《工程机械构造》实验指导书
《工程机械构造》实验指导书
及实验报告
实验一发动机认识实验
一、内容、要求
1、实验内容：在教师指导下拆解柴油机，了解两大机构五大系统的作用、组成及工作原理；柴油机主要零部件的结构特点和工作原理；柴油机的调整内容及方法，装复后并发动。
2、实验要求
掌握柴油机的工作原理，了解两大机构五大系统的作用、组成、工作原理；了解主要部件的结构特点及工作原理；了解柴油机的调整内容及调整方法，装复后顺利发动柴油机，并无燃油、冷却水和润滑油外漏现象。
二、目的意义
通过对柴油机的拆装实验，使学生掌握柴油机的结构，工作原理。了解调整内容和方法，掌握柴油机的拆装工艺。
三、仪器设备
S195、4135、4125等型柴油机
四、准备工作
1、准备S195、4135、4125等柴油机各一台，并金国经过保养、起动，确认该柴油机技术状态良好。
2、准备拆装工具一套。
五、实验步骤（以S195型柴油机为例）
1、拆卸
1）了解柴油机的外部结构。
2）放尽冷却水和机油，关上燃油箱开关。
3）拆下高压油管、低压油管和柴油滤清器，拆下缸盖上的机油管接头螺栓。
4）拆下空气滤清器和进、排气管。
5）拆下气缸盖罩，气门摇臂支座组件，取出进、排气推杆。
6）拆下气缸盖和衬垫及喷油器。
7）拆下正时齿轮室盖和衬垫，拆下机体后盖和衬垫。
8）抽出凸轮轴和起动齿轮，取下调整器驱动齿轮组件。
9）转动飞轮，使活塞推向下止点，用手钳拧下连杆螺栓的保险铁丝，拆下连杆螺栓，取出连杆大端盖，再转动飞轮，将活塞推至上止点，用木柄顶住连杆
大头，将活塞连杆组慢慢推出气缸。
10）用开口板手将飞轮螺母拧松（拧松前将止退垫片折边翻平），旋下飞轮螺母，用拉力器将飞轮拉出，取下飞轮与曲轴连接平键。
11）拆下机体右侧壁的其他附件，拆下主轴承盖及垫片，将曲轴仔细抽出。
2、拆卸后，清洗各零件，然后研究柴油机的组成；工作原理；主要零部件的结构特点；平衡轴的作用原理；高压油的产生和雾化过程；配气机构，润滑系，冷却系和起动系的构造和工作原理。
3、柴油机的安装
1)、将曲轴各轴颈及主轴承表面涂上少许机油，将—根双头螺栓拧入机体上安装主轴承盖的螺孔，用来定位，将贴上垫片的主轴承盖套在曲轴右端主轴颈上，再将曲轴送入机体，将主轴承盖对准方位后装到机体上。利用增减垫片将曲轴轴向间隙调整至0.15~0.25mm。
2)、装上曲轴油封，机体右侧壁其他附件，将飞轮键装入键槽，将飞轮装到曲轴上，装入止退垫片，拧入飞轮螺母并将止退垫片翻边。
3)、将活塞环开口位置相互错开,并在活塞和轴瓦上涂上少许机油，用活塞环夹压紧活塞环，用木柄将活塞推入气扛。装配时连杆大头剖面朝下，连杆盖与大头对记号装上，并将连杆螺栓按8~10公斤·米的扭紧力矩分2-3次拧紧，并用铁丝将连杆螺栓锁紧。
4)、转动飞轮，将活塞推至上止点，对记号安装凸轮轴及各正时齿轮。
5)、安装调速器驱动齿轮组件。
6)、装上正时齿轮室衬垫和正时齿轮室盖；装上机体后盖垫和后盖。
7)、在喷油器前端套上紫铜垫圈，装上喷油器，装上气缸盖衬垫及气缸盖，用20公斤·米左右的拧紧力矩将气缸盖螺栓对角交错分2~3次拧紧。
8)、将推杆插入推杆孔，顶部顶到挺杆的凹槽内，在气缸盖上装上气门摇臂支座组件，然后调整气门间隙。
9)、安装气缸盖罩和衬垫，接上机油管。
10)、安装进气管和空气滤清器，接上喷油器回油管和曲轴箱通气管；装上排气管。
11)、安装高压油管，柴油粗滤器和低压油管，打开油箱开关，排除低压油管内的空气。
12)、在油底壳内加机油约 2.5kg，装上后盖，插上机油标尺，并检查油面
是否在上下刻线之间。
13)、关闭放水开关，在水箱内加满冷却水。
4．柴油机的调整
1）、气门间隙的调整
沿飞轮旋转方向转动飞轮，使活塞处于压缩行程上止点，松开锁紧螺母，旋动气门间隙调整螺钉，利用塞尺调整气门间隙。进气门间隙为0.3mm，排气门间隙为0.45mm，塞尺既能抽动，又感到稍有阻力时，将锁紧螺母拧紧。
2)、供油提前角的检查与调整
从喷油器上拆下高压油管，管口朝上，打开油箱开关，沿飞轮旋转方向缓慢转动飞轮，在管口出现油面波动，有外冒趋势时，立即停止转动。观察飞轮供油时刻线与水箱上刻线之间的相对位置．如果正好对准，表示供油提前角正常；如果超过或还差7.4mm(约为27°曲轴转角)以上，表示供油过于滞后或提前，可拆下喷油泵，利用增减垫片调整，垫片厚度每减少0.1mm，大约可提前1.3°的曲轴转角。
5、柴油机的起动
1)、将调速手柄扳到开始位置。
2)、左手按下减压手柄，右手用起动摇把摇转曲轴并逐渐加快，当转速达到起动转速时，松开减压手柄，右手握住起动摇把继续摇转，柴油即可起动。起动后应握紧手把使其自动退出。
3)、起动后，中速运转2~3min，观察机油压力指示阀标志，水温、烟色和声音，—切正常后方可逐步提高转速。
6、柴油机的停车
将调速手柄扳到停供位置，柴油机即可停车。
六、注意事项
1、拆装过程中应注意正确使用工具。
2、拆装时注意不要碰伤配合表面。
3、该锁紧的部位应保证可靠锁紧。
4、若遇拆卸困难不允许用手锤敲击，应用柴油渗泡后，用专用工具拆卸。
5、应仔细检查润滑油道有无堵塞，装衬垫时，应注意原始位置，切不可随意乱装而造成油道堵塞。
6、安装正时齿轮机构时—定要按照各齿轮上的标记对准装配。
7、起动发动机时一定要注意安全，当摇转播把起动发动机后，应注意握紧手把使其自动退出，否则手把可能会因惯性飞出造成事故。
8．当发现发动机有飞车等异常情况，可迅速取下空气滤清器，堵住进气管，或切断高压油路，或扳动减压手柄使进气门开启，柴油机即能立即停车。
七、实验报告撰写内容
1、叙述柴油机各机构和系统的作用。
2、叙述柴油机活塞连杆组的拆装过程。
3、叙述喷油泵供油提前角的检查与调整方法。
4、分析平衡轴的作用原理。
实验二柴油机燃料供给系主要总成的拆装检验与调试
一、内容、要求
1、实验内容：喷油泵的构造与调整；喷油器的构造与调整。
2、实验要求：掌握喷油泵、喷油器的结构原理和拆装方法；掌握喷油器的调试方法及喷油泵的正确安装。
二、目的意义
喷油泵：
通过对II号喷油泵及调整器的拆装实验，使学生掌握柱塞式喷油泵及调速器的结构原理和拆装方法及喷油泵的正确安装与供油提前角的调整方法。
喷油器：
通过对孔式、轴针式喷油器的拆装，使学生掌握喷油泵的结构和原理与拆装方法。掌握喷油器试验台的使用方法、喷油器的检验项目和检验方法及调试方法。
三、仪器设备
1、II号喷油泵及II号泵调速器、B型泵、单体喷油泵、喷油泵试验台
2、孔式喷油器，轴针式喷油器
3、喷油器试验台
四、准备工作
1、准备II号喷油泵，B型泵，孔式喷油器，轴针式喷油器，喷油器试验台，喷油泵试验台一台。
2、工作台一张，台虎钳一台，螺丝刀，尖咀钳、开口扳手，活动扳手，千分尺等若干件；清洗油盘及柴油等。
五、实验步骤
喷油泵：
1、单体喷油泵的分解
1）用尖嘴钳取下滚轮体卡簧，销钉，取出滚轮体总成。
2）取出柱塞弹簧座、弹簧、柱塞，齿圈和齿条。
3）拆下高压油管接头，取出出油阀弹簧，出油阀总成。
4）拆下柱塞套定位螺钉，取出柱塞套。
5）用干净油进行清洗。
2、单体喷油泵的正确装配
1）将柱塞套装入喷油泵体内，使定位槽与定位螺孔相对应，拧进定位螺钉
和密封垫圈，使其能上下窜动，并有微量转动，无卡滞为止。
2）安装出油阀总成，出油阀弹簧，并拧紧高压油管接头。
3）将齿条和齿套对准记号装入泵体内。
4）装柱塞时，先将上弹簧座和弹簧装入体内，然后将柱塞的末端与下弹簧座套在一起，并将柱塞导壁上的记号与齿圈切槽内号对准装在一起。
5）安装滚轮体总成，装上销钉和卡簧。上下推动滚轮体，能上下移动，无卡滞现象。
6）上紧柱塞套定位螺钉。
安装好的油泵是否正确，还需进一步试验：
（1）首先给油泵的低压腔内加满干净柴油，然后将齿条移到最大位置，上下压动滚轮体，观察低压油是否进入高压腔内，并通过高压油管接头出油。
（2）将齿条移到停止供油位置，继续上下压滚轮体总成，观察高压油管接头是否出油若不出油，说明喷油泵安装正确。
3．按照单体泵拆装步骤研究并对II号喷油泵和B型喷油泵进行拆装。
