植物细胞染色体标本的制作

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植物染色体标本制备的注意事项

植物染色体标本制备的注意事项

植物染色体标本制备的注意事项哟,做植物染色体标本制备可真是个不容易的活儿嘿!得确保使用的植物标本新鲜嘿,不然染色体可能已经破损或者变形了,那可就没法制备出好的标本来了唉。

得小心翼翼地处理植物组织咯,不能随便乱动,要避免在处理过程中让染色体受到损伤,否则后面的工作就得从头再来了咦。

接着,制备标本的时候要特别注意染色体的展平嘿,为了确保染色体在显微镜下能清晰可见,得用一些特殊的技术让它展开嘿,可不能偷懒哟,不然看不清楚的话也白搭了。

嘿,还得注意染色体的染色过程呢,得用适当的染色液来染色,而且时间和温度都得控制得宜,这样才能让染色体呈现出鲜明的颜色来,哎,一不小心就可能把染色搞砸了,到时候可得重新来过呀。

嗨,最后一步要对染色后的标本进行配浆和封片,这个过程又得小心翼翼,不能让标本弄得太干或者太滴水不留,这样才能保证标本的保存质量呢。

植物染色体标本制备是一项需要细心、耐心和技术的工作咯,不过只要注意好每一个步骤,相信大家都能成功制备出漂亮的标本来,加油哟!。

实验七 植物染色体标本的制备与观察实验报告(1)

实验七 植物染色体标本的制备与观察实验报告(1)

细胞及遗传学实验报告陈香燕201008030103 生科1班实验七植物染色体标本的制备与观察(一实验目的学习植物染色体标本的制备技术,掌握染色体的技术方法,了解染色体的生物学意义。

(二实验原理植物染色体标本的制备,常用分生组织,如根尖、茎尖和嫩叶做材料。

常规压片法仍是当今观察植物染色体常用的方法,其程序包括取材、预处理、固定、解离、染色和压片等步骤。

由于秋水仙素可以阻断细胞在分裂中期纺锤体(微管二聚体的形成,以至于不能拉动染色体分开向细胞两极,因此可以使细胞分裂停止在分裂中期,再经过染色,压片,镜检之后便可观察到细胞的染色体形态。

(三实验用品一、材料:蚕豆二、试剂1.Carnoy固定液2.0.1%秋水仙素溶液3.1mol/L HCl4.Schiff试剂5.亚硫酸水溶液(漂洗液6.Carbor fuchsin (卡宝品红染液(四实验方法步骤1.取材:将蚕豆种子培养在培养皿内的湿滤纸上,室温或28°C下发芽,待胚根长达1~2cm时,切取0.5cm长的根尖部分。

2.预处理:将切下的根尖浸入0.1%秋水仙素液中,室温下处理3~4h。

3.水解:把根尖投入预热的58~60°C 1mol/L热HCl中,恒温条件下水解14~15min4.染色:倒去热HCl,滴加卡宝品红少许,染色5~10分钟。

5.洗涤:吸去卡宝品红试剂,用蒸馏水换洗2~3次,每次1~2min。

除去残留染色液后加几滴45%醋酸。

6.压片:用吸管从醋酸中吸取材料,置干净载玻片上,材料周围保留半滴45%醋酸,盖上盖玻片,其上放一片吸水纸。

左手指压住吸水纸的左边,右手指从吸水纸的左端向右方轻轻抹去,再用铅笔擦头从盖玻片上轻轻敲打,使细胞均用散开。

7.镜检:把压好的片子放在显微镜下,先观察细胞分散状况和中期分裂相的多少,再检查分裂中期细胞中染色体是否完全散开。

如若染色体分散不好而难以分辨和计数,可取下片子,平放桌面上,用手指隔着吸水纸在盖玻片上稍施压力,如果操作细心,用力适度,便可很容易得到染色体分散良好的压片标本,供观察,计数和照相用。

染色体标本制备流程

染色体标本制备流程

染色体标本制备流程下载温馨提示:该文档是我店铺精心编制而成,希望大家下载以后,能够帮助大家解决实际的问题。

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常规压片法制作植物染色体玻片标本

常规压片法制作植物染色体玻片标本

常规压片法制作植物染色体玻片标本一、实验目的1、了解植物细胞周期中染色体的动态变化。

2、学习植物染色体常规压片技术。

二、实验原理植物染色体的常规压片技术是观察染色体常用的方法。

该技术以生长、分裂比较旺盛的植物根尖细胞为材料,经预处理、固定、解离、染色、压片等程序,就可以观察到较多的处于有丝分裂中期的细胞和染色体。

三、实验材料洋葱鳞茎或蚕豆种子。

四、实验器具及药品恒温培养箱,恒温水浴锅,显微镜,解剖器,载玻片及盖玻片,白瓷盘,秋水仙素,甲醇,冰醋酸,盐酸,乙醇,改良石炭酸品红(卡宝品红)。

卡宝品红染色液的配制:先配母液A 和B。

母液A:称取3 克碱性品红,溶解于100 毫升的70%酒精中(此液可长期保存)。

母液B:取母液A10 毫升,加入90 毫升的5%石碳酸水溶液,充分混匀,置37℃温箱温溶2-4小时(2 周内使用)。

母液C:取母液B55 毫升,加入6 毫升冰醋酸和6 毫升37%的甲醛。

充分混匀。

染色液:取母液C10—20 毫升,加入80—90 毫升45%的醋酸和1.0 克山梨醇(sorbitol)。

此染色液初配好时颜色较浅,放置二周后,染色能力显著增强,在室温下不产生沉淀而较稳定。

常温下可保存2年。

五、实验说明1.根尖由于取材方便,是观察植物染色体最常用的材料,有些植物种子难以发芽,或仅有植株而无种子,也可以用茎尖作为材料。

2.植物细胞分裂周期的长短不尽相同,通常在十到几十小时之间,温度明显地影响分裂周期,对于一个不太熟悉的实验材料,最好在特定温度下长根,掌握有丝分裂高峰期,以便得到更多的有丝分裂的细胞。

