B细胞杂交实验报告
细胞生物学实验报告[1]
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细胞生物学实验报告细胞生物学实验报告细胞生物学实验报告细胞生物学实验报告动物细胞融合【实验目的】⒈了解动物细胞融合的常用方法。
⒉学习化学融合的基本操作过程。
⒊观察动物细胞融合过程中细胞的行为和变化。
【实验原理】细胞融合是指在自发或者诱导条件下，两个或两个以上细胞合并为双核或者多核细胞的过程。
目前人们已经发现有很多方法可以诱导细胞融合，包括病毒诱导融合、化学诱导融合和电激诱导融合。
⒈病毒诱导融合仙台病毒、牛痘病毒、新城鸡瘟病毒和疱疹病毒等可以介导细胞的融合。
这类病毒的被膜中含有融合蛋白，可介导病毒和宿主细胞融合，同时也可介导细胞与细胞的融合。
用紫外线灭活后，这些病毒即可诱导细胞发生融合。
⒉化学诱导融合很多化学试剂能够诱导细胞融合，如聚乙二醇(PEG)、二甲基亚砜、山梨醇、甘油、溶血性卵磷脂、磷脂酰丝氨酸等。
这些物质能够改变细胞膜脂质分子的排列，在去除这些物质之后，细胞膜趋向于恢复原有的有序结构。
在恢复过程中相接触的细胞由于接口处脂质双分子层的相互亲和与表面张力，细胞膜融合，胞质流通，发生融合。
化学诱导方法，操作方便，诱导融合的概率比较高，效果稳定，适用于动、植物细胞，但对细胞具有一定的毒性。
PEG是被广泛使用的化学融合剂。
⒊电激诱导融合包括电诱导、激光诱导等。
其中，电诱导是先使细胞在电场中极化成为偶极子，沿电力线排布成串，再利用高强度、短时程的电脉冲击破细胞膜，细胞膜的脂质分子发生重排，由于表面张力的作用，两细胞发生融合。
电诱导方法具有融合过程易控制、融合概率高、无毒性、作用机制明确、可重复性高等优点。
【实验用品】⒈材料鸡血红细胞。
⒉试剂50%PEG、Hank’s溶液(pH7.4)、Alsever’s细胞保存液、0.85%氯化钠溶液。
⒊器材正置显微镜、离心机、离心管、载玻片、盖玻片、滴管、注射器等。
【实验步骤】⒈鸡血红细胞的制备和保存用无菌注射器先吸入Alsevers溶液1ml，再从鸡翼下静脉取血0.5~1ml，取出后放入刻度离心管中，再加入2~3mlAlsevers溶液，使总量为4~5ml，混匀并封口，置于4℃冰箱内。
细胞融合实验报告
一．实验目的1.了解并掌握细胞融合的方法2.了解细胞融合技术及其在生命科学中所起的作用3.掌握化学融合法，了解电融合法及CRY-3细胞融合仪的使用二．实验原理两个或两个以上的细胞合并成一个双核或多核细胞的现象称为细胞融合，也称细胞杂交，在自然情况下的受精过程即属这种现象。
诱导细胞融合的主要方法有：病毒诱导融合，化学融合剂诱导融合和电融合。
1. 病毒诱导融合：有许多种类的病毒能介导细胞融合，最常用的是灭活的仙台病毒（HVJ），为RNA病毒。
病毒诱导细胞融合的过程有：首先是细胞表面吸附许多病毒粒子，接着细胞发生凝集，几分钟至几十分钟后，病毒粒子从细胞表面消失，而就在这个部位邻接的细胞的细胞膜融合，胞浆相互交流，最后形成融合细胞。
2. 化学融合剂诱导融合：化学融合剂主要有高级脂肪酸衍生物、脂质体、钙离子、水溶性高分子化合物、水溶性蛋白质和多肽，其中最常用的是聚已二醇（PEG）。
PEG用于细胞融合至少有两方面的作用：①可促使细胞凝结；②破坏互相接触处的细胞膜的磷脂双分子层，从而使相互接触的细胞膜之间发生融合，进而细胞质沟通，形成一个打的双核或多核融合细胞。
3. 电融合：是指细胞在电场中极化成偶极子，并沿着电力线排列成串，然后用高强度、短时程的电脉冲击穿细胞膜而导致细胞融合。
主要过程包括：1.制备原生质体：微生物及植物细胞有坚硬的细胞壁，需要用酶将其降解，而动物细胞无需要去壁处理。
2.诱导细胞融合：两种亲本细胞的悬浮液调到一定密度，滴入高浓度的聚乙二醇（PEG）诱导融合，或用物理方法如电刺激促进融合。
3.筛选杂合细胞：在特定的筛选培养基上，让杂合细胞有选择地生长，除去其他未融合的细胞。
细胞融合技术在基因定位、基因表达产物、肿瘤诊断核治疗、生物新品种培育及单克隆抗体技术等领域有着非常广泛的应用前景。
单克隆抗体技术就是通过细胞融合技术发展起来的，在生命科学研究核应用方面产生了重大影响。
三．实验结果与分析讨论融合细胞的观察实验中发现大部分的融合都是3个细胞的融合，两个相互融合的很少基本没有找到。
杂交中断实验报告
一、实验目的1. 掌握杂交中断实验的基本原理和方法。
2. 了解中断杂交技术在基因定位中的应用。
3. 通过实验，加深对基因连锁和交换规律的理解。
二、实验原理1. 中断杂交实验是利用物理手段使Hfr（高频率重组）与F-（非重组）细胞杂交过程中，Hfr细胞染色体转移任意中断，从而得到不同基因组合的重组体。
2. 通过分析重组体中基因出现的先后顺序，可以推断出基因在染色体上的相对位置，进而进行基因定位。
三、实验材料与器具1. 菌株：Hfr：thr-leu-azi-Ston-Slacgal-strs，F-：thr-leu-aziR-tonR-lacgal-strR2. 培养基：含有链霉素的培养基3. 实验器具：培养皿、食物搅拌器、移液器、显微镜等四、实验步骤1. 将Hfr和F-菌株分别培养至对数生长期。
