抗生素浓度配制
各种抗生素的配制
抗生素溶剂存储浓度一般使用浓度保存条件Kana（卡那霉素）水10mg/ml50ug/ml-20℃Amp（氨苄霉素）水50mg/ml50ug/ml-20℃Strp（链霉素）水10mg/ml50ug/ml-20℃Hyp（潮霉素）水50mg/ml-20℃Ca（头孢霉素）水50mg/ml-20℃Cm（氯霉素）乙醇34mg/ml50ug/ml-20℃
Rif（利福平）二甲基亚砜
（DMSO）
50mg/ml50ug/ml-20℃
以水为溶剂的抗生素贮存液应通过水膜滤器过滤除菌。
以有机溶剂为溶剂的抗生素贮存液应通过有机膜滤器过滤除菌。
以乙醇为溶剂的抗生素溶液无须除菌处理，所有抗生素容易均应保存于不透光的容器中。
乙酰丁香酮（AS）的配置：200mM/L=+1ml二甲基亚砜（DMSO）使用有机滤器过滤除菌；
使用浓度200ug/ml：2ul的200mM/L的配置好的AS
异丙基-b-D-硫代半乳糖苷（IPTG）的配置：用水配置成50mg/ml，后使用水膜滤器过滤除菌；
使用浓度：L-1mM/L
MES溶液：1mol/L，精确称量，加入95ml的ddH2O，使用5M KOH调节PH至后，定容至100ml，超净台内过滤除菌，-20℃冻存。
各种抗生素的配制
抗生素
（一）溶剂存储浓度一般使用浓度保存条件Kana（卡那霉素）水10mg/ml50ug/ml-20℃Amp（氨苄霉素）水50mg/ml50ug/ml-20℃Strp（链霉素）水10mg/ml50ug/ml-20℃Hyp（潮霉素）水50mg/ml-20℃Ca（头孢霉素）水50mg/ml-20℃Cm（氯霉素）乙醇34mg/ml50ug/ml-20℃
Rif（利福平）二甲基亚砜
（DMSO）
50mg/ml50ug/ml-20℃
以水为溶剂的抗生素贮存液应通过0.22um水膜滤器过滤除菌。
以有机溶剂为溶剂的抗生素贮存液应通过0.22有机膜滤器过滤除菌。
以乙醇为溶剂的抗生素溶液无须除菌处理，所有抗生素容易均应保存于不透光的容器中。
乙酰丁香酮（AS）的配置：200mM/L=39.24mgAS+1ml二甲基亚砜（DMSO）使用有机滤器过滤除菌；
使用浓度200ug/ml：2ul的200mM/L的配置好的AS
异丙基-b-D-硫代半乳糖苷（IPTG）的配置：用水配置成50mg/ml，后使用水膜滤器过滤除菌；使用浓度：0.1mM/L-1mM/L
MES溶液：1mol/L，精确称量2.1320gMES，加入95ml的ddH2O，使用5M KOH调节PH至5.3后，定容至100ml，超净台内过滤除菌，-20℃冻存。
1/1。
分子生物学实验中常用的抗生素配置及工作浓度
常用抗生素：备注：（摘自《分子克隆》第三版附录2 ）①以水为溶剂的抗生素贮存液应使用0.22 μm滤器过滤除菌；②用乙醇溶解的抗生素溶液无须过滤除菌；③所有抗生素贮液都应放于不透光的容器中保存。
氨苄青霉素（ampici llin）（100mg/ml）溶解1g氨苄青霉素钠盐于足量的水(最好是高压后的灭菌水)中，最后定容至10ml。
分装成小份于-20℃贮存。
常以25ug/ml～50ug/ml的终浓度添加于生长培养基。
羧苄青霉素（carben icill in）（50mg/ml）溶解0.5g羧苄青霉素二钠盐于足量的水中，最后定容至10ml。
分装成小份于-20℃贮存。
常以25ug/ml～50ug/ml的终浓度添加于生长培养基。
甲氧西林（methic illin）（100mg/ml）溶解1g甲氧西林钠于足量的水中，最后定容至10ml。
分装成小份于-20℃贮存。
常以37.5ug/ml终浓度与100ug/ml氨苄青霉素一起添加于生长培养基。
