植物细胞染色体标本的制作

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植物细胞染色体标本的制作与观察-教案

植物细胞染色体标本的制作与观察

1. 实验背景与原理

染色体的研究在生物进化、发育、遗传和变异中都有十分重要的作用。因此，染色体标本的制备技术是遗传学、细胞生物学、染色体工程、分类学等众多学科的基本实验技术。物种细胞内染色体数目、形态、长度等信息的总和根据实验的观察和测量绘制成的模式图称为核型（karyotype）。核型分析在物种亲缘鉴定，染色体变异分析，杂种分析，细胞分裂过程分析，孤雌生殖等研究中均有重要的作用。

染色体标本的常规制片方法有切片法、涂片法、压片法、滴片法（空气干燥法）等。压片法操作简单，是常用的植物染色体标本制备的方法。不过，该法在制备中要注意避免压片所造成的染色体的扭曲、变形和丢失的现象。

染色体制备的重要环节如下：

（1）取材：应取分生旺盛的组织或细胞。在植物中通常取根尖，在分裂高峰时取材，可得到大量分裂相细胞。而在动物细胞中通常选取骨髓等分裂活跃的细胞，或是植物血球凝集素等刺激下的淋巴细胞，也可选取分裂旺盛的体外培养的癌细胞或转化细胞等。

（2）预处理：使用秋水仙胺等药品破坏纺锤体形成，不但可得到大量分裂相细胞，而且可使染色体缩短变粗，有利于观察。

（3）固定：渗透力强的固定液将细胞迅速杀死，蛋白质沉淀，并可尽量保持细胞原有状态。

（4）解离或低渗：植物细胞要除去细胞间的果胶层，并使细胞壁软化，从而使细胞得以膨胀，为染色体的分散提供了空间。常用解离方法有酸解法和酶解法。动物细胞无细胞壁，通常不需解离，而是用低渗液使细胞膨胀。

（5）染色体分散：通过压片、滴片等机械力量使染色体分散, 有利于观察。2. 实验目的

实验一染色体玻片标本的制作与染色体观察培训资料

配方Ⅱ：改良石碳酸品红
取配方Ⅰ石碳酸品红染色液2-10毫升，加入90-98毫升45％的醋酸和1.8克山梨醇(sorbitol)。此染色液初配好时颜色较浅，放置二周后，染色能力显著增强，在室温下不产生沉淀而较稳定。
五、实验说明
1. 根尖取材方便，是观察植物染色体最常用的材料，也可以用茎尖作为材料。 2. 植物细胞分裂周期的长短不同，在十到几十小时之间，温度影响分裂周期，对于一个不太熟悉的实验材料，最好在特定温度下长根，掌握有丝分裂高峰期，以便得到更多的有丝分裂的细胞。 3. 前处理的目的是降低细胞质的粘度，使染色体缩短分散，防止纺锤体形成，让更多的细胞处于分裂中期，一般在分裂高峰前，把根尖放到药剂中处理3-4 小时。可处理的药剂很多，如秋水仙素、对二氯苯、8-羟基喹啉等。 4. 解离的目的是使分生组织细胞间的果胶质分解，细胞壁软化或部分分解，使细胞和染色体容易分散压平，解离方法有酸解法和酶解法。
实验一染色体玻片标本的制作与染色体观察
辽宁师范大学生命科学学院张剑锋
一、实验原理
植物根尖的分生细胞的有丝分裂，每天都有分裂高峰时间(am9, pm3)，此时把根尖固定，经过染色和压片，再置放在显微镜下观察，可以看到大量处于有丝分裂各时期的细胞和染色体。
二、实验目的
根尖染色体压片法是观察植物染色体最常用的方法，也是研究染色体组型、染色体分带、染色体畸变和姊妹染色单体交换的基础。

实验十二-去壁低渗法制备植物染色体标本

玉米根尖 2n=2x=20
水稻根尖 2n=2x=24
五、作业
• 比较动植物低渗法制作染色体玻片的异同。
谢谢大家！
三、实验材料
• 水稻（Oryza sativa）、玉米(Zea mays)、蚕豆（Vicia faba）、豌豆(Pisum sativum) 种子或洋葱(allium cepa)鳞茎。
四、实验器具与药品
• ⒈器具：恒温培养箱，显微镜，载玻片，酒精灯。
• ⒉药品试剂：对二氯苯饱和溶液，甲醇，冰醋酸，70%酒精，纤维素酶，果胶酶， Giemsa原液，1/15mol/L(pH6.8～7.2)， 0.075mol/L KCl。
实验十二-去壁低渗法制备植物染色体标本
一、实验目的
1.了解植物细胞周期中染色体的动态变化。 2.学习去壁低渗火焰干燥法进行植物染色体制片的基本原理和方法。
二、实验原理
• 植物染色体的常规压片技术在植物细胞遗传学研究中发挥了重要作用, 特别是许多植物的染色体计数和组型分析都是用这种方法完成的,但这种方法也存在一定缺陷,如染色体很难完全散开,容易产生重叠、变形、断裂，影响显带结果等，给核型分析增加了不少困难。另外，在当前植物染色体Giemsa分带研究中，由于压片法很难完全除掉细胞质及细胞壁对染色体的覆盖，因而常常造成Giemsa带可重复性较低，使植物染色体Giemsa分带研究受到一定的影响。其次，由于植物染色体处理方法尚不理想，影响到亚显微结构的研究。因此改革植物染色体压片法是促进植物染色体的研究，特别是植物染色体Giemsa分带和亚显微结构研究的重要关键。20世纪70年代以来，一些从事植物染色体研究的学者，参照动物及人类染色体标本制备技术，开展了对植物细胞去壁、低渗、火焰干燥方法的研究，取得了很好的结果，目前这种方法已广泛用于染色体计数、组型分析、显带、显微操作、原位杂交等分子细胞遗传学研究领域。

常规压片法制作植物染色体玻片标本

一、实验目的

1、了解植物细胞周期中染色体的动态变化。

2、学习植物染色体常规压片技术。

二、实验原理

植物染色体的常规压片技术是观察染色体常用的方法。该技术以生长、分裂比较旺盛的植物根尖细胞为材料，经预处理、固定、解离、染色、压片等程序，就可以观察到较多的处于有丝分裂中期的细胞和染色体。

三、实验材料

洋葱鳞茎或蚕豆种子。

四、实验器具及药品

恒温培养箱，恒温水浴锅，显微镜，解剖器，载玻片及盖玻片，白瓷盘，秋水仙素，甲醇，冰醋酸，盐酸，乙醇，改良石炭酸品红（卡宝品红）。

卡宝品红染色液的配制：

先配母液A 和B。

母液A：称取3 克碱性品红，溶解于100 毫升的70％酒精中（此液可长期保存）。

母液B：取母液A10 毫升，加入90 毫升的5％石碳酸水溶液，充分混匀，置37℃温箱温溶2-4小时（2 周内使用）。

母液C：取母液B55 毫升，加入6 毫升冰醋酸和6 毫升37％的甲醛。充分混匀。

染色液：取母液C10—20 毫升，加入80—90 毫升45％的醋酸和1.0 克山梨醇（sorbitol）。此染色液初配好时颜色较浅，放置二周后，染色能力显著增强，在室温下不产生沉淀而较稳定。常温下可保存2年。

五、实验说明

1.根尖由于取材方便，是观察植物染色体最常用的材料，有些植物种子难以发芽，或仅有植株而无种子，也可以用茎尖作为材料。

2.植物细胞分裂周期的长短不尽相同，通常在十到几十小时之间，温度明显地影响分裂周期，对于一个不太熟悉的实验材料，最好在特定温度下长根，掌握有丝分裂高峰期，以便得到更

实验四植物染色体标本的制备与观察

一、实验目的

1、掌握常规压片法制备植物染色体标本。

2、了解中期染色体的形态和结构以及染色体的生物学意义。

二、实验原理

染色体是细胞分裂时期遗传物质存在的特定形式，是染色质紧密包装的结果，对染色体的观察在研究生物进化、发育、遗传和异变中有十分重要的作用。

植物染色体标本的制备，常用分生组织如根尖、茎尖和嫩叶做材料。常规压片法仍是当今观察植物染色体常见的方法，其程序包括取材、预处理、固定、解离、染色和压片等步骤，简单易操作，但是染色体易变形、难分散开。

