多糖结构分析方法的研究
多糖的结构分析方法包括
多糖的结构分析方法包括多糖的结构分析方法是确定多糖化合物的组成和连接方式的关键工具。
一般而言，多糖的结构分析可分为化学方法和生物方法两大类。
下面将对这些方法进行详细阐述。
一、化学方法：1. 水解分析法：多糖可通过水解反应将其分解为单糖组成部分。
常用的水解剂有酸、碱及酶等。
水解之后，通过测定生成的单糖或小分子产物的性质，如比旋光度、红外光谱等，可以了解多糖的结构。
2. 艳蓝法：多糖与一些特定的染料反应，形成稳定的染色复合物，从而测定多糖的含量。
例如，通过酚-硫酸法，可以用磺酸依托品氧化苄功酸钠抗络常数来定量多糖。
3. 光谱法：红外光谱、紫外光谱、核磁共振等技术可用于多糖的结构分析。
红外光谱可用来分析反映多糖内部结构的原理基团，紫外光谱用于分析多糖的存在和测定多糖的含量，核磁共振用于确定多糖的空间结构。
4. 色谱法：气相色谱、液相色谱和凝胶渗透色谱等方法可用于多糖的分离和定性。
例如，利用薄层色谱法，可分离多糖混合物，并通过染色剂的显色来判断多糖的组成。
二、生物方法：1. 酶降解法：通过加入特定酶，如淀粉酶、纤维素酶、葡萄糖酸酶等，可对多糖进行降解。
通过观察降解过程中生成的产物，可以了解多糖的结构。
此外，酶处理还可用于多糖的修饰。
2. 糖基转移酶法：多糖通过与糖基转移酶反应，可实现特定糖基的转移。
通过测定生成的产物，可以推测多糖的结构。
3. 色谱法：包括气相色谱、高效液相色谱等。
例如，通过细胞外多糖水解产生的单糖组成通过气相色谱或液相色谱分析，可以了解多糖的结构。
4. 核磁共振波谱法：包括质子核磁共振、碳13核磁共振等。
通过测量样品在强磁场下的核磁共振信号，可以获得丰富的结构信息。
此外，还有一些其他方法如质谱分析、电泳分析等都可用于多糖的结构分析。
总之，多糖的结构分析需要利用多种方法互相印证，综合分析，才能获得准确的结构信息。
以上介绍的方法只是常用的几种，请根据研究的具体需要选择合适的方法进行分析。
真菌多糖的化学结构研究
2、主链上糖苷键决定多糖活性
大多抗肿瘤活性的葡聚多糖：(1→3)糖苷键连接。 香菇多糖
3、主链构型决定多糖活性
抗肿瘤活性的多糖：β-(1→3)-D-葡聚糖的主链结构。
[1]孔繁利.碱提糙皮侧耳水溶性多糖WPOP-N1的结构解析及抗肿瘤机制研究[D].吉林大学，2012
4、多糖支链长度对活性的影响
一般支链较短的多糖具有抗肿瘤活性
参考文献
[4] Shao-Ping Nie, Steve W. Cui, Aled O. Phillips, et al. Elucidation of the structure of a bioactive hydrophilic polysaccharide from Cordyceps sinensisby methylation analysis and NMR spectroscopy[J].Carbohydrate Polymers. 2011,84:819– 899.
[5] Himani Bhatia, P.K.Guptab, P.L. Soni. Structure of the oligosaccharides isolated from Prosopis juliflora (Sw.)DC. seed polysaccharide[J]. Carbohydrate Polymers.2014,101:438– 443.
2.2、单糖组成分析
XiuJu Du[2]等采用了 HPAEC-PA对3种桦褐 孔菌子实体多糖进行了 单糖组成分析。
表1 桦褐孔菌多糖的HPAEC-PAD分析
[3] XiuJu Dua, et al. International Journal of Biological Macromolecule.2013,62: 691– 696.
多糖结构分析
多糖结构研究方法多糖及其复合物是来自于高等动、植物细胞膜和微生物细胞壁中的天然大分子物质之一，自然界含量丰富，与人类生活紧密相关，对维持生命活动起至关重要的作用。
多糖和核酸、蛋白质、脂类构成了最基本的4类生命物质。
由于多糖的生物活性与多糖的结构关系密切，因此清楚认识多糖的结构是进行多糖研究和利用的基础。
多糖结构比蛋白质和核酸的结构更加复杂，可以说是自然界中最复杂的生物大分子。
从化学观点来看，多糖结构解析最大的难点就在于其结构的复杂性。
糖的结构分类可沿用蛋白质和核酸的分类方法，即多糖的结构也可分为一级、二级、三级和四级结构。
与蛋白质或核酸大分子相比，糖链的一级结构“含义”要十分丰富。
测定糖链的一级结构，要解决以下几个问题：(1)相对分子质量；(2)糖链的糖基组成，各种单糖组成的摩尔比；(3)有无糖醛酸及具体的糖醛酸类型和比例；(4)各单糖残基的D-或L．构型，毗喃环或呋喃环形式；(5)各个单糖残基之间的连接顺序；(6)每个糖苷键所取的a-或B．异头异构形式；(7)每个糖残基上羟基被取代情况：(8)糖链和非糖部分连接情况；(9)主链和支链连接位点：（10)糖残基可能连接硫酸酯基、乙酰基、磷酸基、甲基的类型等。
多糖的二级结构是指多糖主链间以氢键为主要次级键而形成的有规则的构象，与分子主链的构象有关，不涉及侧链的空间排布；多糖的三级结构和四级结构是指以二级结构为基础，由于糖单位之间的非共价相互作用，导致二级结构在有序的空间里产生的有规则的构象四。
多糖结构的分析手段很多。
不仅有仪器分析法，如红外、核磁共振、质谱等，还有化学方法，如完全酸水解、部分酸水解、高碘酸氧化、Smith降解、甲基化反应等，以及生物学方法，如特异性糖苷酶酶切、免疫学方法等。
