白藜芦醇对阿尔茨海默病动物模型miRNA-106 b的影响论文

ＤＯＩ：１０．３７６０／ｃｍａ．ｊ．ｉｓｓｎ．１００６－７８７６．２０１６．１１．００５作者单位：５２３８０８东莞，广东医科大学公共卫生学院流行病与卫生统计学教研室（孔丹莉、丁元林、罗燕鸿、梁碧玉），基础医学院微生物与免疫教研室（赵祖国），系统生物学研究所（何玉清），基础医学院（王瑾），科技处（于海兵）通信作者：于海兵，Ｅｍａｉｌ：２１６５２０４８＠ｑｑ．ｃｏｍ・认知障碍・白藜芦醇对阿尔茨海默病动物模型ｍｉＲＮＡ－１０６ｂ的影响孔丹莉　赵祖国　何玉清　丁元林　罗燕鸿　梁碧玉　王瑾　于海兵 【摘要】　目的　探讨白藜芦醇对阿尔茨海默病（ＡＤ）动物模型中ｍｉＲＮＡ－１０６ｂ的影响。

方法取３月龄健康昆明雄性小鼠５０只，按照完全随机区组的抽样方法将其分为正常对照组、ＡＤ模型组和白藜芦醇高、中、低剂量组，每组１０只。

除正常对照组外，对其余各组均制作ＡＤ模型，连续３０ｄ。

从第３１天起对对照及模型组每天灌胃双蒸水，其余组分别灌胃不同剂量白藜芦醇，连续６０ｄ。

给药结束后，观测小鼠行为记忆功能；检测各组小鼠大脑组织中淀粉样前体蛋白（ＡＰＰ）、Ｐ６２、载脂蛋白Ａ１（ＡｐｏＡ１）、ｍｉＲＮＡ－１０６ｂ、三磷酸腺苷结合盒转运子Ａ１（ＡＢＣＡ１）表达变化；同时验证ＡＰＰ３′ＵＴＲ序列中是否包含ｍｉＲＮＡ－１０６ｂ的结合位点。

结果　通过跳台实验发现模型组小鼠记忆功能较对照组有不同程度下降，白藜芦醇干预组小鼠记忆功能较模型组均有不同程度提高（均Ｐ＜０畅０５）；ＡＤ小鼠大脑组织中ＡＰＰ表达（１畅１３１±０畅０３５）较正常对照组（０畅６５２±０畅０２６）高，而Ｐ６２（０畅４１２±０畅０２２）、ＡｐｏＡ１（０畅５３４±０畅０３２）表达较低（均Ｐ＜０畅０５），高、中剂量白藜芦醇处理后可不同程度下调ＡＰＰ水平（０畅７３３±０畅０１８，０畅９２９±０畅０１９，Ｆ＝１７７畅７３３）并升高Ｐ６２（０畅９５４±０畅０３５，０畅６３３±０畅０１５，Ｆ＝４３４畅５）、ＡｐｏＡ１（１畅０４２±０畅０５１，０畅８２４±０畅０３４，Ｆ＝２８６畅５８２）水平（均Ｐ＜０畅０５）。

ＡＤ模型组动物脑组织ｍｉＲＮＡ－１０６ｂ（０畅４６４±０畅３１４）及ＡＢＣＡ１（０畅２９３±０畅０４２）的表达较正常对照组ｍｉＲＮＡ－１０６ｂ（１畅０６４±０畅０３２，Ｆ＝２３８畅１５９）及ＡＢＣＡ１（０畅７８１±０畅０２７，Ｆ＝３４１畅６１）降低（均Ｐ＜０畅０５），高、中剂量白藜芦醇处理后ｍｉＲＮＡ－１０６ｂ（０畅８４３±０畅０３４，０畅６０１±０畅０１２）及ＡＢＣＡ１（０畅８８２±０畅０２５，０畅６２４±０畅０３６）水平有不同程度升高（均Ｐ＜０畅０５）；荧光素酶报告载体实验表明ＡＰＰ３′ＵＴＲ序列中包含ｍｉＲＮＡ－１０６ｂ的结合位点。

结论　ＡＰＰ是ｍｉＲＮＡ－１０６ｂ的靶基因之一，白藜芦醇可通过提高ＡＤ动物模型中ｍｉＲＮＡ－１０６ｂ的表达并降低其靶基因ＡＰＰ的表达，同时可通过提高其他靶基因Ｐ６２、ＡｐｏＡ１的水平来改善ＡＤ情况。

