生物显微技术实验指导

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初中生物实验设计与指导教案

初中生物实验设计与指导教案

初中生物实验设计与指导教案实验一:观察植物细胞结构实验目的:了解植物细胞结构并能够准确使用显微镜观察。

实验材料:洋葱片、显微镜、盐水溶液、玻璃片、盖玻片等。

实验步骤:1.取一个洋葱,在显微镜下切取一小块叶片,并将其放入盐水溶液中浸泡10分钟,使其软化。

2.用镊子将叶片取出并放在带有两滴水的玻璃片上。

3.轻轻压住叶片,用另一块玻璃片向下刮,以释放细胞内容物。

4.将盖玻片贴在玻璃片上,并用手轻轻按压以避免空气泡现象。

5.将制好的玻璃片放入显微镜中进行观察。

6.通过调节显微镜的焦距和倍数,观察并记录细胞核、质壁、液泡等植物细胞结构。

实验二:探究光合作用实验目的:了解光合作用的条件及相关因素对其速率的影响。

实验材料:水培植物、盆土、光照仪、测光计等。

实验步骤:1.准备一两株健康的水培植物,并将其分别置于光照强度不同的环境中,如室内、阳台、日光灯等。

2.设置好实验组和对照组,确保每组都有足够数量的植物样本。

3.使用测光仪测量不同环境下的光照强度,并记录下来。

4.每天固定时间进行测量,记录下每组植物的生长情况,包括高度、叶片数量等指标。

5.根据数据变化判断不同环境与光照强度对植物生长及光合作用速率的影响。

实验三:观察动物细胞结构实验目的:通过显微镜观察动物细胞结构,并学会正确使用显微镜操作。

实验材料:新鲜洗净的卵清液(鸡蛋)、玻璃片、盖玻片等。

实验步骤:1.取一个新鲜的鸡蛋并打开,将其中的卵清液倒入玻璃杯中。

2.用一滴卵清液滴在玻璃片上,然后用盖玻片轻轻压在上面。

3.将制作好的标本放在显微镜下观察,并使用调节装置和镜头来调整焦距和倍数。

4.观察并记录卵清液中可见的动物细胞结构,如细胞核、细胞膜等。

以上是三个简单的初中生物实验设计与指导教案,通过这些实验,学生们可以更加直观地了解植物细胞和动物细胞的结构、观察技巧和科学实验的基本原理。

每个实验都可以根据需要进行进一步扩展和探究,以增强学生对生物科学的兴趣和理解。

细胞生物学实验指导(12生工)

细胞生物学实验指导(12生工)

细胞生物学实验指导(12生工)细胞生物学实验教案实验一:特殊显微镜的使用及显微摄影术一、实验目的:1、掌握暗视野显微镜、相差显微镜的原理、构造及其使用方法。

2、掌握显微摄影装置及其操作技术,独立完成显微摄影全过程。

二、实验原理:暗视野显微镜应用丁达尔现象,装配暗示场聚光器,是入射光从聚光器斜向照明被检样品。

暗视野显微镜利用样品的散射光和放射光进行观察,只能观察物体的存在与运动而不能辨清其细微结构。

暗视场照明是照明光线仅照亮被检样品而不能进入物镜,使视场背景暗黑,样品明亮的照明方法。

相差显微镜利用被检物体的光程之差进行镜检,通过衍射和干涉现象,将肉眼看不到的相差,变为明暗的振幅差而能看到。

相差显微镜应用于生物学的主要价值,在于对透明的活体进行直接观察,无需采用是细胞致死的固定和染色的方法。

0lympus BH系列的BHS和BHT型显微镜有摄影装置,通过摄影装置,拍摄显微视场中被检样品。

三、实验仪器与试剂1、材料:洋葱鳞茎、人口腔细胞;2、器材:暗视场显微镜、相差显微镜、Olympus显微镜、活体生物样品、擦镜纸、消毒牙签、镊子、滴管、纱布、吸水纸、载玻片、盖玻片3、试剂:生理盐水(0.9%)、2%碘液、香柏油、二甲苯。

四、实验步骤与方法(一)口腔上皮细胞的制备及染色1、把载玻片和盖玻片擦拭干净;2、用滴管在载玻片的中央滴一滴生理盐水;3、用消毒牙签在自己漱净的口腔内壁轻轻地刮几下;4、把牙签上的碎屑放在生理盐水中轻涮几下;5、盖上盖玻片;6、在盖玻片的一侧滴一滴稀碘液;7、用吸水纸吸引,使染液浸润标本的全部。

(二)洋葱鳞茎内表皮装片制作1、把载玻片和盖玻片擦拭干净;2、用滴管在载玻片的中央滴一滴蒸馏水;3、用镊子撕取洋葱鳞茎内表皮置于蒸馏水中;4、盖上盖玻片;5、在盖玻片的一侧滴一滴稀碘液;6、用吸水纸吸引,使染液浸润标本的全部。

(三)分别用暗视场显微镜和相差显微镜观察(四)显微摄影的使用将装片置于显微摄影镜下,选一清晰的视野进行拍摄并打印出来。

生物显微技术实验指导

生物显微技术实验指导

一、实验目的掌握制作石蜡切片中固定、包埋的基本操作技术。

二、实验用品1、实验材料:鱼2、实验试剂:10%甲醛溶液(40%甲醛10ml,蒸馏水90ml)、50%酒精、70%酒精、80%酒精、90%酒精、95%酒精、100%酒精、二甲苯、石蜡。

3、实验器具:解剖器,双面刀片,小瓶,牛皮纸、电热恒温箱、脱水机、包埋机。

三、实验步骤1、取材:用任何杀生的方法把鱼杀死,将腹腔打开,切取0.5cm3左右大小的肝脏、肠等组织。

2、固定:将切好的组织直接投入10%甲醛固定液中,固定24h。

3、脱水:50%酒精→70%酒精→80%酒精→90%酒精→95%酒精→100%酒精→100%酒精。

每级1-2h。

70%酒精处可长期保存。

4、透明:1/2二甲苯+1/2100%酒精(1-2h) →纯二甲苯(1h) →纯二甲苯(1h)5、浸蜡:石蜡先置于60℃的温箱中,倒入含二甲苯及材料的小瓶中置于37℃温箱中,放置2-4小时。

6、包埋:先提升恒温箱的温度至60℃,换纯蜡3次,每次1-2h,用牛皮纸叠纸盒,置于45-60℃的烫板上,倒入材料,摆放好材料,把标签(正面向外置于底部),补足石蜡,倒好后轻轻的置于冷水盆中,注意底面要接触盆中凉水,待石蜡全部凝固后可取出晾干,也可在凉水盆中放置过夜。