1质谱(MS)由于MS法在糖链结构分析中具有快速灵敏，样品用量少、结构信息直观的特点而得到越来越广泛的应用。
近年来各种软电离技术的诞生，如快原子轰击质谱(FAB—MS)，电喷雾质谱(ESI—MS)，基质辅助激光解析离子化质谱(MALDI-MS)等，使得糖结构分析的研究取得了日新月异的发展。
多糖高级结构研究方法
1. 红外光谱法（IR）红外光谱在多糖的结构分析上的应用主要是确定糖苷键的构型以及常规官能团。
如：多糖化合物在890cm- 1处吸收是β-吡喃糖苷键特征峰，而820 cm- 1和850cm- 1则是α-吡喃糖苷键特征峰。
2.核磁共振法( NMR)主要用于确定多糖结构中糖苷键的构型以及重复结构中单糖的数目。
3. 原子力显微镜（AFM）该技术是在扫描隧道显微镜( STM )基础上发展起来的一种新颖的物质结构分析方法。
其用很尖的探针扫描待测样品表面, 探针附在一根可活动的微悬臂的底端上, 当探针与样品接触时, 产生的微小作用力引起微悬臂的偏转, 通过光电检测系统对微悬臂的偏转进行检测和放大, 信号经过转换可得到样品的三维立体图像。
如：该技术研究了香菇多糖在不同浓度NaOH 溶液下构型和构象的转变。
4. X- 射线衍射法(XRD)X - 射线衍射法可得到晶体的晶胞参数和晶格常数, 再加上立体化学方面的信息，包括键角、键长、构型角和计算机模拟, 就可以准确的确定多糖的构型。
5. 圆二色谱( CD)从CD 可以知道绝对构型、构象等信息, 是研究多糖的三维结构的有效办法。
中性多糖因缺少一般紫外区可提供信息的结构, 难以直接得到由CD 谱提供的结构信息，通常可进行衍生化或者将多糖与刚果红络合后测定。
6. 快原子轰击质谱( FAB - M S)FAB- MS适合于分析极性大、难挥发、热不稳定的样品。
在快原子轰击过程中, 样品通过正离子方式增加一个质子或阳离子, 或通过负离子方式失去一个质子产生准分子离子作为谱图的主要信号, 并给出反映连接顺序等信息的碎片。
因此FAB- MS可用来测定寡糖链的分子量。
通过FAB- MS形成[M - H ] - 离子是确定寡糖中单糖组成的一种方便的方法。
7. 气质联用(GC - M S)气相色谱与质谱联用可以得到有关单糖残基类型、链的连接方式、糖的序列和糖环形式、聚合度等多种结构信息。
多糖化学结构鉴定方案总结
经过分级纯化的多糖在测定结构前须检查其纯度及测定分子量。
检查纯度最常用的判断方法：（1）用G C 、HPLC测定组成多糖的单糖的摩尔比是否恒定。
用不同的柱型测定结果更为可靠。
（2）电泳只出现一条带。
如可用聚丙烯酰胺凝胶电泳、乙酸纤维素薄膜电泳及玻璃纤维纸电泳。
对于中性多糖可采用高压电泳，以硼酸盐为缓冲液，可增大其迁移速度。
（3）凝胶柱层析图呈现对称的单峰。
若有“拖尾”现象，说明其均一性不够好。
阴离子交换层析纯化用DEAE一纤维素52(2.6x100cm)柱层析,0.lmol/LNaCl洗脱,流速6ml/h,按2ml一管分部收集,苯酚一硫酸法逐管检测,绘制收集体积与糖含量之间的关系曲线。
看是否有单一对称峰。
按照Ye等报道,采用DEAE一52一纤维素交换柱层析法(2.6x30cm)对鲍氏层孔菌菌丝体粗多糖进行初步分离。
DEAE一纤维素凝胶预处理:称取DEAE一52一纤维素凝胶干粉,加入约10倍体积质量比(ml/g)的0.5mol/LNa0H溶液浸泡30分钟,倒出上清液,用大量去离子水反复浸洗至pH值近中性;再用相同体积的0.5mol/LHCI溶液浸泡30分钟,倒出上清液,用大量去离子水反复浸洗至pH值近中性;最后用相同体积的0.5mol/lNaOH溶液再浸泡30分钟,用大量去离子水反复浸洗至pH值中性。
处理完毕后,进行湿法装柱,用去离子水0.5mol/LNaCl溶液,去离子水依次分别平衡(流速1.0ml/min)2一3个柱体积备用.糖样100mg溶于5ml的去离子水中,离心除去不溶物,上样于DEAE一52一纤维素阴离子层析柱(2.6x30cm,Cl-1型),分别采用去离子水0.1和0.3mol/LNaCI溶液进行分段梯度洗脱,流速1.0ml/min,自动收集器分部收集(10ml/管),每梯度20管。
用硫酸一苯酚法跟踪检测各管多糖含量(490nm处吸收值),以收集的管数为横坐标。
吸光值(490nm)为纵坐标绘制DEAE 一52一纤维素色谱柱洗脱曲线。
糖苷酶在多糖结构分析中的应用研究
加强糖苷酶在多糖结构分析中的与其他方法的联用研究
1 2 3
糖苷酶与质谱联用
将糖苷酶与质谱联用，通过酶解多糖生成的单 糖或寡糖的质谱分析，提供更多关于多糖结构 的信息。
糖苷酶与光谱方法联用
结合光谱方法如红外光谱、核磁共振等，对酶 解后的产物进行详细的结构分析，进一步解析 多糖的结构特征。
糖苷酶与生物信息学方法联用
度和回收率，降低杂质的干扰。
稳定性提高
03
通过蛋白质工程和分子进化等方法，提高糖苷酶的稳定性和耐
受性，使其在多糖结构分析中更可靠和高效。
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糖苷酶在多糖结构分析中可以 用于水解多糖，获得单糖分子 或低聚糖，以便进一步分析。
研究目的和方法
研究目的
探讨糖苷酶在多糖结构分析中的应用，分析其水解多糖的能力和效果。
研究方法
收集多种具有代表性的糖苷酶，分别对其性能进行测试，并对结果进行比较和分析。同时，对不同来源的多糖 进行水解，分析水解产物的组成和结构。
运用生物信息学方法对糖苷酶的基因序列、氨 基酸组成和三维结构进行预测和分析，为理性 设计提供依据。
发展更高效的糖苷酶制备和纯化方法，提高应用效率。
制备方法
01
