标准菌株在质控中的应用

二、如何选择标准菌株
来源
（1）ATCC：美国标准菌种保藏中心 （2）NCTC：英国国家标准菌种保藏 伦敦 （3）CBS： 真菌中心收藏所 荷兰 （4）WFCC：世界菌种保藏联合会 （5）IFO： 大阪发酵研究所 日本 （6）UCM： 全苏微生物保藏所 苏联
二、如何选择标准菌株
来源
（1）CMCC：中国国家微生物菌种保藏中心
（2）CGMCC：中国普通微生物菌种保藏中心 （3）ACCC：中国农业微生物菌种保藏中心 （4）CICC: 中பைடு நூலகம்工业微生物菌种保藏中心 （5）中国医学真菌菌种保藏中心 中国医科院皮研所 （6）中国医学病毒毒种保藏中心 中国CDC病毒所 （7）中国鼠疫耶尔森菌菌种保藏中心 青海CDC 目前全球菌种保藏机构有300以上
表 1 测定各种培养基性能的菌种（三）
培养基 弯曲菌琼脂
TCBS 平板 沙保弱琼脂 需氧血液增菌液
厌氧血液增菌液 碱性蛋白胨水
质控菌株 空肠弯曲菌 大肠埃希菌 霍乱弧菌 副溶血性弧菌 白色念珠菌 大肠埃希菌 肺炎链球菌 化脓性链球菌 铜绿假单胞菌 白色念珠菌 脆弱拟杆菌 霍乱弧菌 大肠埃希菌
判定标准 生长 部分抑制 生长，黄色菌落 生长，蓝绿色菌落 生长 部分或完全抑制
阳性对照菌
迟缓爱德华菌 产气肠杆菌 阴沟肠杆菌 大肠埃希菌 大肠埃希菌 阴沟肠杆菌 产气肠杆菌 雷极变形杆菌 铜绿假单胞菌（氧化型） 大肠埃希菌（发酵型） 大肠埃希菌 粪肠球菌 粘质沙雷菌 产气肠杆菌 产气肠杆菌 雷极变形杆菌（快） 肺炎克雷伯菌（慢） 大肠埃希菌
阴性对照菌
费枸橼酸杆菌 费枸橼酸杆菌 普通变形杆菌 阴沟肠杆菌 阴沟肠杆菌 大肠埃希菌 迟缓爱德华菌 费枸橼酸杆菌 洛菲不动杆菌（不利用） 洛菲不动杆菌 化脓性链球菌 表皮葡萄球菌 迟缓爱德华菌 迟缓爱德华菌 大肠埃希菌 肺炎克雷伯菌
复习题 1、微生物学质控主要指哪两方面？ 2、一般情况下保存菌种需要多久进行一 次系统鉴定？
答案： 1、微生物学质控主要指？ ①无菌试验、②性能试验 2、一般情况下保存菌种需要多久进行一 次系统鉴定？ 每3代作一次鉴定.
