哈工大酶工程试题答案

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酶工程课后题答案.doc

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第一章

1.简述酶与一般催化剂的共性以及作为生物催化剂的特点

共同点:只能催化热力学所允许的的化学反应,缩短达到化学平衡的时间,而不改变平衡点:反应前后酶本身没有质和量的改变:很少量就能发挥较大的催化作用:其作用机理都在于降低了反应的活化能。

酶作为生物催化剂的特点:1.极高的催化率;2.高度专一性;3.酶活的可调节性;酶的不稳定性。

5.酶失活的因素和机理。

酶失活的因素主要包括物理因素,化学因素和生物因素

物理因素

1热失活:热失活是由于热伸展作用使酶的反应基团和疏水区域暴露,促使蛋白质聚合。

2冷冻和脱水:很多变构酶在温度降低是会产生构象变化。在冷冻过程中,溶质(酶和盐)随着水分子的结晶而被浓缩,引起酶微环境中的pH和离子强度的剧烈改变,很容易引起蛋白质的酸变性。

3.辐射作用:电离辐射和非电离辐射都会导致多肽链的断裂和酶活性丧失。

4.机械力作用:

化学因素

1.极端pH:极端pH远离蛋白质的等电点,酶蛋白相同电荷间的静电斥力会导致蛋白肽链伸展,埋藏在酶蛋白内部非电离残基发生电离,启动改变。交联或破坏氨基酸的化学反应,结果引起不可逆失活。极端pH也容易导致蛋白质水解。

2.氧化作用:酶分子中所含的带芳香族侧链的氨基酸以及Met, Cys等,与活性氧有极高的反应性,极易受到氧化攻击。

3.聚合作用:加热或高浓度电介质课破坏蛋白质胶体溶液的稳定性,促使蛋白质结构发生改变,分子间聚合并沉淀。

4.表面活性剂和变性剂:表面活性剂主要改变酶分子正常的折叠,暴露酶分子疏水内核的疏水基团,使之变性;变性剂与酶分子结合,改变其稳定性,使之发生变性。

酶工程课程习题库和参考答案

酶工程课程习题库和参考答案
答:采用水溶性大分子与酶的侧链基团共价结合,使酶分子的空间构象发生改变, 从而改变酶的特性与功能的方法称为大分子结合修饰。
通过大分子结合修饰,可以提高酶活力,增强酶的稳定性,降低或消除酶的抗原性
等。
六、综合分析题 试述木瓜蛋白酶的生产方法。 答:木瓜蛋白酶可以采用提取分离法、基因工程菌发酵法、植物细胞培养法等多种方
C、化学诱变 D、物理诱变
四、判断题 ( F )1、相同的酶在不同的 pH 条件下进行测定时,酶活力不同。
(×)2、固定化细胞在一定的空间范围内生长繁殖,由于细胞密度增大,使生化反应 加速,所以能够提高酶活力。 (×)3、只有以金属离子为激活剂的酶,才可以进行金属离子置换修饰。 (√)4、包埋法可以用于酶、细胞和原生质体的固定化。 (√)5、有机溶剂的极性系数是指某种溶剂在正辛烷与水两相中的分配系数 五、简答题 1、何谓酶工程,其主要内容有哪些?
B、定向进化 C、化学诱变 D、物理诱变 4、必需水是指( D ) A、维持酶催化反应速度所必需的水量 B、酶催化反应速度达到最大时所需的水量 C、与酶分子紧密结合的水量 D、维持酶分子完整的空间构象所必需的最低水量 5、流化床反应器( D )。
A、适用于游离酶进行间歇催化反应 B、适用于固定化酶进行间歇催化反应 C、适用于游离酶进行连续催化反应 D、适用于固定化酶进行连续催化反应
法进行生产。 (1)提取分离法:从木瓜的果皮中获得木瓜乳汁,通过各种分离纯化技术获得木瓜

酶工程实验试题及答案

酶工程实验试题及答案

1、酶的固定化方法:吸附法、包埋法、共价结合法、热处理法

2、提取酶的有机溶剂有:甲醇、乙醇、丙醇、丙酮、异丙醇、

3、酶生产的主要方式:固体发酵、液体深层通气发酵、固定化细胞或固定化原生质体发酵

4、酶的抽提剂有:稀酸、稀碱、稀盐、稀有机溶剂等

5、测定酶蛋白含量的方法:

凯氏定氮法、双缩尿法、Folin 酚法、紫外法、色素结合法、BCA法、胶体金测定法

6、影响酶活力的主要因素:温度、PH、底物浓度、酶浓度、抑制剂、激活剂

7、包埋固定化酶的凝胶有:聚丙烯酰胺、聚丙烯醇、光敏树脂、琼脂、明胶、海藻酸钙

8、酶的回收率:是指直接测定的固定化酶的活力占固定化之前的活力的百分比。

9、纯化倍数:就是经过纯化后得到的比活力与纯化前比活力之间的比值。

10、盐析的原理:蛋白质溶液在一定浓度范围内,加入无机盐,随着盐浓度增大,蛋白质的溶解度增大,但当盐浓度增到一定限度后,蛋白质将从溶液中析出。

11、在酶的反应过程中如何确保酶的最适反应温度和最适pH值。

保证最适温度的方法:通过发酵罐的热交换设施,控制冷源或热源流量;通过曲室的通风和加热设备控制。保证最适pH的方法:加酸或加碱,加碳源或氮源物质。

12、在发酵产酶过程中的准备工作:

收集筛选菌种,菌种保藏,细胞活化,扩大培养,培养基的配置,对发酵条件的控制。

13、为什么在测酶活实验中要连续不断的测酶活和酶蛋白含量

因为酶的活性会受温度和PH值的影响

14、终止酶反应的方法:

1、迅速升高温度;

2、加入强酸、强碱、尿素、乙醇等变性剂;

3、加入酶抑制剂;

4、调节反应液pH值。

《酶工程》试题一参考答案

《酶工程》试题一参考答案

《酶工程》试题一参考答案:

一、是非题(每题1分,共10分)

1、酶是具有生物催化特性的特殊蛋白质。(╳)

2、酶的分类与命名的基础是酶的专一性。(√ )

3、酶活力是指在一定条件下酶所催化的反应速度,反应速度越大,意味着酶活力越高。(√)

4、液体深层发酵是目前酶发酵生产的主要方式。(√)

5、培养基中的碳源,其唯一作用是能够向细胞提供碳素化合物的营养物质。(╳)

6、膜分离过程中,膜的作用是选择性地让小于其孔径的物质颗粒成分或分子通过,而把大于其孔径的颗粒截留。(√)

7、在酶与底物、酶与竞争性抑制剂、酶与辅酶之间都是互配的分子对,在酶的亲和层析分离中,可把分子对中的任何一方作为固定相。(√)

8、角叉菜胶也是一种凝胶,在酶工程中常用于凝胶层析分离纯化酶。(╳)

9、α-淀粉酶在一定条件下可使淀粉液化,但不称为糊精化酶。(╳)

10、酶法产生饴糖使用α-淀粉酶和葡萄糖异构酶协同作用。(╳)

二、填空题(每空1分,共28分)

1、日本称为“酵素”的东西,中文称为酶,英文则为Enzyme,是库尼(Kuhne)于1878年首先使用的。其实它存在于生物体的细胞内与细胞外。

2、 1926年,萨姆纳(Sumner)首先制得脲酶结晶,并指出酶的本质是蛋白质。他因这一杰出贡献,获1947年度诺贝尔化学奖。

3、目前我国广泛使用的高产糖比酶优良菌株菌号为As3.4309,高产液化酶优良菌株菌号为BF7.658。在微生物分类上,前者属于霉菌,后者属于细菌。

4、 1960年,查柯柏(Jacob)和莫洛德(Monod)提出了操纵子学说,认为DNA分子中,与酶生物合成有关的基因有四种,即操纵基因、调节基因、启动基因和结构基因。

酶工程习题(答案全)

酶工程习题(答案全)

第一章绪论

一、名词解释

1、酶:是具有生物催化功能的生物大分子

2、酶工程:酶的生产与应用的技术过程称为酶工程。它是利用酶的催化作用进行物质转化的技术,是将酶学理论与化工技术、微生物技术结合而形成的新技术,是借助工程学手段利用酶或细胞、细胞器的特定功能提供产品的一门科学

3、核酸类酶:为一类具有生物催化功能的核糖核酸分子.它可以催化本身RNA剪切或剪接作用,还可以催化其他RNA,DNA多糖,酯类等分子进行反应

4、蛋白类酶:为一类具有生物催化功能的蛋白质分子,它只能催化其他分子进行反应。

5、酶的生产:是指通过人工操作获得所需酶的技术过程。主要包括微生物发酵产酶,动植物培养产酶,酶提取和分离纯化等

6、酶的改性是通过各种方法改进酶的催化特性的技术过程,主要包括酶分子的修饰,酶固定化,酶非水相催化等

7、酶的应用:是通过酶的催化作用获得人们所需要的物质或者不良物质的技术过程,主要包括酶反应器的选择和设计以及酶在各领域的应用等。

8、酶的专一性:又称为特异性,是指酶在催化生化反应时对底物的选择性,即在一定条件下,一种酶只能催化一种或一类结构相似的底物进行某种类型反应的特性。亦即酶只能催化某一类或某一种化学反应。

9、酶的转换数:酶的转换数Kp。又称为摩尔催化活性,是指每个酶分子每分钟催化底物转化的分子数

二、填空题

1、根据分子中起催化作用的主要组分的不同,酶可以分为_________和____________两大类.

