实验方法总结:动物模型部分

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动物实验方法总结:组织研磨管的使用方法 临床样本或动物取材注意事项 动物模型

动物实验方法总结:组织研磨管的使用方法 临床样本或动物取材注意事项 动物模型

组织研磨管的使用方法1.作用:只适用于蛋白提取、RNA提取、基因组DNA提取时的组织裂解,不做他用;2.组织研磨管:容量为1.5ml, 里面已经提前放置了研磨珠(有时也不放置),研磨液(Trizol或RIPA裂解液,有时也不放置)一般在取回后才加入,如果已经加入了研磨液,请离心后才拧开管盖,以免研磨液溢出,对皮肤造成伤害,所以操作时,要小心注意!3.组织:把收取的组织分切,用生理盐水或PBS缓冲液把分切的组织上的血液漂洗干净,然后用医用纱布或滤纸把组织表面的水分吸干,然后放入研磨管(组织体积大小为1颗绿豆至2颗黄豆,根据实际情况决定)中,然后把放入的组织尽量剪碎;4.存放:上述过程应尽量在最短的时间内操作完毕,立即用液氮冻结,然后置于液氮或-80℃保存;5.操作事项:操作时间尽可能短,做好一个,立马放置一个;实验方法总结(3):动物模型部分1、研究肿瘤细胞增殖 (2)2、研究肿瘤细胞转移 (3)2.1. 体外(浸润模型) (3)2.2. 体内(转移模型) (3)3、研究肿瘤细胞耐药 (5)3.1. 耐药细胞株的建立 (5)3.2. 裸鼠移植瘤耐药模型的建立 (6)从肿瘤起源分,肿瘤动物模型的分类如下:从研究目的来分,可以从增殖、转移、耐药三个角度来分析:1、研究肿瘤细胞增殖细胞准备:GeneA敲减慢病毒感染细胞扩增至需要的细胞量。

分为:空白对照组、阴性对照组、实验组。

取Balb/c裸鼠,雄性,6周龄,每组10只,适应一周后进行肿瘤细胞注射。

XXX细胞消化离心后制成单细胞悬液,计数后取适量的细胞用PBS悬浮,在Balb/c裸鼠侧腹部皮下接种。

每只接种2×106个细胞,注射体积为100 μL。

此后,每隔5天测量注射部位肿瘤的体积。

30天后裸鼠小鼠腹腔注射80 mg/kg 戊巴比妥钠,小鼠麻醉后置蓝色背景布上拍照(侧卧位,接种部位朝上),小鼠颈椎脱臼处死,取出肿瘤称重,将肿瘤置蓝色背景布上拍照,肿瘤一分为二,一份4%多聚甲醛固定,待后续病理分析,一份-80℃冻存。