探索更高效的制备方法，包括基因克隆、表达和纯化等步骤，
以降低成本和提高产量。
纯化方法
02
开发新的纯化技术，利用色谱、电泳等手段，提高糖苷酶的纯
多糖组成分析
单糖组成分析
利用糖苷酶水解多糖，分析释放出的单糖种类和比例，确定多糖的组成。
糖苷键类型分析
通过分析水解产物中单糖之间的连接方式，确定多糖中的糖苷键类型。
多糖链构象分析
分子量分布
利用糖苷酶处理多糖，通过凝胶色谱法或 超滤法测定分子量及分布。
多糖的结构研究
苷键的构型有关。一般呋喃糖苷键较吡喃型易水解 ,
水解试剂的不同会影响水解条件。水解之后的多糖经中和、 过滤 , 可采 用纸层析 ( PC) 、 薄 层层析 ( T L C) 、 气相 色谱法( GC) 、 液相色谱法 ( HPL C) [ 8] 和离子色谱 法 [ 9] 进行分 析。多糖水 解产生 物的 GC 分析 , 通常 是先经 衍 生化处理成易挥发组成分 , 常采用的衍生化方 法是硅烷基化和乙酰化处理。高效液相色谱法则 克服了 G C 需 衍生化的缺陷 , 它可直接进样测定。同样离子色谱法不 需要衍生处理 , 而且检测灵敏度甚至比 HPLC 法更高。 离子色谱法的原理是将样品经强碱性物质离子化后 , 通 过离子色谱柱经脉冲安培检测器检测。 ) 部分 酸水 解 : 利用多糖链中部分糖苷键如呋喃型糖苷键 、 位于链末端的糖苷键和支链上的糖苷键易水解脱落 , 而构成糖 链的主链重复结构的部分和糖醛酸等对酸水解则相对稳定的特点 , 对多糖常采用部分酸水解法处理。多糖经 部分酸水解后 , 经醇析、 离心 , 将上清液和沉淀分别进行 分析。多 糖部分酸水解之后的醇析产物往往是多糖的 主链重复性结构片段、 糖醛酸链片段 , 从这些小片段可以推测多糖链的一些结构特点。 ) 乙酰解 : 将多 糖与
第2期
周
鹏等 : 多糖的结构研究
199
乙酐、 冰醋酸、 浓硫酸等混合反应 , 可得到乙酰化单糖 , 目的也是用于单 糖组成分析。 点在于半缩醛被保护起来 , 使异构体物减少 , 有利于分辨。
) 甲 醇解 : 利用 HCl-
CH 3OH 溶液把多糖的半缩醛甲基化 , 形成甲基糖甙后再经衍生或不衍生进 行 GC 或 HPL C 分析 , 甲醇解 的优 高碘酸氧化法 : 高碘酸可以选择性的氧化 断裂糖分子中的连二羟基或连三羟基处 , 生成相应的 多糖醛、 甲 酸 , 反应定量地进行。每开裂一个 C- C 键消耗一分子高碘酸 , 通过测定高碘酸的消耗 量和甲酸的 生成量 , 可 以判断糖苷键的位置、 连接方式、 支链状况和聚合度等结构信息。以葡萄糖为例 , 以 1 2 或 1 成一分子甲酸 ; 以 1 时需做空白试验。 Smith 降解 : Smit h 降解是将 高碘酸氧化产物还原后 进行酸 水解或 部分水解。 由于糖 基之间以 不同的 位 置缩合 , 用高碘酸氧化后则生成不同的产物 , 由降解产物来 获取多糖的 结构信息。以 1 糖基为例 , 其高碘酸氧化、 Smit h 降解反 应如图 2。 4、 1 6 糖苷键的 己 4 键合 的葡萄 糖基经高碘酸氧化后 , 每糖基消耗一分子高碘 酸 , 无甲酸生成 ; 而 1 6 键合的葡萄糖基消耗二分子高碘酸 , 生 3 键合的糖基不被高碘酸氧化。高碘酸的氧化反应必须在控制的条件下进行 , 以避免副 反应的产生 ( 超氧化反应 ) 。一般使多糖与最小量的高碘酸 反应 , 溶液 pH 值控制在 3- 5, 且应 避光、 低温 , 同
多糖结构分析范文
多糖结构分析范文多糖是由单糖分子通过糖苷键连接而成的高分子化合物，广泛存在于生物体内，具有重要的生理功能和科学研究价值。
多糖的结构分析是研究其化学组成、分子结构和空间构型的过程，对于了解多糖的生物学功能和性质具有重要意义。
多糖的结构分析方法主要包括物理化学方法、光谱分析方法和酶解分析方法等。
下面将对这些方法进行详细说明。
1.物理化学方法：物理化学方法是利用多糖的物理性质进行结构分析的方法。
其中包括粘度测定、分子量测定、光旋光度测定和电泳分析等。
（1）粘度测定：多糖的粘度与其分子大小和结构有关，通过测定多糖溶液的粘度可以推测其分子量和构型。
粘度测定通常利用Ubbelohde粘度计或Ostwald粘度计进行。
（2）分子量测定：多糖的分子量是其结构的关键参数，可通过凝胶过滤、凝胶电泳或质谱等方法测定。
其中，凝胶过滤是常用的方法，通过选择合适的孔径大小的凝胶阻隔多糖的滤过，然后根据滤过时间计算出多糖的分子量。
（3）光旋光度测定：多糖的结构中含有手性中心，具有旋光性，通过测定多糖溶液的旋光度可以推测其分子结构。
通常使用旋光光谱仪进行测定。
（4）电泳分析：多糖的电泳分析常用聚丙烯酰胺凝胶电泳或琼脂糖电泳。
通过电泳分析可以确定多糖的电荷性质、分子大小和分子结构。
2.光谱分析方法：光谱分析方法包括红外光谱、核磁共振（NMR）光谱和质谱等。
（1）红外光谱：红外光谱可以提供多糖分子中官能团的信息，如羟基、氨基、羧基等。
通过对比标准谱图或理论谱图，可以确定多糖的官能团组成。
（2）核磁共振光谱：核磁共振光谱可以提供多糖分子的分子结构和空间构型信息。
其中，13CNMR可确定多糖的碳原子排布，1H-NMR可确定多糖的氢原子排布。
（3）质谱：质谱是一种通过测量多糖分子或其片段的离子质量比来确定分子结构的方法。
通过质谱可以推断多糖的元素组成、分子量和结构。
3.酶解分析方法：酶解分析方法是利用特定的酶可以选择性地降解多糖，从而确定其分支链和连接方式。
多糖的构象研究方法综迹
多糖的构象研究方法综迹多糖物质（Polysaccharides）是构成生物高级组织的重要物质，是最常见的复杂植物碳水化合物。
