某理工大学生物工程学院《现代分子生物学》考试试卷(2120)

某理工大学生物工程学院《现代分子生物
学》
课程试卷（含答案）
__________学年第___学期考试类型：（闭卷）考试
考试时间：90 分钟年级专业_____________
学号_____________ 姓名_____________
1、分析题（5分，每题5分）
1. 现要求以某一植物或动物组织cDNA为模板扩增A基因，并构建
该基因的重组表达质粒pET28aA，并在大肠杆菌BL21中进行表达。

[宁波大学2019研]
答案：（1）从组织中提取RNA的步骤如下：
①将组织在液氮中所磨碎，每50～100mg组织加入1ml TRIzol 裂解液溶解样品，充分吹打混匀。

②每1ml TRIzol加入2.0ml氯仿，剧烈震荡15s，室温放置
5min。

③4℃，10000g离心15min，此时RNA主要开始集中在水相中。

④将水相转移至新的离心管中，加入等体积二氯甲烷，室温放置
10min。

⑤4℃，10000g离心10min，此时可在顶部离心管底部观察到
白色沉淀，即为RNA。

⑥用75冷的乙醇冲泡沉淀，4℃，7500g以下，离心5min，弃上清。

⑦超净台中吹干，加入无RNase的水溶解。

（2）检测RNA质量的方法如下：
①凝胶成像：取适量RNA溶液加入色谱法缓冲液后，飞奔琼脂糖凝胶电泳，如果28S和18S条带明亮、清晰，并且28S的亮度在
18S条带的两倍以上，则认为RNA的质量是好的。

②吸光度检测：使用紫外分光光度计检测RNA样品在260nm、280nm处的吸光度，若两者的比值在1.8～2.0时，可认为RNA纯度良好，蛋白质等其他物质的污染可以脂肪酸接受。

解析：
2、判断题（55分，每题5分）
1. 某一内切酶在一环状DNA上有3个切点，用此酶切割环状DNA可得到3个片段。

（）
答案：正确
解析：对于环状DNA而言，如果某一内切酶在其上有三个切点，用此酶切割之后，可以得到三个片段。

2. 限制性内切核酸酶具有极高的专一性，可以识别蛋白质或多肽链上的特定位点，将其切断，形成黏性末端或平端。

（）
答案：错误
解析：限制性内切核酸酶具有极高的专一性，可以识别DNA双链的特定位点，将其切断，形成黏性末端或平端。

3. 真核生物的5S、18S和28S rRNA通常组成一个单位进行转录。

（）
答案：错误
解析：真核生物5S rRNA抗体也是成簇排列的，中间被不转录区域隔开，由RNA聚合酶Ⅲ转录。

16～18S、5.8S和26～28SrRNA基因组成一个转录单位，彼此被间隔区分开，由RNA聚合酶Ⅰ转录。

4. 在原核基因操纵子中都有CRP位点。

（）
答案：错误
解析：色氨酸操纵子无CRP位点。

5. RNA连接酶的底物是RNA，DNA连接酶的底物是DNA。

（）
答案：错误
解析：RNA连接酶可特异性地将DNA或RNA的预腺苷酰化5′端连接到RNA3′端，T4 DNA连接酶作用底物是双链的DNA分子或RNADNA杂交分子。

6. DNA复制时，前导链上DNA沿5′→3′方向合成，在滞后链上则沿3′→5′方向合成。

（）
答案：错误
解析：DNA复制时在前导链上和滞后链上DNA均沿5′→3′方向合成。

7. 脉冲凝胶电泳采用一个很强的电场来分离非常长的DNA分子，其
原理在于迫使DNA分子根据长度的不同而具有不同的速度，并按大小
顺序通过凝胶。

（）
答案：错误
解析：在回波场凝胶电泳中，相对较小的分子在电场转换后可以较快
转变移动方向，然而较大的分子在凝胶中转向困难。

电场在两种方向（有一定夹角，而不是相反的两个方向）变动。

DNA分子带有负电荷，会朝正极移动。

因此小分子向着移动的速度比宽带大分子快。

8. 肿瘤细胞由于生长速度快、分裂次数多，因此对生长因子的需要
量也高。

（）
答案：错误
解析：癌细胞的特征之一就是对生长因子需要量降低，体外培养的癌
细胞对生长因子的需要量显著细胞，是因为自分泌或其棘口科锥棘属
细胞增殖的信号融资途径不依赖于生长因子。

