温度对黄鳍鲷主要消化酶活性的影响

6 7 8 9温度对蛋白酶比活的影响 ’由图 "_ 温度对蛋白酶比活的影响见图 "_ < <可知!在 " :_ $ : h范围内!肠蛋白酶和胃蛋白酶 的最 适 温 度 为 = : h! 而 肝 蛋 白 酶 的 最 适 温 度 为 = # h’<个部位的蛋白酶比活的最适温度很相近! 都在 = #_ = : h 的这个范围内’ 胃蛋白酶比活在 " : _ < # h之间 变 化 较 缓 慢! 在 < #_: # h 时 变 化 大! 在: #_ $ : h 时变化又相对缓和!$ : h 时已经没有 活性’在 = #_ = : h之间!<个部位的蛋白酶比活都 有较高的活性’肠蛋白酶的的变化趋势与胃蛋白酶 总体上相似!表明温度对胃蛋白酶和肠蛋白酶比活 都有较大的影响!而肝蛋白酶比活在整个温度范围 都比较缓和!表明温度对肝蛋白酶的影响较小’在 各自的最适温度时!<个部位的蛋白酶比活大小是 胃n 肠n 肝’ 6 7 6 9温度对淀粉酶比活的影响 温度对淀粉酶的影响见图 =_ $ $可 ’ 由图 =_ :_ : : h 的范围内 ! 胃淀粉酶的最适温度 知!在 "
第 !卷第 "& ’ ( ) *+ * , ./ , 0 * 1 2 , 1 0 & 3 , 1 3 1
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温度对黄鳍鲷主要消化酶活性的影响
! ! 李希国" !李加儿"!区又君"
" 6中国水产科学研究院南海水产研究所!广东 广州 : " # < # # 6上海水产大学!上海 ! # # # A # % "! & )! )! ) 摘要!研究了温度对黄鳍鲷肝)肠和胃 < 个部位蛋白酶)淀粉酶和脂肪酶比活的影响’ 实验设计了 " : # : < # : # : # : # : h等 " "个温度梯度!结果表明(肠蛋白酶和胃蛋白酶的最适温度为 = : h! 而 )< )= )= ): ): )$ )$ 肝蛋白酶的最适温度为 = # h"胃淀粉酶的最适温度是 = # h!肝淀粉酶的最适温度是 < : h!而肠淀粉酶的最适温 度是 < # h"肠脂肪酶和胃脂肪酶的最适温度是 = # h!肝脂肪酶的最适温度是 = : h’从整体来看!在 < :_ = : h的 范围内!肝)肠和胃 < 部位的 < 种酶都有较高的活性’ 关键词!黄鳍鲷"温度"消化酶"活性 中图分类号!m A " E = B %%%%%文献标识码!D "m 文章编号!" $ E <F ! ! ! EF % ! # # $ "F # # = <F # $ &#
(R % !* & 2 3 . " , / " * 11 O O 1 3 ) ’ O ) 1 G H 1 2 . ) ( 2 1’ -J , I 1 0 ) , U 11 d L G 1 0 . 3 ) , U , ) L’ O L 1 5 5 ’ QO , -8 5 . 3 PH ’ 2 I L 0 ) ’ G . 3 * 1 H . ) ’ H . 3 2 1 . 0 . J, ) 1 0 ) , . 5 Q . 0 0 ) ( J , 1 J, -) * , 0 1 c H 1 2 , G 1 ) 6R * 12 1 0 ( 5 ) 0 ’ O 0 H 1 3 , O , 3. 3 ) , U , ) L’ O H 2 ’ ) 1 . 0 1. ) J , O O 1 2 1 ) ) 1 G H 1 2 . ) ( 2 1% " : # : # : # : !! !! !< !< != != ! !: !$ ! : # : : h&, J , 3 . ) 1 J) * . ) ) * 1’ H ) , G ( G) 1 G H 1 2 . ) ( 2 1 O ’ 2 H 2 ’ ) 1 . 0 1 , -L 1 5 5 ’ QO , -8 5 . 3 PH ’ 2 I L Q 1 2 1 = : h, -0 ) ’ G . 3 * = # h, -* 1 H . ) ’ ; H . 3 2 1 . 0 . J= : h, -, ) 1 0 ) , . 5 3 . . 5 * 1 ’ H ) , G ( G) 1 G H 1 2 . ) ( 2 1 O ’ 2 . G L 5 . 0 1 Q 1 2 1 = # h, -0 ) ’ G . 3 * < : h, -* 1 H . ) ’ H . 3 2 1 . 0 . J < # h ") ! , -, ) 1 0 ) , . 5 3 . . 5 ") * 1 ’ H ) , G ( G) 1 G H 1 2 . ) ( 2 1 O ’ 2 5 , H . 0 1 Q 1 2 1 = # h, -0 ) ’ G . 3 * ! = : h, -* 1 H . ) ’ H . 3 2 1 . 0 . J = # h, -, ) 1 0 ) , . 5 3 . . 5 6b % !. !5 &, !* 2 . I 1’ O < :) ’ = : h!) * 1 . 3 ) , U , ) L ’ O J , I 1 0 ) , U 1 1 d L G 1 0 H 2 ’ ) 1 . 0 1 G L 5 . 0 1 , H . 0 1 -0 ) ’ G . 3 * 1 H . ) ’ H . 3 2 1 . 0 . J, ) 1 0 ) , . 5 3 . . 5 ’ O L 1 5 5 ’ QO , -8 5 . 3 PH ’ 2 I L. 2 1, -.* , I * 1 2 5 1 U 1 5 6 (L % !J !. 4 ) %5 & , $ . 1 5 5 ’ QO , -8 5 . 3 PH ’ 2 I L ! P ) # , 9 ) $ # , & ") 1 G H 1 2 . ) ( 2 1 , I 1 0 ) , U 11 d L G 1 0 3 ) , U , ) L