二、如何使用标准菌株 注意事项
⑴ 不能用含有可发酵性糖的培养基保存菌种。 ⑵ 不可以使用选择性培养基，不能从药敏试
验平板培养基上留取菌株。 ⑶ 不可使培养菌干枯，所有试管要保持良好 的密封性。 ⑷ 对温度变化敏感的细菌，如淋病奈瑟菌和 脑膜炎奈瑟菌，不可贮存于冰箱，但可用 快速冷冻干燥法长期保存。 ⑸ 作为抗菌药物敏感试验用的标准菌株，由 保存状态取出后，不能连续使用1 周以 上，应定期传代，但一般不超过6 次，必 要时进行更换。
培养基 SS 平板
麦康凯平板 中国蓝琼脂 营养琼脂 厌氧血平板
质控菌株 鼠伤寒沙门菌 伤寒沙门菌 福志贺菌 大肠埃希菌 肠球菌 大肠埃希菌 伤寒沙门菌 大肠埃希菌 伤寒沙门菌 金黄色葡萄球菌 福志贺菌 脆弱拟杆菌 产气荚膜梭菌
判定标准 生长，黑色菌落中心 生长，无色透明菌落 生长，无色透明菌落 部分抑制生长，红色混浊菌落 部分抑制生长 生长，红色混浊菌落 生长，无色混浊菌落 生长，蓝色菌落 生长，无色菌落 大量生长 大量生长 生长 生长，β 溶血
生长
生长 大量生长 抑制生长
表2
培养基 赖氨酸脱羧酶 鸟氨酸脱羧酶 精氨酸双水解酶 蛋白栋水（靛基质） 葡萄糖磷酸盐蛋白胨水 MR V－P 枸橼酸盐（西蒙氏） 苯丙氨酸脱氨酶 O－F 试验管（葡萄糖） 硝酸盐还原 胆汁七叶苷 脱氧核糖核酸琼脂 氰化钾肉汤 丙二酸盐 尿素琼脂 半固体琼脂动力试验
各种鉴别培养基的测试菌种
二、如何选择标准菌株
来源
实验室分离菌株（地方株）： 实验室分离菌株必须经过严格鉴定，其 形态、生理、生化特征典型，经多次传 代，特征恒定，否则不能作为标准菌株。
二、如何选择标准菌株 验证
⑴实验室保存菌种是否按规定时间转种，是 否每3代作一次鉴定，是否有详细记录卡 （菌种名称、编号、来源、保存日期、传代） 等记录。 ⑵验证后不得擅自处理或带出实验室，如确 需要带离实验室，须经上级领导批准，并做 好详细的记录。 ⑶菌株应有专人保管，验证时要有2人在场并 及时做好交接工作。
二、如何使用标准菌株 注意事项
来自国际/国家菌种保藏中心(本标准要 求为ATCC菌株)或经ISO9002认证的经销商 提供的菌株(有资质) 制备储备菌株和工作菌株时一次制备多 份，每株菌原则上不能重复使用，通常工 作菌株不能再传代，但处理得当可再次使 用。
二、如何使用标准菌株 微生物学质控 无菌试验 性能试验 菌种必须经国家或国际公认的菌种 所用培养基严格按照要求进行储藏。
表1
培养基
羊血琼脂平板 生长试验
测定各种培养基性能的菌种（一）
质控菌株 判定标准
生长 生长 生长，α 溶血 生长，β 溶血 ＞10mm，敏感 ＜10mm，耐药 15-18mm，敏感 ＜15mm,耐药 生长
金 黄 色 葡 萄 球 菌 ATCC25923 大肠埃希菌 ATCC25922 溶血反应 肺炎链球菌 ATCC19615 化脓性链球菌 ATCC6305 杆菌肽敏感（纸片法） 化脓性链球菌 ATCC6305 B 群链球菌 Optochin 敏感（纸片法） 肺炎链球菌 涎链球菌 巧克力色血琼脂平板 淋病奈菌瑟 生长试验 脑膜炎奈瑟菌 流感嗜血杆菌 肺炎链球菌
标准菌株在质控中的应用
一、使用标准菌株的意义 二、如何选择和使用标准菌株
一、标准菌株
意义
要做好微生物学检验质控，必须保 存有一批标准菌株，作为对仪器、 培养基、染色液、试剂和诊断血清 的质控菌株，也可作为从事细菌检 验的工作人员熟悉某些菌株的教具。
二、如何选择标准菌株 1.标准菌株的条件 ⑴ 形态、生理、生化及血清学特性典，并 相当稳定。 ⑵菌株对所试药物产生恒定的抑菌环和恰 当的MIC 值。 ⑶ 对测试项目反应敏感。如测试巧克力琼 脂平板的分离能力，应选流感嗜血杆菌或脑 膜炎奈瑟菌。
二、如何使用标准菌株 质控菌株 分离培养基的质控 增菌及选择性 增菌培养基的质控 方法结果判断微生物学质控
三、如何使用标准菌株
方法
无菌试验： 制备好培养基础置37℃温箱过夜 培养，观察结果。
三、如何使用标准菌株
方法
性能试验（见图） 糖发酵培养基的质控 生化试验的质控 干燥培基与新配制培基的对比试验