临床生物化学检验(1).

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生物化学实验指导实验一蛋白质的性质实验（一）（呈色反应）一、目的1

生物化学实验指导实验一蛋白质的性质实验（一）（呈色反应）一、目的1.了解构成蛋白质的基本结构单位及主要联接方式。

2.了解蛋白质和某些氨基酸的呈色反应原理。

3.学习几种常用的鉴定蛋白质和氨基酸的方法二、虽色反应：(一)双缩脱反应：1.原理：尿素加热至180℃左右生成双缩脲并放出一分子氨。

双缩脲在碱性环境中能与cu2+结合生成紫红色化合物，此反应称为双缩脲反应。

蛋白质分子中有肽键，其结构与双缩脲相似，也能发生此反应。

可用于蛋白质的定性或定量测定。

一切蛋白质或二肽以上的多肽部有双纳脲反应，但有双缩脲反应的物质不一定都是蛋白质或多肽。

2.试剂：(1)尿索： 10克(2)10%氢氧化钠溶液 250毫升(3)1%硫酸铜溶液 60毫升(4)2％卵清蛋白溶液 80毫升3.操作方法：取少量尿素结晶，放在干燥试管中。

用微火加热使尿素熔化。

熔化的尿素开始硬化时，停止加热，尿素放出氨，形成双缩脲。

冷后，加10％氢氧化钠溶液约1毫升，振荡混匀，再加1％硫酸铜溶液1滴，再振荡。

观察出现的粉红颜色。

避免添加过量硫酸铜，否则，生成的蓝色氢氧化铜能掩盖粉红色。

向另一试管加卵清蛋白溶液约l毫升和10％氢氧化钠溶液约2毫升，摇匀，再加1％硫酸铜溶液2滴，随加随摇，观察紫玫色的出现。

(二)茚三酮反应1.原理：除脯氨酸、羟脯氨酸和茚三酮反应产生黄色物质外，所有α—氨基酸及一切蛋白质都能和茚三酮反应生成蓝紫色物质。

该反应十分灵敏，1：1 500 000浓度的氨基酸水溶液即能给出反应，是一种常用的氨基酸定量测定方法。

茚三酮反应分为两步，第一步是氨基酸被氧化形成CO2、NH3和醛，水合茚三酮被还原成还原型茚三酮；第二步是所形成的还原型茚三酮同另一个水合茚三酮分于和氨缩合生成有色物质。

反应机理如下：此反应的适宜pH为5—7，同一浓度的蛋白质或氨基酸在不同pH条件下的颜色深浅不同，酸度过大时甚至不显色。

2.试剂：(1)蛋白质溶液 100毫升2％卵清蛋白或新鲜鸡蛋清溶液(蛋清：水＝1：9)(2)0.5％甘氨酸溶液 80毫升(3)0.1％茚三酮水溶液 50毫升(4)0.1％茚三酮—乙醇溶液 20毫升3.操作方法：(1)取2支试管分别加入蛋白质溶液和甘氨酸溶液1毫升，再各加0.5毫升0.1％茚三酮水溶液，混匀，在沸水浴中加热1—2分钟，观察颜色由粉色变紫红色再变蓝。

实验一血清蛋白质测定(范玉平)