卡那霉素（kanamy cin）（10mg/ml）溶解100m g卡那霉素于足量的水中，最后定容至10ml。
分装成小份于-20℃贮存。
常以10ug/ml～50ug/ml的终浓度添加于生长培养基。
氯霉素（chlora mphen icol）（25mg/ml）溶解250m g氯霉素足量的无水乙醇中，最后定容至10ml。
分装成小份于-20℃贮存。
常以12.5ug/ml～25ug/ml的终浓度添加于生长培养基。
链霉素（strept omyci n）（50mg/ml）溶解0.5g链霉素硫酸盐于足量的无水乙醇中，最后定容至10ml。
分装成小份于-20℃贮存。
常以10ug/ml～50ug/ml的终浓度添加于生长培养基。
萘啶酮酸（nalidi xic acid）（5mg/ml）溶解50mg萘啶酮酸钠盐于足量的水中，最后定容至10ml。
抗生素最低抑菌浓度
抗生素最低抑菌浓度（MIC）和半数抑菌浓度（MIC）测定方法几种测定抗菌药物最低抑菌浓度（MIC）方法：1.1.常量肉汤稀释法1.1.1.抗菌药物贮存液制备抗菌药物贮存液浓度不应低于1000μg/ml(如1280μg/ml)或10倍于最高测定浓度。
溶解度低的抗菌药物可稍低于上述浓度。
抗菌药物直接购自厂商或相关机构。
所需抗菌药物溶液量或粉剂量可公式进行计算。
例如：需配制100 ml浓度为1280μg/ml的抗生素贮存液，所用抗生素为粉剂，其药物的有效力为750μg/mg。
用分析天平精确称取抗生素粉剂的量为182.6 mg。
根据公式计算所需稀释剂用量为：（182.6mg×750μg/ml）/1280μg/ml=107.0ml，然后将182.6 mg抗生素粉剂溶解于107.0ml稀释剂中。
制备抗菌药物贮存液所用的溶剂和稀释剂见表5。
配制好的抗菌药物贮存液应贮存于-60℃以下环境，保存期不超过6个月。
1.1.2.药敏试验用抗菌药物浓度范围根据NCCLS抗菌药物敏感性试验操作标准，药物浓度范围应包含耐药、中介和敏感分界点值，特殊情况例外。
1.1.3. 培养基 NCCLS推荐使用Mueller-Hinton（MH）肉汤，pH7.2~7.4。
需氧菌及兼性厌氧菌在此培养基中生长良好。
在测试葡萄球菌对苯唑西林的敏感性时，应在肉汤中加入2%（W/V）氯化钠，按制造厂家的要求配制需要量的MH肉汤。
嗜血杆菌属菌使用HTM肉汤，肺炎链球菌和其它链球菌使用含2%~5%溶解马血的MH肉汤。
1.1.4.接种物的制备有2种方法配制接种物，一是细菌生长方法，用接种环挑取形态相似待检菌落3-5个，接种于4-5ml的水解酪蛋白（MH）肉汤中，35℃孵育2-6h。
增菌后的对数生长期菌液用生理盐水或MH肉汤校正浓度至0.5麦氏比浊标准，约含1~2×108CFU/ml。
二是直接菌落悬液配制法，对某些苛养菌，如流感嗜血杆菌、淋病奈瑟菌和链球菌及甲氧西林耐药的葡萄球菌等菌株，推荐直接取培养18~24h的菌落调配成0.5麦氏比浊标准的菌悬液。
各种抗生素的配制
抗生素之相礼和
热创作溶剂存储浓度
一样平常运用浓
度
保管条件
Kana（卡那霉素）水10mg/ml50ug/ml-20℃Amp（氨苄霉素）水50mg/ml50ug/ml-20℃Strp（链霉素）水10mg/ml50ug/ml-20℃Hyp（潮霉素）水50mg/ml-20℃Ca（头孢霉素）水50mg/ml-20℃Cm（氯霉素）乙醇34mg/ml50ug/ml-20℃
Rif（利福平）二甲基亚砜
（DMSO）
50mg/ml50ug/ml-20℃
以水为溶剂的抗生素储存液应经过0.22um水膜滤器过滤除菌.以无机溶剂为溶剂的抗生素储存液应经过0.22无机膜滤器过滤除菌.以乙醇为溶剂的抗生素溶液无须除菌处理，全部抗生素容易均应保管于不透光的容器中.
