2018CTC-分子病理
2018年肿瘤基因检测专题分析报告
2018年肿瘤基因检测专题分析报告2018年3月正文目录一、创新审评加快，有望惠及肿瘤基因检测 (4)二、击瘤勇进，液体活检及Cancerpanel商业价值巨大 (6)2.1、中国的抗癌负担逐年加大 (6)2.2、液体活检：技术优势明显，临床需求广阔 (8)2.3、Cancerpanel：未来的应用前景广阔 (12)三、FDA审评破冰或将加速国内产品上市进程 (14)3.1、液体活检：罗氏产品获批进行伴随诊断 (14)3.2、基于NGS平台的大型Cancerpanel已获放行 (17)四、国内有望迎来审评收获期 (18)4.1、EGFR液体活检市场空间广阔 (18)4.2、液体活检：关注Super-ARMS的发展潜力 (19)4.3、已有多款Cancerpanel基因测序产品进入绿色通道 (21)五、风险因素 (21)图表目录图1：2014-2017年进入创新医疗器械特别审批通道产品分类统计 (4)图2：IVD领域进入绿色通道的产品数量 (5)图3：IVD领域获批进入绿色通道的领域细分 (5)图4：我国2010-2015年医院出院肿瘤患者数量（万人） (7)图5：我国2010-2015年医院出院恶性肿瘤患者数量（万人） (7)图6：2015年国内预计癌症总发病人数(万) (8)图7：2015年国内预计癌症总死亡人数(万) (8)图8：液体活检有望筛检出早期癌症从而显著降低患癌风险 (9)图9：液体活检的临床应用前景 (10)图10：不同疾病个性化治疗的潜力：肿瘤是NGS应用中最具潜力和实现可能性的疾病 (13)图11：EpigenomicsAG的EpiproColon试剂盒 (16)图12：罗氏cobas?EGFRMutationTestv2 (16)图13：艾德生物的SuperARMS平台相较ARMS灵敏度提升明显 (20)图14：血浆与组织配对标本中EGFR突变状态比较(N=109) (21)一、创新审评加快，有望惠及肿瘤基因检测创新是保证长期成长的驱动力，为了鼓励创新、促进新技术的推广应用，CFDA在2014年初发布了《创新医疗器械特别审批程序（试行）》，对符合相应条件的医疗器械开启“绿色通道”，在标准不降低、程序不减少的前提下，对创新医疗器械予以优先办理。
2018 版 CSCO 肺癌指南更新主要内容
2018版CSCO肺癌指南更新主要内容2018年4月21日，中国临床肿瘤学会（CSCO）指南会在南京召开。
原发性肺癌诊疗指南是CSCO发布的第一个指南，2016年首次发布，本次已迎来第2次更新。
整个指南凸显了精准医学的特点，旨在推进中国肿瘤治疗的规范化。
大会上，北京大学肿瘤医院的林冬梅教授、天津大学肿瘤医院的岳东升教授、中国医学科学院肿瘤医院的王志杰教授及广东省人民医院的周清教授分别对指南的更新进行了解读。
那么，2018版《CSCO原发性肺癌诊疗指南》中究竟更新了哪些内容？又是基于哪些证据呢？让我们一起来看一下。
分子分型部分的更新指南新增推荐相对早期（I〜IIIA期）非小细胞肺癌（NSCLC）进行分子检测（1B类证据），主要基于ADJUVANT和EVAN硏究中靶向药物辅助治疗获益的数据。
推荐对于I〜IIIA期NSCLC、N1/N2阳性的非鳞癌患者进行EGFR 突变检测（1B类证据）。
对于晚期NSCLC患者，除了过去推荐的EGFR和ALK检测，本次更新增加了ROS1重排的检测推荐。
EGFR突变的检测可采用ARMS或SuperARMS法（1类证据）。
ALK融合基因的检测可采用Ventana免疫组化、FISH或RT-PCR的方法（1类证据）。
ROS1融合基因的检测可采用RT-PCR或FISH的方法（1B类证据）随着EGFRTKIs继发性耐药和三代TKI的出现，推荐对EGFRTKIs耐药患者进行EGFRT790M检测。
组织学检测为金标准，在组织不可获取时，血液ctDNAEGFRT790M检测可作为有效补充（1A类证据）。
检测方法上，除了CFDA批准的试剂盒外，也可基于中国现有的检测平台使用Cobas、ddPCR、NGS等方法，并以血液检测作为组织检测的补充。
但是融合基因的血液检测技术尚不成熟，故仍应尽可能进行组织学检测。
而由于NGS的成本高，检测规范性、可靠性欠佳，指南将其列为可推荐但推荐级别不高。
基于病理类型、分期和分子分型的综合治疗部分的更新1.NSCLC治疗的更新（1）IA、IB期原发性NSCLC的治疗仍推荐进行解剖性肺叶切除（1类证据）+肺门纵隔淋巴结清扫术（2A类证据）。
非小细胞肺癌组织起源分子病理分类及其临床意义
