373例乙型肝炎患者HBV-DNA定量与乙型肝炎病毒核心抗原及肝脏酶学指标的相关性分析

373例乙型肝炎患者HBV-DNA定量与乙型肝炎病毒核心抗原及肝脏酶学指标的相关性分析目的探讨HBV-DNA定量和乙型肝炎病毒核心抗原在诊断乙型肝炎和评价病情中的意义。

方法收集373例乙型肝炎患者的HBV-DNA定量、HBeAg 与丙氨酸氨基转移酶（ALT）、天冬氨酸氨基转移酶（AST）、谷氨酰转移酶（GGT）等实验室诊断指标，进行相关性分析。

结果（1）HBV-DNA定量与HBeAg具有相关性（P 0.05）。

结论（1）HBeAg一定程度上反映了病毒在体内的复制情况，但HBV-DNA定量是评价体内病毒复制更直接的指标。

（2）HBV-DNA定量结果与肝功能受损情况相关，高病毒载量是肝功能受损的危险因素。

[Abstract] Objective To explore the significance of quantitative HBV-DNA and HBeAg in the diagnosis of hepatitis B and in the evaluation of disease. Methods Three hundred and seventy-three cases of hepatitis B patients with HBV-DNA quantitative, HBeAg, ALT, AST and GGT laboratory diagnostic indicators were collected, and the correlation analysis was conducted. Results (1)There was correlation between HBV-DNA quantitative and HBeAg (P 0.05). Conclusion (1)HBeAg reflects the replication of the virus in the body to a certain extent. However, HBV-DNA quantitative is a more direct indicator to evaluate the viral replication in vivo. (2)HBV-DNA quantitative relates to the liver function impairment, and high viral load is a risk factor for liver function impairment.[Key words] Hepatitis B; Laboratory diagnosis; HBV-DNA; HBeAg; ALT; AST; GGT乙型病毒性肝炎仍严重威胁着人类健康。

据世界卫生组织统计，全球约有3.5亿慢性HBV感染者，每年直接或间接导致约100万人死亡[1]。

最新流行病学调查数据显示，我国1～59岁一般人群HBsAg携带率为7.18%[2]。

据此估计，我国现有慢性HBV感染者约9 300万人，其中慢性乙型肝炎患者约2 000万例[3]。

酶联免疫吸附法检测乙型肝炎病毒（HBV）的相关血清学标志物，是临床诊断乙型肝炎的重要指标，不同的血清学标志物也具有不同的临床意义。

近年来研发的荧光定量聚合酶链反应检测HBV-DNA技术日益成熟，并逐渐推广，目前也已成为临床诊断乙型肝炎的重要标准[4]。

此外，在临床诊断时，肝功能酶学指标也常同时检测，以反映肝脏的损伤程度。

笔者收集了373例乙型肝炎患者的实验室诊断数据，对HBV-DNA定量、HBeAg与丙氨酸氨基转移酶（ALT）、天冬氨酸氨基转移酶（AST）、谷氨酰转移酶（GGT）等指标进行了相关性分析，探讨这些指标在疾病诊断及判断患者病情中的作用。

1 资料与方法1.1 研究对象373例乙型肝炎患者数据选自本院门诊及住院的乙型肝炎患者，其中，男性282例，女性91例，年龄13～77岁，平均39.5岁。

1.2 方法1.2.1 样本入选及剔除入选的样本均同时检测了HBV-DNA、HBeAg、ALT、AST、GGT等项目；并排除了肝癌、血液病等其他疾病对肝功能的影响。

1.2.2 HBV-DNA定量检测采用ABI公司7500荧光定量PCR仪检测，试剂由深圳凯杰生物有限公司提供，结果以IU/mL报告，最低检出限为5×102 IU/mL，线性范围为1×103～5×107 IU/mL。

1.2.3 乙型肝炎血清学标志物检测采用美国雅培I-2000全自动免疫发光分析仪检测，试剂由美国雅培公司提供。

1.2.4 肝功能酶学检测丙氨酸氨基转移酶（ALT）、天门冬氨酸氨基转移酶（AST）、谷氨酰转移酶（GGT）指标采用日本日立7600生化分析仪检测，检测试剂由日本积水化学工业株式会社提供。

ALT正常值范围0～64 U/L，AST正常值范围0～64 U/L，GGT正常值范围0～47 U/mL。

1.3 统计学分析采用SPSS 16.0统计学软件，进行χ2检验分析。

以P 5×105 copies/mL）87例。

肝功能酶学指标中，ALT阳性106例，阳性率为28.4%；AST阳性79例，阳性率为21.2%；GGT阳性116例，阳性率为31.1%。

2.2 HBV-DNA与HBeAg阳性率相关性分析根据患者HBV-DNA定量结果分为高载量组（> 5×105 copies/mL）、低载量组（5×102～5×105 copies/mL）及阴性组，3组的HBeAg阳性率分别为79.3%、58.9%、33.1%，χ2检验显示，3组间差异有统计学意义（P 0.05）。