乙酰丁香酮（AS）的设置：200mM/L=39.24mgAS+1ml二甲基亚砜（DMSO）运用无机滤器过滤除菌；
运用浓度200ug/ml：2ul的200mM/L的设置好的AS
异丙基-b-D-硫代半乳糖苷（IPTG）的设置：用水设置成50mg/ml，后运用水膜滤器过滤除菌；
MES溶液：1mol/L，精确称量2.1320gMES，加入95ml的ddH2O，运用5M KOH调理PH至5.3后，定容至100ml，超净台内过滤除菌，-20℃冻存.。
抗生素最低抑菌浓度
抗生素最低抑菌浓度（MIC）和半数抑菌浓度（MIC）测定方法几种测定抗菌药物最低抑菌浓度（MIC）方法：1.1.常量肉汤稀释法1.1.1.抗菌药物贮存液制备抗菌药物贮存液浓度不应低于1000μg/ml(如1280μg/ml)或10倍于最高测定浓度。
溶解度低的抗菌药物可稍低于上述浓度。
抗菌药物直接购自厂商或相关机构。
所需抗菌药物溶液量或粉剂量可公式进行计算。
例如：需配制100 ml浓度为1280μg/ml的抗生素贮存液，所用抗生素为粉剂，其药物的有效力为750μg/mg。
用分析天平精确称取抗生素粉剂的量为182.6 mg。
根据公式计算所需稀释剂用量为：（182.6mg×750μg/ml）/1280μg/ml=107.0ml，然后将182.6 mg抗生素粉剂溶解于107.0ml稀释剂中。
制备抗菌药物贮存液所用的溶剂和稀释剂见表5。
配制好的抗菌药物贮存液应贮存于-60℃以下环境，保存期不超过6个月。
1.1.2.药敏试验用抗菌药物浓度范围根据NCCLS抗菌药物敏感性试验操作标准，药物浓度范围应包含耐药、中介和敏感分界点值，特殊情况例外。
1.1.3.培养基NCCLS推荐使用Mueller-Hinton（MH）肉汤，pH7.2~7.4。
需氧菌及兼性厌氧菌在此培养基中生长良好。
在测试葡萄球菌对苯唑西林的敏感性时，应在肉汤中加入2%（W/V）氯化钠，按制造厂家的要求配制需要量的MH肉汤。
嗜血杆菌属菌使用HTM肉汤，肺炎链球菌和其它链球菌使用含2%~5%溶解马血的MH肉汤。
1.1.4.接种物的制备有2种方法配制接种物，一是细菌生长方法，用接种环挑取形态相似待检菌落3-5个，接种于4-5ml的水解酪蛋白（MH）肉汤中，35℃孵育2-6h。
增菌后的对数生长期菌液用生理盐水或MH肉汤校正浓度至0.5麦氏比浊标准，约含1~2×108CFU/ml。
二是直接菌落悬液配制法，对某些苛养菌，如流感嗜血杆菌、淋病奈瑟菌和链球菌及甲氧西林耐药的葡萄球菌等菌株，推荐直接取培养18~24h的菌落调配成0.5麦氏比浊标准的菌悬液。
分子生物学实验中常用的抗生素配置及工作浓度
经常使用抗生素：之杨若古兰创作备注：（摘自《分子克隆》第三版附录2 ）①以水为溶剂的抗生素储存液应使用0.22 μm滤器过滤除菌；②用乙醇溶解的抗生素溶液不必过滤除菌；③所有抗生素贮液都应放于不透光的容器中保管.氨苄青霉素（ampicillin）（100mg/ml）溶解1g氨苄青霉素钠盐于充足的水(最好是高压后的灭菌水)中，最初定容至10ml.分装成小份于-20℃储存.常以25ug/ml～50ug/ml的终浓度添加于生长培养基.羧苄青霉素（carbenicillin）（50mg/ml）溶解羧苄青霉素二钠盐于充足的水中，最初定容至10ml.分装成小份于-20℃储存.常以25ug/ml～50ug/ml的终浓度添加于生长培养基.甲氧西林（methicillin）（100mg/ml）溶解1g甲氧西林钠于充足的水中，最初定容至10ml.分装成小份于-20℃储存.常以终浓度与100ug/ml氨苄青霉素一路添加于生长培养基.