9. 在杂交之前先用凝胶电泳把粗提取物中的RNA或DNA分子进行分离，假定杂交后只有一种或少数几种大小的片段被探针杂交上了，就
能肯定这种杂交是特异性的。

（）
答案：正确
解析：在杂交之前先用凝胶电泳把粗提取物中的RNA或DNA分子进行分离，分离为不同大小的片段。

假定杂交后只有一种或少数几种大
小的片段被探针探针杂交上所了，就确实能肯定这种杂交是特异性的。

10. 紫外线引起DNA损伤的结果是导致胸腺嘧啶二聚体的形成。

（）[扬州大学2019研]
答案：正确
解析：紫外线照射后DNA，发现有几个变化，其中最明显的变化是同一个链上的两个邻接嘧啶核苷酸同一的共价联结，形成嘧啶二聚体。

11. 大肠杆菌参与糖代谢的酶及氨基酸、核苷酸合成系统的酶类，
其合成速度和总量都随培养条件的变化而变化。

（）
答案：正确
解析：
3、名词解释（50分，每题5分）
1. 原位杂交技术（ISH）
答案：原位杂交技术是指运用核酸分子单链之间有互补的碱基序列，
把有放射性或非放射性的外源核酸（即探针）和组织、蛋白质或染色
体上待测DNA或RNA互补配对，结合阴离子成专一的核酸杂交分子，经一定的检测手段把待测核酸在组织、细胞或染色体上的位置显示出
来的一种生物技术。

原位杂交技术通常可分为RNA原位杂交和染色体原位杂交两大类。

解析：空
2. 剪接体（spliceosome）
答案：剪接体是指由snRNP组成，介导转酯络合物反应的巨型复合体，其大小为60S，snRNP是由5种核小RNA（U1、U2、U4、U5和
U6），与几种蛋白质形成的复合物。

这些小核RNA不会翻译出任何
蛋白，但对于调控遗传活动起到非常重要作用。

snRNP中的RNA成分与mRNA的5′端和3′端剪接点及分支点的保守级联，经相互作用
形成一个复合体，使前体mRNA折叠成利于剪切的正确内部结构。

解析：空
3. 蛋白质磷酸化
答案：蛋白质磷酸化是指由由蛋白质激酶催化的介导把ATP或GTP
上γ位的磷酸基转移到蛋白质氨基酸残基上的过程，为可逆过程，是
生物体内存在的一种普遍的调节形式，在细胞信号的传递过程中极其
重要的地位。

蛋白质磷酸化是调节和蛋白质活力和功能的最基本、最
普遍，也是最重要的机制。

解析：空
4. G蛋白
答案：G蛋白又称三聚体GTP结合调节蛋白，是指由α、β、γ三个
亚基组成，能与GDP或GTP结合的外周蛋白。

以二价存在并与GDP 结合者为非活化型，位于细胞膜。

当α亚基与GTP结合并导致βγ二聚体顺式脱落时则变成活化型，可作用突触于膜受体的不同激素，通
过不同的G蛋白介导核酸影响质膜之上某些离子通道或酶的活性，继
而影响细胞内第二信使浓度和后续的生物学效应。

解析：空
5. 蓝白斑筛选[暨南大学2018研]
答案：蓝白斑筛选是指基于β半乳糖苷酶系统的一种重组子筛选方法。

其基本原理是构建的质粒载体包括β半乳糖苷酶基因（lacZ）的启动子、编码α肽区段的区段和五六个克隆位点（MCS），其中MCS位
于编码α肽的区段中，是外源DNA的选择性插入位点。

