色谱定性定量方法
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色谱仪与红外光谱或质谱仪等联用，实际上是红外光谱 仪和质谱仪等起着检测器的作用，将复杂组份的混合物 经色谱柱分离为单组份，再利用红外光谱、质谱或核磁 共振谱等进行定性分析
既充分利用红外光谱、质谱等适于分析分子结构、官能 团或物质的摩尔质量等特点，克服了它们不易检定复杂 物质的困难，又充分利用了色谱的高效分离能力
2.与其它方法结合定性
①与化学方法结合进行定性 将试样经过一些特殊试剂处理，发生物理 变化或化学反应后，其色谱峰将会提前、 移后或完全消失 比较处理前后色谱图的差异，以及在柱后 用化学试剂鉴定流出物，就可初步定性鉴 别试样中含有哪些官能团
2.与其它方法结合定性
②与红外光谱、质谱及核磁共振谱联合定性
用相对校正因子
把混合物中的不同组份的峰面积校正成相当
于某一标准物质的峰面积，用于计算各组份的 含量
1.定量依据和校正因子
相对校正因子fis是指某组份i的绝对校正因子与标准物质s的绝对 校正因子之比值，通常简称为校正因子，即
标准物质：
f is
fi fs
苯（用于热导检测器）
正庚烷（用于氢火焰离子化检测器） 质量校正因子、摩尔校正因子和体积校正因子
常用标准物：苯、正丁烷、对二甲苯、环己烷、2,3,4-三甲基戊烷
对于组份比较简单的已知范围的混合物试样，可采用此法进行定 性。也可利用文献上的r2,1值或色谱手册中的r2,1值对照定性。
1.利用色谱保留参数定性
②加入已知物增加峰高法
首先用被测试样作色谱图，然后将已知纯物质加到试 样中去，在相同的条件下作色谱图，对比这两个色谱 图
100 %
Ai为任一组份的峰面积，fi为任一组份的质量校正因子 归一法的优点是无需标样，结果准确，操作简便，操作条件（如 进样量、流速等）变化对测定结果影响较小，宜于分析多组份试 样中各组份的含量。
②内标法
用一定量的纯物质作内标物，加入到准确称量的试样中，根据 被测试样和内标物的质量比及相应的色谱峰面积之比，计算被 测组分的含量
1.定量依据和校正因子
相对校正因子的测定方法
★准确称量被测组份和标准组份（色谱纯试剂，纯 度应大于99％），混合均匀后，在色谱操作条件 下进行分析。从色谱图上分别测量出相应的峰面 积，从而计算出质量校正因子。 ★常用化合物的校正因子也可以查阅“色谱手册” 及有关参考文献。
2.峰面积的测量
①准确测量法 用计算机测量 通常高级色谱仪配有计算机，能自动计算峰面积
色谱定性定量方法
一、色谱定性方法
定性依据 ★主要依据是每个组份的保留值 ★一般需要标准样品，离开已知纯物质的对 照，就无法识别各色谱峰代表何种组份 ★对某一未知试样，单独用色谱法定性十分 困难，因此常需与化学分析及其它仪器分 析方法相结合
1.利用色谱保留参数定性
①保留值定性
在一定的固定相和恒定的操作条件（如柱温、流动相流速、固定 液含量、柱长和柱径等）下，每种物质都有一定的保留值（tR或 VR），一般不受其它组份的影响，表现为每一组份的特征值 因此可严格控制色谱操作条件，否则重现 性较差 若采用相对保留值r2,1作定性分析，它仅与柱温有关，则可消除某 些操作条件差异所带来的影响
A
1 2
h (W 0 . 15 W 0 . 85 )
平均峰宽是指在峰高0.15和0.85处分别测量的峰宽的平 均值
3.常用定量方法
①归一法
若试样中各组份都能流出色谱柱并在所用的检测器上都能产生信 号显示出色谱峰，则可测量所有组份色谱峰的峰面积，由下列公 式计算各组份的含量
