薄层色谱原理(硅胶吸附)

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薄层色谱法原理

薄层色谱法原理

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优化
1.占比例较大的溶剂为主要溶剂,可使 试样组分溶解并基本分离。 占比例较小的溶剂可进一步调整各组 分Rf值,改善分离效果。 2.分离酸性或碱性组分时,往往在展开 剂中加入少量酸或碱,以防这些组分 离解,使这些组分的斑点更加集中和 清晰,从而提高分离度。 3.当展开剂的粘度太大时,可在展开剂 中加入粘度小的溶剂,以降低展开剂 粘度,从而提高展开速度。
• 2、流动相(展开剂) 薄层色谱法中采用单一溶剂或多元 混合溶剂作流动相,称为展开剂。 与吸附柱色谱法中选择流动相的一 般规则相同,展开剂的选用要从被分 离试样组分极性、吸附剂活性和展开 剂的极性三个因素综合考虑。
吸附剂和展开剂的选择
• 对于极性较小的被分离试样组分,应 选用活性较强的吸附剂,极性较小的 展开剂; • 对于极性较大的被分离试样组分,应 选用活性较弱的吸附剂,极性较大的 展开剂。
薄层板
原点 试样
把薄层板放入层析缸中,底端浸入适当溶剂。
前沿
• 展开过程中,组分在 两相之间发生多次吸 附—解吸平衡,吸附 牢的组分随展开剂移 动慢,吸附弱的组分 随展开剂移动快,一 段时后,组分被分离, 各组分在薄层板上形 成不同距离的斑点。

硅胶色谱的原理

硅胶色谱的原理

硅胶色谱的原理

硅胶色谱是一种常用的分离和纯化技术,广泛应用于有机化学、生化分析、制药等领域。本文将就硅胶色谱的原理进行详细介绍。

硅胶色谱是一种基于化学吸附作用的色谱技术,主要原理是将需要分离的化合物从溶液中吸附到硅胶上,然后利用不同的洗脱剂和条件,将不同的化合物逐一分离出来。硅胶是一种极具吸附性能的材料,其表面上带有许多氢键和游离基团,可以将许多化学物质吸附在其表面上。硅胶颗粒的粒径通常在10-40um之间,具有较大的比表面积和可操作性,因此常常被用作固定相。

硅胶色谱通常采用填充柱或薄层色谱两种形式。填充柱式色谱是一种常见的硅胶色谱形式,使用固定填充的硅胶管填充柱作为分离柱,在柱内加入需要分离的化合物溶液。样品在柱内通过时,不同的化合物在硅胶上的吸附程度不同,因此不同的化合物会分别逐步从分离柱中洗脱出来,达到分离和纯化的目的。薄层色谱则是一种用于小分子化合物分离的快速分析方法,是在硅胶薄片表面上涂覆一层硅胶,通过预先在硅胶上涂覆不同的标记化合物,以确定目标化合物在硅胶上的位置。薄层色谱可以通过在涂层上液滴需要分离的化合物溶液,然后使其在硅胶上分离。分离结果通过扫描或其他检测方法得出。

硅胶色谱的分离机制主要是基于键合作用和范德华力的作用。硅胶上的游离基团可以发生氢键作用和范德华力作用,吸附化合物分子的键合贡献和范德华力作用的贡献不同,导致分离效果不同。对于硅胶颗粒来说,其内部孔径大小与颗粒的特点密切相关。不同颗粒的硅胶在孔径方面具有独特的特征,可以分离不同种类的化合物,取决于化合物不同的分子大小或空间构型。以分离混合物中的乙醇和甲醇为例,由于两种化合物分子结构相似,但是需要分离的组分量很少,因此可以选择具有像极化作用,相近硅胶孔径的硅胶柱进行分离。

