真菌嵌合体植酸酶的构建及其抗蛋白酶水解特性研究

真菌嵌合体植酸酶的构建及其抗蛋白酶水解特性研究
陈庄;贝锦龙;廖玲;刘世贵
【期刊名称】《中山大学学报（自然科学版）》
【年(卷),期】2008(047)004
【摘要】在烟曲霉植酸酶(Afp)的基因上,通过PCR逐步将编码1-47、178-237及338-381多肽序列的DNA片段置换为黑曲霉NRRL 3135植酸酶(Anp)中的对应片段,构建了3个嵌合体(嵌合体Ⅰ、Ⅱ和Ⅲ)基因,并在毕赤酵母中将其成功表达及纯化.所有的嵌合体和亲本植酸酶均能抵抗胃蛋白酶.在m(胰蛋白酶)/m(植酸酶)为0.1时,Anp完全失活;但Afp与所有嵌合体的活性仅损失13%～23%.胰蛋白酶水解产物的SDS-PAGE结果显示嵌合体Ⅱ与Ⅲ也能被胰蛋白酶严重水解,但非变性PAGE结果却表明它们在水解后仍能保持结构完整.嵌合体也具有一些与Anp及Afp相异的新pH曲线及耐热性.实验表明,通过替换基因片段改良真菌植酸酶可行.【总页数】6页(P72-76,87)
【作者】陈庄;贝锦龙;廖玲;刘世贵
【作者单位】四川大学生命科学学院,四川,成都,610064;广东省农业科学院畜牧研究所,广东,广州,510640;广东省农业科学院畜牧研究所,广东,广州,510640;广东省农业科学院畜牧研究所,广东,广州,510640;四川大学生命科学学院,四川,成都,610064【正文语种】中文
【中图分类】Q814
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