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【试剂与器材】
1．6 mol/L NaOH溶液 2．双缩脲试剂 3．双缩脲空白试剂 4．60～70g/L蛋白质标准液 5．仪器分光光度计。
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【试剂与器材】
大试管
1ml吸管 5ml吸管洗耳球
4支３支
2支１只
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操作步骤
1.取试管4支，标明测定管（U）、标准管（S）、标本空白管（B）、试剂空白管（ RB）。
【注意事项】
4. 实验证明，BCG不但与白蛋白呈色，而且与血清中多种蛋白质成分呈色，其中以α1-球蛋白、运铁蛋白、结合珠蛋白更为显著，其反应速度较白蛋白稍慢。由于在30s内呈色对白蛋白特异，故BCG与血清混合后，在30s读取吸光度，可明显减少非特异性呈色反应。为了减少本法基质效应的影响，最好用参考血清作标准。
【方法学评价】
1.本法操作简便、快速，胆红素和一般脂血对测定无明显干扰。
【方法学评价】
2.血红蛋白和BCG产生与白蛋白相等的颜色强度，血红蛋白在1g/L以下无明显干扰，2g/L使吸光度增高3.2%，3g/L使吸光度增高7.4%，4g/L使吸光度增高7.7%，5g/L使吸光度增高8.8%，所以溶血标本不宜做BCG法白蛋白测定。
二物理法：
又可分为紫外吸收法、折射法和重量法等。除紫外吸收法外，其他方法现已很少使用或被淘汰。
三蛋白质与染料结合的方法
是比较灵敏而特异的一类方法。用的较多的染料有丽春红、考马斯亮蓝G250和邻苯三酚红钼。丽春红蛋白结合法测得的结果与凯氏定氮法相符，并且显色后在室温可稳定24小时；考马斯亮蓝G250结合蛋白法灵敏度高，特异性强，操作简便，广泛用于尿蛋白，脑脊液蛋白及各种微量蛋白的检测，但该方法测定蛋白浓度的线性范围不宽，与白、球蛋白反应的灵敏度不同，反应强度亦受温度的影响，且比色杯吸附色素而干扰测定，不能用于自动化分析仪，因此该法的应用受到了一定的限制；邻苯三酚红钼络合显色法克服了考马斯亮蓝G250结合蛋白法的上述缺点，且具有简便、稳定等优点，可用于自动化分析仪。

临床生物化学与检验-自考重点(1)

蛋白质与非蛋白含氮化合物的代谢紊乱清蛋白：运输游离脂肪酸、某些激素、胆红素、多种药物等。

急性时相反应（APR）：（名词解释）血浆前清蛋白、清蛋白、转铁蛋白浓度出现相应下降的炎症反应过程称之为急性时相反应前清蛋白（PA）：（名词解释）在SPE（正常血清蛋白电泳）中显示在清蛋白前方故而得名，主要包括视黄醇结合蛋白（RBP）和甲状腺素转运蛋白（TTR），两者均由肝脏合成。

前清蛋白（PA）的临床意义：属负性APP，作为肝功能不全的指标触珠蛋白（Hp）：（名词解释）又称结合珠蛋白，在SPE（正常血清蛋白电泳）中位于α2区带，为а2в2四聚体。

触珠蛋白（Hp）临床意义中溶血性疾病，连续观察可用于监测溶血是否处于进行状态。

所有的缩写：急性时相反应（APR）、正常血清蛋白电泳（SPE）、前清蛋白（PA）黄醇结合蛋白（RBP）、甲状腺素转运蛋白（TTR）、清蛋白（Alb）、а1-抗胰蛋白酶（а1-AT或AAT）、蛋白酶抑制物（Pi）、а1-酸性糖蛋白（AAG）、触珠蛋白（Hp）、α2-巨球蛋白（α2-M或AMG）、铜蓝蛋白（Cp）、转铁蛋白（Tf）、C-反应蛋白（CRP）、血清淀粉样蛋白A（SAA）转铁蛋白（Tf）用于贫血的鉴别诊断，缺铁性低血素贫血，转铁蛋白（Tf）代偿性合成增加CRP是第一个被认识的APPCRP主要用于结合临床监测疾病：①筛查微生物感染；②评估炎性疾病的活动度；③监测系统性红斑狼疮、白血病和外科手术后并发的感染；④新生儿败血症和脑膜炎的监测；⑤监测肾移植后的排斥反应蛋白质特有的结构或性质：①重复的肽链结构；②酪氨酸和色氨酸残基对酚试剂反应或紫外光吸收；③与色素结合的能力；④沉淀后借浊度或光折射测定。

凯氏定氮法：是公认的参考方法，目前用于标准蛋白质的定值和校正其他方法等，并适用于一切形态（固体和液体）的样品。

双缩脲法是体液总蛋白测定的常规方法。

直接紫外吸收法常用于较纯的酶、免疫球蛋白等蛋白质测定。

临床生物化学检验范畴

临床生物化学检验范畴
（1）阐明疾病状态下生物化学基础及疾病发生发展过程中的生物化学变化,特别是生物化学标志物用于疾病监测的基本原理,帮助理解生物化学标志物是如何通过选择、建立和评价,最终成为一种检验项目而用于临床的过程及方法。

（2）研究和开发上述标志物的检测方法和技术,内容包括临床生物化学方法的选择、建立、评价,参考区间的建立,检测效能评估,验质量控制和质量管理等方法,通过这些“方法学”研究,为临床检验项目提供可靠、实用的检测技术和方法。

