骨伤凝胶膏剂中促渗剂的优选研究

骨伤凝 胶膏剂中促渗剂的优选研究
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公司 ) , M ETTLER - AE240 型 电子分析 天平, CX 250 超声波清洗仪 ( 北京医疗设备二厂 ) TP - 3A 型 ZTY 智能透皮实验仪 ( 巩义市予华仪器有限责任公 司 )。 1 . 2 试剂与药品 乙腈 ( 色谱纯, P rom ptar 公司, 批号 : 68054) , 甲 醇 ( 色谱 纯, P romptar 公司, 批号: 63812) , 磷酸 ( 色 谱纯 , 天津市光复精细化工研究所 , 批号: 080811 ), 娃哈哈纯净水 ; 其他试剂均为分析纯, 微孔滤膜 ( 0 . 45 m, 0 . 80 m ) , 骨伤凝胶膏剂 ( 自制 ) , 柚皮苷对 照品 ( 中国药 品生物 制品 鉴定所 , 批 号: 110722 200610) ; N - 月 桂基 氮杂 环庚 烷 - 2 - 酮 ( 氮 酮, Azone , 北京昌化精细化工厂 ) , V iscom ate NP - 700 ( 药用 , ISP公 司提供 ) , 甘羟铝 ( ISP 公司提供 ) , 甘 油 (分析纯 , 北京益利精细化学 品有限公司 ) , 酒石 酸 (分析纯 , 天津市福晨化学试剂厂 ) , 氯化钠、 无水 乙醇、 丙二醇、 乙二胺四乙酸二钠 ( 分析纯 , 北京化 工厂 ) 。 1 . 3 动物 ICR 小鼠雄性, ( 20 ! 10) g, 北京维通利华实验 动物 技 术 有 限 公 司, 许 可 证 号 : SCXL ( 京 ) 2006 - 0009 。 2 方法与结果 2 . 1 柚皮苷的含量测定方法 2 . 1 . 1 色谱条件 : 色谱柱为 D ia m asil ODS( 250 mm ∀4 . 6 mm, 5 m ) ; 流动相为乙腈 - 磷酸水 ( p H= 3); 梯 度洗脱 , 0 ~ 30 m in, 乙腈 15 % ~ 30% ; 流 速 1 0 mL /m in ; 检测波长为 283 nm; 柱温为室温。在 上述色 谱 条件 下柚 皮 苷与 其 他组 分 能 达到 基 线 分离。 2 . 1 . 2 标准曲线的绘制: 精密称取柚皮苷对照品适 量, 加甲醇制成每毫升含柚皮苷 11 . 76 g 的溶液, 作为对照品溶液。分别精密吸取柚皮苷对照品溶液 1 、 4 、 6 、 10 、 14 L 进样 , 测定峰面积, 以进样量 ( g ) 为横坐标 , 峰面积为纵坐标, 得标准曲线, 并计算回归 方程, 柚皮苷 : Y = 1 703 5 X + 4 793 , R = 0 999 9 。在 0 011 76~ 0 164 60 g 范围内呈良好线性关系。 2 . 1 . 3 精密度试验: 精密吸取标准曲线项下的对照 品溶液 10 L, 重复进样 6 次 , 记录色谱图, 对照品 峰面积积分值的 RSD 为 1 43 % ( n = 6) 。 2 . 1 . 4 稳定性试验: 取同一供试品溶液 , 按上述色 谱条件分别在 0 、 1 、 2 、 4 、 6 、 8 h 测定, 测得峰面积积 分值的 RSD= 1 99 % ( n = 6) , 表明供试品溶液在 8 h 内稳定。
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2 . 1 . 5 重现性试验 : 取同一批号的样品 6 份 , 按上 述色谱条件测定 , 峰面积积分值的 RSD= 1 86 % (n = 6), 表明该方法重现性良好。 2 . 1 . 6 加样回收率的测定: 采用精密回收法 , 精密 称取 2 1 5 项下同一批号的凝胶膏剂 1 g , 分别加入 柚皮苷对照品溶液 ( 0 263 g /L ) 2 mL, 按供试品溶液 制备方法制成加样回收供试品溶液, 测定并计算回 收率, 加样回收 率为 100 22 % , RSD = 1 50 % (n = 6) , 表明加样回收率良好, 准确度高。 2 . 1 . 7 样品的测定: 取凝胶膏剂适量 , 刮取膏体 , 精 密称定约 1 g , 用 2 g 硅藻土研磨分散, 加 70 % 甲醇 40 mL, 超声提取 15 m in , 冷却 , 滤过 , 取续滤液即得 供试品溶液。精密吸取供试品溶液 10 见图 1 。 L 进样 , 计 算其含量。柚皮苷标准品、 凝胶膏剂供试品色谱图
Opti m ization of penetrating agents in Gushang Gel Paste