调速器：
1．II号泵调整器分解
1）了解调速器的外部结构（高速限制调整螺钉，低速限制调整螺钉，调整螺柱，调整螺柱，油门手柄等）及其工作原理。
2）清除喷油泵及喷油器外部污垢。
3）拆下调整器盖总成，逐步拆下起动加浓弹簧、高速弹簧、低速弹簧，校正弹簧，拉杆螺母，推力盘，飞球总成和传动盘等。
2、调整器的安装
1）逐层装配传动盘，飞球总成，推力盘，滚动轴承，传动板和起动弹簧前座和拉杆螺母等。
2）逐层装配调速弹簧后座，调整弹簧，起动加浓弹簧，调速弹簧前座，校正弹簧后座，校正弹簧及前座，校正弹簧调整螺母，保证校正弹簧预压量为0.5毫米。
3）调整调整器传动板与供油拉杆连接的螺母位置，以螺母拧入拉杆7.2mm 一段约2~3圈为宜，停油转臂应偏油泵一侧15°以上。
4）安装调速器盖总成。
5）将调节螺柱拧至碰着凸轮轴，然后退回2.5~3圈。
3．东方红-75推土机用柴油机II号泵调速器调整数据
1）II号泵调速器起作用点：755~765转/分
2）额定工况转速：750转/分，油量：113~116毫升/1000次
3）高速停油转速：<850转/分，油量：10~14毫升/200次
4）怠速工况转速：250转/分，油量：8~10毫升/200次
5）起动工况转速：100转/分，油量：>17毫升/100次
6）校正油量转速：500转/分，油量：26~30毫升/200次
4、东方红-75II号泵调速器的试验和调整
1）试验前的准备
（1）开动试验台，检查试验台各部分工作的可靠性和变速平稳性，必要时进行调整。
（2）用手转动凸轮轴和操纵手柄，检查凸轮轴。供油拉杆传动机构有无卡涩现象；当凸轮轴位于上止点时，柱塞副行程应有足够的余量，以免顶碰。
（3）将II号泵调速器总成装于试验台上，应保证联接牢固，加足润滑油，联接好油管等。
2）试运转
试验用柴油粘度为1.3-1.5°E。低速起动试验台，排除燃油系统中的空气和渗漏油。
（1）无负荷试动转，不带喷油器，转速为500转/分，全供油运转5-10min。
（2）负荷试动转：带喷油器，转速为500转/分，全部供油运转5~10min。
应检查：输油压力不得低于49~68.6kpa；操纵臂固定时，供油拉杆的游动量应不大于0.2min，凸轮轴的轴向游动量不大于0.1min，各部无渗油现象。
3）、试验和调整
（1）供油时间的检查
在试验台上检查供油时间的方法有：溢流校验法、定时管法、感觉压力法等。
（2）拉杆行程的检查和调整
操纵臂在最大供油位置，当油泵凸轮轴转速由100转/分升至350转/分时，拉杆移动的距离为起动行程为2~3mm。当行程不符合时，应调整调节螺柱，向外拧，起动行程增大，反之行程则变小。每转一圈相当起动行程增减1mm，调整时严防调节螺柱与凸轮轴相碰。
当油泵凸轮轴转速由500转/分升至750转/分时拉杆应移动1~1.5mm，并且
移动均匀。该行程为校正行程，若不符合，应调整校正弹簧的预紧力，预紧力减小，校正行程增大，反之则减小。调整范围只有0.5~1mm，若调整困难，应检查校正弹簧的刚度。
（3）调速器起作用转速的试验与调整：调速器起作用转速主要根据拉杆移动快慢的转折点来确定。油门操纵手柄在最大供油位置，逐渐提高油泵转速，拉杆向减油方向缓慢移动，当调速器起作用后，拉杆移动加快，快慢变化的转折点为起作用点，此转速略高于额定工况转速为755~765转/分。若不符合应调整高速限制螺钉，顺时针拧入起作用转速降低，反之则升高。
（4）额定油量的检查与调整：操纵手柄位于最大油门位置，在额定转速下测定各缸的供油量和不均匀度，其结果应符合要求，不均匀度不大于3%，若油量不符，可改变油量调节叉前后位置来调整，向调速器方向移动调节叉油量减少，反之则增大。
（5）调速器工作灵敏性和稳定性检查及供油拉杆限位挡钉的调整
将喷油泵转速由额定转速升至最高空转转速，供油拉杆在此范围内不得有大于0.2毫米的抖动量，测定最高空转转速时供油量，它应符合规定，各分泵间的不均匀度应小于25%，然后将转速升至停油转速850转/分，油泵应迅速停止供油，此时拧入供油拉杆限位挡钉与拉杆相碰，退回1~1.5圈，并锁紧螺母，调整合适后，在任何转速下，扳动熄火手柄，应能使喷油泵停止供油，放回熄火手柄，应迅速恢复供油。
（6）起动油量检查和调整
操作手柄在最大供油位置，油泵转速为100转/分时的供油量为起动油量，应是额定油量1.5倍。如果小，可将调节螺柱向外拧，同时又要重新调整额定油量至规定要求，并检查调速器起作用转速，起动油量即可增加，反之亦然。
（7）怠速油量的检查和调整
操作手柄位于最小油门位置，喷油泵转速控制在250转/分，测量油量应符合规定值，各分泵不均匀度不大于30%。如果油量不符，调整怠速限制螺钉、拧进油量增加，反之则减小。油量调好后，将转速升到350转/分应停止供油，随着转速均匀升降，拉杆移动应均匀灵活。
（8）校正油量检查
操作手柄置于最大油门位置，转速在500转/分时，校正油量为27~30毫升/200次。一般来说，若拉杆行程控制得好，校正油量基本可满足，无需特别调整。
（9）检查调整结束后应铅封锁高、低速限制螺钉、调节螺柱和拉杆限位螺钉
喷油器：
1、喷油器的分解
1）、将喷油器体夹在台虎钳上（钳口必须垫上铜皮之类的软性材料）松开喷油头锁紧螺母。
2）、取出阀体，抽出针阀，放在干净的柴油中清洗。针阀和阀体是配对加工研磨而成，清洗时不要混乱，应成对进行清洗。
3）、松开回油管螺钉，拆下护帽，取出调整压力螺钉，调压弹簧和推杆。
4）、用柴油清洗阀体油路，疏流喷孔等。
5）、观察孔式和抽针式两种喷油器的结构，对比其不同处。
2、喷油器的装配
1）、将喷油器侧夹在台虎钳上，将喷油头和锁紧螺母一同装紧在阀体的上面。
2）、松开台虎钳将喷油器过来重新夹在台钳上。
3）、先将推杆放在阀体最里面，再放调压弹簧，拧上调压螺钉。
3、喷油器压力调试
1）、将喷油器安装在试验台上，油管连接处不能有漏油现象。
2）、用手上下压动试验台的杠杆。观察喷油压力、雾化质量、喷雾锥角。
若喷油压力和喷雾锥角未达到规定值时，应将调压螺钉顺时针拧进少量再进行试验。若喷油器压力和雾锥角过大，应将调压螺钉反时针松少许再反复进行调试、直调到规定值，喷油声音清脆、雾化均匀，没有漏油现象为止。最后拧紧喷油器护帽，装好回油管的空心螺钉。
六、注意事项
1、喷油泵
1）、单喷油泵的拆装在老师的指导下进行。
2）、在喷油泵的分解前应将外部擦试干净。
3）、柱塞副、出油阀副是精密偶件，并且是配对研磨加工的，因此拆装和清
洗时不能混乱和碰撞。在装配前应检查精密偶件的损伤情况，必要时进行修复或更换。
4）、装配时应随检查柱塞、滚轮体总成和齿套、齿条的活动情况，不能有卡滞现象。
2．调速器
1）、拆装调速器时应注意调节螺柱，高速和低速限位螺钉的原始位置。
2）、传动盘，钢球总成和推力盘球配后应转动灵活，装妥的供油拉杆应移动灵活，无卡滞现象。钢球在球座内，应互相顶触，当一个钢球贴于球座的锥面时，另一个钢球的活动间隙就不小于0.3mm。
3）、装配完后应给调速器内加一定量的润滑油。
4）、在试验台上试验调整时一定要注意安全，应保证喷油泵在试验台上连接牢固；喷油凸轮轴和传动轴的对中良好，各联接管路无漏油现象。
5）、调节试验台转速时要缓慢升速至规定值，不能突然加减转速。
6）、无论改变校正弹簧的预紧量或调节螺柱的位置，都应重新检查作用点和额定油量的调整正确性。
3．喷油器
1）、拆装前，应用清洁的柴油清洗和清除外表积污。严禁用刮刀、锉刀和砂纸，也不允许用棉纱擦洗，应用油浸泡和软质毛刷擦洗。
2）、喷油器的针阀和阀座为精密偶件，拆装时严禁碰撞和混乱，应保证环境，工具等的清洁。
3）、清洗后应仔细检查偶件，如有损坏和磨损现象应修复或更换。
七、实验报告撰写内容
1、柱塞式喷油泵由哪几个主要零件组成？简述柱塞泵的供油原理，及油量调节原理。
2、单体喷油泵油量调节机构和II号喷油泵的油量调节机构有什么不同？
3、孔式喷油器与轴针式喷油器有什么不同？
4、喷油器试验台检查哪些项目？怎样调整？