四、作业分析总结石蜡切片技术中固定和包埋的操作注意事项有哪些?附:折纸盒按下列顺序折叠:(1) 折AA'及BB';(2) 折CC'及DD';(3) 折CE'与AE'、向外夹出EE'。

同样折出FF',GG'及HH';(4) 使CE'E与E'IE两三角形相叠,并沿E'C和EI重叠的折痕向后转折。

同样折其余三只角;(5)折RIJF向外,同样折出GKLH,即折成所需的纸盒。

一、实验目的掌握制作石蜡切片中切片、贴片的基本操作技术。

二、实验用品:1.实验试剂:95%酒精、100%酒精、二甲苯、明胶液、蒸馏水。

初中教育中的生物科学实验指导

初中教育中的生物科学实验指导

初中教育中的生物科学实验指导引言:生物科学实验是初中生物教育中不可或缺的一部分,通过实践探究,学生能够亲自参与到科学研究中,培养科学思维和实验技能。

本文将为初中生物科学实验提供一些引人入胜且内容丰富的指导,旨在帮助学生更好地理解生物科学原理和培养科学精神。

实验一:观察植物细胞结构实验目的:通过显微镜观察植物细胞的结构,并了解细胞的基本组成。

实验步骤:1. 取一片新鲜的洋葱表皮,用镊子将其剥离下来。

2. 将洋葱表皮放入盐水中浸泡5分钟,使其软化。

3. 用镊子将洋葱表皮放入玻璃片上,用刀片将其切成薄片。

4. 在玻璃片上加一滴碘液,用盖片盖住,然后放入显微镜下观察。

实验二:观察动物细胞结构实验目的:通过显微镜观察动物细胞的结构,并了解细胞的基本组成。

实验步骤:1. 取一片新鲜的洋葱表皮,用镊子将其剥离下来。

2. 将洋葱表皮放入盐水中浸泡5分钟,使其软化。

3. 用镊子将洋葱表皮放入玻璃片上,用刀片将其切成薄片。

4. 在玻璃片上加一滴碘液,用盖片盖住,然后放入显微镜下观察。

实验三:观察细胞分裂实验目的:通过显微镜观察细胞分裂的过程,并了解细胞分裂的重要性。

实验步骤:1. 取一片洋葱的根尖组织,用镊子将其剥离下来。

2. 将根尖组织放入盐水中浸泡5分钟,使其软化。

3. 用镊子将根尖组织放入玻璃片上,用刀片将其切成薄片。

4. 在玻璃片上加一滴碘液,用盖片盖住,然后放入显微镜下观察。

实验四:观察植物光合作用实验目的:通过实验了解植物进行光合作用的过程和原理。

实验步骤:1. 取一片新鲜的水蕨叶片,用镊子将其剥离下来。

2. 将水蕨叶片放入含有酒精的试管中,用烧杯加热,使其脱色。

3. 将脱色后的水蕨叶片放入含有碳酸氢钠的试管中,用烧杯加热,使其变黄。

4. 将变黄的水蕨叶片放入含有碘液的试管中,观察颜色变化。

实验五:观察动物呼吸作用实验目的:通过实验了解动物进行呼吸作用的过程和原理。

实验步骤:1. 取一只小白鼠,将其放入密封的玻璃管中。

生物显微技术实验

生物显微技术实验

长江大学生命科学学院备课用纸
长江大学生命科学学院备课用纸
长江大学生命科学学院备课用纸
、王灶安.植物显微技术.北京:农业出版社,1992
2006电子版
、李正理.植物组织制片学.北京:北京大学出版社,1996
长江大学生命科学学院备课用纸实验四脱水、透明与浸蜡步骤及过程表
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、每人制作一张永久片;
、将观察结果绘图,并表明各部位的名称。

长江大学生命科学学院备课用纸
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长江大学生命科学学院备课用纸。

微生物实验指导书

微生物实验指导书

微生物实验指导书实验一普通光学显微镜的使用维护一、实验目的:1、掌握显微镜的构造原理及性能。

2、纯熟掌握显微镜的操作方法3、初步了解血球计数板的使用方法。

二、实验原理:1、显微镜的实验原理:普通光学显微镜运用目镜和物镜两组透镜系统来放大成像,故又常被称为复式显微镜。

它们由机械装置和光学系统两大部分组成。

在显微镜的光学系统中,物镜的性能最为关键,它直接影响着显微镜的分辨率。

而在普通光学显微镜通常配置的几种物镜中,油镜的放大倍数最大,对微生物学研究最为重要。

与其他物镜相比,油镜的使用比较特殊,需在载玻片与镜头之间加滴镜油,这重要有如下二方面的因素:①增长照明亮度②增长显微镜的分辨率。

2、血球计数板的构造原理:血球计数板是一块特制的厚的载玻片,其上由四条竖槽构成三个平台,中间较宽的平台又被一短的横槽隔成两半,每一边的平台上各刻有一个方格网,每个方格网共分为9个大方格,中间的大方格为计数室。

计数室的刻度有两种规格即16×25或25×16的。

现在常用25×16的,即计数室(一个大方格)提成25个中方格,每个中方格由分为16个小方格。

1、仪器:显微镜、载玻片、盖玻片、牙签、血球计数板2、材料:擦镜纸、元葱四、实验环节:(一)显微镜练习:1、制片:用牙签挑少许元葱表皮放在载玻片上,然后加盖盖玻片。

2、观测:低倍镜高倍镜(二)血球计数板的练习:先用低倍镜查找中方格,再用高倍镜查找小方格,按照左上、左下、右上、右下、中心格练习。

实验二革兰氏染色法一、目的规定了解革兰氏染色的原理,学习并掌握革兰氏染色的方法。

二、基本原理革兰氏染色反映是细菌分类和鉴定的重要性状。

它是1884年由丹麦医师Gram创建的。

革兰氏染色法(Gram stain)不仅能观测到细菌的形态并且还可将所有细菌区分为两大类:染色反映呈蓝紫色的称为革兰氏阳性细菌,用G+表达;染色反映呈红色(复染颜色)的称为革兰氏阴性细菌,用G-表达。