它们在维持和调节生物系统稳定性方面表现出极高的活性、组成多样性和结构复杂性。
过去几年来，多糖结构构象研究取得了显著进展，得益于几种先进研究方法的支持。
本文就目前用于多糖结构构象研究的主要方法进行综述，主要内容包括：结构表征技术、分子模拟技术、结构分析技术和表征技术。
结构表征技术是多糖构象研究的基础，包括显微镜技术、X光衍射技术和核磁共振技术等。
它们可以测量多糖分子的几何构型，不仅能识别多糖分子的底物，还能准确地表征其形状、大小和官能团分布等。
显微镜技术可用于研究多糖分子的构象，提供了一种量化分析多糖构象和抗原性的方法。
X光衍射技术是一种穿透衍射技术，可以测量多糖分子空间结构，从而获得更准确的构象信息。
核磁共振技术可以快速准确地测量多糖构象，给出更准确的结构表征指标，例如取代官能团类型、取代数量和官能团位置等。
分子模拟技术是多糖构象研究的基础，可以用来预测多糖分子的构象和性质。
它可以提供有关多糖分子结构、性能和作用机制的重要信息，并有助于设计新的多糖。
分子模拟技术主要包括力场模拟、能量最小化和统计力学模拟等。
它们可以帮助我们更好地了解多糖结构的物理化学性质，探索多糖分子的构象调控机制，从而明确其作用机制。
结构分析技术是指在多糖分子构象研究中所应用的技术，可以将多糖分子的空间结构以及其结构表征参数提取出来。
结构分析技术包括几何分析技术、能量模型分析技术和统计分析技术等。
它们可以用于分析多糖结构的物理实体、结构特征、空间构象和结构参数等。
此外，还可以用于比较不同多糖结构的差异，发掘多糖结构之间的关系，并用于设计新的多糖分子及其结构表征。
表征技术是指在多糖结构构象研究中所应用的技术，主要用于描述和分类多糖结构构象。
表征技术主要包括：结构表征技术、序列表征技术和表面表征技术等。
它们可以用于提取多糖分子的序列特征、表面特征、结构特征和功能特征等，更好地了解多糖的构象特性，从而获得更精确的多糖结构构造及功能。
多糖结构分析
一：多糖中的单糖组分分析一般对多糖进行完全水解，水解条件：封管0.5~3M硫酸或1~6M盐酸，80℃~100℃水解2.5~8h 即可。
或控制水解条件，进行逐步水解，如封管0.025M硫酸，100℃水解15min，30min，45min 等，水解液用碳酸钡或氢氧化钡中和，滤液浓缩后可用纸层析、薄层层析、气相层析或高压液相层析等鉴定。
二：相邻单糖基连接方式分析将甲基化多糖水解得到甲基化的单糖，而此单糖上甲基化之羟基所在的碳原子就是连接键所在。
高碘酸氧化是定量反应，Smith降解是将高碘酸氧化产物进行还原，酸水解或部分水解，从高碘酸的消耗量和不同产物的生成，便可进行糖苷键位置的判断-产物中若有一分子比例的甲酸生成而消耗两分子比例的高碘酸根时，表明多糖的非还原末端或非末端部分有1-6苷键相连的单糖基存在；产物中若有赤藓醇生成，则提示有1-4结合苷键；若有甘油生成，有1-6、1-2结合的苷键或有还原性末端葡萄糖基等；若产物中能检出单糖，如葡萄糖、半乳糖、甘露糖等，则有1-3苷键存在。
结合¹³C-NMR确定连接位置。
三：端基碳苷键构型分析1：酶解实验：不被淀粉酶水解的多糖，无α-苷键，与纤维素酶有作用者，存在β-苷键。
2；IR：α-型差向异构体的C-H键在844±8cm‾¹处有一个吸收峰；β-型的C-H键在891±7cm‾处有一个吸收峰。
但是，海藻糖、阿洛糖和异阿洛糖的α-型和β-型同时存在的情况下，就不能以次来判断。
3：¹H-NMR：端基碳的δ值大于5.00ppm者，糖苷键为α-型，小于5.00ppm者，则为β-型。
4；¹³C-NMR：α-型连接的C₁化学位移在97-101ppm，β-型的在103~105ppm。
对甘露聚糖不能用化学位移判断α-型或β-型。
可用裂分常数决定，一般¹Jｃ-ｈ=170HZ，为α-型，160HZ 者为β-型。
水溶性多糖的提取及结构测定方案
水溶性多糖的提取及结构测定方案提取水溶性多糖方法:1. 蒸馏水提取法将植物材料使用蒸馏水浸泡一定时间后，在常温下加热，使多糖向水中溶解。
然后进行过滤、冷却、离心等操作，分离出水溶性多糖。
优点：简单易行，可获得高纯度多糖。
缺点：需耗费大量水和时间，获得的多糖含量低。
2. 酸碱法提取法将植物材料使用强酸或强碱处理，破坏细胞壁，释放出多糖。
然后中和酸或碱，进行沉淀或过滤，获得多糖。
优点：易操作，可获得高纯度多糖，提取产量高。
缺点：对多糖结构有影响，需要严格控制处理时间、温度等参数。
3. 高压法提取法将植物材料加入高压蒸馏水中，在高温高压下进行提取。
然后通过冷却和离心等步骤，分离出水溶性多糖。
优点：高效、快捷、获得的多糖含量高。
缺点：需要专业设备，投资成本高。
结构测定方案：1. 紫外-可见光谱分析法将多糖样品溶解在水中，使用紫外-可见光谱仪测量其吸收光谱。
通过分析吸收峰位、峰形等特征，推断多糖结构。
优点：简单易用，快速。
缺点：只能得出对多糖主要结构的推测。
2. 红外光谱分析法将多糖样品与 KBr 混合后压成盘，进行红外光谱测量。
通过分析吸收峰位、峰形等特征，确定多糖结构。
优点：稳定可靠，测量精度高。
缺点：需要专业技能和设备。
3. 核磁共振光谱分析法将多糖样品溶解在溶剂中，使用核磁共振仪进行分析。
通常使用的是1H核磁共振技术。
通过分析多糖分子内部原子的化学位移、耦合常数等特征，确定多糖结构。
优点：精确度高，能够解析多糖结构。
缺点：需要专业技能和设备，而且成本较高。
总的来说，不同的提取方法和结构测定方法各有优缺点，需要根据具体的研究目的和条件来选择。
同时，为了保证研究结果的可靠性和精确度，提取和分析过程中需要注意控制实验条件和误差。
多糖的结构分析
第6章 多糖的结构分析