5、简述II号喷油泵调速器的结构特点，并说明校正器在什么工况下起作用？
6、简述II号喷油泵调速器检查和调整内容方法。
实验三液力变矩器拆装实验
一、实验内容、要求
实验内容：1、分解和装配三元件液力变矩器。
2、分解和装配四元件液力变矩器。
实验要求：1、熟悉液力变矩器的基本构造。
2、掌握液力变矩器的工作原理。
二、仪器设备
1、单级三元件液力变矩器模型1套
2、向心式三元件液力变矩器1套型号自选
3、双导轮或双涡轮变矩器1套型号自选
4、通用、专用工具2套
三、准备工作
1、认真复习课本上有关液力变矩器的章节。
2、认真阅读本实验教材。
3、熟悉了解本次实验将要拆装的液力变矩器的型号、功能和工作原理。
4、了解专用工具的用法。
四、试验步骤
1、观察变矩器模型的工作情况；
2、将液力变矩器从动力换档变速箱上拆下；
3、取下液力变矩器弹性板；
4、液力元件的拆装在专用的拆装架或工作平台上进行，以便于液力元件的翻转；
5、分解泵轮、涡轮和导轮等液力元件；
6、将卸下的零、部件清洗干净；
7、按拆卸的反顺序进行装配。
五、注意事项
1、拆装时，敲击工作面应用铜棒或木槌，不能猛打猛敲，损坏零件工作面。
2、拆卸配制的零件时，为保持良好的配合特性应在有关零件上作好标记，装配时保持对应关系。
3、零件清洗干净后，用压缩空气吹干，不要用掉毛的棉纱擦拭。
4、凡连接件有四个以上螺栓者，需依次对称均匀拧紧，以免零件变形。
六、实验报告撰写内容
1、你拆装的是什么型号、型式的液力变矩器？
2、液力变矩器的三个工作轮各叫什么？各工作轮与其它构件的连接关系？
3、画出ZL50装载机液力变矩器结构简图，并说明工作中的油液流路线和两个单向阀的作用。
实验四变速箱拆装实验
一、实验内容、要求
实验内容：1、分解和装配机械换档变速箱
2、分解和装配动力换档变速箱
实验要求：1、了解机械换档变速箱及其变速操纵机构的基本构造和功用。
2、了解定轴式和行星齿轮式动力换档变速箱的基本构造和工作
原理。
3、正确区别动力换档变速箱离合器和换档制动器，了解它们的
构造和功用。
二、仪器设备
1、机械换档变速箱2台型号自选
2、动力换档变速箱2台型号自选
3、通用、专用工具2台
三、准备工作
1、认真复习课本上有关变速箱的章节。
2、认真阅读本实验教材。
3、熟悉了解本次实验将要拆装的变速箱型号、构造等。
4、了解拆卸工具的用法。
四、试验步骤：（动力换档）以ZL-50装载机变速箱为例
1、分解变矩器箱体与变速箱箱体。
2、取下大超越离合器总成，并解体大超越离合器，研究内部结构。
3、拧下变速箱后端盖螺栓，取下后端盖。
4、取下闭锁离合器总成，并解体闭锁离合器，研究内部结构。
5、拧压变速箱内压盘螺栓，取下内压盘。
6、逐次取出I档油缸、齿圈、行星架及摩擦片。
7、取下变速箱换档纵阀，取出隔离支架盘，并观察锁定销的锁定方式。
8、取出倒档行星排总成、摩拆片。
9、取出倒档活塞。
10、研究行星排结构和传动路线。
11、把所有的零件彻底清洗，并用压缩空气吹净或擦干。
12、分解变速操纵阀、研究结构、分析油路。
13、按照拆卸的反顺序进行装配。
五、注意事项
1、不要用铁锤在零件表面上直接敲打，以防打毛或敲裂。
2、安装时应注意，活塞油封及各部油封的正确位置，保证油封不能损坏。
3、不要用过大的力拧盖板螺丝，要求均匀加力拧紧。
六、实验报告
1、机械换档变速箱由哪几部分构成？详细说明各部的结构特点和功用。
2、画出ZL-50装载机、液力变矩器动力换档变速箱的结构示意图，并说明该变速器的结构特点，及各档的传动路线。
3、画出ZL-50装载机液力机械变速箱，液压控制系统图，并说明该系统的组成和工作原理。
细胞生物学实验指导
细胞生物学实验指导
细胞生物学实验指导目录 一．显微镜的使用 实验一、几种光学显微镜的使用 实验二、参观电子显微镜及生物超薄切片标本制备 二．细胞形态结构 实验三、细胞大小的形态观察——测微尺的使用 实验四、细胞活体染色技术 实验五、植物细胞骨架光学显微观察 实验六、胞间连丝观察 三．细胞化学 实验七、鉴定RNA的细胞化学方法——Branchet反应 实验八、DNA显色的观察——Feulgen反应 实验九、固绿染色法鉴定细胞内酸性蛋白与碱性蛋白 实验十、多糖及过氧化酶的显示 实验十一、核仁组成区的银染显示与观察 四．细胞生理 实验十二、细胞膜的通透性 实验十三、细胞电泳 五．细胞和组织培养技术 实验十四、植物原生质体的分离和融合 实验十五、植物细胞的培养与观察 实验十六、动物细胞融合 实验十七、动物细胞的培养与观察 六．细胞化学成分的分离 实验十八、细胞器的分离、纯化——细胞分级分离 实验十九、荧光的细胞化学测定 实验二十、细胞活力的鉴别 实验一几种光学显微镜的使用
一、实验目的 了解几种光学显微镜的结构、工作原理、主要用途和使用方法；掌握使用普通显微镜提高分辨力的方法。 二、实验原理 (一)基本原理 一般实验室经常使用的光学显微镜都是由物镜、目镜、聚光器和光阑组成，普通显微镜它们的放大原理及光路图如下： AB物体．A1B l第一次成像，A2B2第二次成像，O l目镜．O2物镜， F1为O l的前焦点，F2为O2的前焦点 各种光学显微镜的光学放大原理基本相同，各种特殊用途的光镜不过只是在光源、物镜、聚光器等方面作了改动，或在其它方面增设了某些特殊的设备。 (二)几种光学显微镜 l、普通光学显微镜： 普通光学显微镜也叫复式显微镜，是最常见，最简单的显微镜。它适于观察一般固定的，有色的透明度较高的标本。其最大分辨力一般为0.2微米，从构造上可分光学、机械和电子三大系统。 2、暗视野显微镜： 暗视野显微镜是以丁达尔现象(Tyndall phenomenon)(即光的微粒散射现象)为基础设计的,它使用了特殊的聚光器进行斜射照明,因光源中心束不直入物镜，所以视野黑暗，而被检细胞器因斜射照明发生衍射和反射，所以发亮可见。暗视野显微镜可用增加光照方法增加物体与背景的反差，因而可观察到0．2—0．004微米直径的微小粒子，但它分不清被检物的细微构造，它常用于观察物体的存在与运动。而暗视野显微镜与普通光学显微镜的区别，主要在于聚光器的不同，致使照明方法有别。确切地说，称暗视野显微镜为暗视野照明更为贴切。它是照明光线仅照亮被检样品而不进入物镜。使视野背景暗黑，样品明亮的照明方法。 3、相差显微镜： 相差是指同一光线经过折射率不同的介质其相位发生变化并产生的差异。相位是指在某一时间上，光的波动所达到的位置。
遗传学实验指导
《遗传学实验》简介 课程名称：遗传学实验 课程性质：随课实验 课程属性：基础课 学时学分：学时16学分1 面向专业： 一、课程的任务和基本要求 遗传学实验是生物学所有专业的一门专业基础课程，是一门独立的实验课程，同时也是为了配合遗传学的教学而开设的一门实验课程,本课程由基础操作性、综合性和设计性等多层次实验内容构成，目的在于巩固和加深学生对遗传学知识的理解、验证遗传学理论、并初步掌握遗传学研究所必需的基本实验技术。在此基础上，进行一定比例的综合性、设计性实验，将实验理论和实验技能融为一体，从而培养学生的基本实验思想、实验方法、实验技能和综合应用能力。本课程的任务是从个体、细胞水平揭示遗传学的基本现象与规律，培养学生牢固掌握经典遗传学研究方法与技术，并初步掌握现代遗传学实验操作技能，熟悉遗传学分析方法，同时要求学生初步具备进行遗传学创新性研究的基本能力与素质。 二、实验项目 植物染色体核型分析 果蝇的培养及生活史和形态观察 小鼠骨髓染色体的制片及观察 人群中基因频率的调查 人类巴氏小体观察 三、有关说明 1、与其它课程和教学环节的联系 先修课程：动物学、植物学、生物化学、微生物学 后续课程：分子生物学、基因工程、人类遗传学 平行开设课程：细胞生物学 2、教材和主要参考书目 （1）教材：刘祖洞江绍慧遗传学实验高等教育出版社1987年第二版 （2）主要参考书目 ①张文霞等编遗传学实验指导高等教育出版社2005 年版 ②张贵友等编普通遗传学实验指导清华大学出版社2003 年 实验一1、洋葱根尖有丝分裂染色体标本制备及观察（３学时） 一、教学基本要求： 1. 掌握植物染色体压片法。 2. 掌握有丝分裂各时期的特征。 3. 掌握用秋水仙素诱发多倍体的一般方法 二、教学内容： 1、洋葱根尖有丝分裂染色体标本制备及观察 〖目的和要求〗 本次实验通过对植物根尖的制片和观察, 要求学生初步学会对植物组织、细胞的固定、离析和压片方法，了解有丝分裂的全过程及其染色体的动态变化情况,掌握有丝分裂各时期的特征。〖实验原理〗 有丝分裂是细胞均等增殖的过程, 是体细胞分裂的主要方式.在有丝分裂过程中.细胞内每条染色体都能复制一份, 然后分配到子细胞中,因此两个子细胞与母细胞所含的染色体在数目,形态和性质上均是相同的，在各种生长旺盛的植物组织中均存在着有丝分裂。分生组织→固定→解离→染色→压片→观察（间期、早期、中期、后期、末期） 〖材料和方法〗 洋葱或大蒜或种子根尖 水浴锅、显微镜 卡诺氏固定液、石炭酸品红（或醋酸洋红）染色液，1N盐酸（或0.5%果胶酶+纤维素酶）,秋水仙素（0.1%）1、取材：大蒜、洋葱根尖，恒温箱
环境生物学 试题
《环境生物学》 填空（每空1分，共20分） 1、污染物在环境中的迁移方式主要有机械迁移、物理-化学迁移、 生物迁移 2、污染物在水体中转化的主要途径有氧化还原作用、配合作用、 生物降解作用。 3、环境污染物透过生物膜的生物转运过程，主要分为被动转运、特殊 转运和胞饮作用三种形式。 4、大多数动物对污染物的吸收主要通过呼吸系统吸收、消化管吸 收、皮肤吸收三条途径。 5、污染物对生物的不利影响最先作用于细胞膜。 6、污染物进入机体后导致的生物化学变化包括：防护性反应和非防 护性反应。 7、酶抑制作用可分为可逆和不可逆抑制作用两大类。 8、多种化学污染物的联合作用通常分为协同作用、相加作用、独立 作用和拮抗作用 4种类型。 9、环境效应按环境变化的性质可分为环境生物效应、环境化学效应、 环境物理效应 10、污染物进入环境的途径包括：自然界释放、人类活动过程中的无 意释放和人类活动过程中故意应用。 11、环境中微生物对金属的转化，主要是通过氧化还原和甲基化作 用 12、环境激素主要包括天然激素和合成激素、植物雌激素、和具 有雌激素活性的环境化学物质等三类。 13、影响生物测试结果的主要因素有：受试生物、试验条件和不 同的实验室。 14、水污染的生物监测方法有：水污染的细菌学监测；浮游生物监测 法；底栖大型无脊椎动物监测法和微型生物群路监测法。 15、污染物对群落的影响表现在：污染物可导致群落组成和结构的改 变。 16、环境污染的“三致作用”是指环境污染具有使人或哺乳动物致癌、致 畸和致突变的作用。 17、毒性试验常用参数EC50和IC50分别表示能引起50%受试生物的某 种效应变化的浓度和能引起受试生物的某种效应50%抑制的浓度
(完整版)细胞生物学实验测试题
细胞生物学实验测试题 1、试述荧光显微镜的原理和用途。（并操作） 原理：荧光显微镜是以紫外线为光源，用以照射被检物体，使之发出荧光，然后在显微镜下观察物体的形状及其所在位置。 （滤光镜片：获得所需波长的激发光；光源：高压汞灯） 用途：荧光显微镜用于研究细胞内物质的吸收、运输、化学物质的分布及定位等。细胞中有些物质，如叶绿素等，受紫外线照射后可发荧光； 另有一些物质本身虽不能发荧光，但如果用荧光染料或荧光抗体染色后，经紫外线照射亦可发荧光，荧光显微镜就是对这类物质进行定性和定量研 究的工具之一。 2、试述酸性磷酸酶显示法的原理及主要步骤。 原理：酸性磷酸酶（ACP）是溶酶体的标志酶，通常酸性磷酸酶在pH 为5左右时发挥作用能水解磷酸酯而释放出磷酸基，PO43-与底物中硝酸 铅反应生成磷酸铅沉淀物。由于这些沉淀物是无色的，需再与黄色的硫化 铵反应，生成棕黄色到棕黑色的硫化铅沉淀而被显示出来。其反应过程如 下： β-甘油磷酸钠+酸性磷酸酶→甘油+PO43- PO43-+Pb(NO3)2 →Pb3(PO4)2↓ Pb3(PO4)2+(NH4)2S →PbS↓(棕黑色) 主要步骤： 1、前处理：获取小白鼠或大白兔腹腔液（猪肝） 2、制片： （1）、将腹腔液（肝细胞悬液）滴一滴于冰冻的干净载玻片上，用牙签涂开，自然干燥。 （2）、放入10%中性福尔马林固定液中固定30min。 （3）、蒸馏水中漂洗,3-5次。（洗去固定液） （4）、磷酸酶作用液，37°C，30Min。 （5）、蒸馏水中漂洗3次，5min一次。（洗去游离铅离子） （6）、1%硫化铵处理（3-5min）; （7）、吉姆沙染液复染15min;（使细胞核、轮廓显示出来） （8）、制片观察。 结果：阳性细胞内有大小不等的棕色或棕黑色的颗粒即为酸性磷酸酶。 对照实验：标本放入作用液前先用高温（50℃）处理 30min，使酶失去活 性，做好标记，其他步骤相同。 3、试述DNA的Feulgen染色法的原理及主要步骤。 原理：DNA经稀盐酸（1mol/L HCL溶液）处理后，可使嘌呤碱与脱氧
环境生物学-考试重点
名词解释 1）环境生物学：是研究生物与受人类干扰的环境之间的相互作用规律及其机理的科学，是环境科学的一个分支科学。 2）环境污染：是指有害物质或因子进入环境，并在环境中扩散、迁移、转化，使环境系统结构与功能发生变化对人类以及其他生物的生存和发展产生不利影响的现象。 3）优先污染物：在众多污染物中筛选出潜在危险大的作为优先研究和控制对象，称之为优先污染物。 4）污染物的生物地球化学循环：就是生物的合成作用和矿化作用所引起的污染物周而复始的循环运动过程。 5）生物运转：是指环境污染物经各种途径和方式同生物机体接触而被吸收、分布和排泄等过程的总称。 6）生物浓缩：是指生物机体或处于同一营养级上的许多生物种群从周围环境中蓄积某种元素或难以分解的化合物，是生物体内该物质的浓度超过环境中的浓度的现象，又称生物学浓缩，生物学富集。 7）生物积累：是指生物在其整个代谢活跃期通过吸收、吸附、吞噬等各种过程，从周围环境中蓄积某种元素或难以分解的化合物，以至随着生长发育，浓缩系数不断增大的现象，又称生物学积累。 8）生物放大：指在生态系统中，由于高营养级生物以低营养及生物为食物，某种元素或难分解的化合物在生物机体中的浓度随着营养级的提高而逐步增大的现象，又称生物学放大。 9）靶器官：污染物进入机体后，对各器官并不产生同样的毒作用，而只对部分器官产生直接毒作用，这些器官称为靶器官。 10）生物测试：指系统的利用生物的反应测定一种或多种污染物或环境因素单独或联合存在时，所导致的影响或危害。 11）毒性：是指有毒物质接触或进入机体后，引起生物体的易感部位产生有害作用的能力。 12）最大无作用剂量：指化学物在一定时间内，按一定方式与机体接触，按一定的检测方法或观察指标，不能观察到任何损害作用的最高剂量。 13）最小有作用剂量：是指能使机体发生某种异常变化所需的最小剂量，即能使机体开始出现毒性反应的最低剂量。 14）急性毒性试验：是研究化学物质大剂量一次染毒或24小时内多次染毒动物所引起的毒性试验。其目的是在短期内了解该物质的毒性大小和特点，并为进一步开展其他毒性试验提供设计依据。 15）亚慢性毒性试验：是在相当于生物周期1-30——1-20时间内使动物每日或反复多次受试物的毒性试验。其目的是为进一步对受试物的主要毒作用、靶器官和最大无作用剂量或中毒阈剂量作出评估。 16）慢性毒性试验：是指以低剂量外来化合物，长期与实验动物接触，观察其对试验动物所产生的生物学效应的实验。通过慢性毒性试验，可确定最大无作用剂量，为制定人体每日允许摄入量和最高容许浓度提供毒理学依据。17）蓄积毒性试验：低于中毒阈剂量的外来化合物，反复多次的与机体持续接触，经一定时间后使机体出现明显的中毒表现，即为蓄积毒性试验。 18）BOD：是指在20摄氏度条件下，微生物好氧分解水样（废水或受污染
《分子生物学》实验指导(2015-2016)