3.前处理的目的是降低细胞质的粘度,使染色体缩短分散,防止纺锤体形成,让更多的细胞处于分裂中期,一般在分裂高峰前,把根尖放到药剂中处理3—4 小时。

可处理的药剂很多,如秋水仙素、对二氯苯、8-羟基喹啉等。

4.解离的目的是使分生组织细胞间的果胶质分解,细胞壁软化或部分分解,使细胞和染色体容易分散压平,解离方法有酸解法和酶解法。

实验一 染色体玻片标本的制作与染色体观察

实验一 染色体玻片标本的制作与染色体观察
实验一 染色体玻片标本 的制作与染色体观察
辽宁师范大学生命科学学院 张剑锋
一、实验原理
植物根尖的分生细胞的有丝分裂,每 天都有分裂高峰时间(am9, pm3),此时把 根尖固定,经过染色和压片,再置放在显 微镜下观察,可以看到大量处于有丝分裂 各时期的细胞和染色体。
二、实验目的
根尖染色体压片法是观察植物染色体 最常用的方法,也是研究染色体组型、染 色体分带、染色体畸变和姊妹染色单体交 换的基础。
卡诺固定液的配制:3 份无水酒精,加1 份冰醋酸(现配现 用 )。 酶液的配制:以0.1mol/L 醋酸钠为溶剂,配成纤维素酶(2 %)和果胶酶(0.5%)的混和液。
染色液的配制: 配方Ⅰ:石碳酸品红(Carbol. fuchsin)染色液,先配母液A和B。 母液A:称取3克碱性品红,溶解于100毫升的70%酒精中(此液可 长期保存)。 母液B:取母液A 10毫升,加入90毫升的5%石碳酸水溶液(2周内 使用)。 石碳酸品红染色液:取母液B 45毫升,加入6毫升冰醋酸和6毫升 37%的甲醛。此染色液含有较多的甲醛,在植物原生质体培养过 程中,观察核分裂比较适宜,后来在此基础上,加以改良的配方 Ⅱ,称改良石碳酸品红,可以普遍应用于植物染色体的压片技术。 配方Ⅱ:改良石碳酸品红 取配方Ⅰ石碳酸品红染色液2-10毫升,加入90-98毫升45%的醋酸 和1.8克山梨醇(sorbitol)。此染色液初配好时颜色较浅,放置二周 后,染色能力显著增强,在室温下不产生沉淀而较稳定。
(四)压片:把染色后的根尖放在清洁的载玻片上,用解剖针 把根冠及延长区部分截去,加上少量染色液,并盖上盖玻片。 一个解离良好的材料,只要用镊子尖轻轻的敲打盖玻片,分生 组织细胞就可铺展成薄薄的一层,再用毛边纸把多余的染色液 吸干,经显微镜检查后,选择理想的分裂细胞,再在这个细胞 附近轻轻敲打,使重叠的染色体渐渐分散,就能得到理想的分 裂相,要达到这个目的,必需掌握以下几点: 1. 压片材料要少,避免细胞紧贴在一起,细胞和染色体没有伸 展的余地。 2. 用镊子敲打盖玻片时,用力要均匀,若在压片时稍不留意, 使个别染色体丢失,而被迫放弃一个良好的分裂相的细胞。 (五)封片:把压好的玻片标本,放在干冰或冰箱结冰器里冻 结。然后用刀片迅速把盖玻片和载玻片分开,用电吹风把玻片 吹干后,滴上油派胶加上盖玻片封片,或经二甲苯透明后,滴 中性树胶,加盖玻片封片,做成永久封片。

染色体标本的制备及组型观察 实验报告

染色体标本的制备及组型观察 实验报告

细胞生物学实验报告染色体标本的制备及组型观察1.实验目的:掌握染色体标本制作的基本方法;认识不同生物的染色体的状态,学会做染色体组型图。

2.实验用品:(1)仪器及器材:显微镜、载玻片、盖玻片、镊子、手术剪、解剖盘、胶头滴管、离心管、离心机、小烧杯、冰箱、酒精灯、小烧杯(1)实验药品:蒸馏水、0.9% NaCl溶液、0.3% KCl溶液,固定液(甲醇:冰醋酸=3:1)、秋水仙素(2)实验材料:小鼠3.实验原理:(1)制作染色体标本的意义:了解染色体的特征(形态、大小、数目)——绘制染色体组型图染色体组型:把真核动物一个体细胞各染色体按长度、形状、着丝粒位置排列成一定顺序。

染色体核型:某一物种特有的一组或一套染色体的形态特征。

(2)染色体组型图的应用①鉴别生物种类:兔44条;小鼠40条;大鼠42条;鸡78条;猫38条;狗78条;马64条②遗传病的诊断和研究:三体综合征(含三条21号染色体)、卵巢退化症(含45条染色体,比正常人缺少一条性染色体)、睾丸退化症(含47条染色体,比正常人多一条X或Y染色体)等因此,我们可以给孕妇抽取羊水检查器胎儿的染色体,做遗传病早期诊断。