硅胶薄层色谱原理

硅胶薄层色谱原理

硅胶薄层色谱原理

硅胶薄层色谱是一种常用的分离技术,利用硅胶作为固定相,将

待测物溶液在薄层硅胶基底上进行分离,然后通过显色、紫外灯或质

谱等技术进行分析。该技术具有操作简便、分离速度快、对分析物的

容纳量小等特点,在分析化学、环境监测、生物医药等领域广泛应用。

硅胶薄层色谱的工作原理主要包括固相特性及样品分离两个方面。

1.固相特性:

硅胶薄层色谱中的固相是指硅胶层,它具有高度多孔、高介电等

特性。硅胶层的多孔性能使其具有较大的比表面积,能够吸附样品分子,实现分离。硅胶颗粒之间的孔隙大小不一,可根据待测物的大小

选择合适的硅胶层,以实现高效的分离。此外,硅胶层是无机物质,

具有较强的化学稳定性,可以在较宽的pH范围内使用,适应各种样品

的分离。

2.样品分离:

样品在硅胶薄层上被分离的过程主要涉及两个相互作用:吸附作

用和分配作用。

吸附作用是指样品分子与硅胶表面间的静电引力、范德华力、氢

键等相互作用,使样品被吸附在硅胶上。不同样品分子与硅胶之间的

相互作用力强度不同,从而导致分离。常见的吸附作用有静电吸附、

范德华力吸附等。

分配作用是指样品分子在溶剂与硅胶层之间的分配行为。不同样

品分子在溶液中的溶解度不同,从而导致在分配中达到动态平衡的程

度不同。样品分子在固相和液相之间快速地发生相互转移,从而实现

分离。常见的分配作用有溶解度分配、离子极性分配等。

硅胶薄层色谱常见的操作步骤如下:

1.样品预处理:如果样品中有杂质或干扰物,需进行预处理,如

过滤、浓缩等。

2.制备色谱板:将硅胶溶液涂布到玻璃、铝箔或塑料片等基底上,制备薄层色谱板。

薄层层析硅胶板的原理及其应用

薄层层析硅胶板的原理及其应用

薄层层析硅胶板的原理及其应用

一.薄层层析硅胶板的原理:

1.薄层层析硅胶板的介绍:

薄层层析硅胶板采用优质硅胶经特有涂布设备制备,表面光滑、厚度均一,分离斑点清晰无拖尾,低金属离子含量、载样量是普通制备板1.3倍以上,可有效分

离多种物质。

2.薄层层析硅胶板的原理:

薄层色谱是吸附色谱,展开过程中,组分在两相之间发生多次吸附-解吸附平衡,吸附牢的组分随展开剂移动慢,吸附弱的组分随展开剂移动快,一段时间后,

组分被分离,各组分在薄层板上形成不同距离的斑点。

二.薄层层析硅胶板的应用:

(1).定性鉴别;

(2).药品的质量控制和杂质检查;

(3).化学反应进程的控制;

(4).柱色谱分离条件的探索。

三.简单的自制薄层层析硅胶板方法:

(1).准备材料:烘箱、载玻片、量筒、50ml烧杯、玻璃棒、称量天平、薄层色谱硅胶、羟甲基纤维钠、无水乙醇、蒸馏水、1%盐酸溶液、电炉

(2).准备工作:取十五张载玻片先用1%盐酸浸泡5分钟左右,取出、洗净、烘干。

(3).承重:称量薄层色谱硅胶9.7111g,羟甲基纤维钠0.1504g,量取蒸馏水30ml注入50ml烧杯中。

(4).调配:将称量好的羟甲基纤维钠加入装有30ml蒸馏水的烧杯中,配制成0.5%的溶液,;放在电炉上加热并不断搅拌,直至完全溶解;冷却至室温后加入适量无水乙醇(约1瓶盖,防止气泡产生),加入硅胶,搅拌至糊状。