医学检验技术毕业考试大纲

医学检验技术毕业考试大纲一、临床检验基础。

这部分可重要啦，就像是医学检验的基本功。

1. 血液学检验。

- 血液标本的采集和处理那是我们必须要熟练掌握的。

你得知道不同采血管的用途，像紫色管是做血常规的，绿色管一般是做生化检查的。

采集的时候怎么找血管，怎么避免溶血，这些小细节可都是大关键。

- 血细胞的形态学检查也很有趣呢。

红细胞、白细胞、血小板的正常形态要牢记于心，这样当它们出现异常的时候，我们就能一眼看出问题。

比如说缺铁性贫血的时候，红细胞会变小，中央淡染区扩大，就像一个个小饼干中间没涂够果酱一样。

- 血红蛋白测定、红细胞计数、白细胞计数及分类计数的方法和临床意义也要清楚。

白细胞增多或者减少可能预示着身体不同的状况，比如感染、血液系统疾病等。

2. 体液学检验。

- 尿液检验是我们经常会碰到的。

尿液标本的采集方法有很多种，随机尿、晨尿、24小时尿都有不同的用途。

尿液的理学检查，像颜色、透明度、比重等，能给我们很多提示。

要是尿液颜色像浓茶，可能是胆红素尿哦。

- 尿沉渣检查就像是在尿液里找宝藏。

红细胞、白细胞、管型、结晶等成分的形态和临床意义都要掌握。

看到透明管型的时候可能是正常情况，但要是有大量的白细胞管型，那肾脏可能有炎症啦。

- 粪便检验也不能小看。

粪便的外观、隐血试验、寄生虫检查等都是重点。

要是在粪便里发现了蛔虫卵，那就是肠道有蛔虫感染的证据啦。

二、临床血液学检验。

1. 造血基础理论。

- 造血器官的功能得了解清楚。

骨髓可是我们造血的大本营，红骨髓能产生各种血细胞。

造血干细胞的概念也很重要，它就像一颗种子，可以分化成各种血细胞。

- 血细胞的发育和成熟过程就像是一场奇妙的旅程。

从原始细胞到成熟细胞，每个阶段都有不同的特点。

我们要能根据细胞的形态、核质比、染色质等特征来判断细胞处于哪个发育阶段。

2. 贫血性疾病。

- 不同类型贫血的病因、发病机制、临床表现、实验室检查和诊断标准都要掌握。

缺铁性贫血、巨幼细胞贫血、再生障碍性贫血等都有各自的特点。

2020年临床执业医师《生物化学》试题及答案(卷一)

2020年临床执业医师《生物化学》试题及答案（卷一）一、A11、下述属于核酶特点的是A、没有催化活性B、其本质是一种DNAC、多数与金属离子结合起作用D、可以改变酶的空间构象E、可以切割特定的基因转录产物2、核酶是A、具有相同催化作用的酶B、酶的前体C、决定酶促反应的辅助因子D、有催化活性的RNAE、能够改变酶的空间构想的调节剂3、下述酶的激活剂特点有误的是A、使酶由无活性变为有活性B、激活剂大多为金属阴离子C、分为必需激活剂和非必需激活剂D、Cl-能够作为唾液淀粉酶的激活剂E、激活剂通过酶-底物复合物结合参加反应4、酶的抑制剂是A、包括蛋白质变性因子B、能减弱或停止酶的作用C、去除抑制剂后，酶表现为无活性D、分为竞争性和非竞争性两种抑制作用E、多与非共价键相连来抑制酶的催化活性5、辅酶中含有的维生素，哪一组是正确的A、焦磷酸硫胺素—VitB2B、磷酸吡哆醛—VitB6C、四氢叶酸—VitB12D、辅酶Ⅰ—VitB2E、生物素—辅酶Q6、辅酶的作用是A、辅助因子参与构成酶的活性中心，决定酶促反应的性质B、金属离子构成辅基，活化酶类的过程C、底物在酶发挥催化作用前与底物密切结合的过程D、抑制剂与酶-底物复合物结合的过程E、酶由无活性变为有活性性的过程7、下述关于酶原激活特性，正确的一项是A、可促使自身蛋白质受蛋白酶水解B、保证合成的酶在特定部位和环境中发挥作用C、是由酶变为酶原的过程D、是暴露活性中心的过程，不会形成新的活性中心E、酶原是具有活性的一类酶8、下述关于共价修饰的叙述错误的是A、可以改变酶的活性B、又称为酶的化学修饰C、乙酰化为常见的化学修饰D、属于酶的快速调节E、两个基团之间是可逆的共价结合9、下列有关Vmax的叙述中，哪一项是正确的A、Vmax是酶完全被底物饱和时的反应速度B、竞争性抑制时Vmax减少C、非竞争抑制时Vmax增加D、反竞争抑制时Vmax增加E、Vmax与底物浓度无关10、下列有关Km值的叙述，哪一项是错误的A、Km值是酶的特征性常数B、Km值是达到最大反应速度一半时的底物浓度C、它与酶对底物的亲和力有关D、Km值最大的底物，是酶的最适底物E、同一酶作用于不同底物，则有不同的Km值11、有关结合酶概念正确的是A、酶蛋白决定反应性质B、辅酶与酶蛋白结合才具有酶活性C、辅酶决定酶的专一性。