IPTG诱导lacZ表达，合成的β半乳糖苷酶α肽与宿主细胞编码的缺陷型β半乳糖苷酶互补，产生有活性的β半乳糖苷酶，水解培养基中的XGal，生成蓝色的溴氯吲哚，菌落呈蓝色。

而当外源DNA插入到质粒的多克
隆位点后，导致载体编码β半乳糖苷酶的部分序列失活，带有重组质
粒的细菌形成白色菌落。

解析：空
6. RACE[宁波大学2019研]
答案：RACE的中文名称是cDNA末端快速扩增技术，指是一种基于PCR从低丰度的转录本中快速扩增cDNA的5′和3′末端的有效方法。

RACE技术的数学方法是利用poly（A）的尾巴作为核酸的位点，反
转录合成第一条cDNA，利用反转录酶MMLV的前端转移酶活性，
在反转录达到第一链的5′末端时自动加上3～5个（dC）残基。

退火
后（dC）残基与含有SMART寡核苷酸序列Oligo（dG）通用接头
引物配对后，转换为以SMART字符串为模板继续集中精力延伸而连
上通用接头。

然后用一个含有部分接头序列的通用引物作为上游引物，
用一个基因特异引物2作为下游引物，以SMART第一链cDNA为模板，进行PCR循环，把目的基因5′末端的cDNA片段扩增出来。

解析：空
7. 复制子
答案：复制子是指单独克隆的一个DNA单元，是从一个DNA复制起点开始，最终由这个起点起始的复制叉始点完成的片段。

复制子中含有复制需要的控制元件。

不具在复制的起始位点具有原点，在复制的终止位点具有终点。

它是一个可移动的单位。

一般来说，原核生物DNA只具有一个复制子，真核生物DNA具有多个复制子。

解析：空
8. 扣除杂交（substrate hybridization）
答案：扣除杂交，又称扣除cDNA克隆，指用一般细胞的mRNA与特殊细胞的cDNA杂交，两类细胞共有的cDNA形成双链，而特异的cDNA保持单链状态，回收单链的cDNA进行克隆，用于制备文库或探针，分离特异的基因的技术，它是通过构建扣除文库得以实现的。

扣除杂交法的本质是除去那些普遍共同存在的或是非诱发产生的cDNA序列，从而使欲分离的目的基因的序列得到有效的富集，提高了分离的敏感性。

解析：空
9. 滚环复制（rolling circle replication）
答案：滚环复制是植入单向复制的一种特殊方式，是指DNA的合成
由对正链原点的细胞毒专一性切割开始，所形成的自由5′端下端被从
双链环中置换出来并为长链DNA结合蛋白所覆盖，使其3′OH端在DNA聚合酶的作用下不断延伸。

在这个过程中，单链四肢的延伸与双链DNA的绕轴旋转同步。

中滚环复制是噬菌体之中常见的DNA复制方式。

解析：空
10. 核酸原位杂交
答案：核酸原位杂交是指用标记了核苷酸已知序列的的片段作为探针，通过杂交直接在组织机构切片、细胞涂片、培养细胞爬片、或分裂中
期染色体上面检测一般而言和定位某一特定的靶核苷酸存在的技术。

核酸原位杂交的生物化学基础是核酸的变性、复性和碱基互补配对结合。

核酸原位杂交有DNARNA杂交、DNADNA杂交和RNARNA
杂交等。

解析：空
4、填空题（40分，每题5分）
1. tRNA的氨基酸臂的主要功能是；反密码环的功能是；Tpc环的功
能是。

答案：接受氨基酸|识别密码子|与核糖体大亚基结合
解析：tRNA的二级结构为“四叶草”状，为“四环一臂”结构：①氨基酸接受臂，其多半功能是接受氨基酸；②反密码子环，其主要功能
是识别mRNA上的密码子；③Tpc环，其主要功能是与核糖体的大亚基结合；④二氢尿嘧啶环（D环），与核糖体的结合有关；⑤可变环，它的大小决定着tRNA分子大的种类。

