人(Human)瘦素(LEP)ELISA试剂盒说明书
人(Human)和肽素(copeptin)ELISA试剂盒说明书
本试剂盒只能用于科学研究，不得用于医学诊断人（Human）和肽素（copeptin）ELISA检测试剂盒使用说明书检测原理试剂盒采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验（ELISA）。
往预先包被和肽素（copeptin）抗体的包被微孔中，依次加入标本、标准品、HRP标记的检测抗体，经过温育并彻底洗涤。
用底物TMB显色，TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。
颜色的深浅和样品中的和肽素（copeptin）呈正相关。
用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），计算样品浓度。
样品收集、处理及保存方法1.血清：使用不含热原和内毒素的试管，操作过程中避免任何细胞刺激，收集血液后，3000转离心10分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。
2.血浆：EDTA、柠檬酸盐或肝素抗凝。
3000转离心30分钟取上清。
3.细胞上清液：3000转离心10分钟去除颗粒和聚合物。
4.组织匀浆：将组织加入适量生理盐水捣碎。
3000转离心10分钟取上清。
5.保存：如果样本收集后不及时检测，请按一次用量分装，冻存于-20℃，避免反复冻融，在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。
自备物品1.酶标仪（450nm）2.高精度加样器及枪头：0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL3.37℃恒温箱操作注意事项1.试剂盒保存在2-8℃，使用前室温平衡20分钟。
从冰箱取出的浓缩洗涤液会有结晶，这属于正常现象，水浴加热使结晶完全溶解后再使用。
2.实验中不用的板条应立即放回自封袋中，密封（低温干燥）保存。
3.浓度为0的S0号标准品即可视为阴性对照或者空白；按照说明书操作时样本已经稀释5倍，最终结果乘以5才是样本实际浓度。
4.严格按照说明书中标明的时间、加液量及顺序进行温育操作。
5.所有液体组分使用前充分摇匀。
试剂盒组成名称96孔配置48孔配置备注微孔酶标板12孔×8条12孔×4条无标准品0.3mL*6管0.3mL*6管无样本稀释液6mL3mL无检测抗体-HRP10mL5mL无20×洗涤缓冲液25mL15mL按说明书进行稀释底物A6mL3mL无底物B6mL3mL无终止液6mL3mL无封板膜2张2张无说明书1份1份无自封袋1个1个无注：标准品（S0-S5）浓度依次为：0、1.5、3、6、12、24pmol/L试剂的准备20×洗涤缓冲液的稀释：蒸馏水按1：20稀释，即1份的20×洗涤缓冲液加19份的蒸馏水。
碧云天 Human IgE ELISA Kit 产品说明书
Human IgE ELISA Kit产品编号 产品名称包装 PI479Human IgE ELISA Kit96次产品简介：碧云天的Human IgE ELISA Kit (Human IgE Enzyme-Linked ImmunoSorbent Assay Kit)，即人总免疫球蛋白E 酶联免疫吸附检测试剂盒，是一种用于特异性地高灵敏地定量检测人血清、血浆中的IgE 的ELISA 试剂盒。
本产品检测灵敏度高，特异性强，重复性好。
多次重复检测结果表明，最小检出量为14.3ng/ml ，本试剂盒采用特异性抗体识别人IgE ，与IgG 、IgA 没有交叉反应性，板内、板间变异系数均小于10%。
免疫球蛋白E (IgE)只能在哺乳动物身上发现。
IgE 存在于血液中，是免疫系统抵御细菌和病毒等外来物质入侵的重要工具。
IgE 是一类具有δ链的亲同种细胞抗体，是参与过敏性鼻炎、过敏性哮喘和湿疹等发病机制调节的主要抗体。
IgE 是组胺和白三烯等肥大细胞释放抗炎剂水平的主要调剂者。
尽管只有少量IgE 在血液中，但它还负责触发严重过敏反应。
IgE 在I 型超敏反应中起作用，I 型超敏反应表现为各种过敏性疾病，如过敏性哮喘、大多数类型的鼻窦炎、过敏性鼻炎、食物过敏，以及某些类型的慢性荨麻疹和特应性皮炎。
此外，有足够证据证明IgE 还参与免疫系统对寄生虫入侵的反应，并增加与癌症发病有关的白血细胞数量。
本试剂盒采用双抗体夹心ELISA 法(Sandwich ELISA)检测样品中人IgE 的浓度，其原理见图1。
人IgE 特异的单克隆捕获抗体已预包被于酶标板上，当加入标准品或样品时，其中的人IgE 会与捕获抗体结合。
当加入辣根过氧化物酶标记人IgE 抗体后，辣根过氧化物酶标记人IgE 抗体与人IgE 结合，形成夹心的免疫复合物。
最后加入显色剂TMB 溶液，固相捕获的辣根过氧化物酶就会催化无色的显色剂氧化成蓝色物质，在加入终止液后呈黄色。
人(Human)受体相互作用蛋白3(RIP3)ELISA试剂盒说明书
本试剂盒只能用于科学研究，不得用于医学诊断人（Human）受体相互作用蛋白3（RIP3）ELISA检测试剂盒使用说明书检测原理试剂盒采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验（ELISA）。
往预先包被受体相互作用蛋白3（RIP3）抗体的包被微孔中，依次加入标本、标准品、HRP标记的检测抗体，经过温育并彻底洗涤。
用底物TMB显色，TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。
颜色的深浅和样品中的受体相互作用蛋白3（RIP3）呈正相关。
用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），计算样品浓度。
样品收集、处理及保存方法1.血清：使用不含热原和内毒素的试管，操作过程中避免任何细胞刺激，收集血液后，3000转离心10分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。
2.血浆：EDTA、柠檬酸盐或肝素抗凝。
3000转离心30分钟取上清。
3.细胞上清液：3000转离心10分钟去除颗粒和聚合物。
4.组织匀浆：将组织加入适量生理盐水捣碎。
3000转离心10分钟取上清。
5.保存：如果样本收集后不及时检测，请按一次用量分装，冻存于-20℃，避免反复冻融，在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。
自备物品1.酶标仪（450nm）2.高精度加样器及枪头：0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL3.37℃恒温箱操作注意事项1.试剂盒保存在2-8℃，使用前室温平衡20分钟。
从冰箱取出的浓缩洗涤液会有结晶，这属于正常现象，水浴加热使结晶完全溶解后再使用。
2.实验中不用的板条应立即放回自封袋中，密封（低温干燥）保存。
3.浓度为0的S0号标准品即可视为阴性对照或者空白；按照说明书操作时样本已经稀释5倍，最终结果乘以5才是样本实际浓度。
4.严格按照说明书中标明的时间、加液量及顺序进行温育操作。
5.所有液体组分使用前充分摇匀。
上海笃玛生物科技有限公司试剂盒组成名称96孔配置48孔配置备注微孔酶标板12孔×8条12孔×4条无标准品0.3mL*6管0.3mL*6管无样本稀释液6mL3mL无检测抗体-HRP10mL5mL无20×洗涤缓冲液25mL15mL按说明书进行稀释底物A6mL3mL无底物B6mL3mL无终止液6mL3mL无封板膜2张2张无说明书1份1份无自封袋1个1个无注：标准品（S0-S5）浓度依次为：0、40、80、160、320、640ng/mL试剂的准备20×洗涤缓冲液的稀释：蒸馏水按1：20稀释，即1份的20×洗涤缓冲液加19份的蒸馏水。
人血管内皮生长因子 ELISA 试剂盒说明书
产品说明书人血管内皮生长因子ELISA试剂盒（Human VEGF ELISA KIT）产品货号：H6139S, H6139M, H6139L产品规格：24T, 48T, 96T产品内容：注：终止液和显色剂具有腐蚀性，一旦接触到液体，请尽快用大量清水冲洗。
储存条件4℃避光保存，有效期见外包装。
开封后，保存温度详见说明书。
产品介绍Human VEGF ELISA Kit (Human Vascular Endothelial Cell Growth Factor Enzyme-Linked ImmunoSorbent Assay Kit) ，即人血管内皮生长因子ELISA试剂盒，可以定量检测人血清、血浆或细胞培养上清液等样本中的天然和重组VEGF浓度。