三、结构研究的化学方法
完全酸水解 阐明结构的第一步就是鉴别多糖的单糖组成。多糖酸水解
是常用的方法。多糖水解的难易与其组分中单糖的性质、单糖 环的形状和糖苷键的构型等有关；含有糖醛酸或氨基糖的多糖 不易水解，α型较β型易水解，吡喃型戊聚糖较吡喃型己聚糖易 水解，呋喃糖苷键一般较吡喃糖苷键易水解。水解后中和水解 液，然后用层析方法分析，常用的层析方法有纸层析、纤维粉 薄层层析和气相层析。近几年这种酸水解方法分析已经达到完 全自动化。 部分酸水解
第6章 多糖的结构分析
一、组成成分分析
1、酸水解 1-3N硫酸，100℃，水解6-8小时。用碳酸 钡中和，G4漏斗过滤，蒸发皿蒸干。
气相色谱分析 纸层析（PG）：
展开剂： 正丁醇∶乙酸∶水=4∶1∶5； 正丁醇∶吡啶∶水=6∶4∶3
显色剂：常用硝酸银显色剂 A：16%硝酸银水溶液∶丙酮=1∶9（V/V） B：1%NaOH乙醇溶液（W/V） C：6 mol/L氢氧化铵
第6章 多糖的结构分析
多糖（Polysaccharide）是天然大分子 物质，是天然化合物中最大族之一。多糖结 构的分析较蛋白质结构分析复杂，一方面是 因为组成多糖的单糖品种繁多（目前已知的 单糖有200多种）；另一方面即使只有一种单 糖组成的多糖其连接方式的不同以及可能有 分枝（蛋白质没有分枝），所以多糖的结构 种类就很多，不容易分析。
第6章 多糖的结构分析
（3）透析 产物加蒸馏水稀释一倍，蒸馏水透析2-3天（换水）
（4）真空干燥（或冻干），得部分甲基化多糖，需进 一步甲基化
（5）进一步甲基化： 重复1-4的Hakomori methods 氧化银法
（6）产物：甲基化产物用氯仿溶解，萃取，收集氯仿 层，干燥得甲基化糖。 甲基化产物分析 气相色谱法。
多糖的结构解析方法研究进展
基金项目：国家自然科学基金资助项目（８１８７２９６２）；国家重点研发计划项目（２０１９ＹＦＣ１７１０８００）；山西省重点研发计划重点项目（２０１６０３Ｄ３１１１０１）；山西省优秀人才科技创新项目（２０１６０５Ｄ２１１０３０，２０１７０５Ｄ２１１０２０） 作者简介：李雪琴，女，１９９５－０７生，在读硕士，Ｅ ｍａｉｌ：２４１７６０９５６７＠ｑｑ．ｃｏｍ 收稿日期：２０２０－１１－１１多糖的结构解析方法研究进展李雪琴１，２，李 科１，２，３ ，秦雪梅１，２，李震宇１，２，范信晖１，２，崔连杰１，２（１山西大学中医药现代研究中心，太原 ０３０００６；２山西大学化学生物学与分子工程教育部重点实验室；３中国科学院过程工程研究所； 通讯作者，Ｅ ｍａｉｌ：ｌｉｋｅ＠ｓｘｕ．ｅｄｕ．ｃｎ）关键词： 中药； 多糖； 结构解析； 纯度； 单糖组成； 单糖连接方式； 糖苷键构型； 构象中图分类号： Ｒ２８４ 文献标志码： Ａ 文章编号： １００７－６６１１（２０２１）０３－０３８０－０８ ＤＯＩ：１０．１３７５３／ｊ．ｉｓｓｎ．１００７－６６１１．２０２１．０３．０２３ 中医药是我国的国粹，是中国人民几千年来与疾病作斗争的经验总结，新冠肺炎疫情发生以来，中西医结合的救治方案在全程中均发挥不可替代的作用。
中药成分复杂，多糖是中药的活性成分之一，研究表明，多糖是柴胡生物活性的基础［１］，黄芪多糖在抗肿瘤［２］、抗衰老［３］、抗氧化［４］等方面发挥着重要作用，大枣多糖具有抗氧化、抗疲劳、抗肿瘤等多种药理活性，是大枣中重要的活性成分［５］。
与基因组学和蛋白质组学相比，糖组学的研究进展较为缓慢，其主要发展瓶颈在于糖的树形结构增加了糖结构解析的难度［６］，尤其是多糖的分支结构尚未有效的方法准确测定，因此多糖的构效关系并不明确。
研究具有活性的中药多糖结构，以便更好地开发利用中药资源是亟待开展的重要工作。
目前缺乏可以对大部分多糖进行结构解析的普遍适用的方法，因此很难实现对多糖结构的快速准确解析，从而制约了对多糖进一步深入的研究。
多糖的研究方法及其现状
多糖是亲水性大分子,难以透过由脂质 构成的细胞膜,所以口服有效常受到质疑. 有人认为多糖主要与肠道细胞表面的相应 受体分子起作用,或者通过胞饮内吞作用 (pinocytosis)由消化道进入血液,然后刺 激人体免疫细胞的成熟,分化和繁殖,诱导 专一性细胞因子的产生与激活(所谓多糖是 多细胞因子诱导剂),结果由这些免疫细胞 去吞噬或杀死肿瘤细胞或阻断细菌,病毒的 吸附或繁殖.
2. 半合成方法 衍生化基团取代 ---多糖中羟基中H 原 子--改变氢键作用---成盐—改善溶解性 羧甲基化 硫酸化 磷酸化 羧甲基化 (1) 多糖(0.15M NaOH, 95oC, 2h)—残 渣水洗至中性---悬浮于0.06%NaCl---醋酸调pH至 4.5(50oC 6h)---悬浮液pH调至碱性---氯乙酸反应--羧甲基化多糖钠盐.
动物
糖原 （Glycogen） 硫酸软骨素 （Chondroitin sulfate） 肝素 （Heparin） 透明质酸 （Hyaluronic acid） 壳聚糖 （Chitin）
葡聚糖 琼脂 （Dextran） （Agar） 果聚糖 藻酸 （Levan） （Alginic acid） 黄源胶 卡拉胶 （Xanthan） （Carrageenin） 甘露聚糖 海带多糖 （Mannan） （Laminaran） 黑曲霉多糖 （Nigeran） 细胞壁多糖 （Cell wall polysaccharide） 香菇多糖 （Lentinan）
2)
多糖的体内药物代谢动力学研究困难
3) 多糖在分子水平下与蛋白质,核酸等其 他分子相互作用的认识还不清楚. 由于目 前有关多糖的药理研究主要局限于观察多 糖在体外或体内的生物效应, 要达到分子 水平,细胞水平还需大量研究.