高血压实验动物模型

高血压实验动物模型

高血压实验动物模型高血压是一种常见的慢性疾病,影响着全球数亿人的健康。

为了研究高血压的发病机制和治疗方法,实验动物模型的使用是必不可少的。

本文将介绍一种常用的高血压实验动物模型,包括所需材料和方法。

材料1、实验动物选用健康成年雄性大鼠作为实验动物。

这些大鼠应具备良好的健康状况,体重在200-300克之间。

2、设备血压测量设备:包括血压计、血压传感器和数据处理分析系统。

这些设备应具备高精度和高稳定性,以确保实验数据的可靠性。

3、药物血管紧张素转化酶抑制剂(如卡托普利):这是一种常用的抗高血压药物,可以通过抑制血管紧张素转化酶的活性,降低血压。

4、试剂血液样本采集试剂:用于采集大鼠的血液样本,以进行进一步的分析和检测。

方法1、实验前准备在实验开始前,对实验动物房间进行清洁和消毒,确保实验环境的质量。

同时,准备好所需的实验器材和药物。

2、实验动物模型制作将选好的雄性大鼠进行适应性饲养,然后开始进行实验。

首先,将卡托普利溶解在生理盐水中,制成卡托普利溶液。

然后,通过灌胃的方式给予大鼠卡托普利溶液,剂量为30毫克/千克体重,每天一次,持续28天。

这样的大鼠即为实验组大鼠。

3、实验测量在实验过程中,定期对大鼠的血压、体重、空腹血糖等指标进行测量。

每次测量前,应确保大鼠处于安静状态,以避免因活动导致的血压升高。

4、数据分析在实验结束后,将实验组大鼠和正常对照组大鼠的实验数据进行汇总和分析。

通过对比两组大鼠的血压变化规律,评估卡托普利治疗高血压的效果。

同时,对其他指标如体重和空腹血糖的变化进行比较,以全面了解高血压对大鼠生理功能的影响以及卡托普利的疗效。

注意事项:1、在实验过程中,要保证大鼠的营养摄入,提供充足的饲料和水。

2、保持实验环境的清洁和安静,避免干扰大鼠的正常生活。

3、对大鼠进行非侵入性的观察,及时记录并处理任何异常情况。

总结本文介绍了一种高血压实验动物模型所需的材料和方法。

通过给予雄性大鼠卡托普利溶液灌胃,并定期测量其血压、体重和空腹血糖等指标,对比正常对照组大鼠,分析了实验组大鼠的血压变化规律。

动物模型:实验动物的替代品

动物模型:实验动物的替代品

动物模型是实验动物的重要组成部分,用于模拟人类疾病的发生和发展过程,为医学研究提供重要的实验数据。

然而,动物模型也存在一定的伦理问题,因此一些研究者开始探索实验动物的替代品,即动物模型的替代品,简称动物模替。

动物模替主要有以下几种类型:
1. 细胞模型:利用细胞培养技术,将人体细胞在体外培养,模拟人体内环境的生理状态,用于研究疾病的发病机制和药物作用效果。

细胞模型具有简便易行、无创伤、可重复性高等优点,但需要严格控制培养条件,对实验技术的要求较高。

2. 基因工程模型:利用基因工程技术,构建表达特定基因的细胞或生物体,用于研究基因表达调控、基因突变对疾病的影响等。

基因工程模型具有更高的可控性和可重复性,但需要较高的技术门槛和成本。

3. 计算机模拟模型:利用计算机模拟技术,模拟人体内环境的生理状态,用于研究疾病的发病机制和药物作用机制。

计算机模拟模型具有不受生物体生理限制、可模拟复杂系统等优点,但需要较高的计算能力和计算资源。

这些替代品具有不同的特点和优势,可以针对不同的研究目的和实验要求选择合适的模替类型。

在实际应用中,需要结合研究背景、实验条件和数据需求等因素进行选择。

此外,这些替代品还存在一定的局限性,例如模拟程度和准确性的问题。

因此,在使用动物模替时需要遵循相关伦理规定和法律法规,确保实验的合法性和道德性。

总之,动物模替是实验动物的重要替代品之一,具有不同的类型和特点。

在选择合适的模替类型时需要结合研究目的和实验要求进行选择,并遵循相关伦理规定和法律法规。

同时,需要不断探索和研究新的替代品和技术,以减少对动物的依赖和伤害。

实验动物重点整理

实验动物重点整理

实验性高血压动物模型方法:缩窄肾动脉法。

将犬和家兔麻醉后,腹向下固定,腹下垫一长枕使腰部顶起,从脊柱旁1.5-2㎝处开始,右侧顺肋骨缘,左侧在离肋骨缘约两指宽的地方作4 ㎝长的皮肤切口。

切开皮下组织和腰背筋膜,并在内外斜肌筋膜连接处旁边,切开内斜肌筋膜,推开背长肌,暴露盖在肾周围空隙上的腹横机肌腱。

顺肌纤维切开肌肉,并将肌肉分离开。

用手指通过手术区摸到肾脏,并在肾切迹与主动脉之间找到强力搏动着的肾动脉。

按所需长度,小心地钝性分离出一段肾动脉。

选用一定直径的银夹或银环套在肾动脉上,或者用缝线将相应直径的铁圈绑扎在血管上面,将缝线结扎紧后取下铁圈。

如果是单侧肾动脉缩窄,则应将另一侧肾切除。

后一手术在间隔10-12天进行。

一般肾切除手术后几天,血压开始升高,1-3月后达到高峰。

并可长期维持实验动物定义,实验用动物包括哪些?根据科学研究的需要,在特定的环境条件下,经过人工定向驯化培育而成的、具备明确的生物学特征和清楚的遗传背景,作为科学研究的对象或材料的动物。

实验用动物主要包括实验动物、经济动物、观赏动物和野生动物。

2实验动物学的定义。

是以实验动物为研究对象,研究它的育种、生态、饲养管理、解剖生理、疾病诊断与防治,以期解决如何使实验动物满足不同学科研究的共同需要和适应某种特定需要的问题。

3实验动物的特点。

1、实验动物是遗传限定动物2、实验动物所携带的微生物、寄生虫受人工控制3、实验动物主要应用于科学实验中4“AEIR”要素A指Animal(动物),E指equipment(设备),I指information(信息),R指reagent(试剂)5试验动物按遗传学分类及其定义。

1、近交系动物又称纯系动物,是采用兄妹交配,同胞兄妹交配20代以上,培育出来的遗传上具有高度纯合性和稳定性的物,近交系数可达99.8%。

2、突变系动物动物在各种内外因素影响下,引起染色体畸变和基因突变,从而育成某些特殊性状表型的品系,称为突变系动物。

医学心理学实验动物模型概述

医学心理学实验动物模型概述

霰塑蕊凰医学心理学实验动物模型概述白吉可-z张澜z李华,(通讯作者)(1.石河子大学第三附属医院,新疆石河子832002;2.石河子大学医学院,新疆石河子832002;3.石河子市人民医院,新疆石河子832002)随着医学心理的研究的日趋深入和扩展,探索心理障碍的产生机制,寻求有效的药物治疗途径蜮为迫切需要解决的课题。

然而,鉴于伦理和道德问题,不可能在人类身上进行过多的干预。

动物模型具有资源相对易获得、操作性强、涉及伦理道德问题相对较少等优点。

而且,理想的动物模型能够很好的模拟人类心理行为问题,能够进行整体、细胞、分子和基因各水平的干预。

因此,动物模型已经成为心理、精神和神经科学工作者科研中不可缺少的工具。

本文拟对医学心理学研究中常用的实验动物模型作一简要概述。

一、焦虑动物模型焦虑是由预先知道但又不可避免的即将发生的应激性事件引起的一种,阍预期反应,以恐惧、担心、紧张等精神症状为主要表现,多伴有心悸、多汗、手脚发冷等植物神经功能紊乱。

从进化的角度讲,动物所表现的防御反应是人类恐惧和焦虑反应的原始成分。

因此,动物gr--表现的恐惧样反应与人类的焦虑反应具有同源性,可作为焦虑动物模型的行为学基础。

㈠高架十字迷宫模型为非条件反射模型,根据M ont gom ery的思想设计,它利用动物对新异环境的探究特性和对高悬敞开臂的恐具C耀,形成动物的矛盾行为,以进入开臂的百分数(O E)和在开臂停留时间的百分数(O T)反映动物的焦虑状态,焦虑动物的O E和O T明显降低。

这种方法以自发行为为基础,动物不需特殊训练,实验方法快速简便。

㈡V ogel S饮水冲突模型为条件反射模型,该模型利用禁水动物烦渴心理和对饮水时受到的电刺激而产生的恐惧形成动物的矛盾冲突行为。

以动物舔水次数(LN)和被电击次数(SN)作为评价焦虑指标。

有焦虑情绪动物的LN 和SN明显减少。

㈡氯苯哌嗪(m C PP)诱导焦虑的明显箱模型1998年,B i l kei G orzoA等在前人工作的基础上,建立了大鼠m C PP诱导焦虑的明显箱模型,焦虑症状是通过对动物进入明箱的活动次数表现的,m C P P有明显的致焦虑作用,使动物进入明箱的次数明显减少。

实验方法总结(3):动物模型部分——【国自然标书写作】

实验方法总结(3):动物模型部分——【国自然标书写作】

1实验方法总结(3):动物模型部分1、研究肿瘤细胞增殖 (1)2、研究肿瘤细胞转移 (2)2.1. 体外(浸润模型) (2)2.2. 体内(转移模型) (2)3、研究肿瘤细胞耐药 (4)3.1. 耐药细胞株的建立 (4)3.2. 裸鼠移植瘤耐药模型的建立 (5)从肿瘤起源分,肿瘤动物模型的分类如下:从研究目的来分,可以从增殖、转移、耐药三个角度来分析:1、研究肿瘤细胞增殖细胞准备:GeneA 敲减慢病毒感染细胞扩增至需要的细胞量。

分为:空白对照实验动物肿瘤模型自发性肿瘤模型 诱发性肿瘤模型移植性肿瘤模型 人体肿癌的异种移植性原位诱发 异位诱发 同种可移植性肿瘤 异种可移植性肿瘤 原位移植 异位移植组、阴性对照组、实验组。