2、核酸类酶分子中起催化作用的主要组分是__________,蛋白类酶分子中起催化作用的主要组分是________________。

酶工程试题及答案

酶工程试题及答案

酶工程试题(A)

一名词解释(每题3分,共计30分)

1. 酶工程:又叫酶技术,是酶制剂的大规模生产和应用的技术。

2.自杀性底物:底物经过酶的催化后其潜在的反应基团暴露,再作用于酶而成为酶的不可逆抑制剂,这种底物叫自杀性底物。

3.别构酶;调节物与酶分子的调节中心结合后,引起酶分子的构象发生变化,从而改变催化中心对底物的亲和力,这种影响被称为别构效应,具有别构效应的酶叫别构酶

4.诱导酶:有些酶在通常的情况下不合成或很少合成,当加入诱导物后就会大量合成,这样的酶叫诱导酶

5.Mol催化活性:表示在单位时间内,酶分子中每个活性中心转换的分子数目

6.离子交换层析:利用离子交换剂作为载体这些载体在一定条件下带有一定的电荷,当带相反电荷的分子通过时,由于静电引力就会被载体吸附,这种分离方法叫离子交换层析。

7.固定化酶:通过物理的或化学的方法,将酶束缚于水不溶的载体上,或将酶束缚于一定的空间内,限制酶分子的自由流动,但能使酶发挥催化作用的酶

8.修饰酶:在体外用一定的化学方法将酶和一些试剂进行共价连接后而形成的酶

9.非水酶学:通常酶发挥催化作用都是在水相中进行的,研究酶在有机相中的催化机理的学科即为非水酶学

10模拟酶:利用有机化学合成的方法合成的比酶结构简单的具有催化作用的非蛋白质分子叫模拟酶。

二填空题(每空1分,共计30分)

1.决定酶催化活性的因素有两个方面,一是酶分子结构,二是反应条件。

2.求Km最常用的方法是双倒数作图法。

3.多底物酶促反应的动力学机制可分为两大类,一类是序列机制,另一类是乒乓机制。

酶工程习题参考答案

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第五章酶工程习题答案

一、填空题

1.决定酶催化活性的因素有两个方面,一是酶分子结构,二是反应条件。

2. Km是米氏常数。它与酶的种类和反应条件有关。

3..对生产酶的菌种来说,我们必须要考虑的条件有,一是看它是不是致病菌,二是能够利用廉价原料,发酵周期

短,产酶量高,三是菌种不易退化,四是最好选用能产生胞外酶的菌种,有利于酶的分离纯化,回收率高。

4.酶制剂有四种类型即液体酶制剂固体酶制剂纯酶制剂固定化酶制剂

5.通常酶的固定化方法有吸附法,共价键结合法,交联法,包埋法。

6. 酶分子的体外化学修饰又可分为酶的表面修饰和内部修饰。经化学修饰的酶热稳定性有较大提高,这是因

为修饰剂的多个功能基团与酶分子上的的多个基团(如氨基、羧基、咪唑基等)相互交联,增加了酶分子构象的稳定性。

7. 生物酶工程主要包括三个方面:基因工程方法大量生产酶(克隆酶);对酶基因修饰产生遗传修饰酶(突变酶);

设计新的酶基因,合成新的酶。

二、问答题

1.解释下列名词:

核酶:具有催化功能的RNA,包括剪切型核酶和剪接型核酶两类。

克隆酶:通过基因工程手段,克隆各种天然的蛋白质或酶基因,并将其与适当的调节信号连接,再通过一定的载体(质粒)导入能够大量繁殖的微生物体内,使之高效表达。

突变酶:利用有控制地对天然酶基因进行剪切、修饰或突变,从而改变这些酶的催化特性、底物专一性或辅酶专一性,使之更加符合人们的需要。

进化酶:创造特殊的进化条件,模拟自然进化机制(随即突变、基因重组和自然选择),在体外改造酶基因,并定向选择(或筛选)出所需性质的突变酶。

酶工程课程试卷和参考答案

酶工程课程试卷和参考答案

A
C
A
D
B
b
二.选择题(每题 1 分,共 20 分)
1
2
3
4
5
6
7

x

x
x
x
x
8
9
10
11
12
13
14
x

x

x
x

15
16
17
18
19
20
x
x

x

x
三.问答题(共 55 分) 1 答:活性中心:必需基团在空间结构上彼此靠近,组成具有特定空间结构的区 域,能与底物特异性结合并能够将底物转化为产物。 活性中心的必需基团包括:结合基团:与底物结合的基团,催化基团:催化底 物转变成为产物的部位。 活性中心外也有必需基团;在活性中心之外,保持酶空间构象所必需的基团。
(
)
(
)
(
)
三 问答题(共 50 分) 1 何谓酶的活性中心?酶的活性中心与必需基团的关系?(10 分) 2 为何组氨酸的咪唑基在广义的酸碱催化中最重要,除此之外酶的其它四种催 化作用的机理是什么?(8 分) 3 何谓共价键固定化酶?说出两种共价法固定化酶中载体活化的方法和要点.(8 分) 4 详细说明如何用固定化酶技术进行 DNA 序列分析。(8 分) 5.水在非水介质酶反应中的作用?在此体系中常用何参数表示必需水量( 8 分) 6 有机相酶反应和酶的化学修饰中热稳定性都能升高的机理分别是什么?( 8 分)

《酶工程》考试问答题总结(含答案)

《酶工程》考试问答题总结(含答案)

《酶工程》考试问答题总结(含答案)

1、利用微生物生产酶制剂的优点是什么?对产酶菌种的要求是什么?

答:优点:1)微生物种类多,酶种丰富,且菌株易诱变、可变。2)微生物繁殖速度快,生产周期短,生产能力强,产酶量高。3)易分离提取,特别是胞外酶。4)原料来源广泛,价格便宜,生产成本低。5)容易实现大规模机械化,自动化连续化工生产。6)可利用生物工程新技术,选育新菌种,提高产酶量,增加酶种。

要求:1)不是致病菌,在系统发育上,最好与病原体无关。在食品与医药方面注意安全性。2)能够利用廉价原料,发酵周期短,产酶量子。3)菌种遗传性要稳定,不易变异退化,不易感染噬菌体,保证生产的稳定重要性。4)最好选用产胞外酶的菌种,有利于酶的分离,回收率高。

2、酶分子修饰的原因、目的和基本原理是什么?主要的修饰方法是什么?

答:原因:(1)活力问题:酶目前来源是生物材料,生物技术和产量有限,活力不高。(2)稳定性问题:酶是蛋白质,一般不稳定,使酶制剂的生产,保存反应有很大不便和问题(3)具有抗原性:酶是高分子蛋白质,作为药物使用,在生物体中有抗原反应及被抗体代谢失效的危险。(4)反应控制问题:实际反应中pH、温度等多种因素不易达到保持酶的最适合条件。

目的:提高酶活力;增强酶的稳定性;降低或是消除酶的抗原性,总之可以大大改善天然酶的不足之处,使其更适合于工业生产的应用要求。

3、酶活力测定需注意哪些问题?

答:(1)测定的酶反应速度必须是初速度:一般指底物消耗量在5%以内或是食物形成占总产量的15%一下时的速度,只有初速度才与底物浓度成正比;

酶工程考试复习题及答案

酶工程考试复习题及答案

酶工程考试复习题及答案

一、选择题

1. 酶工程是指对酶进行改造和利用的科学,其主要目的不包括以下哪一项?

A. 提高酶的稳定性

B. 增强酶的催化效率

C. 改变酶的底物专一性

D. 降低酶的生产成本

答案:D

2. 在酶工程中,下列哪一项技术不属于酶的改造方法?

A. 基因工程

B. 蛋白质工程

C. 酶的固定化

D. 酶的纯化

答案:D

3. 固定化酶技术的优点不包括以下哪一项?