非小细胞肺癌组织起源分子病理分类及其临床意义王娜娜;江楠;杨晓庆;房磊;孙青【摘要】背景与目的近年来对肺癌研究的巨大发展,肺癌的病理学分类不断推陈出新.本研究旨在研究和验证非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)组织起源分子病理分类的临床价值和意义.方法通过免疫组织化学双染法对105例肺癌标本及正常肺组织进行P63/NapsinA、TTF-1/CK7标记,结合肿瘤免疫特征、组织学特点及正常肺组织的免疫特征,提出了NSCLC组织起源分子病理分类体系,将NSCLC分为支气管上皮癌、细支气管肺泡癌、肺泡细胞癌及分泌腺癌,并分析本分类与表皮生长因子受体(epidermal growth factor receptor,EGFR)突变及临床预后的关系.结果本分类体系下不同亚型NSCLC中EGFR突变及其类型具有相对特异性;生存分析表明该分类有助于NSCLC患者预后情况的判断.结论本研究提出的基于组织起源的NSCLC分类体系具有较好的临床实用价值.【期刊名称】《中国肺癌杂志》【年(卷),期】2018(021)007【总页数】6页(P530-535)【关键词】肺肿瘤;组织起源;病理分类;EGFR【作者】王娜娜;江楠;杨晓庆;房磊;孙青【作者单位】250000济南,山东大学附属千佛山医院病理科;250022济南,山东省立医院西院病理科;250000济南,山东大学附属千佛山医院病理科;250000济南,山东大学附属千佛山医院病理科;250000济南,山东大学附属千佛山医院病理科【正文语种】中文肺癌是目前世界范围内死亡率最高的恶性肿瘤[1]，其中非小细胞肺癌（non-small cell lung cancer, NSCLC）约占其总数的85%[2-4]，成为严重威胁人们生命健康的社会问题。
现有的NSCLC病理分类依据是建立在形态和结构基础上的2015版世界卫生组织（World Health Organization,WHO）肺部肿瘤的组织病理学分类，由于肺组织本身结构复杂，癌组织又存在不同程度的异质性，在临床病理诊断中往往会遇到部分含混不清且难以分辨者，直接影响治疗方案的正确选择。
皮肤鳞状细胞癌NCCN 指南 2018 年第 2 版
本《NCCN 指南®》是作者依据他们对当前认可的治疗方法的看法，对证据和共识所作的陈述。欲参考或应用《NCCN 指南》的临床医师应 根据个人具体的临床情况做出独立的医疗判断，以决定患者所需的护理和治疗。美国国家综合癌症网络® （NCCN®）对于指南内容、使用 或应用不做任何陈述或保证，对以任何形式使用或应用这些内容不负任何责任。《NCCN 指南》的版权归美国国家综合癌症网络®所有。保 留所有权利。未经 NCCN 明文允许，不得以任何形式复制本《NCCN 指南》及其插图。© 2018。
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临床试验：NCCN 认为任何肿瘤 患者 都可以在临床试验中得到 最佳处理，因此特别鼓励肿瘤患 者参加临床试验。
若要在网上查找 NCCN 成员机构 进行 的临床试验，请点击这里： /clinical_trials/physician. html。
NCCN 对证据和共识的分类：除 非另有说明，所有建议均为 2A 类。
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NCCN 肿 瘤 学 临 床 实 践 指 南（ NCCN 指 南® ）
皮肤鳞状细胞癌
2018 年第 2 版—2017 年 10 月 5 日
继续
2018 年第 2 版，2017 年 10 月 5 日。©美国国家综合癌症网络，2017 年，保留所有权利。未得到 NCCN®明确书面许可，不得以任何形式对本《NCCN 指南®》及插图进行复制。
术的禁忌，则考虑多学科肿瘤会诊并讨论化疗或临床试验” ►脚注“p”修订为：“考虑多学科会诊以讨论化放疗或临床试验。部分患者放疗时可辅以化疗。参见《NCCN 头颈部肿瘤指南》。” ►脚注“q”修订为：“如果疑似大神经受侵，可考虑行增强 MRI 检查兴趣区以评估病变范围，排除头颈部肿瘤颅底侵犯或颅内浸润。”
扩增型CTC检测临床应用价值探讨PPT课件
Nature
Reviews
Clinical
5
Oncology (2015)
再次肿瘤活检对进展期肺癌至关重要
NEJM：四次活检带来ALK阳性长期生存
ALK阳性，女性，52岁，四次活检，OS48个月
Alice T shaw. 2015 NEJM
第一次RTB
66%
第二次RTB
20.1%
第三次RTB
11.4%
Nature,
3
2016,
540.
肿瘤转移理论
早期转移理论：并行进展模型
肿瘤在原发灶形成之前播散，或者它的播散存在于肿瘤发生发展的全过程，并与原发
灶独立、平行的进化
CA
Klein.
Nature
Reviews
Cancer,
2009,
9(4):302-12；osseini
H,et
al.
Nature,
4
循环肿瘤细胞
循环肿瘤细胞 (Circulating Tumor Cell, CTC）
在肿瘤形成和进展过程中从原发灶或转移灶脱落进入血液循环的肿瘤细胞，能够真实反映肿瘤负荷。
循环肿瘤细胞代表体内原发灶或转 移灶的存在，或癌前病变细胞的存在， 是肿瘤发生发展的直接证据，真实反映 肿瘤负荷及肿瘤特征。
Alix-Panabières C, Pantel K. Clin Chem. 2013 Jan; 591(01):110-8.
2016,
540.
仅根据初诊时标本指导后续治疗可能产生偏歧
肿瘤细胞表型/标志物的转变 - 原发灶、转移灶表型不一致 - 治疗过程中分子标志物的转变 - 需要将追踪肿瘤生物学贯穿于治疗过程
1.Annu. Rev.
