Sherlock全自动微生物鉴定系统
梅里埃全自动微生物鉴定仪参数资料
梅里埃全自动微生物鉴定仪参数设备名称:全自动微生物鉴定及药敏分析系统一、具体用途:对食品,环境中的微生物进行快速,全自动的鉴定及药物敏感性测试。
二、技术参数与性能要求:1.系统可同时处理≥30个标本,系统具有扩容功能,至少可以两台联机;2. 分析组件可对环境中和食品中的细菌进行全自动鉴定,种类包括革兰阴性菌、革兰阳性球菌、革兰氏阳性杆菌、酵母样真菌、假丝酵母类真菌、苛养菌、厌氧菌及棒状杆菌等的鉴定;3. ★分析组件可对芽孢杆菌进行全自动鉴定;4.★大于500种可鉴定细菌,鉴定结果通过美国FDA认证,细菌鉴定采用GB 推荐生化鉴定显色法,药敏检测采用比浊法,并且鉴定方法原理可在GB4789中查询(提供具体细菌库);5.★分析组件可自动进行革兰阴性菌、革兰阳性菌、酵母样真菌、肺炎链球菌等药敏试验,以上所有药敏试验均得到美国FDA批准用于临床应用(提供FDA证明资料);6. ★在对标本的鉴定及药敏试验过程中,无需添加任何额外附加试剂;7.快速全自动对细菌进行鉴定和药敏试验,采用实时检测系统,系统每隔15分钟对试剂卡进行一次扫描读数,一旦确认结果,可马上出报告;8.★细菌最快鉴定时间<4个小时,平均鉴定时间不超过5小时;9.最快药敏实验时间5小时,平均药敏实验时间不大于6小时;10.★系统可同时进行鉴定和药敏实验,并且可同时上机的鉴定试剂卡种类不少于4种,可同时上机的药敏试剂卡的种类不少于6种;11.★系统自动填充悬浮液至试剂卡,自动密封拭卡,并自动将拭卡装载于设备内置读数系统/孵育系统,测试结束时可自动丢弃拭卡,操作都在仪器内部自动进行,不需要额外设备;12.卡片填充菌液后为封闭式卡片,不会造成污染;13.★鉴定卡和药敏卡必须独立包装;14.鉴定卡应至少提供3种不同试剂的SFDA注册证;15.药敏卡应至少提供5种不同试剂的SFDA注册证;16.测试完成后,经分析软件分析后得出结果并可自动打印报告,并保存结果;17.具备中文报告软件系统;18.双向联网软件,可传输报告结果;19.具有三重售后服务保证体系(国内有分支机构、本地有生产厂家办事处、销售商有专职工程师),必须提供终身售后服务支持;20.售后服务时效:有仪器故障,厂方能在4小时作出响应。
全自动微生物鉴定药敏系统技术说明
一、概述
本次招标采购设备为全自动微生物鉴定药敏系统,供应商应根据采购文件所提出的设备技术规格和服务要求,综合考虑设备的适应性,选择具有最佳性能价格比的设备前来投标。希望供应商以优良的产品、服务和优惠的价格参与竞争。
二、内容一览表
序号
货物名称
数量
交货期
目的地
1
全自动微生物鉴定药敏系统
12.2
质量控制模块:软件中具有专用的质控模块,可以对整体流程进行质量控制,可以发布鉴定/药敏质控报告。
12.3
罕见耐药表型告警功能:对万古霉素非敏感的金黄色葡萄球菌、利奈唑胺非敏感的金黄色对葡萄球菌、黏菌素/多粘菌素耐药的肠杆菌目等罕见耐药菌实现监测预警,避免错误报告。
13
LIS连接:可实现和LIS系统的单向或双向通讯。
10
兼容检测模式:兼容0.5McF和0.25McF两种检测模式。
11
加样方式:重力加样或机械加样。
12
软专家系统可以发现异常耐药表型,并对鉴定+药敏结果进行评价,通过与LIS相配合,大部分药敏结果可免人工审核,直接发送至LIS快速出报告。提升药敏报告的时效性。
1套
合同签订之日起2个月内到货
人民医院
2
技术资料
全套
3
供应商须提供的其他资料
三、技术要求
序号
技术要求
备注
1
适用范围:用于微生物实验室细菌、真菌等全自动化快速鉴定及药敏试验。
2
检测原理:药敏检测原理包含氧化还原法。
3
设备通量:≥50孔位,最多可同时进行50个鉴定或药敏实验。
4
检测数量:仪器可检测细菌及真菌数量≥500种。
midi-sherlock报告解读
midi-sherlock报告解读
MIDI Sherlock报告解读如下:
1.微生物鉴定:报告提供了微生物的鉴定结果,包括细菌、真菌等。
这些结果基于MIDI系统的分析,可以用于诊断感染和其他微生物相关的问题。
2.药敏分析:报告还提供了药敏分析结果,即细菌对各种抗生素的敏感性或耐药性。
这些结果可以帮助医生选择合适的抗生素进行治疗。
3.临床建议:根据报告结果,医生可以得出相应的临床建议,包括诊断、治疗、预防等方面的建议。
这些建议是基于MIDI系统的分析结果和临床经验制定的。
4.注意事项:在解读MIDI Sherlock报告时,需要注意一些关键点。
首先,报告结果可能受到实验室技术和样本质量的影响,因此需要确保实验室操作的准确性和可靠性。
其次,报告结果可能存在一定的误差或不确定性,因此需要结合患者的临床表现和其他检查结果进行综合判断。
最后,报告结果只是一种参考依据,而不是绝对标准,最终诊断和治疗方案需要由医生根据患者的具体情况制定。
总之,MIDI Sherlock报告是一种基于MIDI系统的微生物鉴定和药敏分析结果,可以帮助医生快速准确地诊断和治疗感染和其他微生物相关的问题。
在解读报告时,需要注意实验室技术和样本质量的影响、结果的误差和不确定性以及患者的具体情况等因素。
菌种鉴定方法大全
菌种鉴定方法大全一、金开瑞菌种鉴定服务简介在细菌/真菌的16/18SrDNA中有多个区段保守性,根据这些保守区可以设计出细菌/真菌通用引物,扩增出细菌/真菌的16/18SrDNA片。
因此,16/18SrDNA可以作为细菌/真菌群落结构分析最常用的系统进化标记分子。
该鉴定手段试用于单种鉴定或者少量混杂菌种鉴定。
金开瑞拥有多种配套的通用菌种鉴定引物,实验周期短,可以帮您快速实现菌种鉴定。
服务流程引物设计合成—PCR扩增16/18S rDNA/ITS—PCR产物纯化—测序,序列比对分析客户提供基因组DNA:要求基因组DNA的浓度≥100 ng/μl,总体积≥20 μl,且无明显降解;平板或斜面:经菌种分离后带有单菌落的新鲜平板或斜面。
最终交付测序结果,BLAST比对得到细菌种属名称服务内容及说明服务名称服务周期(工作日)原核生物/16SrDNA5-7真核生物/18SrDNA5-7真菌ITS序列分析5-7二、菌种鉴定方法介绍(1)常规鉴定常规鉴定内容有形态特征和生理生化特征。
形态特征包括显微形态和培养特征;理化特性包括营养类型、碳氮源利用能力、各种代谢反应、酶反应等。
(2)BIOLOG碳源自动分析鉴定BIOLOG鉴定系统以微生物对不同碳源的利用情况为基础,检测微生物的特征指纹图谱,建立与微生物种类相对应的数据库。
通过软件将待测微生物与数据库参比,得出鉴定结果。
该系统已获美国FDA认可,已逐步应用于食品和饮品企业、环保、海洋生物/水产品、制药、农业微生物、生物治理、化妆品、临床等领域的微生物鉴定试验中。
BIOLOG是一种微生物菌种快速鉴定系统,涉及革兰氏阴性菌、革兰氏阳性菌、厌氧菌、酵母、丝状真菌在内近2000种微生物。
(3)分子生物学鉴定应用分子生物学方法从遗传进化角度阐明微生物种群之间的分类学关系,是目前微生物分类学研究普遍采用的鉴定方法。
CICC拥有微生物菌种分类鉴定的分子生物学实验室,配有PCR仪、高速冷冻离心机、电泳仪、HPLC、凝胶成像系统、紫外控温分析系统等先进仪器设备,以及DNAMAN、BIOEDIT、CLUSTALX、TREEVIEW等序列分析软件。
磷脂脂肪酸微生物鉴定系统 ppt课件
pattern recognition software
GC 硬件选择
6890 目前6890升级为7890。
6850
微生物菌种库
噬氧菌 厌氧菌 酵母
大于1500种菌种,其中450种来自临床 大于800种菌种 300种,放线菌库亦包含其内。
迄今为止微生物鉴定系统中最大的菌库 并细分为超过100,000个株型,一步直接鉴定到株型,这是传统方法做不到的
2. Sherlock利用样品的前处理过程和气相色谱分析 (Gas Chromatography)去产生定性及定量脂肪酸再 现性成份描述.
3. 从未知的微生物中萃取出脂肪酸而后自动化的被定量 且利用Sherlock的软件来鉴定检测出脂肪酸的成份.