3 讨论长期以来，乙型肝炎病毒血清标志物是诊断乙型肝炎的重要诊断指标，包含HBsAg、HBsAb、HBeAg、HBeAb和HBcAg五项检测指标，一定程度上反映了HBV在体内的复制情况和乙型肝炎患者的免疫状态。

目前认为，HBeAg指标反映了乙型肝炎病毒的活动性复制以及具有传染性。

然而，由于病毒变异导致等原因，传统的血清标志物检测结果不能直接反映HBV在体内的复制情况，也不能作为判断患者传染性的直接证据。

近年来，基于实时荧光定量PCR技术的外周血HBV-DNA载量检测逐渐成熟和推广，其检测结果被认为是判断病毒复制的直接标志。

本研究收集了373例临床诊断为乙型肝炎的患者的HBV-DNA和HBeAg检测结果，统计学分析显示，HBV-DNA与HBeAg检测结果存在相关性。

HBV-DNA 阳性患者的HBeAg阳性率显著高于HBV-DNA阴性患者；且高病毒载量患者的HBeAg阳性率显著高于低病毒载量患者，说明HBeAg指标在一定程度上反映了病毒在体内的复制状态。

但尚有部分病例两者不符合，因此临床上不宜将HBeAg 作为病毒在体内复制的指标，而应直接进行HBV-DNA定量检测。

18例高病毒载量和53例低病毒载量患者HBeAg检测为阴性，不能排除因两种检测方法敏感性不同造成[5]，也可能因病毒变异造成。

当HBV前核心区发生突变时，HBeAg不表达，但HBV-DNA复制仍存在[6-8]，此时可造成HBV-DNA 检测阳性，而HBeAg阴性。

本研究中的52例HBeAg阳性患者HBV-DNA检测阴性，可能是由于HBeAg在外周血中的半衰期较HBV-DNA长，也可能由于抗病毒治疗药物影响检测结果，某些突变导致检测的局限性也可能是其中的原因，但具体机制尚不明确，需进一步研究。

本研究还对乙型肝炎患者的HBV-DNA、HBeAg与ALT、AST、GGT等酶学指标的相关性进行了分析，结果显示：HBV-DNA定量与酶学指标的相关性高，高病毒载量患者的ALT、AST阳性率显著高于低病毒载量组与阴性组，说明病毒复制的活跃程度与患者肝脏受损程度有相关性；HBeAg则与酶学指标无明显的相关性，说明HBeAg不能直接反映患者肝脏受损情况。

综上所述，本研究通过分析373例乙型肝炎患者的实验室诊断指标，证实了HBeAg一定程度上反映了病毒在体内的复制情况，但尚有部分患者两者不符合，在评价患者体内乙型肝炎病毒复制情况时，HBV-DNA是必要的指标。

此外，HBV-DNA定量在评价肝脏功能受损程度方面优于HBeAg，对于高病毒载量（> 5×105 copies/mL）患者，应加强患者体内病毒复制监测[9]。

[参考文献][1] Ganem D，Prince AM. Hepatitis B virus infection--natural history and clinical consequences[J]. N Engl J Med，2004，350（11）：1118-1129.[2] Liang X，Bi S，Yang W，et al. Epidemiological serosurvey of hepatitis B in China--declining HBV prevalence due to hepatitis B vaccination[J]. Vaccine，2009，27（47）：6550-6557.[3] Lu FM，Zhuang H. Management of hepatitis B in China[J]. Chin Med J （Engl），2009，122（1）：3-4.[4] Mommeja-Marin H，Mondou E，Blum MR，et al. Serum HBV DNA as a marker of efficacy during therapy for chronic HBV infection：analysis and review of the literature[J]. Hepatology，2003，37（6）：1309-1319.[5] Stramer SL，Krysztof DE，Brodsky JP，et al. Sensitivity comparison of two Food and Drug Administration-licensed，triplex nucleic acid test automated assays for hepatitis B virus DNA detection and associated projections of United States yield[J]. Transfusion，2011，51（9）：2012-2022.[6] Cho EY，Choi CS，Cho JH，et al. Association between Hepatitis B Virus X Gene Mutations and Clinical Status in Patients with Chronic Hepatitis B Infection[J]. Gut Liver，2011，5（1）：70-76.[7] Chu CM，Yeh CT，Lee CS，et al. Precore stop mutant in HBeAg-positive patients with chronic hepatitis B：clinical characteristics and correlation with the course of HBeAg-to-anti-HBe seroconversion[J]. J Clin Microbiol，2002，40（1）：16-21.[8] Shinkai N，Tanaka Y，Ito K，et al. Influence of hepatitis B virus X and core promoter mutations on hepatocellular carcinoma among patients infected with subgenotype C2[J]. J Clin Microbiol，2007，45（10）：3191-3197.[9] Witjes CD，IJzermans JN，Vander Eijk AA，et al. Quantitative HBV DNA and AST are strong predictors for survival after HCC detection in chronic HBV patients[J]. Neth J Med，2011，69（11）：508-513.。