2. 氨酰tRNA合成酶既能识别又能识别。

答案：氨基酸|相应的tRNA
解析：氨酰tRNA合成酶是一类催化氨基酸与tRNA结合的特异性酶，有高度的专一性，既能识别氨基酸，又能识别相应的tRNA。

3. 人的rRNA前体45SrRNA是在中合成的，在中装配成核糖体的亚
单位，完整的核糖体是在中形成的。

答案：核仁|细胞核|细胞质
解析：在细胞核中形成真核细胞的大小亚基，在核仁中DNA转录出
45SrRNA的前体分子，与细胞质运来的蛋白质结合，再进行加工，经酶解成28S，5.8S的rRNA，rRNA与蛋白质结合，经核孔进入细胞壁，在细胞质中形成完整的核糖体。

4. 根据操纵子对能调节它们的小分子的应答反应的性质，可分为操
纵子和操纵子。

答案：可诱导的|可阻遏的
解析：根据操纵子对能调节它们的小分子的应答反应的性质，可分为
可诱导的操纵子（如乳糖操纵子）和可阻遏的操纵子（如色氨酸操纵子）。

5. 不同生物使用不同的信号来指挥基因调控。

原核生物中，和对基
因表达起着举足轻重的影响。

在高等真核生物中，和是基因表达调控
的最主要手段。

答案：营养状况|环境因素|激素水平|发育阶段
解析：不同生物基因调控的信号不同。

原核生物中，营养状况和环境
因素较为重要；在商业学校真核生物中，激素水平和发育阶段较为重要。

6. 大肠杆菌DNA聚合酶Ⅰ经酶切后，得到大小片段，其中大片段具
有酶活性和酶活性，小片段具有酶活性。

答案：5′→3′聚合|3′→5′外切|5′→3′外切
解析：大肠杆菌DNA聚合酶Ⅰ可分为大小两个片段，其中大片段具有5′→3′聚合酶活性和3′→5′外切酶活性，小片段具有5′→3′外切酶活性。

7. 大肠杆菌乳糖操纵子包括三个结构基因：、lacY和lacA，以及、操纵基因和。

答案：lacZ|启动子|阻遏子
解析：大肠杆菌乳糖操纵子包括三个结构中基因：Z（编码β半乳糖苷酶）、Y（编码β半乳糖苷酶透过酶）、A（编码β精氨酸苷乙酰转移酶），以及启动子（P）、操纵基因（O）、阻遏子（I）。

8. DNA分子中GC含量高，分子比较稳定，熔解温度Tm值，poly d （AT）的Tm值较poly d（GC）的。

答案：高|低
解析：
5、简答题（35分，每题5分）
1. 在染色体步移中，用哪些方法获得克隆的末端？
答案：染色体短萼步移是指由生物基因组或基因组文库中的已知
序列出发逐步探胺基酸知其旁邻的未知序列或和已知序列呈线性关系
的目的序列的碱基的技术。

在染色体步移中，可以用来下方法获得布
季夫的末端：
（1）运用载体克隆位点的通用引物，如T3和T7启动子引物。

（2）假如克隆位点两旁没有T3和T7启动子，可用克隆的酶识
别的DNA序列和随机核酸引物去扩增末端。

（3）假如已知两个克隆的重叠二个部分，可直接把重叠部分切下来进行标记，然后用这个探针进行筛选。

解析：空
2. 结合cAMP的形成机制，简述它在大肠杆菌利用乳糖方面的作用。

答案：环腺苷酸cAMP是指在腺苷酸环化酶的作用下由ATP转
变而来的。

cAMP在大肠杆菌利用乳糖方面的作用如下：
（1）cAMP与CRP蛋白结合演化成复合物，该复合物是激活乳
糖操纵子的重要组成部分，大肠杆菌乳糖操纵子的转录必须有cAMPCRP复合物结合在DNA的启动子区域上。