脂肪酸鉴定与传统微生物鉴定比较的优势:
操作过程
消耗品 人为判断
...over DNA-Based Identification
Bioterrorism list:
• Bacillus anthracis (Anthrax) • Brucella melitensis (Brucellosis) • Burkholderia mallei (Glanders) • Burkholderia pseudomallei (Melioidosis) • Francisella tularensis (Tularemia) • Yersinia pestis (Plague) • 15 challenge organisms
Sherlock® microbe methods and libraries
MIS 软件选择
汽化管和标准品
GC谱图
Report
Result Summaries
MIDI Sherlock微生物自动鉴定系统鉴定方法的建立——以贻贝中分离的蜡样芽胞杆菌为例
结果表明: D 鉴定系统对于用 T B MI I S A培养基培养的蜡样 芽孢杆菌鉴定的准确率比用营养琼脂 培养基培养的要 高, 而且取菌量为 10 10 g组鉴定时的准确率要高于其他取菌量的组, 明 0~ 2 m 说 培养基和取茵量的不同都会对该 系统的鉴定结果产生影响. 最后确定蜡样芽孢杆菌鉴定方法为: TB S A培养待检微生物, 获菌量控制在 10 10 g 间,生理生化鉴定和 P R鉴定验证 了该方 0- 2 之 m C
第2 卷第2 ,0 月 4 期 2 1年4 1
V 1 4 N o2 Ap . 0 o . ., r 2 1 2 1
宁 波 大 学 学 报 (理 工 版 )
J OUR NAL NGBOUNI OFNI VERS T ( E ) I Y NS E
首届 中国 高校优 秀科技 期 刊奖 浙 江省优 秀科 技期 刊一 等奖
第 2期
黄朱梁 , : D h r c 等 MI I el k微生物 自动鉴定系统鉴定方法的建立 S o 113 仪 器 与设 备 ..
9
要 根 据 不 同 种 类 微 生 物 细 胞 膜 中 磷 脂 脂 肪 酸 (h sh l i F t i, L A 的类 型和 含量 具有 P opoid at Ac P F ) p y d
第一作者: 黄朱梁 ( 95 , 浙江舟山人, 18 一) 男, 在读硕士研究生, 主要研究方向: 水产品安全.—a:z 019@ ao.m. Em ih1 295 yho o c l 3 c n ・ 通讯作者: 裘迪红 ( 96 , , 16 一) 女 浙江舟山人, 副教 授, 主要研究方向: 水产 品安全. . a :i i nx 6 C m Em i q d o gl 3 o l uh @1
菌种鉴定
菌种鉴定篇一:菌种鉴定中国工业微生物菌种保藏管理中心CICC是我国唯一的国家级工业微生物菌种保藏管理中心,有近三十年菌种分类鉴定的历史,拥有先进的生物科学仪器和从事分类鉴定的专业化人员队伍。
CICC承担全国工业微生物菌种的委托鉴定工作,所提供的菌种鉴定与评价技术服务获得“国家工商总局(SCIC)经营许可”,为国内科研机构、大专院校和生产企业等提供微生物菌种鉴定服务,涉及细菌、酵母、放线菌和丝状真菌等多类微生物。
菌种鉴定手段包括形态学观察、生理生化特性鉴定、 BIOLOG碳源自动分析鉴定、分子生物学鉴定、API细菌数值鉴定、功能性分析及功能基因、RAPD、SSCP、TLC薄层层析、全细胞脂肪酸分析鉴定、(G+C)mol%测定、DNA/DNA同源性测定等。
鉴定项目序号服务项目菌种类别1 纯菌种鉴定(包含形态、理化、分子)细菌、酵母、放线菌、丝状真菌2 功能基因鉴定(pheS、gryA、atpD等)乳杆菌、芽胞杆菌、双歧杆菌3 产品微生物解析――4 产品污染菌种鉴定――5 菌群分析及纯种分离――6 细胞壁化学组分分析(氨基酸)细菌、放线菌7 细胞壁化学组分分析(糖)细菌、放线菌8 DNA(G+C )mol%含量细菌、放线菌9 DNA/DNA杂交细菌、酵母、放线菌、丝状真菌 10 脂肪酸分析细菌、放线菌11 其它――鉴定手段(1)常规鉴定常规鉴定内容有形态特征和理化特性。
形态特征包括显微形态和培养特征;理化特性包括营养类型、碳氮源利用能力、各种代谢反应、酶反应和血清学反应等。
(2)BIOLOG碳源自动分析鉴定BIOLOG鉴定系统以微生物对不同碳源的利用情况为基础,检测微生物的特征指纹图谱,建立与微生物种类相对应的数据库。
通过软件将待测微生物与数据库参比,得出鉴定结果。
该系统已获美国FDA认可,已逐步应用于食品和饮品企业、环保、海洋生物/水产品、制药、农业微生物、生物治理、化妆品、临床等领域的微生物鉴定试验中。
全自动微生物质谱鉴定系统技术性能要求
全自动微生物质谱鉴定系统技术性能要求技术性能要求对于全自动微生物质谱鉴定系统至关重要,这些要求主要包括以下几个方面:1.高精度和高灵敏度:全自动微生物质谱鉴定系统需要能够快速、可靠地识别微生物的种属和品系。
因此,系统应具备高精度和高灵敏度,能够检测微生物特异的质谱特征和离子信号,以区分不同的微生物。
2.快速分析速度:全自动微生物质谱鉴定系统应具备快速的分析速度。
由于微生物样品数量庞大,因此系统需要能够在短时间内处理大批样品,并提供快速的分析结果。
3.多样性鉴定能力:全自动微生物质谱鉴定系统应能够鉴定多种不同类型的微生物,包括细菌、真菌、病毒等。
系统应具备多样化的质谱数据库,以支持对不同种属的微生物进行鉴定和分类。
4.系统自动化和智能化:全自动微生物质谱鉴定系统应具备高度的自动化和智能化能力。
系统应能够通过自动化的数据处理和分析,快速生成鉴定结果,并通过智能算法提供准确的鉴定和分类。
5.数据分析和管理:全自动微生物质谱鉴定系统应具备强大的数据分析和管理能力。
系统应能够对大量的质谱数据进行存储、分析和管理,并提供可视化的结果呈现,方便用户阅读和理解分析结果。
6.高可靠性和稳定性:全自动微生物质谱鉴定系统需要具备高可靠性和稳定性。
系统应能够在长时间运行和重复使用的情况下保持稳定的性能,并具备较低的故障率和易维护性。
7.用户友好性:全自动微生物质谱鉴定系统应具备良好的用户界面和操作方式,以提供良好的用户体验。
系统应易于操作和维护,并提供详细的用户手册和技术支持。
总之,全自动微生物质谱鉴定系统的技术性能要求包括高精度、高灵敏度、快速分析速度、多样性鉴定能力、系统自动化和智能化、数据分析和管理能力、高可靠性和稳定性以及用户友好性等方面,这些要求能够确保系统能够快速、准确地鉴定和分类微生物,并满足不同用户的需求。
植物内生菌的富集培养实验报告
植物内生菌的富集培养实验报告l、芭蕉属植物内生菌数量、种类与植物品种有关在对植物内生菌研究应用之前对其微生态学要有足够的了解(韩继刚等,2004)。
许多研究表明植物内生菌具有宿主特异性。
Adams等在研究宿主植物的基因型对棉花的内生细菌的影响中发现,宿主植物的基囚型等影响内生细菌在植株中的生存(Adams P. D. et al,2002)。
另有研究报道茶树有性系后代中同一器官不同品种内生细菌数量差异显著,茶树无性系叶片、主根、侧根的内生细菌数量品种间的差异达到极显著水平(陈百文等,2008)。
本研究发现不同品种芭蕉属植物内生细菌含量存在较大差别,无论是整个植株的总含菌量,还是具体到叶部、茎部、根部,均为在4个检测品种中野生蕉内生细菌含量最高,芭蕉和红花蕉含菌量最低。
