用Alu基因的同源基因B1基因且无需DNA提取的检测血浆游离DNA的定量PCR
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专利名称：用Alu基因的同源基因B1基因且无需DNA提取的检测血浆游离DNA的定量PCR方法
专利类型：发明专利
发明人：王晓慧
申请号：CN201410405459.X
申请日：20140818
公开号：CN105463065A
公开日：
20160406
专利内容由知识产权出版社提供
摘要：本发明提供一种能反映大、小鼠过度训练情况的血浆游离DNA水平的定量PCR检测法，该法的扩增引物特别，选用人类基因中表达最丰富Alu基因的同源基因B1重复序列基因，敏感性更高，无需DNA抽提。
训练前、后即刻采血，选择静脉血20ml，肝素或EDTA抗凝。
离心、收集血浆。
将作为标准品的DNA和5倍稀释各样本血浆加入定量PCR反应体系：
MaximaSYBRGreen/ROXqPCRMasterMix(2x)，12.5ml；正向、反向引物(50mM)，各0.2ml；标准品或5倍稀释后的样品，各1.0ml；不含DNA酶的水，11.1ml。
根据标准品浓度计算样品游离DNA 水平。
比较训练前、后即刻血浆游离DNA水平，若几倍到数十倍增加强烈提示大、小鼠过度训练可能。
我们的定量PCR方法能作为血浆游离DNA水平的检测方法，能反映大、小鼠的过度训练情况。
申请人：上海体育学院
地址：200438 上海市杨浦区清源环路650号
国籍：CN
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