人VEGF是由两个相同亚基以二硫键交联组成的二聚体糖蛋白，基因定位于第6号染色体长臂，由8个外显子和7个内含子交替构成，约14 kb。
由于mRNA剪接方式不同，产生了单链分别含121，145，165，183，189和206个氨基酸的不同变异体。
VEGF 121分子量约为34-46 kDa，是可溶性分泌型蛋白质，以游离状态存在，不能与肝素结合；VEGF 165分子量为45 kDa，30-50%以可溶性形式分泌于细胞外基质，其余部分与细胞膜、基底膜或细胞外基质含有肝素的糖蛋白结合。
VEGF 145存在于胎盘细胞和女性生殖道肿瘤细胞。
VEGF 189及VEGF 206分泌后完全结合于细胞膜或基底膜含有肝素的糖蛋白上。
骨骼肌，心肌，肝细胞，成骨细胞，中性粒细胞，巨噬细胞，角质形成细胞，血小板，褐色脂肪组织，CD34+细胞，星形细胞，神经元和内皮细胞等多种细胞和组织均可产生VEGF。
血清和血浆样本均可检测到VEGF，由于血小板可释放VEGF，因此血清中VEGF含量较高。
VEGF是一种特异作用于血管内皮细胞的多功能细胞因子，可增加血管通透性、促进血管形成、引起细胞外基质成分改变等。
人内皮抑素(ES)ELISA试剂说明书kit价格
磷酸二氢钾7778-77-0 Potassiumphosphatemonobasic 产品编号：YSJ-02049 含量： GR，99.5% 产品规格： 500克
酒石酸钾6100-19-2 Potassiumtartratehemihydrate 产品编号：YSJ-02066 含量： AR，99% 产品规格： 500克
硫酸钾7778-80-5 Potassiumsulfate 产品编号：YSJ-02067 含量： AR，99% 产品规格： 500克
硫氰酸钾333-20-0 Potassiumthiocyanate 产品编号：YSJ-02068 含量： AR，98.5% 产品规格： 500克
碘化钾7681-11-0 Potassiumiodide 产品编号：YSJ-02063 含量： AR，99% 产品规格： 500克
过硫酸钾7727-21-1 Potassiumpersulfate 产品编号：YSJ-02064 含量： AR，99.5% 产品规格： 500克
焦硫酸钾7790-62-7 Potassiumpyrosulfate 产品编号：YSJ-02065 含量： AR，98% 产品规格： 500克
二盐基磷酸钾16788-57-1 DKP 产品编号：YSJ-02050 含量： AR，99% 产品规格： 500克
无水磷酸二钾16788-57-1 Potassiumphosphatedibasic 产品编号：YSJ-02051 含量： AR，98% 产品规格： 500克
乙基黄原酸钾140-89-6 Potassiumethylxanthate 产品编号：YSJ-02052 含量： AR，95% 产品规格： 100克
达优 人 IgE ELISA试剂盒说明书
产品信息和操作指南Human IgE预包被 ELISA kit Cat# : DKW12-1820-048 / DKW12-1820-096本试剂盒专用于科研，而非用于诊断Human IgEDKW12-1820目录产品简介 (1)知识背景 (1)试剂盒提供的试剂 (2)需要实验者自行准备的试剂与仪器 (2)注意事项 (3)试剂的配制 (5)操作过程 (7)结果分析 (9)试剂盒的保存 (9)操作步骤一览表 (10)参考文献 (11)ELISA测定中可能会出现的问题及解决方法 (12)预包被ELISA 试剂盒系列产品 (15)1、产品简介：达优®人IgE ELISA试剂盒是通过酶联免疫吸附技术，体外定量检测人血清、血浆、缓冲液或细胞培养液中的IgE，可同时检测天然的和重组的IgE。
本试剂盒为预包被板，整个过程孵育时间不超过4小时，洗涤9次。
本试剂盒专用于科研，而非用于诊断。
使用前请仔细阅读说明书并检查试剂盒组分，若有任何疑问请与达科为生物工程有限公司联系，E-mail：*************.检测范围：32-0.5 ng/mL灵敏度：0.1ng/mL重复性：板内、板间变异系数均＜10％。
2、知识背景：抗体根据抗原性和抗体重链分为IgG、IgA、IgM、IgE和IgD 五种。
IgE是介导I型变态反应的重要抗体，在支气管哮喘、鼻炎、食物过敏、药物、病原体等特应性疾病的发病过程中发挥着关键作用。
而抗IgE单克隆抗体可以与血液中IgE结合，降低血清总IgE水平，并下调肥大细胞、嗜碱性粒细胞表面的IgE高亲和力受体FcεRI的表达，从而抑制了IgE介导的免疫反应（1-6）。
3、试剂盒提供的试剂：试剂规格配制Cytokine standard 2/1瓶* 干粉状，按瓶上说明操作Biotinylated antibody 2/1瓶* 1：100用Dilution buffer R（1×）稀释Streptavidin-HRP 2/1瓶* 1：100用Dilution buffer R（1×）稀释Dilution buffer R（1×） 3/2瓶* 即用型Washing buffer（50×）1瓶 150∶用蒸馏水稀释TMB 1瓶即用型Stop solution 1瓶即用型Precoated ELISA plate 8×12或8×6*即用型封板膜 2/1张* 即用型说明书1份*：96/48 Tests4、需要实验者自行准备的试剂与仪器：1．酶标仪（建议参考仪器使用说明提前预热）2．微量加液器及吸头：P10，P50，P100，P200，P1000 3．蒸馏水或去离子水4．全新滤纸5．旋涡振荡器和磁力搅拌器5、注意事项：1．试剂应按瓶上标签说明储存，使用前室温平衡20-30分钟。
人(Human)白蛋白(Albumin)ELISA试剂盒
本试剂盒只能用于科学研究，不得用于医学诊断人（Human）白蛋白（Albumin）ELISA检测试剂盒使用说明书检测原理试剂盒采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验（ELISA）。
往预先包被白蛋白（Albumin）抗体的包被微孔中，依次加入标本、标准品、HRP标记的检测抗体，经过温育并彻底洗涤。
用底物TMB显色，TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。
颜色的深浅和样品中的白蛋白（Albumin）呈正相关。
用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），计算样品浓度。
样品收集、处理及保存方法1.血清：使用不含热原和内毒素的试管，操作过程中避免任何细胞刺激，收集血液后，3000转离心10分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。
2.血浆：EDTA、柠檬酸盐或肝素抗凝。
3000转离心30分钟取上清。
3.细胞上清液：3000转离心10分钟去除颗粒和聚合物。
4.组织匀浆：将组织加入适量生理盐水捣碎。
3000转离心10分钟取上清。
5.保存：如果样本收集后不及时检测，请按一次用量分装，冻存于-20℃，避免反复冻融，在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。
自备物品1.酶标仪（450nm）2.高精度加样器及枪头：0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL3.37℃恒温箱操作注意事项1.试剂盒保存在2-8℃，使用前室温平衡20分钟。
从冰箱取出的浓缩洗涤液会有结晶，这属于正常现象，水浴加热使结晶完全溶解后再使用。
2.实验中不用的板条应立即放回自封袋中，密封（低温干燥）保存。
3.浓度为0的S0号标准品即可视为阴性对照或者空白；按照说明书操作时样本已经稀释5倍，最终结果乘以5才是样本实际浓度。
4.严格按照说明书中标明的时间、加液量及顺序进行温育操作。
5.所有液体组分使用前充分摇匀。
上海笃玛生物科技有限公司试剂盒组成名称96孔配置48孔配置备注微孔酶标板12孔×8条12孔×4条无标准品0.3mL*6管0.3mL*6管无样本稀释液6mL3mL无检测抗体-HRP10mL5mL无20×洗涤缓冲液25mL15mL按说明书进行稀释底物A6mL3mL无底物B6mL3mL无终止液6mL3mL无封板膜2张2张无说明书1份1份无自封袋1个1个无注：标准品（S0-S5）浓度依次为：0、15、30、60、120、240ng/mL试剂的准备20×洗涤缓冲液的稀释：蒸馏水按1：20稀释，即1份的20×洗涤缓冲液加19份的蒸馏水。