初中生物实验指导

初中生物实验指导

初中生物实验指导第一篇范文:初中生物实验指导生物实验是生物学教学的重要组成部分,它有助于学生更好地理解生物学知识,培养学生的动手能力和科学思维。

为了保证初中生物实验的质量和安全,本文将对初中生物实验的准备工作、操作步骤和注意事项进行详细指导。

二、实验准备工作1.实验器材:在实验前,学生应根据实验需要准备好相应的器材,如显微镜、放大镜、解剖工具、培养皿、试剂等。

2.实验材料:学生应根据实验要求准备好相应的生物材料,如植物叶片、昆虫、动物组织等。

3.实验试剂:学生应根据实验要求准备好相应的试剂,如盐酸、酒精、碘液等。

4.实验环境:确保实验室通风良好,温度适宜,光线充足。

三、实验操作步骤1.观察植物叶片:首先,用剪刀剪取一片新鲜的植物叶片,放入显微镜观察。

观察时,应注意叶片的结构,如叶肉、叶脉等。

2.制作植物切片:将剪取的植物叶片放入水中浸泡,待叶片软化后,用切片刀切割叶片,制作成切片。

3.观察植物切片:将制作好的切片放在显微镜下观察,观察叶片的细胞结构,如细胞壁、细胞质、细胞核等。

4.染色实验:为了更好地观察细胞结构,可用碘液对切片进行染色。

将染色后的切片放在显微镜下观察,对比染色前后的细胞结构。

四、注意事项1.实验安全:在实验过程中,学生应严格遵守实验规程,确保自身和他人的安全。

2.实验器材使用:在使用实验器材时,学生应遵循正确的操作方法,避免损坏器材。

3.实验材料处理:在实验结束后,学生应将实验材料进行妥善处理,不得随意丢弃。

4.实验记录:学生在实验过程中应做好实验记录,记录实验现象和结果。

通过以上实验,学生可以更好地了解植物叶片的结构和细胞特征。

在实验过程中,学生不仅锻炼了动手能力,还培养了观察、思考和总结的能力。

在今后的生物学习中,学生应继续开展实验活动,不断提高自己的实践能力。

为了进一步提高学生的生物实验能力,教师可以引导学生参加生物科技创新比赛、实验设计竞赛等活动,激发学生的创新意识和实践能力。

植物生物学实验:显微技术及显微镜的使用方法

植物生物学实验:显微技术及显微镜的使用方法
2020/11/27
显微镜的分辨率
• 显微镜的分辨率是指显微镜的最小分辨 距离,即显微镜将物体放大成像后,能 将物体相近两点分辨清楚的极限距离, 通常用D表示。它与物镜的数值孔径成 反比,与光波长度成正比。公式为:
• D=0.16入/NxA 入为光波波长。 NxA 为物 镜数值孔径。D越小,显微镜的分辨率 就越高。
2020/11/27
显微镜的机械装置
• 显微镜的机械装置是有精密而牢固的零件组 成,主要包括镜座、镜臂、载物台、镜筒、 物镜转换器和调焦装置等。
• (1)镜座:又称镜脚是显微镜的基座,用以 支持整个镜体的稳定。有的显微镜在镜座内 有照明光源或反光镜。
• (2)镜臂:支持镜筒、载物台、聚光器和调 焦装置等。
• 物镜的数值孔径,又称镜口率,常用NxA或 A表示。数值孔径越大吸光量越多,分辨力 越高。NxA=nxsina/2(n是指物镜与标本之间 介质的折射率;a指镜口角。
2020/11/27
2020/11/27
马铃薯淀粉颗粒4倍镜下观察图片
2020/11/27
• 马铃薯淀粉颗粒10倍镜下观察图片
2020/11/27
• (5)物镜转换器:固着于镜筒的下端,可自 由旋转,更换物镜。当他们转到工作位置时 即与光轴合轴。安装物镜时要把镜筒提高, 以防止镜头碰到载物台。转换物镜要用手指 捏紧转换蝶,而不要推物镜,防止破坏合轴。
2020/11/27
• (6)调焦装置:为了得到清晰的物像,必须 调节物镜与标本之间的距离,使它与物镜的 工作距离相等,这种操作叫做调焦。
2020/11/27
• 2.低倍镜观察

镜检任何标本都要养成必须先用低倍镜
观察的习惯。因为低倍镜视野较,易于发现

微生物显微技术实验

微生物显微技术实验

《微生物显微技术实验》实验指导书王卫主编中南林业科技大学生科院生物工程专业第一部分 实验目的《微生物显微技术》实验课是我院生物工程专业学生的一门重要的基础实验课,是学生进一步深入了解微生物形态与功能关系,将微生物理论与实践应用结合的一门实验课。

《微生物显微技术实验》实验的目的是使学生在掌握微生物学的基本实验方法和技术的基础上,正确的使用实验的仪器设备和掌握微生物显微技术的常规方法,在学生头脑中建立菌株生理和形态鉴定的实验流程,是学生进行后续课程实验和研究的基础。

在目前的实验室条件和有限学时的情况下,得到微生物显微实验技术的基本操作和技能训练,培养学生动手操作能力和创新能力。

通过微生物显微实验课教学,加深理解和巩固课堂所学的知识,熟悉微生物显微实验的基本操作技术,了解微生物显微实验的基础知识。

通过微生物显微实验培养学生观察、思考、分析问题、解决问题的能力,养成实事求是、严肃认真的科学态度、创新精神、创新思维和创新能力。

本实验指导书主要内容包括:细菌芽孢、荚膜、鞭毛的形态观察及染色方法、放线菌和霉菌的菌丝形态观察及染色方法、微生物检测分离及种属鉴定、林木微生物降解菌株实验调查等内容。

整个实验课中贯穿了显微镜使用-灭菌方法-无菌操作-微生物菌种分离筛选鉴定、选育-微生物代谢作用这一主线。

微生物显微技术需掌握的基本操作在实验中得到训练,同时加深了学生对所学微生物显微学基本概念的理解。

实验设计贴近生活,可以大大提高同学们学习微生物显微技术的兴趣。

实验内容与目录如下: 序 号 实验名称 学时 实验类型实验一 细菌芽孢、荚膜、鞭毛的染色及形态观察3 基础验证性实验实验二 酵母菌的形态观察3 实验三 放线菌和霉菌的菌丝形态观察3 实验四 酸奶中微生物及双歧杆菌口服液中微生物形态观察3 设计性实验*实验五 发酵罐内赤霉菌菌丝形态变化与代谢关系3 实验六 环境中产纤维素酶菌株筛选及鉴定3 * 设计性试验任选一项第二部分微生物显微实验规则微生物显微实验的对象大多为环境微生物,其中某些微生物对人体具有危害性,因此要求进入实验室后必须严格遵守以下实验室规则:1.进入实验室应先穿白大衣,离开实验室时要脱下白大衣,反折放回原处,不必要的物品不得带入实验室,必须带入的书籍和文具等应放在指定的非操作区,以免受到污染。

生物医学实验作业指导书

生物医学实验作业指导书

生物医学实验作业指导书一、实验目的本实验旨在帮助学生熟悉生物医学实验的基本操作技能,了解常用实验仪器的使用方法,并培养观察、记录实验数据及结果的能力。

二、实验器材与试剂1. 实验器材:- 显微镜- 电子天平- 显微镜载玻片- 针筒、注射器- 实验用动物(小白鼠)2. 实验试剂:- 生理盐水- 碘酒- 乙醇- 碘化钾溶液三、实验步骤1. 细胞计数实验:步骤1:准备工作- 使用生理盐水清洗玻璃仪器,保证卫生无菌; - 将显微镜装置好,调整放大倍数;- 准备好显微镜载玻片。