己有的实验证明影响多糖生物活性的主要 因素： 分子量,分枝度,高级结构,溶解度,粘度等 多糖--大分子---分子内的糖苷键有较强的 旋转性 -------决定了多糖的二级结构
多糖高级结构解析方法的研究进展
多糖高级结构解析方法的研究进展多糖是一种由多个单糖分子通过糖苷键连接形成的生物大分子，在生物体内发挥着重要的生理功能。
多糖的高级结构解析对于理解生物大分子的生物功能和药物研发具有重要意义。
近年来，随着科技的不断发展，多糖高级结构解析方法的研究取得了显著的进展。
本文将围绕多糖高级结构解析方法的研究进展进行综述。
多糖高级结构的解析方法可以概括为物理方法、化学方法和生物方法。
物理方法包括X射线衍射、红外光谱和核磁共振等，可以提供多糖的构象和取向等信息。
化学方法主要包括降解、甲基化、乙酰化等，可以用于确定多糖的链长度、糖单元组成和连接方式等。
生物方法则包括利用特异性抗体或酶对多糖进行识别和降解等，可以用于分析多糖的高级结构。
然而，这些方法存在一定的局限性，如样品制备困难、分辨率低、特异性不够强等。
随着科技的不断进步，近年来多糖高级结构解析方法的研究取得了许多新的进展。
例如，通过结合超速离心和质谱技术，研究者成功解析了复杂多糖的精细结构。
利用纳米孔测序技术也可以快速、准确地测定多糖序列。
另外，基于计算机模拟的方法如分子动力学模拟和蒙特卡罗模拟等也被应用于多糖高级结构的预测和解析。
这些新方法的引入极大地推动了多糖高级结构解析的研究进展。
多糖高级结构解析方法具有许多优点。
例如，物理方法可以提供关于多糖构象和取向的信息，化学方法可以确定多糖的组成和连接方式，生物方法可以用于分析多糖的高级结构。
然而，这些方法也存在一定的局限性。
例如，物理方法可能需要高分辨率的仪器设备，化学方法可能有副反应或无法确定糖苷键的位置，生物方法则需要特异性抗体或酶。
随着多糖高级结构解析方法的不断改进和发展，其应用前景也越来越广阔。
例如，在药物研发方面，通过解析特定多糖的高级结构，可以发现新的药物靶点或制备具有特定生物活性的多糖药物。
另外，多糖高级结构解析方法在食品工业、环境科学和生物技术等领域也有广泛的应用。
例如，通过解析食品中的多糖结构，可以评估其营养价值和生物活性；通过解析环境中的多糖结构，可以了解其对环境的影响和作用机制；通过解析生物技术制备的多糖结构，可以优化制备工艺并评估其生物功能。
多糖结构测定的一般流程
多糖结构测定的一般流程下载温馨提示:该文档是我店铺精心编制而成，希望大家下载以后，能够帮助大家解决实际的问题。
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在进行多糖结构测定之前，需要做好充分的准备。
生物多多糖结构与功能相关性探究分析
生物多多糖结构与功能相关性探究分析生物多糖是一类由多个单糖分子通过糖苷键连接而成的高分子化合物。
生物多糖在生物体内具有多种结构和功能，在细胞组织和生理过程中起着重要的作用。
本文将探究生物多糖的结构与功能之间的相关性，并进行分析。
生物多糖的结构多样性对其功能发挥起着至关重要的作用。
生物多糖的结构包括链长、支链、分支度以及单糖种类等因素的组合，这些结构特点决定了生物多糖的物理性质和化学性质。
例如，纤维素是一种由葡萄糖单糖组成的线性聚合物，其链长决定了纤维素的机械强度和稳定性，具有良好的保护作用。
而淀粉则是一种由葡萄糖组成的分支聚合物，其分支度决定了淀粉的可溶性和胰蛋白酶降解速率，具有能量储存和供应的功能。
此外，生物多糖的功能也与其分子结构密切相关。
不同的结构特点赋予生物多糖不同的功能，包括支持与结构、储存与供应、调节与信号传导等。
例如，胞外基质中的透明质酸具有多酸结构特点，可以吸收水分和膨胀，从而提供组织间的支持和保护，同时还可以与细胞及分子基质相互作用，参与信号传导过程。
另外，髓鞘中的神经酰胺具有脂肪酰胺结构，可以形成隔离性的保护层，以促进神经冲动的传导和保护神经纤维。
生物多糖结构与功能之间的相关性还可以通过糖链修饰来探究。
糖链修饰是指糖链上的特定单糖分子或化学基团的结合和修饰过程。
这些修饰可以影响生物多糖的空间结构、稳定性和生物学活性。
例如，蛋白质表面的寡糖修饰可以调节蛋白质的折叠和稳定性，参与细胞信号转导和免疫反应。
其他糖链修饰，如硫酸基团、乙酰基、甲基等，也可以影响生物多糖的功能。
因此，糖链修饰的存在使得生物多糖体系更加复杂多样。
生物多糖结构与功能之间的相关性不仅仅体现在单个生物多糖分子上，还与多糖的相互作用及组装有关。
多糖在生物体内往往存在于复杂的组合物中，如糖蛋白、糖脂等。
这些组合物的结构和组装方式决定了它们的功能和稳定性。
例如，胶原蛋白是一种糖蛋白，由多种生物多糖组装而成，具有结构稳定性和细胞外基质的支持作用。
多糖的构象研究
第2期东北师大学报自然科学版N o 21998年JOU RNAL OF NOR THEAST NO RMA L U N IV ERSI T Y 1998第一作者简介:张翼伸,女,78岁,教授国家自然科学基金资助项目(39170206) 收稿日期:1997 10 08多糖的构象研究张翼伸(东北师范大学生命科学学院,长春,130024)摘要 利用多种方法如圆二色谱、旋光、粘度、比色等测定多糖的各项特征,研究了多糖在溶液中的构象情况,以及外来因素如温度、pH 、变性剂、金属离子、化学修饰剂等影响下,构象特征的变化,获得一系列有意义的规律.关键词 多糖;结构;构象糖复合物具有多种多样的生物功能,在生命现象中参与了细胞的多种活动.糖复合物的研究,国内开展较晚,目前虽已成为国际热门课题引起人们极大的兴趣与关注,但国内的研究,尚较冷落.我们较早开始研究真菌多糖、植物多糖,曾确定多种糖链的一级结构,也涉及到多糖链的高级结构.糖链构象研究有极重要的理论意义,探讨结构与功能的关系,构象尤为重要.但多糖链构象的研究比较困难.我们在所研究的系列真菌、植物多糖中,选择其中一些较典型较特殊的,参考研究蛋白质、核酸构象的一些方法,如圆二色谱(CD)、比旋、粘度、比色等方法,研究多糖水溶液中构象特征,以及外来因素如温度、pH 、变性剂、金属离子、化学修饰剂等影响下的特征变化,以期获得一些有意义的规律.1 缔合性多糖链是由单糖残基通过 O 醚键来连接的,自由度与柔性较大.但多糖链上自由羟基很多,易形成氢键,因此糖链间相互缔合的情况是普遍的.某些多糖在水溶液中用光散射法、粘度法、凝胶色谱柱法测相对分子质量比在二甲亚砜中测相对分子质量结果要大.例如一种斜顶菌多糖 1 在水中的相对分子质量与在二甲亚砜中的相对分子质量之比是3 1.用光散射法测得斜顶菌多糖在水中和二甲亚砜中的相对分子质量分别为168 104和56 104.另用粘度法测得两种溶剂中的相对分子质量分别为152 104和50 104.