2018年CAR-T治疗行业深度研究报告
CAR-T 细胞治疗：乐观前景下挑战与机遇并存 ................................................................................................................... 7 安全性是焦点 .......................................................................................................................................................................... 7 实体瘤治疗遇多重挑战 .......................................................................................................................................................... 8 新型 CAR-T 设计改造目标：减少脱靶效应&增强疗效是核心 ............................................................................................ 8 专利纷争持续不断 .................................................................................................................................................................. 9 如何监管是难点 .................................................................................................................................................................... 10 商业化生产遇挑战 ................................................................................................................................................................ 10
肿瘤病理诊断的那些事
肿瘤病理诊断的那些事作者：范冶来源：《西部论丛》2017年第09期近些年来临床检验（PCR、肿瘤相关抗原检测、疾病基因检测）与影像学检查（CT、MRI、PET-CT）有了很大的发展，尤其是DNA微阵列技术对肿瘤的分类及认识提供了可喜的新消息，但由于临床检验与影像学检查受相关因素的影响，对于疾病的诊断和确诊率仍存在一定的失误现象，为了从根本上提升总体的诊断结果，许多临床诊断和影像学检查必须通过病理诊断结果，才能更好的确定患者的病情，降低诊断的失误率。
肿瘤的病理检查对于良恶性质的判定、肿瘤的发展以及后续治疗方法都提供了重要依据，为了提高居民对肿瘤病理诊断的认识，那今天我们给大家简单科普一下肿瘤病理的诊断技术以及肿瘤病理分类的变化。
一、肿瘤病理诊断技术1.免疫组化技术是病理科医生在常规工作中不可缺少的检验技术之一，主要的原因是：它能够通过病理标本有效鉴别良性和恶性肿瘤以及肿瘤的发病部位，并且通过免疫组化技术辨别各种圆细胞、梭形细胞，确定肿瘤的形态，诊断肿瘤的分期和发展的程度，为临床治疗提供确切的依据，此外，免疫组化技术还在软组织肿瘤、神经系统肿瘤以及其他系统肿瘤诊断中具有同样的作用。
在小活检病理检查中免疫组化技术还能够诊断体积较小、且不易诊断的微小细胞癌，对疾病的治疗和预后起着至关重要的作用。
与此同时，免疫组化技术还可以通过对乳腺癌激素受体的检测，将基因产物中的抗体还原成分子，为肿瘤患者的后期疾病的康复提供主要依据。
2.分子病理学主要采用PCR、滤膜杂交以及原位杂交等技术将肿瘤基因内的染色体重新排列，对于肿瘤的检测、判断和预后起到重要的帮助。
显微切割技术主要是在显微镜下来观察从组织切片上切下小片的组织细胞，并通过将细胞分离和归类的方法，来更加细化的研究细胞分型，对于疾病的诊断具有重要意义。
组织芯片又称组织微阵列，它能根据诊断的需要将多个小组织片整齐的排列在固定相载体上，从而制成微缩的组织切片，在应用效果上，可有效的将基因、蛋白水平的研究与组织形态的结合，使单个实验标本变成多个实验标本，在一定程度上增加实验的研究次数，从根本上降低实验误差，提高诊断的效果。
病理分期ajcc(2018)pt1aNOMx
病理分期ajcc(2018)pt1aNOMx病理分期AJCC（2018）PT1ANOMx是2018年AJCC某种肿瘤类型的分期系统，即病理分期。
最初由美国洛克菲勒大学的肿瘤病理学家John C Deimos于1974年创建，简称AJCC。
在此之前，不同临床服务机构对癌症的分期方式不同，而AJCC可以统一临床应用标准，消除差异，分期系统目前用于4个主要肿瘤类型，包括宫颈癌，膀胱癌，食管癌和胃癌等。
PT1ANOMx病理分期是一套AJCC病理分期不将组织细胞级，只对肿瘤的性质和特性进行火属性的分期。
此类病理分期定义了癌症的T（Tumor）字母型分期和N（Nodal）字母型分期，T字母型分期是指肿瘤的大小和形态以及是否已形成淋巴结或肿瘤的形成，而N节点型分期则是指淋巴结内的肿瘤转移情况。