卡那霉素（kanamycin）（10mg/ml）溶解100mg卡那霉素于充足的水中，最初定容至10ml.分装成小份于-20℃储存.常以10ug/ml～50ug/ml的终浓度添加于生长培养基.氯霉素（chloramphenicol）（25mg/ml）溶解250mg氯霉素充足的无水乙醇中，最初定容至10ml.分装成小份于-20℃储存.常以～25ug/ml的终浓度添加于生长培养基.链霉素（streptomycin）（50mg/ml）溶解链霉素硫酸盐于充足的无水乙醇中，最初定容至10ml.分装成小份于-20℃储存.常以10ug/ml～50ug/ml的终浓度添加于生长培养基.萘啶酮酸（nalidixic acid）（5mg/ml）溶解50mg萘啶酮酸钠盐于充足的水中，最初定容至10ml.分装成小份于-20℃储存.常以15ug/ml的终浓度添加于生长培养基.四环素（tetracyyline）（10mg/ml）溶解100mg四环素盐酸盐于充足的水中，或者将无碱的四环素溶于无水乙醇，定容至10ml.分装成小份用铝箔包裹装液管以避免溶液见光，于-20℃储存.常以10ug/ml～50ug/ml 的终浓度添加于生长培养基.。
分子生物学实验中常用的抗生素配置及工作浓度
时常使用抗死素：之阳早格格创做备注：（戴自《分子克隆》第三版附录2 ）①以火为溶剂的抗死素贮存液应使用0.22 μm滤器过滤除菌；②用乙醇溶解的抗死素溶液无须过滤除菌；③所有抗死素贮液皆应搁于没有透光的容器中保存.氨苄青霉素（ampicillin）（100mg/ml）溶解1g氨苄青霉素钠盐于脚量的火(最佳是下压后的灭菌火)中，末尾定容至10ml.分拆成小份于-20℃贮存.常以25ug/ml～50ug/ml的末浓度增加于死少培植基.羧苄青霉素（carbenicillin）（50mg/ml）溶解羧苄青霉素两钠盐于脚量的火中，末尾定容至10ml.分拆成小份于-20℃贮存.常以25ug/ml～50ug/ml的末浓度增加于死少培植基.甲氧西林（methicillin）（100mg/ml）溶解1g甲氧西林钠于脚量的火中，末尾定容至10ml.分拆成小份于-20℃贮存.常以末浓度取100ug/ml氨苄青霉素所有增加于死少培植基.卡那霉素（kanamycin）（10mg/ml）溶解100mg卡那霉素于脚量的火中，末尾定容至10ml.分拆成小份于-20℃贮存.常以10ug/ml～50ug/ml的末浓度增加于死少培植基.氯霉素（chloramphenicol）（25mg/ml）溶解250mg氯霉素脚量的无火乙醇中，末尾定容至10ml.分拆成小份于-20℃贮存.常以～25ug/ml的末浓度增加于死少培植基.链霉素（streptomycin）（50mg/ml）溶解链霉素硫酸盐于脚量的无火乙醇中，末尾定容至10ml.分拆成小份于-20℃贮存.常以10ug/ml～50ug/ml的末浓度增加于死少培植基.萘啶酮酸（nalidixic acid）（5mg/ml）溶解50mg萘啶酮酸钠盐于脚量的火中，末尾定容至10ml.分拆成小份于-20℃贮存.常以15ug/ml的末浓度增加于死少培植基.四环素（tetracyyline）（10mg/ml）溶解100mg四环素盐酸盐于脚量的火中，大概者将无碱的四环素溶于无火乙醇，定容至10ml.分拆成小份用铝箔包裹拆液管免得溶液睹光，于-20℃贮存.常以10ug/ml～50ug/ml 的末浓度增加于死少培植基.。
抗生素最低抑菌浓度(MIC)和半数抑菌浓度(MIC)测定方法
抗生素最低抑菌浓度（MIC）和半数抑菌浓度（MIC）测定方法常量肉汤稀释法1.1抗菌药物贮存液制备抗菌药物贮存液浓度不应低于1000μg/ml(如1280μg/ml)或10倍于最高测定浓度。