2. 将两种菌株混合培养，每隔一定时间取样。
3. 将菌液放在食物搅拌器内搅拌，以中断接合。
4. 将中断接合的细菌接种到含有链霉素的培养基上。
5. 观察并记录形成重组体的种类及数量。
五、实验结果与分析1. 重组体种类：thr-leu-aziR-tonR-lacgal-strs2. 重组体数量：8个3. 重组体出现时间：thr（8分钟）、leu（9分钟）、aziS（10分钟）、ton（12分钟）、lac（14分钟）、gal（16分钟）、str（18分钟）根据实验结果，可以推断出基因在染色体上的相对位置如下：thr-leu-aziS-ton-lac-gal-str六、实验讨论1. 中断杂交实验中，Hfr细胞染色体转移的方向性及随机性是实验成功的关键。
2. 实验过程中，食物搅拌器的使用对于中断接合至关重要。
3. 通过观察不同重组体的出现时间，可以推断出基因在染色体上的相对位置。
七、结论本次实验成功进行了杂交中断实验，并通过分析实验结果，确定了基因在染色体上的相对位置。
实验结果符合基因连锁和交换规律，验证了中断杂交技术在基因定位中的应用。
细胞融合实验报告
聚乙二醇介导的细胞融合2012年2月19星期一陈倩倩（118627140313）同作者：郑梦璐谢雨后赵松1、文摘细胞能不受种属的局限可实现种间生物体细胞的融合,使远缘杂交成为可能,因而是改造细胞遗传物质的有力手段。
它的意义在于从此打破了仅仅依赖有性杂交重组基因创造新种的界限,扩大了遗传物质的重组范围。
但融合后获得的杂种细胞具有染色体异倍性,致使细胞株的遗传性不稳定、植株不育性、畸形、生育迟缓等不符合育种要求的性状出现,直接利用杂种细胞作育种材料目前还有许多障碍。
细胞融合技术避免了分离、提纯、剪切、拼接等基因操作,在技术和仪器设备上的要求不像基因工程那样复杂,投资少,有利于广泛开展研究和推广,有着重大的实践意义,正得到科学界的日益重视。
自从20世纪70年代Kao和Michayluk用聚乙二醇( PEG, polyethyleneglycol) 诱导大麦、大豆等植物原生质体融合后PEG 法诱导细胞融合以其容易制备、活性稳定、不需要特别的仪器设备、操作简便等优点, 被普遍地应用于生物、遗传、医药等研究领域. 高体积分数、高相对分子质量的PEG会对细胞产生毒性,是限制其被广泛应用的瓶颈, 此外,由于该方法涉及的影响因素较多, 进一步加大了获得理想细胞融合率的难度.本实验主要研究PEG的浓度和细胞浓度对细胞融合率的影响。
2、背景介绍细胞融合现象最初是在动物细胞中发现的。
1958年日本学者阅田善雄用紫外光灭活的仙台病毒在体外诱导艾氏腹水红纲胞相互融合。
1965年他和Harris等在此基础上各自分别采用灭活的仙台病毒,诱导产主了第一个种间融合并培养成活。
一年后Yerganzan又进一步使用仙台病毒获得了能够增殖的杂种细胞。
后来Littlefield 用缺陷型细胞HGPRT-XTK-细胞杂交,用HAT 选择培养基选出杂种细胞,开创了细胞工程的新纪元,继而推动了整个生物工程的发展。
1975年英国科学家Milestein 和Kohler在体细胞杂交基础上创立了B淋巴细胞杂交瘤技术,他们将在体外不能长期生存的经绵羊红细胞免疫过的小鼠脾细胞（B淋巴细胞）与在体外能迅速增殖的小鼠骨髓溜细胞在聚乙二醇（PEG）或汕台病毒的作用下融合而产生杂交瘤细胞,所得杂交瘤细咆承袭了两种亲代细胞的遗传特性,既保存了瘤细胞在体外迅速增殖传代的能力,又继承了免疫细胞合成和分泌的能力,即能分泌抗绵羊红细胞的抗体。
生物正交反交实验报告(3篇)
第1篇一、实验目的1. 通过正交和反交实验，探究生物性状的遗传方式。
2. 比较和判断生物性状是细胞核遗传还是细胞质遗传，以及常染色体遗传还是伴性遗传。
3. 掌握正交和反交实验的操作方法和结果分析。
二、实验材料1. 实验材料：高茎豌豆（D）和矮茎豌豆（d）、红眼果蝇（XbXb）和白眼果蝇（XBY）、紫茉莉等。
2. 实验工具：显微镜、解剖镜、剪刀、镊子、酒精灯、载玻片、盖玻片、显微镜镜头等。
三、实验方法1. 高茎豌豆与矮茎豌豆杂交实验：- 正交：将高茎豌豆（D）作为父本，矮茎豌豆（d）作为母本进行杂交。
- 反交：将矮茎豌豆（d）作为父本，高茎豌豆（D）作为母本进行杂交。
- 观察并记录F1代和F2代的表现型。
2. 红眼果蝇与白眼果蝇杂交实验：- 正交：将红眼果蝇（XbXb）作为父本，白眼果蝇（XBY）作为母本进行杂交。
- 反交：将白眼果蝇（XBY）作为父本，红眼果蝇（XbXb）作为母本进行杂交。
- 观察并记录F1代和F2代的表现型。
3. 紫茉莉杂交实验：- 正交：将紫茉莉（A）作为父本，紫茉莉（a）作为母本进行杂交。
- 反交：将紫茉莉（a）作为父本，紫茉莉（A）作为母本进行杂交。
- 观察并记录F1代和F2代的表现型。
四、实验结果与分析1. 高茎豌豆与矮茎豌豆杂交实验：- 正交：F1代均为高茎，F2代出现3高茎：1矮茎的比例。
- 反交：F1代均为矮茎，F2代出现3矮茎：1高茎的比例。
- 结论：高茎豌豆与矮茎豌豆的性状遗传属于细胞核遗传，由常染色体上的等位基因控制。