L I Xue m in , WU Q ing , FAN Zheng, YANG Y in hua , DU Shou y in g , GONG W ei hong ( Schoo l of Ch in ese Phar m acy , B eijing U niversity of Ch in ese M edic in e , B eijing 100102) A bstract : Objective T o opti m ize the penetrat ing agents for Gushang Ge l Paste , and study their percutaneous abso rpt io n behavior and release ra te in vitro. M ethods F ranzs d iffusion cell test and H PLC w ere applied to opti m ize the penetrating agents fo r Gushang Ge l Paste and their percutaneous absorptio n and re lease rate w ere detected taken nor m a l salin e w ater as recept io n liquid , and 24 hour accu m u lative osm osis dose and anatonosis ti m es o f naring in as in dexes . R esu lts W hen taking azone and propy lene g ly co l as penetrating agents the percutaneous absorption w as good , and fin ally the ratio of azone to propylene g ly co l w as set at 1 1 w ith a dose o f 5 % . T he accumu lative re lease rate of naring in w as 83 48 % and accumu lative percutaneous abso rpt io n w as 46 . 59 % . T he release in vitro and percutaneous absorptio n all acco rded w ith W e ibu ll d istribut ion equation. Conclusion W hen azone and propy lene g lycol are added into Gushang G el P aste , the percu taneous abso rpt io n o f wh ich is in creased sig nificant ly, and th e percutaneous absorption and re lease rate are favorable . K ey words : ge l paste ; penetrating agents; percutaneous absorpt io n ; release in v itro 凝胶膏剂 ( 又称巴布剂 ) 系指药材提取物、 药材 或 /和化学药物与适宜的亲水性基质混匀后 , 涂布于 背衬材料上制成的贴膏剂 。据世界卫生组织预 测, 2~ 3 年内 , 有 30 % 以上的药物将改成经皮给药 制剂 , 将会掀起一个内病外治的新高潮 , 凝胶膏剂必 将有良好的市场前景。 骨伤凝胶膏剂处方是临床经验方, 由骨碎补、 当 归、 续断、 甘草、 三七、 自然铜、 刘寄奴、 威灵仙、 血竭、 红
2 . 2 促渗剂的优选 2 . 2 . 1 离体小鼠皮肤的制备 : 取体重合格的健康小 鼠 , 断颈处死 , 脱毛膏 ( 淀粉 皂粉 N a2 S= 7 1 3 ,加 水调成糊状 ) 脱毛 , 清水洗净 , 取腹部皮肤, 剥离脂
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北京中医药大学学报 表 2 促渗剂用 量的筛选结果 ( n = 3) T ab le 2 Screen ing resu lts of dosages of penetra ting agen ts ( n = 3)