步骤2:制备待测试细胞悬液- 取一定量的细胞液,加入适量的生理盐水;- 彻底摇匀,以保证细胞分布均匀。

步骤3:进行细胞计数- 取适量悬液加入显微镜载玻片上;- 在显微镜下观察和调整焦距,找到合适的视野; - 使用计数网格统计细胞数量;- 重复计数,求取平均值。

2. 血液型实验:步骤1:准备工作- 将玻璃仪器用乙醇消毒,保证卫生无菌;- 准备好实验所需的试剂和实验用动物。

步骤2:血样采集- 使用针筒和注射器采集小白鼠的血液样本;- 将血液滴入玻璃片上。

步骤3:加入试剂- 在滴有血液样本的玻璃片上滴加碘化钾溶液;- 混合均匀,等待反应发生。

步骤4:观察结果- 使用显微镜观察血液中的凝集现象;- 根据凝集的形状及规模判断血型。

四、实验注意事项1. 安全注意:- 在实验操作过程中,需佩戴实验手套,避免直接接触实验物品; - 针筒和注射器只可单次使用并妥善处理。

2. 实验仪器使用注意:- 显微镜使用前需进行调节,以保证观察效果;- 电子天平应平稳放置,避免碰撞和摔落。

3. 试剂使用注意:- 使用前检查试剂标签,确保使用正确的试剂;- 碘酒和碘化钾溶液均为有毒物质,慎用。

五、实验结果记录与分析1. 细胞计数实验结果:- 记录在显微镜视野中数到的细胞数量;- 计算平均数,并根据该数值进行数据分析和结果陈述。

2. 血液型实验结果:- 观察血液样本中的凝集情况;- 根据凝集的形状和规模进行血型判断。

生物显微技术

生物显微技术

生物显微技术生物显微技术第一章1、生物显微技术:是应用各种光学显微镜或电子显微镜观察和辨认微小生物(动物、植物和微生物)的细胞形态及其显微、亚显微结构,也包括植物染色体技术与原位杂交等新的方法和技术。

2、列文虎克发明显微镜。

罗伯特胡克用自己设计与制造的显微镜(放大倍数为40-140倍)观察了软木(栎树皮)的薄片,第一次描述了植物细胞的构造,并首次用拉丁文cellar(小室)这个词来称呼他所看到的类似蜂巢的极小的封闭状小室(实际上只是观察到到纤维质的细胞壁)。

第二章1、材料采集注意事项:①选择新鲜的、健康的、有代表性的实验材料;②在保证材料完整的条件下,注意实验材料要“精而小”,而不是“大而多”;③注意实验材料的生长季节和发育时期;④选用刀刃锋利的刀片,切割时用力应均匀,避免组织破裂,影响制片效果;⑤实验材料选好后,应在极短的时间内杀死和固定。

2、切取纵切面时应注意使刀的切向与根茎的长轴方向平行。

这种切面分为两种①、径切面②、切向切面(弦切面)3、固定:应用某种方法以最快的速度,将生物细胞或组织杀死,投入某类化学药液中,借助化学药品的作用使细胞组织保持原来的形状与结构。

4、固定时的注意事项:①材料新鲜:组织采集与分割后须立即固定。

否则时间相隔过久,体积就要收缩变形或发生自溶现象。

一般以神经、造血组织自溶速度较快,胰腺、胃肠道的粘膜亦较易发生改变。

②防止变形:对一些柔嫩或薄的材料如神经、肠系膜等,应先平铺于吸水纸上再固定,可防止因蛋白质凝固而引起的扭转变形。

对含气而浮于液体表面的组织如肺等,可缚以重物使其下沉,或吸出肺内气体,使其下沉于固定剂内。

③固定剂用量:一般为组织体积的10~20倍。

避免组织内水分在固定时渗出,影响固定剂的浓度。

勿使组织贴于瓶底或瓶壁,以免影响固定剂的渗入。

在平时往往用棉花垫以瓶底,而使固定剂能均匀地渗入。

④固定时间:根据组织的不同种类、性质、大小,固定剂种类、性质、渗透力的强弱而定。

生物显微技术实验报告

生物显微技术实验报告

生物显微技术实验报告实验目的掌握石蜡切片技术,为以后的科研中切出合格的实验装片做准备,学习植物制片过程并观察植物叶的横切面内部结构。

实验原理石蜡切片法是通过利用锋利的刃具(切片机)将组织切成极薄的片层,且材料须经过一定特殊的处理,如固定、脱水、包埋、切片、染色等,在制作过程中,还要经过一系列的物理和化学的处理,这些处理方法可根据各种不同材料的性质要求进行合理选择。

切片法虽然工序繁琐,技术复杂。

但是,它最能保持细胞间的正常的相互关系,能较好和较长时间地保留细胞的原貌,还能制作连续切片,组织块可包埋在石蜡中永久保存,本次实验利用的是微波石蜡切片法,微波处理是利用微波辐射使离子进行移动的一系列过程,这不仅缩短了实验的时间,而且操作简单易行,也保证了实验效率和质量。

实验仪器、材料及试剂:①仪器:微波炉、石蜡切片机、恒温箱等②材料:腊梅③试剂:FAA固定液、酒精(Al)、番红、二甲苯(DMB)、石蜡、树胶等方法与操作步骤一、脱水:依次使用下列浓度的乙醇脱水50%乙醇—70%乙醇—85%乙醇—95%乙醇—100%乙醇—100%乙醇每步两个小时。

二、透明:依次通过下列试剂进行透明1、1/2无水乙醇1/2二甲苯(加少许番红粉末,对材料进行附染)两个小时2、二甲苯两个小时3、二甲苯一个小时三、浸蜡:浸蜡步骤如下1、将材料瓶中的二甲苯取出1/2,加入剩余二甲苯的体积3/2倍的石蜡液于36℃温箱中处理35小时2、换用纯石蜡液于60℃温箱中处理2小时,再换一次纯石蜡液处理2小时四、包埋与切片1、在提前准备好的纸盒中放入少量蜡液。

2、片刻后放入材料,避免形成断层还要注意材料摆放的位置和方向。

3、及时将蜡块冷却,防治形成结晶。

4、修块与粘连:将多余的石蜡切除,使蜡块成为梯形;将蜡块一正确的方向粘连在枕木上。

5、切片:利用切片机将蜡块切成薄片。

切片厚度为8~10μm ,以每分钟40~50转为宜。

6、粘片与展片:在载玻片上滴一滴黏贴剂和一滴蒸馏水用牙签涂匀,将蜡带光面朝下固定于载玻片上,放到展片台上经加温使其充分展开。

初中生物实验操作指导与实验报告要点

初中生物实验操作指导与实验报告要点

初中生物实验操作指导与实验报告要点实验名称:观察植物细胞的结构实验目的:通过实验观察植物细胞的结构,了解细胞的基本组成和功能。

实验材料:1. 洋葱切片2. 干净的显微镜玻片3. 盖玻片4. 保鲜膜5. 注射器或吸管6. 高锰酸钾溶液7. 酒精灯或煤气灯8. 水实验步骤:1. 将洋葱切片浸泡在高锰酸钾溶液中约10分钟,以软化细胞壁。