i
Ai f i A1 f 1 A 2 f 2 A n f n
由于被测组份i所使用的计量单位不同，校正因子又可分为质量 校正因子fm、摩尔校正因子fn和体积校正因子fV
1.定量依据和校正因子
某组份i与其等量的标准物s的响应值之比值称为相对响 应值，用Sis表示，它与相对校正因子互为倒数，即
S is
1 f is
Sis或fis只与被测组份、标准物质以及检测器的类型有 关，不受操作条件、柱温、载气流速和固定液的性质 等因素的影响，因而使用方便。
m i f i Ai m s f s As
i
mi m 试样
mi ms
f i Ai f s As
m i f is
Ai m s As
100 % f is
Ai m s A s m 试样
100 %
ms和mi分别为内标物和被测组份的质量 As和Ai分别为内标物和被测组份的峰面积 fis为组份i相对于内标物s的相对校正因子
这就是色谱定量分析的依据
绝对校正因子主要由仪器的灵敏度所决定，并与分析的操作条件
有密切关系
同一种检测器对不同物质具有不同的响应值，即使两种物质的含 量相等，在检测器上得到的信号Ai也往往是不相同的，而且它不 易准确测定，因此无法直接用于定量分析
1.定量依据和校正因子
为使峰面积能正确反映出物质的量，必须采
联用方法是解决复杂未知物定性问题最有效的方法之一， 其中特别是色谱-质谱联用分析，是当今分离和鉴定未 知物最好的手段
二、色谱定量方法
1.定量依据和校正因子
在一定的操作条件下，被测组份的质量mi与检测器产生的响应信 号（色谱图上表现为峰面积）Ai成正比，比例系数称为峰面积绝 对校正因子fi，即
mi=fiAi
若后一色谱图中某一色谱峰相对增高时，则该色谱峰 的组份原则上与加入已知纯物质是同一种化合物 当试样组份比较复杂，峰间距离太近，或操作条件不 易控制稳定，很难准确地测定其保留值时，可采用此 法进行定性
1.利用色谱保留参数定性
③双柱法定性 将试样和标准物的混合物分别在两根极性相差较 大的色谱柱上进行色谱分离 观察标准物和未知物色谱峰在这两根柱子上是否 始终重合，如两色谱峰始终重合，可判断为同一 组份，否则不是同一组份。 可以避免不同组份由于保留值的偶然一致性，可 能发生的定性错误。
用自动积分仪测量 它能自动测出曲线所包围的面积，测量精度达0.2～2％
上述两种方法分析速度快，线性范围广，对小峰或不规 则的峰也能得出较准确的测定结果
2.峰面积的测量
②近似测量法 对称峰可用峰高乘半高峰宽法：
A 1 . 065 hW h / 2
在相对计算时可省略系数，狭窄峰还可将半高峰宽视为 常数以峰高计算 不对称峰可用峰高乘平均峰宽法：
选择内标物有四个要求：
（a）内标物应是该试样中不存在的纯物质； （b）它必须完全溶于试样中，并与试样中各组份的色谱峰能完全分离； （c）加入内标物的量应接近于被测组份； （d）色谱峰的位置应与被测组份的色谱峰的位置相近，或在几个被测组份色谱 峰中间。
内标法的优点： A.不需标准样品 B.测定的结果较为准确
由于通过测量内标物及被测组份的峰面积的相对值来进行计算，因而在一定程度 上消除了操作条件等的变化所引起的误差
内标法的缺点： A.操作程序较为麻烦，每次分析时内标物和试样都要准确称量 B.有时寻找合适的内标物也有困难 可用内标校正曲线法进行定量测定
A
③外标法
外标法就是标准曲线法
Ax