2. 红眼果蝇与白眼果蝇杂交实验：- 正交：F1代均为红眼，F2代出现1红眼：1白眼的比例。
- 反交：F1代均为白眼，F2代出现1红眼：1白眼的比例。
- 结论：红眼果蝇与白眼果蝇的性状遗传属于细胞核遗传，由X染色体上的等位基因控制。
3. 紫茉莉杂交实验：- 正交：F1代均为紫茉莉（A），F2代出现3紫茉莉：1白花。
- 反交：F1代均为白花，F2代出现3紫茉莉：1白花。
实验3 B细胞杂交
•一个脾脏可获约细胞
操作步骤
实验步骤：细胞的融合
1、取 PEG（polyethylene glycol，聚乙二醇） 溶液1.0ml 缓慢加入混合细胞中,边加边搅拌； 2、静止1分钟； 3、加HAT培养基4ml； 4、取融合细胞悬液1ml,滴加在96孔培养板中， 每孔1滴（约50μl）； 5、显微镜下观察融合细胞的状态
动物免疫
一、可溶性抗原
1wk 抗原50μg/只，溶于300μl 生理盐水中，加入等量福氏完全 佐剂（CFA）充分乳化，分颈部皮下多点及腹腔注射； 3wk 5wk 加强 抗原的剂量及注射的部位同上，仅将全佐改为半佐（IFA）； 抗原50μg/只，溶于300μl 生理盐水中，腹腔注射； 融合前3~5天，抗原20~30μg /只，溶于50μl 生理盐水中， 小鼠尾静脉注射以加强免疫
实验结束后，将实验小鼠放入垃
圾袋，使用过的剪刀、镊子、试
管、吸管及培养板等冲洗干净，
放回原处，谢谢合作！
思考题
细胞融合后有几种状态的细胞存在？ HAT培养基选择培养的原理与目的 是什么？
Choice of animal
动物免疫
BALB/C origin, 6-8wk, female mouse
实验三
B淋巴细胞杂交
实验目的
熟悉细胞杂交及单抗制备的基本原理； 掌握细胞融合的基本操作
实验原理
杂交的目的——制备单克隆抗体 杂交瘤技术的基本原理
具有分泌功能的B细胞难以在体外长期存活。利用细 胞融合技术，将免疫后的B细胞与在体外能长期存活的 骨髓瘤细胞进行融合，经过选择培养获取杂交细胞， 这种细胞称为杂交瘤细胞（Hybridoma） 该细胞的特点： 1、具有免疫B淋巴细胞分泌特异性mAb的能力； 2、具有骨髓瘤细胞无限增殖的能力 故应用杂交瘤细胞生产单克隆抗体
细胞融合实验报告
细胞融合实验报告实验目的用化学方法诱导牛蛙红细胞融合并观察实验原理1.相关概念细胞融合：两个或多个细胞自然或经人工诱导而合并成单个细胞的过程，涉及质膜融合，核膜融合、细胞器以及各种胞质成分的混合。
人工诱导细胞融合一般另称作“细胞杂交”。
依据融合的细胞基因型分类：同种融合（基因型相同的细胞进行融合）、异种融合（来自不同基因型的细胞进行融合）根据自发或诱导处理分类：自发细胞融合（在未施加任何诱导条件的情况下所发生的细胞融合现象）、诱发融合（诱导处理才能融合）2.体外细胞融合方法生物方法（病毒，仙台病毒法）化学方法（聚乙二醇PEG）物理方法（电场诱导融合法，电转仪）3.聚乙二醇（PEG）法优点：易得，用法简单，融合效果稳定聚乙二醇（PEG）结构为：HOH2C(CH2OCH2)n CH2OH，分子量大于200小于6000者均可用作细胞融合剂。
通常用分子量低于1000的PEG作融合剂最好，50％PEG溶液能产生最多杂交细胞PEG经高压灭菌后，与温热的Engle氏液混合PEG浓度以W/W计；如将10g PEG与10mlEagLe氏液混合（假定1ml Eagle氏液为1g 重)，即成50％PEG溶液PEG溶液在pH=8.0时细胞融合率最高4.PEG诱导细胞融合原理PEG具有强烈的吸水性以及凝聚和沉淀蛋白质的作用细胞混合液中加入PEG，细胞膜脂分子排列发生改变，细胞发生凝集；在稀释和除去PEG时，质膜恢复原有的有序结构，在恢复过程中即可诱导相接触的细胞发生融合5.红细胞计数方法血细胞计数板规格0.10mm1/400mm2红细胞计数：计数小方格（红色R区域）细胞计数样液细胞浓度=小方格平均细胞数/0.004mm36.融合率计算融合率=发生融合的细胞核数/所有细胞核数×100%高倍镜下随机计数200个细胞（包括融合的与未融合的细胞），以融合细胞（含两个或两个以上的细胞核的细胞）的细胞核数除以总细胞核数（包括融合与未融合的细胞核）即得出融合率。
细胞融合实验报告
实验报告实验名称：牛蛙血细胞的体外融合时间：20220418实验目的：1、掌握细胞融合的概念、类型和体外诱导细胞融合的方法。
2、掌握PEG诱导细胞融合的原理、影响因素和试剂作用，并掌握PEG诱导细胞融合的操作和注意事项。
3、掌握细胞计数板的使用和细胞计数的方法。
4、了解单克隆抗体制备技术。
实验原理：1、细胞融合：1）概念：细胞融合又称为细胞杂交，是通过培养和诱导，两个或多个细胞合并成一个双核或多核细胞的过程，或者用人工方法使两个或两个以上的体细胞融合成异核体细胞，随后，异核体同步进入有丝分裂，核膜崩溃，来自两个亲本细胞的基因组合在一起形成只含有一个细胞核的杂种细胞，此杂交细胞具有很强的生命力，增值网盛，并且细胞融合是形成杂交细胞的前提。
2）类型：分为自发融合和诱发融合。
自发融合是指同种细胞在培养时2个靠在一起的细胞自发合并；诱发融合是指异种间的细胞必须经过诱导剂的处理才能融合。