这为ＡＤ的临床治疗提供了新的理论依据。

【关键词】　白藜芦醇；　阿尔茨海默病；　ｍｉＲＮＡ；　抗－淀粉样前体蛋白基金项目：国家自然科学基金资助项目（８１２７３１６６）；广东省自然科学基金资助项目（Ｓ２０１２０１０００８２７１）；广东省东莞市高等院校科技计划项目（２０１２１０８１０２０５８）；广东省东莞市科技计划医疗卫生单位科研重点项目（２０１２１０５１０２０１０，２０１６１０５１０１２９０）；广东医学院２０１１博士启动基金项目（Ｂ２０１１０１３）；广东省中医药局２０１６中医药常规科研项目（２０１６２０７８）ＥｆｆｅｃｔｏｆｒｅｓｖｅｒａｔｒｏｌｏｎｍｉＲＮＡ－１０６ｂｉｎＡｌｚｈｅｉｍｅｒ′ｓｄｉｓｅａｓｅａｎｉｍａｌｍｏｄｅｌ　ＫｏｎｇＤａｎｌｉ倡，ＺｈａｏＺｕｇｕｏ，ＨｅＹｕｑｉｎｇ，ＤｉｎｇＹｕａｎｌｉｎ，ＬｕｏＹａｎｈｏｎｇ，ＬｉａｎｇＢｉｙｕ，ＷａｎｇＪｉｎ，ＹｕＨａｉｂｉｎｇ．倡ＤｅｐａｒｔｍｅｎｔｏｆＥｐｉｄｅｍｉｏｌｏｇｙａｎｄＢｉｏｓｔａｔｉｓｔｉｃｓ，ＧｕａｎｇｄｏｎｇＭｅｄｉｃａｌＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙＳｃｈｏｏｌｏｆＰｕｂｌｉｃＨｅａｌｔｈ，Ｄｏｎｇｇｕａｎ，Ｇｕａｎｇｄｏｎｇ５２３８０８，ＣｈｉｎａＣｏｒｒｅｓｐｏｎｄｉｎｇａｕｔｈｏｒ：ＹｕＨａｉｂｉｎｇ，ＤｅｐａｒｔｍｅｎｔｏｆＳｃｉｅｎｃｅａｎｄＴｅｃｈｎｏｌｏｇｙ，ＧｕａｎｇｄｏｎｇＭｅｄｉｃａｌＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｄｏｎｇｇｕａｎ，Ｇｕａｎｇｄｏｎｇ５２３８０８，Ｃｈｉｎａ，Ｅｍａｉｌ：２１６５２０４８＠ｑｑ畅ｃｏｍ【Ａｂｓｔｒａｃｔ】　Ｏｂｊｅｃｔｉｖｅ　ＴｏｉｎｖｅｓｔｉｇａｔｅｔｈｅｅｆｆｅｃｔｏｆｒｅｓｖｅｒａｔｒｏｌｏｎｍｉＲＮＡ－１０６ｂｉｎＡｌｚｈｅｉｍｅｒ′ｓｄｉｓｅａｓｅ（ＡＤ）ａｎｉｍａｌｍｏｄｅｌ畅Ｍｅｔｈｏｄｓ　ＦｉｆｔｙＫｕｎｍｉｎｇｍａｌｅｍｉｃｅｗｅｒｅｄｉｖｉｄｅｄｉｎｔｏｆｉｖｅｇｒｏｕｐｓｂｙｃｏｍｐｌｅｔｅｌｙｒａｎｄｏｍｉｚｅｄｂｌｏｃｋｓａｍｐｌｉｎｇ畅Ｔｈｅｆｉｖｅｇｒｏｕｐｓｉｎｃｌｕｄｅｄｔｈｒｅｅｄｏｓａｇｅｒｅｓｖｅｒａｔｒｏｌｇｒｏｕｐｓ，ａｎＡＤｍｏｄｅｌｇｒｏｕｐａｎｄａｃｏｎｔｒｏｌｇｒｏｕｐ畅ＴｈｅＡＤｍｏｄｅｌｓｗｅｒｅｅｓｔａｂｌｉｓｈｅｄｉｎｏｎｅｍｏｎｔｈｐｒｉｏｒｔｏｔｒｅａｔｍｅｎｔｓ畅万方数据Ｓｕｂｓｅｑｕｅｎｔｌｙ，ｆｒｏｍｔｈｅ３１ｓｔｄａｙｖａｒｉｏｕｓｄｏｓｅｓｏｆｒｅｓｖｅｒａｔｒｏｌｗｅｒｅｐｒｏｖｉｄｅｄｉｎｔｒａｇａｓｔｒｉｃｌｙｆｏｒ６０ｄａｙｓ畅Ｔｈｅｎｔｈｅｍｅｍｏｒｙｆｕｎｃｔｉｏｎｗａｓｏｂｓｅｒｖｅｄｂｙｔｈｅｓｔｅｐ－ｄｏｗｎｔｅｓｔ畅Ｍｅａｎｗｈｉｌｅ，ｔｈｅｖａｒｙｉｎｇｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎｓｏｆＡＰＰ，Ｐ６２，ＡｐｏＡ１，ｍｉＲＮＡ－１０６ｂ，ＡＢＣＡ１ｗｅｒｅｔｅｓｔｅｄｉｎｅａｃｈｇｒｏｕｐｔｏｄｅｔｅｒｍｉｎｅｗｈｅｔｈｅｒｔｈｅｒｅｉｓｔｈｅｂｉｎｄｉｎｇｓｉｔｅｆｏｒｍｉＲＮＡ－１０６ｂｉｎＡＰＰ３′ＵＴＲｓｅｑｕｅｎｃｅ畅Ｒｅｓｕｌｔｓ　Ｃｏｍｐａｒｅｄｗｉｔｈｔｈｅｃｏｎｔｒｏｌｇｒｏｕｐｂｙｓｔｅｐ－ｄｏｗｎｔｅｓｔ，ｔｈｅｍｅｍｏｒｙｆｕｎｃｔｉｏｎｏｆｔｈｅＡＤｍｏｄｅｌｇｒｏｕｐｍｉｃｅｄｅｃｒｅａｓｅｄｉｎｄｉｆｆｅｒｅｎｔｄｅｇｒｅｅ，ｗｈｉｃｈｉｎｔｈｅｄｒｕｇｔｒｅａｔｍｅｎｔｇｒｏｕｐｗａｓｈｉｇｈｅｒｔｈａｎｔｈａｔｉｎｔｈｅｍｏｄｅｌｇｒｏｕｐ（Ｐ＜０畅０５）畅ＣｏｍｐａｒｅｄｗｉｔｈｔｈｅＡＤｇｒｏｕｐ，ｔｈｅｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎｏｆＡＰＰ（１畅１３１±０畅０３５）ｉｎｔｈｅｄｒｕｇｔｒｅａｔｍｅｎｔｇｒｏｕｐｗａｓｈｉｇｈｅｒｔｈａｎｔｈａｔｉｎｔｈｅｍｏｄｅｌｇｒｏｕｐ（０畅６５２±０畅０２６），ｗｈｉｌｅｔｈｅＰ６２（０畅４１２±０畅０２２）ａｎｄＡｐｏＡ１（０畅５３４±０畅０３２）ｗｅｒｅｌｏｗｅｒｔｈａｎｔｈｅｍｏｄｅｌｇｒｏｕｐ（ａｌｌＰ＜０畅０５）畅ＨｉｇｈａｎｄｍｅｄｉｕｍｄｏｓｅｇｒｏｕｐｓｏｆｒｅｓｖｅｒａｔｒｏｌｔｒｅａｔｍｅｎｔｒｅｄｕｃｅｄｖａｒｙｉｎｇｄｅｇｒｅｅｓｏｆＡＰＰ（０畅７３３±０畅０１８，０畅９２９±０畅０１９，Ｆ＝１７７畅７３３）ｌｅｖｅｌｓ，ａｎｄｉｎｃｒｅａｓｅｄＰ６２（０畅９５４±０畅０３５，０畅６３３±０畅０１５，Ｆ＝４３４畅５）ａｎｄＡｐｏＡ１（１畅０４２±０畅０５１，０畅８２４±０畅０３４，Ｆ＝２８６畅５８２）ｌｅｖｅｌｓ（ａｌｌＰ＜０畅０５）畅ＴｈｅｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎｏｆｍｉＲＮＡ－１０６ｂ（０畅４６４±０畅３１３）ａｎｄＡＢＣＡ１（０畅２９３±０畅０４２）ｉｎｔｈｅｍｏｄｅｌｇｒｏｕｐｗａｓｌｏｗｅｒｔｈａｎｔｈａｔｉｎｔｈｅｃｏｎｔｒｏｌｇｒｏｕｐ（ｍｉＲＮＡ－１０６ｂ１畅０６４±０畅０３２，Ｆ＝２３８畅１５９；ＡＢＣＡ１０畅７８１±０畅０２７，Ｆ＝３４１畅６１；ｂｏｔｈＰ＜０畅０５）畅ＴｈｅｍｉＲＮＡ－１０６ｂ（０畅８４３±０畅０３４，０畅６０１±０畅０１２）ａｎｄＡＢＣＡ１（０畅８８２±０畅０２５，０畅６２４±０畅０３６）ｌｅｖｅｌｓｉｎｔｈｅｈｉｇｈ，