野生蕉、红花蕉和威廉斯蕉有分离到内生真菌没有分离到内生放线菌,而芭蕉没有分离到内生真菌,却分离到内生放线菌。
显然,在芭蕉属植物中内生茵种类与品种也存在一定的关系。
2、芭蕉属植物内生菌数量、种类与植物器官有关在同―种植物的不同器官组织中,内生菌的种类和数量也有所不同。
试验结果表明红花焦和威廉斯蕉有个共同特征是根部含菌量远高于叶部和茎部。
与付业勤等报道的香蕉内生细菌数量在植株根、假茎、叶柄、叶片组织的总体分布呈现递减趋势的分布结果相似(付业勤等,2007)。
在其他植物上也有相似的研究结果,如哈密瓜内生细菌分布规律为种子>根>叶片>茎>叶柄>果实(罗明等,2007)。
但也有辣椒叶部内生细菌的数量高于根部的报道(Quadt-Hallmann A. et al,1996)。
木研究中野生蕉叶部内生细菌含量同样比根部含量高。
刘云霞等认为,根系统是内生细菌进入植物的入口,因此聚集的内生细菌较多,并通过输导系统由茎部到叶,茎部形态结构决定内生细菌的通道(刘云霞等,1999)。
本文野牛蕉的研究结果验证了这个观点,内生细菌多集中在输导系统。
磷脂脂肪酸(PLFAs)谱图分析技术
微生物生态学的研究方法——磷脂脂肪酸分析(PLFA)【内容摘要】定量描述微生物群落是微生物生态学的难题之一。
应用传统的微生物培养方法和显微技术, 需要在选择性培养基上培养微生物, 即首先从环境样品中分离出纯菌株, 再对该菌株进行一系列的生理生化分析。
文章综述了磷脂脂肪酸谱图分析法在微生物生态研究中的应用,包括估算微生物生物量、确定群落结构、指示特定微生物,指示生理和营养状况等,并指出此种方法存在的问题及改进方法。
【关键词】磷酸脂肪酸微生物生态学应用及发展一、引言:环境中微生物的种类和数量是及其丰富的[1],微生物能把有机质作为营养源转化为组成物质和能量,它们在环境治理过程中扮演着极其重要的作用。
分离和鉴定处理系统中的优势菌,了解特定环境下微生物群落的种群分布、遗传多样性及其动态变化规律和认识微生物群落的稳定性及功能菌的作用,是环境微生物学研究的重要内容。
传统的微生物鉴定和群分析方法建立在微生物纯种培养分离基础上,但自然环境中有 99%以上的微生物还不能通过人工培养,在微生物的分析和研究工作中具有很大的局限性。
二、正文:1.磷脂脂肪酸(PLFAs)谱图分析技术概述1.1 PLFA 概念、分类和命名磷脂是含有磷酸基团的脂质,目前已发现了1000多种磷脂类物质。
磷脂作为微生物细胞膜主要成分,是甘油分子的第3位羟基被磷酸或其他羟基所酯化形成的。
其结构特点是:具有由磷酸相连的取代基团(含氨碱或醇类)构成的亲水头(hydrophilic head)和由脂肪酸链构成的疏水尾(hydrophobictail)。
PLFAs(磷脂脂肪酸,phosphohpids fattyacids)谱图分析方法的原理是基于磷脂——几乎是所有生物细胞膜的重要组成部分,细胞中磷脂的含量在自然条件下(正常的生理条件下)恒定[ 2 ],其长链脂肪酸的形式——磷脂脂肪酸PLFAs 可作为微生物群落的标记物。
此外,磷脂不能作为细胞的贮存物质,在细胞死亡后将很快降解(厌氧条件下约需2d,而好氧条件下约需12—16d)m,可代表微生物群落中“存活”的那部分群体阁。
微生物检测实验室常见的仪器设备
实验室的仪器设备是指用于教学、科研、技术开发试验而设置的仪器设备。
通常人们习惯将通用于测试的仪器设备称作仪器,而将较大型的用于制作和生产性质的仪器设备称为设备。
随着科学技术的不断发展,现代的仪器设备既有制作、生产的功能,又具有测试功能,也就是说,由于测试、制作和生产分不开,使得与其相关的仪器和设备也难以划分和界定。
因此,人们便将仪器和设备通称为仪器设备。
开展食品微生物检测工作,离不开实验室的仪器设备。
具有适合于食品微生物检测功能且状态良好的仪器设备,是获得高质量实验室检测结果的要求之一。
食品微生物检测实验室的仪器设备主要包括有以下几类。
1保证检测用无菌环境的仪器设备生物安全柜和超净工作台是用于实验室的主要隔离设备。
生物安全柜可有效防止有害悬浮微粒的扩散,为操生物安全柜是为操作原代培养物、菌毒株及诊断性标本等具有感染性的实验材料时,用来保护操生物安全柜常使用一次性接种环或电热式接种环灭菌器。
电热式接种环灭菌器配有硼硅酸玻璃或陶瓷保护罩,可减少接种环灭菌时感染性物质的飞溅和散布,但电热式接种环灭菌器会扰乱气流,因此,应置于生物安全柜中靠近工作表面后缘的地方。
2保证检测用实验用品与用具无菌(灭菌)的仪器设备在食品微生物实验室中,用于灭菌的设备通常为高压蒸汽灭菌器或用于干热灭菌的干燥箱。
高压蒸汽灭菌器是应用最广、效果最好的灭菌器,广泛用于培养基、生理盐水、废弃培养物等物品的灭菌。
其种类有手提式、立式、卧式等,目前大部分高压蒸汽灭菌器具有自动过程控制。
干燥箱主要用于金属、玻璃器皿的干热灭菌。
而离子辐射和环己烷灭菌设备由于具有较大的毒性,通常只用于对热敏感物质的灭菌。
接种环的灭菌通常使用酒精灯,但红外线加热灭菌器或灭菌喷灯等设备由于具有使用安全的特点,为接种环的灭菌带来了3满足微生物恒温生长培养的仪器设备微生物培养的设备为培养箱、摇床和水浴锅等。
其中培养箱是微生物培养的主要设备,可分为恒温培养箱、恒温恒湿培养箱、低温培养箱、高温培养箱、微需氧培养箱和厌氧培养箱等。
SherlockMIS微生物菌种鉴定系统简介
SherlockMIS微生物菌种鉴定系统简介Sherlock Microbiol Identification System(MIS)是由美国MIDI公司研究及行销市场,MIDI主要是用来分析及鉴定已分离且在人工培养基中纯化培养的微生物。
Sherlock利用检体的前处理过程和气相色谱分析(GCGas Chromatography)产生的定量脂肪酸形成成分描绘,与Sherlock菌种标准数据库比对,准确判断待检样品的菌种类型。
Sherlock可鉴定出广范围的微生物,分析前不需要分离筛检物理性及生物化学性的族群,每个资料库都收集了良好特征的菌种,经由微生物学家操作建议下的培养菌种,特别适合以下领域的研究和开发应用:1.环境科学2.医学/临床3.灭菌控制4.植物及土壤5.食品工程6.饮用水及废水处理工程生物标志物(biomarker)是微生物中含有的一些化学物质,其含量或结构具有种属特征及与其分布位置密切相关,能够标志某一类或某种特定微生物的存在。
这些具有分类学变异的化学物质的种类和含量可以作为鉴定微生物的指标。
生物标志物的种类很多,不饱和脂肪酸、蛋白质、核酸类脂、磷脂和多糖等。
脂类是早被用于细菌鉴定的生物标志物,约始于20世纪60年代,在这方面的文献报道和许多种分析技术的应用中,脂类易于提取和浓缩,其结构的变化与病菌的营养和生理状况相关,在此情况下还可检测细菌的传染性,如霍乱弧菌脂类结构的变化可以指示细菌感染性的强弱。
检测脂类的手段主要是GC质谱。
美国MIDI公司的Sherlock系统通过GC 分析细菌脂肪酸的方法专门用于细菌的分类鉴定。
细菌在标准的培养条件下培养和收获,经过有机溶剂萃取脂肪酸成分和甲酸化后,注入GC分析系统,一个分析周期2hr(细菌培养时间除外)。
与传统的微生物鉴定手段如形态学观察、生化反应、免疫反应等检测手段比较,Sherlock利用GC分析脂肪酸的办法有下列优点:※检测耗时较少:GC分析脂肪酸的方法,结果评价更具客观性,减少认为判断的误差。
菌种相关检测
菌种相关检测2.14(1)常规鉴定常规鉴定内容有形态特征和理化特性。
形态特征包括显微形态和培养特征;理化特性包括营养类型、碳氮源利用能力、各种代谢反应、酶反应和血清学反应等。