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李学敏, 女 , 在读硕士生 # 通信作者 : 吴清 , 博士 , 教授 , 硕士生导师 , 研究方向 : 中药新剂型与新技术 , E m ai: l qw u @ vip. sin a . com * 重大新药创制项目 ( N o. 2009ZX 09502 008)
第 1期
李学敏等
李学敏 吴清 范峥 杨银花 杜守颖 龚卫红 (北京中医药大学中药学院 北京 100102) 摘要 : 目的 优选骨伤凝胶膏剂的促渗剂 , 研究其透皮吸收行为和体外释放度。 方法 采用改良
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F ranzs扩散池法, 生理盐水为接受液 , 用高效液相色谱法测定 , 以柚皮苷 24 h 累积透过量和增渗倍 数为指标 , 优选骨伤凝胶膏剂的促渗剂并测定其释放度和透皮吸收情况 。结果 选用氮酮和丙二 醇为促渗剂时 , 透皮吸收较好 , 最后确定氮酮和丙二醇的比例为 ( 1 1), 用量为 5 % ; 柚皮苷 24 h 累 积释放率为 83 48 % , 累积透皮吸收率为 46 59% , 体外释药和透皮吸收均符合威布尔分布方程 。 结论 骨伤凝胶膏剂加入氮酮和丙二醇后, 透皮吸收明显增加, 透皮吸收和释药均良好。 关键词: 凝胶膏剂; 促渗剂; 透皮吸收; 体外释放 中照品 ; B 凝胶膏剂供试品 ; C 阴性对照。 referen ce of naringin ; B test sam p le of gel paste; C n egat ive reference. 图 1 样品 H PLC 色谱图 F ig . 1 H PLC chroma tog ra m of sample
序号 N o. 1 2 3 氮酮和丙二醇 ( 1 1 ) 用量 ( % ) D osages of azone and propylen e glycol ( 1 1 ) (% ) 3 5 7
第 34 卷
肪层 , 生理盐水冲洗数次 , 置冰箱中冷藏 , 备用。 2 . 2 . 2 透皮实验方法: 采用改良 F ranz扩散池进行 测定 , 该装置由上下 2 只筒状玻璃管对合而成 , 夹于 玻璃间的贴片将其分为上下 2 室, 上室为扩散室, 下 室为接收室, 扩散池容积为 20 mL, 有效扩散面积为 3 14 c m 。实验 前将 皮肤取 出, 室 温放置 30 m in 。 实验时, 接收室加满接收液 (生 理盐水 ) , 将小鼠腹 皮夹在 2 室之间 , 角质层朝向扩散室, 将凝胶膏剂贴 于小鼠腹皮上 , 背衬层 朝向扩散室 , 固定在 2 室之 间, 排除气泡 , 恒温水浴加热 , 温度 精密控制在 ( 37 ! 0 2) # , 开动磁力搅拌器, 转速 300 r/m in , 在 24 h 时将接收室中的接收液全部倒出, 将接收液蒸干 , 加 70 % 甲醇定容至 10 m L, 按照 2 . 1 . 1 项下方法进行 含量测定 , 计算累积透过率和增渗倍数。 2 . 2 . 3 促渗剂种类的筛选 : 以柚皮苷 24 h 的累积 透过量 ( 柚 皮苷 Q24 ) 和增 渗倍 数 为考 察指 标, 按 2 2 2 项下实验操作, 分别对骨伤凝 胶膏剂空白组 ( 不加促渗剂 ) 及各加 5 % 的丙二醇促渗剂、 氮酮促 渗剂、 N 甲基吡咯烷酮 ( NM P ) 促渗剂和不同促渗剂 的联合运用来考察它们的促渗能力 , 从而筛选最佳 促渗剂种类, 结果见表 1 。
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北京中医药 大学学报 Journa l o f Be ijing U n ive rs ity o f T rad itional Ch inese M edicine
第 34 卷第 1 期 2011 年 1 月 V o.l 34 N o . 1 Jan. 2011
骨伤凝胶膏剂中促渗剂的优选研究
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花等 17味中药组成, 具有活血化瘀、 消肿止痛、 强筋骨 等功效。将方中药味按其药理作用和有效成分性质进 行提取、 富集, 加入亲水高分子材料制成敷贴好、 剥离 方便、 舒适、 保湿好的凝胶膏剂, 对其促渗剂进行优选 并研究方中主要成分柚皮苷的释放及透皮行为 1 仪器与试药 1 . 1 仪器 LC 20AT 高效液相色谱仪 ( 岛津国际贸易有限