溶解度低的抗菌药物可稍低于上述浓度。
抗菌药物直接购自厂商或相关机构。
所需抗菌药物溶液量或粉剂量可公式进行计算。
例如：需配制100 ml浓度为1280μg/ml的抗生素贮存液，所用抗生素为粉剂，其药物的有效力为750μg/mg。
用分析天平精确称取抗生素粉剂的量为182.6 mg。
根据公式计算所需稀释剂用量为：（182.6mg×750μg/ml）/1280μg/ml=107.0ml，然后将182.6 mg抗生素粉剂溶解于107.0ml稀释剂中。
制备抗菌药物贮存液所用的溶剂和稀释剂见表5。
配制好的抗菌药物贮存液应贮存于-60℃以下环境，保存期不超过6个月。
1.2.药敏试验用抗菌药物浓度范围根据NCCLS抗菌药物敏感性试验操作标准，药物浓度范围应包含耐药、中介和敏感分界点值，特殊情况例外。
1.3. 培养基 NCCLS推荐使用Mueller-Hinton（MH）肉汤，pH7.2~7.4。
需氧菌及兼性厌氧菌在此培养基中生长良好。
在测试葡萄球菌对苯唑西林的敏感性时，应在肉汤中加入2%（W/V）氯化钠，按制造厂家的要求配制需要量的MH肉汤。
嗜血杆菌属菌使用HTM肉汤，肺炎链球菌和其它链球菌使用含2%~5%溶解马血的MH肉汤。
1.4.接种物的制备有2种方法配制接种物，一是细菌生长方法，用接种环挑取形态相似待检菌落3-5个，接种于4-5ml的水解酪蛋白（MH）肉汤中，35℃孵育2-6h。
增菌后的对数生长期菌液用生理盐水或MH肉汤校正浓度至0.5麦氏比浊标准，约含1~2×108CFU/ml。
二是直接菌落悬液配制法，对某些苛养菌，如流感嗜血杆菌、淋病奈瑟菌和链球菌及甲氧西林耐药的葡萄球菌等菌株，推荐直接取培养18~24h的菌落调配成0.5麦氏比浊标准的菌悬液。
抗生素筛选浓度
LB培养基中抗生素的贮液配置和工作液浓度
①以水为溶剂的抗生素贮存液应用0.22 μm滤器过滤除菌；
②用乙醇溶解的抗生素溶液无须过滤除菌；
③所有抗生素贮液都应放于不透光的容器中保存。
注意：镁离子是四环素的拮抗剂。
对于以四环素为筛选抗性的细菌，应使用不含镁离子的培养基，如LB培养基。
下面是常用抗生素的贮液浓度及工作浓度
氨苄青霉素：贮液浓度50 mg/ml 溶于水-20℃保存工作浓度20 μg/ml （严紧型质粒）60 μg/ml （松弛型质粒）
羧苄青霉素：贮液浓度50 mg/ml 溶于水-20℃保存工作浓度20 μg/ml （严紧型质粒）60 μg/ml （松弛型质粒）
氯霉素：贮液浓度34 mg/ml 溶于乙醇-20℃保存工作浓度25 μg/ml （严紧型质粒）170 μg/ml （松弛型质粒）
卡那霉素：贮液浓度10 mg/ml 溶于水-20℃保存工作浓度10 μg/ml （严紧型质粒）50 μg/ml （松弛型质粒）
链霉素：贮液浓度50 mg/ml 溶于水-20℃保存工作浓度10 μg/ml （严紧型质粒）50 μg/ml （松弛型质粒）
四环素：贮液浓度 5 mg/ml 溶于乙醇-20℃保存工作浓度10 μg/ml （严紧型质粒）50 μg/ml （松弛型质粒）
质粒类型：。
各种抗生素的配制
抗生素溶剂存储浓度一般使用浓度保存条件Kana（卡那霉素）水10mg/ml50ug/ml-20℃Amp（氨苄霉素）水50mg/ml50ug/ml-20℃Strp（链霉素）水10mg/ml50ug/ml-20℃Hyp（潮霉素）水50mg/ml-20℃Ca（头孢霉素）水50mg/ml-20℃Cm（氯霉素）乙醇34mg/ml50ug/ml-20℃
Rif（利福平）二甲基亚砜
（DMSO）
50mg/ml50ug/ml-20℃
