
T
It
A bc
——称为光吸收定律，又叫朗伯－比耳定律。
是吸光物质在特定波长和显色测量条件下的一个特征
常数，是物质吸光能力的量度。可用于表示定量分析
方法的灵敏度。
例１：某溶液遵循光吸收定律，当浓度为C时 透光率为T，当浓度为2C，液层厚度不变时，透 光率为（D ） A、2T B、T C、 T D、T2
例2：为提高光度分析灵敏度的方法有（D ） A、增加显色剂用量 B、增加被测溶液用量 C、选择适当的参比溶液 D、选择合适的入射光
3、选择适当的参比溶液 （1）当试液、显色剂和其它试剂均无色时， ——纯溶剂（蒸馏水）做参比溶液（溶剂空白），
（２）如果显色剂无色，而试样溶液中其它离子 有色时，应选用不加显色剂的试样溶液为参比溶 液（试液空白）。 （３）当试剂、显色剂有色，而待测试液无色 时，则采用不加待测试液，按操作步骤加入显 色剂和试液配置成参比溶液。（试剂空白）
选择滤光片的原则：滤光片的颜色应与有溶 液的颜色互补。
3. 吸收池：又称为比色皿，石英玻璃制成，规格 有0.5、1、2、3、5cm等。
4. 检测器： 利用光电效应将光信号转化为电信 号的一种装置。通常用硒光电池。
5. 检流计：常用光点反射式微电计，其标尺上 有两种刻度，一是等分的百分透光度，另一 种是不等分的吸光度。
例如：CuSO4溶液呈兰色，是由于该溶液选 择性的吸收了白光中的黄色光。
又例：KMnO4溶液呈紫色，是由于溶液选择性 的吸收了白光中的绿光。
例、某溶液在阳光（白光）下呈兰色，在钠光
（黄光）下呈（ D ）
A、黄色
B、兰色
C、无色
D、黑色
7.2 吸光光度法基本原理
7.2.1 光吸收定律
当一束平行的单色光垂直通过某一溶液时， 由于溶液对光的吸收，透过光的强度必小于入射 光的强度，单色光通过溶液被吸收的程度称为吸 光度，用“A”表示。
7.1.3 光的选择吸收与溶液颜色
1.光的互补色 蓝
紫
青蓝
红
白光
青
橙
绿
黄
2.物质对光的选择吸收与物质颜色 当一束白光通过某一有色溶液时，一些波长
的光被溶液吸收，另一些波长的光则透过溶液， 透射光或反射光刺激人的视觉而使人感受到颜色， 所以溶液的颜色由透射光的波长决定。可以组成 白光的两种单色光称为互补色光，我们看到的溶 液颜色是吸收光的互补色。
有些物质本身具有明显的颜色，KMnO4，可以 直接进行比色分析。但大多数物质本身无颜色或颜 色浅，进行吸光光度分析时，须加入一种显色剂， 将被测物质转化为一种有色物质，这个反应叫显色 反应。
７.３.１显色反应的要求
１.灵敏度要高; ２.选择性要好; ３.色差大; ４、有色化合物稳定性高。
７.３.２ 显色反应的条件
7.5 测定条件的选择
1、选择适当波长的入射光
为使实验结果有较高的灵敏度，一般择最大吸收 波长的的入射光。例如KMnO4溶液，应选用波长为 525nm的绿光为入射光。
2、控制合适的吸光度范围 在吸光度为0.2~0.8时，测定的准确度较高。
例1：光度法测定某试液时，若A＞0.8,为提高 其读数的准确度，应采取的最简便的措施是：C A、减小入射光波长 B、稀释被测液 C、改换厚度较小的比色皿 D、改换厚度较大的比色皿
28、可见吸光光度法中选择参比溶液时， 若试液无色，显色剂有色，应选（ B）
A、溶液空白 B、试剂空白 C、样品空白 D、褪色空白
7.6 吸光光度法应用 1.标准曲线法
１.显色剂用量； ２.溶液酸度； ３.温度； ４.时间 ５.溶剂
例 下列情况使测定结果偏高的是（C ） A、显色时间短、有色物未充分显色； B、酸度过高，显色剂酸效应严重； C、干扰离子与显色剂生成有色化合物 D、干扰离子与显色剂生成无色化合物
７.４分光光度计
光源
单色器
吸收池
实验证明： A lg 1 lg I 0 abc
T
It
式中 ：T ——透光率, I0—— 入射光强度；
It——透过光强度；a——吸光系数；b——液层厚
度；c——溶液浓度；
如果浓度c单位为 mol/L，液层厚度b单位为 cm,
吸光系数a用 表示，称为摩尔吸光系数，单位
为 L mol 1 cm1
1.0*103 （已知Fe的式量为55.85 ） 例４、某有色溶液在2.00cm 吸收池中，测得百
分透光率T%=50 ,若改用（1）1.00cm（2）3.00cm 厚的吸收池时，其T%和A各为多少？
(1) T%和A: 71, 0.15
(2)T%和A: 35, 0.46
７.２.２ 吸收光谱曲线
同一溶液对不同波长的光，其吸光度不同， 将不同波长的光通过某一固定溶液，测得每一波 长下的吸光度，如果以波长为横坐标，吸光度为 纵坐标，所得曲线叫吸收光谱曲线。
检测器
显示记 录系统
1.光源：通常用低压钨丝灯，或氢灯、氘等；
2.单色器：在光电比色计中常用滤光片，在 分光光度计中用棱镜或光栅。
例：用光度比色计测量CuSO4溶液的吸光度，应 选用_____颜色的滤光片，该溶液能最大程度的
吸收____C______颜色的光。
A、兰 兰
B、绿 黄
C、黄 黄
D、黄 兰
3.快速简便，应用广泛；
7.1.2 光的基本性质 光是一种电磁波，具有波动性和粒子性。
紫外区可见光ຫໍສະໝຸດ 域红外区400nm
760nm
在可见光区域各种光的波长范围： 红光 650~760nm 橙光 600~650nm 黄光 580~600nm 黄绿光 560~580nm 绿光 500~560nm 蓝绿光 480~500nm 蓝光 450~480nm 紫光 400~450nm
由图可知，（１）不同浓度
的KMnO4溶液，其最大吸
C
收波长相同，为５２５nm.
即对绿光产生最大程度的吸
B
收。
A
（２）同一物质，不同
浓度时,吸收光谱曲线形
状类似。
(3)不同物质因其分子结构不同而具有各自特征的吸收光 谱,据此可做物质的初步的定性分析;同一波长下吸光度随 浓度的增大而增大,据此可做物质的定量分析.