生物化学实验：第一次实验

实验蛋白质的部分性质第一部分蛋白质的颜色反应一、实验目的：掌握鉴定蛋白质的原理和方法。

二．实验原理蛋白质分子中某种或某些集团可与显色剂作用，产生颜色。

不同的蛋白质由于所含的氨基酸不完全相同，颜色反应亦不完全相同。

颜色反应不是蛋白质的专一反应，一些非蛋白物质也可产生同样的颜色反应，因此不能根据颜色反应的结果来决定被测物是否为蛋白质。

另外，颜色反应也可作为一些常用蛋白质定量测定的依据。

三、实验仪器1、移液管1.0ml、10.0ml2、滴管3、试管4、电炉5、pH试纸6、水浴锅四、实验试剂1、卵清蛋白液：鸡蛋清用蒸馏水稀释10-20倍，3-4层纱布过滤，滤液放在冰箱里冷藏备用。

2、0.5%苯酚：1g苯酚加蒸馏水稀释至200ml。

3、Millon’s试剂：40g汞溶于60ml浓硝酸（水浴加温助溶）溶解后，冷却，加二倍体积的蒸馏水，混匀，取上清夜备用。

此试剂可长期保存。

4、尿素晶体5、1%CuSO4：1g CuSO4晶体溶于蒸馏水，稀释至100ml6、10%NaOH：10g NaOH溶于蒸馏水，稀释至100ml7、浓硝酸8、0.1%茚三酮溶液：0.1g茚三酮溶于95%的乙醇并稀释至100ml.9、冰醋酸10、浓硫酸五、实验步骤（一）米伦氏（Millon’s）反应原理：米伦试剂是硝酸、亚硝酸、硝酸汞、亚硝酸汞的混合物。

他能与苯酚及某些二羟基苯衍生物起颜色反应。

最初产生的有色物质可能为羟苯之亚硝基衍生物，经变位作用变成颜色更深的邻醌肟，最终得具有稳定红色的产物，此红色产物的结构尚不了解。

组成蛋白质的氨基酸中只有酪氨酸含苯酚集团，因此该反应为蛋白质中酪氨酸存在的依据。

操作及现象：1、取0.5%苯酚溶液1ml于试管中，加米伦试剂约0.5ml，小心加热，溶液即出现玫瑰红色。

玫瑰红色2、取2ml蛋白液，加Millon’s试剂0.5ml，出现白色的蛋白质沉淀（因试剂含汞盐及硝酸之故），小心加热，凝固的蛋白质出现红色。

凝固蛋白出现红色（二）双缩脲反应原理：尿素被加热，则两分子的尿素放出一分子氨而形成双缩脲。

临床生化复习题1

临床生化作业题1.常用蛋白质测定方法有哪些？各有什么优缺点？2.与糖尿病相关的生化检测指标有哪些？它们的临床意义有何不同？3.脂蛋白和血脂的生化检测指标有哪些？它们的临床意义有何不同？4.简述血清酶变化的病理机制。

5.自动生化分析仪参数设置主要包括哪些项目？6.常用的肝功能检查包括有哪些方面？主要指标有哪些？7.肾功能分段检查和相应的实验有哪些？8.作为急性心肌梗死标志物，CK、cTnT、Mb在血清中的变化有何特点？在诊断方面各有何优缺点？最佳选择题（每题1分，共100分）1.以下哪项不影响电泳的迁移率？A电渗的大小 B. 分子的大小 C.样品的浓度 D.介质离子强度2. L-B定律表明，溶液的吸光度与成正比。