用标样配成一系列不同浓度的标准溶液，在一定操作条件下，分别 定量进样测量，绘制峰面积对标液浓度的标准曲线。并在相同条件 下，注入相同体积的被测试样测出峰面积，在标准曲线上求出被测 组份的含量 外标法简便，不需用校正因子，但需要标样并且进样量要求十分准 确，操作条件也需严格控制 Cx Cs
既充分利用红外光谱、质谱等适于分析分子结构、官能 团或物质的摩尔质量等特点，克服了它们不易检定复杂 物质的困难，又充分利用了色谱的高效分离能力
2.与其它方法结合定性
①与化学方法结合进行定性 将试样经过一些特殊试剂处理，发生物理 变化或化学反应后，其色谱峰将会提前、 移后或完全消失 比较处理前后色谱图的差异，以及在柱后 用化学试剂鉴定流出物，就可初步定性鉴 别试样中含有哪些官能团
2.与其它方法结合定性
②与红外光谱、质谱及核磁共振谱联合定性
用相对校正因子
把混合物中的不同组份的峰面积校正成相当
于某一标准物质的峰面积，用于计算各组份的 含量
1.定量依据和校正因子
相对校正因子fis是指某组份i的绝对校正因子与标准物质s的绝对 校正因子之比值，通常简称为校正因子，即
标准物质：
f is
fi fs
苯（用于热导检测器）
正庚烷（用于氢火焰离子化检测器） 质量校正因子、摩尔校正因子和体积校正因子
常用标准物：苯、正丁烷、对二甲苯、环己烷、2,3,4-三甲基戊烷
对于组份比较简单的已知范围的混合物试样，可采用此法进行定 性。也可利用文献上的r2,1值或色谱手册中的r2,1值对照定性。
1.利用色谱保留参数定性
②加入已知物增加峰高法
首先用被测试样作色谱图，然后将已知纯物质加到试 样中去，在相同的条件下作色谱图，对比这两个色谱 图
100 %
Ai为任一组份的峰面积，fi为任一组份的质量校正因子 归一法的优点是无需标样，结果准确，操作简便，操作条件（如 进样量、流速等）变化对测定结果影响较小，宜于分析多组份试 样中各组份的含量。
②内标法
用一定量的纯物质作内标物，加入到准确称量的试样中，根据 被测试样和内标物的质量比及相应的色谱峰面积之比，计算被 测组分的含量
1.定量依据和校正因子
相对校正因子的测定方法
★准确称量被测组份和标准组份（色谱纯试剂，纯 度应大于99％），混合均匀后，在色谱操作条件 下进行分析。从色谱图上分别测量出相应的峰面 积，从而计算出质量校正因子。 ★常用化合物的校正因子也可以查阅“色谱手册” 及有关参考文献。
2.峰面积的测量
①准确测量法 用计算机测量 通常高级色谱仪配有计算机，能自动计算峰面积
色谱定性定量方法
一、色谱定性方法
定性依据 ★主要依据是每个组份的保留值 ★一般需要标准样品，离开已知纯物质的对 照，就无法识别各色谱峰代表何种组份 ★对某一未知试样，单独用色谱法定性十分 困难，因此常需与化学分析及其它仪器分 析方法相结合
1.利用色谱保留参数定性
①保留值定性
在一定的固定相和恒定的操作条件（如柱温、流动相流速、固定 液含量、柱长和柱径等）下，每种物质都有一定的保留值（tR或 VR），一般不受其它组份的影响，表现为每一组份的特征值 因此可严格控制色谱操作条件，否则重现 性较差 若采用相对保留值r2,1作定性分析，它仅与柱温有关，则可消除某 些操作条件差异所带来的影响
A
1 2
h (W 0 . 15 W 0 . 85 )
平均峰宽是指在峰高0.15和0.85处分别测量的峰宽的平 均值
3.常用定量方法
①归一法
若试样中各组份都能流出色谱柱并在所用的检测器上都能产生信 号显示出色谱峰，则可测量所有组份色谱峰的峰面积，由下列公 式计算各组份的含量
i
Ai f i A1 f 1 A 2 f 2 A n f n
由于被测组份i所使用的计量单位不同，校正因子又可分为质量 校正因子fm、摩尔校正因子fn和体积校正因子fV