根据T字母型分期，PT1A病理分期表明肿瘤最大径小于5 cm，且没有局部侵犯性。
而N字母型分期表明，NOMx表示没有淋巴结转移。
根据PT1ANOMx的病理分期，医生可以更准确的诊断患者的肿瘤类型及其病情，并并用于患者的临床治疗规划。
诊断出PT1A NOMx病理分期的患者，可以根据治疗方案来控制肿瘤生长。
一般而言，pt1A NOMx病理分期的患者可以考虑手术切除来治疗肿瘤，以获得良好的预后。
但是，根据患者每个个体的具体情况，其他治疗方法，如手术+化学治疗，放疗等可以考虑。
综上所述，PT1ANOMx病理分期是2018年AJCC某种癌症类型的分期系统，它对肿瘤的大小、形态以及淋巴结内的肿瘤转移情况进行火属性的分期，可以帮助医生准确的诊断患者的肿瘤类型及其病情，并用于患者的临床治疗计划。
治疗方案一般是根据患者的实际情况进行调节，治疗PT1A NOMx病理分期的患者的治疗上，手术切除是可以考虑的治疗方法，也可以根据需要，考虑其他治疗方法，获得更好的治疗效果。
2018胃癌NCCN临床实践指南更新及解读
2021/3/26
6
6.病理检查原则和生物标志物检测原则
该章节进行了大幅度的修改，主要增加了“微卫星不稳定（MSI） 或错配修复（MMR）检测”和“PD-L1检测”的推荐。
●微卫星不稳定（MSI）或错配修复（MMR）检测
►对于适合接受PD-1抑制剂治疗的局部晚期、复发或存在远处转移 的胃癌患者，应考虑进行MMR或MSI检测。检测标本为福尔马林固 定、石蜡包埋（FFPE）的组织，结果按结直肠癌标本指南以“MSIH或错配蛋白修复缺陷”进行报告。参见NCCN遗传/家族性高风险 评估指南：结直肠癌。 MMR或MSI检测只能在美国临床实验室改进 法案修正案（CLIA）认证的实验室进行。
►治疗选项“给予氟尿嘧啶类药物（氟尿嘧啶或卡培他滨），接着 行氟尿嘧啶为基础的放化疗，然后再给予氟尿嘧啶类药物（氟尿嘧 啶或卡培他滨）（1类证据）”新增了适应症的说明：如果淋巴结 清扫未达D2。
►治疗选项“如果初始手术做了D2淋巴结清扫，行化疗”的证据/监测
2●021/P3/2D6 -L1检测
7
7.遗传风险评估原则
●对遗传性弥漫型胃癌的随访建议做了修改，修改后的内容为： “对于CDH1突变携带者，建议在18岁-40岁进行预防性全胃切除术。 在行预防性全胃切除术之前有指征进行基础的内窥镜检查。”
原2017.5版的指南，对于该类患者，建议行预防性胃切除和手术前 的基础内窥镜检查及随机多点活检，新版指南明确了进行全胃切除。
●对于接受全胃切除术的患者，特别强调了术后应注意监测营养缺 乏（如：B12和铁）。
●对于p II/III期或yp I-III期（接受新辅助治疗±辅助治疗）的患者， 添加了如考虑行PET-CT监测随访应根据临床指征而定的说明。
2021/3/26
嗜血细胞综合征诊治中国专家共识2018
由于触发因素不同，分为“原发性”和“继发性” 两大类 1.原发性：一种常染色体或性染色体隐性遗传病。 2.继发性：由感染、肿瘤、风湿性疾病等多种病因 启动免疫系统活化机制所引起的一种反应性疾病。
根据缺陷基因特点分为以下三类： 1.家族性HLH（FHL）：共有5个亚型，包括FHL1、 FHL-2、 FHL-3、 FHL-4、 FHL-5。 2.免疫缺陷综合征相关HLH：主要包括Grisceli综 合征2（GS-2）、Chediak-Higashi综合征1 （GHS-1）和Hermansky-Pudlak综合征II （HPS-II）。 3.EBV驱动HLH：X连锁淋巴组织增生综合征 （XLP），包括XLP-1和XLP-2.
诱导治疗(HLH-94方案详解续)
•维持治疗（9-52周）： CSA:5-6mg /kg .d（维持谷浓度200ng/L） Dex: 每2周用初治量冲击3天 VP-16 :150mg/m2，每2周一次 •04HLH治疗方案： 与94方案基本一致，但CSA从第一天就开始
鞘内注射甲氨蝶呤和地塞米松： 年龄﹤1岁，6mg/2mg（MTX/Dex）； 1-2岁，8mg/2mg （MTX/Dex）； 2-3岁，10mg/4mg （MTX/Dex）； ﹥3岁，12mg/5mg （MTX/Dex）。 每周鞘内注射持续到中枢神经系统（临床和CSF指 数）恢复正常至少1周后。
HLH患者常合并感染和多脏器功能受累。支持治疗 包括预防卡氏肺孢子虫肺炎及真菌感染、静脉补充 免疫球蛋白和防范中性粒细胞减少症，维持血小板 计数在50× 109/L以上，防止自发性出血，严密监 测脏器储备功能，并给予对症支持治疗。
疗效评价主要指标包括sCD25、铁蛋白、血细胞计 数、三酰甘油、嗜血现象、意识水平（有CNSHLH患者） 1.完全应答：上诉指标均恢复正常范围。 2.部分应答：≧2项症状或实验室指标改善25%以上， 个别指标达到以下标准： ①sCD25水平下降1/3以上； ②铁蛋白和三酰甘油下降25%以上； ③不输血情况下：中性粒细胞﹤0.5× 109/L，需上 升100%并﹥500× 109/L并恢复正常； ④ALT﹥400u/L者，需下降50%以上。
医学教育
医学教育肺癌中循环肿瘤细胞的检测2012-11-26 14:55 来源：国际肿瘤学杂志作者：夏凡等肿瘤转移是一个多阶段、多步骤的复杂过程。
存在于原发瘤和转移瘤之外的肿瘤细胞统称为游离肿瘤细胞，其中进入血流的又称循环肿瘤细胞circulating tumor cell，CTC）。
Ashworth 首次报道在患者外周血中发现类似肿瘤的细胞，并提出CTC的概念。
1991年，Smith等首先应用反转录聚合酶链反应（reverse-transcription polymerase chain reaction，RT-PCR）检测实体肿瘤患者外周血中的肿瘤细胞。
近年来，敏感分子技术的发展使得分离、计数外周血CTC成为可能。