(3)染色体标本的制作①观察:由于分裂期中期的染色体染色体凝集程度最高,因而我们应尽量使细胞停留在分裂期中期以便观察。

②细胞:为尽量看到多的染色体,我们应当选取具有旺盛分裂能力的细胞,这样的细胞可以来自:胸腺、骨髓、睾丸、小肠等。

我们在此实验中使用的是小鼠的精巢细胞。

在做人的染色体标本时,我们使用的是血液里的淋巴细胞。

③药物:PHA(植物细胞凝集素):PHA具有促进细胞凝集和分裂的作用。

PHA可以使血液中的淋巴细胞还原至淋巴母细胞(只存在于骨髓中)秋水仙素:秋水仙素可以破坏微管的组装,纺锤体不能形成,细胞分裂停在中期。

与秋水仙素作用相同的药物还有长春花碱、鬼臼素、苯环己烯等。

可以促进胃管组装的药物有紫杉酚、重水等。

④空气干燥:使细胞与染色体易于分离⑤低渗作用:水进入细胞内,细胞内容空间变大,染色体距离变大,易于分离、展平。

染色体标本制作和观察实验报告

染色体标本制作和观察实验报告

染色体标本制作和观察实验报告染色体实验报告摘要:本次实验旨在制作和观察染色体标本,通过显微镜观察染色体的结构和数量。

实验过程中,我们成功制作了植物和动物染色体标本,并使用适当的显微镜对染色体进行了观察。

通过实验结果,我们可以清楚地了解染色体的结构和数量。

实验结果表明,植物细胞通常具有较大的数量和较小的染色体,而动物细胞通常具有较少的数量和较大的染色体。

引言:染色体是细胞内的遗传物质,它们包含了个体的遗传信息。

通过观察染色体的结构和数量,可以了解物种的特性和遗传模式。

本次实验通过制作染色体标本和使用显微镜观察染色体,以探究染色体的结构和数量对不同物种的差异性。

材料和方法:1.动物染色体标本制作:-从一个动物个体中取得组织样本。

-在显微镜盖玻片上加入一滴减数分裂阻滞剂。

-使用细针将细胞群收集到玻璃滴管中。

-在玻璃滴管中加入一滴适当的染料,例如鲭鱼绿。

-轻轻将标本放在显微镜盖玻片上。

-使用显微镜观察染色体的结构。

2.植物染色体标本制作:-从一个植物个体中取得组织样本。

-将组织样本切成细小片段。

-在细胞裂变诱导剂中浸泡组织片段。

-在显微镜盖玻片上加入一滴适当的染料,例如鲭鱼绿。

-轻轻将标本放在显微镜盖玻片上。

-使用显微镜观察染色体的结构。

结果:我们制作了多个动物和植物染色体标本,并使用显微镜观察了它们的结构和数量。

通过观察,我们发现植物细胞的染色体通常比较小,数量较大,而动物细胞的染色体通常比较大,数量较少。

染色体呈现出普遍的线状结构,但也有一些不规则的染色体存在。

讨论:根据实验结果,我们可以得出结论,植物和动物细胞的染色体在结构和数量上存在差异。

这可能与物种的特点和遗传模式相关。

植物细胞通常需要更多的遗传信息来适应复杂的环境,因此具有较大的数量和较小的染色体。

相比之下,动物细胞通常需要更少的遗传信息,因此具有较少的数量和较大的染色体。

然而,本实验的主要限制在于只使用了一种染色剂来染色染色体,可能无法获取所有染色体的完整信息。

第一章染色体制片方法

第一章染色体制片方法
第一章 植物染色体制片技术
郭启高
染色体是细胞核中由DNA、蛋白质和少 量RNA组成的易被碱性染料着色的一种丝 状或杆状物。也是遗传物质的载体。它可 被苏木精、蕃红、结晶紫、吉姆萨、醋酸 洋红、地衣红和孚尔根染液等染色。染色 体为细胞中最重要的遗传结构。对染色体 的结构与功能的研究一直是细胞学、遗传 学中的重大课题。
在去壁低渗法中,既要使细胞壁完全被消 化,又要使染色体完好无损,掌握好酶解条 件,使之恰倒好处,便成为该步骤的技术难 点,为此,应注意如下几点:
(1)酶液浓度应控制在2.5%-5%,根 尖2.5%,幼叶、幼芽5%。
(2)酶解时间应视材料老嫩、大小和 种类而作变动,一般以3小时为基准。
(3)温度要恒定,通常用25-27℃ 。
1910年摩尔根研究果蝇的染色体以来,染色体研究 进入了鼎盛时期。
染色体的制作方法和技术始终是一大难关。在 E.B.Wilson的巨著((The Cell)的1947年版本中, H.de Winiwarter于1912和1921两次定的人的 二 倍 体 染 色 体 数 是 4 7 和 4 8 , T.S.PainLer 于 1921和1922定的数目,单倍体是24,二倍体是48。
注意:
(1)染色时间据材料而变,材料大或硬,延长至1小 时或更长。但不能太长,因HCL过度处理反而使染 色体着色困难。
(2)若染色太深,用45%乙酸压片,可达到适当分 色的效果。
(3)无论用1%乙酸地衣红或45%乙酸压片,之前均 不宜在酒精灯上加热,否则将褪色。
ห้องสมุดไป่ตู้(4)若压片之后,反差不好,细胞质着色太深,则 可在酒精灯上微热以适度褪色,增加反差。
➢ 放线菌酮(cycloheximide),适宜早中期染 色体供核型分析和G-带研究。20-50ppm, 小染色体用低浓度,大染色体用高浓度