(2)BIOLOG碳源自动分析鉴定BIOLOG鉴定系统以微生物对不同碳源的利用情况为基础,检测微生物的特征指纹图谱,建立与微生物种类相对应的数据库。
通过软件将待测微生物与数据库参比,得出鉴定结果。
该系统已获美国FDA认可,已逐步应用于食品和饮品企业、环保、海洋生物/水产品、制药、农业微生物、生物治理、化妆品、临床等领域的微生物鉴定试验中。
科标生物检测中心拥有国内完善的BIOLOG数据库,涉及革兰氏阴性菌、革兰氏阳性菌、厌氧菌、酵母、丝状真菌在内近2000种微生物。
(3)分子生物学鉴定应用分子生物学方法从遗传进化角度阐明微生物种群之间的分类学关系,是目前微生物分类学研究普遍采用的鉴定方法。
(4)API细菌数值鉴定系统API鉴定系统涵盖15个鉴定系列,约有1000种生化反应,目前已可鉴定超过600种的细菌。
鉴定过程中,可根据细菌所属类群选择适当的生理生化鉴定系列,通过软件将待测细菌与数据库参比,得出鉴定结果。
科标生物检测中心目前可应用API50CH系列、API20E系列、API Staph系列对乳酸杆菌(Lactobacillus sp.)和相关细菌、芽孢杆菌(Bacillus sp.)、葡萄球菌属(Staphylococcus sp.)、微球菌属(Micrococcus sp.)和库克菌属(Locuria sp.)进行鉴定。
(5)功能性分析及功能基因科标生物检测中心不断致力于工业微生物资源的功能及其功能基因研究,目前通过木聚糖酶、纤维素酶、葡萄糖异构酶、β-甘露聚糖酶等功能基因的克隆进行菌种产酶的功能性分析。
应用gyrA、atpD及pheS等看家基因于微生物菌种鉴定,在某些种、亚种、株间有较好的分辨效果。
(6)RAPD、SSCP技术随着微生物菌种应用的进一步发展,在食品安全管理、生物产品出口认证、知识产权保护等行业需求日益增加,微生物菌种株水平的鉴别技术成为一个迫切需要解决的问题。
全自动微生物鉴定分析系统技术参数
全自动微生物鉴定分析系统技术参数一、设备用途用于好氧细菌鉴定及微生物生态分析。
可升级为表型分析系统,具备对微生物细胞或者哺乳动物细胞表型进行高通量检测,包括碳源、氮源、磷源和硫源、渗透压、pH值及各种化学敏感物质等,进行表型特征和动力学对比分析。
二、工作条件电源:220-240V温度:15-30℃湿度:20-80%RH三、硬件1、培养/读数一体化主机,可实现实时培养、数据采集和快速菌种鉴定2、主机最大容量:培养容量不小于50块96孔板;3、主机培养温度范围:室温+5~45℃;4、主机培养温度一致性:±1.5℃;5、主机循环读取时间:最大培养容量下,培养结果的读取时间不大于15分钟;6 、最小自动读取结果时间间隔:15分钟。
四、鉴定系统1、数据库:配套的好氧菌数据库可鉴定的细菌数量应大于1500种。
可一步鉴定到种,无需革兰氏染色、氧化酶、过氧化物酶等预实验和补充实验。
2、鉴定周期:需氧菌4-24小时。
具备自动、快速读取浊度及颜色变化结果,通过与数据库对比,给出鉴定结果。
3、在完成菌种鉴定的同时,具备高通量分析碳源利用功能,一次鉴定的反应数量不少于70种碳源。
4、用户可生成自定义数据库。
具有数据管理功能,用户可对数据文件进行备份、合并、浏览、编辑及表格格式输入或输出。
实验结果进行自动分析,记录和打印。
5、可生成系统树图或丛生图表,以线形、平面和立体等形式反映结果情况。
6、可设定用户使用权限,保证数据安全,系统安全性应通过相关认证。
五、可升级为表型分析系统1、微生物表型分析1.1 具备对纯种微生物或混合微生物细胞表型进行高通量表型测试和表型特征分析功能,包括碳源、氮源、磷源、硫源、以及渗透压、pH值、化学敏感物质等,测试的表型应大于2200种,可用于细菌、酵母菌、丝状真菌等微生物细胞表型的研究。
1.2 各种表型板由主机完成培养和自动读数,系统每15或30分钟定时测定颜色变化值,得到表型反应的动力学图曲线,定量测定表型反应的强弱。
预防疾控微生物检验技术副高综合练习(单选题3)
1.适用于空气灭菌的方法是A.干热灭菌法B.湿热灭菌法C.紫外线灭菌法D.电离辐射灭菌法E.超声波灭菌法'【答案】'.C2.无菌的含义是:A.杀灭物体上所有的微生物B.杀死物体上的病原微生物C.物体上无活菌存在D.杀死含芽胞的细菌E.抑制微生物生长繁殖'【答案】'.C3.平板分区划线的目的是A.使细菌获得充分的营养B.减少细菌间的相互抑制作用C.获得足够的单个菌落D.加快细菌的生长速度E.利于细菌的大量生长'【答案】'.C4.最低药物浓度能杀死99.9%原始种入的细菌即为该菌的:A.MICB.MBCC.ICD.MPCE.BC'【答案】'.B5.关于血清学诊断,错误的叙述是A.是一种用已知抗原检测患者血清中相应抗体的免疫学方法B.常用于抗原性较强的病原菌感染性疾病的诊断C.是一种以效价为测量单位的半定量试验D.适用于病程短的传染病的诊断E.可用于人群免疫水平的调查'【答案】'.D6.关于细菌荚膜的叙述,下列正确的是:A.与致病性有关B.与分裂有关C.与运动有关D.与接合有关E.与染色性有关'【答案】'.A7.大多数细菌繁殖一代所需时间为A.10mainB.20minC.40minD.1hE.2h'【答案】'.B8.细菌L型是下列哪种结构缺陷:A.中介体B.细胞膜C.细胞壁D.细胞质E.核质'【答案】'.C9.革兰阴性菌细胞壁的特殊组分是A.肽聚糖B.磷壁酸C.外膜层D.脂质双层E.脂多糖'【答案】'.E10.细菌芽胞所特有的并与其高度耐热性有关的成分是A.磷脂B.肽聚糖C.磷壁酸D.吡啶二羧酸E.二氨基庚二酸'【答案】'.D11.数码鉴定时菌悬液浓度不同试条的要求应调整为A.1.5亿/mlB.<1.5亿/mlC.1.0亿/ml或>1.0亿/mlD.<1.0亿/mlE.以上都不是'【答案】'.A12.根据卫生部标准要求,重症监护病房医护人员手部细菌数不得超过A.9CFU/cm<sup>2</sup>B.5CFU/cm<sup>2</sup>C.10CFU/cm<sup>2</sup>D.CFU/cm<sup>2</sup>E.CFU/cm<sup>2</sup>'【答案】'.B13.Sensititire全自动微生物鉴定/药物分析仪MIC板每种药均有几种稀释度A.2B.2~3C.4D.6E.8'【答案】'.E14.流行性乙型脑炎病毒的传染源是A.幼猪B.库蚊C.虱D.蜱E.螨'【答案】'.A15.立克次体与细菌的主要区别是()A.有细胞壁和核糖体B.含两种类型核酸C.严格细胞内寄生D.以二分裂方式繁殖E.对抗生素敏感'【答案】'.C16.观察钩体的最好方法是A.革兰染色法B.抗酸染色法C.暗视野显微镜法D.悬滴法E.压片棉蓝染色法'【答案】'.C17.酵母菌细胞壁的主要成分为A.肽聚糖,磷壁酸B.葡聚糖和甘露聚糖C.几丁质D.纤维素'【答案】'.B18.食入未经消毒的羊奶,最有可能罹患的疾病是A.波浪热B.结核病C.伤寒D.破伤风E.肉毒中毒'【答案】'.A19.下列哪种结构不是细菌的表面结构A.中介体B.鞭毛C.菌毛D.荚膜E.性菌毛'【答案】'.A20.鉴定葡萄球菌致病性的重要指标是:A.葡萄球菌溶素B.血浆凝固酶C.金黄色素D.扩散因子'【答案】'.B21.鼠疫耶氏菌产生的鼠毒素与一般外毒素的区别是A.化学成分是脂多糖B.不可用甲醛脱毒制成类毒素C.免疫动物不能产生抗毒素D.由质粒产生E.菌细胞裂解或自溶后才能释放'【答案】'.E22.病原菌由原发部位一时性或间断性侵入血流,但未在血中繁殖,只是暂时或一过性通过,并且无明显中毒症状称为A.败血症B.