2. 将一片浸泡过的洋葱切片取出放在显微镜玻片上。

3. 将另一块玻片有顶部覆盖在洋葱切片上,然后轻轻按压,使洋葱切片变薄。

4. 将切片浸泡在酒精中,然后立即将切片放入温水中,用力振荡,以去除切片表面的色素。

5. 用吸管或注射器将一滴水滴在洋葱切片上,用盖玻片将其覆盖。

6. 将覆盖好的玻片放在显微镜中,调整放大倍数至适合观察。

7. 观察细胞的形态、细胞壁、细胞质、细胞核等结构。

实验注意事项:1. 实验过程中要小心操作,避免切伤手指。

2. 使用显微镜时,要注意调节放大倍数,以免出现模糊不清的观察效果。

3. 注意观察时要轻柔移动显微镜的调节旋钮,避免打乱玻片的位置。

4. 注意勿将高锰酸钾溶液触及皮肤或衣物,以免引起灼伤。

实验报告要点:1. 实验目的:简明扼要地阐述本次实验的目的,即通过观察植物细胞的结构来了解细胞的基本组成和功能。

2. 实验材料:列出实验所用的材料,包括洋葱切片、显微镜玻片、盖玻片、保鲜膜、注射器或吸管、高锰酸钾溶液、酒精灯或煤气灯、水。

3. 实验步骤:详细描述实验的步骤,包括洋葱切片的处理、显微镜的调整与使用等。

4. 观察结果:准确描述所观察到的细胞的形态、细胞壁、细胞质、细胞核等结构,并标注出对应的图示。

5. 结果分析与讨论:对观察到的细胞结构进行分析和讨论,例如细胞壁的作用、细胞核的功能等。

6. 实验总结:简要总结本次实验的目的、步骤和观察结果,以及从实验中所获得的有关细胞结构的新知识。

7. 实验改进:对实验中可能存在的不足之处和改进方法进行讨论,提出对实验的改进建议。

生物实验技巧课学习生物实验中的显微镜使用技巧

生物实验技巧课学习生物实验中的显微镜使用技巧

生物实验技巧课学习生物实验中的显微镜使用技巧主题:生物实验技巧课学习生物实验中的显微镜使用技巧一、引言在生物学研究和实验中,显微镜是一种非常重要的工具。

它可以让我们观察到微小的生物结构和细胞,对于理解生物现象和现象起着关键作用。

掌握显微镜的使用技巧是学习生物实验的基础,本节课将重点介绍显微镜的使用技巧。

二、显微镜的基本结构和原理1. 显微镜的基本结构:透镜组、目镜、物镜、光源和台架等。

2. 显微镜的工作原理:通过目镜、物镜等透镜组合将光线聚焦到待观察样品上,同时通过目镜观察到放大后的样品图像。

三、显微镜的使用注意事项1. 样品的准备:样品应摆放在玻片上,并在上面加一滴显微镜试液。

2. 调焦:通过转动升降机或调节物镜距离来获得清晰的样品图像。

3. 观察放大倍数:根据需要选择合适的物镜放大倍数,避免过度放大导致图像模糊。

4. 操作注意:使用显微镜时,要避免强光直接照射眼睛,避免镜头碰撞和过度调节焦距。

四、常见的显微镜使用技巧1. 平移移动:通过转动升降机,调节样品位置以便观察到不同部位。

2. 旋转调节:转动物镜转盘,调节不同物镜以得到不同的放大倍数。

3. 调节光源:根据需要调节光源亮度,避免过亮或过暗的情况。

4. 显微镜镜片清洁:使用特制的镜片纸或棉签蘸取少量无水乙醇轻轻擦拭镜片,避免使用含有酸碱的清洁液。

五、显微镜的维护和存放1. 维护:使用完毕后应认真清洁显微镜,保持其清洁干燥,并避免碰撞和摔落。

2. 存放:将显微镜放置在干燥通风的地方,避免阳光直射和潮湿环境。

六、实验操作演练通过实验操作,让学生亲自使用显微镜,并观察不同样品,培养学生对显微镜的熟练使用。

七、总结通过本节课的学习,学生们掌握了显微镜的基本使用技巧和操作步骤,对于进一步学习和探索生物学领域将起到积极的促进作用。

同时,培养了学生的实验操作能力和观察力。

八、拓展阅读鼓励学生阅读相关生物学方面的书籍和文献,深入了解显微镜的工作原理和应用。

初中:生物实验设计与现场操作指导

初中:生物实验设计与现场操作指导

初中:生物实验设计与现场操作指导引言生物实验是初中生物学教学的重要组成部分,通过实际操作和观察,学生可以更好地理解生物学的基本概念和原理。

本文将介绍一些适合初中生进行的生物实验设计,并提供现场操作指导,以帮助学生顺利完成实验。

实验1:观察显微镜下的植物细胞材料: - 鲜嫩的洋葱片 - 盐水 - 碱性溶液(如氨水) - 碘酒 - 显微镜 - 盖玻片和载玻片步骤:1. 取一块洋葱片放在载玻片上。