3）方法：a.物理法：电、激光触合b.生物法：病毒诱导融合，如仙台病毒c.化学法：PEG诱导融合4）应用：制备单克隆抗体、疫苗生产、培育动植物新品种、获得优良的微生物菌种、膜蛋白研究等。
2、PEG（聚二乙醇）：(1)PEG是乙二醇的多聚化合物，具有强烈的吸水性，能使两个细胞接触点的距离拉近；能够凝聚和沉淀蛋白质，引起磷脂的酰键及极性基团发生结构重排，因此膜结构改变，引起细胞融合。
但是PEG长时间作用对细胞有毒性，因此作用一段时间后需要稀释或撤去。
(2)融合的活力与频率与PEG的相对分子质量、浓度、作用时间、细胞的生理状态与密度等有关。
(3)PEG法最佳的融合条件：1）细胞：状态良好，得是单细胞悬液，有核细胞（便于观察，便于用光学显微镜判断是否成功融合）；因此选择新鲜制备的牛蛙血细胞，细胞很大且有核，若是培养的细胞，需要将其状态调至很好。
2）密度：5*105-106个/ml3）PEG：分子量4000，浓度为50%（浓稠的吸水性更好，但对细胞膜的损伤更大）4）温度：37℃5）缓冲液：pH7-84、细胞计数：1）细胞计数板：每个大方格的体积为0.1mm3，可换算为每毫升液体中的细胞数量。
细胞生物融合实验报告
细胞生物融合实验报告实验目的本实验旨在研究和探究细胞融合对生物体的影响，以及细胞融合在生物科学中的应用。
实验方法1. 实验材料准备：- 两种不同类型的细胞（细胞A和细胞B）- 细胞培养基- 细胞培养皿- 显微镜2. 实验步骤：1. 采集细胞A和细胞B，并分别培养在不同的细胞培养基中。
2. 将细胞A和细胞B分别转移到两个不同的培养皿中。
3. 动态观察细胞A和细胞B的生长情况，记录生长速度和形态特征。
4. 将细胞A和细胞B混合放置到一个新的培养皿中。
5. 动态观察细胞A和细胞B的融合情况，记录融合细胞的生长速度和形态特征。
6. 使用显微镜观察融合细胞的结构和特征，并进行拍照记录。
实验结果1. 细胞A和细胞B在单独培养的情况下，生长速度有所差异。
细胞A生长速度较快，呈现较大的细胞体积和扁平形态，而细胞B生长速度较慢，呈现较小的细胞体积和圆形形态。
2. 在细胞A和细胞B混合培养的情况下，观察到融合细胞的生成。
融合细胞的生长速度较为平稳，在培养皿中形成聚集，形态呈现多样性，并具有两者的特征。
3. 使用显微镜观察到融合细胞的结构和特征，发现融合细胞中存在两种类型的细胞核，细胞质融合且较为均匀。
同时，融合细胞的形态、大小和细胞质的分布也呈现多样性。
实验分析与讨论1. 细胞融合实验的结果表明，细胞融合能够影响细胞的生长速度和形态特征。
融合细胞的生成可能导致细胞代谢的重新调整，从而改变生长速度和形态。
2. 融合细胞的形态和特征的多样性可能是由于细胞融合后的基因相互作用和表达的调节。
细胞核和细胞质的融合使得不同类型细胞的基因信息得以混合和表达，从而产生新的细胞表型。
3. 细胞融合在生物科学中具有广泛的应用。
例如，通过细胞融合，可以研究不同类型细胞的互补作用和相互影响，以深入理解细胞生长和发育的机制。
此外，细胞融合还可用于生物医学领域，如细胞治疗和组织工程等。
实验总结通过本次实验，我们了解了细胞融合对生物体的影响和在生物科学中的应用。
杂交实验推理实验报告
小鼠B细胞荧光标记观察结果实验报告一、实验目的：1.掌握小鼠的抓取和固定。
2.掌握小鼠的编号与标记方法。
3.掌握小鼠的常用实验方法。
4.掌握小鼠的常用麻醉方法。
5.掌握小鼠的安死术。
6.掌握小鼠的采血方法。
7.了解小鼠的采尿、类的方法。
8.了解小鼠各种脏器标本的采集方法。
二、实验器材：ICR小鼠、电子称、手套、实验托益、固定板、固定器、烧杯、注射器（2支）剪刀、镊子、灌胃针头、毛细管、酒精棉球、5%水合氯醛、生理盐水。
三、实验内容1.抓取：单手固定、双手固定、固定器、固定板。
2.称重：小鼠放在烧杯中称重（去除烧杯重量)，记录小鼠体重20g。
3.编号：包括染色法及穿耳孔法。
4.给药：包括尾静脉给药（小鼠放入固定器，露出尾巴、准各好注射器：左手食指托住尾巴，拇指配合，右手持注射器针尖轻轻抬起与血管平行刺入，轻推给药：血管由红变白后拔针、棉球按压)、皮下注射（俯卧固定，左手拇指和食指捏住皮肤提起，右手持针沿纵轴方向刺入皮肤，阻力消失后回抽无血活入药物，拔针，皮内注射（俯卧固定，与皮肤平行刺入捏起的皮肤，阳力大，注射药物局部有皮丘后停留片刻后拔针）、腹腔注射（仰面固定，在腹正中线两侧腹股沟平行的位置30-45°进针，挑起皮肤和肌肉，回抽无血，注药)、灌胃（小鼠固定身体星一条直线，灌胃枕头顺着上颚插入咽部，先少量注药证明未入气管后继续给药)．肌肉注射（注射针刺入肌肉回抽无血给药）。
5.采血：尾尖采血法、眼眶静脉丛采血法、心脏采血法。
6.麻醉：根据小鼠体重计算麻醉药物用量，水合氯醛0.16ml，通过腹腔注射给药途径麻醉小鼠，观察小鼠麻醉期。
7.安死术：颈椎脱臼法、过量麻醉法、空气栓塞法。
8.解剖：观察小鼠的脏器解剖结构。
四、总结1.小鼠性情比较温顺，个体小，比较容易抓取固定。
但是小鼠尾静脉血管较细，尾静脉注射有一点难度，可以先酒精擦拭使血管扩张，遵循先远后近的原则会提高尾静脉注射的成功率。
2通过此次试验，学习了关于实验动物小鼠的一些基本操作技术，对以后的科研实验做了基本的准备。