A. 可重复使用

B. 提高酶的稳定性

C. 便于酶的分离和纯化

D. 增加酶的底物专一性

答案:D

二、填空题

4. 酶工程中常用的酶固定化方法包括_______、_______和_______。

答案:吸附法、包埋法、共价结合法

5. 酶的催化效率通常用_______来表示,它是酶催化反应速率与

_______的比值。

答案:kcat、底物浓度

三、简答题

6. 简述酶工程在工业生产中的应用。

答案:酶工程在工业生产中的应用主要包括食品加工、制药、生物

燃料生产、环境保护等领域。通过酶的改造和固定化技术,可以提高

生产效率,降低成本,实现绿色生产。

7. 描述酶的改造方法之一——蛋白质工程的基本过程。

答案:蛋白质工程的基本过程包括:(1) 确定目标酶的氨基酸序列;

(2) 设计预期的氨基酸序列变化;(3) 通过基因突变或基因合成技术

实现氨基酸序列的改变;(4) 表达改造后的酶蛋白;(5) 评估改造酶

的性能,如稳定性、催化效率等。

四、论述题

8. 论述固定化酶在生物反应器中的应用及其优势。

答案:固定化酶在生物反应器中的应用主要包括连续流反应器和批

式反应器。固定化酶的优势包括:(1) 酶的稳定性提高,延长使用寿命;(2) 易于从反应体系中分离,便于回收和再利用;(3) 可以提高

《酶工程》 课后习题答案

《酶工程》 课后习题答案

第一章酶工程基础

1.名词解释:酶工程、比活力、酶活力、酶活国际单位、酶反应动力学

①酶工程:由酶学与化学工程技术、基因工程技术、微生物学技术相结合而产生的一门新技术,是工业上有目的地设计一定的反应器和反应条件,利用酶的催化功能,在常温常压下催化化学反应,生产人类所需产品或服务于其它目的地一门应用技术。

②比活力:指在特定条件下,单位质量的蛋白质或RNA所拥有的酶活力单位数。

③酶活力:也称为酶活性,是指酶催化某一化学反应的能力。其大小可用在一定条件下,酶催化某一化学反应的速度来表示,酶催化反应速度愈大,酶活力愈高。

④酶活国际单位: 1961年国际酶学会议规定:在特定条件(25℃,其它为最适条件)下,每分钟内能转化1μmol底物或催化1μmol产物形成所需要的酶量为1个酶活力单位,即为国际单位(IU)。

⑤酶反应动力学:指主要研究酶反应速度规律及各种因素对酶反应速度影响的科学。

2.说说酶的研究简史

酶的研究简史如下:

(1)不清楚的应用:酿酒、造酱、制饴、治病等。

(2)酶学的产生:1777年,意大利物理学家 Spallanzani 的山鹰实验;1822年,美国外科

医生 Beaumont 研究食物在胃里的消化;19世纪30年代,德国科学家施旺获得胃蛋白酶。1684年,比利时医生Helment提出ferment—引起酿酒过程中物质变化的因素(酵素);1833年,法国化学家Payen和Person用酒精处理麦芽抽提液,得到淀粉酶;1878年,德国

科学家Kűhne提出enzyme—从活生物体中分离得到的酶,意思是“在酵母中”(希腊文)。

酶工程期末考试题及答案

酶工程期末考试题及答案

酶工程期末考试题及答案

酶工程是一门新兴的交叉学科,涉及化学、生物学、工程学等多个学科领域。作为一名酶工程学生,期末考试对于我们来说是一项非常重要的考验。下面我将介绍一些可能出现在酶工程期末考试中的题目和答案。

一、选择题

1. 以下哪项不是酶的分类方式?

A. 酸性酶

B. 超微生物酶

C. 细胞外酶

D. 工业用酶

正确答案:B

2. 下面哪些因素不会影响酶催化反应的速率?

A. 酶浓度

B. 底物浓度

C. 温度

D. pH值

正确答案:B

3. 下面哪种酶是蛋白酶的前体?

A. 胰岛素

B. 胃蛋白酶原

C. 胰蛋白酶原

D. 胰激肽原

正确答案:C

二、填空题

1. 酶活性受环境影响,会在 pH 为_____,温度为_____的情况下达到最大值。

正确答案: 7-8, 35-40℃

2. 酶切割谷氨酰胺和精氨酰胺的酶是_____。

正确答案:转铁蛋白酶

3. 醛缩酶是一种能催化_____和_____之间的反应的酶。

正确答案:醛类, 氨基酸

三、简答题

1. 什么是酶反应速率?如何计算酶反应速率?

酶反应速率是指酶催化底物转化为产物的速率。计算酶反应速率需要知道在单位时间内底物转化为产物的数量。

2. 什么是酶的底物?