A溶液的颜色 B. 液层的厚度大小 C.样品的浓度 D. 厚度与浓度的积3. 凯氏定氮法测定蛋白质的主要优点是A.方法简便B.不需要特殊仪器C.省时D.结果准确4. 嘌呤核苷酸分解代谢的终产物主要是A.尿素B.尿酸C.乳清酸D.嘌呤5.以下哪项不是肝脏的主要功能？A.物质代谢B.生物转化C.胆汁分泌D.激素分泌6. EDTA滴定法测定血钙试验中常用的指示剂是A.钙红B.钙蓝C.酚红D.酚酞7. 以下哪项一般不作为黄疸的生化诊断的检验项目A. 血清总胆红素B.血清蛋白质C.尿胆红素D. 尿中尿胆原8. 肝硬化的生化诊断不包括A.氨基酸氧化酶测定B.ASTC.血清透明质酸测定D. 总蛋白9.成人血清癌胚抗原（CEA）大于100ng/ml，应高度怀疑A.肺癌B.原发性肝癌C.胚胎肿瘤D.肝硬化10. 参考值范围一般以可信限为界。

A.75%B.85%C.95%D.99%11.回收实验中，所用的标准液一般要求A.加入体积要多B.标准液的浓度要高C.浓度与样品接近D.以上都不对12. 以下哪种不是常用的质控材料A.液体质控血清B.冻干未定值质控血清C. 冻干定值质控血清D.普通血清13. 以下哪项不是聚丙烯酰胺凝胶电泳的分离物质的原理？A.电荷效应B. 分子筛效应C.浓缩效应D.吸附效应14.偏离Lambert-Beer定律的因素有A.入射光不是单射光B. 溶液的pH值C. 温度D. 以上都是15.与火焰光度法不符的是A.为发射光谱法B. 用火焰作激发原C.不同原子有各自特征性光谱D. 物质浓度与发射光呈反比16.对蛋白质电泳错误的认识是A.电场强度增大电泳速度加快B.要选择一定pH的缓冲液C.电泳速度越慢分辨率越高D. 要选择一定的离子强度17.对肝癌诊断最有价值的标志物是A.本-周蛋白B.AFPC.癌胚抗原D.CA19-918.不连续聚丙烯酰胺凝胶电泳分辨率高是因为有A.标本浓缩效应B. 电荷效应C. 分子筛效应D..以上综合效应19.聚合酶链反应不需要A.模板DNAB. 引物C.TaqDNA聚合酶D. 引物酶20.关于酶活性的国际单位的定义，错误的是A.在最适温度B. 最适底物浓度C.每分钟催化1 mol底物反应的酶量D. 单位是IU/ml21.测定酶促反应速度，在酶浓度一定时，应在那一阶段进行A.一级反应B. 混合级反应C.零级反应D. 以上都不行22.测定酶促反应开始后一段时间内底物减少量或产物的增加量称为A.固定时间法B. 终点法C. 两点法D. 以上都对23.血浆特异性酶A.主要在血细胞合成B. 在血浆不起催化作用C.活性变化与器官无关D. 大多由肝细胞合成24.常用于急性心肌梗死的酶类有A.ACPB. ALTC. γ-GT、ASPD. AST、LDH 、CK25.α-脂蛋白相应于A.CMB. VLDLC. LDLD. HDL26.转运内源性甘油三酯的脂蛋白是A.CMB.VLDLC. LDLD. IDL27.IIa型高脂血症患者常见于A.高乳糜血症B.高β-脂蛋白血症C.高α-脂蛋白血症D. 高前β-脂蛋白血症28.下列哪种不是初级胆汁酸A.胆酸B.鹅脱氧胆酸C. 脱氧胆酸D.甘氨胆酸29.不能从尿中排出来的是A.尿胆素原B. 粪胆素原C.结合胆红素D. 未结合胆红素30.阻塞性黄疸的原因是A.肝代谢障碍B.大量红细胞破坏C.肝细胞膜通透性增大D.肝内外胆道阻塞31.下列哪个指标可以用于判断肝脏蛋白质代谢功能A.尿三胆B. A/G比值C. 血清ALT活性D. TBIL32.正常人血清范登堡实验结果应是A.直接反应阳性B.间接反应阳性C.双相反应阳性D.间接弱阳性或阴性33.肝前性黄疸时血清中升高的主要是A.未结合胆红素B. 结合胆红素C.结合和未结合胆红素D. 直接胆红素34.维持血浆胶体渗透压起主要作用的是A.纤维蛋白原B.白蛋白C. α-球蛋白D. β-球蛋白35.正常时尿中排出量相对恒定的是A.尿酸B. 尿素C. 肌酐D. 氨36.血浆中直接发挥生理作用的钙是A.草酸钙B. 柠檬酸钙C.氢氧化钙D. 离子钙37.正常人血浆中[Ca]⨯[P]的乘积以mg/dl表示时为A.20-25B.25-30C. 30-35D. 35-4038.升高血钙降低血磷的激素是A.降钙素B.醛固酮C.甲状腺素D. 甲状旁腺素39.测定血清尿素氮含量的意义是提示A.肝脏功能B. 肾脏功能C. 胰腺功能D. 心脏功能40.正常时，肾小球滤过率增加的主要因素是A.血浆胶体渗透压的升高B. 血浆晶体压的升高C.肾小囊内压的升高D. 肾血流量的增加41.二乙酰肟法用于检测血清哪种物质A.尿素氮和氨B.尿素氮C.尿素氮和多肽D. 尿素氮和铵盐42. 肝硬化时，血清蛋白质电泳图谱出现特征的A.宽白蛋白带B.β-γ桥C. 宽β带D. α-β桥43. 血浆中含量最高的是哪一种胆红素？A游离胆红素 B.结合胆红素 C. δ-胆红素 D. 未结合胆红素44. 血浆中胆红素的主要来源是A.血红蛋白分解B.肌红蛋白分解C. 细胞色素分解D. 过氧化物酶分解45. 在细胞外液中含量最多的阳离子是A. Ca2+B. K+C. Na +D.Mg2+46.正常成人血钙水平相当恒定。