CTC在外周血中的数量稀少，大约每l05～107个单核细胞中才有一个CTC。
现有针对CTC的检测技术大致分为细胞富集技术和分析技术两类。
1 细胞筛选富集技术由于外周血中CTC的数量非常少，对血液样本中的目标细胞进行富集以提高其检出率，显得极为重要。
常见的细胞筛选富集技术如下。
1.1免疫磁性分选技术免疫磁性分选技术（immunomagnetic separation，IMS）采用纳米微粒制备成免疫磁珠，磁珠上的特异性抗体与靶细胞上的抗原结合成靶细胞-抗原抗体-磁珠复合物，其在磁力作用下发生移动，进而与别的物质分离，达到分离特异性细胞的目的。
美国Veridex公司研发的CellSearch是目前美国食品和药品管理局（Food and Drug Administration，FDA）惟一批准的CTC检测方法。
其基本步骤为：上皮细胞黏附因子（epithelial cell adhesion molecule，EpCAM）抗体磁珠用于捕获CTC，细胞角蛋白（cytokeratin，CK）荧光抗体识别上皮细胞、CD45抗体识别白细胞、4'6-二脒基-2-苯基吲哚（DAPI）荧光核染料用于生成细胞图像。
乳腺癌组织中p53与PD-L1表达的相关性
１������ １ 材料 １������ １������ １ 标本:收集郑州大学第一附属医院 ３８ 例确诊为乳腺 癌的组织标本ꎬ同时收取 ８ 例正常乳腺组织ꎬ所收组织均为 原发性乳腺癌ꎬ未接受放化疗ꎮ 该研究已获得本单位伦理委 员会的批准及受试者签署的知情同意书ꎮ 收集患者病理信 息ꎬ查询患者 ｐ５３ 阳性阴性表达情况并分组实验ꎮ １������ １������ ２ 主要试剂:( Ａｍｂｉｏｎ������ ) Ｔｒｉｚｏｌ������ Ｒｅａｇｅｎｔ ( Ｌｉｆｅ Ｔｅｃｈ￣ ｎｏｌｏｇｙ 公司) ꎻＰｒｉｍｅＳｃｒｉｐｔＴＭ ＲＴ ｒｅａｇｅｎｔ Ｋｉｔ、 ＳＹＢＲ Ｐｒｅｍｉｘ ＥＸ ＴａｑＴＭ Ⅱ[ 宝生物( 大连) 有限公司] ꎻβ￣Ａｃｔｉｎ 引物( 上海生工 生物工程 技 术 服 务 有 限 公 司) ꎻ ＰＤ￣Ｌ１ 引 物 ( Ｇｅｎｇｃｏｐｉｅｓ 公 司) ꎻ兔抗人 ＧＡＰＤＨ 单克隆抗体和兔抗人 ＰＤ￣Ｌ１ 多克隆抗 体( Ｃｅｌｌ Ｓｉｇｎａｌｉｎｇ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ 公司) ꎮ １������ ２ 方法 １������ ２������ １ ＲＴ￣ｑＰＣＲ 检测 ＰＤ￣Ｌ１ ｍＲＮＡ: 称取 ０������ １ ｍｇ 组织于 无酶离心管内ꎬ 加入 １ ｍＬ Ｔｒｉｚｏｌꎬ 使用组织匀浆机 研 磨ꎬ 室温静置５ ｍｉｎꎬ 将匀浆液全部转移至另一新的无酶离心 管中ꎬ 加 入 ２００ μＬ 氯 仿ꎬ 充 分 震 荡 混 匀ꎬ 室 温 静 置 １０ ｍｉｎꎬ ４ ℃ ꎬ １２ ０００ ｒ / ｍｉｎ 离 心 １０ ｍｉｎꎬ 吸 上 清 ４００ ~ ５００ μＬ至另一无酶离心管内ꎬ加入等体积异丙醇轻轻混匀ꎬ 室温静置 １０ ｍｉｎꎬ ４ ℃ １２ ０００ ｒ / ｍｉｎ 离 心 １０ ｍｉｎꎬ 弃 上 清ꎬ
一种基于体内CTC捕获的CellCollector技术对乳腺癌患者分层的价值
tissue engineering［J］.Tissue Eng Part C Methods，2009，15（2）：115-124.doi：10.1089/ten.tec.2008.0288.［16］Guyatt GH，Townsend M，Berman LB，et al.A comparison of Likert and visual analogue scales for measuring change in function［J］.J Chronic Dis，1987，40（12）：1129-1133.doi：10.1016/0021-9681 (87)90080-4.［17］Sung YT，Wu JS.The visual analogue scale for rating，ranking and paired-comparison（VAS-RRP）：A new technique forpsychological measurement［J］.Behav Res Methods，2018，50（4）：1694-1715.doi：10.3758/s13428-018-1041-8.［18］Wada E，Fukui M，Takahashi K，et al.Japanese orthopaedic association cervical myelopathy evaluation questionnaire （JOACMEQ）：Part5.Determination of responsiveness［J］.J Orthop Sci，2019，24（1）：57-61.doi：10.1016/j.jos.2018.08.015.（2021-09-13收稿2021-09-27修回）（本文编辑陆荣展）一种基于体内CTC捕获的CellCollector®技术对乳腺癌患者分层的价值王玲艳1，2，高春晖2，冯雪园2，崔鑫淼2，孙建云2，何向辉1△摘要：目的探讨基于CellCollector®技术捕获的循环肿瘤细胞（CTC）用于筛选转移风险较高的乳腺癌患者的可能性。
分子病理检测及其质量控制
预测因子：
内分泌治疗 CMF方案 蒽环类 紫杉类药物
HER2阳性患者相对耐药 HER2阳性患者相对耐药 对大剂量蒽环类相对敏感
相对敏感
靶向治疗靶点：
Her-2状态指导靶向治疗
2013 HER2 ISH 判断流程及主要更新点
双探针：
比值的阈值改变 同时考虑 HER2拷贝数