（2）AMPCRP复合物是一个不同于阻遏物的正调控因子，它三
个与阻遏体系形成两个相互独立的调控体系，调节乳糖操纵子的转录。

（3）在大肠杆菌中，cAMP的浓度控制受到葡萄糖代谢的调节。

（4）在含有葡萄糖的培养基中，cAMP的浓度就低，大肠杆菌优先使用葡萄糖。

（5）在缺乏碳源的培养基中，cAMP的浓度就高。

（6）大肠杆菌在只含有甘油或胆红素的培养基中（无大进行糖酵解途径的碳源），cAMP的浓度也会很高，启动大肠杆菌乳糖操纵子的表达。

（7）糖酵解融资途径中位于葡萄糖6磷酸与甘油之间的络合物某个代谢产物是腺苷酸环化酶的抑制剂。

解析：空
3. 限制性核酸内切酶有哪几种类型？哪一种类型的限制酶最适合于基因工程，为什么？请简要说明理由。

答案：（1）按照限制酶的构成、与去除酶活性关系、切断核酸的情况不同，限制性核酸内切酶分为三类：
①Ⅰ类限制性核酸内切酶：由3种不同亚基构成，兼具有修饰酶活性和依赖于ATP的限制性内切酶活性，它能识别和结合特定的DNA序列位点，去随机切断在识别位点位点此外的DNA序列，通常在识别位点周围400～700bp。

这类酶的积极作用需要Mg2＋，S腺苷甲硫氨酸及ATP。

②Ⅱ类限制性核酸内切酶：与Ⅰ类酶相似，是多亚基蛋白质，既有内切酶活性，又有修饰酶活性，切断位点在识别序列外面25～
30bp范围内，酶促反应除Mg2＋外，也需要ATP供给能量。

③Ⅲ类限制性核酸内切酶：只由一条肽链共同组成，仅需Mg2＋，切割DNA特异性最强，且在识别位点范围内切断DNA，是分子生物学应用最广的限制性内切酶。

（2）Ⅱ类限制性核酸内切酶最适合基因工程，因为Ⅱ类限制性核酸内切酶只由一条肽链共同组成，仅需Mg2＋，切割DNA特异性最强，且就在识别位点范围内切断DNA。

Ⅰ类和Ⅲ类限制性核酸内切酶由于切割序列是随机的，与识别序列不统一，中都因此在基因工程当
中没有什么价值。

解析：空
4. 简述蛋白质的生物合成过程。

[暨南大学2018研]
答案：蛋白质生物合成是神经元细胞最为复杂的活动之一。

参与
细胞内蛋白质酵素生物合成的物质除原料氨基酸外，还需要mRNA作为模板、tRNA作为特异的氨基酸“搬运工具”、核糖体用具作为蛋
白质合成的装配场所、有关的酶与蛋白质因子参与反应、ATP或GTP 提供能量。

翻译者过程包括起始、延长和终止三个阶段。

生物合成投
资过程如下：
（1）起始：该过程是指mRNA、起始氨基酰tRNA分别与多肽
结合而形成翻译起始复合物。

（2）延长：翻译起始复合物形成后，核糖体从mRNA的5′端向3′端移动，依据密码子顺序，从N端开始向C端合成多肽链。

这是一个在上核糖体上重复进行的进位、成肽和转位的循环过程，每完成1次，肽链上即可增加1个氨基酸残基。

该过程也被称为核糖体循环。

这一过程除了需要mRNA、tRNA和核糖体外，还需要数种延长因子以及GTP等参与。

（3）终止：终止密码子不被任何氨基酰tRNA识别，释放因子RF能识别终止位点而进入A位，这一鉴别过程需要水解GTP。

RF的结合可触发核糖体构象改变，将肽基转移酶活性转变为酯酶活性，水
解肽链与结合在P位的tRNA之间的酯键，释出合成的肽，促使mRNA、tRNA及RF从核糖体脱离。