临床微生物学检验技术考试题库及答案(一)

临床微生物学检验技术复习练习试题绪论选择题A 型题（只选一个最佳答案）1.细菌属于原核细胞型微生物的主要依据A 单细胞，结构简单B 原始核，细胞器不完善C 二分裂方式繁殖D 有细胞壁E 对抗生素敏感2.属于非细胞型微生物A 细菌B 病毒C 衣原体D 真菌E 立克次体3．第一架观察微生物的显微镜放大的倍数A 200倍B 266倍C 500倍D 366倍E 1000倍4．不属于原核细胞型微生物的是A 螺旋体B 衣原体C 支原体D 真菌E 放线菌5．首次使用固体培养基的科学家是A 琴纳(Edward Jenner)B 巴斯德 (Louis Pasteur)C 伊凡诺夫斯基(Iwanovsky)D 列文胡克(Leewenhoek)E 郭霍(Robert Koch)6．微生物特点描述哪项错误A 形体小，结构简单B 肉眼看不见的低等生物C 分布广，种类多D 繁殖快，代谢强E 不易发生变异B型题（每题只选一个最佳答案，备选答案可重复被选）A 法国的巴斯德B 德国的郭霍C 俄国的伊凡诺夫斯基D 中国的汤飞凡E 荷兰的列文胡克1.最早观察到细菌2.创用固体培养基分离细菌3.病毒发现起重要贡献的是4.狂犬病疫苗、炭疽病疫苗研制者5．首先证实有机物发酵和腐败是由微生物引起6．首先成功地分离出沙眼衣原体7.结核杆菌、炭疽芽胞杆菌的发现者X型题（选2个以上答案）1.属于原核细胞型微生物A 细菌B 病毒C 衣原体D 真菌E 立克次体2．微生物与人类的关系A 大多数微生物可导致人发病B 微生物可以制造菌肥和杀死害虫，促进农作物生长C 微生物可以产生多种抗生素D 微生物可为基因工程提供必不可少的工具酶和载体系统E 病原微生物可以引起人和动物发病填空题1．微生物的特点：；；；。

2．原核细胞型微生物仅有原始核质，无、；缺乏，只有核糖体。

名词解释：微生物、微生物学问答题1．简要列举微生物学发展史上重大贡献的人物及其发现（或理论）。

2．试述微生物的分类和特点。

2017年临床检验技师考试生化检验第五章重要考点(1)