人(Human)sialyl Tn抗原(sTn-Ag)ELISA试剂盒说明书
本试剂盒只能用于科学研究，不得用于医学诊断人（Human）sialyl Tn抗原（sTn-Ag）ELISA检测试剂盒使用说明书检测原理试剂盒采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验（ELISA）。
往预先包被sialyl Tn抗体（sTn-Ab）抗体的包被微孔中，依次加入标本、标准品、HRP标记的检测抗体，经过温育并彻底洗涤。
用底物TMB 显色，TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。
颜色的深浅和样品中的sialyl Tn抗原（sTn-Ag）呈正相关。
用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），计算样品浓度。
样品收集、处理及保存方法1.血清：使用不含热原和内毒素的试管，操作过程中避免任何细胞刺激，收集血液后，3000转离心10分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。
2.血浆：EDTA、柠檬酸盐或肝素抗凝。
3000转离心30分钟取上清。
3.细胞上清液：3000转离心10分钟去除颗粒和聚合物。
4.组织匀浆：将组织加入适量生理盐水捣碎。
3000转离心10分钟取上清。
5.保存：如果样本收集后不及时检测，请按一次用量分装，冻存于-20℃，避免反复冻融，在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。
自备物品1.酶标仪（450nm）2.高精度加样器及枪头：0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL3.37℃恒温箱操作注意事项1.试剂盒保存在2-8℃，使用前室温平衡20分钟。
从冰箱取出的浓缩洗涤液会有结晶，这属于正常现象，水浴加热使结晶完全溶解后再使用。
2.实验中不用的板条应立即放回自封袋中，密封（低温干燥）保存。
3.浓度为0的S0号标准品即可视为阴性对照或者空白；按照说明书操作时样本已经稀释5倍，最终结果乘以5才是样本实际浓度。
4.严格按照说明书中标明的时间、加液量及顺序进行温育操作。
5.所有液体组分使用前充分摇匀。
上海笃玛生物科技有限公司试剂盒组成名称96孔配置48孔配置备注微孔酶标板12孔×8条12孔×4条无标准品0.3mL*6管0.3mL*6管无样本稀释液6mL3mL无检测抗体-HRP10mL5mL无20×洗涤缓冲液25mL15mL按说明书进行稀释底物A6mL3mL无底物B6mL3mL无终止液6mL3mL无封板膜2张2张无说明书1份1份无自封袋1个1个无注：标准品（S0-S5）浓度依次为：0、7.5、15、30、60、120U/mL试剂的准备20×洗涤缓冲液的稀释：蒸馏水按1：20稀释，即1份的20×洗涤缓冲液加19份的蒸馏水。
Human TSLP ELISA Kit 说明书
EK165-01Catalog Number EK165-48EK165–96定量检测血清、血浆和细胞培养上清中的人胸腺基质淋巴细胞生成素(TSLP)浓度。
本产品仅用于科学研究，非诊断试剂，不能用于临床诊断。
一、产品介绍1.背景介绍胸腺基质淋巴细胞生成素(TSLP)主要由非造血细胞如成纤维细胞、上皮细胞和不同类型的基质或基质样细胞产生。
它主要影响骨髓细胞、诱导单核细胞释放T 细胞虏获趋化因子和增强髓样(CD11c +)树突状细胞成熟。
研究表明，TSLP 还可激活位于表皮的特定树突状细胞亚群—朗格汉斯细胞的成熟。
胸腺TSLP 激活髓样和浆细胞样(CD123+)树突状细胞会导致调节性T 细胞的产生。
TSLP 通过胸腺基质淋巴细胞受体CRLF2和IL-7Rα链组成的异源二聚体受体复合物产生信号。
结合STAT5后就会诱导其发生磷酸化，进而导致上游转录因子的表达。
TSLP 的表达与许多疾病包括哮喘、炎症性关节炎、特应性皮炎、湿疹及其它过敏状态有关。
2.检测原理本试剂盒采用双抗体夹心酶联免疫吸附检测技术。
特异性抗人TSLP 抗体预包被在高亲和力的酶标板上。
酶标板孔中加入标准品和待测样本，经过孵育，样本中存在的TSLP 与固相抗体结合。
洗涤去除未结合的物质后，加入生物素化的检测抗体孵育。
洗涤去除未结合的生物素化的抗体，加入辣根过氧化物酶标记的链霉亲和素(Streptavidin-HRP)。
洗涤后，加入显色底物TMB ，避光显色。
颜色反应的深浅与样本中TSLP 的浓度成正比。
加入终止液终止反应，在450nm 波长(参考波长570-630nm)测定吸光度值。
3.试剂盒检测的局限1)请在本试剂盒标示的有效期内使用。
2)试剂盒的试剂不能与其他批号的试剂或其他来源的试剂混合使用。
3)任何标准品稀释、操作人员、移液技术、洗涤技术、孵育温度、试剂盒保存时间的改变，都将影响结合反应。
4)本试剂盒在设计上去除或降低了生物学样本中的一些内源性干扰因素，并非所有可能的影响因素都已经去除。
人ELISA试剂盒,第八因子相关抗原ELISA试剂盒说明书
人ELISA试剂盒，第八因子相关抗原ELISA试剂盒说明书人ELISA试剂盒，第八因子相关抗原ELISA试剂盒说明书产品规格：96T/48T供应商：上海樊克生物有限公司本产品只用于科研实验人ELISA试剂盒，第八因子相关抗原ELISA试剂盒说明书，(LR/Ob-R)ELISA试剂盒，苗条素受体elisakit elisa试剂盒上海樊克生物供应！人ELISA试剂盒，第八因子相关抗原ELISA试剂盒说明书Reagent preparationThe kit is removed from the cold storage environment and can be used at room temperature.1 standard solution: the kit provides 6 tube standard, each tube has been calibrated concentration, and freeze dry. Before the experiment in each standard tube added 0.5ml sample dilution and cover after standing for 10 minutes or more, then repeatedly reversed / rubbing its dissolution, restore the complex for each standard tube body labeling concentration.2.20 * washing buffer dilution: distilled water diluted by 1:20, that is, 20 copies of 1 x wash buffer plus 19 copies of distilled water.Kit performance:1 sample linear regression and the expected concentration correlation coefficient R value is above 0.990.The 2 batch and the batch should be less than 9% and 11% respectively.人ELISA试剂盒，第八因子相关抗原ELISA试剂盒说明书ELIAS试剂盒的实验条件:1. 固相载体的选择：许多物质可作为固相载体，如聚氯乙烯、聚苯乙烯、聚丙酰胺和纤维素等。
R&D leptin试剂盒
人、小鼠和大鼠的瘦素（leptin）elisa试剂盒瘦素(Leptin)为肥胖基因（ob）编码产物，是脂肪细胞分泌的蛋白质类激素，在调节能量平衡、摄食行为起重要作用，可直接作用于脂肪细胞抑制脂肪的合成，促进分解，避免肥胖发生。
R&D systems公司于1976年成立于美国，一直致力于各种细胞因子及其相关分子的生产研发，其生产的各种ELISA试剂盒、重组因子及抗体以其卓越的品质赢得了世界各国科研及临床诊断机构的青睐。
是全世界最大的细胞因子、ELISA试剂盒公司，全球公认的金标准系列。