菌血症C.脓毒血症D.内毒素血症E.毒血症'【答案】'.B23.临床微生物学检验的要求是A.快速、准确地提出检验报告B.检验人员须有掌握微生物学基础知识和操作技能,养成有菌观点和无菌操作的习惯C.临床微生物学检验必须进行全面质量控制,并参加和接受质量控制考核D.重视实验室消毒灭菌工作E.以上说法都正确'【答案】'.E24.下列不属于湿热杀菌机制的是A.菌体蛋白质变性B.菌体蛋白质凝固C.细菌核酸降解D.细菌胞质膜损伤E.细菌电解质浓缩'【答案】'.E25.下面关于直接镜检的说法正确的是A.尿液、脑脊液等标本经过离心浓缩后镜检有助于临床初步诊断B.5~10min即可得出结论C.直接镜检对于确定进一步检出步骤及鉴定方法有帮助D.直接镜检还可评价标本是否符合检验要求E.以上均正确'【答案】'.E26.下列能溶于脂肪溶剂中,不溶于水,化学亲和力低的染料是A.瑞氏染料B.姬姆萨染料C.苏丹类染料D.荧光染料E.酸性染料'【答案】'.C27.细菌学中最经典、最常用的染色方法是A.单染色法B.革兰染色法C.抗酸染色D.荧光染色E.以上都不是'【答案】'.B28.下列哪种显微镜多用于检查不染色的活细菌和螺旋体的形态及运动进行观察A.普通光学显微镜B.暗视野显微镜C.相差显微镜D.荧光显微镜E.电子显微镜'【答案】'.B29.用纸片法做抗微生物药物敏感试验时两张纸片的中心距离为A.≥24mmB.≥20mmC.≥16mmD.≥12mmE.≥8mm'【答案】'.A30.关于甲基红试验原理不正确的是:A.细菌分解葡萄糖产生丙酮酸B.丙酮酸进一步分解产生甲酸等C.使培养基pH下降至4.5以下D.甲基红变色范围为pH4.4~6.2E.阳性时呈黄色'【答案】'.E31.关于吲哚试验,不正确的是A.培养基为蛋白胨水B.培养基中不含葡萄糖C.阳性的细菌含有色氨酸酶D.吲哚试剂为四甲基对苯二胺E.有红色的玫瑰吲哚形成为阳性'【答案】'.D32.常规用于纸片扩散法的菌悬液浓度为A.1.0×108CFU/mlB.1.1×108CFU/mlC.l.2×108CFU/mlD.1.4×108CFU/mlE.1.5×108CFU/ml'【答案】'.E33.下列哪项不是细菌生长繁殖的基本条件A.充足的营养B.合适的酸碱度C.适宜的温度D.充足的氧E.适量的气体'【答案】'.D34.悉生动物是A.无菌动物B.无菌动物引入已知细菌C.清洁动物D.突变动物E.无特殊病原体动物'【答案】'.B35.关于细菌菌毛叙述,正确的是A.与细菌运动有关B.与细菌染色有关C.与细菌分裂有关D.与细菌黏附有关E.与细菌抵抗力有关'【答案】'.D36.制备好的培养基一般保存在A.-80℃B.-40℃C.-20℃D.4℃E.25℃'【答案】'.D37.利用生化反应鉴定细菌是根据A.细菌酶活性差异B.细菌毒素活性差异C.细菌酶含量的差异D.细菌毒素种类的差E.细菌分解代谢产物的差异'【答案】'.E38.AutoScan-4自动微生物鉴定/药敏分析仪对药敏(MIC)测定用的是A.比色法B.比浊法C.荧光柱测技术D.二氧化碳感受器E.放射性14C标记法'【答案】'.B39.医院感染最主要的病原体是:A.衣原体B.支原体C.细菌D.病毒E.真菌'【答案】'.C40.放线菌属于A.病毒界B.原核原生生物界C.真菌界D.真核原生生物界'【答案】'.B41.关于钩端螺旋体的描述,错误的是A.人主要通过接触钩体污染的水或土壤被感染B.钩体致病与其产生的内毒素样物质有关C.钩体可入血引起钩体血症D.钩体病可累及全身多个器官E.钩体病患者病后可获得以细胞免疫为主的特异型免疫力'【答案】'.E42.白色念珠菌常引起A.癣病B.皮肤黏膜、内脏感染C.毒血症D.皮下组织感染E.真菌中毒症'【答案】'.B43.以增殖为主要繁殖方式的是A.细菌B.酵母菌C.霉菌D.病毒'【答案】'.D44.关于霍乱,错误的是A.属于烈性传染病B.人类是霍乱弧菌的唯一宿主C.病愈后,少数人可长期带菌D.接种霍乱死菌苗可增强人群的特异性免疫力E.病后免疫力短暂'【答案】'.E45.预防新生儿淋球菌性眼结膜炎常用的消毒剂是A.2%双氧水B.1%硝酸银C.0.1%硫柳汞D.0.1%升汞E.70%乙醇'【答案】'.B46.预防病毒病最有效的方法是A.使用抗毒素B.使用抗病毒化学疗剂C.使用中草药D.免疫预防(使用疫苗)E.使用抗菌药物'【答案】'.D47.正常菌群成员引起感染的条件之一是:A.变为耐药菌B.发生基因突变C.寄居部位改变D.变为L型细菌E.发生S-R变异'【答案】'.C48.毒性最强的细菌毒素是A.金葡菌肠毒素B.肉毒毒素C.破伤风痉挛毒素D.白喉外毒素E.霍乱肠毒素'【答案】'.B49.外毒素特点之一是A.多由革兰阴性菌产生B.多为细菌裂解后释放C.化学组成是脂多糖D.可制备成类毒素E.耐热'【答案】'.D50.下面有关细菌在人体分布的说法错误的是A.人体的正常微生物群通称正常菌群B.正常菌群一般不致病C.生态失调在宿主表现为种类、数量和定位的改变D.当机体免疫力下降时正常菌群可致病E.正常菌群具有相对稳定性'【答案】'.C51.高压蒸汽灭菌法通常在103.4kPa的压力下维持:A.3minB.10minC.15~20minD.30minE.60min'【答案】'.C52.光学显微镜下能看清细菌形态的最佳放大倍数是:A.1000倍B.500倍C.100倍D.10000倍E.600倍'【答案】'.A53.下列属于酸性染料的是A.复红B.甲紫C.美蓝D.伊红E.天青'【答案】'.D54.用于耐高温、耐湿等物品的最佳灭菌方法是:A.高压蒸汽灭菌法B.间歇蒸汽灭菌法C.流动蒸汽灭菌法D.巴氏消毒法E.煮沸法'【答案】'.A55.下列为鉴别培养基的是:A.EMB培养基B.血琼脂培养基C.巧克力琼脂培养基D.肉汤培养基E.疱肉培养基'【答案】'.A56.制备固体培养基时所用凝固物质不包括A.琼脂B.明胶C.卵清蛋白D.血清E.淀粉'【答案】'.E57.关于琼脂的性质,错误的是A.为培养基的赋形剂B.从石花菜中提取的半乳糖胶C.98℃以上溶解,65℃以下凝固D.培养基中加20~30g/L即成固体培养基E.细菌不能分解利用'【答案】'.C58.下列不属于蛋白质和氨基酸代谢试验的是A.赖氨酸脱羧酶试验B.七叶苷水解试验C.硫化氢试验D.苯丙氨酸脱氨酶试验E.尿素分解试验'【答案】'.B59.配制的M-H琼脂平皿置2~8℃冰箱保存,需在几天内用完A.5dB.6dC.7dD.8dE.9d'【答案】'.C60.细菌血清学诊断时,不常用的试验为:A.凝集试验B.沉淀试验C.补体结合试验D.中和试验E.细菌素分型试验'【答案】'.E61.病原菌获得能量的基质主要是A.脂肪B.氨基酸C.糖类D.蛋白质E.有机氮源'【答案】'.C62.细菌代谢活动活跃的原因是:A.细菌的体表面积大B.细菌的结构简单C.细菌繁殖快D.细菌易变异E.细菌营养谱广63.下列不常用的动物接种途径是A.皮下注射B.静脉注射C.腹腔注射D.肌内注射E.足部注射'【答案】'.E64.测定细菌DNA中G十C含量摩尔百分比可作为A.判断细菌致病力强弱的依据之一B.细菌分类的重要依据之一C.区分死菌和活菌的重要依据之一D.判断细菌对热抵抗力强弱的依据之一E.判断细菌繁殖速度的依据之一'【答案】'.B65.下列关于干燥保存法错误的是A.原理是使细菌处于休眠和代谢停滞状态B.一般使用五氧化二磷(或无水氯化钙)作吸水剂C.可以保存营养细胞D.多用于保存产芽胞的细菌E.多用于保存产生孢子的真菌和放线菌'【答案】'.C66.