某些多糖在水溶液中与氯化钠溶液中所测相对分子质量也是不同的.例如一种树舌多糖CF 2a 2 在Sepharose Cl-4B 柱上,用NaCl 液洗脱,NaCl 浓度愈大,洗脱下来的相对分子质量愈小(如图1).右旋糖酐则变化不大.CF 2a 的粘度测定也同样,在NaCl 溶液浓度愈大时,粘度愈小(如图2).右旋糖酐变化也不大.多糖链在水溶液中有缔合现象,在二甲亚砜中则无.在水溶液中的缔合可用稀NaCl 溶液解缔.用凝胶柱层析测多糖的相对分子质量时,不宜用水做洗脱剂,否则结果偏大.图1 树舌多糖CF 2a 在琼脂糖C l-4B 柱上层析CF 2a , 右旋糖酐图2 CF 2a 在不同浓度NaC l 中的比粘变 C F 2a , 右旋糖酐真菌多糖中的云芝多糖、斜顶菌多糖、树舌多糖、裂褶菌多糖、香菇多糖等均为 (1-3)葡聚糖,均为三股螺旋链.这类多糖均可与刚果红形成络合物,在0~0 5mol/L NaOH 范围内,表现为最大吸收波长的特征变化(变成红紫色)(如图3).非 (1-3)葡聚糖或其他多糖链则不能与刚果红产生此颜色反应.但 (1-3)葡聚糖的主干链的长短、支链的长短、有无支链等均可影响三股螺旋链的稳定性.例如从斜顶菌中分出五种多糖 3 ,有三种结构相似,但相对分子质量大小不同.CS 1(50 104),CS 3(13 104),CS 4(0 3 104),它们与刚果红形成的络合物曲线(如图4)不同,主干长、相对分子质量大者稳定,表明三股螺旋链稳定.另两种分支率高者不稳定,C 2(40 104,分支率高于CS 1一倍,支链长一个葡萄糖基),C 2-1(0 2 104~0 3 104,分支比例大)与刚果红所形成的曲线可以看出此特征(如图5).图3 斜顶菌多糖的刚果红实验曲线图4 C S 1,C S 3,CS 4刚果红实验曲线 多糖, 刚果红 CS 1, CS 3, CS 4, 刚果红(1-3)葡聚糖的三股螺旋链在NaCl 溶液或二甲亚砜(DMSO)中则解聚,这种构象的转变在DM SO 混合溶剂体系中可看到构象的转化点 1~2 .如图6所示,以0 5mg/mL 多糖水溶液为起始溶液,以等浓度该多糖的DM SO 溶液调节体积分数 H 2O ,测不同 值下的比旋( )D 与比粘度 sp/c ,结果表明, 值减至0 2前,( )D 与 sp/c 基本不变.当 56东北师大学报自然科学版 1998年6月值在0 2后则发生骤变,两种变化均以 H 2O 0 2为突变点,可以判断此时发生了构象的转化 1,由三股螺旋转变为单股螺旋.实验表明此种转化是可逆的.其他的 (1-3)葡聚糖均可重复此实验.图5 C 2,C 2-1刚果红实验曲线C 2, C 2-1, 刚果红图6 CF 2a 多糖在水与二甲亚砜混合溶剂的比旋与比粘度 , sp/c - H 2O ; ,[ ]D - H 2O2 变性多糖链因大分子链柔性大易变性,但也易复性.多糖水溶液在温度25 ~30 时, sp/c 基本不变,至40 时 sp/c 急骤下降,至60 降至最低 2 (如图7).但经8mol/L 脲,60 处理30m in 的多糖样品,则不随温度变化,表明后者变性为无序构象,前者为有序螺旋构象,40 开始向无序构象变化,且为可逆过程.大多数多糖可用热水或蒸煮的方法提取得到,即是因其加热后虽遭变性,但冷却后仍复性不变的原因.不过多糖样品脱水干燥时,温度稍高则变性,丧失或减低水溶性,值得人们注意.多糖水溶液在pH 值过高或过低时变性,从粘度变化也可以观察到(如图8) 2 .靠近中性范围氢键稳定,构象稳定.在较低或较高pH 值下,氢键受破坏,多股或单股螺旋构象发生变化.图7 多糖的比粘度与温度关系CF 2a , CF 2a 经脲处理图8 多糖的比粘度与pH 值关系变性剂如脲等若对多糖溶液产生较大的变性作用,需要达到一定浓度(如图8).当脲浓度在0~6mol/L 范围时 sp/c 逐渐下降,至8mol/L,降至最低.表明在水溶液中脲浓度大于6mol/L 后,构象发生显著变化.温度、pH 值、变性剂均可使多糖变性,但移去这些因57第2期 张翼伸:多糖的构象研究素,则大多可复性.3 金属离子多糖具有络合多种金属离子的能力,络合后构象大多发生变化,但同样常常也是可逆的,移去金属离子后,则恢复其构象.Fe 3+在碱性条件下与多糖可以表面络合形成与铁蛋白相类似的结构 4~5 .FeCl 3与NaOH(形成聚合的 -FeOOH 铁核)滴加至多糖溶液中,生成多糖铁.它含有铁核,多糖是其表面络合配体,相对分子质量较原来图9 脲浓度对C F 2a 比粘度的影响增大许多.电镜观察,呈颗粒,有增溶现象.穆斯堡谱分析,多糖铁与铁蛋白有相似的结构(如图10),所含铁都为高自旋Fe 3+,处于弱相互作用八面体座状态.大多数可溶性多糖如淀粉、糖元、右旋糖酐、人参多糖、人参果胶 6 等均可与Fe 3+形成多糖铁表面络合物.络合后糖链构象发生变化,如淀粉已无碘颜色反应.中性多糖络合铁时,要加柠檬酸,酸性多糖则不需加柠檬酸(如人参果胶).糖元较淀粉络合铁能力稍差,可能是由于糖链中具有较多的短支链的缘故.多糖铁的制备也是开发铁剂的途径之一.图10 穆斯堡(M ssbauer)谱图11 多糖S-3圆二色谱未经CaCl 2处理的S-3; 经过CaCl 2处理的S -3Ca 2+可与含羧基的酸性多糖作用,羧基的多少,结合Ca 2+的量亦不同,有不同的溶解度,常用做多糖的分级方法.从人参的茎、叶中分离出含 (1-4)半乳糖醛酸为主链的杂多糖 7 ,加CaCl 2后,构象有明显的变化(如图11).酸性图12 蛋箱结构模型杂多糖与Ca 2+作用后,根据园二色谱的变化,推断Ca 2+与两链上的羧基作用,引起两链间的聚合,形成 蛋箱 结构(如图12).如移去Ca 2+(透析或用EDTA)则恢复原状.相似的Ba 2+也有类似情况.钙剂的制备也可用此类方法.Cu 2+可与甘露聚糖形成铜络合物,常用做提纯甘露聚糖的好方法.Cu 2+用斐林试剂,58东北师大学报自然科学版 1998年6月从酵母 8 或小皮伞 9 中提出甘露聚糖均获得好的效果.如图13是小皮伞多糖的圆二色谱,多糖与斐林试剂络合前后的分析.络合后CD 谱有明显的变化,表明小皮伞多糖构象有变化,而且表明多糖与斐林试剂形成络合物,不单涉及Cu 2+,而是Cu 2+与酒石酸共同络合的(络合物过滤后,滤液中检不出旋光物质),如图13.多糖与斐林试剂铜络合物可加酸破坏,恢复成原来的多糖.Pb 2+(PbAc 2)对葡聚糖有较灵敏的选择性,曾用作分级树舌多糖的不同级份 10 .如用PbAc 2可将树舌多糖的色素多糖CF 1、CF 2分开.CF 1、CF 2均为 (1-3)葡聚糖,其中CF 2支链较少.3G 61G 1G G G G G 3G 61G G 1 CF 1 361G 1G 3G 61G 1G 3G 61G 1 CF 2金属离子与多糖链形成各种各样的络合物而引起构象变化,移去金属离子或改变条件则恢复原状.