《分子生物学》实验指导 实验1 总DNA提取 生物总DNA的提取是分子生物学实验的一个重要内容。由于不同的生物材料细胞壁的结构和组成不同，而细胞壁结构的破坏是提取总DNA的关键步骤。同时细胞内的物质也根据生物种类的不同而有差异，因此不同生物采用的提取方法也不同，一般要根据具体的情况来设计实验方法。本实验介绍采用CTAB法提取植物总DNA的技术。 [实验目的] 学习和掌握学习CTAB法提取植物总DNA的基本原理和实验技术。学习和掌握紫外光吸收法鉴定DNA的纯度和浓度。 [实验原理] 植物叶片经液氮研磨，可使细胞壁破裂，加入去污剂（如CTAB），可使核蛋白体解析，然后使蛋白和多糖杂质沉淀，DNA进入水相，再用酚、氯仿抽提纯化。本实验采用CTAB法，其主要作用是破膜。CTAB 是一种非离子去污剂，能溶解膜蛋白与脂肪，也可解聚核蛋白。植物材料在CTAB的处理下，结合65℃水浴使细胞裂解、蛋白质变性、DNA 被释放出来。CTAB与核酸形成复合物，此复合物在高盐（>0.7mM）浓度下可溶，并稳定存在，但在低盐浓度（0.1-0.5mM NaCl）下CTAB-核酸复合物就因溶解度降低而沉淀，而大部分的蛋白质及多糖等仍溶解于溶液中。经过氯仿/ 异戊醇(24:1) 抽提去除蛋白质、多糖、色素等来纯化DNA，最后经异丙醇或乙醇等沉淀剂将DNA沉淀分离出来。 由于核酸、蛋白质、多糖在特定的紫外波长都有特征吸收。核酸及其衍生物的紫外吸收高峰在260nm。纯的DNA样品A260/280≈1.8，纯的RNA样品A260/280≈2.0，并且1μg/ml DNA 溶液A260=0.020。 [实验器材] 1、高压灭菌锅 2、冰箱 3、恒温水浴锅 4、高速冷冻离心机 5、紫外分光光度计 6、剪刀 7、陶瓷研钵和杵子 8、磨口锥形瓶（50ml） 9、滴管10、细玻棒11、小烧杯（50ml）12、离心管（50ml）13、植物材料 [实验试剂] 1、3×CTAB buffer（pH8.0） 100mM Tris 25mM EDTA 1.5M NaCl 3% CTAB 2% β-巯基乙醇 2、TE缓冲液（pH8.0） 10mmol/L Tris·HCl 1mmol/L EDTA 3、氯仿-异戊醇混合液（24：1，V/V） 4、95％乙醇 5、液氮 [实验步骤] 1、称取2g新鲜的植物叶片，用蒸馏水冲洗叶面，滤纸吸干水分。 2、将叶片剪成1cm长，置预冷的研钵中，倒入液氮，尽快研磨成粉末。 3、待液氮蒸发完后，加入15mL预热（60℃）的CTAB提取缓冲液，转入一磨口锥形瓶中，
环境生物学(考试)
一、名词解释： 1.优先污染物P26 ：在众多的污染物中筛选出的潜在危险大的作为优先研究和控制对象的污染物，称之为优先污染物或称为优先控制污染物。 2.污染物的迁移P28：指污染物在环境中发生的空间位置的移动及其引起的富集、分散和消失的过程。 3.生物污染P59：生物污染是指对人和生物有害的微生物、寄生虫等病原体和变应原等污染水、气、土壤和食品，影响生物产量和质量，危害人类健康，这种污染称为生物污染。 4.环境激素P87：环境中存在一些天然物质或人工合成的环境污染物具有动物和人体激素的活性，这些物质能干扰和破坏野生动物和人体内分泌功能，导致野生动物繁殖障碍，甚至能诱发人类重大疾病。这些物质被称为环境激素，或外源性雌激素，或环境内分泌干扰物。 5.生物迁移P29：污染物通过生物的吸收、代谢、生长、死亡等过程所实现的迁移，是一种非常复杂的迁移形式。 6.污染物的转化P34：污染物在环境中通过物理、化学或生物的作用改变形态或转变成另一种物质的过程称为污染物的转化。 7.生物转化P43：生物转化指外源化合物进入生物机体后在有关酶系统的催化作用下的代谢变化过程。 8.生物转运P38：是指环境污染物经各种途径和方式同生物机体接触而被吸收、分布和排泄等过程的总称。 9.生物浓缩P51：指生物机体或处于同一营养级上的许多生物种群，从周围环境中蓄积某种元素或难分解化合物，使生物体内该物质的浓度超过环境中的浓度的现象，又称生物学浓缩，生物学富集。 ! 10.生物积累P51：指生物在其整个代谢活跃期间通过吸收、吸附、吞食等各种过程，从周围环境中蓄积某些元素或难分解化合物，以致随着生长发育，浓缩系数不断增大的现象，又称生物学积累。 11.生物放大P52：指在生态系统中，由于高营养级生物以低营养级生物为食物，某种元素或难分解化合物在生物机体中浓度随营养级的提高而逐步增大的现象，又称为生物学放大。 12.生物测试P95：指系统地利用生物的反应测定一种或多种污染物或环境因素单独或联合存在时所导致的影响或危害。 13.半数致死浓度（LC50）P100：指能引起一群动物的50%死亡的最低剂量或浓度。 14.半数效应浓度（EC50）P101：指引起50%受试生物的某种效应变化的浓度。通常指非死亡效应。 15.剂量—效应（反应）关系P100： 剂量-效应关系：不同剂量的化学物质在个体或群体中表现来的量效应大小之间的关系。 剂量-反应关系：不同剂量的化学物质与其引起的质效应发生率之间的关系 16.生物监测P140：生物监测是利用生物个体、种群或群落对环境污染或变化所产生的反应阐明环境污染状况，从生物学角度为环境质量的监测和评价提供依据。 17.指示生物P157：指示生物是指环境中对某些物质（包括进入环境中的污染物）能产生各种反应或信息而被用来监测和评价环境的现状和变化的生物。（不考） \ 18.环境生物技术P306：就是应用于认识和解决环境问题过程的生物技术体系，包括对环境污染效应的认识、环境质量评价和环境污染的生物处理技术等。 19.生物强化技术P333：生物强化技术（Bioaugmentation）或生物增强技术就是为了提高废水处理系统的处理能力，而向该系统中投加从自然界中筛选的优势种群并通过基因组合技术
环境生物学实验指导-11环科
环境生物学实验指导 专业：环境科学 时间：二零零九年九月
环境生物学实验指导 一、课程简介 环境生物学是环境科学专业开设的一门重要的专业必修课。通过本课程的学习，了解生物与环境之间的相互作用及其关系，生物在环境监测、环境评价、环境修复中的作用以及环境污染物的生物降解与转化规律，生物技术在环境治理中的应用等有关基本知识。系统地掌握环境生物学的基本理论、基本知识和基本技能。 二、课程实验目的和要求： 1 、目的：通过实践操作，印证和巩固课堂教学中学到的环境生物学的理论知识，学会实地观察的技术，培养进行科学工作的能力，养成实事求是的工作作风和解决实际问题的能力。 2 、要求：要求学生能够正确使用实验室的基本仪器设备，掌握环境生物学实验的基本操作技术，并能够客观地对实验进行观察、描述、比较、分析和综合。 三、考试（考核）方式： 以考核方式进行，要求学生独立完成每个实验并提交报告，并用百分制记分，然后求平均分 = 总分 / 实验次数。其实验成绩占课程总评成绩的 30% 。实验内容在课程考试中占 30% 。 四：主要仪器： 光学显微镜（含有关配件）50 台，超净工作台4台，高压蒸气灭菌锅2只，烘箱、恒温培养箱各3台，电炉 10 只，酒精灯、载玻片、接种环（针）、培养皿、试管、移液管、锥形瓶等若干。 五、主要参考书目： [1] 孔繁翔，环境生物学，南京：南京大学出版社。 [2] 王家玲，环境微生物学实验，北京：高等教育出版社。 [3] 程树培，环境生物技术实验指南，南京：南京大学出版社。