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G X ! 滴加 # 6 " :7的氢氧化钠 "G X !摇匀!于室温 & Y #G , ’再加 # 6 =G X<7M 下暗处静置 ! ! = 酸化 ’ 以# 6 # ! :7的硫代硫酸钠滴定! 指示剂为 ! j 淀粉 液!终点无色’% = &酶液蛋白质浓度测定方法(采 : &脂肪 用福林酚试剂法!用酪蛋白做标准曲线’% 酶活性的定义( 在 H M值 B 6 #和 < E h 条件下水浴 " * !脂肪酶水解每 G I分子脂肪酸的酶 , -产生 "! 量!为一个脂肪酶的活力单位’比活力定义为(活
%%鱼类的消化生理过程受到诸多环境和内部因素 的影响’其中!温度是影响鱼类消化道消化吸收能 力的重要环境因素之一’鱼类生活水体的温度是影 响鱼类消化生理活动的重要因素之一!也是鱼类生 活的重要环境因子之一’温度通过影响鱼类消化道
中消化酶活性的大小来影响食物的消化吸收!最终 影响鱼类的生长发育’本文为黄鳍鲷消化酶活性研 究系列之四!初步研究了温度对黄鳍鲷消化酶活性 的影响!旨在为黄鳍鲷的人工养殖提供参考’
F " B &分别测定蛋白酶) , 蛋白’ % 为(活力单位 G I
淀粉酶和脂肪酶的活性! 每批样品均在 ! =*内测 试完毕’每个样品设 !个平行!文中数据为 !次测 定的平均值’ " 6 ! 6 = %数据统计%%应用 & N & & " # 6 #对实验结果进 行显著性统计分析’
! %实验结果
"修回日期!! 收稿日期!! # # : ; # $ ; ! E # # : ; " " ; # E & 资助项目!广东省重大科技兴海项目 % D ! # # # : " D # < 作者简介!李希国 % " A E EF & !男!硕士生!从事水产养殖基础生物学研究’C ; G . , 5 c # # " ! K0 ’ * ( 6 3 ’ G (5 通讯作者!李加儿!C ; G . , 5 g 1 # # " K" ! $ 6 3 ’ G (5
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南%方% 水 %产
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第 !卷
" %材料与方法
8 7 8 9实验材料 实验在广东省深圳市盐田南海水产研究所深圳 试验基地进行’实验用的黄鳍鲷取自南海水产研究 ! 体长为 " 所深圳基地养殖池!体重 : #_ E #I ! #_ ’ " : #G G 8 7 6 9方法 )! )! ) " 6 ! 6 " %实验设计%%实验共设计 " : # : )< )= )= ): ): )$ )$ < # : # : # : # : h等 " "个 温 度 梯度!反应 在 恒 温 水 浴 箱 中 进 行! 从 " : h 开 始! 逐步升温到 $ : h! 在各个温度下分别测定 <个部 位的蛋白酶)淀粉酶和脂肪酶比活’ " 6 ! 6 ! %酶液的制备%%将黄鳍鲷活鱼运回实验室! 在进行生物学测定之后置于冰盘上解剖!取出全部 肝脏和消化道!剔除脂肪和消化道的内含物!将消 化道 分 成 肝 胰 脏) 胃 % 包 括 幽 门 垂& ) 前 肠) 中 h 冰冻重蒸水中在研钵 肠)后肠 :个部分!先置 = = 内研磨!再以玻璃匀浆器匀浆’ 匀浆液经离心 % ) 沉淀! 取上清液置于 = , #G , h冰 : # #2 G , - &" 箱中待用’ " & 蛋白酶活性测定方 " 6 ! 6 < %酶活性测定 %% % X酶液 法(采用福林酚试剂法’ 在室温下! 取 "G M值为 E 6 $的磷酸缓冲液稀释 :倍! 加稀释后 用H !在 < 待测酶液样品和 ! j 的酪蛋白各 "G X E h下 #G , 后用 R + D终止反应!< E h 保温 " #G , 反应 " 后过滤!取滤液 "G X加 :G X# 6 =] 的碳酸钠溶 6 :G X福林酚试剂显色’ 用 E ! !分光光 液!再加 # 度计!在波长 $ : #G 测定光密度’ 用酪氨酸做标 准曲线’ % XH M ! & 脂肪酶活性测定方法( 取 :G X 值为 B 6 #的 # 6 # ! :G ’ 5 G X 的磷酸缓冲液和 =G , 聚乙烯醇橄榄油乳化液于三角烧瓶中! 置 < E h下 #G , X酶液!准确反应 $ #G , -后 预热 " !加入 "G : j乙醇终止反应!加数滴 " j酚酞指示剂! 用 以A # 6 # :G ’ 5 G X 的氢氧化钠标准溶液滴定’ 对照组 , : j 乙醇! 再加酶液’ 为缓冲液和底物混合液! 加 A j < & 淀粉酶活性测定采用淀粉一碘显色法( 取 ! % 淀粉液 !G X M值为 $ 6 B的 # 6 !] 磷酸缓冲液在 !H < E h水浴 中 平 衡! 加 酶 液 # 6 :G X #G , !保 温 < ! 于水中煮沸 " #G , ! 然后用次亚碘发测定葡萄糖! 取 "G X反 应 液 于 碘 量 瓶 中! 加 # 6 "7 的 碘 液 "