以水为溶剂的抗生素贮存液应通过0.22um水膜滤器过滤除菌。
以有机溶剂为溶剂的抗生素贮存液应通过0.22有机膜滤器过滤除菌。
以乙醇为溶剂的抗生素溶液无须除菌处理，所有抗生素容易均应保存于不透光的容器中。
乙酰丁香酮（AS）的配置：200mM/L=39.24mgAS+1ml二甲基亚砜（DMSO）使用有机滤器过滤除菌；
使用浓度200ug/ml：2ul的200mM/L的配置好的AS
异丙基-b-D-硫代半乳糖苷（IPTG）的配置：用水配置成50mg/ml，后使用水膜滤器过滤除菌；
使用浓度：0.1mM/L-1mM/L
MES溶液：1mol/L，精确称量2.1320gMES，加入95ml的ddH2O，使用5M KOH 调节PH至5.3后，定容至100ml，超净台内过滤除菌，-20℃冻存。
抗生素的配置
四.常用抗生素氨苄青霉素（ampicillin）（100mg/ml）溶解1g氨苄青霉素钠盐于足量的水中，最后定容至10ml。
分装成小份于-20℃贮存。
常以25ug/ml～50ug/ml的终浓度添加于生长培养基。
羧苄青霉素（carbenicillin）（50mg/ml）溶解0.5g羧苄青霉素二钠盐于足量的水中，最后定容至10ml。
分装成小份于-20℃贮存。
常以25ug/ml～50ug/ml的终浓度添加于生长培养基。
甲氧西林（methicillin）（100mg/ml）溶解1g甲氧西林钠于足量的水中，最后定容至10ml。
分装成小份于-20℃贮存。
常以37.5ug/ml终浓度与100ug/ml氨苄青霉素一起添加于生长培养基。
卡那霉素（kanamycin）（10mg/ml）溶解100mg卡那霉素于足量的水中，最后定容至10ml。
分装成小份于-20℃贮存。
常以10ug/ml～50ug/ml的终浓度添加于生长培养基。
氯霉素（chloramphenicol）（25mg/ml）溶解250mg氯霉素足量的无水乙醇中，最后定容至10ml。
分装成小份于-20℃贮存。
常以12.5ug/ml～25ug/ml的终浓度添加于生长培养基。
链霉素（streptomycin）（50mg/ml）溶解0.5g链霉素硫酸盐于足量的无水乙醇中，最后定容至10ml。
分装成小份于-20℃贮存。
常以10ug/ml～50ug/ml的终浓度添加于生长培养基。
萘啶酮酸（nalidixic acid）（5mg/ml）溶解50mg萘啶酮酸钠盐于足量的水中，最后定容至10ml。
分装成小份于-20℃贮存。
常以15ug/ml的终浓度添加于生长培养基。
四环素（tetracyyline）（10mg/ml）溶解100mg四环素盐酸盐于足量的水中，或者将无碱的四环素溶于无水乙醇，定容至10ml。
分装成小份用铝箔包裹装液管以免溶液见光，于-20℃贮存。
常以10ug/ml～50ug/ml的终浓度添加于生长培养基。
抗生素最低抑菌浓度(MIC)和半数抑菌浓度(MIC)测定方法
抗生素最低抑菌浓度（MIC）和半数抑菌浓度（MIC）测定方法常量肉汤稀释法1.1抗菌药物贮存液制备抗菌药物贮存液浓度不应低于1000μg/ml(如1280μg/ml)或10倍于最高测定浓度。
溶解度低的抗菌药物可稍低于上述浓度。
抗菌药物直接购自厂商或相关机构。
所需抗菌药物溶液量或粉剂量可公式进行计算。
例如：需配制100 ml浓度为1280μg/ml的抗生素贮存液，所用抗生素为粉剂，其药物的有效力为750μg/mg。
用分析天平精确称取抗生素粉剂的量为182.6 mg。
根据公式计算所需稀释剂用量为：（182.6mg×750μg/ml）/1280μg/ml=107.0ml，然后将182.6 mg抗生素粉剂溶解于107.0ml稀释剂中。