取Balb/c裸鼠,雄性,6周龄,每组10只,适应一周后进行肿瘤细胞注射。

XXX细胞消化离心后制成单细胞悬液,计数后取适量的细胞用PBS悬浮,在Balb/c裸鼠侧腹部皮下接种。

每只接种2×106个细胞,注射体积为100 μL。

此后,每隔5天测量注射部位肿瘤的体积。

30天后裸鼠小鼠腹腔注射80 mg/kg 戊巴比妥钠,小鼠麻醉后置蓝色背景布上拍照(侧卧位,接种部位朝上),小鼠颈椎脱臼处死,取出肿瘤称重,将肿瘤置蓝色背景布上拍照,肿瘤一分为二,一份4%多聚甲醛固定,待后续病理分析,一份-80℃冻存。

2、研究肿瘤细胞转移肿瘤转移的模型包括两大类:体外(浸润模型)和体内(转移模型)。

体外(浸润模型):了解肿瘤细胞对周围相连组织的侵润性。

体内模型主要研究肿瘤细胞的转移性即肿瘤细胞在远端组织形成病灶的能力。

2.1. 体外(浸润模型)例:浸润型脑胶质瘤动物模型的建立方法:取若干只Balb/c免疫缺陷裸鼠,将分离和鉴定并转染携带绿色荧光蛋白的脑胶质瘤干细胞立体定向法行小鼠颅内接种,每组10只。

小鼠麻醉后头部正中切口,剥离骨膜后钻孔(坐标是冠状缝后0.5 cm,矢状缝右侧2.5 cm) 。

史前动物实验报告

史前动物实验报告

摘要:本实验报告旨在通过模拟史前动物的生活环境和行为,探讨史前动物的生长发育、生理特征以及与人类生存环境的关系。

实验过程中,我们选取了史前动物模型,如恐龙、猛犸象等,进行了详细的观察、记录和分析。

本报告从实验目的、实验材料、实验方法、实验结果及讨论等方面进行阐述。

一、实验目的1. 了解史前动物的生活习性和生理特征;2. 探讨史前动物与人类生存环境的关系;3. 分析史前动物在地球生态环境中的地位和作用;4. 为现代动物研究提供借鉴和启示。

二、实验材料1. 模拟史前动物生活环境的实验装置:恐龙、猛犸象等史前动物模型;2. 实验仪器:温度计、湿度计、pH计、显微镜、电子天平等;3. 实验试剂:生理盐水、营养液、抗生素等。

三、实验方法1. 实验装置搭建:根据史前动物的生活习性,搭建模拟史前动物生活环境的实验装置,如恐龙、猛犸象等史前动物模型;2. 实验动物观察:对史前动物模型进行外观、行为、生理等指标的观察和记录;3. 实验数据采集:利用实验仪器对史前动物模型进行生理指标的测定,如体温、心率、呼吸频率、血压等;4. 实验数据分析:对实验数据进行整理、分析,探讨史前动物的生长发育、生理特征以及与人类生存环境的关系。

四、实验结果1. 外观特征:实验结果表明,史前动物模型在模拟史前生活环境下,具有与史前动物相似的外观特征,如恐龙模型的鳞片、猛犸象模型的毛发等;2. 行为特征:史前动物模型在模拟史前生活环境下,表现出与史前动物相似的行为特征,如恐龙模型的捕食、猛犸象模型的迁徙等;3. 生理特征:实验结果显示,史前动物模型在模拟史前生活环境下,其生理指标与史前动物相近,如体温、心率、呼吸频率等;4. 与人类生存环境的关系:史前动物在地球生态环境中扮演着重要的角色,如恐龙是地球生态系统的顶级捕食者,猛犸象则是地球生态环境中的重要物种。

五、讨论1. 史前动物在地球生态环境中的地位和作用:史前动物在地球生态环境中具有重要的地位和作用,它们是地球生态系统的重要组成部分,对地球生态环境的平衡和稳定起着关键作用;2. 史前动物与人类生存环境的关系:史前动物与人类生存环境密切相关,它们在地球生态环境中的地位和作用,对人类的生存和发展具有重要影响;3. 现代动物研究启示:通过对史前动物的研究,可以为现代动物研究提供借鉴和启示,有助于我们更好地了解地球生态环境和动物行为。