实验一有毒物质对水生生物的影响或急性毒性实验（4学时） 农药是一类特殊化学品。农药引起的环境污染和对生物的影响日益突出。在施用过程中,仅有1 %左右的农药作用于靶生物，其余的或残留于土壤,或通过间接途径进入水环境，从而影响土壤生物和水生生物。水环境中的农药可通过食物链途径逐级浓缩，从而导致对水生态系统的危害，甚至可最终危害人类健康。农药对水生生物的毒性是农药的生态风险评价和管理的重要参数。 一、实验目的和内容 百草枯、草甘膦、敌杀死和乐果是目前我国广泛施用的除草剂和高效杀虫剂。本实验采用急性毒性实验来研究农药对水生生物的影响。 二、实验材料 实验动物：体长约5~8cm的鲫鱼； 实验药品：草甘膦 实验仪器：塑料桶（容量约﹥10L）；容量瓶（100ml）；移液管；烧杯（250ml）； 三、实验方法步骤 (一)急性毒性试验的一般程序 1．急性试验剂量分组 (1)先查阅文献，找出与受试化学物结构与理化性质近似的化合物的毒性资料，并以其相同生物种类和相同染毒途径得出LD50(LC50)值作为受试物的预期毒性中值。 (2)以此LD50(LC50)为待测化合物的中间剂量组，再上下以3倍之差的剂量各推1～2个剂量组做预试验，求出生物全活、全死剂量。 (3)在预试验的全活全死剂量之间设5～6个剂量组，一般的各组间距按1.2～1.5等比级数设计。 2．选用适宜的染毒方式染毒，观察两周内的死亡情况。 3．症状观察：LD50值并不能充分说明受试化合物的急性毒性，因此应详细观察实验动物接触不同剂量外源化合物后的中毒症状、发生和发展过程及规律，死亡前症状特点、死亡时间等。一般常见的中毒症状有兴奋现象、抑制现象。 4．剖检死亡和濒死动物及部分存活动物，做大体病理解剖检查。 5．计算LD50(LC50)，及其标准法。通常采用寇氏法和几率单位法。 6．根据所得结果，按相关急性毒性分级标准，评定其毒性大小，如急性毒性作用带愈小，则引起死亡的危险性就愈大，反之，则愈小；LD50值愈小，毒性愈大。 (二)本实验方法步骤 1、农药的配制：母液稀释法（二次稀释法） 即先用少量的水把农药稀释，配成母液，再用大量的水把母液稀释成所需浓度。这样配出的药液高效又稳定！ 2、剂量分组 按水生生物急性毒性试验标准方法进行。每种农药设6～7 个试验浓度组,并同时设一对照组。每组
细胞生物学实验
实验室规则和要求 一般规定 1.上课第一天请先熟悉环境，牢记“安全”是进行任何实验最重要的事项。 2.在实验室内请穿著实验衣（最好长及膝盖下），避免穿著凉鞋、拖鞋（脚 趾不要裸露）。留有长发者，需以橡皮圈束于后，以防止引火危险或污染实验。 3.在实验室内禁止吸烟、吃东西、饮食、化妆、嚼口香糖、嬉戏奔跑，食 物饮料勿存放于实验室的冰箱中，实验桌上勿堆放书包、书籍、衣服外 套及杂物等。 4.所有实验仪器、耗材、药品等均属实验室所有，不得携出实验室外。每 组分配之仪器、耗材请在课程开始前确定清点与保管，课程结束后如数 清点缴回。公用仪器请善加爱惜使用。实验前后，请把工作区域清理擦 拭，并随时保持环境清洁。 5.实验前详阅实验内容，了解实验细节的原理及操作，注意上课所告知的 注意事项。实验进行中有任何状况或疑问，随时发问，切勿私自变更实 验程序。打翻任何药品试剂及器皿时，请随即清理。实验后，适切记下 自己的结果，严禁抄袭，确实关闭不用之电源、水、酒精灯及瓦斯等。 6.身体不适、睡眠不足、精神不济或注意力无法集中，请立即停止实验。 实验时间若延长，请注意时间的管制及自身的安全，不可自行逗留实验 室。 7.实验完毕，请清理实验室、倒垃圾、灭菌、关闭灯光及冷气，离开实验 室前记得洗手。 8.任何意外事件应立即报告教师或实验室管理人员，并应熟知相关之应变 措施。
药品 1.使用任何药品，请先看清楚标示说明、注意事项，翻阅物质安全资料， 查明是否对人体造成伤害，使用完毕请放回原位。 2.新配制的试剂请清楚注明内容物、浓度、注意事项及配制日期，为避免 污染，勿将未用完的药剂倒回容器内。 3.挥发性、腐蚀性、有毒溶剂（如甲醇、丙酮、醋酸、氯仿、盐酸、硫酸、 -巯基乙醇、甲醛、酚等）要在排烟柜中戴手套量取配制，取用完应随即盖好盖子，若不小心打翻试剂，马上处理。 4.有毒、致癌药剂例如丙稀酰胺（神经毒）、溴化乙啶（突变剂）、SDS（粉 尘）请戴手套及口罩取用，并勿到处污染，脱下手套后，养成洗手的好 习惯。 5.使用后的实验试剂和材料，应放在专用的收集桶内。固体培养基、琼脂 糖或有毒物品不得倒入水槽或下水道中。 6.使用刻度吸管取物时，切勿用嘴吸取，请用自动吸管或吸耳球。 仪器 1.使用仪器前先了解其性能、配备及正确操作方法，零件及附件严禁拆卸， 勿私自调整，并注意插座电压（110V或220V）之类别。 2.使用离心机时，离心管要两两对称、重量平衡，离心机未停下不得打开 盖子。冷冻离心机于开机状态时，务必盖紧盖子，以保持离心槽之低温并避免结霜。 3.电源供应器有高电压，切勿触摸电极或电泳槽内溶液，手湿切勿开启电 源。
环境生物学试验教案
实验一污染物对生物在生物化学和分子水平上的影响 ——空气中SO2对植物叶片叶绿素含量 及叶绿素a、b含量比例的影响 [实验目的] （1）掌握植物叶绿素含量的测定方法 （2）了解SO2对植物叶绿素含量的影响 [实验原理] （1）用丙酮提取叶绿素 （2）叶绿素a、b的最大吸收峰分别位于663nm和645nm，根据Lambert-Beer定律，可得：C a（mg/L）= 12.7D663 － 2.69D645 C b（mg/L）= 22.9D645 － 4.68D663 式中：C a、C a为叶绿素a、b的浓度。将C a与C b相加即得叶绿素总量C T： C T（mg/L）= C a + C b = 20.21A645 + 8.02A663 按下列公式计算叶绿素在叶片中的含量，并计算叶绿素a、b的比例。 mg/g ?? 叶绿素浓度提取液最终体积稀释倍数 叶绿素含量（）= 叶片鲜重克数 [实验器材] （1）仪器设备：分光光度计；电子天平；研钵；剪刀；50mL棕色容量瓶；小漏斗；玻璃棒；定量滤纸；吸水纸；滴管；2mL移液管；50mL烧杯。 （2）试剂：丙酮，80%丙酮，石英砂，碳酸钙粉。 （3）实验材料：经SO2熏气和未经熏气的植物样品 [实验步骤] （1）分别剪取两种处理植物的叶样，洗净，擦干，除去中脉，称取0.5g，剪碎。 （2）将剪碎的叶样置于研钵中，加少许石英砂和碳酸钙，再加少许丙酮，磨成匀浆。再加15 mL左右丙酮，搅拌，静置3min。 （3）将提取液过滤至50mL棕色容量瓶中，多次洗涤研钵、研棒。 （4）用滴管吸取丙酮，将滤纸上的叶绿素全部洗入容量瓶。用丙酮定容至50mL，摇匀。 （5）分别取2mL叶绿素提取液和2mL80%丙酮于50mL烧杯，混匀，成比色液。
环境生物学考试内容 修复的
绪论 1.三个环境的概念，尤其是“环境科学”中的“科学” 一般工具书中定义的“环境”是指人以外的客观事物，将环境作为一种人以外的客观存在来加以定义，如新华字典中定义为：周围的一切事物。 环境科学术语的“环境”的中心事物是“人”，是以人类为主体的外部世界，是“人类生存的环境”，在此基础上定义：影响人类生存和发展的各种天然的和经过人工改造的自然因素的总和。 生态学中“环境”研究的中心事物是“生物”，则环境是以整个生物界的生命为主体，是“生物生存的环境”，可定义：直接或间接影响生物生存和发展的各种因素的总和。 2.“环境”具有相对性，在不同的学科中含义不同，主体的改变往往导致环境概念含义的不同。人类是环境发展到一定阶段的产物，环境是人类生存的物质基础，环境在影响人类生产、生活的同时，人类也在不断地利用和改造自然环境。故人类和环境密切联系，相互作用。 3.环境问题：主要分为环境污染和生态破坏。指由于人类活动作用于人们周围的环境所引起的环境质量变化，以及这种变化反过来对人类生产、生活和健康的影响问题。其产生是人类社会发展到一定阶段人类与环境矛盾激化的产物。其实质是由于人类活动超出了环境的承受能力，对其所赖以生存的自然生态系统的结构和功能产生了破坏作用，导致人与其生存环境的不协调。 重大环境问题 （1）温室效应：大气中的温室气体（二氧化碳、甲烷等）覆盖在地球表层，它们能吸收来自太阳的短波辐射，同时吸收地球发出的长波红外辐射，因而可以像玻璃温室一样使地球保持与积蓄热量，引起地球表面温度上升，发生所谓的“温室效应” 危害：：（1）海平面上升（2）影响农业和自然生态系统（3）加剧洪涝、干旱等气候灾害（4）影响人类健康 （2）臭氧层的破坏：臭氧层的减少是人类活动所引起的，尤其是氯原子能催化抽样的分解，因而打破了臭氧的自然平衡。（到达平流层的氯主要是人们排放的氯氟烷烃CFC和含溴卤代烷烃，如应用在冷冻机、电冰箱及高级电子元件做清洁剂的弗利昂，均对臭氧层产生威胁）危害：1）使皮肤癌和白内障患者增加，损坏人的免疫力，使传染病的发病率增加。（2）破坏生态系统，植物减产，减少动物寿命，水生系统破坏；（3）引起新的环境问题。 （3）酸雨：酸雨是有于大气中二氧化硫和一氧化氮在强光照射下，进行光化学作用，并和水汽结合而形成。主要成分为硫酸和硝酸。这些强酸在雨水中解离，是雨雪的pH下降，一般将小于5.6的雨称为酸雨 危害：酸雨能直接伤害植物，导致农作物明显减产。也能引起土壤性质改变，主要是使土壤酸化，影响生物数量和群落结构，抑制硝化菌、固氮菌等的活动，是有机物的分解、固氮过程减弱，因而土壤肥力降低，生物生产力明显下降。 （4）有毒物质污染：有毒物质是指对生态系统和人类健康有毒害作用的物质排放到环境中而引起的危害。 环境生物学的研究方法主要有以下三类：野外调查和试验、实验室试验、模拟研究 4.解决环境问题的根本途径是调节人类社会活动与环境的关系。要真正实现这种调节必须具备下列条件：掌握自然生态规律，通晓环境变化过程，能预测人类活动引起的环境影响，运用规律去利用自然资源、改造自然。 第一章环境污染物在生态系统中的行为 1.环境污染分类：按环境要素分——大气污染、水体污染、土壤污染；污染物性质——生
