金黄色葡萄球菌临床监测与葡萄球菌A蛋白快速检验研究
实验5 金黄色葡萄球菌的检验
实验5 金黄色葡萄球菌的检验1 目的和要求（1）掌握金黄色葡萄球菌的检验方法（2）了解金黄色葡萄球菌各检验步骤的依据及原理2 基本原理金黄色葡萄球菌进入人体内，可引起局部的痈疾和蜂窝组织炎，还可以引起肺炎、心肌炎、骨骼炎、肾盂肾炎等系统化脓性感染，甚至可发展成败血症。
此外，食品中生长金黄色葡萄球菌是食品卫生中的一种潜在危险，因为金黄色葡萄球菌在是中会产生肠毒素，食用后将引起食物中毒，这在我国细菌性食物中毒事件中，仅次于沙门氏菌和副溶血弧菌。
因此，检验食品中金黄色葡萄球菌是实际意义。
绝大多数金黄色葡萄球菌在血琼脂平板上产生金黄色色素，菌落周围有透明的溶血圈，在厌氧条件下能分解甘露醇产酸，产生血浆凝固酶和耐热的DNA酶。
3 实验材料3.1 检样乳与乳制品（如奶粉、消毒乳）、肉制品、饮料3.2 菌种金黄色葡萄球菌、藤黄八叠球菌斜面培养物。
3.3 培养基7.5%氯化钠肉汤、肉浸液肉汤、血琼脂平板、Baird-Parker氏培养基3.4 试剂与染色剂无菌生理盐水、兔血浆、革兰氏染色液等。
3.5 仪器与其他用具无菌吸管（1mL、5、10）、无菌试管、载玻片、接种环、酒精灯、显微镜、均质器、恒温箱等。
4 检样程序5 操作步骤5.15.1.1样品的处理称取25 g 样品至盛有225 mL 7.5 %氯化钠肉汤或10 %氯化钠胰酪胨大豆肉汤的无菌均质杯内，8000 r/min～10000 r/min 均质 1 min～2 min，或放入盛有225 mL 7.5 %氯化钠肉汤或10 %氯化钠胰酪胨大豆肉汤的无菌均质袋中，用拍击式均质器拍打 1 min～2 min。
若样品为液态，吸取25 mL 样品至盛有225 mL 7.5 %氯化钠肉汤或10 %氯化钠胰酪胨大豆肉汤的无菌锥形瓶(瓶内可预置适当数量的无菌玻璃珠)中，振荡混匀。
5.1.2 增菌和分离培养5.1.2.1 将上述样品匀液于36 ℃±1 ℃培养18 h～24 h。
《微生物学检验》试卷
《微生物学检验》试卷1.肠杆菌科细菌不具有的抗原是（） [单选题] *A.M抗原B.H抗原C. O抗原D.K抗原E.Vi抗原(正确答案)2.从粪便标本中分离志贺菌属常选用的培养基是（） [单选题] *A. MACB.巧克力色平板C.BAPD.EMBE. SS(正确答案)3.下列细菌中，属于肠道正常菌群的是（） [单选题] *A.鼠疫耶尔森菌B.福氏志贺菌C.伤寒沙门菌D.阴沟肠杆菌(正确答案)E.痢疾志贺菌4.人类细菌性痢疾的病原菌是（） [单选题] *A.霍乱弧菌B. 大肠埃希菌C.痢疾志贺菌(正确答案)D.空肠弯曲菌E.伤寒沙门菌5.鼠疫耶尔森菌在肉汤培养基中生长48小时后的特点是（） [单选题] *A. 沉淀生长B.贴壁生长C.形成菌膜，稍加摇动呈“钟乳石”状下垂(正确答案)D.云雾状生长E.均匀混浊生长6.下列微生物中，可导致患者粪便呈“米泔水”样的是（） [单选题] *A.大肠埃希菌B.痢疾志贺菌C.伤寒沙门菌D.霍乱弧菌(正确答案)E.金黄色葡萄球菌7. 霍乱弧菌根据下列哪种抗原进行分群和分类（） [单选题] *A. H抗原B. Vi抗原C. O抗原(正确答案)D. K抗原E. M抗原8.霍乱弧菌在TCBS平板上的菌落颜色为（） [单选题] *A.绿色B.黄色(正确答案)C.深蓝色D.黑色E.灰褐色9.我国沿海地区食物中毒最常见的病原菌是（） [单选题] *A.霍乱弧菌B.副溶血弧菌(正确答案)C.金黄色葡萄球菌D.拟态弧菌E.伤寒沙门菌10.常引起败血症的细菌是（） [单选题] *A.白喉棒状杆菌B.破伤风梭菌C.铜绿假单胞菌(正确答案)D.百日咳鲍特菌E.肉毒梭菌11.铜绿假单胞菌的特征是（） [单选题] *A.兼性厌氧菌B.具有周鞭毛的革兰阴性菌C.在液体培养基中形成菌膜，菌液呈蓝绿色(正确答案)D.是人类皮肤和粘膜表面的常居菌E.麦康凯平板上很难生长12.引起烧伤后败血症最常见、最严重的细菌为（） [单选题] *A.大肠埃希菌B.肺炎链球菌C.铜绿假单胞菌(正确答案)D.产气肠杆菌E.枸橼酸杆菌13.出现“卫星现象”的原因是由于金黄色葡萄球菌能合成大量（） [单选题] *A.生长因子B.V因子C.X因子D. 维生素B1(正确答案)E.V因子+X因子14. 伤寒患者发病第一周内，分离病原菌应采用的标本是（） [单选题] *A 血液(正确答案)B 尿液C 粪便D 呕吐物E 脑脊液15. 氧化酶试验的主要试剂为（） [单选题] *A 盐酸四甲基对苯二胺(正确答案)B 对二甲氨基苯甲醛C 氨基苯甲醛D 苯丙酮酸E 二甲基对苯二胺16.白喉棒状杆菌的异染颗粒，通过哪种染色可观察到（） [单选题] *A.革兰染色B.抗酸染色C.Albert染色(正确答案)D.镀银染色E.黑斯染色17. L型菌与支原体的区别是（） [单选题] *A.形态多形性B.对低渗敏感C.“荷包蛋”样菌落D.返祖现象(正确答案)E.可通过滤菌器18.人类最常见的炭疽病是（） [单选题] *A.肺炭疽B.肠炭疽C.皮肤炭疽(正确答案)D.肝炭疽E.炭疽性脑膜炎19.对炭疽病动物采集标本特别禁止（） [单选题] *A.取舌尖B.取耳尖C.局限病灶的病变组织D.宰杀后解剖(正确答案)E.穿刺取心血20.使结核分枝杆菌在液体培养基中呈束状生长的菌体成分是（） [单选题] *B.索状因子(正确答案)C.硫酸脑苷脂D.蜡质DE.肽聚糖21.诺卡菌广泛存在于（） [单选题] *A.口腔B.皮肤C.肠道D.土壤(正确答案)E.水源22.血平板上形成双层溶血环的细菌是（） [单选题] *A.金黄色葡萄球菌B.肺炎链球菌C.破伤风梭菌D.产气荚膜梭菌(正确答案)E.白喉杆菌23.肉毒梭菌所引起疾病的感染途径是（） [单选题] *A.食用污染食物(正确答案)B.污染伤口C.节肢动物叮咬D.吸入污染的空气E.接触肉毒患者的用品24.破伤风特异性治疗可应用（） [单选题] *B.抗毒素(正确答案)C.类毒素D.细菌素E.破伤风菌苗25. 含有细菌所需要最基本的营养成分，可供大多数细菌生长的培养基是（） [单选题] *A 基础培养基(正确答案)B 营养培养基C鉴别培养基D 选择培养基E 特殊培养基26.下列属于强培养基的是（） [单选题] *A.MAC培养基B.中国蓝培养基C.EMB培养基D. SS培养基(正确答案)E.肉汤培养基27.下列能产生H2S的细菌是（） [单选题] *A. 大肠埃希菌B.伤寒沙门菌(正确答案)C. 痢疾志贺菌D.鼠疫耶尔森菌E.肺炎克雷白菌28.肠道选择培养基是利用肠杆菌科细菌的特性中的（） [单选题] *A.耐盐性B.耐碱性C.耐酸性D.耐胆盐和某些染料(正确答案)E.对头孢菌素天然耐药29. 耐甲氧西林金黄色葡萄球菌是（） [单选题] *A MRSA(正确答案)B MRSEC MRSD MRCNSE SPA30. 引起剥脱性皮炎的细菌是（） [单选题] *A 肺炎链球菌B 草绿色链球菌C 粪肠球菌D 金黄色葡萄球菌(正确答案)E 脑膜炎奈瑟菌31. 微生物分类的基本单位是（） [单选题] *A属B目C种(正确答案)D株E门32.第一个被人类发现的病原菌是（） [单选题] *A.霍乱弧菌B.百日咳鲍特菌C.破伤风梭菌D.炭疽芽孢杆菌(正确答案)E.鼠疫耶尔森菌33.菌落呈“融蜡状”的细菌是（） [单选题] *A.破伤风梭菌B.产气荚膜梭菌C.结核分枝杆菌D.白喉棒状杆菌E.蜡状芽孢杆菌(正确答案)34.可进行“冷增菌”的细菌是（） [单选题] *A.艰难梭菌B.红斑丹毒细菌C.产单核细胞李斯特菌(正确答案)D.蜡样芽孢杆菌E.副溶血性弧菌35.分支杆菌一般需培养多长时间才能长出肉眼可见菌落（） [单选题] *A.1～2天B.3～5天C.6～9天D.10～13天E.14天以上(正确答案)36.分支杆菌抵抗盐酸乙醇脱色的主要物质基础是（） [单选题] *A.肽聚糖B.脂多糖C.分枝菌酸(正确答案)D.磷壁酸E.脂蛋白37.庖肉培养基可用来培养（） [单选题] *A. 产气荚膜梭菌(正确答案)B.炭疽杆菌C.百日咳杆菌D. 枯草芽孢杆菌E.流感嗜血杆菌38.油镜下呈“网球拍”状的细菌是（） [单选题] *A.白喉杆菌B.枯草杆菌C.炭疽杆菌D.产气荚膜梭菌E.肉毒梭菌(正确答案)39.判断灭菌的依据是（） [单选题] *A.杀灭细菌繁殖体B.杀灭芽胞(正确答案)C.细菌菌毛蛋白变性D.破坏鞭毛蛋白E.破坏细菌荚膜40.下列标本采集说法错误的是（） [单选题] *A采集时间最好是病程早期、急性期或症状典型时B必须在使用抗生素或其他抗菌药物之后采集(正确答案)C采集的标本应无外源性污染D如尿液标本疑为厌氧菌感染时，应以无菌注射器从耻骨上缘行膀胱穿刺术抽取E若怀疑是需氧或兼性厌氧菌的感染，则可通过自然导尿获取标本41.细菌生长繁殖的方式是（） [单选题] *A 二分裂(正确答案)B 有丝分裂C 孢子生殖D 复制E 出芽42. 获得纯种细菌最简单有效的方法是将标本（） [单选题] *A 穿刺接种于半固体培养基中培养B 研磨接种于液体培养基中培养C 分区画线接种于固体平板培养基培养(正确答案)D 连续涂布于固体平板培养基培养E 蛇形画线接种于固体斜面培养基培养43. 含有Ⅴ和Ⅹ因子适于接种疑有嗜血杆菌、奈瑟菌等标本的培养基（） [单选题] *A 麦康凯平板B 巧克力血平板C SS琼脂D 血液增菌培养基(正确答案)E 中国蓝平板44. 大肠埃希菌在伊红美蓝平板上生长呈现（） [单选题] *A 粉红色B 黑色C 蓝色D 紫黑色具有金属光泽(正确答案)E 灰色45. 霍乱弧菌在TCBS琼脂上生长的颜色是（） [单选题] *A 黄色B 粉红色C 蓝色D 紫黑色具有金属光泽E 灰色(正确答案)46. 下面不属于选择性培养基的是（） [单选题] *A中国蓝平板B伊红美蓝平板C S-S平板D麦康凯平板E血液增菌培养基(正确答案)47. 血液接种于培养瓶后，若为生长阴性，应孵育多长时间弃去（） [单选题] *A 1天B 2天C 1周(正确答案)D 2周E 一个月48. 链球菌与葡萄球菌的属间鉴别，可做初步确定的是（） [单选题] *A DNA酶试验B 触酶试验(正确答案)C 氧化酶试验D 葡萄糖发酵试验E 过氧化氢酶抑制试验49. 从严重肺内感染患者分离出的产ESBLS的肺炎克雷伯菌，可用（） [单选题] *A 头孢他啶B 头孢唑林C 氨曲南D 亚胺培南(正确答案)E 青霉素50. 鉴别金黄色葡萄球菌与表皮葡萄球菌最主要的区别是（） [单选题] *A 色素B溶血素C A蛋白D产生凝固酶(正确答案)E革兰染色51. 下列微生物中何种属于人体口腔及咽部“正常菌群”（） [单选题] *A 流感嗜血杆菌B 金黄色葡萄球菌C 草绿色链球菌(正确答案)D 不动杆菌E 铜绿假单胞菌52. 用来代替立克次体抗原与患者血清做外-斐反应的是（） [单选题] *A.普通变形杆菌(正确答案)B.粘质沙雷菌C.副伤寒沙门菌D.肺炎克雷白菌E.产气肠杆菌53.下列细菌中，一般不引起肠道感染的是（） [单选题] *A.埃希菌属B.沙门菌属C.志贺菌属D.耶尔森菌属E.克雷伯菌属(正确答案)54. 