动物实验报告

动物实验报告

动物实验报告
标题: 动物实验报告
摘要:
动物实验在科学研究和医学领域发挥着重要的作用。

这篇报告总结了动物实验的背景、目的和结果,并对其伦理问题进行了讨论。

引言:
动物实验是在动物模型中进行的科学研究。

在许多领域,如药物研发、疾病治疗和基础科学研究中,动物实验是不可或缺的工具。

然而,动物实验引发了一系列伦理问题,包括动物权益和道德问题。

方法:
本次实验选择了小鼠作为模型动物。

小鼠被分为实验组和对照组,每组10只小鼠。

实验组被注射了一种新型药物,而对照组则注射了安慰剂。

实验组和对照组的体重、生存率和其他指标进行了比较。

结果:
实验组在注射药物后显示出明显的病情改善。

实验组小鼠的体重增加情况较对照组更好,生存率也更高。

此外,切片结果显示实验组小鼠的疾病相关病变较轻。

讨论:
动物实验在疾病治疗和药物研发方面具有重要意义。

通过动物
实验,我们可以评估新药物的疗效、毒性和剂量。

然而,动物实验也涉及到一定的伦理问题。

一方面,动物权益受到损害,动物可能会遭受痛苦和苦难。

另一方面,动物实验也可以为人类提供重要的医疗进步,挽救生命。

结论:
动物实验在科学研究和医学领域有着重要的作用。

在实施动物实验时,我们应该尽最大努力减少动物的痛苦,并寻找替代实验方法。

同时,我们也应该加强对动物权益的保护,并确保动物实验的道德合规性。

生命科学中的实验动物模型和正当使用规范

生命科学中的实验动物模型和正当使用规范

生命科学中的实验动物模型和正当使用规范随着科技的不断发展,生命科学正在不断拓展着它的范畴,涵盖着动物繁殖、生长、发育、行为、疾病发生、治疗等众多方面。

为了更好地研究和探索这些领域,实验动物模型成为了不可或缺的工具和手段。

然而,实验动物模型的合理和正确使用,是我们必须要明确的责任和义务。

在生命科学研究中,动物实验模型扮演着至关重要的角色。

很多生命科学研究所涉及到的问题,如新药临床试验、基因工程产品等,都需要经过动物实验验证其安全性和有效性。

这其中用到的实验动物模型,涉及到了许多不同种类的动物,包括小鼠、大鼠、猪、狗、猴等等。

每一个实验动物模型,都有其特定的研究目的和应用范围,不同种类的动物实验模型都具有不同的优缺点。

这些实验动物模型的使用,为生命科学的发展做出了重要贡献,但同时,也引起了一些伦理和道德上的争议。

对于动物实验使用的问题,不仅是科研工作者所关切的问题,更是社会大众的普遍关注的问题。

动物实验使用对于动物福利和道德伦理问题的考虑必须具备正当性实质和道义责任感。

动物实验模型的合理使用并不是没有规范。

为方便进行有效的监管,各个国家和地区也都建立了相应的法律和实施规定,规范动物实验模型使用的程序和标准。

在美国,动物福利法是规范动物实验使用的一个法律体系,在欧洲,则有EU指令等相关法规。

国内亦有一些规定,如中国科学院出台了《动物实验管理制度》,加紧了实验用动物的管理和使用,协调了主管部门与科研机构之间的关系。

实验动物模型的合理使用,需要按照一定的程序和标准进行。

在选用实验动物模型上,不仅要选择适合具体研究的动物,还要保证动物实验使用的数量必须严格控制,避免浪费和滥用。

在实验过程中,也应该尽可能减少实验动物的痛苦和磨难,比如使用无痛苦实验方法,减轻实验动物的压力等等。

在道德和伦理方面,我们更应该对实验动物进行人道保护,做到动物实验的伦理正当性和人道性。

当然,实验动物模型并不能完全代表人类生物体的生命周期,也无法完全预测人类有关药物的响应。

实验动物模型

实验动物模型

实验动物模型中医药防治高血压左心室肥厚实验动物模型研究述评【关键词】中医药疗法高血压左心室肥厚动物模型述评近年来,有关中医药防治左心室肥厚(LVH)的文献逐渐增多,从原来单纯的中医药临床疗效观察逐渐向实验研究及微观作用机制研究不断深入。

随着中医药防治LVH实验研究的开展,有关LVH动物模型的应用和研究逐渐增加,许多学者从不同的病理机制出发,复制了多种高血压病LVH动物模型。

笔者现就目前中医药防治LVH常用的动物模型的类型及存在的问题作一述评。

1 中医药防治左心室肥厚常用的动物模型类型1.1 自发性高血压大鼠自发性高血压大鼠(SHR)是较为接近人类原发性高血压病的遗传性大鼠模型,出生后不久就出现血压增高,12~16周后与同龄正常血压大鼠相比较有非常显著的差异。

SHR左室重量及左室重量指数、心肌细胞面积及横径在高血压初期(6周)无明显改变,7~8周龄后左室肥厚逐渐发生,14周时有显著增加,24周时增加更加显著[1]。

有学者用具有补阴益阳作用的桂附八味丸早期干预治疗,可纠正血压升高,据此提示SHR 可能是重要阴阳两虚模型。

但其病理变化的过程复杂,以上结论尚缺乏进一步的实验证据的支持[2]。

目前研究表明,多种中药复方或单味中药均可从不同的机制干预SHR模型LVH的形成,如益气活血复方[3]、活血潜阳复方[4],活血化瘀类的通心络复方[5],滋肾抑肝的滋肝青阳片[6]、杞菊地黄丸[7],以及单味药丹参[8]、灯盏花素[9]、前胡丙素[10]、钩藤[11]等,均通过不同的作用机制降低SHR大鼠血压、逆转心肌肥厚的作用。

导致此类现象的原因可能是在SHR血压增高的过程中,左室肥厚、心肌纤维化及血管周围纤维化和间质纤维化的发生发展过程是不同步的,它们各自有自己的演变规律,而导致这些变化非同步的原因可能是由于其致病因素并非完全相同。

1.2 腹主动脉缩窄大鼠模型根据Anversa[12]的方法,平均体重为220 g(200~230 g)的SD大鼠,腹腔注射戊巴比妥钠(40 mg/100 g体重)麻醉,仰卧固定后,腹部常规处理,沿膈以下2 cm 处切开皮肤和肌肉,打开腹腔找到腹主动脉并分离,取一探针(直径约0.6 mm)沿主动脉的方向与分离的腹主动脉一起结扎,然后抽出探针,形成一个缩窄的腹主动脉,关闭腹腔。

动物实验报告总结通用

动物实验报告总结通用

动物实验报告总结通用引言动物实验是科学研究和药物研发过程中不可或缺的一环,通过对动物模型的研究,可以有效地预测人类的生理反应和药物的安全性和有效性。

然而,动物实验也面临一系列伦理和道德的争议,因此,在进行动物实验之前,需要经过严格的伦理审查和合规程序。

本报告旨在总结动物实验的目的、方法和对人类健康的影响,同时讨论动物实验的利弊,以及未来可能的替代方法。

目的动物实验的主要目的是通过在动物模型上研究人类疾病的机制,寻找治疗、预防和诊断疾病的方法。

通过动物实验,研究人员可以了解疾病的发展过程,找到潜在的分子靶点,并测试潜在药物的疗效和安全性。

此外,动物实验还可以帮助研究人员了解环境因素对健康的影响,比如毒物和致癌物的检测。

方法动物实验需要严格遵循伦理审查和合规程序,确保动物受到合理的对待和保护。

在实验过程中,动物需要得到适当的饲养和喂养,提供适宜的生活环境,同时减轻它们的痛苦和困难。

研究人员通常会使用小鼠、猴子等常见模型动物进行实验,这些动物具有与人类相似的生理机制和疾病发展过程。

对人类健康的影响动物实验对人类健康的影响是巨大的。

通过动物实验,研究人员能够开发出许多重要的药物和治疗方法,包括抗生素、抗癌药物、心血管药物等。

这些药物的研发往往需要经过多年的实验和临床试验,而动物实验是其中不可或缺的一环。

同时,动物实验还可以帮助研究人员了解食品安全和毒物检测。

通过在动物模型上进行毒物实验,可以及早发现潜在的毒物风险,并采取措施来保护人类的健康。

此外,动物实验还对疫苗研发和传染病的控制具有重要意义。

利弊讨论动物实验既有利也有弊。

其中的利益包括:- 动物实验可以为许多疾病的治疗和预防带来突破性的进展;- 动物模型可以提供生理反应和毒性测试等人类不能接受的实验条件;- 动物实验可以帮助了解疾病发展的机制,为研究提供重要线索。

然而,动物实验也面临不少争议和难题,包括:- 动物实验可能对动物造成痛苦和苦难;- 动物模型不一定能准确预测人类的反应;- 动物实验的代表性和外推能力仍存在争议。

呼吸系统药物动物模型

呼吸系统药物动物模型

---------------------------------------------------------------最新资料推荐------------------------------------------------------呼吸系统药物动物模型呼吸系统药物实验法呼吸系统药物实验法包括祛痰药物实验法、镇咳药物实验法以及呼吸兴奋药物实验法。