金属离子对多糖链构象的影响研究,除有理论意义外,也为多糖的分级纯化提供了方法,同时也为微量元素补剂的开发提供新的思路和基础准备.4 化学修饰剂多糖链上羟基多,易被多种化学修饰剂修饰.例如经高碘酸氧化生成醛基或羧基,经乙酰化生成乙酰基化合物,经硫酸化或磷酸化生成硫酸基或磷酸基化合物.羟基被化学修饰后,产生新构象.新构象稳定,且是不可逆的.从金顶侧耳中分离出一以 -(1-6)半乳糖为主干,部分2-位上有甘露糖基的支链 12,在水溶液中为无规卷曲构象.其2位上的甘露糖基可与ConA 结合,此多糖与ConA 结合后,可使ConA 的构象发生变化(见图14).但多糖如经氧化或硫酸化后,构象有较大变化,便失去与ConA 结合的能力.图13 FP 1的圆二色谱1-小皮伞多糖;2-斐林试剂;3-多糖斐林试剂;4-滤液图14 多糖PC -3同ConA 结合的圆二色谱测定 ConA; Pc-3+ConA59第2期 张翼伸:多糖的构象研究60东北师大学报自然科学版 1998年6月参考文献1 梁忠岩,张翼伸 斜顶菌水溶性多糖的构象研究 生物化学杂志,1985,1(5,6):142~1472 梁忠岩,张翼伸 树舌多糖CF2a溶液中构象行为的研究 生物化学与生物物理学报,1944,26(4):411~4163 梁忠岩,张翼伸 斜顶菌多糖构象的比较研究 东北师大学报(自然科学版),1988,4:115~1224 石德成,张翼伸 葡聚糖对FeOOH微核表面络合作用初步研究 生物化学与生物物理学报,1989,21(3):201~2085 石德成,张翼伸 直链淀粉及糖原表面络合性能的初步研究 生物化学与生物物理学报,1990,22(3):235~2406 唐明国,张翼伸等 人参多糖与FeooH微核表面络合作用的研究 东北师大学报(自然科学版),1990(1):99~1047 台桂花,张翼伸 人参茎中水溶性多糖的研究( ) 东北师大学报(自然科学版),1988(3):97~1088 周义发,焦明大等 酵母甘露聚糖的电子显微镜观察 东北师大学报(自然科学版),1994(1):58~599 陈西广,张翼伸 安络小皮伞中水溶性多糖的研究 真菌学报,1990,9(2):155~16010 梁忠岩,张翼伸等 树舌水溶性色素多糖CF1的分离纯化与结构研究 生物化学杂志,1990,6(3):273~27811 梁忠岩,张翼伸 树舌水溶性色素CF2的结构确定 生物化学杂志,1992,8(4):497~49912 张丽萍,张翼伸 金顶侧耳多糖及其化学修饰产物水溶液构象的圆二色谱测定 生物化学杂志,1994,10(5):633~635Conformational Study of PolysaccharideZhang Yishen(School of Life S cience,Northeast Normal U niversity,Changchun,130024)Abstract By using various methods such as circular dichroism spectra,optical ratatory,vis cosity,cororimetry etc.,to determine diverse characteristics of polysaccharides.And to study conformation of polysaccharides in solations as w ell as the changes of the conformation al characteristics due to factors including temperature,pH,denaturant,metallic ion,chemi cal modification agent.A series of significant conclusions are obtained in this paper. Keywords polysaccharide;structure;conformation。
多糖高级结构解析方法的研究进展_徐航
螺旋结构上，近年来人们发现，硫酸化蛋白聚糖的抗 肿瘤活性明显升高，其原因不仅在于化学修饰改善了分 子的物理性质，如溶解性，更在于硫酸基团之间的排 斥作用促使分子球体结构松散，暴露出某些功能基团， 增强了分子与受体的相互作用 [6]。除此之外，具有相对 有序球体结构的枸杞多糖与絮状结构的枸杞多糖相比， 具有更好的诱导肝癌细胞凋亡的活性 [7]。尽管如此，目 前对多糖高级结构与其活性关系的研究仍处于起步阶 段，这不仅仅因为多糖自身结构的复杂性及其空间结 构的多态性 [8]，更主要的是由于缺乏表征其高级结构动 态变化的技术手段。
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PROGRESS IN PHARMACEUTICAL SCIENCES 2015,39 (5):364-369
多糖高级结构解析方法的研究进展
徐航，朱锐，刘玮，高向东 *
（中国药科大学生命科学与技术学院，江苏南京210009） [ 摘要 ] 研究发现，多糖的生物活性不仅与其一级结构（如分支度、单糖组成及糖苷键连接方式等）有关，而且与其空间结构也密不可分。 因此，对多糖高级结构的研究将有助于阐释其构效关系，为寻找具有生物活性的多糖和开发多糖药物提供理论依据。传统的多糖结构分 析方法具有一定的局限性，已不能满足多糖研究的需求，而现代物理技术的发展则为多糖高级结构解析提供了新的手段。综述近年来多 糖高级结构解析方法的研究进展。 [ 关键词 ] 多糖；高级结构；解析方法 [ 中图分类号 ] Q539；R284.1[ 文献标志码 ] A[ 文章编号 ]1001-5094（2015）05-0364-06
在低于005moll1的氢氧化钠溶液中香菇多糖会以线性圆形以及具有分支的三螺km9wohooohooohooohooohoohoh2cohh2cohhoh2cohooh2coohoch2ohohhoh2cohch2ohhohoohhooh图1香菇多糖重复单元结构figure1therepeatunitstructureoflentinan2差示扫描量热法差示扫描量热法dsc是近几年在差热分析技术differentialthermalanalysisdta基础上发展起来的一种可用于多糖高级结构解析的方法29其不仅可以描述样品与参比物之间的温度变化还可以实时记录热量差与温度之间的变化规律常用于评价高聚物的热稳定性和相容性以及研究高分子物质之间的相互作用3031