细菌核质以外的遗传物质是（） [单选题] *A mRNAB 核蛋白体C 质粒(正确答案)D 异染颗粒E 性菌毛55. 革兰染色所用试剂的顺序是（） [单选题] *A 稀释复红—碘液—酒精—结晶紫B 结晶紫—酒精—碘液—稀释复红C 结晶紫—碘液—酒精—稀释复红(正确答案)D 稀释复红—酒精—结晶紫—碘液E 稀释复红—结晶紫—碘液—酒精56.下列细菌中，被认为是潜在的生物恐怖性细菌的是（） [单选题] *A.铜绿假单胞菌B.荧光假单胞菌C.鼻疽伯克霍尔德菌(正确答案)D.斯氏假单胞菌E.嗜麦芽窄食单胞菌57. 在血平板上生长，不会出现溶血现象的是（） [单选题] *A.鲍曼不动杆菌(正确答案)B.铜绿假单胞菌C.金黄色葡萄球菌D.A群链球菌E.肺炎链球菌58. S－R变异是指（） [单选题] *A、形态变异(正确答案)B、培养特性变异C、毒力变异D、耐药性变异E、抗原性变异59. 下列哪种显微镜多用于检查不染色的活细菌和螺旋体的形态及运动观察（）[单选题] *A 普通光学显微镜B 暗视野显微镜(正确答案)C 相差显微镜D 荧光显微镜E 电子显微镜60.真菌感染不能用抗生素治疗，是因为真菌（） [单选题] *A.缺乏细胞壁B.产耐青霉素的酶C.产期使用青霉素易产生耐药D.细胞壁缺乏肽聚糖(正确答案)E.亲和力低61. 微生物检验的任务，错误的是（） [单选题] *A.专门研究代谢产物检测方法(正确答案)B.消毒灭菌效果评价C.监测医院内感染D.进行病原学诊断E. 筛选抗菌药物62. 通常临床微生物实验室属生物安全几级实验室（） [单选题] *A. BSL-0B. BSL-1C. BSL-2(正确答案)D. BSL-3E. BSL-463. 含血清的培养基多用何种方法灭菌（） [单选题] *A.烧灼法B.间歇蒸汽灭菌法(正确答案)C.巴氏消毒法D.煮沸法E.高压蒸汽灭菌法64. 可用于制备卡介苗的结核分枝杆菌是什么变异的菌株（） [单选题] *A.形态变异B.结构变异C.毒力变异(正确答案)D.耐药性变异E.菌落变异65. 检查厌氧菌动力常用 [单选题] *A.毛细管法(正确答案)B.压滴法C.革兰染色法D.抗酸染色法E.悬滴法66. 下列培养基中，含有酚红指示剂的是（） [单选题] *A.吲哚试验B.甲基红试验C.葡萄糖氧化发酵D.硫化氢试验E. 尿酶试验(正确答案)67. 观察细菌内部的超微结构需要采用（） [单选题] *A 荧光显微镜B 普通光学显微镜C 电子显微镜(正确答案)D 暗视野显微镜E 相差显微镜68.下列有关药敏试验意义的论述，错误的一项是（） [单选题] *A.药敏实验的结果为“敏感”时，治疗可能有效B.药敏试验为中介时，只要加大药物剂量完全可以达到治疗效果(正确答案)C.药敏试验结果是提供药物选择的依据D.药敏试验结果可预测抗菌治疗的效果E.体外药敏结果不完全与体内治疗效果一致69.人类最严重的鼠疫是（） [单选题] *A.肺鼠疫B.败血型鼠疫(正确答案)C.腺炭疽D.肝鼠疫E.鼠疫脑膜炎70.脑脊液标本通常接种于（） [单选题] *A 血液增菌培养基(正确答案)B 血平板C 巧克力平板D 中国蓝平板E 伊红美蓝平板71.胆汁溶菌试验常用于鉴别（） [单选题] *A.A群链球菌和B群链球菌B. A群链球菌和D群链球菌C.肺炎链球菌和甲型溶血型链球菌(正确答案)D.肺炎链球菌和乙型溶血性链球菌E.表皮葡萄球菌和腐生葡萄球菌72. 含有细菌所需要最基本的营养成分，可供大多数细菌生长的培养基是（） [单选题] *A 基础培养基(正确答案)B 营养培养基C鉴别培养基D 选择培养基E 特殊培养基73.从混有杂菌的标本中分离葡萄球菌的首选培养基是（） [单选题] *A.MAC培养基B.中国蓝培养基C.EMB培养基D.高盐甘露醇培养基(正确答案)E.肉汤培养基74.肠道致病菌与肠道非致病菌的初步鉴别试验常选用（） [单选题] *A.吲哚试验B.乳糖发酵试验(正确答案)C.尿素分解试验D.胆汁溶解试验E.菊糖发酵试验75.肥达反应有诊断价值的抗体效价，通常是（） [单选题] *A O凝集价≥40，H凝集价≥ 40B O凝集价≥80，H凝集价≥ 160(正确答案)C O凝集价≥40，H凝集价≥160D O凝集价≥160，H凝集价≥ 80E O凝集价≥80，H凝集价≥ 8076.湿热灭菌效果监测应采用生物指示物是（） [单选题] *A 嗜热脂肪杆菌芽孢(正确答案)B 枯草杆菌黑色变种芽孢C 短小芽孢杆菌D 粪链球菌E肠球菌77.能产生绿色色素和特殊生姜气味的细菌是（） [单选题] *A.大肠埃希菌B.变形杆菌C.克雷伯菌D.结核分枝杆菌E.铜绿假单胞菌(正确答案)78. 用于霍乱孤菌培养的培养基是（） [单选题] *A 麦康凯平板B碱性蛋白胨水(正确答案)C SS琼脂D 血液增菌培养基E 中国蓝平板79. 幽门螺杆菌感染的快速诊断可依据（） [单选题] *A 葡萄糖发酵试验B 硫化氢试验C尿素酶试验(正确答案)D 胆汁溶菌试验E 明胶液化试验80. 最有可能分离出流感嗜血杆菌的标本是（） [单选题] *A 尿液B 粪便C 烧伤分泌物D 腹腔液E 痰液(正确答案)81.下面不属于选择性培养基的是（） [单选题] *A中国蓝平板B伊红美蓝平板C S-S平板D麦康凯平板E血液增菌培养基(正确答案)82. 细菌核质以外的遗传物质是（） [单选题] *B 核蛋白体C 质粒(正确答案)D 异染颗粒E 性菌毛83. 革兰染色所用试剂的顺序是（） [单选题] *A 稀释复红—碘液—酒精—结晶紫B 结晶紫—酒精—碘液—稀释复红C 结晶紫—碘液—酒精—稀释复红(正确答案)D 稀释复红—酒精—结晶紫—碘液E 稀释复红—结晶紫—碘液—酒精84.可用荚膜肿胀试验分型的细菌为（） [单选题] *A A群链球菌B B群链球菌C D群链球菌D 肺炎链球菌(正确答案)E 草绿色铁球菌85.由疖、痈病变继发的败血症，其细菌大多为（） [单选题] *A 大肠埃希菌B 脑膜炎奈瑟菌C 金黄色葡萄球菌(正确答案)D 腐生葡萄球菌E 肺炎链球菌86.百日咳鲍特菌在病程采集标本检出率最高（） [单选题] *B.卡它期(正确答案)C. 痉挛期D.恢复期E.全病程87.与慢性浅表性胃炎有关的细菌是（） [单选题] *A.空肠弯曲菌B.幽门螺杆菌(正确答案)C.霍乱弧菌D.副溶血弧菌E.气单胞菌88.脲酶实验强阳性的细菌是（） [单选题] *A.幽门螺杆菌(正确答案)B.空肠弯曲菌C.霍乱弧菌D.副溶血弧菌E.气单胞菌89. 从败血症患者分离出耐甲氧西林金黄色葡萄球菌，应选用（） [单选题] *A 大剂量青霉素B 头孢唑林C 亚胺培南D 氨卞西林/舒巴坦E 万古霉素(正确答案)90.肠道选择培养基是利用肠杆菌科细菌的特性中的（） [单选题] *B.耐碱性C.耐酸性D.耐胆盐和某些染料(正确答案)E.对头孢菌素天然耐药91.判断细菌性食物中毒除定性试验外，必须做（） [单选题] *A.药敏试验B.荚膜肿胀试验C.活菌计数(正确答案)D.动力试验E.动物毒力试验92.临床微生物学检验的要求是（） [单选题] *A快速、准确地提出检验报告B检验人员需要掌握微生物学基础知识和操作技能，养成有菌观点和无菌操作的习惯C临床微生物学检验必须进行全面质量控制，并参加和接受质量控制考核D重视实验室消毒灭菌工作E以上说法都正确(正确答案)93.以下属于细菌的特殊结构的是（） [单选题] *A 质粒B细胞核C菌毛(正确答案)D细胞壁E中间体94.细菌的基本结构不包括（） [单选题] *A 细胞壁B细胞膜C鞭毛(正确答案)D细胞质E核质95.有关G+菌细胞壁的特点不正确的（） [单选题] *A.主要成分是粘肽B.含有磷壁酸C.对青霉素敏感D.含有大量脂多糖(正确答案)E.易被溶菌酶裂解96.下列哪种不是实验室暴露的常见原因（） [单选题] *A 因个人防护缺陷而吸入致病因子或含感染性生物因子的气溶胶B 被污染的注射器或实验器皿、玻璃制品等锐器刺伤、扎伤、割伤C 在生物安全柜内加样、移液等操作过程中，感染性材料洒溢(正确答案)D 在离心感染性材料及致病因子过程中发生离心管破裂、致病因子外溢导致实验人员暴露E在实验室进食、饮水或吸烟。
葡萄球菌a蛋白考点(一)
葡萄球菌a蛋白考点(一)葡萄球菌a蛋白的相关考点及详解什么是葡萄球菌a蛋白？•葡萄球菌a蛋白是一种在金黄色葡萄球菌（Staphylococcus aureus）中广泛存在的蛋白质。
•它是一种分泌性蛋白，被认为是金黄色葡萄球菌引起多种感染的重要致病因子之一。
葡萄球菌a蛋白的功能•附着：葡萄球菌a蛋白通过与宿主细胞表面的分子结合，帮助细菌附着在宿主组织上。
•毒力：葡萄球菌a蛋白可以破坏宿主细胞的细胞膜，释放细菌内部的毒素。
•免疫逃逸：葡萄球菌a蛋白可以干扰宿主的免疫反应，减弱宿主的抵抗力。
葡萄球菌a蛋白的结构•葡萄球菌a蛋白是一种多聚体蛋白，由分子量较大的单体链组装而成。
•它的结构包含α-螺旋、β-折叠和无规卷曲区域。
•在葡萄球菌a蛋白的N端，存在一个信号肽序列，用于分泌蛋白到细胞外。
葡萄球菌a蛋白与感染的关系•与皮肤感染的关系：葡萄球菌a蛋白使金黄色葡萄球菌能够侵入皮肤层，引发疖、脓疮等感染。
•与呼吸道感染的关系：葡萄球菌a蛋白可引起肺炎，并导致严重的呼吸道感染。
•与心血管感染的关系：葡萄球菌a蛋白可沉积在人工心脏瓣膜上，导致感染和心内膜炎。
检测和治疗•葡萄球菌a蛋白的检测：目前常用的方法包括PCR、酶联免疫吸附试验（ELISA）等。
•葡萄球菌a蛋白的治疗：目前主要采用抗生素治疗，如万古霉素、利奈唑胺等。
葡萄球菌a蛋白的研究进展•葡萄球菌a蛋白的基因调控机制：研究发现，葡萄球菌a蛋白的表达受到多种基因的调控。
•抗药性的研究：由于葡萄球菌a蛋白与抗生素抗性相关，研究人员正在寻找新的治疗方法。
以上是关于葡萄球菌a蛋白的相关考点及详解。
了解葡萄球菌a 蛋白的结构和功能，以及其在感染和治疗中的作用，对于深入了解细菌感染机制和开发新的治疗方法具有重要意义。
金黄色葡萄球菌
金黄色葡萄球菌研究现状前言金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus ,金葡菌)是一种革兰氏阳性球菌,广泛分布于自然界,可以引起人和动物的感染。
在人体主要寄殖于鼻前庭粘膜、腹股沟、会阴部和新生儿脐带残端等部位，偶尔也寄生于口咽部、皮肤、肠道及阴道口等，是医院感染常见的病原体之一。
在医院里，耐甲氧西林和其它抗生素的金葡菌广泛流行，对万古霉素不敏感的菌株也有所增加，给临床治疗带来了很大的困难。
金葡菌除了引起感染外，其产生的肠毒素可污染食物而致食物中毒，为人类带来非常严重的公共卫生负担。
本文拟对金葡菌感染的临床症状，流行病学研究，病原学，分型，检测及预防等方面做简要综述。
1.病原学1.1形态与染色典型的金黄色葡萄球菌为球型,直径0.8μm左右,显微镜下排列成葡萄串状。
金黄色葡萄球菌无芽胞、鞭毛,大多数无荚膜。
革兰染色阳性,衰老或死亡后可转为阴性。
1.2培养特性金黄色葡萄球菌营养要求不高,在普通培养基上生长良好,需氧或兼性厌氧,最适生长温度37 ℃,最适生长pH7. 4。
平板上菌落厚、有光泽、圆形凸起,直径1～2mm。
血平板菌落周围形成透明的溶血环。