1 祛痰药物实验法 1.1 呼吸道分泌液量测定法呼吸道液时气管、支气管腺体以及杯细胞的分泌物。

在粘膜组织中的支气管腺是浆液腺和粘液腺的混合体,因为它们的导管时共通的,所以浆液和粘液时适当的混合的,杯细胞产生和分泌粘液。

呼吸道液的一部分被肺吸收,总的呼吸道液在正常情况下处于恒定的状态。

呼吸道液的主要任务是湿润气道粘膜,使之润滑,保护上皮的纤毛运动;呼吸道液还在呼吸道内包裹微粒、细菌等异物,不断运送或溶解,从粘膜上清楚,通过咳嗽从呼吸道咳出,对这些输送过程起主要作用的是纤毛运动。

大多数祛痰药是通过增加呼吸道分泌液,使附着呼吸道粘膜的痰变稀,容易从气道壁脱落,在咳嗽时咳出,增加的分泌液覆盖粘膜后使之光滑,保护粘膜壁免受能引起咳嗽的有害刺激的损害,最常用的方法是测定反映呼吸道分泌道分泌增加的呼吸道液量测定法和杯细胞、肺泡 2 型细胞分泌功能测定法。

1.1.1 小鼠酚红排泄法【原理】利用酚红小鼠腹腔注射后部分从气道排泄的特定,测定小鼠气道酚红排泄量,以判断受试物1 / 20对气道分泌液量的影响。

【材料】苯酚红用生理盐水配成 2.5%苯酚红生理盐水溶液,称取一定量放研钵中逐渐加生理盐水研磨后,溶于生理盐水中。

【操作步骤】小鼠饥饿 16h 过夜,给受试药 30min 后脱颈处死小鼠,暴露气管,气管插管并与注射器相连,用 5%NaHCO3溶液 1ml,缓慢注入气管内,然后轻轻吸出,再用 5% NaHCO3水溶液 1ml,同上冲洗,如此反复 3 次,合并 3 次冲洗液放置一定时间使杂质沉淀,得到的透明红色上清液,用 545nm 分光光度计比色,根据酚红的标准曲线计算出酚红的排泄量。

动物血压模型实验报告(3篇)

动物血压模型实验报告(3篇)

第1篇一、实验目的1. 掌握动物血压模型的建立方法;2. 了解高血压的病理生理变化;3. 掌握血压测量技术;4. 分析不同药物对高血压动物模型的影响。

二、实验材料1. 实验动物:大鼠,体重180-220g;2. 仪器设备:电子血压计、手术显微镜、手术器械、注射器、麻醉机、血压传感器等;3. 药物:去甲肾上腺素、酚妥拉明、普萘洛尔等。

三、实验方法1. 动物分组:将大鼠随机分为正常对照组、高血压模型组、去甲肾上腺素组、酚妥拉明组、普萘洛尔组。

2. 高血压模型建立:采用两肾一夹法建立高血压动物模型。

首先,将大鼠麻醉后仰卧位固定,在无菌条件下分离左侧肾动脉,用U型银夹夹闭肾动脉,造成肾脏缺血。

术后观察大鼠血压变化,待血压稳定在200mmHg以上时,认为模型建立成功。

3. 血压测量:采用电子血压计测量大鼠血压,分别在实验前、术后1周、术后2周、术后3周进行测量。

4. 药物干预:分别给予去甲肾上腺素组、酚妥拉明组、普萘洛尔组相应药物,观察药物对高血压动物模型血压的影响。

5. 数据处理:采用SPSS 22.0软件对实验数据进行统计分析,比较各组血压差异。

四、实验结果1. 高血压模型建立成功,术后1周大鼠血压明显升高,术后2周、3周血压持续升高。

2. 与正常对照组相比,高血压模型组血压显著升高(P<0.05)。

3. 与高血压模型组相比,去甲肾上腺素组、酚妥拉明组、普萘洛尔组血压均有所下降,但差异不显著(P>0.05)。

五、讨论1. 本实验采用两肾一夹法建立高血压动物模型,该方法操作简便,成功率高,适用于多种高血压相关研究。

2. 高血压模型建立后,大鼠血压持续升高,与人类高血压的病理生理变化相似。

3. 去甲肾上腺素、酚妥拉明、普萘洛尔等药物对高血压动物模型血压有一定程度的降低作用,但效果不明显。

4. 本实验结果表明,高血压动物模型可用于研究高血压的病理生理变化及药物治疗效果,为高血压的防治提供实验依据。

作文动物实验报告总结(3篇)

作文动物实验报告总结(3篇)

第1篇一、实验背景随着科学技术的不断发展,动物实验在医学、生物学、药理学等领域扮演着至关重要的角色。

本实验旨在探究某种药物对特定动物模型的影响,为后续的临床应用提供实验依据。

本次实验选取了XX动物作为实验对象,通过给予其不同剂量的药物,观察并记录其生理和行为变化。

二、实验目的1. 评估该药物对XX动物生理指标的影响;2. 观察药物对XX动物行为的影响;3. 为该药物的临床应用提供实验依据。

三、实验方法1. 实验动物:选取健康、年龄相当的XX动物XX只,随机分为实验组和对照组,每组XX只。

2. 实验分组:实验组给予不同剂量的药物,对照组给予等体积的生理盐水。

3. 实验步骤:(1)实验前,对实验动物进行适应性饲养,使其适应实验环境。

(2)实验过程中,定期监测实验动物的生理指标,如心率、血压、体温等。

(3)观察并记录实验动物的行为变化,如活动能力、睡眠质量、摄食情况等。

(4)实验结束后,对实验数据进行统计分析。

四、实验结果1. 生理指标变化:(1)实验组动物的心率、血压、体温等生理指标与对照组相比,无显著性差异(P>0.05)。

(2)实验组动物的心率、血压、体温等生理指标在不同剂量组间无显著性差异(P>0.05)。

2. 行为变化:(1)实验组动物的活动能力、睡眠质量、摄食情况等行为与对照组相比,无显著性差异(P>0.05)。

(2)实验组动物的行为在不同剂量组间无显著性差异(P>0.05)。

五、实验结论本次实验结果表明,该药物对XX动物无明显的生理和行为影响。

根据实验结果,该药物在临床应用中具有较大的安全性。

六、实验讨论1. 实验过程中,我们选取了健康、年龄相当的XX动物作为实验对象,确保了实验结果的可靠性。

2. 实验过程中,我们采用了随机分组的方法,避免了人为因素的影响。

3. 实验结果显示,该药物对XX动物无明显的生理和行为影响,表明该药物在临床应用中具有较高的安全性。

七、实验展望1. 在后续的研究中,我们将进一步探讨该药物在不同动物模型中的药效和安全性。

动物模型(定义、分类及注意事项)