下列哪一种血培养仪没有采用荧光探测技术:A.BacT/AlertB.VITALC.BACTEC9120D.Mini-vitalE.BACTEC9240'【答案】'.A67.接种后的API试条一般经多少温度孵育18~24h可以观察结果A.30~40℃B.35~37℃C.36~38℃D.37~39℃E.32~35℃'【答案】'.B68.下列不是半自动微生物鉴定和药敏系统组成的是A.充填机/封口机B.读数仪C.电脑D.数据库E.药敏分析系统'【答案】'.A69.ATB系统可鉴定的细菌多达多少种A.600B.650C.450D.550E.300'【答案】'.D70.真菌不具有的成分是A.细胞壁B.细胞核C.线粒体E.叶绿素'【答案】'.E71.放线菌的形态是A.单细胞B.多细胞C.单或多细胞D.非细胞'【答案】'.A72.能产生LTA的细菌是A.脆弱类杆菌B.鼠疫耶氏菌C.脑膜炎奈瑟菌D.淋病奈瑟菌E.乙型溶血性链球菌'【答案】'.E73.对痢疾志贺菌而言,一般不易产生耐药性的药物是A.青霉素B.链霉素C.庆大霉素D.红霉素E.黄连素'【答案】'.E74.引起志贺菌感染的最小数量是A.几个B.几千个C.几十万个D.几百万个E.几亿个'【答案】'.A75.关于霍乱肠毒素,错误的是:A.A亚单位是毒性亚单位B.B亚单位是结合亚单位C.由一个A亚单位和5个B亚单位组成D.其受体是糖蛋白E.是霍乱弧菌主要的致病物质'【答案】'.D76.临床上不可取粪便标本作为检测材料的有:A.甲型肝炎病毒B.麻疹病毒C.脊髓灰质炎病毒D.人类轮状病毒E.埃可病毒'【答案】'.B77.病毒本身具有mRNA功能的基因类型A.双股DNAB.单股DNAC.单正股RNAD.单负股RNAE.双正股RNA'【答案】'.C78.衣原体发育周期中具有感染性的是:A.网状体B.原体C.始体D.包涵体E.六邻体'【答案】'.B79.在正常情况下机体无菌的部位是:A.血液B.皮肤C.口腔D.肠道E.尿道'【答案】'.A80.下列哪些因素可以引起菌群失调A.不适当的抗菌药物治疗B.病人免疫功能低下C.医疗措施影响D.外来菌侵袭E.以上都对'【答案】'.E81.哪种细菌是水被粪便污染的主要指标A.霍乱弧菌B.伤寒沙门菌C.大肠埃希菌D.痢疾志贺菌E.艰难梭菌'【答案】'.C82.用于观察细菌内部结构的最好仪器是A.相差显微镜B.荧光显微镜C.暗视野显微镜D.电子显微镜E.光学显微镜'【答案】'.D83.巴氏消毒法的温度和时间是A.100℃、10minB.121℃、15minC.80℃、10minD.63℃、30minE.71.7℃、30min'【答案】'.D84.一般不用作培养基抑制剂的是:A.胆盐B.煌绿C.亚硫酸钠D.氯化钠E.染料'【答案】'.D85.临床细菌室最常用的培养方法是A.需氧培养法B.微需氧培养法C.二氧化碳培养法D.厌氧培养法E.组织培养法'【答案】'.A86.下列不属于糖类代谢试验的是A.菊糖分解试验B.甘露醇分解试验C.O/F试验D.吲哚试验E.甲基红试验'【答案】'.D87.关于血清学反应,正确的叙述是A.用已知菌种(型)的抗体检测未知菌的抗原来鉴定细菌种(型)的血清学方法称血清学鉴定B.用颗粒性抗原与抗体反应的试验称沉淀反应C.抗"O"试验是一种沉淀反应D.用于鉴定炭疽杆菌的絮状试验称Ascoli试验E.以上均正确'【答案】'.A88.MBC的含义是A.最低抑菌浓度B.最低杀菌浓度C.最高抑菌浓度D.最高杀菌浓度E.最低稀释浓度'【答案】'.B89.实验动物接种后,不正确的做法是A.每3d观察1次并详细记录B.要测量体温、脉搏等生理指标C.注意动物的精神状态有无异常D.观察动物的行动是否正常E.食欲是否良好也要监测'【答案】'.A90.有关实验动物解剖,错误的是:A.实验动物经接种死亡后,应立即解剖B.接种动物观察期已满,可人工处死解剖C.接种动物已发病,可人工处死解剖D.若不能及时解剖,应将动物尸体置消毒剂中长期保存E.解剖实验动物应在专用的实验台上进行'【答案】'.D91.可用于鉴别细菌的细胞质内的颗粒A.核糖体B.核质C.糖原D.异染颗粒E.脂肪颗粒'【答案】'.D92.研究传染病常用的动物模型是:A.无菌动物B.悉生动物C.无特殊病原体动物D.清洁动物E.普通动物'【答案】'.B93.需要用电子显微镜观察的细菌结构是A.芽胞B.鞭毛C.菌毛D.荚膜E.异染颗粒'【答案】'.C94.关于荚膜的叙述,正确的是A.是细菌侵袭力的组成部分B.与细菌运动有关C.与细菌分裂有关D.与细菌染色有关E.与细菌接合有关'【答案】'.A95.细菌的休眠形式是A.荚膜B.芽胞C.性菌毛D.普通菌毛E.鞭毛'【答案】'.B96.属于第二类危害的致病微生物有A.埃博拉病毒B.冠状病毒C.SARS冠状病毒D.枯草杆菌E.以上均是'【答案】'.C97.利用棉拭子采样法对医院物体表面进行细菌污染监测,棉拭子在5cm×5cm的规格板内来回涂抹的次数是A.3次B.5次C.7次D.9次E.10次'【答案】'.B98.ATB敏感性试验采用的培养基为A.固体琼脂B.半固体琼脂C.液体培养基D.生理盐水E.以上都不是'【答案】'.C99.VITEK系统每个实验卡包含多少个反应孔A.30B.60C.16D.32E.64'【答案】'.A100.MicroScan自动微生物分析系统多长时间可得MIC结果A.2hB.2.5hC.3hD.3.5hE.4h'【答案】'.D101.亚急性细菌性心内膜炎是一种A.立克次体引起的感染B.衣原体引起的感染C.肠道病毒引起的感染D.条件致病菌引起的感染E.乙型溶血型链球菌引起的感染'【答案】'.E102.白僵菌为生产上应用最多的昆虫病原A.细菌B.放线菌C.真菌D.病毒'【答案】'.C103.核酸是病毒结构中的主要成份A.壳体B.核髓C.外套D.都是'【答案】'.B104.接种环常用的灭菌方法是A.火焰灭菌B.干热灭菌C.高压蒸汽灭菌D.间歇灭菌'【答案】'.A105.沼气发酵的主要产物是A.CO<sub>2</sub>B.NH3C.H<sub>2</sub>SD.CH4'【答案】'.D106.我国引起细菌性痢疾最常见的病原体是A.痢疾志贺菌1型B.痢疾志贺菌2型C.福氏志贺菌D.鲍氏志贺菌E.宋内志贺菌'【答案】'.C107.产生匐匍菌丝是○的形态特征A.根霉B.毛霉C.青霉D.曲霉'【答案】'.A108.关于伤寒和副伤寒沙门菌感染的免疫性,正确的是A.病后可重复感染同一型细菌B.血清抗体量的高低与病情轻重成正比C.血清抗体对此菌无杀伤作用D.因体液免疫而获得较牢固免疫力E.因细胞免疫而获得较牢固免疫力'【答案】'.E109.感染皮下组织的真菌是:A.毛癣菌B.石膏样小孢菌C.假丝酵母菌D.着色真菌E.隐球菌'【答案】'.D110.类毒素具有A.抗原性B.抗原性和毒性C.抗原性和无毒性D.无抗原性和无毒性'【答案】'.C111.炭疽芽孢杆菌的毒力因素中不包括A.荚膜抗原B.菌体抗原C.保护性抗原D.水肿因子E.致死因子'【答案】'.B112.关于外毒素的叙述,错误的是A.是活菌释放至菌体外的一种蛋白质B.由革兰阳性菌及少数革兰阴性菌产生C.性质稳定、耐热D.毒性强E.抗原性强'【答案】'.C113.我国饮用水的标准为1ml水中的细菌总数不超过A.50B.100C.150D.200E.300'【答案】'.B114.紫外线杀菌的最佳波长是:A.180~220nmB.240~280nmC.300~350nmD.355~400nmE.100~150nm'【答案】'.B115.下列哪项不是无菌实验室所必需的A.无菌实验室应完全封闭B.定期进行彻底消毒C.进入无菌室应着隔离衣D.