全国指定代理：优宁维公司部分畅销ELISA试剂盒介绍如下：Human Leptin Quantikine ELISA Kit #DLP00Format: 96-well strip plateSensitivity: 7.8 pg/mLSpecificity: Natural and recombinant human LeptinAssay Range:15.6 - 1,000 pg/mLAssay Length: 3.5 hoursSample Type: Cell Culture Supernates、Serum, EDTA Plasma, Heparin Plasma, Citrate Plasma Cross-reactivity:< 0.5% cross-reactivity observed with available related molecules. < 50% cross-species reactivity observed with species tested.人的瘦素（leptin）elisa试剂盒主要是采用的HRP直接标记的酶显双抗夹心法，整个实验过程差不多3.5小时，适用于细胞上清，血清和血浆，并且有6块板和50块板包装可以选择。
Mouse/Rat Leptin Quantikine ELISA Kit，# MOB00Format: 96-well strip plateSensitivity: 22 pg/mLSpecificity: Natural and recombinant mouse and rat LeptinAssay Range: 62.5 - 4,000 pg/mL (Serum, Cell Culture Supernates, EDTA Plasma)Assay Length: 4.5 hoursSample Type & Volume Required Per Well:Cell Culture Supernates (50 µL), Serum (20 µL), EDTA Plasma (20 µL)Cross-reactivity: < 0.5% cross-reactivity observed with available related molecules. Cross-species reactivity observed with 1 or more species tested.Mouse/Rat 瘦素（Leptin）elisa试剂盒，此款试剂盒适用于小鼠和大鼠血清，血浆和细胞上清，有2块板，6块板和50块板包装可以选择。
CD62L)ELISA试剂盒简介说明
人L选择素（L—Selectin/CD62L）ELISA试剂盒简介说明试验原理：本试剂盒是固相夹心法酶联免疫吸附试验（ELISA）.已知待测物质浓度的标准品、未知浓度的样品加入微孔酶标板内进行检测。
先将待测物质和生物素标记的抗体同时温育。
洗涤后，加入亲和素标记过的HRP。
再经过温育和洗涤，去除未结合的酶结合物，然后加入底物A、B，和酶结合物同时作用。
产生颜色。
颜色的深浅和样品中指标的浓度呈比例关系。
试剂盒内容及其配制：试剂盒成份96孔配置48孔配置96/48人份酶标板1块板（96T）半块（48T）塑料膜板盖1块半块标准品1瓶（1.0ml）1瓶（0.5ml）空白对比1瓶（1.0ml）1瓶（0.5ml）标准品稀释缓冲液1瓶（8.0ml）1瓶（4.0ml）生物素标记抗体1瓶（8.0ml）1瓶（4.0ml）亲和链酶素HRP 1瓶（12ml）1瓶（6.0ml）洗涤缓冲液1瓶（20ml）1瓶（10ml）底物A1瓶（6.0ml）1瓶（3.0ml）底物B1瓶（6.0ml）1瓶（3.0ml）停止液1瓶（6.0ml）1瓶（3.0ml）自备料子：1．蒸馏水。
2．加样器：5ul、10ul、50ul、100ul、200、500ul、1000ul。
3．振荡器及磁力搅拌器等。
人L选择素（LSelectin/CD62L）ELISA试剂盒样品收集、处置及保管方法：1、血清操作过程中躲避任何细胞刺激。
使用不含热原和内毒素的试管。
收集血液后，1000×g离心10分钟将血清和红细胞快速当心地分别。
2、血浆EDTA、柠檬酸盐、肝素血浆可用于检测。
1000×g离心30分钟去除颗粒。
3、细胞上清液1000×g离心10分钟除颗粒和聚合物。
4、组织匀浆将组织加入适量生理盐水捣碎。
1000×g离心10分钟，取上清液5、保管假如样品不立刻使用，应将其分成小部分70 ℃保管，躲避反复冷冻。
尽可能的不要使用溶血或高血脂血。
doc_小鼠瘦素(LEP)酶联免疫试剂盒(ELISA试剂盒)
仅供科研使用，不得用于临床检验。
小鼠瘦素（LEP）酶联免疫试剂盒（ELISA试剂盒）说明书黄石市艾恩斯生物科技有限公司【产品名称】通用名称：小鼠瘦素（LEP）酶联免疫试剂盒（ELISA试剂盒）英文名称：Mouse Leptin（LEP）ELISA KIT【包装规格】48人份/盒，96人份/盒【预期用途】仅供科研使用，定量检测血清、血浆、细胞培养上清液中小鼠瘦素（LEP）的浓度。
【检验原理】本试剂盒采用双抗体夹心酶联免疫吸附试验（ELISA）。
在预包被抗小鼠瘦素（LEP）抗体（固相抗体）的微孔酶标板中，加入小鼠瘦素（LEP）校准品和待测样本，再加入另一株HRP 标记的抗小鼠瘦素（LEP）抗体（酶标抗体），经过温育与充分洗涤，去除未结合的组分，在微孔板固相表面形成固相抗体-抗原-酶标抗体的夹心复合物。
加底物A和B，底物在HRP催化下，产生蓝色产物，在终止液（2M 硫酸）作用下，最终转化为黄色，在酶标仪上测定吸光度（OD值），吸光度（OD值）与待测样品中小鼠瘦素（LEP）的浓度正相关。
拟合校准品曲线，可以计算出样本中小鼠瘦素（LEP）的浓度。
【主要组成成分】主要成分校准品检测范围：125.0 - 8,000 pg/mL。
校准品已经通过测试，结果表明HBs抗原阴性，HIV1、HIV2和HCV抗体阴性，由于不存在一种试验方法能够完全保证没有这些物质，本品必须按照具有潜在的感染性进行处理，处理过程应当遵循通用的安全措施。
需要但未提供的材料及耗材1、酶标仪2、精密移液器及一次性吸头3、蒸馏水4、洗瓶或者自动洗板机5、37℃水浴锅或恒温箱6、500ml量筒7、无粉一次性乳胶手套【储存条件及有效期】1、2-8℃保存，切勿冷冻，有效期6个月。
2、开封使用后，包被微孔板放入带有干燥剂的自封袋中，密闭自封袋，并将全部试剂放回2-8℃冰箱。
3、开封后，按照建议的条件保存，校准品、包被微孔板和HRP标记抗体，有效期为14天，其他成分在标签标明的有效期内是稳定的。
大鼠瘦素(LEP)ELISA试剂盒说明书
大鼠瘦素（LEP）ELISA试剂盒使用说明书本试剂盒仅供体外研究使用!北京奇松生物科技有限公司预期应用ELISA法定量测定大鼠血清、血浆、细胞培养上清或其它相关生物液体中瘦素（LEP）含量。
实验原理用纯化的抗体包被微孔板，制成固相载体，往包被抗LEP抗体的微孔中依次加入标本或标准品、生物素化的抗LEP抗体、HRP标记的亲和素，经过彻底洗涤后用底物TMB显色。
TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。
颜色的深浅和样品中的LEP呈正相关。
用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），计算样品浓度。
试剂盒组成及试剂配制1.酶联板：一块（96孔）2.标准品（冻干品）：2瓶，每瓶临用前以样品稀释液稀释至0.5ml，盖好后静置10分钟以上，然后反复颠倒/搓动以助溶解，其浓度为20 ng/ml，做系列倍比稀释（注：不要直接在板中进行倍比稀释）后，分别稀释成20 ng/ml，10 ng/ml，5 ng/ml，2.5 ng/ml，1.25 ng/ml，0.625 ng/ml，0.312 ng/ml，样品稀释液直接作为标准浓度0 ng/ml，临用前15分钟内配制。
如配制10 ng/ml标准品：取0.3ml （不要少于0.3ml ）20 ng/ml的上述标准品加入含有0.3ml样品稀释液的Eppendorf管中，混匀即可，其余浓度以此类推。
3.样品稀释液：1×20ml。
4.检测稀释液A：1×10ml。
5.检测稀释液B：1×10ml。
6.检测溶液A：1×120μl（1:100）临用前以检测稀释液A 1:100稀释，稀释前根据预先计算好的每次实验所需的总量配制（100μl/孔），实际配制时应多配制0.1-0.2ml。
如10μl检测溶液A加990μl检测稀释液A的比例配制，轻轻混匀，在使用前一小时内配制。
7.检测溶液B：1×120μl/瓶（1:100）临用前以检测稀释液B 1:100稀释。
艾美捷QuicKey-人脂联素(ADP Acrp30)酶联免疫吸附测定试剂盒使用说明书