植物染色体标本制备的注意事项

植物染色体标本制备的注意事项

植物染色体标本制备的注意事项
1. 取材可得选对咯!就像你去挑衣服,得选合适的呀。

可别随随便便拿个植物就开始,一定要找生长旺盛、细胞分裂活跃的部位,不然怎么能制备出好的标本呢?比如说洋葱根尖就很不错哟!
2. 预处理很重要哇!这就好比给植物来个“美容前奏”。

不处理好,后面的步骤可就难搞啦。

比如固定的时候,时间和试剂都得掌握好,不然效果会大打折扣呀!
3. 解离也得小心呐!这可不能乱来,就跟拆玩具一样,得有技巧。

要是解离过度或者不足,都会出问题的嘞,怎么能看清染色体呀!就像切菜,不能切得太碎或太粗嘛!
4. 染色也有讲究滴!染色剂可不能乱选乱涂呀,那可是染色体的“华服”呢。

要选对染色剂,均匀上色,不然怎么能让染色体美美的展示出来呢,你说是不是?
5. 制片的时候轻点哟!千万别毛手毛脚的,这就像对待宝贝一样得小心翼翼。

压片要是太用力,把细胞都弄破了咋办呀?那不等于白忙啦!
6. 观察得仔细呀!这可是关键时刻呢,你得瞪大眼睛好好找。

别找半天啥都没看到,那不就悲剧了嘛!就好像找你丢了的东西一样,得仔细点呀!
7. 保持环境清洁呀!这可不是小事哦,脏兮兮的怎么能做出好标本呢?难道你能在垃圾堆里找出宝贝不成?所以一定得注意环境哦!
8. 操作得规范呐!每一步都要严格按照要求来,不能偷懒也不能乱搞哟!这就像走钢丝,一步错步步错呀!
总之,植物染色体标本制备可不能马虎,每个环节都得认真对待,这样才能成功呀!。

植物细胞染色体标本的制作与观察

植物细胞染色体标本的制作与观察

普通生物学实验课须知1.新生进实验室之前要认真阅读实验室基本知识。

2.每次进入实验室的时间为以课表为准,提前10分钟进入实验室。

3.应严格按照实验平台上预约时间进入实验室进行实验,不来者,视为旷课。

如因特殊情况请假,需在实验开始前至少三天向指导教师说明,在选课平台系统中取消原预约时间,重新预约,一次不做实验或一次不交报告,即按不及格论处。

4.预习实验内容和有关知识,写好预习报告(手写),前四部分内容(一、实验目的,二、实验原理,三、实验器材与试剂,四、实验步骤与操作方法),无预习报告者扣10分。

5. 实验过程中应认真操作,仔细观察实验现象,做好原始记录(三个实验需要用相机或手机拍照,DNA指纹图谱实验需用U盘拷贝实验结果,请自备拍照工具和U盘)。

6. 预习、课堂操作、课堂纪律、善后处理、实验报告是评分的依据。

7. 实验完毕,要将自己使用的仪器刷洗干净,药品按序恢复原位,台面擦净,把自己做实验的一套东西找齐,经指导老师检查合格并签字后方可离开。

8. 值日生要认真清扫地面、水槽、台面,检查水、电、门窗是否关好。

9. 实验讲义:实验预约系统中可以下载,也可到生命科学与技术学院网站下载。

10. 实验报告模板见附件,需注明姓名、学号、组号、做实验具体时间。

植物细胞染色体标本的制作与观察上课地点:化学楼120 上课时间:选课时任课教师:陈丽杰办公地点:生化楼215 电话:课程要求:预习实验内容,掌握实验目的及原理、仪器和试剂、实验步骤;手写完成预习报告(实验名称、实验目的、实验原理、实验器材与试剂、实验方法与步骤),课堂检查预习报告情况。

实验注意事项:1、实验台上物品按实验室管理老师要求摆放整齐;2、实验废物按实验室管理老师要求收集;3、实验结束后,经老师检查后方可离开。

实验纪律:1、按时上课2、穿实验服(白大衣)3、不许吃东西,课堂严禁大声喧哗4、手机静音实验成绩:预习报告: 20分实验操作: 40分报告内容:结果和讨论 40分植物细胞染色体标本的制作与观察1. 实验背景与原理染色体的研究在生物进化、发育、遗传和变异中都有十分重要的作用。