神经生物学实验指导书
神经生物学实验指导书 实验一 脑内重要神经核团和神经生物学研究方法简介 Methods for neuroscience research and nuclei in brain 1.实验目的 理解神经核团的概念，理解重要的神经核团；掌握脑立体定位图谱的使用方法；了解神经生物学研究的常用方法。 2.实验器材、试剂及实验材料 手术刀、毛剪、注射器， 1%戊巴比妥钠(Pentobarbital Sodium)、依文氏蓝(Evans Blue)， 大鼠。 3.实验步骤 3.1脑的大致结构和重要神经核团 脑膜至外由内分别有：硬脑膜、蛛网膜、软脑膜，其下是大脑皮层，边缘系统等结构。重要的核团（神经内分泌相关的丘脑下部核团）有：PVN（室周核）、PeN （室旁核）、SON（视上核）、ME（正中隆起）、Hippocampus（海马）等。下表给出几个重要核团的大致范围，值得注意的是：核团在不同截面上的位置和形状是不同的，因此具体位置应查阅图谱。 神经核团距离前囟（mm）中心线两侧（mm）距脑背侧（mm） PVN（室周核）-1.0~-4.2 0.0~0.8 5.0~5.5 PeN（室旁核）0.0~-3.2 0.0~0.5 6.5~9.5 SON（视上核）0.0~-1.8 1.0~2.3 8.5~8.8 ME（正中隆起）-2.4~-3.4 0.0~0.5 9.5~10.0 Hippocampus（海马）-1.8~-6.2 0.5~6.3 3.2~8.0 3.2实验内容 a)戊巴比妥钠腹腔注射麻醉大鼠（40mg/kg）； b)在颅骨前囟后3-5mm处打孔； c)用微量注射器吸入3μl依文氏蓝，注入大鼠背侧三脑室。 d)大鼠断头，除去颅骨，观察脑的结构。 George Paxinos and Charles Watson，The Rat Brain in Stereofaxic coordinates，Academic press，1986 4.江湾Ⅰ型脑定位仪的使用 6.1脑立体定位仪的原理 a)脑立体定位仪分为两大类：直线式和赤道式。
环境生物学复习试题1
复习题 一、名词解释（5个，10分） 光化学烟雾：参与光化学反应过程的一次污染物和二次污染物的混合物所形成的烟雾污染现象叫做光化学烟雾。 氧化应激（OS）是指体内氧化与抗氧化作用失衡，倾向于氧化，导致中性粒细胞炎性浸润，蛋白酶分泌增加，产生大量氧化中间产物。氧化应激是由自由基（活性氧自由基(ROS)和活性氮自由基RNS)在体内产生的一种负面作用，并被认为是导致组织损伤、衰老和疾病的一个重要因素。 共代谢作用：只有在初级能源物质存在时微生物才能进行有机物的生物降解过程。 硝化作用：是好氧条件下在无机化能硝化细菌作用下氨被氧化成硝酸盐的过程。 生物转化：指污染物进入生物机体后在有关酶系统的催化作用下, 发生一系列化学变化并形成一些分解产物或衍生物的代谢变化过程。 氧垂曲线：在河流受到大量有机物污染时，由于有机物这种氧化分解作用，水体溶解氧发生变化，随着污染源到河流下游一定距离内，溶解氧由高到低，再到原来溶解氧水平，可绘制成一条溶解氧下降曲线，称之为氧垂曲线。 固定化酶：通过物理吸附法或化学键合法将水溶性酶和固态的不溶性载体相结合，使酶变成不溶与水但仍保催化活性的衍生物。 BOD5 每日容许摄入量（ADI）最高容许浓度（MAC）PM2.5 混合功能氧化（MFO）相Ⅰ反应相Ⅱ反应污泥负荷（Ls）污泥沉降比（SV） 二、填空（每空1分，共约40分） 1．土壤中，硫酸盐在硫酸盐还原菌的作用下，将硫酸盐还原成硫化氢。 2．污染物经完整皮肤吸收，脂／水分配系数接近的化合物最容易经皮肤吸收。 3.微宇宙法是研究污染物在生物、、生态系统和生物圈水平上的生物效应的一种方法。标准化水生微宙的实验容器为L。 4.大肠菌群是较好的水质粪便污染的指示菌，其检验方法有和两种。 5.MFO代谢有机化合物，转化成低毒易溶的代谢产物排出体外，但有的则变成高毒甚至致癌物。 6.劣质磷肥，除含大量重金属外，三氯乙醛的含量也很高；氯乙醛在土壤微生物的作用下，迅速转为，其毒性大于三氯乙醛。 7.排泄主要途径是，随尿排出；其次是经通过消化道，随粪便排出，挥发性化学物还可经呼吸道，随呼出气排出。 8.对于能发生生物浓缩的外源性物质必须满足以下两个条件：(1) 难以生物降解(2) 具有亲脂性。 9．铅被机体吸收后90%沉积在骨骼中；有机氯农药蓄积在脂肪组织中。 10．生物对环境的污染效应有①病原微生物的危害，能使人动物及植物致病；②水体富营养化；③污染生物的代谢产物，使其他生物中毒，食品污染等。 11．评价微生物污染状况的指标可用细菌总数和链球菌总数；测定大气污染的细菌总数的方法有：沉降平皿法；吸收管法；撞击平皿法；滤膜法。 12．一定剂量的化学物质A和B分别引起某动物15％和40％的死亡率，经A和B同时作用于100只活的动物，若A和B具有独立作用，那么将死亡只；若A和B具有相加作用，那么将死亡只。 13.为了探明环境污染物对机体是否有蓄积毒作用，致畸、致突变、致癌等作用，随着毒理
生物化学实验指导
生物化学实验须知 一、实验目的 1．培养学生严谨的科学作风，独立工作能力及科学的思维方法。 2．学习基础的生物化学实验方法，为今后的学习与研究准备更好的条件。 3．培养学生爱护国家财物、爱护集体、团结互助的优良道德品质。 4．培养学生的书面及口头表达能力。 二、实验的总要求 1．按教研室予先公布的实验进度表，了解各次实验的具体内容，并认真做好预习。弄清各步骤的意义，避免教条或机械式做实验。 2．进行实验不仅要求结果良好，而且要求敏捷高效。为达到此目的，实验者应注意：①一切步骤都按正规操作法进行；②样品与试剂勿过量取用；③宜粗者勿细（例如粗天平称量物品即足够准确时，不用分析天平，用量筒取液足够准确时，不用吸量管）；④试剂、仪器防止污染及破损，保持实验环境的整洁。⑤注意力集中，避免差错。 3．实验中观察要仔细，记录要详尽、及时与客观，不得于实验后追记，应直接记在实验报告本中，而且无论实验成功与失败，都应记下。对于失败的实验，要分析其原因。 4．实验室是集体学习与工作的场所，实验时应保持肃静，不得大声喧哗，以免影响他人的工作与思考。对师长尊敬，对同学要团结友爱。实验后应清洗整理用过的仪器及清理自己的实验场所。 三、实验报告 实验报告的书写是培养学生书面表达能力和科学作风的重要手段之一，实验者应该重视。实验报告的内容包括下列各项：实验名称、实验日期、实验目的、实验原理、实验步骤、实验记录、计算（定量测定、解释）、讨论或小结。实验记录除应包括“实验总要求”的第3项要求外，还应包括原始记录。原始记录是随做随记的第一手记录，应由指导教师签字认可。书写实验报告要字迹工整，语句通顺。书写工整的实验报告，是尊师的重要表现之一。 四、组织与分组 1．每一个班学习委员负责①实验报告的收集与分发；②安排清扫值日名单； ③反映同学学习情况及对教学工作的意见；④其它临时性的工作。 2．一般实验都为两个学生单独进行。有的实验要4人一组，由相邻两学生组成固定小组。小组的成员在指导教师的同意下，可作适当的调整。