不进行常见临床标本的分离E.有超净工作台'【答案】'.A116.脑膜炎奈瑟菌需要在浓度为()的二氧化碳环境中才能良好生长A.3%~7%B.5%~10%C.10%~15%D.15%~20%E.20%~25%'【答案】'.B117.纸片扩散法药敏试验中,MH平板的厚度应为A.1mmB.2mmC.3mmD.4mmE.5mm'【答案】'.D118.甲基红试验阳性结果为A.绿色B.黄色C.红色D.蓝色E.紫色'【答案】'.C119.下列不属于无菌动物特征的是A.在无菌环境中生长B.除肠道内有少量细菌外无微生物存在C.对各种病原体感受性相同D.体内不含有任何抗体E.自身不患感染性疾病'【答案】'.B120.在选择实验动物时,可以不考虑:A.动物的敏感性B.动物的品系C.动物的性别D.动物的年龄E.动物的颜色'【答案】'.E121.病原性细菌最适生长pH为A.7.2~7.6B.6.0~8.0C.8.4~9.2D.9.0~10.0E.4.0~6.0'【答案】'.A122.细菌的革兰染色性不同主要是由于下列哪种结构不同A.细胞核B.细胞壁C.细胞膜D.细胞质E.胞质内含物'【答案】'.B123.细菌鞭毛的作用主要是A.与抵抗力有关B.与分裂繁殖有关C.与运动有关D.与黏附有关E.与变异有关'【答案】'.C124.能维持细菌固有外形的是A.细胞核B.细胞壁C.细胞膜D.细胞质E.中介体'【答案】'.B125.下列哪种菌种保存方法是目前最有效的保存方法A.普通琼脂斜面保存法B.半固体穿刺保存法C.干燥保存法D.冷冻干燥保存法E.脱脂牛奶保存法'【答案】'.D126.二级生物安全防护水平主要研究的对象为A.通常不引起健康成人疾病的第四类危害的微生物B.第三类(少量二类)危害的致病微生物C.第二类(少量一类)危害的致病微生物D.第一类危害的致病微生物E.以上均是'【答案】'.B127.患者血清检查HBsAg阳性、抗HBs阴性、HBeAg阳性、抗HBe阴性、抗HBclgM阳性,临床意义为A.急性乙型肝炎B.慢性迁延性肝炎C.慢性乙型肝炎D.乙型肝炎恢复期E.慢性活动性肝炎'【答案】'.A128.某患者因急性高热、休克,由家人送入医院就诊。
环境微生物自动鉴定系统比较
环境微生物自动鉴定系统比较摘要:随着微生物学的迅速发展,自动化微生物鉴定系统由于其快速简便的优势引起了人们的兴趣,近年来相继出现了一些自动鉴定系统,如VITEK系统,MicroScan系统,PHOENIXTM系统,MicroScan系统,MIDI系统,Biofosun系统微生物鉴定仪等。
关键词:鉴定系统;种属关系1.VITEK全自动微生物检测系统VITEK是先进的微生物自动鉴定系统,具有高度的特异性、敏感性和重复性,系统可联机孵育、定时扫描、自动分析,操作简便,人为误差小。
可鉴定405种细菌其中:GPI卡可鉴定凝固酶阳性和阴性的葡萄球菌、肠球菌等51种;GNI+卡可鉴定肠杆菌科、弧菌科和非发酵菌等116种;NFC卡可鉴定不动杆菌、气单胞菌、产碱杆菌等42种;YBC卡可鉴定假丝酵母(念珠菌)、红酵母等34种;ANI卡可鉴定放线菌、梭菌等94种;BAC卡可鉴定芽胞杆菌21种;NHI卡可鉴定奈瑟氏菌、嗜血杆菌等47种。
2.MicroScan系统MicroScan系统有由主机、真空加样器、孵育箱/读取器、计算机、打印机等组成。
除采用传统呈色反应法外,同时采用敏感度极高的快速荧光测定技术来检测细菌胞外酶,鉴定板有普通板和快速板两种,普通板获得结果需要16~18h,快速板测定只需2~3.5h。
该系统有8种鉴定反应板,可鉴定包括革兰阴性菌、革兰阳性菌、厌氧菌、酵母菌、嗜血杆菌和奈瑟菌等近800种细菌。
药敏部分采用比浊法进行测定,90%菌株可在5.5h内获得对17~33种抗菌药物的MIC值。
3.PHOENIXTM系统PHOENIXTM?系统是新一代全自动快速细菌鉴定/药敏系统,由BD公司生产。
鉴定试验采用BD专利荧光增强技术与传统酶、底物生化呈色反应相结合的原理。
仪器由主机、比浊仪、微生物专家系统等组成。
有PHOENIXTM?100或50二种型号。
PHOENIXTM?100型分别可进行100个鉴定试验和100个药敏试验。
脂肪酸测定步骤
细胞脂肪酸组成分析Sherlock Microbial Identification System(MIS)就是一套由美国MIDI公司开发成功的微生物鉴定自动化系统,该系统操作安全、简单、快速,实验成本也相对较低。
它主要根据不同种类微生物细胞膜中磷脂脂肪酸(Phospholipid fatty acid,PLFA)的类型和含量具有种的特异性、指示性和遗传稳定性等特殊性能对微生物进行全自动鉴定和分析,该系统备有图谱识别软件和迄今为止微生物鉴定系统中最大的数据库资源,包括嗜氧菌1 100余种,厌氧菌800余种,酵母菌和放线菌约300种,共计超过2 200种。
一、仪器设备安捷伦6 890N气相色谱、Sherlock MIS系统、旋转式混合振荡仪、水浴锅、XW.80A旋涡混合器、10 IIll带聚四氟乙烯塞的玻璃瓶等。
所有的玻璃器皿均需在马福炉中400~C烘烤1 h。
二、培养基MIDI推荐培养基--TSBA培养基:加热混合溶解30 g胰蛋白胨大豆肉汤(Tryptiease soy broth,TSB)、15 g琼脂(Granulated ar)和1 L去离子水制成。
三、配置试剂(所有有机试剂均为HPLC级,无机试剂均为优级纯)溶液I(皂化试剂):混合150 ml水和150 ml甲醇,加入45 g NaOH,同时搅拌至完全溶解。
溶液II(甲基化试剂):325 ml 6 mol L 的盐酸加入到275 ml甲醇中,混合均匀。
溶液III(萃取试剂):加200 ml甲基叔丁基醚到200 ml正己烷中,混合均匀。
溶液IV(碱洗液):在900 ml去离子水中加入10.8 gNaOH,搅拌至完全溶解。
溶液V(饱和NaC1溶液):在100 ml去离子水中加入40 g NaC1。
四、实验方法试验方法主要参照MIDI操作手册,即在培养基上28℃恒温培养细菌24 h后取菌,通过提取和分离细菌细胞膜中的磷脂脂肪酸(PLFA),甲基化后进行气相色谱鉴定分析。
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➢ Cost ~$30.00 per sample for consumables ➢ Large environmental libraries, small clinical libraries ➢ Requires proprietary PCR reagents ➢ Extract to identification= 5 to 7 hours ➢ Difficult to use
GC-FAME 的优点
+ 色谱分析技术成熟,准确性高 + 重现性很高 + 自动化程度高,操作简便 + MIDI对所有菌属采用相同的标准程序 + 消耗品成本低 + 系统设备耐用,易维护 + No GC experience necessary
Sample Preparation
Standard Extraction Procedure
具有代表性的鉴定性特征峰
杆状菌 16:1w7c Alcohol; Iso 17:1 w 10c
黄质菌属
15:0 Iso 3OH
Weeksella
17:0 Iso 3OH
Cytophaga
Methylobacterium 18:1 w7c> 65%
棒状杆菌
TBSA
Microaerophils >70% 18:1 w 9c