实验三植物染色体标本制作

实验三植物染色体标本制作

三 实验材料
经镜检物像清晰符合要求的洋葱、大 麦、棉花或蚕豆等根尖有丝分裂,玉米或

小麦等花粉母细胞减数分裂的临时片子。
四 实验用具与药品
实验用具 显微镜 冰箱 培养皿 刀片 解剖针 鸭嘴镊子 玻璃棒 纱布 毛笔 吸水纸 标签 实验药品 正丁醇 95%酒精 冰乙酸 二甲苯 中性树胶
五 实验步骤(1)
实验三 植物染色体标本制作
一 实验目的
学习将根尖细胞压片及花粉母细胞涂片的 临时染色体玻片改为永久片的制作方法。
二 实验原理
用植物根尖细胞压片或花粉母细胞涂抹制成的片 子,如材料染色清晰、物像符合要求,一般可用石蜡、 甘油胶冻或指甲油将盖玻片的四周封固制成临时片, 贮于冰箱中,保存观察一周左右。但时间过长,物像 收缩、颜色变深,将难以观察鉴别。因此,对一些需 要长期保存的片子,必须改制为永久片,以便进一步 观察和研究。 永久片的制作过程包括脱去临时片的盖玻片、 材料脱水、透明和封片。其中材料脱水干净和透明良 好是制成永久片的关键。为此,需选用适当的脱水剂 和透明剂。目前较理想的脱水剂是正丁醇和叔丁醇, 它们都能与最常用的脱水剂乙醇混合使用,并具有良 好的透明效果,且能与封藏剂树胶混合,有利于封片, 材料也不会发生收缩和硬化等问题。
脱盖玻片:用刀片把临时片上盖玻片周围的石蜡 刮净,用毛笔刷掉石蜡屑后,再蘸少许二甲苯擦 去残留的石蜡,或用45%乙酸除去水溶的封藏剂。 如刚作的临时片,最好过几个小时候后再进行脱 片。把临时片翻转,盖玻片朝下,放入盛有盖玻 片液(3份45%乙酸=1份95%酒精)的培养皿中, 将载玻片的一端搁在短粗玻璃棒上,呈倾斜状, 让盖玻片自然滑落。盖玻片脱落后2~3min,分别 取出盖玻片和载玻片,用吸水纸将玻片上的溶液 吸干,注意不要触动载玻片上的材料。

染色体标本制作与观察实验报告

染色体标本制作与观察实验报告

染色体标本制作与观察实验报告一、引言染色体是细胞核中的遗传信息携带体,它是由DNA和蛋白质组成的长丝状结构。

染色体的数目、形态和大小等特征在不同物种和个体中是有差异的。

本实验旨在通过染色体标本制作和观察,了解染色体的基本结构和分类。

二、实验材料1.新鲜的玉米幼苗2.醋酸3.高锰酸钾4.盐酸5.电镜滴管6.镜片和盖玻片7.显微镜8.实验室用具:手套、显微刀、移液器等三、实验步骤1.将新鲜的玉米幼苗准备好材料摆放在实验台上;2.取一片净玻片,滴加一滴醋酸,然后用电镜滴管吸取一点玉米根尖细胞悬浮液,滴在玻片上;3.将盖玻片慢慢压在悬浮液上,使悬浮液扩散均匀;4.把制作好的染色体标本放在带有千倍放大倍数的显微镜下观察。

四、实验结果将制作好的染色体标本放在显微镜下观察,可以清晰地观察到悬浮液中的染色体结构。

在玉米根尖细胞中,染色体呈为长条状丝状物,一般成双出现。

根据染色体的位置和大小可以将其分为四组,分别为A、B、C、D组。

五、实验分析根据观察结果可以得出以下结论:1.染色体是由DNA和蛋白质组成的长丝状结构;2.染色体的数目、形态和大小等特征在不同物种和个体中是有差异的;3.在玉米根尖细胞中,染色体大多数成对出现,有些物种的染色体可能会出现多倍体现象。

六、实验总结通过本实验,我们成功制作了染色体标本并观察到了染色体的基本结构和分类。

染色体是细胞核中的遗传信息携带体,对于了解生物遗传学、进化与变异等方面具有重要意义。

然而,本实验只观察了玉米根尖细胞中的染色体,染色体在不同组织和细胞中可能会有差异,需要进一步研究和探索。

同时,在制作染色体标本的过程中需要注意操作规范,以免对实验环境和个人健康造成危害。

以上是本次染色体标本制作与观察实验的实验报告,通过本实验,我们对染色体的结构和分类有了一定的了解,并为进一步的研究提供了基础。

实验过程中需注意操作规范,确保安全性和准确性的同时保证结果的可靠性。

植物染色体标本的制备

植物染色体标本的制备

实验用品
一、 材料 蚕豆、豌豆(或玉米、水稻) 二、器材 显微镜,擦镜纸,剪子,镊子,小平皿,载玻片, 盖玻片。 三、试剂 Carnoy固定剂, 95%酒精 ,1mol/L HCl, Schiff 试剂,亚硫酸
实验方法
1、将植物种子放在潮湿的滤纸上,20℃使其发芽。
2、预处理:切取的0.5cm长的根尖浸入0.1%秋水仙 素液中,室温下处理3~4小时。
观察
蚕豆根尖2n=2x=12
豌豆根尖 2nபைடு நூலகம்2x=14
玉米根尖 2n=2x=20
水稻根尖 2n=2x=24
思考题
1、简述Feulgen反应的原理 2、欲得到一张好的Feulgen反应制片, 制片过程中应注意些什么 3、绘制细胞分裂图。
3、固定、水解及染色:
Carnoy固定剂固定10~30分钟→95%酒精10分钟 →70%酒精10分钟→蒸馏水→ 1mol/L HCl, 60 ℃ 15 分钟→ Schiff试剂40~60分钟 →亚硫酸水(1,2,3) → 换3次,每次5分钟自来水→将染色后的根尖漂洗干净, 选择染色效果好的材料→蒸馏水→压片→镜检
目的要求
学习植物染色体标本的制备技 术,了解Feulgen反应的基本原理, 学习其操作方法和压片法,初步掌握 细胞分裂各期的主要特点。
实验原理
Feulgen反应的原理是根据DNA经弱酸 (1mol/L)水解后,打开嘌呤和脱氧核糖连接的 键,在脱氧核糖的一端形成游离的醛基.这些醛 基就在原位与Schiff试剂结合,形成含醌基的化 合物,醌基是一个发色团所以具有颜色,因此凡 有DNA的部位,就呈现紫红色。

