蛋白质的透析

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实验11 蛋白质的透析
一、实验目的
学习透析的基本原理和操作
二、实验原理
蛋白质是大分子物质,它不能透过透析膜而 小分子物质可以自由透过。在分离提纯蛋白 质的过程中,常利用透析的方法使蛋白质与 其中夹杂的小分子物质分开。
三、器材 器材
1 1、透析管或玻璃纸 2、烧杯 3、玻璃棒 4、电磁搅拌器 5、试管及试管架
五ห้องสมุดไป่ตู้实验操作
3、约1小时后,自烧杯中取水1~2mL,加 10%硝酸溶液数滴使成酸性,再加入1% 硝酸银溶液1~2滴,检查氯离子的存在。 4、从烧杯中另取1~2mL水,做双缩脲反 应,检查是否有蛋白质存在
五、实验操作
5、不断更换烧杯中的蒸馏水(并用电磁搅 拌器不断搅动蒸馏水)以加速透析过程。数 小时后从烧杯中的水中不能再检出氯离子。 此时停止透析并检查透析袋内容物是否有蛋 白质或氯离子存在(此时应观察到透析袋中 球蛋白沉淀的出现,这是因为球蛋白不溶于 纯水的缘故)。
六、思考题
蛋白质透析的操作要点及主要事项
四、试剂
1、蛋白质的氯化钠溶液 3个除去卵黄的鸡卵蛋 清与700mL水及300mL饱和氯化钠溶液混合后, 用数层干纱布过滤。 2、10%硝酸溶液 3、1%硝酸银溶液 4、10%氢氧化钠溶液 5、1%硫酸铜溶液
五、实验操作
1、用蛋白质溶液作双缩脲反应。 2、向火棉胶制成的透析管中装人 10~15mL蛋白质溶液并放在盛有蒸馏水的 烧杯中(作法见第二章,或用玻璃纸装入蛋 白质溶液后扎成袋形,系于一横放在烧杯的 玻璃棒上)。
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