杂交植物的实验报告(3篇)
第1篇一、实验目的1. 掌握杂交植物的基本原理和方法。
2. 学习如何进行植物杂交实验，包括亲本选择、杂交操作和种子收获。
3. 了解杂交后代的遗传变异情况，观察和记录其表型特征。
4. 分析杂交后代的遗传规律，探讨其育种价值。
二、实验原理植物杂交是指不同基因型的植物个体之间进行交配，产生后代的过程。
通过杂交，可以将不同亲本的优良性状结合在一起，从而获得具有更高产量、品质或其他经济性状的新品种。
杂交实验通常包括以下步骤：1. 亲本选择：选择具有优良性状的亲本进行杂交。
2. 杂交操作：将亲本的花粉传递到另一亲本的柱头上。
3. 种子收获：收获杂交后代的种子。
4. 种子萌发和生长：将种子在适宜的条件下萌发和生长。
5. 表型观察和记录：观察和记录杂交后代的表型特征。
6. 遗传分析：分析杂交后代的遗传规律。
三、实验材料1. 亲本：选择具有不同优良性状的植物个体作为亲本，如小麦、玉米、大豆等。
2. 杂交工具：镊子、剪刀、毛笔、酒精、棉签等。
3. 种子收获工具：剪刀、纸袋、标签等。
4. 萌发和生长条件：温室、土壤、水分、光照等。
四、实验过程1. 亲本选择：选择具有不同优良性状的植物个体作为亲本，如小麦的高产、抗病性状和玉米的高品质、耐旱性状。
2. 杂交操作：将小麦的花粉传递到玉米的柱头上，确保杂交成功。
3. 种子收获：收获杂交后代的种子，并做好标记。
4. 种子萌发和生长：将种子在温室中萌发和生长，保持适宜的土壤、水分和光照条件。
5. 表型观察和记录：观察和记录杂交后代的表型特征，如株高、叶色、花色、产量等。
6. 遗传分析：分析杂交后代的遗传规律，如分离定律、自由组合定律等。
五、实验结果与分析1. 表型观察：杂交后代呈现出丰富的表型特征，包括株高、叶色、花色、产量等。
部分后代表现出与亲本相似的性状，部分后代则表现出新的性状。
2. 遗传分析：根据观察结果，分析杂交后代的遗传规律。
例如，小麦的高产性状在后代中表现出显性遗传，而玉米的高品质性状在后代中表现出隐性遗传。
动物杂交定律实验报告
一、实验目的1. 深入理解孟德尔遗传学的基本定律，包括分离定律、自由组合定律和连锁互换定律。
2. 通过实际操作，验证这些遗传定律在动物杂交中的应用。
3. 掌握动物杂交实验的基本步骤和数据处理方法。
二、实验原理孟德尔遗传学的基本定律包括：1. 分离定律：在生物的生殖细胞形成过程中，每个个体的基因成对分离，分别进入不同的生殖细胞中。
2. 自由组合定律：在生物的生殖细胞形成过程中，不同基因对的分离是互不干扰的。
3. 连锁互换定律：位于同一条染色体上的基因在遗传过程中通常一起传递，但有时会发生互换。
本实验以果蝇为实验材料，通过正交和反交实验，观察和分析果蝇的性状表现，验证上述遗传定律。
三、实验材料与器具1. 实验材料：野生型雌果蝇、野生型雄果蝇、突变型雌果蝇、突变型雄果蝇。
2. 器具：培养皿、解剖针、放大镜、显微镜、记号笔、酒精棉球、乙醚、毛笔、超净台等。
四、实验步骤1. 配对杂交：将野生型雌果蝇与突变型雄果蝇进行正交杂交，得到F1代。
2. 观察F1代：观察F1代果蝇的性状表现，记录红眼和白眼的比例。
3. 配对杂交：将F1代雌果蝇与突变型雄果蝇进行反交杂交，得到F2代。
4. 观察F2代：观察F2代果蝇的性状表现，记录红眼和白眼的比例，并统计各表现型的数量。
5. 数据分析：根据实验数据，分析并验证孟德尔遗传学的基本定律。
五、实验结果与分析1. 正交杂交：正交杂交实验中，F1代果蝇均为红眼，说明红眼为显性性状，白眼为隐性性状。
2. 反交杂交：反交杂交实验中，F1代果蝇均为红眼，说明红眼基因位于X染色体上，为伴性遗传。
3. F2代观察：F2代果蝇中，红眼和白眼的比例接近3:1，符合孟德尔分离定律。
4. 连锁互换定律：通过观察F2代果蝇的性状表现，发现红眼和白眼基因位于同一条染色体上，但有时会发生互换，符合连锁互换定律。
六、实验结论1. 孟德尔遗传学的基本定律在动物杂交中得到了验证。
2. 分离定律、自由组合定律和连锁互换定律是生物遗传学的基础，对于理解生物的遗传现象具有重要意义。
杂交设计实验报告
杂交设计实验报告杂交设计实验报告引言：杂交设计是一种重要的实验方法，用于研究不同基因型之间的相互作用及其对表型的影响。
本实验旨在通过杂交设计，探究不同基因型对植物生长和发育的影响，并为进一步的遗传改良提供理论依据。
材料与方法：1. 实验材料：选取两个不同基因型的植物品种，如A品种和B品种。
2. 实验设定：将A品种和B品种进行交配，得到F1代。
然后将F1代自交，得到F2代。
同时，分别培养A品种和B品种作为对照组。
3. 实验参数：记录F1代和F2代的生长指标，如株高、叶片数、根长等。
利用统计学方法对结果进行分析。
结果与讨论：1. F1代表现：F1代的表现往往具有杂种优势，即相比于A品种和B品种，F1代的生长指标更好。
这可能是由于A品种和B品种的基因组合带来了某些优势基因的表达，从而促进了植物的生长和发育。
2. F2代表现：F2代的表现则更加复杂。
由于基因重组的发生，F2代中出现了各种不同的基因组合，导致了不同的表型。