（本试剂盒仅供体外研究使用，不用于临床诊断！）QuicKey-人脂联素(ADP/Acrp30)酶联免疫吸附测定试剂盒使用说明书QuicKey Human ADP/Acrp30(Adiponectin) ELISA Kit产品货号：E-TSEL-H002096T/48T/24T使用前请仔细阅读说明书。
如果有任何问题，请通过以下方式联系我们：销售部电话************，************技术部电话************QQ客服800110755具体保质期请见试剂盒外包装标签。
联系时请提供产品批号(见试剂盒标签)，以便我们更高效地为您服务。
QuicKey系列与传统ELISA试剂盒相比，在实验时间节省至少1小时的同时，获得更加灵敏和精确的实验结果。
Elabscience 自主开发的新技术，旨在帮助客户以更为高效的方式进行科学研究。
用途该试剂盒用于体外定量检测人血清、血浆中ADP浓度。
其它相关生物液体请咨询技术支持。
灵敏度、检测范围、特异性和重复性●灵敏度：0.18ng/mL。
●检测范围：0.39-25ng/mL。
●特异性：可检测样本中的人ADP,且与其它类似物无明显交叉反应。
●重复性：板内，板间变异系数均<10%。
背景介绍脂联素（Acrp30/ADP）是一种仅由脂肪细胞分泌的激素，参与调节体内能量平衡和糖脂代谢。
人体内的脂联素由244个氨基酸组成，分子量为30KDa，是apM1基因的表达产物，在结构上与Ⅷ、Ⅹ型胶原和补体C1q高度同源。
脂联素单体聚合形成多种可影响生物活性的复合物结构，包括三聚体（低分子量）、六聚体（中分子量）和更高阶的寡聚结构（高分子量）。
脂联素是脂肪细胞来源蛋白质，调节炎症和新陈代谢的旁分泌及内分泌，它可促进脂肪细胞分化、脂肪酸分解代谢和胰岛素敏感。
研究表明，脂联素与肥胖、胰岛素抵抗、2型糖尿病、高血脂病、高血压、动脉粥样硬化和肾脏疾病等密切相关。
检测原理本试剂盒采用双抗体夹心ELISA法。
兔子瘦素(LEP)ELISA试剂盒,ELISA试剂盒说明书
兔子瘦素(LEP)ELISA试剂盒，ELISA试剂盒说明书兔子瘦素(LEP)ELISA试剂盒，ELISA试剂盒说明书96T/48T供应商：上海乔羽生物有限公司本试剂仅供研究使用标本：全血试验原理：HLA- B27试剂盒是固相夹心法酶联免疫吸附实验（ELISA）.已知HLA-B27浓度的标准品、未知浓度的样品加入微孔酶标板内进行检测。
兔子瘦素(LEP)ELISA试剂盒，ELISA试剂盒说明书先将HLA- B27和生物素标记的抗体同时温育。
洗涤后，加入亲和素标记过的HRP。
再经过温育和洗涤，去除未结合的酶结合物，然后加入底物A、B，和酶结合物同时作用。
产生颜色。
颜色的深浅和样品中HLA-B27的浓度呈比例关系。
乔羽生物竭力为您提供最真的品质！最优的价格！最好的服务！最好的效果！兔子瘦素(LEP)ELISA试剂盒，ELISA试剂盒说明书试剂的准备标准品：标准品的系列稀释应在实验时准备，不能储存。
稀释前将标准品振荡混匀。
2．洗涤缓冲液（50×）的稀释：蒸馏水50倍稀释。
兔子瘦素(LEP)ELISA试剂盒，ELISA试剂盒说明书Operation steps1 before use, all reagents and mixing. Don't make the liquid to produce a large amount of foam, so as to avoid when adding a lot of bubbles, the error on the sample.2 according to the number of decision sample quantity plus the standard required number of strips. Each standard and blank should be wells. Each sample is determined by the number of them, can use complex hole to do complex hole.3 diluted after standard 50ul 50ul to sample addition reaction hole to be measured in the reaction hole. Immediately joined the 50ul antibody labeled with biotin. Cover film plate, gently shake, 37 degrees 1 hours of incubation.4 left hole liquid, each hole filled with washing liquid, oscillating 30 seconds off the washing liquid, pat dry with absorbent paper. This operation is repeated 3 times. If you use the washing machine washing, washing times increase a.5 per hole adding chain affinity enzyme -HRP 80ul, gently oscillating mixing, 37 degrees 30 minutes incubation.6 left hole liquid, each hole filled with washing liquid, oscillating 30 seconds off the washing liquid, pat dry with absorbent paper. This operation is repeated 3 times. If the washing machine with washing, washing times increased once.7 each hole to join the substrate A, B each 50ul, gently oscillating mixing, 37 degrees Celsius incubation 10 minutes. Avoid light.8 remove the enzyme labeled plate, quickly join the 50ul terminator, add the end of the liquid should be measured immediately after the results.9 OD value at the wavelength of 450nm was measured by hole.limitThe result of the above 6 standard is nonlinear, and the result can not be obtained accurately according to the standard curve.兔子瘦素(LEP)ELISA试剂盒，ELISA试剂盒说明书Elisa试剂盒标本要求：1．标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。
(20111122)大鼠瘦素(LEP)Elisa试剂盒说明书
本试剂盒仅供研究使用。
检测范围：96T 0μg/L -8μg/L
使用目的：本试剂盒用于测定大鼠血清、血浆及相关液体样本中瘦素(LEP)含量。
实验原理:大鼠瘦素(LEP)Elisa试剂盒说明书本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中大鼠瘦素(LEP)水平。用纯化的大鼠瘦素(LEP)抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入瘦素(LEP)，再与HRP 标记的瘦素(LEP)抗体结合，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB 在HRP 酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的瘦素(LEP)呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度(OD 值)，通过标准曲线计算样品中大鼠瘦素(LEP)浓度。
9.显色：每孔先加入显色剂A50μl，再加入显色剂B50μl，轻轻震荡混匀，37℃避光显色15 分钟.