三、实验仪器、材料和试剂

（一）仪器、用具：显微镜、剪刀、镊子、刀片、培养皿、滤纸、吸水纸、青霉素瓶、染色缸、载玻片、盖玻片、玻璃板、酒精灯。

（二）材料：蚕豆(Vicia faba, 2n=2x=12)、黑麦(Secale cereale, 2n=2x=14)、大麦(Hordeum sativum, 2n=2x=14)、普通小麦(Triticum aestivum, 2n=2x=42)、玉米(Zea mays, 2n=2x=20)、豌豆(Pisum sativum, 2n=2x=14)、洋葱（Aillum cepa，2n＝16）等根尖。

（三）试剂

1、Carnoy固定液、1%秋水仙素(或对二氯苯)。

2、苯酚品红染色液。

四、实验方法与步骤压片法制备染色体标本：

(1) 取材：把蚕豆种子预先浸泡12h，然后转入垫有湿润滤纸的培养皿中上面蒙上湿纱布，置25℃温箱中暗培养发根，经过48h后幼根长至1—2cm左右，于上午9—11时剪下根尖。

去壁低渗法制备植物染色体标本

一、实验目的 1、掌屋植物染色体标本的去壁低渗方法 2、了解中期染色体的形态结构
二、实验原理：

植物细胞有很坚实的细胞壁，染色体很难像动物染色体那样平整地贴在载玻片上，可通过纤维素酶和果胶酶处理去掉细胞壁；用低渗溶液处理可以提高染色体的分散程度。陈瑞阳等（1979，1982）提出了植物染色体标本制备的酶解去壁低渗法，并在多种植物上得到广泛应用，成为当前植物染色体研究中的重要方法。

1、材料培养：将玉米或大麦的种子充分浸种后，摆在铺有滤纸的培养皿内，在25℃温箱发芽培养 2、预处理：待根长至0.5-1cm时,切取根尖立即放入盛有1ml0.2%秋水仙素的小瓶中预处理2-3小时 3、前低渗：切取分裂旺盛的部分根尖（1mm），放入0.075mol/L氯化钾低渗液中，在25℃条件下处理30 分钟。以下可分两种方法进行处理

6、经过上述两种方法处理的材料,可用两种方法制备染色体标本 1）、第一种方法,涂片法: （1）固定：将后低渗好的材料，直接用甲醇：冰醋酸（3：1）固定液固定30分钟以上（2）涂片：将材料放在预先用蒸馏水浸泡并冷冻的清洁载玻片上，加1滴固定液，然后用镊子迅速将材料夹碎涂布，并去掉大块组织残渣（3）火焰干燥：立即将载玻片在酒精灯火焰上微微加热烤干（4）染色：经干燥的玻片标本，用Giemsa染色液染色30分钟，然后用自来水细流冲洗，甩干水珠空气干燥。

植物细胞染色体标本的制作

• 固定：卡诺固定液卡诺固定液4 ℃下固定 30 min后，用蒸馏水洗净。
4. 实验步骤
• 解离与洗涤：60 ℃水浴下 1 mol/L HCl解离 10 min；用蒸馏水清洗根尖组织。若洗不净，会影响染色。
4. 实验步骤
• 染色：用改良的石炭酸品红染色5 min，可直接在载玻片上进行。
染色前去掉分生区以后部分，保留根尖0.2~0.3 cm即可。
染色体分散：通过压片、滴片等机械力量使染色体分散, 有利于观察。
2. 实验原理
• 核型分析技术的应用 • 染色体标本制备的主要方法和环节
3. 实验材料与试剂
实验材料：市售大蒜与洋葱。仪器及用具：显微镜，冰箱，恒温水浴锅，载玻
片，盖玻片，剪刀，镊子，滤纸等
3. 实验材料与试剂
试剂： 1g/L 秋水仙胺解离液：1mol/L的盐酸。卡诺固定液：按甲醇:冰醋酸以3:1(体积分
微核
细胞核
染色体断裂
i
染色体数目变异
急性骨髓白血病 10、11号染色体间易位
染色人体涂染
2. 实验原理
• 核型分析技术的应用 • 染色体标本制备的主要方法和环节
2. 2 染色体标本制备的主要方法和环节
• 主要方法
低渗涂片法
压片法：植物根尖等组织
滴片法：动物细胞悬液
2.实验原理
主要环节原理