通过对F2代的生长指标进行统计分析，我们可以发现一些有趣的规律。
a) 部分F2代的表型与A品种或B品种相似，说明这些个体继承了A品种或B 品种的某些基因，表现出了相应的性状。
b) 有些F2代个体的表型介于A品种和B品种之间，这可能是由于基因的互补作用或部分显性基因的表达。
c) 还有一些F2代个体的表型与A品种和B品种完全不同，这可能是由于基因的重组和新的基因组合所引起的。
3. 实验结果分析：通过对F2代的生长指标进行统计学分析，可以推测不同基因型之间的相互作用及其对表型的影响。
进一步的研究可以揭示这些基因的功能和调控机制，为植物遗传改良提供理论基础。
结论：本实验通过杂交设计，研究了不同基因型对植物生长和发育的影响。
结果表明，杂种优势在F1代中得到了体现，而F2代的表现更加复杂，涉及到基因的互补作用、显性基因的表达以及基因的重组等。
通过对F2代的生长指标进行统计学分析，可以进一步揭示不同基因型之间的相互作用，并为植物遗传改良提供理论基础。
小鼠B细胞荧光标记观察结果实验报告
小鼠B细胞荧光标记观察结果实验报告一、实验目的：1.掌握小鼠的抓取和固定。
2.掌握小鼠的编号与标记方法。
3.掌握小鼠的常用实验方法。
4.掌握小鼠的常用麻醉方法。
5.掌握小鼠的安死术。
6.掌握小鼠的采血方法。
7.了解小鼠的采尿、类的方法。
8.了解小鼠各种脏器标本的采集方法。
二、实验器材：ICR小鼠、电子称、手套、实验托益、固定板、固定器、烧杯、注射器（2支）剪刀、镊子、灌胃针头、毛细管、酒精棉球、5%水合氯醛、生理盐水。
三、实验内容1.抓取：单手固定、双手固定、固定器、固定板。
2.称重：小鼠放在烧杯中称重（去除烧杯重量)，记录小鼠体重20g。
3.编号：包括染色法及穿耳孔法。
4.给药：包括尾静脉给药（小鼠放入固定器，露出尾巴、准各好注射器：左手食指托住尾巴，拇指配合，右手持注射器针尖轻轻抬起与血管平行刺入，轻推给药：血管由红变白后拔针、棉球按压)、皮下注射（俯卧固定，左手拇指和食指捏住皮肤提起，右手持针沿纵轴方向刺入皮肤，阻力消失后回抽无血活入药物，拔针，皮内注射（俯卧固定，与皮肤平行刺入捏起的皮肤，阳力大，注射药物局部有皮丘后停留片刻后拔针）、腹腔注射（仰面固定，在腹正中线两侧腹股沟平行的位置30-45°进针，挑起皮肤和肌肉，回抽无血，注药)、灌胃（小鼠固定身体星一条直线，灌胃枕头顺着上颚插入咽部，先少量注药证明未入气管后继续给药)．肌肉注射（注射针刺入肌肉回抽无血给药）。
5.采血：尾尖采血法、眼眶静脉丛采血法、心脏采血法。
6.麻醉：根据小鼠体重计算麻醉药物用量，水合氯醛0.16ml，通过腹腔注射给药途径麻醉小鼠，观察小鼠麻醉期。
7.安死术：颈椎脱臼法、过量麻醉法、空气栓塞法。
8.解剖：观察小鼠的脏器解剖结构。
四、总结1.小鼠性情比较温顺，个体小，比较容易抓取固定。
但是小鼠尾静脉血管较细，尾静脉注射有一点难度，可以先酒精擦拭使血管扩张，遵循先远后近的原则会提高尾静脉注射的成功率。
2通过此次试验，学习了关于实验动物小鼠的一些基本操作技术，对以后的科研实验做了基本的准备。
杂交染色实验报告
一、实验目的1. 了解杂交染色的原理和意义；2. 掌握杂交染色的操作步骤；3. 学会观察和分析杂交染色结果；4. 培养实验操作能力和科学思维。
二、实验原理杂交染色是一种利用荧光标记的DNA探针，检测特定基因或染色体片段的方法。
其原理是：将待检测的DNA片段与荧光标记的DNA探针进行杂交，如果待检测的DNA 片段与探针具有同源性，则两者会结合形成杂交体，荧光标记会发出荧光信号，从而实现检测。
三、实验材料与器具1. 材料：待检测的DNA样本、荧光标记的DNA探针、杂交缓冲液、DNA变性液、琼脂糖、电泳缓冲液、凝胶成像系统等。
2. 器具：PCR仪、凝胶成像系统、电泳槽、电泳仪、紫外灯、移液器、吸管、离心机、微量加样器、恒温水浴锅、剪刀、剪刀、镊子等。
四、实验步骤1. DNA提取：按照实验室标准操作流程提取待检测的DNA样本。
2. DNA标记：将荧光标记的DNA探针与待检测的DNA样本进行杂交，制备杂交样本。
3. DNA变性：将杂交样本进行变性处理，使DNA双链解开。
4. 琼脂糖凝胶电泳：将变性后的DNA样本加入琼脂糖凝胶，进行电泳分离。
5. 染色：将电泳后的凝胶放入凝胶成像系统中，用紫外灯照射，观察荧光信号。
6. 结果分析：根据荧光信号的强弱和位置，分析待检测的DNA片段与探针的杂交情况。
五、实验结果与分析1. 正确操作下，荧光标记的DNA探针应与待检测的DNA样本进行杂交，形成杂交体，发出荧光信号。
2. 通过观察荧光信号的强弱和位置，可以分析待检测的DNA片段与探针的杂交情况。
3. 如果荧光信号较强且位于预期位置，说明待检测的DNA片段与探针具有较高同源性，杂交成功。
4. 如果荧光信号较弱或不存在，可能原因包括：探针与待检测的DNA片段无同源性、探针浓度过低、实验操作不当等。
六、实验结论通过本次杂交染色实验，我们掌握了杂交染色的原理和操作步骤，学会了观察和分析杂交染色结果。
实验结果表明，待检测的DNA片段与荧光标记的DNA探针具有较高同源性，杂交成功。
杂交设计实验报告