(5).制作:用玻璃棒将调制好的糊状物迅速涂在载玻片上,不断振动载玻片使其分布均匀。

(6)晾干:置于水平桌面上自然风干。

(7)活化:使用前放入烘箱105-120摄氏度恒温加热1小时活化。

薄层层析的原理与操作

薄层层析的原理与操作

薄层层析的原理与操作

薄层色谱,或称薄层层析(thin-layer chromatography),是以涂布于支持板上的支持物作为固定相,以合适的溶剂为流动相,对混合样品进行分离、鉴定和定量的一种层析分离技术。这是一种快速分离诸如脂肪酸、类固醇、氨基酸、核苷酸、生物碱及其他多种物质的特别有效的层析方法,从50年代发展起来至今,仍被广泛采用。

一、基本原理

薄层层析是把支持物均匀涂布于支持板(常用玻璃板,也可用涤纶布等)上形成薄层,然后用相应的溶剂进行展开。薄层层析可根据作为固定相的支持物不同,分为薄层吸附层析(吸附剂)、薄层分配层析(纤维素)、薄层离子交换层析(离子交换剂)、薄层凝胶层析(分子筛凝胶)等。一般实验中应用较多的是以吸附剂为固定相的薄层吸附层析。

吸附是表面的一个重要性质。任何两个相都可以形成表面,吸附就是其中一个相的物质或溶解于其中的溶质在此表面上的密集现象。在固体与气体之间、固体与液体之间、吸附液体与气体之间的表面上,都可能发生吸附现象。

物质分子之所以能在固体表面停留,这是因为固体表面的分子(离子或原子)和固体内部分子所受的吸引力不相等。在固体内部,分子之间相互作用的力是对称的,其力场互相抵消。而处于固体表面的分子所受的力是不对称的,向内的一面受到固体内部分子的作用力大,而表面层所受的作用力小,因而气体或溶质分子在运动中遇到固体表面时受到这种剩余力的影响,就会被吸引而停留下来。吸附过程是可逆的,被吸附物在一定条件下可以解吸出来。在单位时间内被吸附于吸附剂的某一表面积上的分子和同一单位时间内离开此表面的分子之间可以建立动态平衡,称为吸附平衡。吸附层析过程就是不断地产生平衡与不平衡、吸附与解吸的动态平衡过程。

薄层色谱原理(硅胶吸附)

薄层色谱原理(硅胶吸附)

薄层色谱原理及应用的一点心得

薄层色谱鉴别为我们在中药质量控制中常用的定性鉴别方法,有关的原理及小知识总结如下。

一、小知识

薄层色谱常用的硅胶较细,一般粒度在10~40μ,而柱层析常用的粒度为100~160目。

我们在试验中也常用到的硅胶板其成分及组成如下

硅胶板硅胶G-高效板硅胶粉煅石膏(12%~13%的石膏(CaS04)),

硅胶H-高效板硅胶粉

硅胶GF254-高效板硅胶粉煅石膏12%~13%的石膏(CaS04) 254nm下吸收的荧光物质

硅胶GF365-高效板硅胶粉煅石膏12%~13%的石膏(CaS04) 365nm下吸收的荧光物质

手铺板硅胶粉12%~13%的石膏(CaS04) 一般加入3%CMC-钠为黏合剂

二、薄层色谱原理

薄层色谱是吸附色谱,其过程实际上是组分的分子与展开剂的分子竞争占据吸附剂表面活性中心的过程,所以展开剂的选择应同时考虑被测物质的性质,吸附剂的活性及展开剂的极性三个因素。

2.以硅胶作为吸附剂为例,其过程实际上是组分的分子与展开剂的分子竞争占据吸附剂表面活性中心的过程,硅胶是极性吸附,根据相似相溶原理,如果选择极性大的展开剂,展开剂与硅胶吸附能力增强,则组分相对吸附能力下降,则容易被展开或洗脱下来;如果组分的极性比展开剂的极性大,则组分与硅胶的吸附能力较展开剂强,则不容易被展开或洗脱下来。

所以说在用极性吸附剂如硅胶,氧化铝时,选用极性大的展开剂(相对于组分来说)均可以使组分跑到前沿。

常用的展开系统

石油醚-乙酸乙酯,氯仿-甲醇-水,乙酸乙酯-甲醇,正丁醇-乙酸-水,极性由小到大,还有看你的物质,比例自己可以摸索,还有如果你的物质偏酸性,可加点甲酸,偏碱性,可用碱板来爬,或