2017年临床检验技师考试生化检验第五章重要考点（1）诊断酶学本章考点：1.血清酶(1)分类、生理变异与病理生理机制(2)酶活性与酶质量测定方法及其评价(3)同工酶及其亚型测定的临床意义2.血清酶活性检测技术(1)酶活性概念和表示方法(2)酶活性测定方法分类、原理、优缺点及应用(3)影响酶作用的因素(4)工具酶的概念、代谢物测定中常用的指示反应3.常用血清酶及同工酶测定的参考值及临床意义(1)肌酸激酶及同工酶和其亚型(2)乳酸脱氢酶及同工酶(3)氨基转移酶及同工酶(4)碱性磷酸酶及同工酶(5)谷氨酰基转移酶及同工酶(6)淀粉酶及同工酶(7)酸性磷酸酶及同工酶4.代谢物酶法测定第一节血清酶一、血清酶的分类根据酶的来源及其在血清中发挥催化功能的情况，可将血清酶分为两大类。

(一)血浆特异酶在血浆中发挥特定催化作用的酶。

如凝血酶、胆碱酯酶(CHE)、脂蛋白脂肪酶、铜氧化酶等。

它们大多数在肝内合成，在血浆中的浓度甚至超过器官细胞内浓度。

有的可以作为肝功能试验的一部分。

血浆特异酶活性的改变，除了反映血液功能外，还反映来源器官的功能。

(有少部分酶在细胞合成后分泌到血液中行使其功能，如凝血因子及有关的纤溶因子。

它们以酶原状态分泌人血，在一定的条件下被激活，引起相应的生理或病理变化。

)(二)非血浆特异酶在血浆中浓度很低，且无功能，分为两种。

1.分泌酶：来源于消化腺或其他外分泌腺的酶。

如α-淀粉酶(AMY)、前列腺酸性磷酸酶(ACP)、脂肪酶(LPS)、胃蛋白酶原、胰蛋白酶原、ALP等。

正常体液中外分泌酶活性低而稳定，不发生催化作用。

在血液中的浓度和其分泌腺体的功能活动和疾病有关，来源增加或排泄受阻时，血浆中此类酶活性增高。

例如，急性胰腺炎时，血淀粉酶就会升高。

2.代谢酶：(细胞酶)在细胞内发挥催化功能的酶。

正常时这些酶存在于组织细胞中，血浆中酶活性很低。

细胞内、外浓度差异悬殊。

当酶来源的组织细胞发生病变，细胞膜通透性增加或细胞坏死时，细胞内酶大量进入血浆，导致血浆酶活性显著增高。

实验1 双缩脲法测定血清总蛋白

全国高等医药院校医学检验专业规划教材
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临床生物化学检验实验指导（第二版）
实验1 双缩脲法测定血清总蛋白
临床意义
1．血清总蛋白浓度增高（1）血浆浓缩
凡体内水分的排出大于摄入时，均可引起血浆浓缩。如急性脱水（如呕吐、腹泻、高烧等），外伤性休克（毛细血管通透性增大），慢性肾上腺皮质功能减退（尿排钠增多引起继发性失水）。
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蛋白标准液
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0.10 0.10
蒸馏水
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双缩脲空白试剂－
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5.0
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双缩脲试剂
5.0
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5.0
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5.0
全国高等医药院校医学检验专业规划教材
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临床生物化学检验实验指导（第二版）
实验1 双缩脲法测定血清总蛋白
计算
血清总蛋白(g/L) AU ARB AB 蛋白标准液浓度 As ARB ASB
当肝功能严重受损时，蛋白质合成减少，以清蛋白降低最为显著。
（4）蛋白质丢失
严重烧伤，大量血浆渗出；大出血；肾病综合征尿中长期丢失蛋白质；溃疡性结肠炎可从粪便中长期丢失一定量的蛋白质。
全国高等医药院校医学检验专业规划教材
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临床生物化学检验实验指导（第二版）
实验1 双缩脲法测定血清总蛋白
注意事项
这种紫红色络合物在540nm处有明显吸收峰，其吸光度与血清蛋白含量在一定范围内呈正比关系，经
与同样处理的蛋医药院校医学检验专业规划教材
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临床生物化学检验实验指导（第二版）
实验1 双缩脲法测定血清总蛋白
试剂与器材