植物染色体的标本制备

目前，国内外常用的植物染色体制片技术可以分为两种，即压片技术和去壁低渗技术。Belling(1921)提出植物染色体压片技术后，压片已成为植物染色体研究中最广泛应用的常规技术；但是由于植物细胞有坚实的细胞壁，染色体很难象动物染色体那样平整地贴在载玻片上，Omura 和Kurata(1978)把植物原生质体技术应用到水稻染色体研究之中，用纤维素酶、果胶酶和0.075mol.L-1氯化钾处理取得了一定的进展，陈瑞阳等人（1979、1982）提出了植物染色体标本制备的酶解去壁低渗技术，并在多种植物上得到广泛应用，成为当今植物染色体研究中的重要方法。压片技术和去壁低渗技术在取材和预处理要求及其操作都是相同的，即两者的材料基础条件是相同的，但它们所采用的染色体分散方法是不同的。压片法是以人工外加机械压力使染色体分散，而去壁低渗法是用酶分解细胞壁，低渗液使细胞膜吸胀、水表面张力使染色体分开。两种技术各有其优缺点，前者操作快速简便、省材省时，后者染色体易于展开、且真实不变形，尤其是对成熟细胞多的植物组织，如芽、愈伤组织等材料有独到效果，本实验主要介绍去壁低渗染色体制片技术。

一、实验原理

植物根尖的分生细胞的有丝分裂，每天都有分裂高峰时间，此时把根尖固定，经过染色和压片，再置放在显微镜下观察，可以看到大量处于有丝分裂各时期的细胞和染色体。二、实验目的

根尖染色体压片法，是观察植物染色体最常用的方法，也是研究染色体组型、染色体分带、染色体畸变和姊妹染色单体交换的基础。学习醋酸洋红染色的具体操作方法，掌握植物有丝分裂制片技术，通过大量的制片观察，能比较快速准确地判断细胞有丝分裂前、中、后、末期的染色体图象，并对其典型制片照像。

染色体标本制作和观察实验报告

染色体实验报告

摘要：

本次实验旨在制作和观察染色体标本，通过显微镜观察染色体的结构和数量。实验过程中，我们成功制作了植物和动物染色体标本，并使用适当的显微镜对染色体进行了观察。通过实验结果，我们可以清楚地了解染色体的结构和数量。实验结果表明，植物细胞通常具有较大的数量和较小的染色体，而动物细胞通常具有较少的数量和较大的染色体。

引言：

染色体是细胞内的遗传物质，它们包含了个体的遗传信息。通过观察染色体的结构和数量，可以了解物种的特性和遗传模式。本次实验通过制作染色体标本和使用显微镜观察染色体，以探究染色体的结构和数量对不同物种的差异性。

材料和方法：

1.动物染色体标本制作：

-从一个动物个体中取得组织样本。

-在显微镜盖玻片上加入一滴减数分裂阻滞剂。

-使用细针将细胞群收集到玻璃滴管中。

-在玻璃滴管中加入一滴适当的染料，例如鲭鱼绿。

-轻轻将标本放在显微镜盖玻片上。

-使用显微镜观察染色体的结构。

2.植物染色体标本制作：

-从一个植物个体中取得组织样本。

-将组织样本切成细小片段。

-在细胞裂变诱导剂中浸泡组织片段。

-在显微镜盖玻片上加入一滴适当的染料，例如鲭鱼绿。

-轻轻将标本放在显微镜盖玻片上。

-使用显微镜观察染色体的结构。

结果：

我们制作了多个动物和植物染色体标本，并使用显微镜观察了它们的结构和数量。通过观察，我们发现植物细胞的染色体通常比较小，数量较大，而动物细胞的染色体通常比较大，数量较少。染色体呈现出普遍的线状结构，但也有一些不规则的染色体存在。