薄层色谱法的基本原理

薄层色谱法的基本原理

薄层色谱法的基本原理

薄层色谱法(Thin Layer Chromatography,TLC)是一种常用的分析技术,基于物质在固定相上的分配和迁移差异实现物质分离和检测。

薄层色谱法的基本原理如下:

1. 固定相:将一层薄薄的固定相涂覆在玻璃、金属或塑料基质上,形成薄层色谱板。常用的固定相有硅胶、氧化铝或纤维素等,它们可以吸附和分离不同物质。

2. 样品施加:将待分析的混合物样品沿着色谱板底部施加。样品可通过滴管或微量注射器等工具点状施加在色谱板上,通常施加位置为距离色谱板底部约1-2 cm处。

3. 迁移:将色谱板置于封闭的容器中,容器内加入有机溶剂或某种移动相,将移动相铺满容器底部。容器盖上后,移动相沿着色谱板向上上升。物质分子会与移动相相互作用,并迁移到上方。迁移距离取决于化学物质与移动相的亲疏性。

4. 分离:在固定相上,不同物质在移动相中的迁移速度不同,导致分离。物质越亲近固定相的亲疏性越大,它们迁移速度越慢。分离后的物质会在色谱板上形成不同的斑点。

5. 可视化:将色谱板取出,根据待分析物质的性质选择合适的显色方法,如紫外灯照射、着色剂喷洒、化学反应等,在色谱板上的斑点处产生可见的色谱带。

通过比较样品斑点的运动距离和标准物质的运动距离,可以推断待分析样品中的物质成分。薄层色谱法具有操作简便、速度快、分离效果好等优点,因此广泛应用于化学、生物等领域的物质分离和分析。

薄层色谱法原理

薄层色谱法原理

薄层色谱法原理

薄层色谱法(TLC)是一种分离技术,对物质进行分离和纯化。其原理基于物质在固定相和流动相之间的不同亲和性来实现分离。

薄层色谱法使用一种薄而均匀涂敷在玻璃、铝箔或塑料片上的液体或固体层,称为薄层层片。这个层片通常是由无定型的吸附剂,如硅胶或氧化铝组成的。待分离样品通常是在物理或化学处理后溶解在适当的溶剂中,然后以一小点或线状的方式施加到层片上。

在色谱过程中,层片与溶剂系统保持接触,而溶剂会在吸附剂上升出现浸润,形成一个移动相。移动相通过表层片,将溶解物质带上升。移动相的速度取决于吸附剂的性质和选择性,以及溶剂在薄层上的升力和展开行为。

在运行过程中,溶质分子与吸附剂的相互作用力不同,以致有了多项移动的速度。这导致了溶质分子的分离,从而使它们以不同的速度通过层片。

最终,通过观察分离物质在层片上的位置和形成的斑点,可以确定分离效果并进行定性或定量分析。这可以通过显色剂或紫外光照射等方法来实现。

总的来说,薄层色谱法原理是基于样品分子与吸附剂的吸附作用和移动相的逐渐上升,利用它们在层片上的差异速度实现分离。

薄层色谱的原理

薄层色谱的原理

薄层色谱的原理

薄层色谱(thin layer chromatography,TLC)是一种常用的色谱技术,其原理基于化合物在静止相(固定在玻璃或塑料基底上)和流动相(液体或气体)之间的分配行为。利用该分配行为,可以将不同的化合物分离并检测。

在薄层色谱中,首先需要准备一层薄的静止相涂覆在玻璃或塑料基底上,这层涂层通常是硅胶或氧化铝。准备好的薄板即为薄层色谱板。然后将待分离的混合物溶解在流动相中,流动相通常是有机溶剂或混合溶液。接下来,将薄层色谱板浸入流动相中,使浸湿并等待流动相上升。

