专题三 植物的组织培养技术知识点填空附答案

专题三 植物的组织培养技术
课题 1 菊花的组织培养
1．有某种生物全套 生物细胞都具有
的任何一个活细胞，都具有发育成
的能力，即每个
。但在生物体的生长发育过程中并不表现出来，这是因为在
条件下，通过基因的
，构成不同组织和器官。
2. 植物组织培养技术的应用有：实现优良品种的
子；培育作物
以及细胞产物的
；培育
作物；制作
种
等。
3. 细胞分化：个体发育中细胞在
4. 愈伤组织是通过
呈
状态的
上出现 形成的，其细胞排列 细胞。
差异的过程。 ，高度
5. 植物组织培养的过程可简单表示为：
（脱分化）） 愈伤组织
（
）
（生长） 新个体
6.材料：植物的种类、材料的 和
等都会影响实验结果。菊花组织培养一般
选择
作材料。
7. 营养：常用的培养基是 培养基，其中含有的大量元素是
，微量元
素是
，有机物有甘氨酸、烟酸、肌醇、维生素、蔗糖等。
8.激素：在培养基中需要添加
和
等植物激素，
其
、
、
等都影响结果。
9.环境条件：PH、
、 等环境条件。菊花组培所需 PH 为 ，温度为
，
光照条件为
。
10. 配制各种母液：将各种成分按配方比例配制成的浓缩液。使用时根据母液的
，
计算用量，并加
稀释。
11. 配制培养基：应加入的物质有琼脂、
、大量元素、微量元素、有机物和植物激素
的母液，并用
定容到
毫升。在菊花组织培养中，可以不添加
，
原因是菊花茎段组织培养比较容易。
12.灭菌：采取的灭菌方法是
。
13．发酵操作
13.1 前期准备：用
消毒工作台，点燃酒精灯。注意所有接种工作都必须在
酒精灯旁进行，器械使用前后都要用火焰灼烧
。
13.2 接种操作：接种过程中插入外植体时
朝上，每个锥形瓶接种
个外植体。外植体接种与细菌接种相似之处是
。
13.3 培养过程应该放在
中进行，并定期进行消毒，保持适宜的
和
。
13.4 移栽前应先打开培养瓶的
，让其在培养间生长几日，然后用流水清洗根部培
养基。然后将幼苗移植到
等环境中生活一段时间，进
行壮苗。最后进行露天栽培。
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课题成果评价 （一）对接种操作中污染情况的分析 接种 3～4 d 后，在接种操作中被杂菌污染的培养物会表现出被污染的现象。请学生适 时统计污染率，分析接种操作是否符合无菌要求。 （二）是否完成了对植物组织的脱分化和再分化 观察实验结果，看看是否培养出了愈伤组织，记录多长时间长出愈伤组织。统计更换培 养基后愈伤组织进一步分化成根和芽的比例和时间。 （三）是否进行了统计、对照与记录 做好统计和对照，填好结果记录表，培养严谨的科学态度。从实验的第一步开始就要求 学生做好实验记录，可以让学生分组配制不同培养基，如诱导愈伤或直接分化丛芽的培养基， 然后做不同配方的比较。 （四）生根苗的移栽是否合格 生根苗移栽技术的关键是既要充分清洗根系表面的培养基，又不能伤及根系。一般使用 无土栽培的办法。培养基质要提前消毒，可以向培养基质喷洒质量分数为 5%的高锰酸钾， 并用塑料薄膜覆盖 12 h。掀开塑料薄膜后 24 h 才能移栽。新移栽的组培苗要在温室过渡几 天，等壮苗后再定植大田或进行盆栽。学生可以在课后统计自己移栽的成活率，看看移栽是 否合格。 答案和提示 （一）旁栏思考题 1.你能说出各种营养物质的作用吗？同专题 2 中微生物培养基的配方相比，MS 培养基 的配方有哪些明显的不同？ 答：微量元素和大量元素提供植物细胞生活所必需的无机盐；蔗糖提供碳源，同时能够 维持细胞的渗透压；甘氨酸、维生素等物质主要是为了满足离体植物细胞在正常代谢途径受 到一定影响后所产生的特殊营养需求。微生物培养基以有机营养为主。与微生物的培养不同， MS 培养基则需提供大量无机营养，无机盐混合物包括植物生长必须的大量元素和微量元素 两大类。 2.你打算做几组重复？你打算设置对照实验吗？ 答：教师可以安排学生分组，做不同的材料或配方，最后分别汇报成果。但每种材料或 配方至少要做一组以上的重复。设置对照实验可以取用一个经过灭菌的装有培养基的锥形瓶， 与接种操作后的锥形瓶一同培养，用以说明培养基制作合格，没有被杂菌污染。 （二）练习 1.答：植物组织培养所利用的植物材料体积小、抗性差，对培养条件的要求较高。用于 植物组织培养的培养基同样适合于某些微生物的生长，如一些细菌、真菌等的生长。而培养 物一旦受到微生物的污染，就会导致实验前功尽弃，因此要进行严格的无菌操作。 2.答：外植体的生理状态是成功进行组织培养的重要条件之一。生长旺盛的嫩枝生理状 况好，容易诱导脱分化和再分化。
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课题 2
1.
月季的花药培养
小孢子母细胞（2n）
（
）分裂
（ ）时期（n）
（ ）个精子(n) （ ）分裂
（ ）细胞（n） （ ）细胞（n）
单核（ 单核（
）期（n） （
）期（n）
（ ）细胞核（n） （
）分裂
双核期
）细胞核（n）
2. 育被子植物花粉的发育要经历
、
和
等阶段。花粉是由花粉
母细胞经过
而形成的，因此花粉是
。
3. 在正常情况下，一个小孢子母细胞可以产生
个精子；在一枚花药中可以产生
个花粉。
4. 产生花粉植物的两种途径
①
脱分化
花药中的花粉
② 花药中的花粉 脱分化
（） 丛芽 诱导 生根
（） 丛芽
移栽
5. 诱导花粉植株能否成功及诱导成功率的高低，受多种因素影响，其中影主要因素是：
和
等。
6. 材料的选择：
①从花药来看，应当选择（初花期、盛花期、晚花期）的花药；
②从花粉来看，应当选择（四分体期、单核期、双核期、萌发期）的花粉；
③从花蕾来看，应当选择（完全未开放、略微开放、完全盛开）的花蕾。
7. 选择花药时一般通过
确定花粉发育时期，此时需要对花粉细胞核进行染色，最常
用的染色剂是
和
，它们分别可以将细胞核染成
色和
色。
8. 在使用焙花青－铬钒溶液时，需要首先将花药用
处理 20min。该试剂的配
制方法是将
按体积比为
的比例混合均匀。
9. 消毒后的花蕾，要在
条件下除去花萼、花瓣。剥取花药时，一是注意不要损伤花
药，原因是
；二是要彻底除去花丝，原因
是
。
10. 剥取的花药要立刻接种到
上。每个培养瓶接种
个花药。花药培养利用
的培养基是
培养基，pH 为
，温度为 ℃，幼苗形成之前（需要、不需要）
光照。在花药培养基中，用量最高的激素是
；在诱导丛芽或胚状体培养基中，
用量最高的激素是
；在诱导生根的培养基中，用量最高的激素是
。
11. 培养 20－30d 后，花药开裂，长出
或释放出胚状体。前者还要转移到
上进行分化培养成再生植株；后者要尽快
并转移到新的培养基上。通过愈伤组
织形成的植株，常常会出现
的变化，因而需要鉴定和筛选。
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