2. 在洋葱片上滴加盐水使其保持湿润。

3. 用锋利刀片轻轻削去洋葱片表面的一小块。

4. 在削去表皮的洋葱片上滴加碱性溶液。

5. 将一个盖玻片放在洋葱片之上,使其稍微压平。

6. 将装有盖玻片的载玻片放在显微镜台上,调整镜头直到看到清晰的图像。

7. 在显微镜下逐渐调整放大倍数,观察洋葱细胞的结构。

8. 如需染色,滴加少量碘酒,并再次观察。

注意事项:- 操作前确保显微镜调整正确并且载玻片无空气泡。

- 洋葱需新鲜,切削时要小心避免受伤。

- 实验完成后要及时清理和保存实验器材。

实验2:探究光合作用材料: - 绿色植物(如水生植物或绿叶) - 高度浓缩盐水 - 透明塑料袋 - 太阳光步骤: 1. 取一段绿色植物(如水生植物或绿叶)。

2. 将绿色植物放入高度浓缩盐水中,将其浸泡一段时间,使其失去活性。

3. 取出失去活性的绿色植物,并在塑料袋内密封住它。

4. 将密封的塑料袋放在阳光下曝晒一段时间。

5. 观察塑料袋内氧气和二氧化碳的变化。

注意事项: - 操作过程中要小心避免损坏叶片。

- 选择一个阳光充足的地方进行曝晒实验。

实验3:观察蚯蚓运动习性材料: - 湿润的泥土 - 一只或多只蚯蚓步骤: 1. 取适量湿润的泥土放入一个容器中。

2. 将一只或多只活跃的蚯蚓放入泥土中。

3. 观察和记录蚯蚓在不同环境条件下的反应和运动习性,如触摸、温度变化等。

注意事项: - 保持泥土湿润,但不要太湿,以确保蚯蚓能正常活动。

初中生物实验指导手册

初中生物实验指导手册

初中生物实验指导手册生物实验是中学生学习生物知识和培养科学实验能力的重要环节。

本手册旨在为初中生物实验提供指导,帮助学生正确进行实验操作并深入理解实验原理。

实验一:观察显微镜下的植物细胞实验目的:通过观察显微镜下的植物细胞,掌握细胞组成和细胞器的结构。

实验材料:玉米苗、显微镜、玻璃刀、载玻片、甘油、显微镜盖玻片、蒙古黑实验步骤:1. 将玉米苗取一小片,放在载玻片上。

2. 用玻璃刀将玉米苗切割成薄片。

3. 在蒙古黑滴一滴甘油,再将切割好的玉米苗片加入。

4. 用显微镜将玉米苗片放在显微镜盖玻片上。

5. 调节显微镜放大倍数,观察并记录植物细胞的形态和细胞器的结构。

实验结果与讨论:在显微镜下观察,可以看到植物细胞内有细胞壁、细胞膜、细胞质和细胞核。

细胞壁是植物细胞独有的特征,可以保护和支持细胞结构。

细胞膜是细胞内和外环境之间的界面,控制物质的进出。

细胞质是细胞内的液体环境,包含着各种细胞器,如叶绿体、线粒体、高尔基体等。

细胞核是细胞的控制中心,包含着遗传物质DNA。

实验二:探究光合作用的影响因素实验目的:通过观察植物光合作用叶绿素的色素变化,探究光照强度、二氧化碳浓度和温度对光合作用的影响。

实验材料:银叶子、试管、酒精灯、分光计、试管夹实验步骤:1. 将银叶子放在试管中。

2. 用试管夹将试管夹在支架上,将试管中的银叶子用酒精灯加热。

3. 用分光计测量银叶子中叶绿素的吸收光谱。

4. 分别在不同的光照强度、二氧化碳浓度和温度条件下重复实验步骤2和3。

5. 比较不同条件下叶绿素的吸收光谱,记录并分析结果。

实验结果与讨论:光照强度、二氧化碳浓度和温度是影响光合作用的重要因素。

在高光照强度下,叶绿素的吸收峰值移动到较高波长的位置,说明光合作用效率提高。

增加二氧化碳浓度可以促进光合作用,叶绿素的吸收峰值增加。

温度对光合作用的影响较为复杂,适宜的温度可以提高光合作用的效率,但过高或过低的温度会抑制光合作用。

实验三:研究酵母发酵过程实验目的:通过观察酵母发酵过程,了解酵母的生命活动和酵母发酵产生的效应。

微生物检测实验指导(XXXX版)

微生物检测实验指导(XXXX版)

食品微生物实验指导刘后伟、林丹琼、刘旭光适合专业:绿色食品加工专业食品营养与检测专业农产品检测专业实训一显微镜的操作与使用实验1: 显微镜的构造、性能和使用方法1.目的要求(1) 熟悉普通光学显微镜的构造及各局部的功能。

(2) 学习并掌握油镜的原理和使用方法。

2.根本原理显微镜由机械装置和光学系统两大局部组成。

油镜物镜的根本原理微生物学研究用的显微镜的物镜通常有低倍物镜〔16mm,10×〕、高倍物镜〔4mm,40—45×〕和油镜〔1.8 mm,95—100×〕三种。

油镜通常标有黑圈或红圈,也有的以“OI字样表示,它是三者中放大倍数最大的。

根据使用不同放大倍数的目镜,可使被检物体放大1000—2 000多倍。

油镜的焦距和工作距离〔标本在焦点上看得最清晰时,物镜与样品之间的距离〕最短,光圈那么开得最大,因此,在使用油镜观察时,镜头离标本十分近,需特别小心。

使用时,油镜与其他物镜的不同是载玻片与物镜之间不是隔一层空气,而是隔一层油质,称为油浸系。

这种油常选用香柏油,因香柏油的折射率n=1.52,与玻璃相同。

当光线通过载玻片后,可直接通过香柏油进入物镜而不发生折射。

如果玻片与物镜之间的介质为空气,那么称为枯燥系,当光线通过玻片后,受到折射发生散射现象,进入物镜的光线显然减少,这样就减低了视野的照明度。

利用油镜不但能增加照明度,更主要的是能增加数值孔径,因为显微镜的放大效能是由其数值孔径决定的。

所谓数值孔径,即光线投射到物镜上的最大角度〔称为镜口角〕的一半正弦,乘上玻片与物镜间介质的折射率所得的乘积,可用以下公式表示:NA=n·sinα式中 NA=数值孔径;n=介质折射率;α=最大入射角的半数,即镜口角的半数。

因此,光线投射到物镜的角度愈大,显微镜的效能就愈大〔图Ⅲ-5〕,该角度的大小决定于物镜的直径和焦距。

同时,α的理论限度为90°,sin90°=1,故以空气为介质时〔n=1〕,数值孔径不能超过1,如以香柏油为介质时,那么n增大,其数值孔径也随之增大。

细胞生物学实验指导书

细胞生物学实验指导书

实验一普通光学显微镜的结构及其使用一、实验目的1、了解普通光学显微镜的工作原理,掌握光学显微镜的使用方法。

2、熟悉光学显微镜细胞的形态与结构。

二、实验用品普通光学显微镜、生物制片标本、擦镜纸。

三、实验原理和方法1、普通光学显微镜的构造从构造上,主要分三部分:①光学放大系统,为两组玻璃透镜:目镜和物镜;②照明系统:光源、折光镜和聚光镜,有时另加各种滤光片以控制光的波长范围;③机械和支架系统:主要保证光学系统的准确配制和灵活调控。