染色体标本制作与观察实验报告

染色体标本制作与观察实验报告

染色体标本制作与观察实验报告实验报告:染色体标本制作与观察一、实验目的1.掌握染色体标本制作的基本原理和方法。

2.学习并掌握染色体观察的基本技巧和特点。

3.通过实验加深对遗传学基础知识的理解和应用。

二、实验原理染色体标本制作是生物学实验中的一项基本技术,其目的是将细胞中的染色体以一种可见且易观察的形式展现出来。

染色体观察有助于我们了解细胞分裂过程中染色体的行为和变化,进一步理解遗传物质的复制、分离和交换等基本过程。

本实验将通过植物根尖细胞的有丝分裂过程来制作染色体标本,并通过显微镜观察其形态和分布。

三、实验步骤1.准备试剂和器材:碱性染料(如龙胆紫溶液)、生理盐水、镊子、滴管、载玻片、盖玻片、显微镜等。

2.选取植物根尖:选择新鲜的植物根尖,长度约为5-10mm。

3.预处理:将根尖放入冰箱冷藏(4℃)约24小时,然后放入25℃的温水中浸泡约6小时。

4.固定:用镊子将根尖取出,放入卡诺氏液中浸泡0.5-1小时,然后转移到70%酒精中保存。

5.解离:将根尖放入1N的盐酸盐酸盐酸KOH溶液中,在60℃的水浴中解离10分钟。

6.漂洗:用镊子取出根尖,用清水冲洗3次,每次5分钟。

7.染色:将根尖放在载玻片上,用滴管吸取龙胆紫溶液滴在根尖上,染色3-5分钟。

8.制片:盖上盖玻片,避免产生气泡。

然后在显微镜下观察。

四、实验结果与讨论1.实验结果:通过显微镜观察到清晰的染色体形态,可以看到细胞分裂的不同阶段,如前期、中期和后期。

在中期可以看到染色体整齐地排列在赤道板上,而在后期则可以看到染色体的分离和移动。

这证明了实验方法的可行性。

2.结果讨论:实验中观察到的细胞分裂过程与教科书中的描述基本一致,说明我们的实验方法是有效的。

此外,通过观察不同阶段的细胞分裂,我们可以更好地理解细胞周期和遗传物质的复制、分配等过程。

然而,我们也注意到实验过程中存在一些问题。

例如,解离过程中可能会出现过度解离的情况,导致染色体形态不完整。

植物染色体标本的制备和观察

植物染色体标本的制备和观察

植物染色体标本的制备和观察摘要:目的1、掌握常规压片法制备植物染色体标本的基本原理和方法;2、学会观察和统计植物细胞的染色体数目;3、了解和学习去壁低渗法进行植物染色体制片的基本原理和方法。

方法大蒜的根尖是分裂比较旺盛的,我们可以利用秋水仙素处理根尖使得大蒜根尖的细胞分裂处于分裂中期,然后经固定染色等处理将染色体染色固定,以便观察。

结果大蒜的染色体有16条,都被染色成红色的条状或细丝状物质。

结论大蒜染色体有16条。

关键词:植物染色体;大蒜;秋水仙素前言染色体是遗传物质的载体,本实验便是观察染色体的形态和数目。

植物染色体标本的制备,常用分生组织,如根尖、茎尖和嫩叶做材料。

常规压片法仍是当今观察植物染色体常用的方法。

其程序包括取材、预处理、固定、解离、染色和压片等步骤,即可观察到较多的、处于有丝分裂中期的细胞和染色体。

由于现在洋葱发根较难,我们采用的是大蒜根尖进行相关实验。

材料与方法1.实验材料大蒜根尖、白姜花的根尖、野百合的根尖等。

2.实验试剂:0.02%秋水仙素;改良苯酚品红染液;卡诺氏固定液,1N盐酸,浓盐酸:95%乙醇(1:1)解离液。

3. 实验用具显微镜、剪刀、镊子、刀片、培养皿、吸水纸、滴管、载玻片、盖玻片。

4.实验植物和试剂大蒜根尖、 0.02%秋水仙素;改良苯酚品红染液;卡诺氏固定液,1N盐酸;70%酒精;95%乙醇;85%乙醇;蒸馏水5.实验方法和步骤5.1 取材先将大蒜浸泡若干小时,然后转入一个垫有湿润滤纸的培养皿中,置25℃恒温培养箱中萌发,待幼根长至1~2cm时,于上午9~11时剪下根尖。