金黄色葡萄球菌有高度的耐盐性,可在10～15 %NaCl 肉汤中生长，因此利用它的这个特性进行污染标本分离。
1.3抵抗力抗干燥:在干燥环境中存活数月；空气中存在,但不繁殖;耐热:加热70 ℃1h ,80 ℃30min 不被杀死；耐低温:在冷冻食品中不易死亡[1，2 ];耐高渗：在含有50 %～66 %蔗糖或15 %以上食盐食品中才可被抑制,能在15 %NaCl 和40 %胆汁中生长.2．流行现状2.1院内感染及耐药金黄色葡萄球菌是院内感染的常见细菌之一，许多国家都设有专门机构，应对金葡菌的院内感染问题。
随着ß-内酰胺类抗生素的广泛应用，耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA) 随之增加，且引起的感染和病死率有逐年增加的趋势。
MRSA 可通过接触途径进行传播, 即易感人群从携带者或感染者身上获得MRSA , 导致传播流行。
金黄色葡萄球菌鉴别方法探讨
金黄色葡萄球菌鉴别方法探讨目的探讨金黄色葡萄球菌的检验方法，提高金黄色葡萄球菌的鉴定准确率。
方法本研究针对金黄色葡萄球菌的特异性、敏感性、准确性进行研究，比较该方法与传统国标法的检测结果。
结果在传统国标法上增加API Staph 鉴定试条试验，检测结果与国标法的显示阳性的检测结果相一致。
结论此方法可对似阳非阳的结果进行判定，甚至对假阴性进行修正，防止漏检，明显提高了金葡菌的检出水平和准确性，对日常的检验工作具有很现实的指导意义，值得推广。
标签：金黄色葡萄球菌；API Staph；鉴定The identification method of Staphylococcus aureusSONG?SongwenGuangxi Yulin Institute for Food and Drug Control, Yulin 537000, China[Abstract] Objective To probe into the test methods of Staphylococcus aureus and improve Staphylococcus aureus identification accuracy. Methods This experiment was aimed at researching the specificity, sensitivity and accuracy of Staphylococcus aureus and compares the test results of this approach with that of the traditional national standard method. Results API Staph identification cards are increased in the traditional national standard method.The test results are the same as that of national standard method, which shows positive. Conclusion The results of unclear positive can be judged by this method, even the false negative can be revised to prevent undetection. Thus obviously improves the detection level and accuracy of Staphylococcus aureus.It has practical guiding significance on the daily inspection work, and is worthy to be popularized.[Key words] Staphylococcus aureus; API Staph; Identification金黄色葡萄球菌（SA）广泛存在自然界，是一种引起食物中毒的常见致病菌之一，目前很多国家都把金黄色葡萄球菌列为药品和食品卫生的法定检测项目[1]。
GB 4789.10-2016 食品安全国家标准 食品微生物学检验 金黄色葡萄球菌检验
中华人民共和国国家标准G B4789.10 2016食品安全国家标准食品微生物学检验金黄色葡萄球菌检验2016-12-23发布2017-06-23实施中华人民共和国国家卫生和计划生育委员会前言本标准代替G B4789.10 2010‘食品安全国家标准食品微生物学检验金黄色葡萄球菌检验“㊁S N/T0172 2010‘进出口食品中金黄色葡萄球菌检验方法“㊁S N/T2154 2008‘进出口食品中凝固酶阳性葡萄球菌检测方法兔血浆纤维蛋白原琼脂培养基技术“㊂本标准与G B4789.10 2010相比,主要变化如下:试验用增菌液统一为7.5%氯化钠肉汤㊂食品安全国家标准食品微生物学检验金黄色葡萄球菌检验1范围本标准规定了食品中金黄色葡萄球菌(S t a p h y l o c o c c u s a u r e u s)的检验方法㊂本标准第一法适用于食品中金黄色葡萄球菌的定性检验;第二法适用于金黄色葡萄球菌含量较高的食品中金黄色葡萄球菌的计数;第三法适用于金黄色葡萄球菌含量较低的食品中金黄色葡萄球菌的计数㊂2设备和材料除微生物实验室常规灭菌及培养设备外,其他设备和材料如下:2.1恒温培养箱:36ħʃ1ħ㊂2.2冰箱:2ħ~5ħ㊂2.3恒温水浴箱:36ħ~56ħ㊂2.4天平:感量0.1g㊂2.5均质器㊂2.6振荡器㊂2.7无菌吸管:1m L(具0.01m L刻度)㊁10m L(具0.1m L刻度)或微量移液器及吸头㊂2.8无菌锥形瓶:容量100m L㊁500m L㊂2.9无菌培养皿:直径90mm㊂2.10涂布棒㊂2.11p H计或p H比色管或精密p H试纸㊂3培养基和试剂3.17.5%氯化钠肉汤:见A.1㊂3.2血琼脂平板:见A.2㊂3.3 B a i r d-P a r k e r琼脂平板:见A.3㊂3.4脑心浸出液肉汤(B H I):见A.4㊂3.5兔血浆:见A.5㊂3.6稀释液:磷酸盐缓冲液:见A.6㊂3.7营养琼脂小斜面:见A.7㊂3.8革兰氏染色液:见A.8㊂3.9无菌生理盐水:见A.9㊂第一法金黄色葡萄球菌定性检验4检验程序金黄色葡萄球菌定性检验程序见图1㊂图1金黄色葡萄球菌检验程序5操作步骤5.1样品的处理称取25g样品至盛有225m L7.5%氯化钠肉汤的无菌均质杯内,8000r/m i n~10000r/m i n均质1m i n~2m i n,或放入盛有225m L7.5%氯化钠肉汤无菌均质袋中,用拍击式均质器拍打1m i n~ 2m i n㊂若样品为液态,吸取25m L样品至盛有225m L7.5%氯化钠肉汤的无菌锥形瓶(瓶内可预置适当数量的无菌玻璃珠)中,振荡混匀㊂5.2增菌将上述样品匀液于36ħʃ1ħ培养18h~24h㊂金黄色葡萄球菌在7.5%氯化钠肉汤中呈混浊生长㊂5.3分离将增菌后的培养物,分别划线接种到B a i r d-P a r k e r平板和血平板,血平板36ħʃ1ħ培养18h~ 24h㊂B a i r d-P a r k e r平板36ħʃ1ħ培养24h~48h㊂5.4初步鉴定金黄色葡萄球菌在B a i r d-P a r k e r平板上呈圆形,表面光滑㊁凸起㊁湿润㊁菌落直径为2mm~3mm,颜色呈灰黑色至黑色,有光泽,常有浅色(非白色)的边缘,周围绕以不透明圈(沉淀),其外常有一清晰带㊂当用接种针触及菌落时具有黄油样黏稠感㊂有时可见到不分解脂肪的菌株,除没有不透明圈和清晰带外,其他外观基本相同㊂从长期贮存的冷冻或脱水食品中分离的菌落,其黑色常较典型菌落浅些,且外观可能较粗糙,质地较干燥㊂在血平板上,形成菌落较大,圆形㊁光滑凸起㊁湿润㊁金黄色(有时为白色),菌落周围可见完全透明溶血圈㊂挑取上述可疑菌落进行革兰氏染色镜检及血浆凝固酶试验㊂5.5确证鉴定5.5.1染色镜检:金黄色葡萄球菌为革兰氏阳性球菌,排列呈葡萄球状,无芽胞,无荚膜,直径约为0.5μm~1μm㊂5.5.2血浆凝固酶试验:挑取B a i r d-P a r k e r平板或血平板上至少5个可疑菌落(小于5个全选),分别接种到5m LB H I和营养琼脂小斜面,36ħʃ1ħ培养18h~24h㊂取新鲜配制兔血浆0.5m L,放入小试管中,再加入B H I培养物0.2m L~0.3m L,振荡摇匀,置36ħʃ1ħ温箱或水浴箱内,每半小时观察一次,观察6h,如呈现凝固(即将试管倾斜或倒置时,呈现凝块)或凝固体积大于原体积的一半,被判定为阳性结果㊂同时以血浆凝固酶试验阳性和阴性葡萄球菌菌株的肉汤培养物作为对照㊂也可用商品化的试剂,按说明书操作,进行血浆凝固酶试验㊂结果如可疑,挑取营养琼脂小斜面的菌落到5m LB H I,36ħʃ1ħ培养18h~48h,重复试验㊂5.6葡萄球菌肠毒素的检验(选做)可疑食物中毒样品或产生葡萄球菌肠毒素的金黄色葡萄球菌菌株的鉴定,应按附录B检测葡萄球菌肠毒素㊂6结果与报告6.1结果判定:符合5.4㊁5.5,可判定为金黄色葡萄球菌㊂6.2结果报告:在25g(m L)样品中检出或未检出金黄色葡萄球菌㊂第二法金黄色葡萄球菌平板计数法7检验程序金黄色葡萄球菌平板计数法检验程序见图2㊂图2金黄色葡萄球菌平板计数法检验程序8操作步骤8.1样品的稀释8.1.1固体和半固体样品:称取25g样品置于盛有225m L磷酸盐缓冲液或生理盐水的无菌均质杯内,8000r/m i n~10000r/m i n均质1m i n~2m i n,或置于盛有225m L稀释液的无菌均质袋中,用拍击式均质器拍打1m i n~2m i n,制成1ʒ10的样品匀液㊂8.1.2液体样品:以无菌吸管吸取25m L样品置于盛有225m L磷酸盐缓冲液或生理盐水的无菌锥形瓶(瓶内预置适当数量的无菌玻璃珠)中,充分混匀,制成1ʒ10的样品匀液㊂8.1.3用1m L无菌吸管或微量移液器吸取1ʒ10样品匀液1m L,沿管壁缓慢注于盛有9m L磷酸盐缓冲液或生理盐水的无菌试管中(注意吸管或吸头尖端不要触及稀释液面),振摇试管或换用1支1m L 无菌吸管反复吹打使其混合均匀,制成1ʒ100的样品匀液㊂8.1.4按8.1.3操作程序,制备10倍系列稀释样品匀液㊂每递增稀释一次,换用1次1m L无菌吸管或吸头㊂8.2样品的接种根据对样品污染状况的估计,选择2个~3个适宜稀释度的样品匀液(液体样品可包括原液),在进行10倍递增稀释的同时,每个稀释度分别吸取1m L样品匀液以0.3m L㊁0.3m L㊁0.4m L接种量分别加入三块B a i r d-P a r k e r平板,然后用无菌涂布棒涂布整个平板,注意不要触及平板边缘㊂使用前,如B a i r d-P a r k e r平板表面有水珠,可放在25ħ~50ħ的培养箱里干燥,直到平板表面的水珠消失㊂8.3培养在通常情况下,涂布后,将平板静置10m i n,如样液不易吸收,可将平板放在培养箱36ħʃ1ħ培养1h;等样品匀液吸收后翻转平板,倒置后于36ħʃ1ħ培养24h~48h㊂8.4典型菌落计数和确认8.4.1金黄色葡萄球菌在B