酶的底物是指酶催化反应过程中所作用的物质,它通常是一种分子,可以被酶催化转化为产物。

3. 请简述酶的工业应用。

酶广泛应用于食品、药品、环保等众多领域,例如在面包、啤酒、酪制品等食品加工过程中,酶用于改善产品的口感和品质。

在制药领域,酶可以被用作药物合成的催化剂。在环保方面,酶可以被用来降解有害化学物质,以保护我们的环境。

《酶工程》试卷B及答案

《酶工程》试卷B及答案

《酶工程》课程试卷B

专业: 考试日期:

试卷所需时间:120分钟 闭卷 试卷总分:100分

一.名词解释(共10小题,每小题3分,共30分)

1. 大分子结合修饰

2. 核酶

3. 临界温度

4.酶活回收率

5. 包埋法

6. 锁钥理论

7. 固定化酶

8. 模拟酶

9. 交错延伸PCR 10. 免疫拷贝法

二.判断题(对打“√”,错打“╳”。共10小题,每题1分,共10分)

1. 如果某种酶有几种底物,则对每一种底物各有一个特定Km 值,其中Km 值最大的底物一般称为该酶的最适底物或天然底物。( )

2.若酶促反应持续时间缩短,则此条件下测得的最适反应温度往往偏低。( ) 3.化学修饰剂聚乙二醇(PEG)既溶于水,也溶于有机溶剂,而且免疫原性和毒性很低。( )

4.有机相酶催化必需微量的水,这对于维持酶活性结构非常重要。( ) 5. 虽然米氏方程对许多酶提供了很好的实验数据模式,但少数酶与米氏方程不相符合,如诱导酶。( )

6.从最佳的抽提效果着眼,最好远离待抽提酶的等电点。也就是说,酸性蛋白质宜用碱性溶液抽提,碱性蛋白质宜用酸性溶液。( )

7. 酶作用机制的“锁钥理论”无法解释酶催化反应中的可逆反应。( )

8.膜分离过程中,膜的作用是选择性地让小于其孔径的物质颗粒成分或分子通过,而把大于其孔径的颗粒截留。( )

9.固定化酶的活力在多数情况下比天然酶高,其底物专一性可能发生改变。( ) 10.采用化学修饰法确定某种氨基酸残基在酶分子中所存在的状态(表面或分子内

部),通常表面基团能反应,而分子内部不能反应。( )

《酶工程》试题参考答案

《酶工程》试题参考答案

《酶工程》试题一参考答案:

一、是非题(每题1分,共10分)

1、酶是具有生物催化特性的特殊蛋白质。(╳)

2、酶的分类与命名的基础是酶的专一性。(√)

3、酶活力指在一定条件下酶所催化的反应速度,反应速度越大,意味着酶活力越高。(√)

4、液体深层发酵是目前酶发酵生产的主要方式。(√)

5、培养基中的碳源,其唯一作用是能够向细胞提供碳素化合物的营养物质。(╳)

6、膜分离过程中,膜的作用是选择性地让小于其孔径的物质颗粒成分或分子通过,而把大于其孔径的颗粒截留。

(√)

7、在酶与底物、酶与竞争性抑制剂、酶与辅酶之间都是互配的分子对,在酶的亲和层析分离中,可把分子对中的

任何一方作为固定相。(√)

8、角叉菜胶也是一种凝胶,在酶工程中常用于凝胶层析分离纯化酶。(╳)

9、α-淀粉酶在一定条件下可使淀粉液化,但不称为糊精化酶。(╳)

10、酶法产生饴糖使用α-淀粉酶和葡萄糖异构酶协同作用。(╳)

二、填空题(每空1分,共28分)