mRNA模板和各种蛋白质因子、其他组分都可被重新利用。

解析：空
5. 怎样将一个平末端DNA片段插入到EcoRⅠ限制位点中去？
答案：将一个平末端DNA片段插入到EcoRⅠ限制位点中，操作步骤如下：
（1）将平末端片段利用甲基化酶处理，保护其中的EcoRⅠ识别
序列（如果平末端序列中不是含有EcoRⅠ位点，则此步骤省略）；
（2）化学合成一些长为10bp含有EcoRⅠ识别位点的短的
DNA片段，然后与带克隆片段两端连接起来；
（3）利用EcoRⅠ切割该片段，产生带有EcoRⅠ黏性末端的片段；
（4）通过DNA连接酶的作用，将处理后的片段插入到EcoRⅠ
限制位点中。

解析：空
6. 简述蛋白质转运的机制。

答案：蛋白质合成后定向地被输送到其糖类履行职责功能的场所
的过程称为靶向运输。

大多数情况下，被输送的蛋白质分子需穿过底
物膜结构，才能到达特定的部位。

核酸的运输机制翻译包括一运转同
步机制和翻译后运转机制。

（1）翻译：运转同步机制：蛋白质合成之初，一旦信号肽序列的N后端暴露在核糖体外，该序列（包括核糖体）就飞速与信号识别颗
粒（SRP）相结合，诱发SRP与GTP相结合形成SRP复合物，暂停新生多肽的进一步延伸（此时新生肽一般长约70个残基）。

受到位于ER外膜上的SRP受体及核糖体受体（DP）的牵引，这个复合物（GTPSRP核糖体mRNA新生肽）立即向ER外膜靠拢，GTP水解
释放SRP并进入新一轮气化，肽链重新开始延伸，并转运通过肽链中转复合物进入ER内腔，信号肽被切除（某些蛋白质的信号肽被保留）。

（2）线粒体蛋白质跨膜运转：分子伴侣HSP70或核糖体输入激活因子（MSF）等先与待运转多肽结合使多肽链解折叠，然后它们与
线粒体外膜上的外膜转运酶（TOM）受体复合物结合，通过TOM和内膜转运酶（TIM）细胞核组成的膜通道进入线粒体的内腔，蛋白酶
水解前导肽，最后重新折叠为成熟的线粒体蛋白质。

（3）动物细胞蛋白质跨膜运转：与线粒体蛋白质胺基运转大分子相似。

（4）核定位蛋白的运转：蛋白质的核定位是通过多个蛋白的共同作用来同时实现的。

Importin（α，β亚基）的作用有点像SRP受体。

核定位序列（NLS）蛋白importin复合物停留在核孔上，并在
RanGTPase的作用下通过生物膜。

蛋白质中的核聚变定位序列一般不被切除。

解析：空
7. 操纵子学说是原核生物基因结构及其表达调控的学说，请以乳糖操纵子为例，论述其如何调控基因表达。

[扬州大学2019研]
答案：大肠杆菌乳糖操纵子不含Z、Y、A三个结构基因，分别编码半乳糖苷酶、半乳糖苷透过酶和半乳糖苷乙酰转移酶。

此外还有一个操纵序列O，一个启动子P和一个调节基因I。

（1）阻遏蛋白的负性调节机制如下：
①没有乳糖存在时，I基因编码的阻遏蛋白结合于操纵子序列O 处，乳糖操纵子一直处于阻遏状态，无法合成分解乳糖的三种酶。

②有乳糖存在时，乳糖作为诱导物诱导阻遏蛋白变构，不能结合于控制者序列，乳糖操纵子被诱导开放合成分解乳糖的三种酶。

所以，乳糖操纵子的这种调控机制为可诱导的负调控。

（2）CAP的正性调节机制如下表所示：
①在启动子上游有CAP结合位点，环境大肠杆菌从以葡萄糖为碳源的当转为以乳糖为碳源的环境时，cAMP浓度升高，与CAP结合，使CAP发生变构。