5.2 预处理将剪下的根尖放进装有0.02%秋水仙素溶液的烧杯中,浸泡处理3~4小时。

5.3 固定将经过预处理或没有预处理的材料,放到卡诺氏固定液中固定(固定液的量约为材料的10倍,要求一个容器中所装的材料不能太多,温度不能太高)。

固定2~24h后分别在95%和85%乙醇中各30min ,再转入70%酒精中,于4℃冰箱内保存,保存时间最好不超过二个月。

植物细胞有丝分裂染色体制片及观察

植物细胞有丝分裂染色体制片及观察

三、实验材料
洋葱(Allium cepa)及蚕豆(Vicia faba) 等
四、实验用具及药品
1.用具:显微镜、水浴锅、剪刀、镊子、 刀片、载玻片、盖玻片、酒精灯等。 2.药品:无水乙醇、70%乙醇、冰乙酸、 饱和对二氯苯水溶液、0.1%秋水仙素、 0.1N盐酸。
五、实验步骤
酸解: 取材 固定 解离 酶解 染色 压片 镜检
六、制作永久玻片
冷冻脱片封片法 酒精一叔丁醇脱水封片法 酒精—二甲苯脱片封片法
七、作业及思考题
1.根据你的实验情况总结出制备好一张优 良的细胞分裂标本应注意哪些问题? 2.常用染料的特点如何? 3.绘制2~3个有丝分裂典型时期简图。
实验一 植物细胞有丝分裂染色 体制片及观察
一、实验目的
学习和掌握植物根尖细胞有丝分裂染色 体压片技术;观察有丝分裂过程中染色 体的形态特征和动态变化。
二、实验原理
有丝分裂是植物体细胞增殖的主要方式。在有 丝分裂过程中,细胞核内染色体能准确地复制, 并能有规律地均匀分配到两个子细胞中去,使 子细胞遗传组成与母细胞完全一样,从而保证 了性状的发育和遗传的稳定性。 有丝分裂是一个连续的过程,可分为前期、中 期、后期和末期。高等植物的有丝ห้องสมุดไป่ตู้裂主要发 生在根尖、茎尖及幼叶等部位的分生组织。经 过适当的取材处理、固定、离析、染色、压片 等步骤,可获得清晰的植物细胞有丝分裂染色 体动态变化的装片。以进行有丝分裂和染色体 动态的观察。

实验三植物染色体标本制作

实验三植物染色体标本制作
展望
随着科学技术的发展,染色体制片技术将不断改进和完善, 未来有望实现更加准确、高效的染色体计数和形态分析。这 将有助于推动植物遗传学和进化生物学的研究进展。
THANKS
感谢观看
染色体数目
通过对大量细胞的观察和计数,我们确定了植物细胞的染色体数目为2n=46条 ,这与之前的研究结果一致。
染色体分组
我们还观察到了染色体按照大小和形态的不同被分为不同的组别,这些组别在 遗传学上具有重要意义。
染色体分析的结果
染色体长度
我们测量了每条染色体的长度,并发现不同染色体长度存在差异,这对于理解基 因组结构和功能具有重要意义。
植物染色体的结构
植物染色体的基本结构包括染色质纤维、核膜、着丝粒和染色体臂。染色质纤维是染色体的基本组成单位,由 DNA和蛋白质组成。核膜是包围着整个细胞核的双层膜结构,起着调节基因表达的作用。着丝粒是染色体上连接 两个染色单体的区域,而染色体臂则是由DNA和蛋白质组成的区域,上面排列着基因。
学习制作染色体标本的方法
染色体观察与计数
找到分裂相细胞
染色体计数
在显微镜下寻找处于分裂期的细胞, 这些细胞是观察染色体的最佳时期。
对每个分裂相细胞中的染色体进行计 数,确保计数的准确性和可靠性。
观察染色体形态
在找到分裂相细胞后,仔细观察染色 体的形态、数目和分布情况,并记录 下来。
染色体分析
染色体形态分析
分析染色体的形态特征,如长度、着丝粒 位置等,判断是否存在染色体结构变异。
染色体的形态和结构
染色体形态
染色体在细胞分裂过程中呈现特 定形态,包括染色质、染色粒和 着丝粒等。
染色体结构
染色体由DNA和蛋白质组成,具 有特定的序列结构和组织结构。

植物染色体的标本制备

植物染色体的标本制备

植物染色体的标本制备目前,国内外常用的植物染色体制片技术可以分为两种,即压片技术和去壁低渗技术。

Belling(1921)提出植物染色体压片技术后,压片已成为植物染色体研究中最广泛应用的常规技术;但是由于植物细胞有坚实的细胞壁,染色体很难象动物染色体那样平整地贴在载玻片上,Omura 和Kurata(1978)把植物原生质体技术应用到水稻染色体研究之中,用纤维素酶、果胶酶和0.075mol.L-1氯化钾处理取得了一定的进展,陈瑞阳等人(1979、1982)提出了植物染色体标本制备的酶解去壁低渗技术,并在多种植物上得到广泛应用,成为当今植物染色体研究中的重要方法。

压片技术和去壁低渗技术在取材和预处理要求及其操作都是相同的,即两者的材料基础条件是相同的,但它们所采用的染色体分散方法是不同的。

压片法是以人工外加机械压力使染色体分散,而去壁低渗法是用酶分解细胞壁,低渗液使细胞膜吸胀、水表面张力使染色体分开。

两种技术各有其优缺点,前者操作快速简便、省材省时,后者染色体易于展开、且真实不变形,尤其是对成熟细胞多的植物组织,如芽、愈伤组织等材料有独到效果,本实验主要介绍去壁低渗染色体制片技术。

一、实验原理植物根尖的分生细胞的有丝分裂,每天都有分裂高峰时间,此时把根尖固定,经过染色和压片,再置放在显微镜下观察,可以看到大量处于有丝分裂各时期的细胞和染色体。

二、实验目的根尖染色体压片法,是观察植物染色体最常用的方法,也是研究染色体组型、染色体分带、染色体畸变和姊妹染色单体交换的基础。

学习醋酸洋红染色的具体操作方法,掌握植物有丝分裂制片技术,通过大量的制片观察,能比较快速准确地判断细胞有丝分裂前、中、后、末期的染色体图象,并对其典型制片照像。

三、实验材料大蒜(Aillumsativum)、洋葱(Aillumcepa)的鳞基或蚕豆(Viciafaba)的种子。

四、实验内容1、植物染色体制片技术训练,独立完成植物根尖、茎尖及幼叶的取材、预处理、固定、制片、染色等染色体制片全过程,并获得图象清晰、完整、高度分散的染色体典型图象制片;2、染色体显微照相技术训练,用生物摄影显微镜,摄制某新资源植物种典型的染色体图象照片40张,并从中挑选确定清晰的图片;3、细胞有丝分裂典型时期识别技能训练,通过大量的染色体图象观察,能比较快速准确地判断细胞有丝分裂前、中、后、末各个时期的。