动物模型(定义、分类及注意事项)

动物模型(定义、分类及注意事项)动物模型是指使用动物作为实验对象来研究人类疾病、药物疗效和生物学机制的科学实验方法。

动物模型在医学研究、药物研发和生物学研究中起着重要的作用。

本文将从定义、分类和注意事项三个方面对动物模型进行详细介绍。

一、定义:动物模型是指使用非人类动物作为研究对象,通过对动物进行实验操作,模拟和研究人类疾病、药物疗效、生物学机制等问题的科学研究方法。

动物模型可以帮助科学家们更好地理解人类疾病的发生机制,评估新药的疗效和安全性,推动医学和生物学的发展。

二、分类:1. 哺乳动物模型:包括小鼠、大鼠、猫、狗、猪、猴等哺乳动物。

哺乳动物模型在医学研究中应用广泛,因为哺乳动物与人类在基因、生理、解剖等方面有较高的相似性,可以更好地模拟人类疾病。

2. 禽类模型:如鸟类模型,主要用于研究鸟类特有的疾病和生物学机制。

3. 无脊椎动物模型:如果蝇、线虫等无脊椎动物模型,由于其生命周期短、繁殖快以及基因组简单等特点,被广泛应用于生物学研究,尤其是基因功能的研究。

4. 鱼类模型:如斑马鱼、鲈鱼等鱼类模型,主要用于研究鱼类特有的疾病和生物学机制。

三、注意事项:1. 遵循伦理规范:在进行动物实验时,必须遵循伦理规范,确保动物的福利和权益不受损害。

研究人员应该尽量减少动物数量,采取无创伤性的实验方法,以及提供良好的饲养条件和环境。

2. 合理选择动物种类:选择合适的动物种类是进行动物模型研究的关键。

应根据研究目的和需要选择与人类相似度高的动物模型,以确保实验结果的可靠性和可重复性。

3. 控制实验条件:在动物实验中,需要严格控制实验条件,如温度、湿度、饲养环境等,以减少实验误差对结果的影响。

4. 数据准确性和可重复性:进行动物模型实验时,应确保数据的准确性和可重复性。

实验结果应进行统计分析,并进行多次实验验证,以确保研究结果的可靠性。

5. 替代方法的使用:在进行动物模型实验时,应尽量使用替代方法,如体外细胞模型、计算机模拟等,以减少对动物的使用,并提高实验效率和可行性。

小鼠MCAO总结

小鼠MCAO总结

小鼠MCAO总结小鼠MCAO(大脑中动脉结扎)是一种常用的动脉结扎模型,用于研究缺血性脑卒中。

在该模型中,通过结扎小鼠颈部的大脑中动脉,导致大脑供血不足,从而引发脑组织缺血和神经细胞死亡。

本文将对小鼠MCAO的实验步骤、方法以及该模型的应用进行总结和分析。

首先,进行小鼠MCAO实验的前提是具备动物实验的合理伦理和实验条件。

对于伦理问题,需要获得相关实验动物伦理委员会的批准,并遵守国家和地区的法律法规以及世界卫生组织的相关指导原则。

对于实验条件,需要具备适当的动物设施,例如温度和湿度适宜的动物房、合适的饲养和免疫条件等。

接下来是小鼠MCAO的实验步骤。

首先,需要选择适合的小鼠品系和年龄。

常用的小鼠品系包括C57BL/6和Wistar。

选择小鼠的年龄一般在8-12周之间,因为在这个年龄段,小鼠的大脑动脉易于结扎。

然后,对小鼠进行术前准备,例如麻醉、剃毛和消毒等。

麻醉可以选择使用异氟醚、氯胺酮等。

在实施术中,首先需要进行颈部的切开,然后定位大脑中动脉。

一般通过显微镜或放大镜来观察和定位。

之后,使用一根丝线或者闭夹器进行结扎,以阻断大脑中动脉的血流。

结扎的位置一般选择在颈动脉与大脑中动脉的分叉处。

结扎时间一般为30分钟至1小时,可以根据实验需求来决定。

至于恢复期,可以选择24小时、72小时或更长的时间。

MCAO模型的评价标准主要有神经行为学、组织学和分子生物学等方面。

神经行为学评价包括笼中循环、运动协调、行动能力评估等。

组织学评价主要是通过HE染色或免疫组化等方法,观察和统计脑组织的损伤程度、核染色和胶质增生等指标。

分子生物学评价主要是通过检测相关蛋白或基因的表达水平来评价大脑组织的病理改变。

小鼠MCAO模型是研究缺血性脑卒中的重要模型,具有较好的再现性和可操作性。

其主要应用包括:研究病理生理机制,例如缺血再灌注损伤、神经炎症反应、胶质增生等;评估潜在的治疗方法,例如药物和干细胞治疗等;评估神经保护剂或治疗方式的效果,例如针刺、脉冲电磁场等;研究缺血性脑卒中的早期诊断和预防方法,例如影像学、生物标志物等。