当流动相从底部向上渗透时,化合物会根据其亲水性或亲油性在静止相和流动相之间发生分配。亲水性较强的化合物会更多地留在静止相中,而亲油性较强的化合物则会随流动相上升。这样,不同化合物在薄层色谱板上会形成不同的斑点。

为了可视化这些斑点,通常会使用染料或化学试剂对化合物进行标记。染料或化学试剂与化合物发生反应后,能产生明显的色斑或荧光。通过比较样品中斑点的相对位置、颜色或荧光强度,可以对待分离的化合物进行鉴定。

薄层色谱因其简便、快速且经济的特点,在实验室常用于药物分析、有机合成、食品检测、环境监测等领域。它不仅可以用于分离化合物,还可以确定某一物质的纯度、判断反应的进行以及监测反应的过程。它是一种常用的分离和分析工具,广泛应用于化学、生物化学和药学等领域。

硅胶薄层色谱原理

硅胶薄层色谱原理

硅胶薄层色谱原理

硅胶薄层色谱(TLC)是一种分离和分析化合物的方法,其原理基于化合物在硅胶薄层(一种固定相)和流动相之间的差异分配行为。其原理如下:

1. 硅胶薄层:硅胶薄层是一种多孔性薄膜,由硅酸盐和其他物质组成。它具有较大的表面积和多孔结构,提供了很强的吸附能力。

2. 流动相:流动相由溶剂或溶剂混合物组成,可以是有机溶剂(如乙酸乙酯、丙酮等)和无机溶剂(如水、醇等)。流动相的选择取决于目标化合物的极性和分离要求。

3. 样品应用:待分析的混合物样品通过毛细管、微量注射器或样品斑点的吸附法等方法应用在硅胶薄层的一端。

4. 分离过程:待分析的化合物在样品斑点处被硅胶吸附,当流动相沿着硅胶薄层移动时,化合物会根据其相对亲水性或亲油性的不同在硅胶上分配。极性较大的化合物会被硅胶吸附得更紧密,移动速度较慢;而极性较小的化合物会被较少吸附,移动速度较快。

5. 可视化和分析:当流动相达到硅胶薄层的另一端时,通过对硅胶薄层的定性或定量分析,可以确定分离出的化合物的位置和相对含量。常用的可视化方法包括紫外灯照射、染色剂喷洒或化学反应等。

硅胶薄层色谱原理基于化合物在固相和流动相之间的分配差异,可用于快速、简单和经济的化合物分离和分析。

薄层层析硅胶板层析法基础知识点整理介绍

薄层层析硅胶板层析法基础知识点整理介绍

薄层层析硅胶板层析法知识点

一.薄层层析法基础知识:

薄层层析又叫薄板色谱,是快速分离和定性分析少量物质的一种很重要的实验技术,属固-液吸附色谱,它兼备了柱色谱和纸色谱的优点,一方面适用于少量样品(几到几毫克,甚至0.01毫克)的分离,另一方面再制作薄层板时,把吸附层加厚加大,又可用来精致样品,此法特别适用于发挥性较小或较高温度易发生变化而不能用气相色谱分析的物质。此外,薄层色谱法还可用来跟踪有机反应及进行柱色谱之前的一种“预试”。

二.色谱条件:

(1).固定相选择:

柱色谱中提到的吸附剂都可以用作为薄层色谱的固定相,分离性能及使用选择同柱色谱的选择原则相同。

一般用于薄层色谱时,要求吸附剂的粒度更小。商品吸附剂区分为色谱级(用于柱色谱)和薄层色谱级(用于薄层色谱)。

(2).展开剂选择:

薄层色谱展开剂的选择和柱色谱一样,主要根据样品中各组分的极性、溶剂对于样品中各组分溶解度等因素来考虑,展开剂的极性越大,对化合物的洗脱力也越

大。

选择展开剂时,除参照表列溶剂性来选择外,更多地采用实验的方法,在一块薄层板上进行实验:

①.若所选展开剂使混合物中所有的组分点都移到了溶剂前沿,此溶剂的极性

过强。

②.若所选展开剂几乎不能使混合物中的组分点移动,留在了原点上,此溶剂

的极性过弱。当一种溶剂不能很好地展开各组分时,常选择用混合溶剂作为展开剂,先用一种极性较小的溶剂为基础溶剂展开混合物,若展开不好,用极性较大的溶剂

与前一溶剂混合,调整极性,再次试验,直到选出合适的展开剂组合。合适的混合

展开剂常需要多次仔细选择才能确定。

硅胶薄层色谱和柱色谱的异同

硅胶薄层色谱和柱色谱的异同

硅胶薄层色谱和柱色谱的异同

硅胶薄层色谱和柱色谱都是常见的色谱分析技术,但其原理、操作方式和应用范围等方面存在一些不同之处:

1. 原理不同:硅胶薄层色谱是在硅胶薄层上进行分离的,它主要利用样品在硅胶表面的吸附、分配和反相作用进行分离纯化;而柱色谱则是在柱子中进行分离的,可根据不同物质的分子大小、化学亲和性等性质来对其进行分离。

2. 操作方式不同:硅胶薄层色谱可以手工或自动进行,分离迅速,适合样品少、分离较简单的情况;而柱色谱需要较多的列柱、洗柱、干燥等操作步骤,适合样品多、分离相对复杂的情况。

3. 分离能力不同:硅胶薄层色谱对于小分子化合物的分离纯化能力较强,而对于大分子化合物的分离纯化能力则较弱;而柱色谱则可以适用于各种不同性质的化合物,其分离能力较为全面。

4. 应用范围不同:硅胶薄层色谱适用于许多不同类型的样品,例如有机化合物、生物化学物质、药物、天然产物等;柱色谱则广泛应用于食品、环境、生物、医药等领域的样品分析和分离纯化。

总之,硅胶薄层色谱和柱色谱虽然存在一些不同之处,但均是色谱分析技术中常用的方法,它们的选择取决于具体的实验目的和样品特性。

薄层色谱rf值计算

薄层色谱rf值计算

薄层色谱rf值计算

薄层色谱(Thin-layer chromatography,缩写为TLC)是一种常用的分离和鉴定有机化合物的方法。其中一项重要的参数是RF值(Retention Factor),是评估分离效果和帮助鉴定化合物的指标。本文将详细介绍RF值的计算方法及其应用。

一、薄层色谱原理简介

薄层色谱是一种基于物质在固定相(例如硅胶或者其他吸附剂)和流动相(例如有机溶剂或者混合溶液)间的分配行为而进行的分离方法。在进行薄层色谱时,将待测样品通过一个均匀的色层覆盖在在固定相上,然后将色层浸入流动相中。样品中的化合物在固定相和流动相之间的分配不均匀,密度最接近流动相的化合物会更容易被流动相带走,而密度较高的化合物则留在固定相上。

二、RF值的定义与计算方法

RF值是指化合物在色谱条件下在固定相与流动相之间的相对迁移距离比。它是一个无单位的值,通常表示为小数或百分数。RF值的计算方法如下:

RF值=色点前行距离/迁移剂的前行距离

在进行计算时,迁移剂的前行距离是指从样品点到薄层底端的距离。色点前行距离是指从样品点到色点的最远距离。通常情况下,样品上有多个色点,需要分别测量各个色点的迁移距离,并计算其RF值。

三、RF值的应用

1.评估分离效果

RF值可以作为评估薄层色谱分离效果的指标之一、一般来说,RF值

越接近0或1,表示分离效果越好。若两个化合物的RF值非常接近,说

明它们在薄层色谱条件下很难分离。在优化分离条件时,可以通过调整固

定相和流动相的组成,改变化合物在色谱上的迁移距离,从而调整RF值,以达到较好的分离效果。

薄层色谱的分离原理

薄层色谱的分离原理

薄层色谱的分离原理、条件选择与操作方法

一、薄层色谱概念

最常用的薄层色谱也属于液-固吸附色谱。同柱色谱不同的是吸附剂被涂布在玻璃板上,形成薄薄的平面涂层。干燥后在涂层的一端点样,竖直放入一个盛有少量展开剂的的有盖容器中。展开剂接触到吸附剂涂层,借毛细作用向上移动。与柱色谱过程相同,经过在吸附剂和展开剂之间的多次吸附-溶解作用,将混合物中各组分分离成孤立的样点,实现混合物的分离。

