微生物标准操作流程

目录

生物安全柜操作规程及维护 (3)

实验室高压蒸气灭菌器操作程序 (6)

物体表面细菌监测 (8)

医护人员手指细菌监测 (9)

空气中细菌含量的监测 (10)

环境卫生学监测质控标准 (12)

使用中消毒剂与无菌物品保存液的质控程序 (13)

一次性医疗用品微生物监测 (14)

紫外线消毒质量控制程序 (15)

污水的细菌监测(总大肠菌群) (16)

正确洗手的手法 (18)

生物安全柜操作规程及维护

1.目的：

为了满足生物安全操作的要求，并且达到在操作时保护操作人员的目的，使细菌操作达到无菌操作的要求，便于操作的标准化。

2.原理：

通过使用空气超高过滤器（ULPA）的过滤，使仪器内部的空气洁净度达到100级，使细菌的一般操作限制在一个相对密闭的环境中，不但保护操作人员，还可满足操作的标准化。

3.工作条件：

环境温度：18－30℃相对湿度：<80%

安装的环境必须达到一定的洁净度；远离人员通道及有潜在干扰气流的位置；柜后及两侧各留30cm的空隙，顶部30-35cm空隙。

环境必须有良好的通风设备。

4、操作步骤：

生物安全柜的设置已经设置完全，如果需要重新设置请参看HFsafe生物安全柜使用说明。具体操作步骤为：

4.1将电源插头插入准备好的固定插座，连通电源。

4.2有系统管理员(即本室负责人)开启玻璃门门锁，并将总开关置于开位置“！”，此时系统开始上电。

4.3检查显示及按钮的各项功能，具体见后附注（注意：UV灯的测试除外，开启UV灯时必须将前玻璃门关闭）。

4.4当系统稳定后，对设备进行安全性检查。（检查项目包括：工作室平均垂直风速；工作室内可操作区域洁净度达到100级；设备的密封有没有被破坏。所有的安全检查项目中的洁净度建议由当地卫生防疫部门来进行尘埃粒子数、沉降菌和菌落数的检测，看是否符合其工作室的洁净度要求）。

4.5如果安全性测试通过，系统已经可以使用，请在《使用记录》上写下相应的信息。在使用时需要注意的是，操作必须在工作台板无孔区域进行，物品也必须放置于无孔区域。

4.6操作者应先把手臂放进安全柜内大约1分钟，以使柜子适应并且让气流扫过手臂手臂移入移出柜内应保持前门气流的连续性，应缓缓移入移出，并且方向和前门垂直；为使跨越前门的动作量降低，在实验开始前应把所需的物品放入柜子；柜子在开始工作前以及完成后至少要运行5分钟是，使柜子净化，以便于污染空气从柜内排出。实验操作方向应从清洁区到污染区，一般要求为左→右。

4.7 当工作完成后需要关机前，将试验使用的所有材料和其他物品从设备中取出。

4.8关闭前玻璃门前，需要维持气流循环一段时间（时间长短视所操作材料的危险性而定）。

4.9关闭风机，停止气流循环。

4.10每日使用后维护(见后面维护中的第一二步)。

4.11维护完成后，关闭电源开关。

4.12锁住前玻璃门，并如实填写《使用记录》。

5、仪器的维护：

5.1 基本保养：

5.1.1 清洁：在通常的情况下，清洁只需要用少量家用或商用的碗碟清洗剂，将它溶于水后直接擦洗，就可将设备表面的污染擦掉。请不要擦拭任何玻璃，以免产生摩擦。

5.2在使用过程中每日或每周的清洁:

5.2.1消毒（一般使用1000mg/L的次氯酸钠溶液）和清洁工作室

5.2.2 对操作面板进行消毒和清洗。

5.2.3用柔性的清洁剂或玻璃专用清洁剂清洗箱体外表面和玻璃。

5.2.4 对照说明书对设备的各种功能进行检查。

5.2.5 将本次工作记录下来。

5.3 月清洗：

5.3.1用清洁剂将所有外表面的尘埃清除。

5.3.2 对设备内部进行消毒处理。

5.3.3 对设备进行功能检验，并在通常使用时检查设备的安全。

5.3.4 将本次清洗记录下来。

5.3.5 每月必须对紫外灯进行照射强度检测。

5.4 每年维护：

5.4.1对设备进行安全性全面的检查，对设备进行维护。包括柜体防泄露、高效过滤器的完整性、人员保护能力、产品保护能力、下降气流流速、流入气流流速、负压、气流模式、警报和联锁等的检测。一般安全检测由仪器公司进行。

5.4.2 检查前玻璃门驱动装置的松劲程度。

5.4.3 检查紫外灯管。

5.4.4将本次维护记录下来。

5.5每两年更换日光灯管。

5.6 故障的维护处理：

当故障发生时必须停止一切操作，尽量维持设备内部空气的循环过滤，将正在进行的试验材料和工具全部取出并妥善管理，然后通知有关部门前来维修。每次仪器出现故障时必须填写故障登记表，注明故障情况及处理情况。常见的故障，原因及其处理方法见下表：

6.1 只有负责管理本设备的人员才有权关闭风机。

6.2只有经过培训和指导的人员才能操作本设备。

6.3 顶部通风口不能被任何东西覆盖以保证排气通畅。

6.4当系统失效时会发出声讯号，此时不能继续操作，否则会导致材料的损失，污染和人身安全方面的危险。

6.5如果发现过滤器失效，要更换过滤器时，必须由专业人员进行更换。

6.6 柜内溅出物的处理：在柜内如果出现危险生物材料溅出，应该不能关闭风机继续运行，覆盖滤纸或吸水纸于溅出物表面，然后向滤纸上滴加消毒液（1000mg/L的次氯酸钠溶液）浸泡5分钟，用钳子钳取滤纸丢入感染性废物收集袋中，然后用浸泡了消毒液的干净抹布擦拭柜内表面。

6.7 生物安全柜内避免使用明火，因为使用明火会破坏柜内的气流方向。也禁止使用易挥发易燃易爆物品，以免造成危险。接种环可以使用微波炉或“电炉”，最好使用一次性接种环。