讨论：

根据实验结果，我们可以得出结论，植物和动物细胞的染色体在结构和数量上存在差异。这可能与物种的特点和遗传模式相关。植物细胞通常需要更多的遗传信息来适应复杂的环境，因此具有较大的数量和较小的染色体。相比之下，动物细胞通常需要更少的遗传信息，因此具有较少的数量和较大的染色体。

植物根尖染色体的制备

实验报告
在制片的过程中有哪些需要注意的问题？为什么在压片前需要先经过酸水解？植物染色体制备和动物染色体制备的相同点和主要区别。
Βιβλιοθήκη Baidu
预处理：切取长约5mm的植物根尖，浸入 0.1%秋水仙素中，室温下处理3~6小时
将根尖放入1mol/L的盐酸中，60℃水浴，恒温条件下解离10~15min。
解离后倒出HCl，水洗2次，每次3~5min。将材料直接浸入改良苯酚品红中，盖上盖玻片。
用镊子或铅笔轻轻敲打，使根尖细胞分散开。
实验结果
植物根尖染色体标本的制备
目的要求基本原理实验用品方法与步骤实验结果实验报告
目的要求
掌握植物染色体标本的制备技术
实验原理
制备植物细胞的染色体标本，在取材上必须选择细胞分裂较旺盛，而且取材较方便的组织作为实验材料。如植物的根尖。
实验用品
1、器材：显微镜、水浴锅、载玻片、盖玻片、镊子、刀片、烧杯等。 2、试剂： 0.1%秋水仙素；Carnoy固定液；1mol/L HCL；改良苯酚品红 3、实验材料：洋葱根尖

实验一植物有丝分裂标本制备与染色体核型分析学时

0.1％秋水仙碱，或饱和对二氯苯溶液，卡诺氏固定液，改良石炭酸品红染液，冰乙酸，甲醇，无水乙醇，95％乙醇，0.1％升汞，１mol/L盐酸。
五实验方法 1．发根
将蚕豆种子用0.1％升汞消毒10min，经流水冲洗，温水浸种浸泡1～2d后，置25℃恒温箱中发根。待主根长到2cm左右时剪去主根（须根系植物的种子发出的主根不需剪掉），让其充分长出侧根。待侧根长到1 ～2cm时，于适宜时间用蒸馏水洗净，将水吸干，剪取根尖0.5 ～1cm进行预处理。为获得尽可能多的分裂相，蚕豆根尖以上午9～10时剪取为宜。
2．预处理
将剪下的根尖立即放入0.1％秋水仙碱或饱和对二氯苯水溶液中，以药液浸没根尖为度，处理3～4h。抑制和破坏纺锤丝的形成，使根尖细胞延迟其染色体的分离，增加中期分裂相，并使染色体分散于细胞中，以便观察计数。
3．固定
材料经预处理后，用流水冲洗，然后投入卡诺液Ⅰ（3份甲醇∶1份冰乙酸，现配现用）中固定20～24h，用95％的乙醇洗两次，转入 70％乙醇中保存备用。固定的目的是将材料迅速杀死，并使染色体形态、结构尽可能保持不变和便于染色。
末期：分开在两极的染色体各自组成新的细胞核，在细胞质中央赤道板处形成新的细胞壁，使细胞分裂为二，形成二个子细胞。这时细胞进入分裂间期。
七作业１．制作细胞有丝分裂前、中、后、末各期的制片一张，中期应能数清染色体数。贴上标签，注明材料名称，染色方法，制片日期和制作者姓名。 2．绘制所观察到有丝分裂典型时期的染色体图像，并简要说明各时期染色体的行为变化和特征。

染色体标本制作与观察实验报告

一、引言

染色体是细胞核中的遗传信息携带体，它是由DNA和蛋白质组成的长丝状结构。染色体的数目、形态和大小等特征在不同物种和个体中是有差异的。本实验旨在通过染色体标本制作和观察，了解染色体的基本结构和分类。