10.终止：每孔加终止液50μl，终止反应(此时蓝色立转黄色)。
11.测定：以空白空调零，450nm 波长依序测量各孔的吸光度(OD 值)。 测定应在加终止液后15 分钟以内进行。
操作程序总结：
6.显色剂B 液 6ml×1/瓶 12 密封袋 1 个;
标本要求:
1.标本采集后尽早进行提取，提取按相关文献进行，提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验，可将标本放于-20℃保存，但应避免反复冻融
2.不能检测含NaN3 的样品，因NaN3 抑制辣根过氧化物酶的(HRP)活性。
操作步骤:
1.标准品的稀释：本试剂盒提供原倍标准品一支，用户可按照下列图表在小试管中进行稀
0.5μg/L 1 号标准品 150μl 的2 号标准品加入150μl 标准品稀释液;
人Leptin Elisa试剂盒
1.试剂盒自冰箱中取出后应置室温平衡20分钟；每次检测后剩余试剂请及时于2～8℃保存。 2.将浓缩洗涤液用双蒸水或去离子水稀释(1份加19份水)。 3. 标准品:加入去离子水 0.25ml 至冻干标准品瓶中使 leptin 终浓度达到 2000pg/ml，静置 15 分钟后轻轻混悬待彻 底溶解，用标准品稀释液倍比梯度稀释后依次加入检测孔中。（标准曲线取七个点，最高浓度为 2000 pg/ml,标准品 稀释液直接加入作为 0 浓度.）
3.分别将标本或不同浓度标准品(100ul/孔)加入相应孔中，用封板胶纸封住反应孔，室温孵育120分钟。对于血清或 血浆标本，请加入50ul样本分析缓冲液后加50 ul标本，如稀释量大，请将样本与样本分析缓冲液等量加入，不足部 分用标准品稀释液补充至100ul。 4.洗板5次，且最后一次置厚吸水纸上拍干。 5.加入生物素化抗体工作液(100ul/孔)。用封板胶纸封住反应孔，室温孵育60分钟。 6.洗板5次，且最后一次置厚吸水纸上拍干。 7.加入酶结合物工作液(100ul/孔)。用封板胶纸封住反应孔，避光室温孵育20分钟。 8.洗板5次，且最后一次置厚吸水纸上拍干。 9.加入显色剂TMB100ul/孔，避光室温孵育20分钟。 10.加入终止液50ul/孔,混匀后即刻测量OD450值。
瘦素功能的实现主要跟瘦素受体结合后实现的，瘦素受体有两类，一类是固定细胞膜上的受体，主要通过 JAK/STAT 信号通路起作用，另一类是游离的受体，这类受体一般是丢失了受体的细胞膜内的部分，游离出来的， 根据失去的结构不同，游离受体的种类较多。人体内游离的受体的产生主要是由金属蛋白酶介导的细胞膜外功能域 的脱落后形成的。游离的受体在晚期肾病、慢性心脏病和厌食症的病人中发现有所增高。
存于4℃。
人体分泌素ELISA试剂盒说明书
Human secretin ELISA KitFor the quantitative in vitro determination of Human secretin concentrations in serum - plasma - celiac fluid - tissue homogenate - body fluidFOR LABORA TORY RESEARCH USE ONLY.NOT FOR USE IN DIAGNOSTIC PROCEDURES.This package insert must be read in its entirety before using this product.ELISAENZYME LINKED IMMUNOSORBENT ASSAYINTENDED USE AND TEST PRINCIPLEThis secretin ELISA kit is intended Laboratory for Research use only and is not for use in diagnostic or therapeutic procedures. The Stop Solution changes the color from blue to yellow and the intensity of the color is measured at 450 nm using a spectrophotometer. In order to measure the concentration of secretin in the sample, this secretin ELISA Kit includes a set of calibration standards. The calibration standards are assayed at the same time as the samples and allow the operator to produce a standard curve of Optical Density versus secretin concentration. The concentration of secretin in the samples is then determined by comparing the O.D. of the samples to the standard curve.SAMPLE COLLECTION AND STORAGESSerum - Use a serum separator tube and allow samples to clot for 2 hours at room temperature or overnight at 4℃ before centrifugation for 20 minutes at approximately 2000×g. Remove serum and assay immediately or aliquot and store samples at -20℃. Avoid repeated freeze-thaw cycles Plasma - Collect plasma using heparin as an anticoagulant. Centrifuge samples for 30 minutes at 2000×g at 2-8℃within 30 minutes of collection. Store samples at -20℃. Avoid repeated freeze-thaw cycles.Cell culture supernates, tissue homogenate and other biological fluids - Remove particulates by centrifugation and assay immediately or aliquot and store samples at -20℃. Avoid repeated freeze-thaw cycles.Note: The samples shoule be centrifugated dequately and no hemolysis or granule was allowed.MATERIALS REQUIRED BUT NOT SUPPLIED1. 37 ℃ incubator2. Standard microplate reader capable of measuring absorbance at 450 nm3. Precision pipettes, disposable pipette tips and Absorbent paper4. Distilled or deionized waterREAGENTS PROVIDEDAll reagents provided are stored at 2-8°C. Refer to the expiration date on the label.Name 96 determinations 48 determinationsMICROTITER PLATE 8*12strips 8*6stripsSTANDARD（6 vial）0.3ml/vial 0.3ml/vialSAMPLE DILUENT 6.0ml 3.0mlENZYME CONJUGATE 10.0ml 5.0mlWASH SOLUTION 25ml 15mlSUBSTRA TE A 6.0ml 3.0mlSUBSTRA TE B 6.0ml 3.0mlSTOP SOLUTION 6.0ml 3.0mlClosure plate membrane 2 2User manual 1 1Sealed bags 1 1Note:1. Standard concentration was followed by: 200, 100, 50, 25, 12.5, 0 pg/mL.2. If samples generate values higher than the highest standard, please dilute thesamples with Sample Diluent and repeat the assay.PRECAUTIONS1.Do not substitute reagents from one kit lot to another. Standard, conjugate and microtiter plates are matched for optimal performance. Use only the reagents supplied by manufacturer.2.Allow kit reagents and materials to reach room temperature (20-25°C) before use. Do not use water baths to thaw samples or reagents.3.Do not use kit components beyond their expiration date.e only deionized or distilled water to dilute reagents.5.Do not remove microtiter plate from the storage bag until needed. Unused strips should be stored at 2-8°C in their pouch with the desiccant provided.e fresh disposable pipette tips for each transfer to avoid contamination.7.Do not mix acid and sodium hypochlorite solutions.8.Serum and plasma should be handled as potentially hazardous and capable of transmitting disease. Disposable gloves must be worn during the assay procedure, since no known test method can offer complete assurance that products derived from Rat blood will not transmit infectious agents. Therefore, all blood derivatives should be considered potentially infectious and good laboratory practices should be followed.9.All samples should be disposed of in a manner that will inactivate viruses.10.Liquid Waste: Add sodium hypochlorite to a final concentration of 1.0%. The waste should be allowed to stand for a minimum of 30 minutes to inactivate the viruses before disposal.11.Substrate Solution is easily