结合阈值和拷贝数两个参数
• 融合探针
• 分离探针
套细胞淋巴瘤的诊断
特征性 t（11；14） （BCL1-IGH） 95%， 少数： IGK，IGL
t (11;14) +
t (11;14) -
61M， （十二指肠球部、升结肠、横结肠） 活检组织小而破碎 IGH/CCND1 Dual Color, Dual Fusion Translocation Probe
分子病理基础和主要应用
根据疾病与基因异常的关系
肿瘤组织/细胞
分子生物学 分子遗传学
技术
DNA RNA 异常 蛋白
易感性/ 遗传性/ 毒副作用
诊断分型
靶向治疗
外周血 （有核细胞）
正常组织
手术标本 活检标本 细胞学标本
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预后判断
疗效监测 耐药机制
外周血 （CTC） （ctDNＡ）
侵袭性B细胞淋巴瘤的鉴别诊断
舌根部肿块，54F : DLBCL? Burkitt? DH-BL? 治疗和预后不同
MYC分离探针
BCL6分离探针
BCL2-IgH融合探针
MYC 基因易位 + BCL6 基因易位 + BCL2 基因易位 -
最后诊断: Double-Hit 淋巴瘤
实时荧光定量PCR检测马尔尼菲篮状菌病组织样本中菌载量的研究
实时荧光定量PCR检测马尔尼菲篮状菌病组织样本中菌载量的研究郑艳青;史娜娜;曹存巍【摘要】目的实时荧光定量PCR测定马尔尼菲篮状菌病组织样本中马尔尼菲篮状菌的载量.方法收集马尔尼菲篮状菌病患者的皮肤病理切片、淋巴结活检组织,提取总DNA,采用实时荧光定量PCR技术检测样本中马尔尼菲篮状菌载量.结果皮肤病理切片、淋巴结活检组织中马尔尼菲篮状菌载量阳性.病理切片平均菌载量3.01×104 copies (1.07×104～7.26×104 copies),淋巴结活检组织中马尔尼菲篮状菌载量4.68×105 copies.结论荧光定量PCR能高效检测皮肤病理切片、淋巴结活检组织中马尔尼菲篮状菌载量,对马尔尼菲篮状菌病诊断有一定的价值.%Objective To evaluate real-time fluorescence quantitative PCR (Qpcr) in determining the load of Talaromyces marneffei in different samples of talaromycosis marneffei (TSM).Methods The loads of Talaromyces marneffei in pathological slices,biopsy tissues from suspected patients of TSM were measured by means of Qpcr.Results The average load of Talaromyces marneffei in pathological slices was 3.01 × 104 copies (1.07 × 104 ～7.26 × 104 copies),the load of Talaromyces marneffei in biopsy tissues was 4.68× 105 copies.Conclusion This study showed that Qpcr determining the load of Talaromyces marneffei in pathological slices and biopsy tissues could be a useful method in TSM diagnosis.【期刊名称】《中国真菌学杂志》【年(卷),期】2018(013)002【总页数】4页(P71-74)【关键词】马尔尼菲篮状菌病;实时荧光定量PCR;分子诊断;病理切片;淋巴结活检组织【作者】郑艳青;史娜娜;曹存巍【作者单位】广西医科大学第一附属医院皮肤性病科,南宁530021;南宁市第四人民医院,南宁530023;广西医科大学第一附属医院皮肤性病科,南宁530021;广西艾滋病防治研究重点实验室,南宁530021;广西医科大学第一附属医院皮肤性病科,南宁530021;广西艾滋病防治研究重点实验室,南宁530021【正文语种】中文【中图分类】R519.8马尔尼菲篮状菌病 (talaromycosis marneffei，TSM)在东南亚、我国南方，尤其是广西、广东具有区域性流行[1]，TSM好发于免疫受损患者[2]，尤其是AIDS患者，据统计广西19%的AIDS患者合并T. marneffei感染，是仅次于结核的第二大机会性感染[3]。
益善生物:技术创新成就个体医疗先锋
益善生物：技术创新成就个体医疗先锋佚名【期刊名称】《广东科技》【年(卷),期】2018(027)001【总页数】4页(P56-59)【正文语种】中文[导语]成立于2006年的益善生物技术股份有限公司（以下简称益善生物），是我国首家专业从事个体化医疗检测产品研发、生产及推广的高新技术企业。
作为国际个体化医学联盟的首个中国成员，益善生物成为中国个体化医疗产业的开拓者和领军者。
目前，拥有国际化研发团队、领先的技术平台、现代化的研发及生产设施的益善生物，其自主研发的个体化医疗检测系列产品已达到国际领先水平。
《广东科技》：2006年11月，益善生物设立，填补了中国肿瘤个体化医疗行业的空白。
能否详细介绍一下个体化医疗的概念以及贵公司的经营与发展理念？益善生物：个体化医疗是指运用分子诊断技术对患者的样本进行靶标检测，筛选出最适合患者的药物，并结合临床信息制定最适合患者的治疗方案，使患者得到更合理和有效的治疗。
当前，个体化治疗已经成为世界医疗领域肿瘤临床治疗的主流。