a i r d-P a r k e r平板上呈圆形,表面光滑㊁凸起㊁湿润㊁菌落直径为2mm~ 3mm,颜色呈灰黑色至黑色,有光泽,常有浅色(非白色)的边缘,周围绕以不透明圈(沉淀),其外常有一清晰带㊂当用接种针触及菌落时具有黄油样黏稠感㊂有时可见到不分解脂肪的菌株,除没有不透明圈和清晰带外,其他外观基本相同㊂从长期贮存的冷冻或脱水食品中分离的菌落,其黑色常较典型菌落浅些,且外观可能较粗糙,质地较干燥㊂8.4.2选择有典型的金黄色葡萄球菌菌落的平板,且同一稀释度3个平板所有菌落数合计在20C F U~ 200C F U之间的平板,计数典型菌落数㊂8.4.3从典型菌落中至少选5个可疑菌落(小于5个全选)进行鉴定试验㊂分别做染色镜检,血浆凝固酶试验(见5.5);同时划线接种到血平板36ħʃ1ħ培养18h~24h后观察菌落形态,金黄色葡萄球菌菌落较大,圆形㊁光滑凸起㊁湿润㊁金黄色(有时为白色),菌落周围可见完全透明溶血圈㊂9结果计算9.1若只有一个稀释度平板的典型菌落数在20C F U~200C F U之间,计数该稀释度平板上的典型菌落,按式(1)计算㊂9.2 若最低稀释度平板的典型菌落数小于20C F U ,计数该稀释度平板上的典型菌落,按式(1)计算㊂9.3 若某一稀释度平板的典型菌落数大于200C F U ,但下一稀释度平板上没有典型菌落,计数该稀释度平板上的典型菌落,按式(1)计算㊂9.4 若某一稀释度平板的典型菌落数大于200C F U ,而下一稀释度平板上虽有典型菌落但不在20C F U~200C F U 范围内,应计数该稀释度平板上的典型菌落,按式(1)计算㊂9.5 若2个连续稀释度的平板典型菌落数均在20C F U~200C F U 之间,按式(2)计算㊂9.6 计算公式式(1):T =A BC d(1)式中:T样品中金黄色葡萄球菌菌落数;A某一稀释度典型菌落的总数;B某一稀释度鉴定为阳性的菌落数;C某一稀释度用于鉴定试验的菌落数;d 稀释因子㊂式(2):T =A 1B 1/C 1+A 2B 2/C 21.1d(2)式中:T样品中金黄色葡萄球菌菌落数;A 1第一稀释度(低稀释倍数)典型菌落的总数;B 1第一稀释度(低稀释倍数)鉴定为阳性的菌落数;C 1第一稀释度(低稀释倍数)用于鉴定试验的菌落数;A 2第二稀释度(高稀释倍数)典型菌落的总数;B 2第二稀释度(高稀释倍数)鉴定为阳性的菌落数;C 2第二稀释度(高稀释倍数)用于鉴定试验的菌落数;1.1计算系数;d 稀释因子(第一稀释度)㊂10 报告根据9中公式计算结果,报告每g (m L )样品中金黄色葡萄球菌数,以C F U /g(m L )表示;如T 值为0,则以小于1乘以最低稀释倍数报告㊂第三法 金黄色葡萄球菌M P N 计数11 检验程序金黄色葡萄球菌M P N 计数检验程序见图3㊂图3金黄色葡萄球菌M P N法检验程序12操作步骤12.1样品的稀释按8.1进行㊂12.2接种和培养12.2.1根据对样品污染状况的估计,选择3个适宜稀释度的样品匀液(液体样品可包括原液),在进行10倍递增稀释的同时,每个稀释度分别接种1m L样品匀液至7.5%氯化钠肉汤管(如接种量超过1m L,则用双料7.5%氯化钠肉汤),每个稀释度接种3管,将上述接种物36ħʃ1ħ培养,18h~24h㊂12.2.2用接种环从培养后的7.5%氯化钠肉汤管中分别取培养物1环,移种于B a i r d-P a r k e r平板36ħʃ1ħ培养,24h~48h㊂12.3典型菌落确认按8.4.1㊁8.4.3进行㊂13结果与报告根据证实为金黄色葡萄球菌阳性的试管管数,查M P N检索表(见附录C),报告每g(m L)样品中金黄色葡萄球菌的最可能数,以M P N/g(m L)表示㊂附录A培养基和试剂A.17.5%氯化钠肉汤A.1.1成分蛋白胨10.0g牛肉膏5.0g氯化钠75g蒸馏水1000m LA.1.2制法将上述成分加热溶解,调节p H至7.4ʃ0.2,分装,每瓶225m L,121ħ高压灭菌15m i n㊂A.2血琼脂平板A.2.1成分豆粉琼脂(p H7.5ʃ0.2)100m L脱纤维羊血(或兔血)5m L~10m LA.2.2制法加热溶化琼脂,冷却至50ħ,以无菌操作加入脱纤维羊血,摇匀,倾注平板㊂A.3B a i r d-P a r k e r琼脂平板A.3.1成分胰蛋白胨10.0g牛肉膏5.0g酵母膏1.0g丙酮酸钠10.0g甘氨酸12.0g氯化锂(L i C l㊃6H2O)5.0g琼脂20.0g蒸馏水950m LA.3.2增菌剂的配法30%卵黄盐水50m L与通过0.22μm孔径滤膜进行过滤除菌的1%亚碲酸钾溶液10m L混合,保存于冰箱内㊂A.3.3制法将各成分加到蒸馏水中,加热煮沸至完全溶解,调节p H至7.0ʃ0.2㊂分装每瓶95m L,121ħ高压灭菌15m i n㊂临用时加热溶化琼脂,冷至50ħ,每95m L加入预热至50ħ的卵黄亚碲酸钾增菌剂5m L摇匀后倾注平板㊂培养基应是致密不透明的㊂使用前在冰箱储存不得超过48h㊂A.4脑心浸出液肉汤(B H I)A.4.1成分胰蛋白质胨10.0g氯化钠5.0g磷酸氢二钠(12H2O)2.5g葡萄糖2.0g牛心浸出液500m LA.4.2制法加热溶解,调节p H至7.4ʃ0.2,分装16mmˑ160mm试管,每管5m L置121ħ,15m i n灭菌㊂A.5兔血浆取柠檬酸钠3.8g,加蒸馏水100m L,溶解后过滤,装瓶,121ħ高压灭菌15m i n㊂兔血浆制备:取3.8%柠檬酸钠溶液一份,加兔全血4份,混好静置(或以3000r/m i n离心30m i n),使血液细胞下降,即可得血浆㊂A.6磷酸盐缓冲液A.6.1成分磷酸二氢钾(K H2P O4)34.0g蒸馏水500m LA.6.2制法贮存液:称取34.0g的磷酸二氢钾溶于500m L蒸馏水中,用大约175m L的1m o l/L氢氧化钠溶液调节p H至7.2,用蒸馏水稀释至1000m L后贮存于冰箱㊂稀释液:取贮存液1.25m L,用蒸馏水稀释至1000m L,分装于适宜容器中,121ħ高压灭菌15m i n㊂A.7营养琼脂小斜面A.7.1成分蛋白胨10.0g牛肉膏3.0g氯化钠5.0g琼脂15.0g~20.0g蒸馏水1000m LA.7.2制法将除琼脂以外的各成分溶解于蒸馏水内,加入15%氢氧化钠溶液约2m L调节p H至7.3ʃ0.2㊂加入琼脂,加热煮沸,使琼脂溶化,分装13mmˑ130mm试管,121ħ高压灭菌15m i n㊂A.8革兰氏染色液A.8.1结晶紫染色液A.8.1.1成分结晶紫1.0g95%乙醇20.0m L1%草酸铵水溶液80.0m LA.8.1.2制法将结晶紫完全溶解于乙醇中,然后与草酸铵溶液混合㊂A.8.2革兰氏碘液A.8.2.1成分碘1.0g碘化钾2.0g蒸馏水300m LA.8.2.2制法将碘与碘化钾先行混合,加入蒸馏水少许充分振摇,待完全溶解后,再加蒸馏水至300m L㊂A.8.3沙黄复染液A.8.3.1成分沙黄0.25g95%乙醇10.0m L蒸馏水90.0m LA.8.3.2制法将沙黄溶解于乙醇中,然后用蒸馏水稀释㊂A.8.4染色法a)涂片在火焰上固定,滴加结晶紫染液,染1m i n,水洗㊂b)滴加革兰氏碘液,作用1m i n,水洗㊂c)滴加95%乙醇脱色约15s~30s,直至染色液被洗掉,不要过分脱色,水洗㊂d)滴加复染液,复染1m i n,水洗㊁待干㊁镜检㊂A.9无菌生理盐水A.9.1成分氯化钠8.5g蒸馏水1000m LA.9.2制法称取8.5g氯化钠溶于1000m L蒸馏水中,121ħ高压灭菌15m i n㊂附录B葡萄球菌肠毒素检验B.1试剂和材料除另有规定外,所用试剂均为分析纯,试验用水应符合G B/T6682对一级水的规定㊂B.1.1 A㊁B㊁C㊁D㊁E型金黄色葡萄球菌肠毒素分型E L I S A检测试剂盒㊂B.1.2p H试纸,范围在3.5~8.0,精度0.1㊂B.1.30.25m o l/L㊁p H8.0的T r i s缓冲液:将121.1g的T r i s溶解到800m L的去离子水中,待温度冷至室温后,加42m L浓H C L,调p H至8.0㊂B.1.4p H7.4的磷酸盐缓冲液:称取N a H2P O4㊃H2O0.55g(或N a H2P O4㊃2H2O0.62g)㊁N a2H P O4㊃2H2O2.85g(或N a2H P O4㊃12H2O5.73g)㊁N a C l8.7g溶于1000m L蒸馏水中,充分混匀即可㊂B.1.5庚烷㊂B.1.610%次氯酸钠溶液㊂B.1.7肠毒素产毒培养基B.1.7.1成分蛋白胨20.0g胰消化酪蛋白200m g(氨基酸)氯化钠5.0g磷酸氢二钾1.0g磷酸二氢钾1.0g氯化钙0.1g硫酸镁0.2g菸酸0.01g蒸馏水1000m Lp H7.3ʃ0.2B.1.7.2制法将所有成分混于水中,溶解后调节p H,121ħ高压灭菌30m i n㊂B.1.8营养琼脂B.1.8.1成分蛋白胨10.0g牛肉膏3.0g氯化钠5.0g琼脂15.0g~20.0g蒸馏水1000m LB.1.8.2制法将除琼脂以外的各成分溶解于蒸馏水内,加入15%氢氧化钠溶液约2m L校正p H至7.3ʃ0.2㊂加入琼脂,加热煮沸,使琼脂溶化㊂分装烧瓶,121ħ高压灭菌15m i n㊂B.2仪器和设备B.2.1电子天平:感量0.01g㊂B.2.2均质器㊂B.2.3离心机:转速3000g~5000g㊂B.2.4离心管:50m L㊂B.2.5滤器:滤膜孔径0.2μm㊂B.2.6微量加样器:20μL~200μL㊁200μL~1000μL㊂B.2.7微量多通道加样器:50μL~300μL㊂B.2.8自动洗板机(可选择使用)㊂B.2.9酶标仪:波长450n m㊂B.3原理本方法可用A㊁B㊁C㊁D㊁E型金黄色葡萄球菌肠毒素分型酶联免疫吸附试剂盒完成㊂本方法测定的基础是酶联免疫吸附反应(E L I S A)㊂96孔酶标板的每一个微孔条的A~E孔分别包被了A㊁B㊁C㊁D㊁E 型葡萄球菌肠毒素抗体,H孔为阳性质控,已包被混合型葡萄球菌肠毒素抗体,F和G孔为阴性质控,包被了非免疫动物的抗体㊂样品中如果有葡萄球菌肠毒素,游离的葡萄球菌肠毒素则与各微孔中包被的特定抗体结合,形成抗原抗体复合物,其余未结合的成分在洗板过程中被洗掉;抗原抗体复合物再与过氧化物酶标记物(二抗)结合,未结合上的酶标记物在洗板过程中被洗掉;加入酶底物和显色剂并孵育,酶标记物上的酶催化底物分解,使无色的显色剂变为蓝色;加入反应终止液可使颜色由蓝变黄,并终止了酶反应;以450n m波长的酶标仪测量微孔溶液的吸光度值,样品中的葡萄球菌肠毒素与吸光度值成正比㊂B.4检测步骤B.4.1从分离菌株培养物中检测葡萄球菌肠毒素方法待测菌株接种营养琼脂斜面(试管18mmˑ180mm)36ħ培养24h,用5m L生理盐水洗下菌落,倾入60m L产毒培养基中,36ħ振荡培养48h,振速为100次/m i n,吸出菌液离心,8000r/m i n 20m i n,加热100ħ,10m i n,取上清液,取100μL稀释后的样液进行试验㊂B.4.2从食品中提取和检测葡萄球菌毒素方法B.4.2.1牛奶和奶粉将25g奶粉溶解到125m L㊁0.25M㊁p H8.0的T