细胞生物学试验指导
细胞生物学实验指导 细胞生物学的发展总是依赖于技术和实验手段的进步,所以学习细胞生物学的技术和方法至关重要。 实验一普通显微镜及其使用（装片观察） 一、目的要求： 1、掌握显微镜的构造、油浸系的原理、使用方法、保护要点。 2、参观了解其他各类显微镜。 二、材料：普通光学显微镜及其他显微镜、细菌标本片、香柏油、二甲苯、擦镜纸。 三、方法和步骤： 1、介绍普通光学显微镜的构造 机械部分：镜座、镜臂、镜筒、转换器、载物台、调焦螺旋。 光学部分：接目镜、物镜、反光镜、聚光器。 2、油镜的原理及使用方法 原理：油镜头的晶片细小，进入镜中的光线亦少，光线经聚光器，通过载玻片进油镜时，由于空气介质和玻璃介质的折射率不一样，光线因折射而损失，使视野更暗。在载玻片和油镜之间加上和玻璃折光系数相同的香柏油，光线直接进入镜头，不发生折射，视野明亮，便于观察。 3、如何维护显微镜：机械部分的维护，光学部分的维护。 4、注意事项： （1）观察油镜载片时，先在载片上有菌影的地方滴1-2滴香柏油，然后放载物台中央，眼侧面看，慢慢降低油镜浸入香柏油中，镜头几乎接触标本。再用左眼在接目镜观察，同时慢慢旋动粗螺旋提起镜筒至能模糊看到物象时，再转动微调螺旋，直至看清晰为止。注意镜头离开油，就不能看清，重新按刚才的步骤进行。 （2）油镜使用过后，立即用擦镜纸擦拭镜头，如油渍已干，则可用香柏油粘二甲苯擦拭镜
头，再用干净擦镜纸擦去二甲苯。 5、观察几种细菌标本片。 6、示教看相差显微镜和荧光显微镜。 四、作业及思考题： 1、油镜的原理是什么？ 2、光线强弱如何调节？与哪些部件有关？ 实验二、细胞膜的渗透性 实验目的 了解细胞膜的渗透性及各类物质进入细胞的速度。 实验原理 将红细胞放入数种等渗溶液中，由于红细胞对各种溶质的透性不同，有的溶质可以渗入，有的不能渗入，渗入的溶质能够提高红细胞的渗透压，所以促使水分进入细胞，引起溶血，由于溶质透入速度互不相同，因此溶血时间也不相同。 实验用品 一、器材 50ml烧杯, 试管（1～10cm）, 10ml移液管, 试管架。 二、材料 羊血。 三、试剂0.17mol/L氯化钠，0.17mol/L氯化胺，0.17mol/L醋酸胺，0.17mol/L硝酸钠，0.12mol/草酸胺，0.12mol/硫酸钠，0.32mol/葡萄糖，0.32mol/甘油，0.32mol/乙醇，0.32mol/丙酮。 实验方法 一、羊血细胞悬液 取50ml小烧杯一个，加1份羊血和10份0.17mol/L氯化钠，形成一种不透 明的红色液体，此即稀释的羊血。
环境生物学实验-20200901-邹立
中国海洋大学本科生课程大纲 课程属性：公共基础/通识教育/学科基础/专业知识/工作技能，课程性质：必修、选修 一、课程介绍 1.课程描述（中英文）： 本课程配合环境科学专业本科学生的专业基础课《环境生物学》设置，通过一系列4个实验，由浅入深地学习和掌握环境生物学实验方法，深化对概念和理论的理解，锻炼实验操作技能。包括污染物对酶、器官和细胞等不同生物水平的影响，掌握环境生物学实验的基本操作，学习受损生物体的观察和检测方法，运用不同生物水平指标监测和检测污染物的生物学效应。 Experiment on Environmental Biology is associated on the basic curriculum of environmental biology in environmental sciences. It is assigned 4 practical projects from lower to higher levels, in order to practice and promote the professional and operational skills in environmental biology. These 4 projects not only assist the understanding on concepts, theories and technology in the course of Environmental Biology, but also improve the students’ practical skills and abilities. The projects cover the pollutant influences on biological levels of enzyme, organ and cell, by which grasp the basic practical methods in environmental biology, learn the observation and determination methods on poisoned organisms, and apply the parameters in different biological levels on monitoring and detecting the biological effects of pollutants. 2.设计思路： 《环境生物学实验》的实验内容包括污染物对种子萌发的影响，污染物对藻类细胞形态和结构的影响，重金属污染对藻类初级生产力的影响，过氧化氢酶对有机污染的 - 1 -
环境生物学实验 指导书
实验1 种群生态环境调查与空间分布格局调查分析 （3学时） 一、实验目的和要求： 通过对植物立地条件观察，进一步了解植物。植物群落与环境条件的相互关系；通过对种群内物种分布方差计算确定物种的空间分布类型，掌握种群空间分布判断方法。 实验内容、原理和步骤： （一）种群生态环境调查 1.光、水、土、热等环境因子的生态效应观察 （l）生态序列法选择其一种或数种环境因子逐渐变化的地段作观察。 l）诃流湖泊沿岸地带：这里是由岸边到陆上高地地下水位逐渐降低，导致上壤及其理化性质渐变的地带。注意观察植物由沉水植物、浮水植物、挺水植物、湿生植物、中生植物逐渐变化的生态类型。 2）海滨或内陆封闭湖盆地区；注意观察土壤含盐量的逐渐变化和地下水位的影响。盐生植物、湿生植物、中生植物等生态类型的相应变化。 3）各种沙丘与丘间洼地地带：沙丘迎风坡和背风坡、中间平坦低洼地带注意观察土地。水热条件、化学性质的显著差异，导致植物种类和生态习性的差异。注意观察比较各生适应应类型的特征差异。 4）较高的山地：自下而上水热条件、土层厚度、土壤质地、土壤水分。粗骨性程度生境条件的明显变化，导致植物群落、植物优势种的相应变化、注镜观察比较其特征差异。 5）不同坡向的坡地（阴坡与阳坡）：其光照和水热条件的差异会引起其他生态条件的变化。可选择一个坡地或山丘。绕行一周，注意观察其生境条件和植物种类或生长状态随之相应变化的状况。 6）在森林或防护林分布茂密的地方；用野外风速表、照度计测定林地内外各处的风速、光照强度的变化，同时进行各处植物种类更替情况和生长状况变化的观察比较. （2）样线法沿生态序列中环境变化显著的方向拉开30－50m 的皮尺或测绳（样线），详细记录绳尺所通过植物的名称及植株生长的高度；以及生境的特点。样线长度视环境的变化、种类、密度等具体情况而定，但不宜过长，以能表现出生态学到更替即可。 （3）频度法 1）选择观察地点和主要环境因子（土壤pH值、盐度、水分、光照等）。 2）选定若干待测的灌木。草本植物，尽量熟识这些植物的种类，或剪取标本，回室内鉴定。 3）测量小样方．大型灌木、草本植物可取1平方米样方。小型草本植物可取1/10的样方。沿环境梯度变化方向。每隔一定的距离（10m 或30m 。视生境复杂情况而定）设置10－20个样方或样圆，参照表7.8格式，分别登记所遇到的待测植物。计算这些植物出现的频度。某种植物出现的样方占该测点样方总数的百分数就是该植物的出现频度。