公司成立以来，我们始终秉持着“专业、卓越”的企业理念，为个体化医疗提供系统解决方案，致力于提升人类健康水平。
在创新发展过程中，益善生物视人才为核心价值，强调人才培养，在共同推动个体化医疗产业发展的同时，实现企业与员工的共同成长，收获成就和荣誉。
《广东科技》：2011—2014年，益善生物独立研发的产品获得国家食品药品监督管理总局（CFDA）颁发的“医疗器械注册证”和欧洲CE认证证书，请谈谈你们的产品与市场上其他同类产品（包括进口产品）的区别？益善生物：益善研发的产品主要有Surplex®和Surevision FISH两个系列。
Surplex®基因突变检测系列产品是益善生物运用液相芯片技术平台开发的新型突变检测二代技术，拥有全球专利。
Surplex®基因突变检测通过单孔反应检测样本中多种基因突变，精准显示具体突变类型，克服了目前所有其他产品的诸多局限，实现了小样本、高通量的突变检测，既帮助临床医师确定患者是否适用相应靶向药物治疗，又能避免浪费宝贵的肿瘤样本。
18F-Alfatide-RGD PETCT显像在胶质瘤中的初步应用的开题报告
18F-Alfatide-RGD PETCT显像在胶质瘤中的初步
应用的开题报告
胶质瘤是一种恶性神经系统肿瘤，具有高度侵袭性和复发性。
目前
已经有多种方法用于胶质瘤的诊断和治疗，其中医学影像学是非常重要
的一种。
近年来，分子影像学的发展引起了越来越多的关注，包括PET、SPECT、MRI等技术，可以帮助医生更准确地识别肿瘤组织，优化治疗方案。
18F-Alfatide-RGD PETCT显像技术是一种新型的分子影像学技术，
通过定量分析肿瘤基因表达的变化，来判断肿瘤的恶性程度和治疗效果。
在本研究中，我们将探讨18F-Alfatide-RGD PETCT显像技术在胶质
瘤中的初步应用。
研究将采用前瞻性队列研究设计，招募符合条件的胶
质瘤患者进行分子影像学检查。
检查结果将与患者的临床表现和病理学
检查结果进行对比分析，评估该技术在胶质瘤的诊断和预后评估中的应
用前景。
本研究的研究成果将有助于更深入地了解18F-Alfatide-RGD PETCT
显像技术在胶质瘤中的应用价值，为临床医生提供更准确、可靠的诊断
结果和治疗方案，最终是为改善患者的生存质量做出贡献。
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•任何体检筛查都不具备肿瘤确诊的依据 •筛查阳性结果仅提示存在与肿瘤高度相关的异常细胞，提示专科就诊或周期性检查。 •在病理或临床确诊后，才可把这类循环异常型细胞定义为循环肿瘤细胞。
正常人体检筛查
适用人群：
临床表现为无肿瘤相关发生特征的正常人（包括：有肿瘤家族史或肿瘤易感 基因、不良生活习惯的高危人群等）
适用人群： 1） 拟行手术的肿瘤患者 2） 已行手术的定期接受复查患者
检测流程：
复发转移预测与监测
结果判定：
CTC数目≥2：提示存在潜在复发转移风险。需密切关注，周期性监测，并联 合其它诊断指标，必要时介入治疗等。 CTC数目持续≥2，并呈进行性递增状或数目较高时，提示复发转移风险加剧 或已发生。 CTC数目＜2：请参考现有临床标准诊治。
• CTC 数目＜ 2：提示本次未检测到CTC 或CTC 水平趋于正常，病灶性质为良性倾向， 可参考现有临床诊治标准进行综合判断。
注：本检测技术在正常人中参考值为0-1 个CTC/3.2mL 血液
复发转移预测与监测
CTC临床重点应用：二、复发转移预测与监测
• 根治性术后的无瘤状态是否
真的健康了？
• 如何及早发现复发转移？
便捷性
CTC只需采集少量外周静脉血便可进行检测，对人体基 本无创，取样便捷，适于动态连续性监测。
循环肿瘤细胞CTC临床应用方向
CTC临床重点应用：一、辅助诊断
判断病灶良恶性 无创便捷，发现早期隐匿转移
辅助传统TNM参考分期 提供适时诊断信息，实现精准治疗
辅助诊断
CTC检测应用于辅助诊断
诊断难
异常占位，良性? 恶性? 病灶位置不宜活检怎么办? 有创操作，是否有瘤细胞种植？
------染色体异常型循环异常细胞（Circulating Abnormal Cell,CAC）检测
理论基础：
•实体瘤形成之前，正常细胞→癌变细胞 •癌变细胞存在早期入血可能 •癌变首先是细胞基因水平DNA层面的变化 •染色体扩增是细胞病态的非正常表现，肿瘤病人中绝大部分存在这种拷贝数目变异 (CNV)的情况，CNV与肿瘤的发生、发展有直接的相关性。血液中存在非血源性 CNV细胞提示恶性病变或恶性转化。
Klein CA. Science, 2008, 321(5897): 1785-1787.
1 CTC概念 2 技术介绍 3 临床研究 4 送检要求
如何检测CTC？
CTC检测 路线
分离 富集
鉴定 识别
我们的选择
阴性富集
莱尔 1
CyttelTTMM -CTC
• 肿瘤细胞标志物任何理化特性－无依赖 • 肿瘤细胞大小、形态 －无影响 • 富集细胞自然状态－便于后续检测 • 血液/胸腹水/尿/脑脊液/灌洗液－通用性
检测流程：
疗效与耐药性评估
注：其他治疗流程类似，放疗建议在放疗前、结束全部放疗后至少一周以上时间进行检测。
结果判定： CTC计数进行性下降：提示治疗效果良好； CTC计数进行性上升：提示治疗效果不佳，可能产生耐药性； CTC计数波动或维持不变：建议参考现有临床标准评估疗效。
正常人体检筛查
其他临床应用：正常人体检筛查
影像学
血清学
可为影像学诊断提供 参考数据；费用低廉； 适用于大众筛查 没有高度特异性的标 志物； 假阳性、假阴性高 与生理病理相关性差
使肿瘤可视化 对患者的放射损伤； 依赖病灶的存在； 判断主观性； 可检测肿瘤的最小直 径为2-3mm
病理学