contaminated. If bluish prior to use, do not use.12.Substrate B contain 20% acetone, keep this reagent away from sources of heat or flame.13.Remove all kit reagents from refrigerator and allow them to reach room temperature ( 20-25°C).REAGENT PREPARATION AND STORAGEWash Solution (1X) - Dilute 1 volume of Wash solution (20X) with 19 volumes of deionized or distilled water. Wash Solution is stable for 1 month at 2-8°C.ASSAY PROCEDURE1. Prepare all reagents before starting assay procedure. It is recommended that all Standards and Samples be added in duplicate to the Microtiter plate.2. Add 50μl of Standard or Sample to the appropriate wells. Blank well doesn’t add anyting.3. Add 100μl of Enzymeconjugate to standard wells and sample wells except the blank well, cover with an adhesive strip and incubate for 60 minutes at 37°C.4. Wash the Microtiter Plate 4 times.Manual Washing - Remove incubation mixture by aspirating contents of the plate into a sink or proper waste container. Using a squirt bottle, fill each well completely with Wash Solution (1X),then aspirate contents of the plate into a sink or proper waste container. Repeat this procedure for a total of four times. After final wash, invert plate, and blot dry by hitting plate onto absorbent paper or paper towels until no moisture appears. Note: Hold the sides of the plate frame firmly when washing the plate to assure that all strips remain securely in frame.Automated Washing- Aspirate all wells, then wash plates four times using Wash Buffer (1X). Always adjust your washer to aspirate as much liquid as possible and set fill volume at 350μL/well/wash. After final wash, invert plate, and blot dry by hitting plate onto absorbent paper or paper towels until no moisture appears.5. Add Substrate A 50μl and Substrate B 50μl to each well. Gently mix and incubate for 15 minutes at 37°C. Protect from light.6. Add 50μl Stop Solution to each well. The color in the wells should change from blue to yellow. If the color in the wells is green or the color change does not appear uniform, gently tap the plate to ensure thorough mixing.7. Read the Optical Density (O.D.) at 450 nm using a microtiter plate reader within 15 minutes.CALCULATION OF RESULTS1.This standard curve is used to determine the amount in an unknown sample. The standard curve is generated by plotting the average O.D. (450 nm) obtained for each of the six standard concentrations on the vertical (X) axis versus the corresponding concentration on the horizontal (Y) axis.2.First, calculate the mean O.D. value for each standard and sample. All O.D. Values are subtracted by the mean value of the balnk well before result interpretation. Construct the standard curve using graph paper or statistical software.3.To determine the amount in each sample, first locate the O.D. value on the Y-axis and extend a horizontal line to the standard curve. At the point of intersection, draw a vertical line to the X-axis and read the corresponding concentration.4.Any variation in operator, pipetting and washing technique, incubation time or temperature, and kit age can cause variation in result. Each user should obtain their own standard curve.5.Intra-assay CV(%) is less than 10% and Inter-assay CV(%) is less than 15%.6.Assay range: 6.25 pg/mL – 200 pg/mL.7. Sensitivity: The minimum detectable dose of Human secretin is typically less than 1.0 pg/mL.8. Cross-reactivity: This assay recognizes recombinant and natural Human secretin. No significantcross-reactivity or interference was observed.9. Storage: 2-8℃ (Use frequently); six months (-20℃)。
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本试剂盒只能用于科学研究，不得用于医学诊断人（Human）瘦素（LEP）ELISA检测试剂盒使用说明书检测原理试剂盒采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验（ELISA）。
往预先包被瘦素（LEP）抗体的包被微孔中，依次加入标本、标准品、HRP标记的检测抗体，经过温育并彻底洗涤。
用底物TMB显色，TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。
颜色的深浅和样品中的瘦素（LEP）呈正相关。
用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度（OD值），计算样品浓度。
样品收集、处理及保存方法1.血清：使用不含热原和内毒素的试管，操作过程中避免任何细胞刺激，收集血液后，3000转离心10分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。
2.血浆：EDTA、柠檬酸盐或肝素抗凝。
3000转离心30分钟取上清。
3.细胞上清液：3000转离心10分钟去除颗粒和聚合物。
4.组织匀浆：将组织加入适量生理盐水捣碎。
3000转离心10分钟取上清。
5.保存：如果样本收集后不及时检测，请按一次用量分装，冻存于-20℃，避免反复冻融，在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。
自备物品1.酶标仪（450nm）2.高精度加样器及枪头：0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL3.37℃恒温箱操作注意事项1.试剂盒保存在2-8℃，使用前室温平衡20分钟。
从冰箱取出的浓缩洗涤液会有结晶，这属于正常现象，水浴加热使结晶完全溶解后再使用。
2.实验中不用的板条应立即放回自封袋中，密封（低温干燥）保存。
3.浓度为0的S0号标准品即可视为阴性对照或者空白；按照说明书操作时样本已经稀释5倍，最终结果乘以5才是样本实际浓度。
4.严格按照说明书中标明的时间、加液量及顺序进行温育操作。
5.所有液体组分使用前充分摇匀。
试剂盒组成名称96孔配置48孔配置备注微孔酶标板12孔×8条12孔×4条无标准品0.3mL*6管0.3mL*6管无样本稀释液6mL3mL无检测抗体-HRP10mL5mL无20×洗涤缓冲液25mL15mL按说明书进行稀释底物A6mL3mL无底物B6mL3mL无终止液6mL3mL无封板膜2张2张无说明书1份1份无自封袋1个1个无注：标准品（S0-S5）浓度依次为：0、1、2、4、8、16ng/mL试剂的准备20×洗涤缓冲液的稀释：蒸馏水按1：20稀释，即1份的20×洗涤缓冲液加19份的蒸馏水。
洗板方法1.手工洗板：甩尽孔内液体，每孔加满洗涤液，静置1min后甩尽孔内液体，在吸水纸上拍干，如此洗板5次。
2.自动洗板机：每孔注入洗液350μL，浸泡1min，洗板5次。
操作步骤1.从室温平衡20min后的铝箔袋中取出所需板条，剩余板条用自封袋密封放回4℃。
2.设置标准品孔和样本孔，标准品孔各加不同浓度的标准品50μL；3.样本孔先加待测样本10μL，再加样本稀释液40μL；空白孔不加。
4.除空白孔外，标准品孔和样本孔中每孔加入辣根过氧化物酶（HRP）标记的检测抗体100μL，用封板膜封住反应孔，37℃水浴锅或恒温箱温育60min。
5.弃去液体，吸水纸上拍干，每孔加满洗涤液，静置1min，甩去洗涤液，吸水纸上拍干，如此重复洗板5次（也可用洗板机洗板）。
6.每孔加入底物A、B各50μL，37℃避光孵育15min。
7.每孔加入终止液50μL，15min内，在450nm波长处测定各孔的OD值。
结果判断绘制标准曲线：在Excel工作表中，以标准品浓度作横坐标，对应OD值作纵坐标，绘制出标准品线性回归曲线，按曲线方程计算各样本浓度值。