薄层色谱原理图

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除了固定相的形状和展开剂的移动方向不同以外,薄层色谱和柱色谱在分离原理上基本相同。由于薄层色谱操作简单,试样和展开剂用量少,展开速度快,所以经常被用于探索柱色谱分离条件和监测柱色谱过程。

二、薄层色谱条件

⑴固定相选择

柱色谱中提到的吸附剂都可以用作为薄层色谱的固定相,分离性能及使用选择同柱色谱的选择原则相同(各种吸附剂见柱色谱表1)。

一般用于薄层色谱时,要求吸附剂的粒度更小。商品吸附剂区分为色谱级(用于柱色谱)和薄层色谱级(用于薄层色谱)。

⑵展开剂选择

薄层色谱展开剂的选择和柱色谱一样,主要根据样品中各组分的极性、溶剂对于样品中各组分溶解度等因素来考虑。展开剂的极性越大,对化合物的洗脱力也越大。(各种溶剂极性见柱色谱表2)。

选择展开剂时,除参照表列溶剂极性来选择外,更多地采用试验的方法,在一块薄层板上进行试验:

①若所选展开剂使混合物中所有的组分点都移到了溶剂前沿,此溶剂的极性过强;

②若所选展开剂几乎不能使混合物中的组分点移动,留在了原点上,此溶剂的极性过弱。当一种溶剂不能很好地展开各组分时,常选择用混合溶剂作为展开剂。先用一种极性较小的溶剂为基础溶剂展开混合物,若展开不好,用极性较大的溶剂与前一溶剂混合,调整极性,再次试验,直到选出合适的展开剂组合。合适的混合展开剂常需多次仔细选择才能确定。⑶相对移动值从点样原点开始到展开后的溶剂前沿,是溶剂的移动距离,记为lo,混合物中各组分的移动距离分别记为l1,l2,l3 …(移动值示意图)。

有机化学实验薄层色谱法分离原理解析

有机化学实验薄层色谱法分离原理解析
在固定条件下特定化合物的r值是一个常数因此在条件完全相同的情况下r值可以作为该化合物定性检定的物理指标就像测定熔点或其它物理常数一样为了获得相同的色谱条件通常是把未知样和标准样同时滴加在同一块薄板上未知样标准样二吸附剂最常用的吸附剂有硅胶氧化铝粒度一般为150300目筛孔其次是聚酰胺和纤维素其粒度一般分别为70140目筛孔和160200目筛孔
薄层粘合剂及其他添加剂
❖石膏(10—15%)、羧甲基纤维素钠(CMC)(0.5— 1%)、淀粉(5%)、聚乙烯醇(0.5—1%)等。 ❖添加1.5%的硅酸锌锰(Zn2SiO4∶Mn),制成荧光板。 ❖加入硝酸银可制成硝酸银薄板,用于分离含π键的顺、反异 构体。 ❖添加硼酸制成的薄层板则可以分离单糖类化合物异构体。
薄层色谱实验
有机化学实验
色谱法 薄层色谱法(THIN LAYER CHROMATOGRAPHY, TLC)
TLC定义:把吸附剂(硅胶)铺在玻璃板上,将样品点在其上,然 后用溶剂展开,使样品中各个组分相互分离的方法。
特点:简便、快速、微量的分离分析技术,应用广泛。 基本原理:不同物质与吸附剂(固定相)之间的吸附力不同;不 同物质在溶剂(流动相)中的溶解度不同;达到分离的目的。
图 3—28 各种点样方式示意图
源自文库.展开/展层
展开/展层的概念:
展层的容器:除了专用的色谱缸外,常见玻璃标 本缸、染色缸、广口瓶、大量筒、大试管等可作 为其代用品。