r i s缓冲液中,混匀后同液体牛奶一样按以下步骤制备㊂将牛奶于15ħ,3500g离心10m i n㊂将表面形成的一层脂肪层移走,变成脱脂牛奶㊂用蒸馏水对其进行稀释(1ʒ20)㊂取100μL稀释后的样液进行试验㊂B.4.2.2脂肪含量不超过40%的食品称取10g样品绞碎,加入p H7.4的P B S液15m L进行均质㊂振摇15m i n㊂于15ħ,3500g离心10m i n㊂必要时,移去上面脂肪层㊂取上清液进行过滤除菌㊂取100μL的滤出液进行试验㊂B.4.2.3脂肪含量超过40%的食品称取10g样品绞碎,加入p H7.4的P B S液15m L进行均质㊂振摇15m i n㊂于15ħ,3500g离心10m i n㊂吸取5m L上层悬浮液,转移到另外一个离心管中,再加入5m L的庚烷,充分混匀5m i n㊂于15ħ,3500g离心5m i n㊂将上部有机相(庚烷层)全部弃去,注意该过程中不要残留庚烷㊂将下部水相层进行过滤除菌㊂取100μL的滤出液进行试验㊂B.4.2.4其他食品可酌情参考上述食品处理方法㊂B.4.3检测B.4.3.1所有操作均应在室温(20ħ~25ħ)下进行,A㊁B㊁C㊁D㊁E型金黄色葡萄球菌肠毒素分型E L I S A检测试剂盒中所有试剂的温度均应回升至室温方可使用㊂测定中吸取不同的试剂和样品溶液时应更换吸头,用过的吸头以及废液处理前要浸泡到10%次氯酸钠溶液中过夜㊂B.4.3.2将所需数量的微孔条插入框架中(一个样品需要一个微孔条)㊂将样品液加入微孔条的A~G 孔,每孔100μL㊂H孔加100μL的阳性对照,用手轻拍微孔板充分混匀,用黏胶纸封住微孔以防溶液挥发,置室温下孵育1h㊂B.4.3.3将孔中液体倾倒至含10%次氯酸钠溶液的容器中,并在吸水纸上拍打几次以确保孔内不残留液体㊂每孔用多通道加样器注入250μL的洗液,再倾倒掉并在吸水纸上拍干㊂重复以上洗板操作4次㊂本步骤也可由自动洗板机完成㊂B.4.3.4每孔加入100μL的酶标抗体,用手轻拍微孔板充分混匀,置室温下孵育1h㊂B.4.3.5重复B.4.3.3的洗板程序㊂B.4.3.6加50μL的TM B底物和50μL的发色剂至每个微孔中,轻拍混匀,室温黑暗避光处孵育30m i n㊂B.4.3.7加入100μL的2m o l/L硫酸终止液,轻拍混匀,30m i n内用酶标仪在450n m波长条件下测量每个微孔溶液的O D值㊂B.4.4结果的计算和表述B.4.4.1质量控制测试结果阳性质控的O D值要大于0.5,阴性质控的O D值要小于0.3,如果不能同时满足以上要求,测试的结果不被认可㊂对阳性结果要排除内源性过氧化物酶的干扰㊂B.4.4.2临界值的计算每一个微孔条的F孔和G孔为阴性质控,两个阴性质控O D值的平均值加上0.15为临界值㊂示例:阴性质控1=0.08阴性质控2=0.10平均值=0.09临界值=0.09+0.15=0.24B.4.4.3结果表述O D值小于临界值的样品孔判为阴性,表述为样品中未检出某型金黄色葡萄球菌肠毒素;O D值大于或等于临界值的样品孔判为阳性,表述为样品中检出某型金黄色葡萄球菌肠毒素㊂B.5生物安全因样品中不排除有其他潜在的传染性物质存在,所以要严格按照G B19489‘实验室生物安全通用要求“对废弃物进行处理㊂附录C金黄色葡萄球菌最可能数(M P N)检索表每g(m L)检样中金黄色葡萄球菌最可能数(M P N)的检索见表C.1㊂表C.1金黄色葡萄球菌最可能数(M P N)检索表阳性管数0.100.010.001M P N 95%置信区间下限上限000<3.0 9.5 0013.00.159.6 0103.00.1511 0116.11.218 0206.21.218 0309.43.638 1003.60.1718 1017.21.318 102113.638 1107.41.320 111113.638 120113.642 121154.542 130164.542 2009.21.438 201143.642 202204.542 210153.742 211204.542 212278.794阳性管数0.100.010.001M P N95%置信区间下限上限220214.542 221288.794 222358.794 230298.794 231368.794 300234.694 301388.7110 3026417180 310439180 3117517200 31212037420 31316040420 3209318420 32115037420 32221040430 323290901000 330240421000 331460902000 33211001804100 333>1100420注1:本表采用3个稀释度[0.1g(m L)㊁0.01g(m L)和0.001g(m L)]㊁每个稀释度接种3管㊂注2:表内所列检样量如改用1g(m L)㊁0.1g(m L)和0.01g(m L)时,表内数字应相应降低10倍;如改用0.01g (m L)㊁0.001g(m L)㊁0.0001g(m L)时,则表内数字应相应增高10倍,其余类推㊂。
金黄色葡萄球菌实验活动风险评估报告
金黄色葡萄球菌实验活动风险评估报告金黄色葡萄球菌是一种广泛存在于自然界的革兰阳性球菌，可分布于空气、水、土壤、物品，以及人和动物的皮肤和外界相通的腔道中。
大部分是不致病的腐物寄生菌。
葡萄球菌属有20余种，其中金黄色葡萄菌、表皮葡萄球菌及腐生性葡萄球菌为常见致病菌。
金黄色葡萄球菌的抗原种类多，结构复杂，已发现的抗原在30种以上，其中以葡萄球菌A蛋白较为重要。
金黄色葡萄球菌的SPA抗原为完全抗原，可与人类IgG1、IgG2和IgG4的Fc段非特异性结合。
采用含SPA的葡萄球菌作为载体，结合特异性抗体后，可开展简易、快速的协同凝集试验。
荚膜多糖有利于金黄色葡萄球菌黏附到细胞或生物合成材料表面。
多糖抗原具有群特异性，存在于细胞壁。
A群多糖抗原从金黄色葡萄球菌中提出，化学组成是磷壁酸中的N-乙酰葡糖胺核糖醇残基。
B群多糖抗原分离自表皮葡萄球菌，化学组成是磷壁酸中的N-乙酰葡糖胺甘油残基。
金黄色葡萄球菌是世界性卫生问题，是人类化脓感染中最常见的病原菌。
上呼吸道感染患者的鼻腔带菌率为83%，所以人畜化脓性感染部位常称为污染源。
传播途径包括接触传播、空气传播、食品传播等。
在实验室中，应严格遵守生物安全规范，采取必要的防护措施，避免感染和传播。
金黄色葡萄球菌是一种常见的致病菌，传播途径包括消化道、皮肤黏膜损伤、医务人员带菌、吸入染菌尘埃以及食品污染等。
食品在加工过程中容易受到污染，导致食物中毒。
此外，奶牛和禽畜患化脓性乳腺炎或局部化脓也会造成肉体和其他部位的污染。
人类对金黄色葡萄球菌有一定的天然免疫力，但只有当皮肤黏膜受创伤或免疫力降低时才容易感染。
易感人群包括有创口的外科病人、严重烧伤患者、新生儿、老年人、免疫缺陷者、血液病、恶性肿瘤、糖尿病患者以及患流感、麻疹伴肺部病变者。
金黄色葡萄球菌感染的潜伏期较短，一般为半小时到两天。
其肠毒素对人的中毒剂量一般认为是20~25μg。
当葡萄球菌污染食物后，在氧气不足够数量的条件下，温度20~30℃经4~5h繁殖，即可产生大量的肠毒素。
金黄色葡萄球菌的致病性及检测技术
金黄色葡萄球菌营养要求不高，在普通培养基上生长良好，需氧或兼性厌氧，最适生长温 度37°C，最适生长pH7.4，干燥环境下可存活数周。平板上菌落厚、有光泽、圆形凸起， 直径0.5~1.0mm。
金黄色葡萄球菌具有较强的抵抗力，对磺胺类药物、青霉素、红霉素、土霉素、新霉素等 抗生素敏感，但易产生耐药性，对碱性染料敏感。
1、玻片法：将待试菌落乳化于玻片上的盐水中，经10~20S证实无自凝后，用接种环取人或 兔血浆一环，与乳化菌液混合，出现凝集者为阳性，另设生理盐水为阴性对照。 2、试管法：吸取0.5mL兔血浆与0.5mL金黄色葡萄球菌肉浸液肉汤24小时培养物充分混匀， 置37℃培养，每隔半小时观察一次，连续观察6小时，出现凝固，即将小试管倾斜或倒置时， 内容物不流动，判为阳性。
生化鉴定 如上述，注意与其他凝固酶阳性的葡萄球菌的鉴别要点：PYR（吡咯烷酮-β-萘基酰胺 试验阴性；VP试验阳性；鸟氨酸脱羧酶试验阴性。 免疫学方法 用酶联免疫吸附试验和对流免疫电泳方法可检测金葡菌的磷壁酸抗体。
分子生物学方法
包括PFGE脉冲场凝胶电泳以及酶切图谱分析等。
定量检测方法
目前关于食品中金黄色葡萄球菌的定量检测方法主要有Baird-Parker平板计数法、显色培养 基计数法、Petrifilm TM 测试片计数法、MPN计数法、酶联免疫吸附法、反相被动乳胶凝 集法、放射免疫测量法、反相血凝实验、纤维玻片凝胶双扩散法、聚合酶链式反应技术等。
此外，金黄色葡萄球菌还产生溶表皮素、明胶酶、蛋白酶、脂肪酶、肽酶等。
检测与诊断
标本采集
采自不同感染部位的各种标本，包括血液、脑脊液、穿刺液；痰液、脓液、创伤分 泌物、尿液、粪便和呕吐物等。
直接涂片镜检
直接涂片检查在正常情况下呈无菌状态的体液标本如血液、脑脊液、穿刺液等，若有 检出革兰氏阳性，显微镜下呈葡萄状排列、无芽胞、荚膜，直径0.5-1μm的球菌。即具有 重要的临床价值。
A蛋白与凝固酶凝集试验在金黄色葡萄球菌快速鉴定中的应用
国 际检 验 医学杂 志 ２０ ０６年 １ ０月第 ２ 卷 第 １ Ｉｔ ． ｄ（ｃ ｂｒ２０’ ｏ．７， ｏ． ０ ７ Ｏ期 ｎ Ｉ ｂＭｅ．）ｏｅ ０６＿ １ Ｎ １ Ｊ ａ ｔ Ｖ ２
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临 床 研 究
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Ａ 蛋 白与凝 固酶 凝 集 试 验 在 金 黄 色 葡 萄 球 菌快 速鉴 定 中的应 用
刘芳 张进 旋 梁莉华 张礼 昀 解晓珍 蒲晓 允
【 要】 目的 探 讨 金 黄 色 葡 萄 球 菌 快 速 检测 的 可 能 性 。方 法 用 凝 固 酶 （ Ａ）试 管 法 和 玻 片 摘 Ｃ （ 法 ） 葡 萄球 菌 Ａ蛋 白（ Ｐ 两 种 方 法 检 测 ６ ７株 葡 萄 球 菌 。 结 果 ３ ８株 金 黄 色 葡 萄 球 菌 中 二 者 和 Ｓ Ａ） ６ ７ 同 时 呈 阳性 的 有 ３ ３株 ， ０ 阳性 率 为 ８ ． ， 异 性 、 确 性 均 为 １ ０ ； Ａ 与 Ｓ Ａ 试 验 联 合 使 用 的 阳 Ｏ２ 特 准 ０ Ｃ Ｐ 性 率 之 和 高 至 ９ ． ， 其 他 ２ ９株 葡 萄 球 菌 Ｃ 与 Ｓ Ａ 试 验 的 阳 性 率 之 和 仅 为 １． 。结 论 ８９ 而 ８ Ａ Ｐ ２４