40 A
fatty acids
Fatty Acid Naming
饱和的 不饱和的
环丙烷
16:0 16:1 w7c
17:0 环丙烷
O OH
O OH
O OH
Fatty Acid Naming
支链
带有羟基的 3OH
17:0 Anteiso 10:0 3OH
O OH
OH O OH
• Gram (-) bacteria 的脂多糖
PLFA分析的应用
研究因素
研究对象
有机物种类 有机物含量
水分条件 酸碱度 温度 施肥 农药 灌溉 污染
土壤 地表水 植物体内
微生物群落
细菌 霉菌 酵母 放线菌
研究目的
多态性分布 群落结构变化 微生物量变化
MIDI-PLFA联用应用技术
MIDI系统分析磷脂脂肪酸(PLFA)成分 原理:通过色谱等方法得到细菌样品脂肪酸谱图
格兰氏阴性 Straight chain Unsaturated 羟基 * Cyclopropane Iso/Anteiso
格兰氏阳性 Straight chain Unsaturated Iso/Anteiso *
生态龛位效应
Environmental
Clinical
Burkholderia cepacia 假单胞
,通过对比或者软件分析得到相关结论。
应用:分析环境影响因素如酸碱度、有机物含量 、水份和温度等和环境来源微生物多样性变化 的因果关系。
MIDI系统是目前唯一能做此类研究的产品,是鉴定环 境微生物分布最可靠的研究工具
细菌特征性标志物
标志物
DNA
单体
核苷
种类
4
应用
测序
Protein 碳水化合物
PLFA
Fatty acid profiles of same species are different based on ecological niche (Clinical vs. Environmental). MIDI has both Clinical and Environmental libraries.
Biomarker的种类
Chemical marker
脂肪酸、类脂、磷 脂、多糖和醌类
所有细 菌共有
细菌分 类鉴定
分枝菌酸
分枝杆菌属、诺卡氏菌属、棒状 杆菌属和红球菌属等的分类鉴定
DPA
鉴别芽孢与繁殖体
蛋白质和核酸
细菌和病 毒共有
DPA: 2,6-吡啶二羧酸
病毒和细 菌的鉴定
Microbial Identification Systems
➢ Biochemical-based systems (Biolog)
➢ Cost ~$10.00 per sample for consumables ➢ Large clinical libraries, small environmental libraries (Biolog is reversed) ➢ Not good for Bacillus species ➢ Requires proprietary test cards, gram stains & offline tests ➢ Extract to identification= 2 to 24 hours
400种
> $10/样本,鉴定卡、试剂、 孵化器等耗材贵,一次性使 用
活菌
2-18小时
比浊器,VITEK系统的读取 设备,通用性差,色度分析 不如气相色谱分析结果好
< 50 种菌/天
需要革兰式染色
生化试剂不稳定,需要冷藏
生化试剂存在过期问题
Plasmids and Mutations
Burkholderia cepacia
Sherlock GC-FAME Libraries
Standard Extraction Procedure
➢ Aerobic Bacteria Libraries
➢ Clinical = 590 species ➢ Environmental = 900 species
➢ Anaerobic Bacteria Library
➢ Gas chromatography + fatty acid analysis (MIDI)
➢ Cost under $2.00 per sample for consumables ➢ Large environmental and clinical libraries ➢ Good with Bacillus species- 42 Bacillus species in libraries ➢ Requires no proprietary test cards, no gram stain & no offline tests ➢ Extract to identification= 9 to 20 minutes
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➢ Saponification
➢ Kills bacteria, forms sodium salts of the fatty acids
➢ Methylation
➢ Formation of fatty acid methyl esters (FAMEs)
➢ Extraction
➢ Extraction of FAMEs into organic layer
➢ 925 species
➢ Yeast Libraries
➢ 215 species
➢ Mycobacteria Library
➢ 31 species, including M. tuberculosis ➢ Not as sensitive as MIDI’s Sherlock
Mycobacteria Identification System
➢ Base Wash
➢ Clean up FAMEs, prepare for Agilent GC
Sherlock Microbial Identification
Standard Extraction Procedure
Culture
Saponification & Methylation
Extraction
2-D Plot
25 ED2
40 ED2
12 ED2 Same Strain
MIDI系统对不同土壤样品中微生物 群落结构的聚类分析结果
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北京华新安科科技有限公司
销 售 部:吴亚城 联系方式:15811041704
© 2004 MIDI, Inc.
MIDI Sherlock全自动微生物脂肪 酸分析技术
微生物鉴定系统
• 安捷伦 6850/7890 GC • 安捷伦 ChemStation • MIDI’s Sherlock 模式识别软件 • MIDI’s 微生物数据库
没有时间限制
真菌库较强
1800多种 > $10/样本,鉴定卡、试剂、 孵化器等耗材贵,一次性使 用 活菌 16-24小时 手动系统菌库小,分析速度 慢,人为判断误差大;自动 系统价格昂贵 < 50 种菌/天 需要革兰式染色
生化试剂不稳定,需要冷藏 生化试剂存在过期问题
强项是药敏生化鉴定,菌库 小,少量的临床常见菌
PLFA分析的原理
脂肪酸(Fatty acid, FA)是活体微生物细胞膜的重要组分, 不同类群的微生物能通过不同的生化途径合成不同的脂 肪酸。脂肪酸作为生物标记物表征微生物量和微生物群 落结构等变化,因此通过测定脂肪酸成份就可以推出微 生物的信息。 主要有以下应用:
1. 土壤微生物分析 2. 地表水微生物分析 3. 植物宿主微生物多态性分析