一、实验目的1. 了解杂交实验的基本原理和方法；2. 掌握杂交实验的操作技能；3. 验证遗传规律，分析杂交后代的表现型比例；4. 学习并掌握实验数据的处理和分析方法。
二、实验原理杂交实验是研究遗传规律的重要手段之一，通过将具有不同遗传特征的个体进行交配，观察后代的表现型，分析遗传规律。
本实验以小麦为研究对象，通过正交和反交实验，验证遗传规律，分析杂交后代的表现型比例。
三、实验材料与器具1. 实验材料：小麦种子（纯种和杂种）、剪刀、放大镜、标签纸、记号笔、培养皿、恒温箱、酒精棉球、乙醚等。
2. 器具：显微镜、电子天平、电子秤、量筒、滴管、烧杯、培养皿、恒温箱、酒精灯、剪刀等。
四、实验流程1. 准备实验材料：选取纯种小麦和杂种小麦，分别进行编号，并记录种子数量。
2. 配制培养基：将小麦种子放入烧杯中，加入适量蒸馏水，用酒精棉球擦拭种子表面，再用剪刀将种子剪成两半，放入培养皿中。
3. 正交实验：（1）将纯种小麦与杂种小麦进行正交杂交，即纯种小麦雌雄与杂种小麦雌雄进行交配。
（2）将交配后的种子放入恒温箱中培养，观察种子发芽情况。
（3）统计发芽率，计算杂交后代的表现型比例。
4. 反交实验：（1）将杂种小麦与纯种小麦进行反交杂交，即杂种小麦雌雄与纯种小麦雌雄进行交配。
（2）将交配后的种子放入恒温箱中培养，观察种子发芽情况。
（3）统计发芽率，计算杂交后代的表现型比例。
5. 数据处理与分析：将实验数据进行分析，验证遗传规律，得出结论。
五、实验步骤1. 准备实验材料：选取纯种小麦和杂种小麦，分别进行编号，并记录种子数量。
2. 配制培养基：将小麦种子放入烧杯中，加入适量蒸馏水，用酒精棉球擦拭种子表面，再用剪刀将种子剪成两半，放入培养皿中。
3. 正交实验：（1）将纯种小麦雌雄与杂种小麦雌雄进行交配，将交配后的种子放入恒温箱中培养。
（2）观察种子发芽情况，记录发芽率。
（3）统计发芽率，计算杂交后代的表现型比例。
4. 反交实验：（1）将杂种小麦雌雄与纯种小麦雌雄进行交配，将交配后的种子放入恒温箱中培养。
杂交实验报告
一、实验目的1. 了解杂交实验的基本原理和操作步骤；2. 掌握杂交实验在遗传育种中的应用；3. 通过实验，验证孟德尔遗传定律。
二、实验原理杂交实验是遗传学中常用的实验方法，通过将两个不同基因型的个体进行交配，观察后代的表现型，从而分析基因的遗传规律。
本实验以果蝇为实验材料，利用正交和反交的方法，验证孟德尔遗传定律。
三、实验材料与器具1. 实验材料：野生型雄果蝇、突变型雌果蝇；2. 器具：显微镜、培养皿、解剖针、酒精棉球、乙醚、毛笔、超净台、恒温箱、白纸等。
四、实验步骤1. 配培养基：将酵母、玉米粉、丙酸、蔗糖、琼脂等物质按比例混合，制成培养基；2. 选处女蝇：在超净台上选取野生型与突变型的雄果蝇和雌果蝇；3. 杂交（正交）：（1）取红眼雌果蝇5个与白眼雄果蝇4个，放入培养皿中，标记为正交；（2）将培养皿放置于恒温箱中，观察F1代果蝇的生长情况；4. 杂交（反交）：（1）取白眼雌果蝇5个与红眼雄果蝇4个，放入培养皿中，标记为反交；（2）将培养皿放置于恒温箱中，观察F1代果蝇的生长情况；5. 观察并记录：分别将正反交的F1代用乙醚麻醉，倒在白纸上，分别数红白眼的雌蝇和雄蝇，记录数据。
五、实验结果与分析1. 正交实验结果：- 雌蝇：红眼：白眼 = 5：0- 雄蝇：红眼：白眼 = 5：0由此可知，在正交实验中，F1代雌雄果蝇均表现为红眼。
2. 反交实验结果：- 雌蝇：红眼：白眼 = 5：0- 雄蝇：红眼：白眼 = 0：5由此可知，在反交实验中，F1代雌果蝇均表现为红眼，而雄果蝇均表现为白眼。
根据实验结果，我们可以得出以下结论：1. 正交和反交实验的结果符合孟德尔遗传定律，即F1代果蝇的性状表现与亲本性状一致；2. 红眼基因对白眼基因是完全显性，红眼基因位于X染色体上；3. 验证了伴性遗传和分离、连锁交换定律。
六、实验总结通过本次杂交实验，我们掌握了杂交实验的基本原理和操作步骤，了解了杂交实验在遗传育种中的应用。
β地贫斑点杂交实验结果
β地贫斑点杂交实验结果概述β地贫斑点是一种由基因突变引起的遗传性疾病，特点是血红蛋白分子中的谷氨酸被缺失，导致红细胞出现异常形态和功能受损。
本实验旨在通过杂交实验，研究β地贫斑点的遗传传递规律和分子机制。
实验设计本实验采用小鼠作为研究对象，通过杂交实验产生β地贫斑点小鼠。
实验最终目的是观察杂交后代小鼠红细胞的形态和功能变化，从而研究β地贫斑点的遗传性疾病机制。
实验材料•正常小鼠（NN型）•β地贫斑点小鼠（SS型）实验步骤1.将正常小鼠与β地贫斑点小鼠进行杂交。
2.观察杂交后代小鼠的红细胞形态变化。
3.检测杂交后代小鼠红细胞功能变化。
实验结果红细胞形态变化经过杂交后，观察到杂交后代小鼠红细胞形态发生明显改变。
1. 形态异常杂交后代小鼠红细胞呈现不规则形状，出现斑点状或凹凸不平的现象。
2. 变形性增加杂交后代小鼠红细胞的变形性明显增加，即在通过狭小的血管时更容易变形。
红细胞功能变化经过杂交后，观察到杂交后代小鼠红细胞功能发生明显改变。
1. 氧气运输能力降低杂交后代小鼠红细胞氧气运输能力降低，即无法有效将氧气输送至组织和器官。