薄层层析的原理与操作

薄层层析的原理与操作

薄层层析的原理与操作

薄层色谱,或称薄层层析(thin-layer chromatography),是以涂布于支持板上的支持物作为固定相,以合适的溶剂为流动相,对混合样品进行分离、鉴定和定量的一种层析分离技术。这是一种快速分离诸如脂肪酸、类固醇、氨基酸、核苷酸、生物碱及其他多种物质的特别有效的层析方法,从50年代发展起来至今,仍被广泛采用。

一、基本原理

薄层层析是把支持物均匀涂布于支持板(常用玻璃板,也可用涤纶布等)上形成薄层,然后用相应的溶剂进行展开。薄层层析可根据作为固定相的支持物不同,分为薄层吸附层析(吸附剂)、薄层分配层析(纤维素)、薄层离子交换层析(离子交换剂)、薄层凝胶层析(分子筛凝胶)等。一般实验中应用较多的是以吸附剂为固定相的薄层吸附层析。

吸附是表面的一个重要性质。任何两个相都可以形成表面,吸附就是其中一个相的物质或溶解于其中的溶质在此表面上的密集现象。在固体与气体之间、固体与液体之间、吸附液体与气体之间的表面上,都可能发生吸附现象。

物质分子之所以能在固体表面停留,这是因为固体表面的分子(离子或原子)和固体内部分子所受的吸引力不相等。在固体内部,分子之间相互作用的力是对称的,其力场互相抵消。而处于固体表面的分子所受的力是不对称的,向内的一面受到固体内部分子的作用力大,而表面层所受的作用力小,因而气体或溶质分子在运动中遇到固体表面时受到这种剩余力的影响,就会被吸引而停留下来。吸附过程是可逆的,被吸附物在一定条件下可以解吸出来。在单位时间内被吸附于吸附剂的某一表面积上的分子和同一单位时间内离开此表面的分子之间可以建立动态平衡,称为吸附平衡。吸附层析过程就是不断地产生平衡与不平衡、吸附与解吸的动态平衡过程。

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薄层色谱原理及应用的一点心得

薄层色谱鉴别为我们在中药质量控制中常用的定性鉴别方法,有关的原理及小知识总结如下。

一、小知识

薄层色谱常用的硅胶较细,一般粒度在10~40μ,而柱层析常用的粒度为100~160目。

我们在试验中也常用到的硅胶板其成分及组成如下

硅胶

硅胶

2.

所以说在用极性吸附剂如硅胶,氧化铝时,选用极性大的展开剂(相对于组分来说)均可以使组分跑到前沿。

常用的展开系统

石油醚-乙酸乙酯,氯仿-甲醇-水,乙酸乙酯-甲醇,正丁醇-乙酸-水,极性由小到大,还有看你的物质,比例自己可以摸索,还有如果你的物质偏酸性,可加点甲酸,偏碱性,可用碱板来爬,或者用氨水饱和后再展开。

三、在应用中的一点体会

仅供个人学习参考

1、争宠我们把硅胶比作皇帝,硅胶极性大,根据相似相溶原则,喜欢极性大的,就好比,皇帝喜欢丰满的妃子,比如

杨贵妃,是待分离组分,很丰满,极性大,而田贵妃是流动相,比杨贵妃瘦,极性小,皇帝不喜欢他,田贵妃就离皇帝远远的,也就是说,硅胶(即皇帝)更喜欢杨贵妃-待测组分,因而很不容易被展开,Rf值小。田贵妃不甘心啊,就拼命吃,很快就比杨贵妃还胖,也就是将溶剂的极性调大,这下皇帝就喜欢上了田贵妃,将杨贵妃踢开,杨贵妃-待分离组分,很快就被洗脱或展开了。

2、窝里斗还将硅胶比作皇帝,硅胶极性大,相似相溶原则,喜欢极性大的,就好比,皇帝喜欢丰满的妃子,而待分离

田军

仅供个人学习参考

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