1.定量依据和校正因子
某组份i与其等量的标准物s的响应值之比值称为相对响 应值，用Sis表示，它与相对校正因子互为倒数，即
S is
1 f is
Sis或fis只与被测组份、标准物质以及检测器的类型有 关，不受操作条件、柱温、载气流速和固定液的性质 等因素的影响，因而使用方便。
m i f i Ai m s f s As
i
mi m 试样
mi ms
f i Ai f s As
m i f is
Ai m s As
100 % f is
Ai m s A s m 试样
100 %
ms和mi分别为内标物和被测组份的质量 As和Ai分别为内标物和被测组份的峰面积 fis为组份i相对于内标物s的相对校正因子
这就是色谱定量分析的依据
绝对校正因子主要由仪器的灵敏度所决定，并与分析的操作条件
有密切关系
同一种检测器对不同物质具有不同的响应值，即使两种物质的含 量相等，在检测器上得到的信号Ai也往往是不相同的，而且它不 易准确测定，因此无法直接用于定量分析
1.定量依据和校正因子
为使峰面积能正确反映出物质的量，必须采
联用方法是解决复杂未知物定性问题最有效的方法之一， 其中特别是色谱-质谱联用分析，是当今分离和鉴定未 知物最好的手段
二、色谱定量方法
1.定量依据和校正因子
在一定的操作条件下，被测组份的质量mi与检测器产生的响应信 号（色谱图上表现为峰面积）Ai成正比，比例系数称为峰面积绝 对校正因子fi，即
mi=fiAi
若后一色谱图中某一色谱峰相对增高时，则该色谱峰 的组份原则上与加入已知纯物质是同一种化合物 当试样组份比较复杂，峰间距离太近，或操作条件不 易控制稳定，很难准确地测定其保留值时，可采用此 法进行定性
1.利用色谱保留参数定性
③双柱法定性 将试样和标准物的混合物分别在两根极性相差较 大的色谱柱上进行色谱分离 观察标准物和未知物色谱峰在这两根柱子上是否 始终重合，如两色谱峰始终重合，可判断为同一 组份，否则不是同一组份。 可以避免不同组份由于保留值的偶然一致性，可 能发生的定性错误。
用自动积分仪测量 它能自动测出曲线所包围的面积，测量精度达0.2～2％
上述两种方法分析速度快，线性范围广，对小峰或不规 则的峰也能得出较准确的测定结果
2.峰面积的测量
②近似测量法 对称峰可用峰高乘半高峰宽法：
A 1 . 065 hW h / 2
在相对计算时可省略系数，狭窄峰还可将半高峰宽视为 常数以峰高计算 不对称峰可用峰高乘平均峰宽法：
选择内标物有四个要求：
（a）内标物应是该试样中不存在的纯物质； （b）它必须完全溶于试样中，并与试样中各组份的色谱峰能完全分离； （c）加入内标物的量应接近于被测组份； （d）色谱峰的位置应与被测组份的色谱峰的位置相近，或在几个被测组份色谱 峰中间。
内标法的优点： A.不需标准样品 B.测定的结果较为准确
由于通过测量内标物及被测组份的峰面积的相对值来进行计算，因而在一定程度 上消除了操作条件等的变化所引起的误差
内标法的缺点： A.操作程序较为麻烦，每次分析时内标物和试样都要准确称量 B.有时寻找合适的内标物也有困难 可用内标校正曲线法进行定量测定
A
③外标法
外标法就是标准曲线法
Ax
用标样配成一系列不同浓度的标准溶液，在一定操作条件下，分别 定量进样测量，绘制峰面积对标液浓度的标准曲线。并在相同条件 下，注入相同体积的被测试样测出峰面积，在标准曲线上求出被测 组份的含量 外标法简便，不需用校正因子，但需要标样并且进样量要求十分准 确，操作条件也需严格控制 Cx Cs