人体免疫系统实验方法总结

人体免疫系统实验方法总结

人体免疫系统实验方法总结人体免疫系统是一套复杂而精密的防御系统,用于保护我们的身体免受各种致病微生物和病原体的侵害。

为了研究和了解人体免疫系统的功能及其在健康和疾病状态下的表现,科学家们开展了各种实验方法。

本文将对人体免疫系统实验方法进行总结。

一、体外实验方法1. 细胞培养实验细胞培养实验是一种常用的体外研究方法,用于研究免疫细胞的功能和相互作用。

通常使用细胞株或原代细胞,如淋巴细胞、巨噬细胞等。

该实验可以通过添加不同的刺激物,如细菌成分、病毒抗原等,来模拟免疫反应。

2. 酶联免疫吸附测定(ELISA)ELISA是一种广泛应用于免疫学研究的体外实验方法。

通过将待测物(如抗体、细胞因子等)固定在微孔板表面,再加入特异性标记的检测物(如酶或荧光染料),可以定量测定目标物质的含量。

ELISA 可用于测定血清中抗体水平、细胞因子产生等。

3. 流式细胞术流式细胞术是一种高效而灵敏的体外细胞分析方法,用于研究免疫细胞的表型和功能。

通过使用荧光标记的抗体,可以对细胞进行多参数的免疫荧光染色,再通过流式细胞仪进行分析和计数。

该实验可用于检测免疫细胞的亚群分布、细胞凋亡等。

二、动物模型实验方法1. 小鼠免疫模型小鼠是最常用的实验动物之一,被广泛应用于人体免疫系统的研究。

通过诱导小鼠产生特定的疾病模型,如感染模型、关节炎模型等,可以模拟人体免疫系统在特定病理状态下的反应。

通过测定血清中免疫指标、器官病理等可以评估免疫反应的程度和效果。

2. 大型动物实验在某些免疫系统研究中,大型动物如猴子、猪等也被用作实验模型。

这些动物更接近人类,其免疫系统的反应更具相似性。

通过感染这些动物或注射特定的免疫刺激剂,可以更准确地评估人体免疫系统的反应。

三、临床实验方法1. 人体临床试验临床试验是评估新药物和治疗方法安全性和有效性的重要手段之一。

对于免疫系统疾病的治疗方法研究,常常需要进行人体临床试验。

通过招募患者,将其分为实验组和对照组,并进行治疗或观察,可以评估新治疗方法的疗效和副作用。

动物实验模型范文

动物实验模型范文

动物实验模型是一种常用的生物医学研究方法,通过模拟人体内的生理环境,对药物、医疗器械、生物材料等产品的安全性、有效性进行评估。

以下是一个动物实验模型的范文,供您参考:
实验名称:药物安全性动物实验模型
实验目的:评估某新药在动物体内的安全性、耐受性和药效
实验对象:大鼠
实验方法:将大鼠随机分为实验组和对照组,给实验组大鼠连续注射新药,观察其生理指标的变化,并记录不良反应。

同时,对大鼠进行药效测试,观察药物对疾病的疗效。

实验流程:
1. 准备工作:准备实验器材、药物、动物饲料等,确保实验条件符合要求。

2. 分组与给药:将大鼠随机分为实验组和对照组,并按照实验方案给实验组大鼠注射新药。

3. 观察与记录:每天观察大鼠的生理指标变化,如体重、心率、血压、呼吸等,并记录不良反应。

同时,对大鼠进行药效测试,观察新药对疾病的疗效。

4. 数据整理与分析:将观察和记录的数据进行整理和分析,评估新药的安全性和有效性。

注意事项:
1. 确保实验环境的卫生和安静,防止动物受到惊吓。

2. 定期监测动物的生理指标,确保实验数据的准确性。

3. 确保动物的生活条件良好,避免影响实验结果。

实验结果:通过实验数据的分析,发现新药在动物体内的安全性较好,未出现明显的不良反应。

同时,新药对疾病的疗效也得到了验证。

总结:本实验成功地模拟了人体内的生理环境,对某新药的安全性和有效性进行了评估。

实验结果为新药的进一步研究和应用提供了有力支持。

在今后的研究中,可以进一步完善实验方案,提高实验结果的准确性和可靠性。

实验动物总结

实验动物总结

第一章绪论1、实验动物与实验用动物实验动物:指经人工培育,对其携带的微生物进行控制,遗传背景明确,可用于科学实验、药品、生物制品的生产和检定及其它科学研究的动物。

实验用动物:一切可以用于实验的动物。

区别:遗传控制不同、微生物控制等级不同、培养的形质和目标不同。

2、按遗传学控制标准即基因的纯合成度,实验动物分为:近交系-C3H、突变系-裸鼠、杂交群-F1、封闭群-昆明小鼠3、实验动物标准化:对动物的质量,繁育条件,实验条件等方面规定的统一技术标准。

内容:实验动物遗传学质量控制;实验动物微生物学质量控制;实验动物设施环境标准化;实验动物饲料营养标准化;4、突变系动物:指正常染色体的基因发生了变异,具有一种或多种遗传缺陷的动物。

5、医药研究中动物选择的原则:(1)选择与人的机能、代谢、结构及疾病特点相似的实验动物;(2)选择遗传背景明确,得到良好微生物控制,具有模型性状显著且稳定的LA;(3)选择解剖、生理特点符合实验目的要求的LA;(4)选择靶器官效应好的LA;(5)选择科研、检定及生产中传统使用的LA;(6)选择具有特殊反应性的实验动物品种(系)。

第二章实验动物质量控制1.1、相同基因类型动物:指所有个体的遗传背景相同或相近的实验动物。

主要指近交系动物,其中包括同源突变近交系、同源导入近交系、重组近交系和杂交一代动物。

1.2、不同基因类型动物:指所有个体的遗传背景具有较大差异的实验动物,主要是指封闭群。

1.3、品种、品系具备的条件:A.相似的外貌特征;B.独特的生物学特性;C.稳定的遗传性能;D.共同的遗传来源和一定的遗传结构。

1.4、近交系:指至少连续20代全同胞兄妹或亲子交配,品系内所有个体都可追溯到起源于第20代或以后代数的一对共同祖先,且近交系数达98.6%以上遗传物质高度纯合和稳定的遗传群体。

特征:基因纯合性;同基因性;遗传稳定性;可识别性;表现型一致性;个体性;资料的可查性;国际分布的广泛性。

家兔dic实验报告结果

家兔dic实验报告结果

家兔dic实验报告结果家兔DIC实验报告结果引言:DIC(Diffusion Interference Contrast)是一种显微镜技术,可以观察细胞和组织的细节结构,对于生物学研究具有重要意义。

本实验旨在利用家兔作为模型动物,通过DIC技术观察其细胞和组织的结构特征,并对实验结果进行分析和总结。

实验材料和方法:1. 实验动物:选取健康的家兔作为实验对象,确保其无任何疾病和异常症状。

2. 实验设备:使用DIC显微镜进行观察和拍摄。

3. 实验操作:将家兔进行麻醉后,取得需要观察的组织样本,如皮肤、肌肉等。

实验结果:在本次实验中,我们观察到了家兔皮肤和肌肉的细胞和组织结构,并记录下了以下结果:1. 皮肤细胞结构:通过DIC显微镜观察,我们发现家兔皮肤细胞呈现出多层排列的结构,表面光滑且具有弹性。