ａ ｄ ｓ ｎ ｉ ｖ ｔ ｒ ０ ．Ｔｈ ｏ ｉ ｖ ａ ｅｏ ｔ ｐ ｙ ｏ ｃ ｓ Ｓ ｎ ｅ ｓｔ ｉ ａ ｅ １ ｉ ｙ ０ ｅ ｐ ｓｔ ｅ ｒ ｔ ｆＳ ａ ｈ ｃ ｃ ｕ ．ａ ｒ ｕ ｎ ｌ ｚ ｄ ｂ ｏ ｈ Ｓ ｉ ｕ ｅ ｓ ａ ａｙ ｅ ｙ ｂ ｔ ＰＡ ｅ ｔａ ｄ ｔｓ ｎ ｃ ａ ｕ ａ ｅ ｔ ｓ ｓ ９ ．９ 。ｗｈ ｌ ｈ ｏ ｉｉ ｅ ｒ ｔ ｆｏ ｈ ｒ ２ ９ ｓ ｒ ｉ ｓ ｏ ｔ ｐ ｙ ｏ ｃ ｓ ａ ａ ｙ ｅ ｙ ｏ ｇ ｌｓ ｅ ｔｗａ ８ ｉ ｔ ｅ ｐ ｓｔ ａ ｅ ｏ ｔ ｅ ８ ｔ ａｎ ｆＳ ａ ｈ ｃ ｃ ｕ ｎ ｌｚ ｄ ｂ ｅ ｖ ｔ ｅ ｗａ ４ ．Ｃｏ ｃ ｕ ｉ ｎ Ｓ ａ ｈ ｃ ｃ ｕ ． ａ ｒ ｕ ａ ｅ ｆ ｓｌ ｅ ｅ ｔ ｄ ｂ ｏ ｈ Ｓ ｈ ｍ ｓ １ ． ２ ｎ ｌ ｓｏ ｔ ｐ ｙ ｏ ｃ ｓ Ｓ ｕ ｅ ｓ ｃ ｎ ｂ ａ ｔｙ ｄ ｔｃ ｅ ｙ ｂ ｔ ＰＡ ｅ ｔａ ｄ ｔ ｓ ｎ ｃ ａ ｕ ａ ｅ ｔ ｓ ｎ ｈ ｓ ｓ ａ ｓ ａ ｅ ｒ ｐ ｄ， ｐ ｃｆ ｎ ｅ ｓｔ ｅ ｏ ｇ ｌｓ ｅ ｔａ ｄ ｔ ｅ ｅ ａ ｓ ｙ ｒ ａ ｉ ｓ ｅ ｉ ｃ ａ ｄ ｓ ｎ ｉ ｖ ． ｉ ｉ
临床微生物学检验技术考试题库及答案
临床微生物学检验技术考试题库及答案一、单选题1.细菌单位是A. dmB. cmC. mmD.umE. nm答案：D2.对下列细菌大小表述错误的是A.葡萄球菌体直径约1umB.大肠埃希菌长约2〜3umC.阴沟肠杆菌宽约0.3〜0.5umD.霍乱弧菌体长2〜3umE.布鲁菌长2~3um答案：E3.下列细菌菌体形态呈链状排列的是A.卡他布兰汉菌B.屎肠球菌C.腐生葡萄球菌D.肺炎克雷伯菌E.淋病奈瑟菌答案：B4.下列细菌菌体形态呈螺旋形排列的是A.表皮葡萄球菌B.产酸克雷伯菌C.克氏耶尔森菌D.鼠咬热螺菌E.鲍氏志贺菌答案：D5.下列不属于细菌基本结构的是A.细胞壁B.芽胞C.细胞膜D.核质E.细胞质答案：B6.不属于革兰阴性细菌细胞壁成分的是A脂蛋白 B.聚糖骨架 C.四肽侧链 D.五肽交联桥 E.脂多糖答案：D7.革兰阳性细菌细胞壁具有很强抗原性的成分是A.外膜B.肽聚糖C.磷壁酸D.聚糖骨架E.五肽交联桥答案：C8.下列菌有细胞壁外膜层的是A.粪肠球菌B.溶血葡萄球菌^新型隐球菌 D.产酸克雷伯菌E.克柔假丝酵母菌答案：D9.下列不属于细菌细胞质基本成分的是A.水B.聚糖骨架C.无机盐、糖D.蛋白质、脂类E.核酸答案：B10.控制细菌某些特定遗传性状的是A.核质B.胞质颗粒C.质粒D.核糖体E.蛋白质答案：C11.细菌细胞质中决定菌体嗜碱性的物质是A.核糖核酸B.质粒C.蛋白质口.双链闭环DNA E.脂类答案：A12.细菌的主要遗传物质是A.核糖核酸B.脂类C.质粒D.核质E.蛋白质答案：D13.不属于细菌特殊结构的是A.荚膜B.核质C.鞭毛D.菌毛E.芽胞答案：B14.对细菌荚膜功能表述不正确的是A.对细菌具有保护作用B.致病作用C.抗原性D.有特殊的H抗原E.鉴别细菌的依据之一答案：D15.下列对细菌鞭毛表述不正确的是A.是由细胞质伸出的蛋白质丝状物B.长度超过菌体数倍C.弧菌都具有鞭毛D.革兰阴性杆菌都具有鞭毛E.螺菌都具有鞭毛答案：D16.下列有菌毛的细菌是A.表皮葡萄球菌B.肺炎链球菌C.金黄色葡萄球菌D.霍乱弧菌E.结核分枝杆菌答案：D17.细菌的DNA存在于A.蛋白质B.染色体和质粒中C.细胞质染色体外D.细胞壁E.聚糖骨架中答案：B18.下列不属于细菌细胞膜的结构和化学成分的是A.脂质B.载体蛋白C.多糖D.酶E.磷壁酸答案：E19.下列能将雄性菌的某些遗传物质转移给雌性菌的特殊结构是A.单鞭毛B.普通菌毛C.性菌毛口.双鞭毛 E.周鞭毛答案：C20.典型L型细菌菌落是A.油煎蛋样菌落B.光滑型菌落C.丝状菌落D.G型菌落E.F型菌落答案：A21.细菌的RNA主要存在于A.细胞壁B.聚糖骨架C.胞质D.脂多糖E.蛋白质答案：C22.细菌所含核糖核酸占细菌干重的A.5% B,10% C,15% D,20% E,25%答案：B23.细菌L型的特点不包括A.形态多形性B.染色不确定性C.渗透压敏感性D.生化反应增强E.对抗生素抵抗答案：D50.从患者标本中新分离的L型菌落常呈A.颗粒型B.荷包蛋样C.丝状菌落D.露珠样E.脐状菌落答案：A51.细菌需氧呼吸最终电子受体是A. H<sub>2</sub>OB. O<sub>2</sub>C. CO<sub>2</sub>D. ATPE. ADP答案：B26.螺形菌属于A.细菌B.螺旋体C.杆菌D.病毒E.真菌答案：A27.属于细菌遗传物质的是A.脂多糖B.质粒C.胞质颗粒D.荚膜E.鞭毛答案：B28.细菌的内毒素的化学成分是A.脂多糖B.质粒C.胞质颗粒D.荚膜E.鞭毛答案：A29.内毒素是G-菌的菌体成分的A.肽聚糖B.脂多糖C.磷壁酸D.胞壁酸E.脂蛋白答案：B30.细菌贮存营养物质的是A.脂多糖B.质粒C.胞质颗粒D.荚膜E.鞭毛答案：C31.测量细菌大小的单位是A. cmB. nmC. mmD. umE. dm答案：D32.细菌的特殊结构不包括A.芽抱B.荚膜C.中介体D.菌毛E.鞭毛答案：C33.关于细胞壁的功能，下列不正确的是A.维持细菌固有形态B.与细胞内外的物质交换有关C.决定细菌的分裂D.是细菌外层结构，比较坚韧.且具有高度弹性E.带有多种抗原决定簇，决定了菌体的抗原性答案：C34.革兰阳性菌细胞壁特有成分为A.外膜B.磷壁酸C.脂多糖D.肽聚糖E.脂蛋白答案：B35 .革兰阳性菌细胞壁的特点是A.较疏松B.无磷壁酸C.有脂多糖D.有脂蛋白E.肽聚糖含量多 答案：E36 .革兰阴性菌细胞壁特有组分是A.肽聚糖B.磷壁酸 C,氨基酸 D.外膜E.细胞膜 答案：D37 .具有物质转运与生物合成和分泌等作用的细菌结构是41 .细菌的遗传物质是A.染色体、核糖体、质粒B.染色体、核糖体、转位因子C.染色体、中介体、转位因子D.染色体、核糖体、中介体E.染色体、质粒、转位因子答案：E42 .质粒是细菌的A.核质RNAB.胞浆中的异染颗粒C.核质DNAD.染色体外的DNAE.胞浆中的RNA 答案：D 43 .关于荚膜的叙述，正确的是A.是细菌侵袭力的组成部分B.与细菌运动有关C.与细菌分裂有关A.细胞壁B.细胞质C.核质 答案：E38 .细菌合成蛋白质的场所是A.中介体B.细胞膜C.核糖体 答案：C39 .能维持细菌固有外形的是A.细胞核B.细胞壁C.细胞膜答案：B40 .细菌核质的特点是A.有典型细胞核结构B.含组蛋白E.DNA 呈线状答案：C D.异染颗粒 E.细胞膜 D.胞质颗粒 E.核质 D.细胞质 E.中介体 C.无核膜与核仁 D.含两条染色体D.与细菌染色有关E.与细菌接合有关答案：A44.细菌的运动器官是A.荚膜B.芽胞C.性菌毛D.鞭毛E.普通菌毛答案：D45.关于细菌菌毛叙述，正确的是A.与细菌运动有关B.与细菌染色有关C.与细菌分裂有关D.与细菌黏附有关E.与细菌抵抗力有关答案：D46.细菌的休眠形式是A.荚膜B.芽胞C.性菌毛D.普通菌毛E.鞭毛答案：B47.细菌菌体中含量最多的成分是A.水B.无机离子C.酶D.有机物E.肽聚糖答案：A48.决定细菌抗原性的是A.细胞核B.细胞壁C.细胞膜D.细胞质E.中介体答案：B二、多选题1.下列有关芽胞的叙述不正确的是A.芽胞容易着色B.芽胞对理化因素的抵抗力强C. 一个芽胞遇适宜环境只生成一个繁殖体D.芽胞是细菌的休眠状态E.细菌都产生芽胞答案：AE2.细菌特殊结构包括A.细胞壁B.荚膜C.细胞膜D.细胞质E.菌毛答案：BE临床微生物学检验技术考试题库及答案2、（正常菌群）条件致病性微生物一一临床上多引起内源性感染3、G+菌特有成分：磷壁酸（重要表面抗原，可用于细菌血清学分型）（外毒素）4、G-菌特有成分：外膜层（由脂多糖（内毒素）、脂质双层（磷脂）、脂蛋白）5、G+菌和G-菌细胞壁的共同成分是肽聚糖。
临床微生物学检验技术考试题库及答案
临床微生物学检验技术考试题库及答案一、单选题1.细菌单位是A. dmB. cmC. mmD.umE. nm答案：D2.对下列细菌大小表述错误的是A.葡萄球菌体直径约1umB.大肠埃希菌长约2~3umC.阴沟肠杆菌宽约0.3~0.5umD.霍乱弧菌体长2~3umE.布鲁菌长2~3um答案：E3.下列细菌菌体形态呈链状排列的是A.卡他布兰汉菌B.屎肠球菌C.腐生葡萄球菌D.肺炎克雷伯菌E.淋病奈瑟菌答案：B4.下列细菌菌体形态呈螺旋形排列的是A.表皮葡萄球菌B.产酸克雷伯菌C.克氏耶尔森菌D.鼠咬热螺菌E.鲍氏志贺菌答案：D5.下列不属于细菌基本结构的是A.细胞壁B.芽胞C.细胞膜D.核质E.细胞质答案：B6.不属于革兰阴性细菌细胞壁成分的是A脂蛋白 B.聚糖骨架 C.四肽侧链 D.五肽交联桥 E.脂多糖答案：D7.革兰阳性细菌细胞壁具有很强抗原性的成分是A.外膜B.肽聚糖C.磷壁酸D.聚糖骨架E.五肽交联桥答案：C8.下列菌有细胞壁外膜层的是A.粪肠球菌B.溶血葡萄球菌C.新型隐球菌D.产酸克雷伯菌E.克柔假丝酵母菌答案：D9.下列不属于细菌细胞质基本成分的是A.水B.聚糖骨架C.无机盐、糖D.蛋白质、脂类E.核酸答案：B10. 控制细菌某些特定遗传性状的是A.核质B.胞质颗粒C.质粒D.核糖体E.蛋白质答案：C11.细菌细胞质中决定菌体嗜碱性的物质是A.核糖核酸B. 质粒C.蛋白质D.双链闭环DNAE.脂类答案：A12.细菌的主要遗传物质是A.核糖核酸B.脂类C.质粒D.核质E.蛋白质答案：D13.不属于细菌特殊结构的是A.荚膜B.核质C.鞭毛D.菌毛E.芽胞答案：B14.对细菌荚膜功能表述不正确的是A.对细菌具有保护作用B.致病作用C.抗原性D.有特殊的H抗原E.鉴别细菌的依据之一答案：D15. 下列对细菌鞭毛表述不正确的是A.是由细胞质伸出的蛋白质丝状物B.长度超过菌体数倍C.弧菌都具有鞭毛D.革兰阴性杆菌都具有鞭毛E.螺菌都具有鞭毛答案：D16.下列有菌毛的细菌是A.表皮葡萄球菌B.肺炎链球菌C.金黄色葡萄球菌D.霍乱弧菌E. 结核分枝杆菌答案：D17.细菌的DNA存在于A.蛋白质B.染色体和质粒中C.细胞质染色体外D.细胞壁E.聚糖骨架中答案：B18.下列不属于细菌细胞膜的结构和化学成分的是A.脂质B.载体蛋白C.多糖D.酶E.磷壁酸答案：E19.下列能将雄性菌的某些遗传物质转移给雌性菌的特殊结构是A.单鞭毛B.普通菌毛C.性菌毛D.双鞭毛E.周鞭毛答案：C20. 典型L型细菌菌落是A.油煎蛋样菌落B.光滑型菌落C.丝状菌落D.G型菌落E.F型菌落答案：A21.细菌的RNA主要存在于A.细胞壁B.聚糖骨架C.胞质D.脂多糖E.蛋白质答案：C22.细菌所含核糖核酸占细菌干重的A.5%B.10%C.15%D.20%E.25%答案：B23.细菌L型的特点不包括A.形态多形性B.染色不确定性C.渗透压敏感性D.生化反应增强E.对抗生素抵抗答案：D50.从患者标本中新分离的L型菌落常呈A.颗粒型B.荷包蛋样C.丝状菌落D.露珠样E.脐状菌落答案：A24.细菌需氧呼吸最终电子受体是A. H<sub>2</sub>OB. O<sub>2</sub>C. CO<sub>2</sub>D. A TPE. ADP答案：B26. 螺形菌属于A.细菌B. 螺旋体C.杆菌D.病毒E.真菌答案：A27. 属于细菌遗传物质的是A.脂多糖B.质粒C.胞质颗粒D.荚膜E.鞭毛答案：B28. 细菌的内毒素的化学成分是A.脂多糖B.质粒C.胞质颗粒D.荚膜E.鞭毛答案：A29. 