显微镜的质量主要取决于物镜,物镜是显微镜最主要的光学部件。

物镜的种类很多。

2、显微镜的能力显微镜的能力是质量和性能的标志。

能力包括分辨率、放大率、焦点深度和视场宽度等,其中最重要的是分辨率。

物镜分辨力是指分辨被检样品微细结构的能力。

通常以能清晰地分辨两个物体点的最短距离来表示。

其公式如下:R=0.61λ/N.A.R:分辨率(两点的最短距离)λ:照明光线波长N.A.:物镜数值孔径分辨率以分辨两个点的最短距离表示,R值愈小,分辨能力愈大。

物镜的分辨率与照明光线的波长成反比,与物镜的数值孔径成正比。

3、显微镜的使用①聚光器的调节②光阑的调节③工作距离④油镜的使用4、观察标本注意观察下列结构:①细胞核及核仁:不同细胞的核及核仁――蚕豆根尖切片、兔肝切片(Unna试剂染色)多核及多核仁现象――蛙卵切片、肌肉切片染色体――蚕豆根尖切片、玉米花粉母细胞切片(Giemsa,地衣红或洋红染色)。

②中心体:蝗虫精巢切片(巴西木素染色)。

③线粒体:蚕豆根尖切片、兔肝切片。

④高尔基体:兔肝切片、蚕豆根尖切片(硝酸银或四氧化锇染色)。

四、实验结果简述显微镜的主要结构和操作要领;绘制细胞显微结构图。

实验二线粒体和液泡系的超活染色与观察一、实验目的1、观察植物活细胞内线粒体、液泡系的形态、数量与分布。

2、学习一些细胞器的超活染色技术。

二、实验原理活体染色是指对生活有机体的细胞或组织能着色但又无毒害的一种染色方法。

综合性试验课程指导书生物显微技术大试验陈超石洪凌编写适用

综合性试验课程指导书生物显微技术大试验陈超石洪凌编写适用

综合性实验课程指导书《生物显微技术大实验》陈超、石洪凌编写适用专业:生物科学生物技术唐山师范学院生命科学系2007年3月实验学时:36 学时实验类型:综合性每组人数:4 人/组一、实验目的通过本实验的学习,使学生了解传统显微摄影的原理和方法、暗室技术,掌握采用徒手切片与整体制片法制作永久切片的技术;掌握石蜡切片制作技术及各步骤相关的知识点,掌握数码显微摄影的技术,学会动植物内部结构的比较研究方法。

培养学生采用石蜡切片技术进行动植物组织、结构观察的技能,为今后学生参与动植物细胞学方面的研究工作奠定基础。

二、实验原理生物组织、细胞除用临时装片方法进行观察外,许多材料还必须经过染色等处理,长期保存这种制片称永久制片。

永久制片无论是涂片、装片、还是切片都需要经过下列步骤:固定、洗涤、染色、脱水、透明、封藏、镜检、标注。

徒手切片法:是指用刀片将手持的新鲜材料切成薄片或将小型而扁薄的材料夹持在夹持物中用刀切成薄片的方法。

徒手切片制作简单,又能随机迅速地观察到植物生活细胞及各器官的内部组织的生活状态和天然色彩,所以在组织化学中应用及其广泛。

石蜡切片法:是用石蜡浸透常用的一种方法。

本实验室让学生用爱氏苏木精稀释液对材料进行整染,仅染色、返蓝后再进行切片。

利用显微摄影装置真实而客观地将显微镜视野中羧观察到的物体的结构拍摄记录下来,这种技术成为显微摄影技术。

传统的显微摄影一般使用传统的相机,将镜头去除,装在显微镜上,拍摄显微镜下看到的切片;对焦、光圈、曝光全在显微镜上操作完成,除了连续照明外,甚至装有闪光灯和色温表,自动曝光系统既可点测光也可中心重点测光,曝光补偿、倒记数显示等等,一应俱全。

传统的显微摄影有着和传统相机一样的缺点:拍摄的照片,不能立拍即现,照片必须要经过冲洗,在数字化成电子文挡的时候,细节有损失等等。

数码显微摄影在装置上,一般使用数码相机通过各种接口和显微镜的组合,然后数码相机和计算机相连;数码显微摄影的优点在于,可即时浏览拍摄,拍摄后的照片即时观看,减少废片率;另外拍摄后的照片即时传入到计算机的分析软件,即刻得出分析接结果,大大缩减了因冲洗照片而耽误大量时间,从而解决了实验的连续性的问题;再者,数码显微摄影拍摄的图片为数字化的文档,可即刻用于power point教学或日后的编辑出版工作。

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一、实验目的
掌握制作石蜡切片中取材、包埋的基本操作技术。

二、实验用品
1、实验材料:鱼
2、实验试剂:10%甲醛溶液(40%甲醛10ml,蒸馏水90ml)、50%酒精、70%酒精、80%酒精、90%酒精、95%酒精、100%酒精、二甲苯、石蜡。

3、实验器具:解剖器,双面刀片,小瓶,牛皮纸、电热恒温箱、脱水机、包埋机。

三、实验步骤
1、取材:用任何杀生的方法把鱼杀死,将腹腔打开,切取0.5cm3左右大小的肝脏、肠等组织。

2、固定:将切好的组织直接投入10%甲醛固定液中,固定24h。

3、脱水:50%酒精→70%酒精→80%酒精→90%酒精→95%酒精→100%酒精→100%酒精。

每级1-2h。

70%酒精处可长期保存。

4、透明:1/2二甲苯+1/2100%酒精(1-2h) →纯二甲苯(1h) →纯二甲苯(1h)
5、浸蜡:石蜡先置于60℃的温箱中,倒入含二甲苯及材料的小瓶中置于37℃温箱中,放置2-4小时。

6、包埋:先提升恒温箱的温度至60℃,换纯蜡3次,每次1-2h,用牛皮纸叠纸盒,置于45-60℃的烫板上,倒入材料,摆放好材料,把标签(正面向外置于底部),补足石蜡,倒好后轻轻的置于冷水盆中,注意底面要接触盆中凉水,待石蜡全部凝固后可取出晾干,也可在凉水盆中放置过夜。

四、作业
分析总结石蜡切片技术中固定和包埋的操作注意事项有哪些?
附:折纸盒按下列顺序折叠:
(1) 折AA'及BB';
(2) 折CC'及DD';
(3) 折CE'与AE'、向外夹出EE'。