2. 寿命缩短杂交后代小鼠红细胞寿命缩短，即红细胞死亡速度加快。
结论通过本实验的杂交实验，观察到β地贫斑点小鼠与正常小鼠进行杂交后，杂交后代小鼠红细胞形态发生明显变化，包括形态异常和变形性增加。
此外，杂交后代小鼠红细胞功能也发生明显变化，包括氧气运输能力降低和寿命缩短。
这些结果表明，β地贫斑点的基因突变对红细胞形态和功能产生了显著影响。
通过本研究可以深入研究β地贫斑点的遗传传递规律和分子机制，为进一步理解该疾病的发病机理提供了重要线索。
未来的研究可以进一步探讨β地贫斑点突变基因的具体功能以及如何通过基因治疗等手段来治疗和预防该疾病。
参考文献1.Smith A, Jones B. The role of gene mutations in β地贫斑点. JGenet. 20XX;XX(X):XXX-XXX.2.Zhang C, et al. Molecular mechanisms of β地贫斑点. Mol MedRep. 20XX;XX(X):XXX-XXX.3.Wang D, et al. β地贫斑点 and its implications in human health.Front Genet. 20XX;XX(X):XX-XX.。
细胞融合实验报告
细胞融合Cell Fusionxx 201100140120 同组者：xx 2013年3月14号【实验目的】1、了解动物细胞融合的常用方法Learn common methods of cell fusion2、学习用PEG进行细胞融合的基本操作过程Use PEG to induce cell fusion3、注意动物细胞融合的过程中细胞的行为和变化Pay attention to the action and change of cells during the process of cell fusion【实验原理】细胞融合是指把相同或不同类型的两个或多个细胞融合成一个具有共同细胞质和单一、连续细胞膜的细胞。
Cell fusion is that two or more cells ，of same or different types，be fused by certain technique to produce one cell with a common cytoplasm and a single continuous cell membrane.目前用于细胞融合的有以下三种常用的方法：1、Virus 病毒2、PEG 聚乙二醇3、Electric shock 电击通过结合化学和电击的方法，可以使细胞融合率高达70%Up to 70% cell fusion efficiencies by combining both chemical and electrical fusion protocols.细胞融合率=已融合的细胞核总数/所有细胞的细胞核总数*100%Cell fusion efficiency is the ratio of the total number of fused nucleus over that of all the cells in the vision，usually shown as percentage.除了诱导剂外，其他因素，如细胞类型和性质、温度、PH值、离子强度等也会影响细胞融合率。
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苏州大学实验报告
院、系医学部年级专业姓名学号
课程名称医学免疫学实验成绩
指导老师葛彦同组实验者实验日期 2020/6/3
六、思考题
1.阐述脾脏细胞和骨髓瘤细胞融合后的五种状态，以及在HAT选择性培养基里生存与否的原理。
1)五种状态：未融合的B细胞；未融合的骨髓瘤细胞；B细胞融合B细胞；骨髓瘤细胞融合骨
髓瘤细胞；B细胞融合骨髓瘤细胞。
2)生存与否的原因
B细胞无法在体外长期大量生存，故未融合的B细胞和B细胞相互融合都无法在HAT选择性
培养基生存；
骨髓瘤细胞和骨髓瘤同核融合细胞在HAT培养液中时，DNA合成的主要途径被A阻断，由于缺乏HGPRT或/及TK，不能利用培养基中的H及T，无法完成DNA的合成；
B细胞和骨髓瘤细胞的异核融合体即杂交瘤细胞，既从B细胞获得了HGPRT和TK，从而利用培养液中的H和T合成DNA，又从骨髓瘤细胞获得了无限增殖的能力，因此，只有杂交瘤细胞能在HAT选择培养液中生存下来。
2.现需要利用杂交瘤技术制备鼠抗人CD3单克隆抗体，请设计一个实验计划，阐述各阶段的实验
方案和过程，以及所需的实验材料
1)实验材料
人CD3抗原、小鼠、小鼠骨髓瘤细胞、细胞融合剂、PBS、HAT培养液、120目钢丝筛网、
玻璃平板、96孔细胞培养板、温控离心机。
2)实验方案和过程
a)将人CD3抗原注入小鼠体内，进行几周加强免疫；
b)取小鼠脾脏
处死小鼠，固定于解剖架上打开腹腔，取出脾脏。
置于120目的钢丝网中，将网移入
盛有生理盐水的平皿中，轻轻压磨，使其成为单个细胞悬液，吸取细胞悬液，与骨髓
瘤细胞SP2/0按比例混合，离心后弃上清；
c)用HAT培养基培养纯化，得到杂交瘤细胞，使其产生抗人CD3单克隆抗体。