内毒素是G-菌的菌体成分的A.肽聚糖B.脂多糖C.磷壁酸D.胞壁酸E.脂蛋白答案：B30.细菌贮存营养物质的是A.脂多糖B.质粒C.胞质颗粒D.荚膜E.鞭毛答案：C31.测量细菌大小的单位是A. cmB. nmC. mmD. umE. dm答案：D32.细菌的特殊结构不包括A.芽孢B.荚膜C.中介体D.菌毛E.鞭毛答案：C33.关于细胞壁的功能,下列不正确的是A.维持细菌固有形态B.与细胞内外的物质交换有关C.决定细菌的分裂D.是细菌外层结构,比较坚韧.且具有高度弹性E.带有多种抗原决定簇,决定了菌体的抗原性答案：C34.革兰阳性菌细胞壁特有成分为A. 外膜B.磷壁酸C.脂多糖D.肽聚糖E.脂蛋白答案：B35.革兰阳性菌细胞壁的特点是A.较疏松B.无磷壁酸C.有脂多糖D.有脂蛋白E.肽聚糖含量多答案：E36.革兰阴性菌细胞壁特有组分是A.肽聚糖B.磷壁酸C. 氨基酸D.外膜E.细胞膜答案：D37.具有物质转运与生物合成和分泌等作用的细菌结构是A.细胞壁B.细胞质C.核质D.异染颗粒E.细胞膜答案：E38. 细菌合成蛋白质的场所是A.中介体B.细胞膜C.核糖体D.胞质颗粒E.核质答案：C39.能维持细菌固有外形的是A.细胞核B.细胞壁C.细胞膜D.细胞质E.中介体答案：B40.细菌核质的特点是A.有典型细胞核结构B.含组蛋白C.无核膜与核仁D.含两条染色体E.DNA呈线状答案：C41.细菌的遗传物质是A.染色体、核糖体、质粒B.染色体、核糖体、转位因子C.染色体、中介体、转位因子D.染色体、核糖体、中介体E.染色体、质粒、转位因子答案：E42.质粒是细菌的A.核质RNAB.胞浆中的异染颗粒C.核质DNAD.染色体外的DNAE.胞浆中的RNA答案：D43.关于荚膜的叙述,正确的是A.是细菌侵袭力的组成部分B.与细菌运动有关C.与细菌分裂有关D.与细菌染色有关E.与细菌接合有关答案：A44.细菌的运动器官是A.荚膜B.芽胞C.性菌毛D.鞭毛E.普通菌毛答案：D45.关于细菌菌毛叙述,正确的是A.与细菌运动有关B.与细菌染色有关C.与细菌分裂有关D.与细菌黏附有关E.与细菌抵抗力有关答案：D46.细菌的休眠形式是A.荚膜B.芽胞C.性菌毛D.普通菌毛E.鞭毛答案：B47.细菌菌体中含量最多的成分是A.水B.无机离子C.酶D.有机物E.肽聚糖答案：A48.决定细菌抗原性的是A.细胞核B.细胞壁C.细胞膜D.细胞质E.中介体答案：B二、多选题1.下列有关芽胞的叙述不正确的是A.芽胞容易着色B.芽胞对理化因素的抵抗力强C.一个芽胞遇适宜环境只生成一个繁殖体D.芽胞是细菌的休眠状态E.细菌都产生芽胞答案：AE2.细菌特殊结构包括A.细胞壁B.荚膜C.细胞膜D.细胞质E.菌毛答案：BE临床微生物学检验技术考试题库及答案2、（正常菌群）条件致病性微生物——临床上多引起内源性感染。
金黄色葡萄球菌的测定方法验证报告
方法验证报告公共场所卫生检验方法第4部分：公共用品用具微生物金黄色葡萄球菌GB/T 18204.4-2013(5)1.目的验证平皿鉴定法测定公共用品用具微生物中的金黄色葡萄球菌，来判断在本实验室此方法的适用性。
2.培养基和试剂2.1培养基和试剂2.1.1胰酪胨大豆肉汤成分：胰酪胨(或胰蛋白胨) 17g植物蛋白胨(或大豆蛋白胨) 3g氯化钠100g磷酸氢二钾 2.5 g葡萄糖 2.5 g蒸馏水1000mL制法：将上述成分混合后，加热溶解，调pH为7.2~7.3，分装，121 C、20 min 高压灭菌。
2.1.2氯化钠肉汤(75 g/L)成分：蛋白胨10g牛肉膏10g氯化钠75 g蒸馏水 1 000 mL制法：将上述成分加热溶解，调pH为7.4，分装，121 ℃、20 min高压灭菌。
2.1.3 Baird Parker平板成分：胰蛋白胨10g牛肉膏5g酵母浸膏1g丙酮酸钠10g甘氨酸12g氯化锂(LiCl. 6H2O) 5g琼脂20g蒸馏水950 mL增菌剂的配制：卵黄盐水(30%,体积分数)50mL与除菌过滤的亚碲酸钾溶液(质量浓度=1%)10mL混合，保存于冰箱内。
制法：将各成分加到蒸馏水中，加热煮沸完全溶解，冷至25℃校正pH至7.0±0.2。
分每瓶95 mL，121℃高压灭菌15min，临用时加热熔化琼脂，每95mL 加入预热至50C的卵黄亚碲酸钾增菌5mL，摇匀后倾注平板。
培养基应是致密不透明的。
使用前在冰箱储存，不得超过48 h。
2.1.4血琼脂培养基成分：营养琼脂100 mL脱纤维羊血(或兔血) 10 mL制法：将营养琼脂加热溶化,待冷至50 C左右以无菌方法加人脱纤维羊血，摇匀，制成平板，置冰箱内备用。
2.1.5革兰氏染色液2.1.5.1结晶紫染色液成分：结晶紫1g乙醇(95% ,体积分数) 20 mL草酸铵水溶液(质量浓度=1%) 80 mL制法：将结晶紫溶于乙醇中,然后与草酸铵溶液混合。
金黄色葡萄球菌检验与计数,GB4789.10-2016及纸片法-JW
金黄色葡萄球菌的肠毒素
金黄色葡萄球菌肠毒素：是金黄色葡萄球菌一 种重要的致病物质。本菌引起的食物中毒是因 为食品污染了金黄葡萄球菌后，由细菌产生大 量肠毒素而导致的。
近年报导表明，50%以上的金黄色葡萄球菌菌株 在实验室条件下可产生肠毒素，并且1个菌株能 产生两种或两种以上的肠毒素。
肠毒素是一种可溶性蛋白质，由单个无分枝的 肽链组成。分子量约为3000左右。易溶于水， 难溶于有机溶剂。
分离培养基
Baird-Parker琼脂：培养基中含有卵黄亚 碲酸钾，能抑制大多数细菌的繁殖，并能 促进金黄色葡萄球菌的生长使其产生黑色 和晕圈。培养基中的丙酮酸钠和甘氨酸也 能促进金黄色葡萄球菌的生长。
金黄色葡萄球菌的菌落形态：圆形、光滑 凸起、湿润，直径约2~3mm，颜色呈灰色到 黑色，边缘为淡色，周围为一混浊带，在 其外层有一透明圈。用接种针接触菌落似 有奶油树胶的硬度，偶而可见无混浊带和 透明圈的非典型菌落。
血浆凝固酶试验
挑取Baird－Parker平板或血平板上可疑菌落 1个或以上，分别接种到5mL BHI和营养琼脂 小斜面，36℃±1℃培养18 h～24 h。
取新鲜配置兔血浆0.5mL，放入小试管中，再 加入可疑菌落的BHI培养物0.2mL～0.3mL，振 荡摇匀，置36℃±1℃温箱或水浴箱内，每半 小时观察一次，观察6h，如呈现凝固（即将 试管倾斜或倒置时，呈现凝块）或凝固体积 大于原体积的一半，判定为阳性结果。
金黄色葡萄球菌的菌落形态：呈金黄色， 有时也呈白色，大而突起，圆形、不透明、 表面光滑，周围有透明的β溶血环。
血平皿上的形态
血平板：金黄色葡萄球菌可以产生溶血素， 因此在血平板上产生明显的溶血环。
典型菌落：呈金黄色，有时也为白色，大而 突起，圆形，不透明，表面光滑，菌落周围 有完全透明溶血环。
金黄色葡萄球菌检测报告
包子中金黄色葡萄球菌的检测
一、实验目的
检测包子中是否有金黄色葡萄球菌的存在，以便更好的处理和解决包子在生产过程中在那些方面被金黄色葡萄球菌感染。
二、实验器材
无菌操作台、酒精灯、PH试纸，酸碱缓冲溶液、试管、锥形瓶、金黄色葡萄球菌试片、1ml移液管、酒精棉球、包子样品为2012年4月21日的梅干菜、生理盐水、高压蒸汽灭菌锅。
三、实验原理
根据金黄色葡萄球菌试片中含有选择性培养基和专一性的
酶显色剂，运用微生物试片的专有技术，做快速检验样品的方法，一般培养15到24小时，之后进行观察，紫红色的菌落为金黄色葡萄球菌；呈蓝色的菌落为其他大肠杆菌菌群。
四、实验步骤
取样品25g放入含有225ml的生理盐水的锥形瓶中，制成1：10的样品均液，挑PH直为6.2到8.0。
再用1ml灭菌移液管吸取1：10样品均液1ml，注入含有9ml的生理盐水中进行稀释，摇匀为1:100的样品均液。
然后在无菌操作间内进行接种分别取1:10和1:100的样品均液1ml滴加到金黄色葡萄球菌的试片上，然后将上层缓慢盖上，静止10S左右培养基凝固。
同时做一个空白对照。
将试片叠加在一起放入自封袋内并封口，透明面朝上置于恒
温培养箱内，培养温度为36℃—1℃，培养15-24小时。
四、培养结果
19295-2011,符合其标准。
金黄色葡萄球菌国家标准检验方法
金黄色葡萄球菌国家标准检验方法一、国家标准检验办法参见GB 4789.10-2010《食品平安国家标准食品微生物学检验金黄色葡萄球菌检验》其次法和第三法。
1、Baird-Parker平板计数（其次法）本办法适用于金黄色葡萄球菌含量较高的食品中金黄色葡萄球菌的计数。
1.1、检验流程 1.2、试验步骤 (1）样品的稀释①固体和半固体样品：称取25g样品置盛有225mL 缓冲液或生理盐水的无菌均质杯内，8000-10000r/min均质1-2min，或置盛有225mL稀释液的无菌均质袋中，用拍击式均质器拍打1～2min，制成1：10的样品匀液。
②液体样品：以无菌吸管吸取25mL样品，置盛有225mL磷酸盐缓冲液或生理盐水的无菌锥形瓶（瓶内预置适当数量的无菌玻璃珠）中，充分混匀，制成1：10的样品匀液。
③用1mL无菌吸管或微量移液器吸取1：10样品匀液1mL，沿管壁缓慢注于盛有9mL 稀释液的无菌试管中（注重吸管或吸头尖端不要触及稀释液面），振摇试管或换用1支1mL无菌吸管反复吹打使其混合匀称，制成1：100的样品匀液。
④按③操作程序，制备10倍系列稀释样品匀液。
每递增稀释一次，换用1次1mL无菌吸管或吸头。
(2）样品的接种按照对样品污染情况的估量，挑选2-3个相宜稀释度的样品匀液（液体样品可包括原液），在举行10倍递增稀释时，每个稀释度分离吸取1mL样品匀液以0.3mL, 0.3mL, 0.4mL接种量分离加入三块Baird-Parker平板，然后用无菌L棒涂布囫囵平板，注重不要触及平板边缘。
用法前，如Baird-Parker平板表面有水珠，可放在25-50℃的培养箱里干燥，直到平板表面的水珠消逝。
(3）培养在通常状况下，涂布后，将平板静置l0min，如样液不易汲取，可将平板放在培养箱（(36±1)℃培养1h；等样品匀液汲取后翻转平皿，倒置于培养箱，(36±1)℃培养，45一48h。
金黄色葡萄球菌的检验(共27张PPT)
金黄色葡萄球菌的定性检验
检样
增菌〔7.5％氯化钠肉汤或 10％氯化钠胰酪胨大豆肉汤〕
BP平板，血平板
涂片染色
观察溶血
报告
BHI肉汤和营养琼脂 血浆凝固酶实验
金黄色葡萄球菌的检验
1、样品制备
按无菌操作取检样25 g〔mL〕， 参加225 mL灭菌生理盐水，固体样 品研磨或置均质器中制成1:10样品
＊＊＊当金黄色葡萄球菌污染了含淀粉及水分较多的食品，如牛奶和 乳制品、肉、蛋等，在温度条件适宜时，经过8～10小时即可产生相当数 量的肠毒素，肠毒素可耐受100℃煮沸30分钟而不被破坏。
人摄食该菌污染的食物2～3h后 可引起中毒病症，它引起的食
物中毒病症是呕吐和腹泻。
金黄色葡萄球菌的流行病学特点
2、培养特性：
金黄色葡萄球菌营养
要求不高，在普通培养基 上生长良好，加少量葡萄
糖或血液生长更旺盛。需 氧或兼性厌氧，最适生长 温度37℃，最适生长pH 7.4
金黄色葡萄球菌有高度的耐盐性，可在7.5～ 15%NaCl肉汤中生长。
3、生化特性：
可分解葡萄糖、麦芽糖、乳糖、 蔗糖，产酸不产气。甲基红反响阳 性，VP反响弱阳性。