同样折出FF',GG'及HH';
(4) 使CE'E与E'IE两三角形相叠,并沿E'C和EI重叠的折痕向后转折。

同样折其余三只角;
(5)折RIJF向外,同样折出GKLH,即折成所需的纸盒。

一、实验目的
掌握制作石蜡切片中切片、贴片的基本操作技术。

二、实验用品:
1.实验试剂:95%酒精、100%酒精、二甲苯、明胶液、蒸馏水。

2.实验器具:切片机、展片机、烤片机、载玻片、盖玻片、酒精灯、毛笔、牛皮纸、刀片、解剖刀、台木。

三、实验步骤:
1.修块、粘块、整修的步骤:
(1)选取所要切片的材料,从包埋的石蜡块上用单面刀片切割下来,注意不可损伤包埋的组织。

(2)确定切面的方位,用刀片将石蜡块的四面作初步的整修。

保证材料四周都有石蜡包围。

但不可太多。

切面的上、下边平行。

(3)点燃酒精灯,并准备一把旧的解剖刀。

(4)左手大拇指与食指间持整修好的石蜡块,材料向上用其余三指夹住台木。

此时将解剖刀在酒精灯上加温后,即放在台木与石蜡块之间,因解剖刀已加温,遇上两面的石蜡都会融化,可立即将解剖刀抽出,石蜡块迅速压在台木上。

(5)再将解剖刀蘸取少许石蜡碎屑,放在刚才固定的石蜡四周。

此时,解剖刀再加温,并迅速将石蜡块四周的碎屑烫平。

使石蜡块牢固地粘在台木上。

(6)修石蜡块上下面平行,使切成的蜡带呈一直线,不弯曲。

每个切片中组织的距离接近。

2.切片的方法:
(1)准备下列用具:毛笔、牛皮纸
(2)将已固着和整修好的石蜡块和台木装在切片机的夹物部分.
(3)安装切片刀,将刀片夹在刀夹上,并调整好刀的角度。

刀的斜度,非常重要,最好先切除的蜡块试刀,以确定刀的斜度,一经调度适合后,就不要随便变动,以免每次试刀的麻烦。

(4)移动刀片固定器,使夹刀部与夹物部之间的距离调整好,以石蜡块的表面刚贴近刀口为度,在旋紧切片固定器的螺旋。

(5)调整石蜡块与刀口之间的角度与位置。

修整蜡块,将刀片移近蜡块,使小蜡块的下边与刀锋平行,如不平行,可调夹物部上的螺旋。

然后把它固定,再转下蜡块.呈矩形才行。

只有平整的蜡块,才能切出平整的蜡带。

(6)最后根据需要,调整控制切片厚度的机制。

调度后,把它固定下来。

上述四步骤完成后,就可进行切片,
(7)开始切片。

右手握旋转轮的手柄,摇动一转就可切下一片,切下的蜡片粘在刀口上,待第二片切下时粘在一起,所以连续摇动就可将切下的蜡片连成一条蜡带。

这时左手就可持毛笔将蜡带提起,边摇边移动蜡带。

转速为每分钟40-50为宜。

(8)切成的蜡带到20-30厘米时,即以右手用另一只毛笔轻轻将蜡带挑起,平放在牛皮
纸上。

靠刀的一面较光滑,应向下,较皱的一面向上。

(9)切下的蜡片是否良好,此时应先行检查。

(10)切片工作结束后,仍将刀片用具擦拭干净。

3.贴片:贴附牢固,在染色时不易脱落;使皱褶的蜡片伸展平整。

用具:载玻片、粘片剂、解剖刀、蒸馏水、展片机及烤片机。

材料切成薄片后,须将切片粘在玻璃片上,加热展开,这叫粘片。

所用载玻片必须清洁才能使用。

粘片时,需把胶液置簿玻片上,再取切片,浮置胶液上,然后置烘片台上,使切片展开烫平,材料不现皱纹为度。

最后将切片依次排好,用滤纸吸去多余水分,同时以记号笔在玻片上编号,放入温箱中烘干,温度30~40℃约1小时即干。

(1)将展片机温度调整到35℃,保持恒定。

(2)在载玻片上涂蛋白甘油粘片剂。

其法是用细玻璃棒蘸取一小滴粘片剂,加在载玻片的中央,然后用洗净的手指(无名指)加以涂抹,范围不要太广,也不要太多,以能贴足够的蜡片为度。

(3)将涂粘片剂的载玻片放在展片机上,滴加蒸馏水数滴,此时若发现水不均匀分散而聚成滴状,即表示玻片不清洁,有残留油脂等物在上面。

(4)用解剖刀将蜡带切成小段,每段的长度应以盖玻片的长度为准,一般应比盖玻片短约1/5-2/5。

分片应从蜡带交界处分。

将蜡带轻轻移到涂有水的载玻片上,蜡片光面应向下贴在载玻片上,依次排列整齐。

留出右端贴标签处。

(5)材料展平后,从展片机上取下,稍稍倾斜留出多余的水分,用吸水纸吸干背面及周围多余水分,放于烤片机(35℃)上烤干水分。

保存在玻片盒内。

四、作业
分析总结石蜡切片技术中切片和贴片的操作注意事项有哪些?
实验三石蜡切片技术——染色、观察
一、实验目的
掌握制作石蜡切片中苏木精——伊红(HE)染色法及其结果的观察。

二、实验用品
1、实验试剂:二甲苯、酒精、苏木精染液、伊红染液、树胶。

苏木精原液配方:苏木精(2g),冰醋酸(10ml),甘油(100ml),95%酒精(100ml),蒸馏水(100ml),硫酸铝钾(5g),配制步骤:1.将苏木精溶于少量酒精中,加冰醋酸后搅拌,加速其溶解;2.加入甘油及其余酒精;3.研碎钾矾,溶于水中并加温;4.将加温的钾矾溶液一滴滴地加入染色剂中,并不断搅动;5.瓶口用双层纱布包扎,放于通风处,并经常摇动,直到颜色变为紫红时即可使用,成熟时间约需2-4周以致数月之久,若加0.2g碘酸钠即可立即成熟。

已成熟的原液,须用瓶塞密封,置低温暗处长期保存。

使用时以原液1份加入50%酒精与冰醋酸等量混合液1份或2份。

伊红溶液配方:伊红(1g)、70-75%酒精(100ml)。

配制步骤:先将伊红用蒸馏水(少许)调成浆糊状,再加入酒精,边加边搅拌,直到彻底溶解,此时试剂有些混浊,取少许冰醋酸,加入到试剂中去,试剂逐渐转变为清亮,呈鲜红色,。

2、实验器具:染缸、显微镜。

三、实验步骤
1、二甲苯脱蜡:把烤好的载玻片放于盛二甲苯的染缸中纯二甲苯(5-10min) →纯二甲苯(5-10min)
2、二甲苯与纯酒精等量混合液2min。

3、纯酒精、95%、70%、50%、30%酒精各2min。

4、蒸馏水2min。

5、苏木精染液15-20min。

6、蒸馏水洗,去除多余染液。

7、1%酸酒精分化数秒钟(如染色合适,此步可取消)
8、自来水洗数秒至1min。

9、氨水中“蓝化”数秒,或在自来水中冲洗使变蓝。

10、蒸馏水15min。

11、伊红染色2min。

12、70%酒精数秒钟。

13、95%酒精。

纯酒精各2min,片子取出时需速拭净,但注意勿触及切片。

14、纯酒精与二甲苯等量混合液2min。

15、二甲苯2min。

16、树胶封藏。

17、观察结果:细胞核呈蓝色;细胞质呈粉红色。

四、作业
分析总结脱蜡及染色过程中的注意事项有哪些?。

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