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息的总和根据实验的观察和测量绘制成的 模式图称为核型(karyotype)。
2.实验原理
核型的应用
核型分析在物种亲缘鉴定,染色体变异分 析,杂种分析,细胞分裂过程分析,孤雌 生殖等研究中均有重要的作用。
微核
细胞核
染色体断裂
i
染色体数目变异
急性骨髓白血病 10、11号染色体间易位
染色人体涂染
中期是观察染色体的最 理想
时期。
主要环节原理
植物染色体标本制备过程中有两个重要环节,即解离和固定。
解离:除去细胞间的果胶层,并使细胞壁 软化,从而使细胞得以膨胀,为染色体的 分散提供了空间。
动物细胞无细胞壁,通常不需解离, 而是用低渗液使细胞膨胀。
主要环节原理
固定:目的在于尽快使细胞的结构固定于 接近存活状态;防止蛋白质分解而导致结 构变化。
2.实验原理
遗传现象-孟德尔的豌豆实验
变异现象-摩尔根的果蝇实验
摩尔根是第一位以遗传学成就而荣获诺贝 尔生理学或医学奖的科学家,是细胞遗传 学的创始人。
伴性遗传—基因学说 基因与染色体
遗传物质是DNA
基因本质的揭示
DNA双螺旋结构的发现开启了分子生物学 时代。
基因的本质是具有遗传效应的DNA片段。 染色体是基因的主要载体。
实验目的 实验原理 实验材料 实验步骤 注意事项 实验讨论
主要内容
1.实验目的
(1)掌握常规压片技术制作植物染色体标 本的一般方法。
1.实验目的
(2)了解显微镜下常规显色的植物细胞染 色体的形态特点,熟练掌握显微镜的使用。
1.实验目的
(3)理解染色体与生命遗传的意义及染色 体核型检查的应用。
玻片;载玻片和盖玻片之间也不要移动。 可随时镜检判断敲本的湿润。
染色体永久切片标本的观察
男人染色体标本(箭头分别表示X和Y染色体)
染色体永久切片标本的观察
6. 实验讨论
若染色体标本结果不理想,请分析一下可 能的原因有哪些?
Any Question?
染色体分散:通过压片、滴片等机械力量 使染色体分散, 有利于观察。
2. 实验原理
核型分析技术的应用 染色体标本制备的主要方法和环节
3. 实验材料与试剂
实验材料:市售大蒜与洋葱。 仪器及用具:显微镜,冰箱,恒温水浴锅,载玻
片,盖玻片,剪刀,镊子,滤纸等
3. 实验材料与试剂
试剂: 1g/L 秋水仙胺 解离液:1mol/L的盐酸。 卡诺固定液:按甲醇:冰醋酸以3:1(体积分
数)配制,现用现配。 改良石炭酸品红染液
实验内容
压片法观察大蒜、洋葱根尖染色体标本。 观察男人和女人染色体、洋葱根尖有丝分
裂永久切片标本。
催芽
4. 实验步骤
4. 实验步骤
取材,预处理。 取大蒜或洋葱0.5~1 cm的根尖。 1 g/L 秋水仙胺处理3~4 h。
4. 实验步骤
固定:卡诺固定液卡诺固定液4 ℃下固定 30 min后,用蒸馏水洗净。
细胞分裂与染色体行为
细胞周期
染色质与染色体
染色质和染色体是真核生物遗传物质存在 的两种不同形态,两者不存在成分上的差 异,仅反映它们处于细胞分裂周期的不同 功能阶段而已。
染色质——分裂间期 染色体——分裂期
有丝分裂
中期 是观察染色体 的最好时期
2. 1 核型分析技术的应用
核型分析技术的应用 物种细胞内染色体数目、形态、长度等信
1.实验目的
掌握常规压片技术制作植物染色体标本的 一般方法。
了解显微镜下常规显色的植物细胞染色体 的形态特点,熟练掌握显微镜的使用。
理解染色体与生命遗传的意义及染色体核 型检查的应用。
2. 实验原理
核型分析技术的应用 染色体标本制备的主要方法和环节
2. 1 核型分析技术的应用
染色体与遗传的奥秘 孟德尔—遗传学说 遗传因子
分生区
根尖生长点
切取0.3cm左右的根尖
6. 压片
4. 实验步骤
盖片 敲片
压片
4. 实验步骤
7.镜检观察
敲至组织在玻片上呈现雾状
20µm
大蒜根尖细胞的染色体制片(×400,箭头示 染色体)
4. 实验步骤
5. 注意事项
过长的根尖分裂相会大大减少。 压片、敲片时力量要均匀合适,避免弄碎
2. 实验原理
核型分析技术的应用 染色体标本制备的主要方法和环节
2. 2 染色体标本制备的主要方法和环节
主要方法
低渗涂片法
压片法:植物根尖等组织
滴片法:动物细胞悬液
2.实验原理
主要环节原理
取材:应取分生旺盛的组织或细胞。 预处理:秋水仙胺:破坏纺锤体形成,细胞阻断于中期;
使染色体变粗变短,易于观察。
4. 实验步骤
解离与洗涤:60 ℃水浴下 1 mol/L HCl解离 10 min;用蒸馏水清洗根尖组织。
若洗不净,会影响染色。
4. 实验步骤
染色:用改良的石炭酸品红染色5 min,可 直接在载玻片上进行。
染色前去掉分生区以后部分,保留根 尖0.2~0.3 cm即可。
将根尖置于载玻片上
伸长区
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