ｍｅｄｉｕｍｄｏｓｅｒｅｓｖｅｒａｔｒｏｌｔｒｅａｔｍｅｎｔｇｒｏｕｐｓｉｎｃｒｅａｓｅｄｔｏｄｉｆｆｅｒｅｎｔｅｘｔｅｎｔ（ｂｏｔｈＰ＜０畅０５）畅Ａｆｔｅｒｔｈｅｄｒｕｇｔｒｅａｔｍｅｎｔ，ｌｕｃｉｆｅｒａｓｅｒｅｐｏｒｔｅｒｖｅｃｔｏｒｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔｓｓｈｏｗｅｄｔｈａｔｔｈｅＡＰＰ３′ＵＴＲｓｅｑｕｅｎｃｅｃｏｎｔａｉｎｓｔｈｅｂｉｎｄｉｎｇｓｉｔｅｏｆｍｉＲＮＡ－１０６ｂ畅Ｃｏｎｃｌｕｓｉｏｎｓ　ＡＰＰｉｓｏｎｅｏｆｔｈｅｔａｒｇｅｔｇｅｎｅｓｏｆｍｉＲＮＡ－１０６ｂ畅ＲｅｓｖｅｒａｔｒｏｌｉｓｃａｐａｂｌｅｏｆｉｍｐｒｏｖｉｎｇＡＤｂｙｅｎｈａｎｃｉｎｇｔｈｅｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎｏｆｍｉＲＮＡ－１０６ｂａｎｄｄｏｗｎ－ｒｅｇｕｌａｔｉｎｇｔｈｅｔａｒｇｅｔｇｅｎｅｓｉｎｃｌｕｄｉｎｇＡＰＰ，Ｐ６２ａｎｄＡｐｏＡ１畅ＴｈｉｓｐｒｏｖｉｄｅｓａｎｅｗｔｈｅｏｒｅｔｉｃａｌｂａｓｉｓｆｏｒｔｈｅｃｌｉｎｉｃａｌｔｒｅａｔｍｅｎｔｏｆＡＤ畅【Ｋｅｙｗｏｒｄｓ】　Ｒｅｓｖｅｒａｔｒｏｌ；　Ａｌｚｈｅｉｍｅｒｄｉｓｅａｓｅ；　ｍｉＲＮＡ；　ＡｍｙｌｏｉｄｐｒｅｃｕｒｓｏｒｐｒｏｔｅｉｎＦｕｎｄｐｒｏｇｒａｍ：ＮａｔｉｏｎａｌＮａｔｕｒａｌＳｃｉｅｎｃｅＦｏｕｎｄａｔｉｏｎｏｆＣｈｉｎａ（８１２７３１６６）；ＮａｔｕｒａｌＳｃｉｅｎｃｅＦｏｕｎｄａｔｉｏｎｏｆＧｕａｎｇｄｏｎｇＰｒｏｖｉｎｃｅ（Ｓ２０１２０１０００８２７１）；ＳｃｉｅｎｃｅａｎｄＴｅｃｈｎｏｌｏｇｙＰｒｏｊｅｃｔｏｆＤｏｎｇｇｕａｎＣｉｔｙ（２０１２１０８１０２０５８）；ＫｅｙＰｒｏｊｅｃｔｏｆＳｃｉｅｎｔｉｆｉｃＲｅｓｅａｒｃｈｏｆＤｏｎｇｇｕａｎＳｃｉｅｎｃｅａｎｄＴｅｃｈｎｏｌｏｇｙＰｒｏｊｅｃｔ（２０１２１０５１０２０１０，２０１６１０５１０１２９０）；ＤｏｃｔｏｒａｌＳｔａｒｔ－ｕｐＦｕｎｄｉｎｇＰｒｏｊｅｃｔｏｆ２０１１ｏｆＧｕａｎｇｄｏｎｇＭｅｄｉｃａｌＣｏｌｌｅｇｅ（Ｂ２０１１０１３）；ＴｒａｄｉｔｉｏｎａｌＣｈｉｎｅｓｅＭｅｄｉｃｉｎｅＳｃｉｅｎｔｉｆｉｃＲｅｓｅａｒｃｈＰｒｏｊｅｃｔ２０１６ｏｆＧｕａｎｇｄｏｎｇＰｒｏｖｉｎｃｉａｌＢｕｒｅａｕｏｆＴｒａｄｉｔｉｏｎａｌＣｈｉｎｅｓｅＭｅｄｉｃｉｎｅ（２０１６２０７８） 阿尔茨海默病（Ａｌｚｈｅｉｍｅｒ′ｓｄｉｓｅａｓｅ，ＡＤ）是一种起病隐匿的进行性发展的神经系统退行性疾病［１］，以进行性认知功能障碍和记忆损害为特征，是导致老年人痴呆的主要原因，其特征性的病理改变是大脑皮质和海马区域神经元数量减少、老年斑沉积或神经原纤维缠结［２］。