季节分布，多见于春夏季；中毒食品种类 多，如奶、肉、蛋、鱼及其制品。此外，剩饭 、油煎蛋、糯米糕及凉粉等引起的中毒事件也 有报道。
金黄色葡萄球菌的检验
GB4789.10-2021 √第一法：金黄色葡萄球菌的定性检测 √第二法：金黄色葡萄球菌Baird-Parker平板计数 √第三法：金黄色葡萄球菌MPN计数
细胞；
c.血浆凝固酶：当金黄色葡萄球菌侵入人体时， 该酶使血液或血浆中的纤维蛋白沉积于菌体外 表或凝固，阻碍吞噬细胞的吞噬作用。 葡萄
大学病原生物学考试练习题及答案221
大学病原生物学考试练习题及答案21.[单选题]在无芽胞菌中抵抗力最强的是( )A)A群链球菌B)脑膜炎奈瑟菌C)金黄色葡萄球菌D)淋病奈瑟菌答案:C解析:2.[单选题]关于金葡菌引起化脓性感染，下列哪一项不正确？( )A)感染局限B)感染易扩散C)脓汁粘稠D)感染途径多答案:B解析:3.[单选题]下列不属于消化道感染的细菌是A)变形杆菌B)弯曲菌C)霍乱弧菌D)布鲁杆菌答案:D解析:4.[单选题]下列哪种情况选用破伤风抗毒素预防A)部队指战员B)儿童C)青年人D)手外伤的人群答案:D解析:5.[单选题]风湿热与下列哪种细菌有关( )A)链球菌B)金黄色葡萄球菌C)脑膜炎球菌D)淋球菌答案:A解析:6.[单选题]能通过胎盘的Ig是( )A)IgAB)IgMC)IgED)igG答案:D解析:7.[单选题]孕妇产前检查时发现有淋病性子宫颈炎，胎儿娩出后应作的处理是( )A)给婴儿注射青霉素B)迅速将婴儿放入无菌隔离室C)1%硝酸银滴眼D)0.01%洗必肽清洗婴儿皮肤答案:C解析:8.[单选题]关于IgM哪点是错的（）A)分子量大B)能激活补体C)以五聚体形式存在D)个体发育最早答案:D解析:9.[单选题]目前所知毒性最强的毒素是( )A)肉毒毒素B)破伤风痉挛毒素C)霍乱肠毒素D)炭疽毒素答案:A解析:10.[单选题]牛奶的消毒宜采用A)紫外线B)巴氏消毒灭菌法C)高压蒸汽灭菌法D)流通蒸汽消毒法答案:B解析:11.[单选题]多数病原菌生长的适宜温度是B)39℃C)33℃D)37℃答案:D解析:12.[单选题]与细菌致病性无关的是A)血浆凝固酶B)热原质C)毒素D)抗生素答案:D解析:13.[单选题]下列哪项操作时错误的A)进入微生物实验室要穿白大衣B)尽量少携带物品C)实验完毕，要用香皂洗手方可离开。
D)觉得口渴，实验区内可以喝水答案:D解析:14.[单选题]我国卫生细菌学标准规定；每升饮用水中大肠菌群数不得超过A)3个B)5个C)10个D)100个答案:A解析:15.[单选题]与颅外静脉相通A)椎内静脉丛B)椎外静脉丛C)两者均是D)两者均否答案:C解析:16.[单选题]预防肠热症的措施以下哪项不适用( )A)注意饮食、饮水清洁卫生B)加强粪便管理C)保护好水源、特别是生活用水D)常服用广谱抗生素答案:D解析:17.[单选题]HLA属于哪类抗原( )A)同种异型抗原B)异种抗原C)自身抗原D)肿瘤相关抗原答案:A解析:18.[单选题]下列哪一种细菌是G+菌：( )A)大肠杆菌B)金黄色葡萄球菌C)淋球菌D)肺炎克雷伯氏菌答案:B解析:19.[单选题]化脓性球菌侵入血液后在血液中大量繁殖，同时引起其他脏器化脓性病灶，称( )A)毒血症B)脓毒血症C)菌血症D)败血症答案:B解析:20.[单选题]引起急性肾小球肾炎最常见的病原体是A)结核分枝杆菌B)金黄色葡萄球菌C)溶血性链球菌D)寄生虫答案:C解析:21.[单选题]正常人血清中含量最高的Ig是( )A)IgMB)IgGC)igAD)igE22.[单选题]与消化性溃疡、慢性胃炎、胃癌有关的细菌是A)铜绿假单胞菌B)金黄色葡萄球菌C)幽门螺杆菌D)弯曲菌答案:C解析:23.[单选题]病人，男，38岁。
金黄色葡萄球菌检验技术介绍及分析
金黄色葡萄球菌检验技术介绍及分析作者：***来源：《食品安全导刊》2020年第06期金黄色葡萄球菌是生活中最常见的病原菌之一，也是革兰氏阳性菌的代表，可引起许多严重的感染。
该菌对营养的要求不高，在普通培养基上生长良好，需氧或兼性厌氧。
容易受金黄色葡萄球菌污染的食品主要为乳制品、蛋及蛋制品、各类熟肉制品，其次是含有乳类的冷冻食品等，因此对于该菌的检验也被确定为食品致病性菌种检验中的重要项目。
按照现行的国标方法，金黄色葡萄球菌检测方法分为第一法定性检验、第二法平板计数法（适用于金黄色葡萄球菌含量较高的食品），以及第三法MPN计数法（适用于金黄色葡萄球菌含量较低的食品）。
第一法定性检验过程包括样品处理、样品增菌、平板分离划线、初步鉴定、确证鉴定这5个步骤，整个流程全部完成至少需要5天时间。
第二法平板计数法包括5个步骤——样品稀释、样品接种涂布、典型菌和可疑菌计数、鉴定试验、结果计算，整个流程全部完成至少需要4天时间。
第三法MPN计数法同样包括5个步骤，即样品稀释、样品增菌、平板分离划线、鉴定试验、查MPN表确认结果，整个流程全部完成至少需要5天时间。
以下将对金黄色葡萄球菌的检测流程进行简单介绍，并对难点、注意事项进行梳理和讲解。
1 第一法：金黄色葡萄球菌定性1.1 样品处理固态和半固态样品：称取25g样品至盛有225mL7.5%氯化钠肉汤中，充分混匀。
液体样品：吸取25mL样品至盛有225mL7.5%氯化钠肉汤的无菌锥形瓶（瓶内可预置适当数量的无菌玻璃珠）中，振荡混匀。
1.2 样品增菌将上述样品匀液置于36±1℃的恒温培养箱中培养18～24h。
1.3 平板分离划线该步骤是整个金黄色葡萄球菌检测环节中最重要的步骤之一，因为平板划线分离的效果决定了可疑菌落的判定和选择。
平板划线选择三分法或四分法则分离效果较好，更容易出现单菌落平板。
1.4 初步鉴定分离的培养基选用Baird-Parker平板（BP平板）和血平板。
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Ｊｉ ｎ ｇ — ｈ ｕ ａ 。 （ １ ． Ｃｌ ｉ ｎ ｉ ｃ ａ ｌ Ｌ ａ ｂ ｏ ｒ ａ ｔ ｏ ｒ ｙ， Ｆｅ ｎ ｇｇ ａ ｎ ｇ Ｈｏ ｓ ｐ ｉ ｔ ａ ｌ ｏ ｆ Ｄｏ ｎ ｇｇ ｕ ａ ｎ ｇ， Ｄｏ ｎ ｇ ｇ ｕ ａ ｎ， Ｇｕ ａ ｎ ｇ ｄ ｏ ｎ ｇ ５ ２ ３ ６ ９ ０ ， Ｃ ｈ ｉ ｎ ａ； ２ ．
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林 建华 ， 陈 忠城。 ， 区敬 华。 （ １ ． 东莞 市凤 岗医院检 验 科 ， 广 东 东莞 ５ ２ ３ ６ ９ ０ ； ２ ． 中山大 学附属 第三 医院检验 科 ， 广 东广 州 ５ １ ８ ０ ０ ０ ； ３ ． 中山大 学基 础 学 院药理教 研 室 ， 广 东广 州 ５ １ ８ ０ ０ ０ ）
Ｓ ｔ ａ ｐ ｈ ｙ ｌ ｏ ｃ ｏ ｃ ｃ ｕ ｓ ａ ｕ ｒ ｅ ｕ ｓ ｃ ｌ ｉ ｎ ｉ ｃ ａ ｌ ｍｏ ｎ ｉ ｔ ｏ ｒ ｉ ｎ ｇ ａ ｎ ｄ Ｓ ＰＡ ｒ ａ ｐ ｉ ｄ ｔ ｅ ｓ ｔ ｒ ｅ ｓ ｅ ａ ｒ ｃ ｈ ＬＪ Ｎ Ｊｉ ａ ｎ — ｈ ｕ ａ ． ＣＨ ＥＮ Ｚ ｈ ｏ ｎ ｇ — ｃ ｈ ｅ ｎ ｇ ． Ｏቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ
・
１ ４ ０ ４ ・
检验医学与临床 ２ ０ １ ３年 ６月 第 １ Ｏ卷 第 １ １期
Ｌ ａ ｂ Ｍｅ ｄ Ｃ ｌ ｉ ｎ ， Ｊ ｕ ｎ ｅ ２ ０ １ ３ ， Ｖ ｏ １ ． １ ０ ， Ｎｏ ． １ １
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论 著 ・
金 黄 色葡 萄 球 菌 临床 监 测 与 葡 萄 球 菌 Ａ 蛋 白快 速 检 验 研 究
Ｃｈ ｉ ｎ ａ； ３ ．Ｄｅ ｐ ａ ｒ ｔ ｍｅ ｎ ｔ ｏ ｆ Ｐｈ ａ ｒ ｍａ ｃ ｏ ｌ ｏ ｇ ｙ， Ｂａ ｓ ｉ ｃ Ｍｅ ｄｉ ｃ ａ ｌ Ｃｏ ｌ ｌ ｅ ｇｅ ， Ｓ ｕ ｎ Ｙ ａ ｔ — ｓ ｅ ｎ Ｕｎ ｉ ｖ ｅ ｒ ｓ ｉ ｔ ｙ， Ｇｕ ａ ｎ ｇ ｚ ｈ ｏ ｕ， Ｇｕ ａ ｎ ｇ ｄ ｏ ｎ ｇ ［ Ａｂ ｓ ｔ ｒ ａ ｃ ｔ ］ Ｏｂ ｊ ｅ ｃ ｔ ｉ ｖ ｅ Ｔｏ ａ ｎ ａ ｌ ｙ ｚ ｅ ｔ ｈ ｅ ｄ ｉ ｓ ｔ ｒ ｉ ｂ ｕ ｔ ｉ ｏ ｎ ｃ ｈ ａ ｒ ａ ｃ ｔ ｅ ｒ ａ ｎ ｄ ｄ ｒ ｕ ｇ ｒ ｅ ｓ ｉ ｓ ｔ ａ ｎ ｃ ｅ ｏ ｆ Ｓ ｔ ａ ｐ ｈ ｙ ｌ ｏ ｃ ｏ ｃ ｃ ｕ ｓ ａ ｕ ｒ ｅ ｕ ｓ （ ＳＡ）
出 甲氧 西林 敏 感 Ｓ Ａ（ ＭＳ Ｓ Ａ） ６ １株 （ 占４ ６ ． ２ １ ） ， 对 青 霉 素 Ｇ、 左氧氟沙星 、 庆大霉 素、 克林 霉素 、 红 霉 素 的 耐 药 率 分
别为 ９ ３ ． １ ２ 、 １ ３ ． ２ ３ 、 ２ ３ ． １ ２ 、 ５ ６ ． ８ ７ 、 ５ ４ ． ２ ３ ； 甲氧 西林 耐 药 Ｓ Ａ（ ＭＲＳ Ａ） ７ １株 （ 占５ ３ ． ７ ９ ） ， 对 青霉 素 （ 、 复 方 磺 胺 甲嗯 唑 、 左氧氟沙星 、 庆 大霉素 、 克林 霉素 的耐 药率 分别 为 ９ ２ ． １ ２ ％、 ２ ｌ ＿ ２ １ 、 ６ １ ． ２ １ 、 ２ ９ ． ２ １ 、 ７ ６ ． ２ ３ 磁 性 微 球 分 散 性 良好 ， 对Ｓ Ａ 样 品 的检 测 灵敏 度 可 达 １ ０ ０ Ｃ Ｆ Ｕ， 在 一 定 条 件 下 可 维 持 高 活 性 ３周 。 结 论
【 摘 要】 目的 分 析 － 临床 金 黄 色 葡 萄 球 菌 （ Ｓ Ａ） 分布 特征 及 耐 药性 ， 并 建立 可用 于检 测葡 萄糖球 菌 Ａ 蛋 白 （ Ｓ Ｐ Ａ） 的 新 方 法 。方 法 分 析 １ ３ ２株 Ｓ Ａ 菌株 的 分 布特 征 与 耐 药 性 。构 建 金 属 螯 合 免 疫磁 性 微 球 ， 对 其 表 面形 态 、 大 小、 表 面 基 团吸 收峰 进 行 测 定 ， 用 该磁 性微 球 分 离 ｓ Ｐ Ａ， 并用于 ｓ Ａ 检 测 。结 果 １ ３ ２株 Ｓ Ａ 分 离 自痰 液 ７ ４株 （ 占 ５ ６ ． ｏ ６ ） 、 分泌物 ４ ３株 （ 占３ ２ ． ５ ８ ） 、 血液 １ ０株 （ 占７ ． ５ ７ ） 、 胆 汁 ３株 （ 占２ ． ２ ３ ） 、 器械 导 管 ２株 （ 占１ ． ５ ２ ） 。检
耐 药性 较 强 ； 免疫磁性微球技 术可用于 Ｓ Ａ 的 快 速检 测 ， 值得推 广应用。
Ｓ Ａ 菌 株
【 关键词】 金 黄 色葡 萄球 菌 ； 葡 萄糖 球 菌 Ａ 蛋 白 ； 分 离检 验技 术
Ｄ Ｏ Ｉ ： １ ０ ． ３ ９ ６ ９ ／ ｊ ． ｉ ｓ ｓ ｎ ． １ ６ ７ ２ － ９ ４ ５ ５ ． ２ ０ １ ３ ． １ １ ． ０ ３ ３ 文 献标 志 码 ： Ａ 文章编 号 ： １ ６ ７ ２ － ９ ４ ５ ５ （ ２ ０ １ ３ ） １ １ ｌ ４ ０ ４ — ０ １