二、实验材料

1.新鲜的玉米幼苗

2.醋酸

3.高锰酸钾

4.盐酸

5.电镜滴管

6.镜片和盖玻片

7.显微镜

8.实验室用具：手套、显微刀、移液器等

三、实验步骤

1.将新鲜的玉米幼苗准备好材料摆放在实验台上；

2.取一片净玻片，滴加一滴醋酸，然后用电镜滴管吸取一点玉米根尖细胞悬浮液，滴在玻片上；

3.将盖玻片慢慢压在悬浮液上，使悬浮液扩散均匀；

4.把制作好的染色体标本放在带有千倍放大倍数的显微镜下观察。

四、实验结果

将制作好的染色体标本放在显微镜下观察，可以清晰地观察到悬浮液

中的染色体结构。在玉米根尖细胞中，染色体呈为长条状丝状物，一般成

双出现。根据染色体的位置和大小可以将其分为四组，分别为A、B、C、

D组。

五、实验分析

根据观察结果可以得出以下结论：

1.染色体是由DNA和蛋白质组成的长丝状结构；

2.染色体的数目、形态和大小等特征在不同物种和个体中是有差异的；

3.在玉米根尖细胞中，染色体大多数成对出现，有些物种的染色体可

能会出现多倍体现象。

六、实验总结

通过本实验，我们成功制作了染色体标本并观察到了染色体的基本结

构和分类。染色体是细胞核中的遗传信息携带体，对于了解生物遗传学、

进化与变异等方面具有重要意义。然而，本实验只观察了玉米根尖细胞中

的染色体，染色体在不同组织和细胞中可能会有差异，需要进一步研究和

染色体标本制作与观察实验报告

染色体标本制作与观察实验报告实验报告：染色体标本制作与观察

一、实验目的

1.掌握染色体标本制作的基本原理和方法。

2.学习并掌握染色体观察的基本技巧和特点。

3.通过实验加深对遗传学基础知识的理解和应用。

二、实验原理

染色体标本制作是生物学实验中的一项基本技术，其目的是将细胞中的染色体以一种可见且易观察的形式展现出来。染色体观察有助于我们了解细胞分裂过程中染色体的行为和变化，进一步理解遗传物质的复制、分离和交换等基本过程。

本实验将通过植物根尖细胞的有丝分裂过程来制作染色体标本，并通过显微镜观察其形态和分布。

三、实验步骤

1.准备试剂和器材：碱性染料（如龙胆紫溶液）、生理盐水、镊子、滴管、载

玻片、盖玻片、显微镜等。

2.选取植物根尖：选择新鲜的植物根尖，长度约为5-10mm。

3.预处理：将根尖放入冰箱冷藏（4℃）约24小时，然后放入25℃的温水中

浸泡约6小时。

4.固定：用镊子将根尖取出，放入卡诺氏液中浸泡0.5-1小时，然后转移到

70%酒精中保存。

5.解离：将根尖放入1N的盐酸盐酸盐酸KOH溶液中，在60℃的水浴中解离10

分钟。

6.漂洗：用镊子取出根尖，用清水冲洗3次，每次5分钟。

7.染色：将根尖放在载玻片上，用滴管吸取龙胆紫溶液滴在根尖上，染色3-5

分钟。

8.制片：盖上盖玻片，避免产生气泡。然后在显微镜下观察。

四、实验结果与讨论

1.实验结果：通过显微镜观察到清晰的染色体形态，可以看到细胞分裂的不同

阶段，如前期、中期和后期。在中期可以看到染色体整齐地排列在赤道板

上，而在后期则可以看到染色体的分离和移动。这证明了实验方法的可行

植物染色体标本的制备与观察实验报告

实验七植物染色体标本的制备与观察一、实验目的

学习植物染色体标本的制备技术，掌握染色体的技术方法，了解染色体的生物学意义。

二、实验用品

Carnoy固定液、0.1%秋水仙素溶液、1mol/HCL、Schiff溶液、亚硫酸水溶液（漂洗液）、混合酶液（纤维素酶、果胶酶各1%-2%）、Carbor fuchsin(卡宝品红)染液配方1、配方2

三、实验方法

1.取材：将大蒜培养，待胚根长达1-2cm时。窃取0.5cm

长的根尖部分。

2.预处理：将切下的根尖浸入0.1%秋水仙素液中，室温下

处理3-4h

3.固定：取出根尖，投入Carnoy 液固定2-24h,换入70%

酒精，暂时保存

4.水解：把根尖投入预热的58-60℃1mol/HCL中，恒温下

水解14-15min.