1、日本称为“酵素”的东西,中文称为酶,英文则为Enzyme,是库尼(Kuhne)于1878年首先使用的。其实它存在

于生物体的细胞内与细胞外。

2、1926年,萨姆纳(Sumner)首先制得脲酶结晶,并指出酶的本质是蛋白质。他因这一杰出贡献,获1947年度

诺贝尔化学奖。

3、目前我国广泛使用的高产糖比酶优良菌株菌号为As3.4309,高产液化酶优良菌株菌号为BF7.658。在微生物分类

上,前者属于霉菌,后者属于细菌。

4、1960年,查柯柏(Jacob)和莫洛德(Monod)提出了操纵子学说,认为DNA分子中,与酶生物合成有关的基

酶工程课程试卷和参考答案

酶工程课程试卷和参考答案

)
15 刚度是指设备在载荷作用下抵抗破坏的能力。
(
)
16 返混是连续化操作所伴生的现象,因此只有完全不返混状态才是理想流动状
态。
()
17 不仅可通过固定化微生物细胞的呼吸作用也可利用其新陈代谢的产物设计生
物传感器。
(
)
18 一个干燥的酶获得必需水时,首先酶分子表面极性基团与水结合,然后酶分
子表面带电基团再与水结合。 19 反胶束中萃取率随 pI-pH 差值增大而增大。 20 疏水底物要选择疏水性强的溶剂,便于底物溶解。
(
)
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三 问答题(共 50 分) 1 何谓酶的活性中心?酶的活性中心与必需基团的关系?(10 分) 2 为何组氨酸的咪唑基在广义的酸碱催化中最重要,除此之外酶的其它四种催 化作用的机理是什么?(8 分) 3 何谓共价键固定化酶?说出两种共价法固定化酶中载体活化的方法和要点.(8 分) 4 详细说明如何用固定化酶技术进行 DNA 序列分析。(8 分) 5.水在非水介质酶反应中的作用?在此体系中常用何参数表示必需水量( 8 分) 6 有机相酶反应和酶的化学修饰中热稳定性都能升高的机理分别是什么?( 8 分)
甘油激酶、己糖激酶(将体系中游离的碱基反应除去)、ATP 磷酸化酶(与加入 试剂反应产生能量),荧光酶柱(接上荧光标记)最后已能否产生荧光来判断。

酶工程考试复习题及答案

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一、名词解释题

1.酶活力 : 是指酶催化一定化学反应的能力。酶活力的大小可用在一定条件下,酶

催化某一化学反应的速度来表示,酶催化反应速度愈大,酶活力愈高,反之活力

愈低。

2.酶的专一性 : 是指一种酶只能对一种底物或一类底物起催化作用,对其他底物无

催化作用的性质,一般又可分为绝对专一性和相对专一性。

3.酶的转换数:是指每个酶分子每分钟催化底物转化的分子数,即是每摩尔酶每分钟催化

底物转变为产物的摩尔数,是酶的一个指标。

4.酶的发酵生产 : 是指通过对某些特定微生物进行发酵培养后,利用微生物生长发酵过程中

特定的代谢反应生成生产所需要的酶,最后通过提取纯化过程得到酶制剂的过程称为

酶的发酵生产。

5.酶的反馈阻遏 :

6.细胞破碎:是指利用机械、物理、化学、酶解等方法,使目标细胞的细胞膜或细胞

壁得以破坏,细胞中的目标产物得以选择性或全部释放便于后续收集和分离的过程称为细胞破

碎。

7.酶的提取 : 是指在一定的条件下,用适当的溶剂处理含酶原料,使酶充分溶解到

溶剂中的过程,也称作酶的抽提,是酶分离纯化过程常用的手段之一。

8.沉淀分离 : 是通过改变某些条件,使溶液中某种溶质的溶解度降低,从溶液中沉淀析

出,而与其他溶质分离的方法,常用语酶的初步提取与分离。

9.层析分离 : 亦称色谱分离,是一种利用混合物中各组分的物理化学性质的差别,使各组

分以不同程度分布在两个相中,其中一个相为固定的(称为固定相 ),另一个相则流过此固定相 (称为流动相 )并使各组分由于与固定相和流动相作用力的不同以不同速度

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年级2001

专业生物技术

一名词解释(每题3分,共计30分)

1.酶工程

2.自杀性底物

3.别构酶

4.诱导酶

5.Mol催化活性

6.离子交换层析

7.固定化酶

8.修饰酶

9.非水酶学

10.模拟酶

二填空题(每空1分,共计30分)

1.决定酶催化活性的因素有两个方面,一是,二是

2.求Km最常用的方法是。

3.多底物酶促反应的动力学机制可分为两大类,一类是,另一类是

4.可逆抑制作用可分为,,,

5.对生产酶的菌种来说,我们必须要考虑的条件有,一是看它是不是,二是能够利用廉价原料,发酵周期,产酶量,三是菌种不易,四是最好选用能产生酶的菌种,有利于酶的分离纯化,回收率高。

6.酶活力的测定方法可用反应法和反应法。

7.酶制剂有四种类型即酶制剂,酶制剂,酶制剂和

酶制剂。

8.通常酶的固定化方法有法,法,法,

法。

9.酶分子的体外改造包括酶的修饰和修饰。

10.模拟酶的两种类型是酶和酶。

11.抗体酶的制备方法有法和法。

三问答题(每题10分,共计40分)

1.固定化酶和游离酶相比,有何优缺点

2.写出三种分离纯化酶蛋白的方法,并简述其原理。

3.为什么酶制剂的生产主要以微生物为材料

4.下面是某人对酶测定的一些数据,据此求出该酶的最大反应速度和米氏常数。

10-6

10-6

10-5

10-5

10-5

10-4

10-4

10-2

酶工程试题(B)

一名词解释

1.抗体酶

2.酶反应器

3.模拟酶

4.产物抑制

5.稳定pH

6.产酶动力学

7.凝胶过滤

8.固定化酶

9.非水酶学

10.液体发酵法

二填空题(每空1分,共计30分)