②CAP结合于乳糖操纵子启动序列附近的CAP结合位点，激活RNA聚合酶活性，促进结构基因转录，调节蛋白结合于操纵子后促进基因的转录，对乳糖操纵子实行正调控，加速合成分解分解乳糖的三种酵素。

乳糖操纵子中的I基因编码的阻遏蛋白的负调控与CAP的正调控两种机制，互相协调、互相制约。

解析：空
6、论述题（20分，每题5分）
1. 什么是DNA多态性？DNA亲子鉴定是通过分析个体DNA中的“短
串联重复序列”即STR，来确定两个体间是否存在亲子关系。

说明STR
鉴定的优点和实验方法。

答案：（1）DNA多态性的含义
DNA多态性是指个体间基因的核苷酸序列存在的碱基组成或长度上的差异性，可以分为两类，即DNA位点多态性和长度多态性。

（2）STR鉴定的优点
①STR基因座的个体识别概率和非父排除率高：在人类基因组中
分布极为广泛，且片段小，与旧式的蛋白质遗传标记相比，等位基因多，杂合度高，因此，不同动物性基因型不同的可能性更大。

②检材量少，灵敏度和成功率高，且适用于各种来源的生物性检材：少量检材即可满足DNA的提取，将提取的DNA通过PCR扩增，灵敏度比传统的DNA指纹高得多。

③由于PCR扩增片长度较短，所以即使仅含降解的DNA陈旧性斑痕，其扩增效率仍很高，因而可适用于各种来源的检材。

因此，STR分型被认为是第二代法医DNA指纹技术的核心，是目前国内外
法医学个体识别和国际上亲子鉴定的主要包括发展方向。

（3）STR鉴定的实验方法
PCR扩增后进行聚丙烯酰胺凝胶电泳分离，硝酸银染色，到PCR 扩增后通过基因分析仪进行分析，扩增产物通过分析仪进行毛细管电泳，经收集软件收集电泳信息，然后通过基因扫描软件分析扩增片段
的大小，继而通过基因型分析模板检测各位点的基因型，读取结果。

解析：空
2. 负调控在生命活动中有重要的意义，除经典的操纵子模型以外，
近年来还发现有泛素（ubiquitin）介导的蛋白质降解机制和microRNA （miRNA）介导的转录和翻译抑制机制，请从后两者中任选一种举例说
明其作用机制与生物学意义。

答案：microRNA（miRNA）的作用协调机制与生物学意义。

（1）microRNA也可以写为miRNA，是一种21～25nt长的
单链小分子RNA。

它广泛存在于真核生物中，是一组不编码蛋白质的短序列RNA，其本身不具有可读点阵（ORF）。

成熟的miRNA5′端
有一个磷酸基团，3′端为羟基。

编码miRNA的基因最初产生一个长
的miRNA前体（primiRNA）分子，这种这种初期分子还需要被剪
切成70～90个碱基大小、具发夹结构单链RNA前体（premiRNA）并经过Dicer酶加工后生成。

成熟的miRNA5′端的磷酸基团和3′端
羟基则基本功能是它与相同长度的功能RNA降解片段的区分标志。

（2）miRNA的作用机制：miRNA基因是一类高度保守高度的
基因家族，按其作用模式不同可分为三种：①以线虫lin4为代表，作
用时与靶标基因不完全互补结合，进而抑制翻译而不影响mRNA的稳定性（不改变mRNA丰度），这种miRNA是目前发现最多的食性；
②以拟南芥miR171为代表，作用时与靶位基因完全互补结合，作用。