5.染色：用配方2染5-10min

6.用蒸馏水西区多余染液

7.酶解:酶解20min左右

8.洗涤：用蒸馏水洗涤，除去残留酶液后加45%醋酸。

9.压片：将根尖置于载玻片上，滴半滴45%醋酸，盖上盖

玻片，压片

10.镜检

四、实验结果及分析

这是用大蒜根尖所制的玻片观察到的，只能看到被染色的核，但未能清晰观察搭配中期分裂相中染色体的排列。

分析实验失败原因如下：

1.处理时间不对，处理时细胞未处于分裂

中期

2.所用试剂配的有问题，导致最终只能看

到核被染色，但看不到中期染色体的清晰排布。

植物染色体标本的制备和观察

摘要：目的1、掌握常规压片法制备植物染色体标本的基本原理和方法；2、学会观察和统计植物细胞的染色体数目；3、了解和学习去壁低渗法进行植物染色体制片的基本原理和方法。方法大蒜的根尖是分裂比较旺盛的，我们可以利用秋水仙素处理根尖使得大蒜根尖的细胞分裂处于分裂中期，然后经固定染色等处理将染色体染色固定，以便观察。结果大蒜的染色体有16条，都被染色成红色的条状或细丝状物质。结论大蒜染色体有16条。

关键词：植物染色体；大蒜；秋水仙素

前言

染色体是遗传物质的载体，本实验便是观察染色体的形态和数目。植物染色体标本的制备，常用分生组织，如根尖、茎尖和嫩叶做材料。常规压片法仍是当今观察植物染色体常用的方法。其程序包括取材、预处理、固定、解离、染色和压片等步骤，即可观察到较多的、处于有丝分裂中期的细胞和染色体。由于现在洋葱发根较难，我们采用的是大蒜根尖进行相关实验。

材料与方法

1.实验材料

大蒜根尖、白姜花的根尖、野百合的根尖等。

2.实验试剂：

0.02%秋水仙素；改良苯酚品红染液；卡诺氏固定液，1N盐酸，浓盐酸：95%乙醇（1:1）解离液。

3. 实验用具

显微镜、剪刀、镊子、刀片、培养皿、吸水纸、滴管、载玻片、盖玻片。

4.实验植物和试剂

大蒜根尖、 0.02%秋水仙素；改良苯酚品红染液；卡诺氏固定液，1N盐酸；70%酒精；95％乙醇；85％乙醇；蒸馏水

5.实验方法和步骤

5.1 取材先将大蒜浸泡若干小时，然后转入一个垫有湿润滤纸的培养皿中，置25℃恒温培养箱中萌发，待幼根长至1~2cm时，于上午9~11时剪下根尖。

实验一植物根尖染色体标本的制备与观察

细胞周期
Cell cycle
分裂间期
interphase
DNA合成前期（ Gap1,G1 ） DNA合成期（DNA synthesis, S）
DNA合成后期（Gap2,G2）
前期 (prophase)
核分裂
Nuclear division
前中期 (prometaphase) 中期 (metaphase) 后期 (anaphase)
三、实验用品
• 1、器材：显微镜、水浴锅、载玻片、盖玻片、镊子、刀片、烧杯等。
• 2、试剂： 0.1%秋水仙素；0.002mol/L 8-羟基喹啉（称取0.2901g 8-羟基喹啉定溶于容量瓶中，60℃水浴溶解）； Carnoy固定液（3份95%乙醇∶1份冰乙酸）； 1mol/L HCL；改良苯酚品红
• 减数分裂：DNA复制一次，细胞连续分裂两次。
– 通常减数分裂I分离的是同源染色体，所以称为异型分裂（ heterotypic division）或减数分裂（ reductional division）。
– 减数分裂II分离的是姊妹染色体，类似于有丝分裂，所以称为同型分裂（homotypic division）或均等分裂（equational division）。
五、注意事项
• 1、取材要取分生区，尽量要小，避免细胞紧贴在一起，致使细胞和染色体没有伸展的余地；

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