制备抗菌药物贮存液所用的溶剂和稀释剂见表5。
配制好的抗菌药物贮存液应贮存于-60℃以下环境，保存期不超过6个月。
1.2.药敏试验用抗菌药物浓度范围根据NCCLS抗菌药物敏感性试验操作标准，药物浓度范围应包含耐药、中介和敏感分界点值，特殊情况例外。
1.3.培养基NCCLS推荐使用Mueller-Hinton（MH）肉汤，pH7.2~7.4。
需氧菌及兼性厌氧菌在此培养基中生长良好。
在测试葡萄球菌对苯唑西林的敏感性时，应在肉汤中加入2%（W/V）氯化钠，按制造厂家的要求配制需要量的MH肉汤。
嗜血杆菌属菌使用HTM肉汤，肺炎链球菌和其它链球菌使用含2%~5%溶解马血的MH肉汤。
1.4.接种物的制备有2种方法配制接种物，一是细菌生长方法，用接种环挑取形态相似待检菌落3-5个，接种于4-5ml的水解酪蛋白（MH）肉汤中，35℃孵育2-6h。
增菌后的对数生长期菌液用生理盐水或MH肉汤校正浓度至0.5麦氏比浊标准，约含1~2×108CFU/ml。
二是直接菌落悬液配制法，对某些苛养菌，如流感嗜血杆菌、淋病奈瑟菌和链球菌及甲氧西林耐药的葡萄球菌等菌株，推荐直接取培养18~24h的菌落调配成0.5xx比浊标准的菌悬液。
抗生素溶液配制
抗生素溶液配制之杨若古兰创作红霉素是由无水乙醇配制的！可按以下准绳配制：1 储存液一班配制100mg/ml或50mg/ml；2 -20度，避光保管；3 配完后，小量分装保管，取出用后即丢弃；4 可用0.44um滤膜过滤，除菌、除杂.氯霉素溶液的配置和留意事项.工作液、母液配制：普通经常使用的工作浓度为25μg/ml.配制母液时，先用乙醇配成10 mg/ml，再用水浓缩至1 mg/ml.该母液应冻存，并在30天内用完.留意事项：（氯霉素溶液应避光）（氯霉素溶液见光分解后会变黄，出现橘黄色沉淀）氨苄青霉素（ampicillin）（100mg/ml）溶解1g氨苄青霉素钠盐于充足的水中，最初定容至10ml.分装成小份于-20℃储存.常以25ug/ml～50ug/ml的终浓度添加于生长培养基. 羧苄青霉素（carbenicillin）（50mg/ml）溶解0.5g羧苄青霉素二钠盐于充足的水中，最初定容至10ml.分装成小份于-20℃储存.常以25ug/ml～50ug/ml的终浓度添加于生长培养基. 甲氧西林（methicillin）（100mg/ml）溶解1g甲氧西林钠于充足的水中，最初定容至10ml.分装成小份于-20℃储存.常以37.5ug/ml终浓度与100ug/ml氨苄青霉素一路添加于生长培养基. 卡那霉素（kanamycin）（10mg/ml）溶解100mg 卡那霉素于充足的水中，最初定容至10ml.分装成小份于-20℃储存.常以10ug/ml～50ug/ml的终浓度添加于生长培养基. 氯霉素（chloramphenicol）（25mg/ml）溶解250mg氯霉素充足的无水乙醇中，最初定容至10ml.分装成小份于-20℃储存.常以12.5ug/ml～25ug/ml的终浓度添加于生长培养基. 链霉素（streptomycin）（50mg/ml）溶解0.5g链霉素硫酸盐于充足的无水乙醇中，最初定容至10ml.分装成小份于-20℃储存.常以10ug/ml～50ug/ml的终浓度添加于生长培养基. 萘啶酮酸nalidixic acid）（5mg/ml）溶解50mg萘啶酮酸钠盐于充足的水中，最初定容至10ml.分装成小份于-20℃储存.常以15ug/ml的终浓度添加于生长培养基. 四环素（tetracyyline）（10mg/ml）溶解100mg四环素盐酸盐于充足的水中，或者将无碱的四环素溶于无水乙醇，定容至10ml.分装成小份用铝箔包裹装液管以避免溶液见光，于-20℃储存.常以10ug/ml～50ug/ml的终浓度添加于生长培养基.。