细胞内可见细长的角质颗粒,这些颗粒起到保护皮肤的作用。

此外,我们还观察到皮肤中存在大量的毛囊,这些毛囊与皮肤细胞相互交织,形成一个完整的结构。

2. 肌肉纤维结构:在观察家兔肌肉组织时,我们发现其由众多肌肉纤维组成。

这些肌肉纤维呈现出纵横交错的排列方式,形成了肌肉组织的整体结构。

通过DIC显微镜的高分辨率观察,我们还可以清晰地看到肌肉纤维内部的细小结构,如线粒体和肌原纤维等。

3. 细胞间质结构:除了观察细胞本身的结构外,我们还注意到细胞间质的存在。

细胞间质是细胞外基质的一部分,包括胶原纤维和弹性纤维等。

在家兔组织中,我们观察到细胞间质呈现出丰富的纤维网状结构,这些纤维网状结构不仅支持细胞的形态和功能,还提供了细胞之间的相互联系。

讨论与结论:通过DIC技术的应用,我们成功观察到了家兔皮肤和肌肉组织的细胞和组织结构。

从实验结果中我们可以得出以下结论:1. 家兔皮肤具有多层排列的结构,细胞内含有角质颗粒,这些结构有助于保护皮肤免受外界环境的伤害。

2. 家兔肌肉组织由纵横交错的肌肉纤维构成,这种排列方式使得肌肉组织具有更强的收缩和伸展能力。

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实验方法总结:动物模型部分
1、研究肿瘤细胞增殖 (1)
2、研究肿瘤细胞转移 (2)
2.1. 体外(浸润模型) (2)
2.2. 体内(转移模型) (2)
3、研究肿瘤细胞耐药 (4)
3.1. 耐药细胞株的建立 (4)
3.2. 裸鼠移植瘤耐药模型的建立 (5)
从肿瘤起源分,肿瘤动物模型的分类如下:
从研究目的来分,可以从增殖、转移、耐药三个角度来分析:
1、研究肿瘤细胞增殖
细胞准备:GeneA敲减慢病毒感染细胞扩增至需要的细胞量。

分为:空白对照组、阴性对照组、实验组。

取Balb/c裸鼠,雄性,6周龄,每组10只,适应一周后进行肿瘤细胞注射。

XXX细胞消化离心后制成单细胞悬液,计数后取适量的细胞用PBS悬浮,在Balb/c裸鼠侧腹部皮下接种。

每只接种2×106个细胞,注射体积为100 μL。

此后,每隔5天测量注射部位肿瘤的体积。

30天后裸鼠小鼠腹腔注射80 mg/kg 戊巴比妥钠,小鼠麻醉后置蓝色背景布上拍照(侧卧位,接种部位朝上),小鼠颈椎脱臼处死,取出肿瘤称重,将肿瘤置蓝色背景布上拍照,肿瘤一分为二,一份4%多聚甲醛固定,待后续病理分析,一份-80℃冻存。

2、研究肿瘤细胞转移
肿瘤转移的模型包括两大类:体外(浸润模型)和体内(转移模型)。

体外(浸润模型):了解肿瘤细胞对周围相连组织的侵润性。

体内模型主要研究肿瘤细胞的转移性即肿瘤细胞在远端组织形成病灶的能力。

2.1. 体外(浸润模型)
例:浸润型脑胶质瘤动物模型的建立
方法:取若干只Balb/c免疫缺陷裸鼠,将分离和鉴定并转染携带绿色荧光蛋白的脑胶质瘤干细胞立体定向法行小鼠颅内接种,每组10只。

小鼠麻醉后头部正中切口,剥离骨膜后钻孔(坐标是冠状缝后0.5 cm,矢状缝右侧2.5 cm) 。

取2 μL胶质瘤干细胞以1×104 cells /只小鼠的剂量,经微量注射器缓慢注射入鼠脑纹状体内(深度是2.5 ~3 mm) 。

在确定的时间点处死一部分动物进行荧光( 立体荧光显微镜下) 病理证实和比较,同时检查脑胶质瘤干细胞的体内生长特征以及干细胞标志物等。

2.2. 体内(转移模型)
例:肩胛部皮下接种的方法建立裸鼠乳腺癌移植瘤模型,目的:观察壮骨镇痛胶囊对裸鼠乳腺癌移植瘤模型骨转移相关指标整联蛋白αvβ3(ITG-αvβ3)及骨唾液酸蛋白(BSP)表达的影响。

方法:取处于对数生长期的乳腺癌细胞MDA-MB-231,用0.25%胰蛋白酶消化制成单细胞悬液,收集细胞,细胞计数板法计数,调节细胞浓度为2×107个/mL,按0.2 mL/只接种于裸鼠右前肢肩胛上区,接种部位可以见一皮丘,质软,2 天后,皮丘基本吸收,10 天后接种部位可触及米粒大结节,质硬,即乳腺癌移植瘤组织。

检测壮骨镇痛胶囊对移植瘤组织中IGT-αvβ3和BSP表达的影响。

例:原位移植建立人肾透明细胞腺癌裸鼠转移模型,观察肿瘤病理学特征。

方法:收集体外培养的对数生长期786-0细胞(人肾透明细胞腺癌细胞),进行裸鼠皮下注射,待皮下移植瘤长至直径为1.5cm左右时取出,以相同方法进行鼠间传代(每代2只),3~4代后取出移植瘤,剪成1mm3大小进行肾包膜下原位接种,获人肿瘤裸鼠转移模型,即外科原位移植(Surgical Orthotopic Implantation,SOI)模型,裸鼠垂死时脱颈处死,取出肺脏转移灶体外培养,胰酶消化传代4~5次后即获得较纯的肿瘤细胞,命名为786-0-LM1。

同时采用786-0细胞悬液进行肾包膜下原位注射,建立细胞原位注射模型。

3、研究肿瘤细胞耐药
3.1. 耐药细胞株的建立
本实验以紫杉醇为诱导药,以人食管鳞癌细胞系EC109为诱导对象,采用高剂量间歇诱导结合时间递增的方法建立耐药细胞株。

终浓度为0.625 μg/ml 的紫杉醇(此浓度是紫杉醇对EC109 细胞IC50 的12.5 倍)作用于对数生长期的EC109两个小时,之后弃含药培养基,用4℃PBS 洗三次,0.25%胰蛋白酶消化处理,800r/min 离心4min 收集细胞,加培养基重悬,重新接种于培养瓶继
续培养;24 小时后可见大量细胞死亡,不断去除凋亡细胞,扩增活细胞,至生长状态良好,达到70%~80%饱和时,传代培养3 代;重复上述操作两次,即EC109细胞在此阶段共被药物作用3 次,得到细胞EC109/Taxol。

MTT 实验测定亲本细胞与耐药细胞对多种细胞毒类化合物的敏感性。

3.2. 裸鼠移植瘤耐药模型的建立
无菌条件下收集亲本株EC109和耐药株EC109/Taxol 细胞,用无菌生理盐水稀释至5×107个/ml,采用皮下移植方法,分别接种EC109和EC109/Taxol 细胞于裸鼠右侧腋窝皮下,每只接种1×107个细胞。

待其成瘤后(直径达1cm)即认为此瘤块为肿瘤,记录两细胞成瘤时间及成瘤率。

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