值增加,其抑制剂属于抑制剂,Km不变,其抑制剂属于抑制剂,Km 减小,其抑制剂属于抑制剂。

2.菌种培养一般采用的方法有培养法和培养法。

3.菌种的优劣是影响产酶发酵的主要因素,除此之外发酵条件对菌种产酶也有很大的影响,发酵条件一般包括,,,,

和等。

4.打破酶合成调节机制限制的方有,,。

5.酶生物合成的模式分是,,,

6.根据酶和蛋白质在稳定性上的差异而建立的纯化方法有法,法和

7. 通常酶的固定化方法有法,法,法,

法。

8. 酶分子的体外改造包括酶的修饰和修饰。

9.酶与抗体的重要区别在于酶能够结合并稳定化学反应的,从而降低了底物分子的,而抗体结合的抗原只是一个态分子,所以没有催化能力

三问答题(每题10分,共计40分)

1.在生产实践中,对产酶菌有何要求

2.对酶进行化学修饰时,应考虑哪些因素

3.列出用共价结合法对酶进行固定化时酶蛋白上可和载体结合的功能团

4.某酶的初提取液经过一次纯化后,经测定得到下列数据,试计算比活力,回收率及纯化

倍数。

(A)答案及评分细则

1. 酶工程:又叫酶技术,是酶制剂的大规模生产和应用的技术。

2.自杀性底物:底物经过酶的催化后其潜在的反应基团暴露,再作用于酶而成为酶的不可逆抑制剂,这种底物叫自杀性底物。

3.别构酶;调节物与酶分子的调节中心结合后,引起酶分子的构象发生变化,从而改变催化中心对底物的亲和力,这种影响被称为别构效应,具有别构效应的酶叫别构酶

4.诱导酶:有些酶在通常的情况下不合成或很少合成,当加入诱导物后就会大量合成,这样的酶叫诱导酶

5.Mol催化活性:表示在单位时间内,酶分子中每个活性中心转换的分子数目

6.离子交换层析:利用离子交换剂作为载体这些载体在一定条件下带有一定的电荷,当带相反电荷的分子通过时,由于静电引力就会被载体吸附,这种分离方法叫离子交换层析。

7.固定化酶:通过物理的或化学的方法,将酶束缚于水不溶的载体上,或将酶束缚于一定的空间内,限制酶分子的自由流动,但能使酶发挥催化作用的酶

8.修饰酶:在体外用一定的化学方法将酶和一些试剂进行共价连接后而形成的酶

9.非水酶学:通常酶发挥催化作用都是在水相中进行的,研究酶在有机相中的催化机理的学科即为非水酶学

11.模拟酶:利用有机化学合成的方法合成的比酶结构简单的具有催化作用的非蛋白质分子

叫模拟酶。

1.酶分子结构反应条件

2.双倒数作图法

3.序列机制乒乓机制

5.竞争性反竞争性非竞争性混合性

6.致病菌短高退化胞外

7.终止反应法连续反应法

8.液体酶制剂固体酶制剂纯酶制剂固定化酶制剂

9.吸附法共价键结合法交联法包埋法

10.半合成酶全合成酶

11.拷贝法引入法

1优点(1)易将固定化酶和底物,产物分开产物溶液中没有酶的残留简化了提纯工艺(2)可以在较长的时间内连续使用

(3)反应过程可以严格控制,有利于工艺自动化

(4)提高了酶的稳定性

(5)较能适于多酶反应

(6)酶的使用效率高产率高成本低

缺点

(1)固定化时酶的活力有损失

(2)比较适应于水溶性底物

(3)与完整的细胞相比,不适于多酶反应。(每点一分,答满满分)

2.方法

透析与超虑离心分离凝胶过滤盐析等电点沉淀共沉淀吸附层析电泳亲和层析热变性酸碱变性表面变性等(写出一种方法1分)

每种方法的原理叙述总计7分

3.(1)微生物种类多,酶种丰富,且菌株易诱变,菌种多样

(2)微生物生长繁殖快,酶易提取,特别是胞外酶

(3)来源广泛,价格便宜

(4)微生物易得,生长周期短

(5)可以利用微电脑技术控制酶的发酵生产,可进行连续化,自动化,经济效益高(6)可以利用以基因工程为主的分子生物学技术,选育和改造菌种,增加产酶率和开发新酶种

每点2分,满分10分

4.最大反应速度140

Km: 10-5

每项5分,但要作出合理的说明或计算。

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