试剂盒性能1.准确性：标准品线性回归与预期浓度相关系数R值，大于等于0.9900。
2.灵敏度：最低检测浓度小于0.1ng/mL。
3.特异性：不与其它可溶性结构类似物交叉反应。
4.重复性：板内、板间变异系数均小于15%。
5.贮藏：2-8℃，避光防潮保存。
6.有效期：6个月免责声明1.试剂盒仅供研究使用，不得用于临床实验或人体实验，否则所产生的一切后果，由实验者承担，本公司概不负责。
2.严格按照说明书操作，实验者违反说明书操作，后果由实验者承担。
FOR RESEARCH USE ONLY.NOT FOR USE IN DIAGNOSTIC PROCEDURES.Human Leptin(LEP)ELISA Kit instruction Intended useThis LEP ELISA kit is intended Laboratory for Research use only and is not for use in diagnostic or therapeutic procedures.The Stop Solution changes the color from blue to yellow and the intensity of the color is measured at450nm using a spectrophotometer.In order to measure the concentration of LEP in the sample,this LEP ELISA Kit includes a set of calibration standards.The calibration standards are assayed at the same time as the samples and allow the operator to produce a standard curve of Optical Density versus LEP concentration.The concentration of LEP in the samples is then determined by comparing the O.D.of the samples to the standard curve.Sample collection and storagesSerum-Use a serum separator tube and allow samples to clot for30minutes before centrifugation for10minutes at approximately3000×g.Remove serum and assay immediately or aliquot and store samples at-20℃or-80℃.Avoid repeated freeze-thaw cycles Plasma-Collect plasma using EDTA or heparin as an anticoagulant.Centrifuge samples for30minutes at3000×g at2-8℃within30minutes of collection.Store samples at-20℃or-80℃.Avoid repeated freeze-thaw cycles.Cell culture supernates and other biological fluids-Remove particulates by centrifugation and assay immediately or aliquot and store samples at-20℃or -80℃.Avoid repeated freeze-thaw cycles.Note:The samples shoule be centrifugated dequately and no hemolysis or granule was allowed.Materials required but not supplied1.Standard microplate reader(450nm)2.Precision pipettes and Disposable pipette tips.3.37℃incubatorPrecautions1.Do not substitute reagents from one kit to another.Standard,conjugate and microplates are matched for optimal e only the reagents supplied by manufacturer.2.Do not remove microplate from the storage bag until needed.Unused strips should be stored at2-8°C in their pouch with the desiccant provided.3.Mix all reagents before using.Remove all kit reagents from refrigerator and allow them to reach room temperature(20-25°C)Materials suppliedName96determinations48determinations Microelisa stripplate12*8strips12*4stripsStandard0.3ml*6tubes0.3ml*6tubesSample Diluent 6.0ml 3.0mlHRP-Conjugate reagent10.0ml 5.0ml20X Wash solution25ml15mlChromogen Solution A 6.0ml 3.0mlChromogen Solution B 6.0ml 3.0mlStop Solution 6.0ml 3.0mlClosure plate membrane22User manual11Sealed bags11Standard(S0→S5)concentration was followed by:0,1,2,4,8,16ng/ml. Reagent preparation20×wash solution:Dilute with Distilled or deionized water1:20.Assay procedure1.Prepare all re a g e n t s before starting assay procedure.It is recommended that all Standards and Samples be added in duplicate to the Microelisa Stripplate.2.Add standard:Set Standard wells,testing sample wells.Add standard50μl to standard well.3.Add Sample:Add testing sample10μl then add Sample Diluent40μl to testing sample well;Blank well doesn’t add anyting.4.Add100μl of HRP-conjugate reagent to each well,c over with an adhesive strip and incubate for60minutes at37°C.5.Aspirate each well and wash,repeating the process four times for a total of five washes.Wash by filling each well with Wash Solution(400μl)using a squirt bottle, manifold dispenser or plete removal of liquid at each step is essential to good performance.After the last wash,remove any remaining Wash Solution by aspirating or decanting.Invert the plate and blot it against clean paper towels.6.Add chromogen solution A50μl and chromogen solution B50μl to each well. Gently mix and incubate for15minutes at37°C.Protect from light.7.Add50μl Stop Solution to each well.The color in the wells should change from blue to yellow.If the color in the wells is green or the color change does not appear uniform,gently tap the plate to ensure thorough mixing.8.Read the Optical Density(O.D.)at450nm using a microtiter plate reader within15minutes.Calculation of results1.This standard curve is used to determine the amount in an unknown sample.The standard curve is generated by plotting the average O.D.(450nm) obtained for each of the six standard concentrations on the vertical(Y)axisversus the corresponding concentration on the horizontal(X)axis.2.First,calculate the mean O.D.value for each standard and sample.All O.D.values,are subtracted by the mean value of the zero standard before result interpretation.Construct the standard curve using graph paper or statistical software.3.To determine the amount in each sample,first locate the O.D.value on theY-axis and extend a horizontal line to the standard curve.At the point of intersection,draw a vertical line to the X-axis and read the corresponding concentration.4.Any variation in operator,pipetting and washing technique,incubation time ortemperature,and kit age can cause variation in result.Each user should obtain their own standard curve.5.The sensitivity by this assay is0.1ng/ml6.Standard curve Storage：2-8℃.validity：six months.FOR RESEARCH USE ONLY;NOT FOR THERAPEUTIC OR DIAGNOSTIC APPLICATIONS!PLEASE READ THROUGH ENTIRE PROCEDURE BEFORE BEGINNING!。