肿瘤定性诊断金标准 有创性检查； 受限于取材位置； 不能用于连续监测； 承担对已有病灶性质的 判断，缺乏对整体现状 及预后的综合评价；
无创便捷，定期监测 CTC手术前后变化指示复发转 移风险 较之影像学，可提早6个月发现 复发转移
复发转移预测与监测
CTC功能：
CTC作为对血液中即时存在的肿瘤细胞的反映，可评估根治性术后患者的复发转 移风险。同时，进行动态、周期性监测，通过CTC数目有无及其变化可适时监测 复发转移的发生，指导临床及早介入诊疗，使患者受益。
CTC检测优势性-液体活检
预知性
癌变细胞→肿瘤原发灶→转移灶，肿瘤细胞量的累积形 成质的变化，细胞水平的CTC的变化具有更早的对肿瘤 发生发展的预知性。
整体性
CTC是对原发灶和转移灶综合信息的反映，全面实时 反应了全身肿瘤发生发展以及整体的肿瘤负荷
直观性
不同于肿瘤血清标志物及ctDNA，CTC提供了肿瘤细胞 的直接证据，具有直观性。
胰腺癌
49.00% （单8）
75.49%
72.39% 70.3% 70.92%
（8+17） （8+17） （1+8） （8+3）
73.57% 72.07% 62.75% （7+8） （7+8） （单8）
※Cut-off值为2
1 CTC概念 2 技术介绍 3 临床研究 4 送检要求
现有诊断方法现状
疗效与耐药性评估
CTC临床重点应用：三、疗效与耐药性评估
治疗是 否有效
• 无效治疗副作用 • 高额费用
• 耽误病人宝贵救命时间
影像学评
价疗效的 局限性
用药过程 是否发生
• 宏观性指标
耐药
• 缺乏对瘤体生物活性的评价
• 是否发生耐药
• 原发灶和转移灶信息不一致
CTC检测应用于疗效评价及耐药性评估
无创便捷，适时监测 反应肿瘤生物活性的微观功能指标
禁忌症：
处于急性感染、发热期及环游骨髓增生异常综合征(MDS) 骨髓增生性疾病 (MPD) 未指定的血液系统疾病 （HDNOS）的人群不适用本检测。 此外，本检测对处于免疫抑制剂用药期的人群可能存在检测结果的假阳性。如 非必要，不建议使用。
检测流程：
正常人体检筛查
结果判定：
CAC 数目≥ 2：提示有异常细胞进入血液中，存在癌变可能。建议进一步进行肿瘤 标记物和影像学检查，若后续任意一项或两项异常，建议专科就诊； 若后续两项均正常，建议一个月后再次检测。CAC 并建议增加体检 频率，随时监测身体状况，保持合理健康饮食及生活习惯。
诊准难
肿瘤异质性的影响? 临床分期与病理分期不一致?
如何针对肿瘤时空信息变化提供
即时诊断信息?
辅助诊断
CTC功能：
对尚未完善病理诊断的患者，CTC 可联合影像学、血清学作为辅助判断病灶良恶性的指标。 同时,CTC是对原发灶与转移灶信息的全面反映，可弥补现有传统TNM 分期的不足，提示早 期微转移的存在风险，指导临床调整诊疗策略，制定更加合理的个体化诊疗方案（如进一 步筛查转移、拟定新辅助化疗、辅助化疗方案等。
阴性富集流程图
全亚型、高效率、非依赖
通用于绝大部分实体肿瘤、非血源性循环稀有细胞的富集
我们的选择
imFISH
imFISH技术将基因水平的FISH技术与蛋白水平的 免疫荧光染色技术相结合,是兼具核遗传信息及细 胞形态改变的精准CTC鉴定分析方法。
技术优势： ➢ 核酸水平稳定性、灵敏度高（80％） ➢ 引入CD45染色，提高特异性（97％) ➢ 细胞计数、核型分析、表型分析、分子分型
CAC 数目＜ 2：提示本次未检测到异常细胞或处于正常水平。
1 CTC概念 2 技术介绍 3 临床研究 4 送检要求
送检要求
采血：
➢ACD保养管（5mL）2管，采血完毕后立即颠倒混匀8次。
储存及运输：
➢室温（15-30℃），采血后24小时内进行检测处理，严禁剧烈振荡。
当日最高温度高于30℃时，需加冷冻冰袋，但标本需用海绵等包裹住放入泡沫箱中，避免标本直接接触 冰袋，且不能使标本低于10℃。
适用人群：
• 影像学发现异常占位且良恶倾向不明，或病灶位置不适宜活检的患者 • 无可观察病灶或影像学手段评价不一致（如PET-CT、MRI）的患者 • 需要考察是否存在隐匿微转移病灶或潜在转移风险的患者 • 需要对肿瘤细胞是否入血进行判断并提供证据支持治疗的患者
检 数目≥ 2：提示患者血液中存在恶性肿瘤细胞，体内怀疑存在恶性肿瘤病灶，存 在潜在转移风险或已发生远处转移。
一步到位 ➢ 细胞形态、遗传变异、表型变化、一目了然
遗传变异、高侵袭性CTC鉴别、计数、 分型和分析技术
方法学验证-临床实例
各癌种CTC检出分布（/3.2mL）
方法学验证-临床实例
各癌种CTC检出率（/3.2mL）
肺癌
80% （单8）
结直肠癌
71.96% （7+8）
鼻咽癌
乳腺癌
胃癌
肝癌
食管癌 前列腺癌 肾癌
循环肿瘤细胞CTC检测
云康·分子病理
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目录
1 CTC概念 2 技术介绍 3 临床应用 4 送检要求
1 CTC概念 2 技术介绍 3 临床应用 4 送检要求
什么是循环肿瘤细胞？
循环肿瘤细胞（Circulating Tumor Cell, CTC）是指由肿瘤原发灶 或转移灶脱落进入血液循环中的肿瘤细胞。
联合影像学更客观评价疗效 监测耐药发生
疗效评估、耐药性监测
疗效与耐药性评估
CTC功能：
CTC的动态变化可反映治疗效果。同时因其无创便捷的特性可对包括术前新辅助化 疗、术后辅助化疗、晚期放化疗、靶向治疗、生物免疫治疗等在内的各阶段治疗进 行随时连续监测治疗效果，不仅可以实时快速判断疗效，还可动态监测耐药发生。 适用人群： 1） 局部晚期，行术前新辅助化疗的患者 2） 根治性术后，行术后辅助化疗的患者 3） 早中晚期行放疗、化疗、靶向治疗、生物治疗、中西医治疗的患者
不合格样本：
➢ 血量不足样本； ➢ 凝块或溶血样本。