生物化学与分子生物学基本试验试验一蛋白质的盐析与透析试验

生物化学与分子生物学基本实验实验一蛋白质的盐析与透析实验目的了解蛋白质的盐析与透析的原理和意义实验原理血清中的蛋白质，用盐析的方法，可以分离出清蛋白、α、β球蛋白和γ-球蛋白三种。

详情见盐析技术。

另选择适宜孔径的半透膜，使蛋白质分子被截留，小分子的中性盐透出而达分离的目的。

但透析时正负离子透过半透膜的速度不同，如硫酸铵中的NH4+的透出较快，膜内SO42-剩余而生成H2SO4，其酸度足以使蛋白质变性，因此，除盐时开始应对0.14 mol·L-1的NH4OH透析。

本实验分别用双缩脲试剂和Nessler试剂检验蛋白质和NH4+的存在。

仪器材料和试剂药品仪器材料：（1）离心管、试管及试管架。

（2）2m1刻度吸管、玻璃棒、小烧杯。

（3）透析袋。

（4）离心机。

试剂药品：（1）饱和硫酸铵溶液。

（2）硫酸铵粉末。

（3）双缩脲试剂称取CuSO4·5H2O 2.5g，加蒸溜水少许，微热溶解后稀释至100ml。

另取酒石酸钾钠（NaKC4H4O6·H2O）10g和KI 5g，溶于500ml蒸馏水中，再加入20％氢氧化钠300ml，混匀后，慢慢加入硫酸铜溶液中，加蒸馏水至1000ml。

此液可长期储存。

（4）Nessler试剂称取150g碘化钾置于三角烧瓶中，加蒸馏水100ml使之溶解，再加入110g碘，待完全溶解后加140g～150g汞，用力振摇10分钟左右，此时产生高热，须将三角烧瓶放入水中继续摇动，直至棕红色的碘转变成带绿色的碘化汞钾为止。

将上清液倾入2000ml容量瓶中，并用蒸馏水洗涤瓶内的沉淀数次，将洗涤液一并倒入容量瓶内，用蒸馏水稀释至刻度，此为贮存液，储于棕色瓶中备用。

取贮存液150ml，加10％氢氧化钠700ml，混匀后加蒸馏水150ml，混匀，此为应用液，储于棕色瓶中，如混浊可过滤或静止数天后取上清液使用。

本试剂需有适宜的pH值，调节至用1 mol/L盐酸20ml滴定时，需本试剂11.0ml～11.5ml时为宜。

检验资格考试

1、关于临床生物化学检验，下列哪项描述是正确的？
A. 主要用于检测人体内的微生物
B. 是通过物理学方法分析血液成分
C. 可以评估人体的代谢状态和器官功能
D. 仅用于诊断遗传性疾病
（答案）C
2、在进行尿液分析时，下列哪项指标升高可能提示肾功能受损？
A. 葡萄糖
B. 蛋白质
C. 酮体
D. 胆红素（正常范围内）
（答案）B
3、免疫学检验中，ELISA技术主要用于检测：
A. 血液中的电解质浓度
B. 特异性抗体或抗原
C. 红细胞的数量
D. 尿液中的葡萄糖含量
（答案）B
4、关于血液学检验，下列哪项不是血常规检查的内容？
A. 白细胞计数
B. 红细胞沉降率
C. 血红蛋白浓度
D. 血小板计数
（答案）B
5、在微生物学检验中，培养法的主要目的是：
A. 直接观察微生物形态
B. 分离并鉴定微生物种类
C. 测量微生物大小
D. 评估微生物的致病性
（答案）B
6、关于分子生物学检验，PCR技术主要用于：
A. 检测基因突变
B. 测定蛋白质含量
C. 分析细胞形态
D. 评估药物疗效
（答案）A
7、在进行血清电解质检验时，下列哪项电解质浓度异常可能导致心律失常？
A. 钠离子
B. 钙离子
C. 氯离子
D. 镁离子（轻微变化）
（答案）A
8、关于临床免疫学检验中的补体测定，下列哪项说法是错误的？
A. 补体水平可反映机体免疫功能状态
B. 补体缺乏可能与某些自身免疫病相关
C. 补体升高一定意味着机体存在感染
D. 补体测定有助于某些疾病的诊断和鉴别诊断
（答案）C。