多种抗生素皮试液配制方法
（0.6㎎）
头 孢
噻污纳
1.0g/支
NS
头孢噻污纳1.0g/支加生理盐水3.5ml：
取上液0.1ml+生理盐水0.9ml
取上液0.1ml+生理盐水0.9ml
取上液0.4ml+生理盐水0.6ml
1㎎／ml
0.1ml
（0.1㎎）
头 孢Hale Waihona Puke 噻污纳1.5g/支
NS
头孢噻污纳1.5g/支加生理盐水5.2ml：
NS
将原液稀释到1ml
取上液0.1ml+生理盐水0.9ml
150U／ml
0.1ml
(15U)
普鲁卡因
0.25%
2.5㎎／ml
0.1ml
（ 0.25㎎）
细胞色素C
30㎎/支
NS
取上液0.1ml+生理盐水0.9ml
0.75㎎／ml
0.1ml
（0.075㎎）
取上液0.1ml+生理盐水0.9ml
取上液0.1ml+生理盐水0.9ml
取上液0.4ml+生理盐水0.6ml
1.2㎎／ml
0.1ml
（0.12㎎）
头 孢
噻污纳
0.75g/支
NS
头孢噻污纳0.75g/支加生理盐水2.6ml：
取上液0.1ml+生理盐水0.9ml
取上液0.1ml+生理盐水0.9ml
取上液0.4ml+生理盐水0.6ml
取上液0.1ml+生理盐水0.9ml
取上液0.1ml+生理盐水0.9ml
取上液0.4ml+生理盐水0.6ml
0.96㎎／ml
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四.常用抗生素
氨苄青霉素（ampicillin）（100mg/ml）
溶解1g氨苄青霉素钠盐于足量的水中，最后定容至10ml。
分装成小份于-20℃贮存。
常以25ug/ml～50ug/ml的终浓度添加于生长培养基。
羧苄青霉素（carbenicillin）（50mg/ml）
溶解0.5g羧苄青霉素二钠盐于足量的水中，最后定容至10ml。
分装成小份于-20℃贮存。
常以25ug/ml～50ug/ml的终浓度添加于生长培养基。
甲氧西林（methicillin）（100mg/ml）
溶解1g甲氧西林钠于足量的水中，最后定容至10ml。
分装成小份
于-20℃贮存。
常以37.5ug/ml终浓度与100ug/ml氨苄青霉素一起添加于生长培养基。
卡那霉素（kanamycin）（10mg/ml）
溶解100mg卡那霉素于足量的水中，最后定容至10ml。
分装成小份
于-20℃贮存。
常以10ug/ml～50ug/ml的终浓度添加于生长培养基。
氯霉素（chloramphenicol）（25mg/ml）
溶解250mg氯霉素足量的无水乙醇中，最后定容至10ml。
分装成小份于-20℃贮存。
常以12.5ug/ml～25ug/ml的终浓度添加于生长培养基。
链霉素（streptomycin）（50mg/ml）
溶解0.5g链霉素硫酸盐于足量的无水乙醇中，最后定容至10ml。
分装成小份于-20℃贮存。
常以10ug/ml～50ug/ml的终浓度添加于生长培养基。
萘啶酮酸（nalidixic acid）（5mg/ml）
溶解50mg萘啶酮酸钠盐于足量的水中，最后定容至10ml。
分装成小份于-20℃贮存。
常以15ug/ml的终浓度添加于生长培养基。
四环素（tetracyyline）（10mg/ml）
溶解100mg四环素盐酸盐于足量的水中，或者将无碱的四环素溶于无水乙醇，定容至10ml。
分装成小份用铝箔包裹装液管以免溶液见光，
于-20℃贮存。
常以10ug/ml～50ug/ml的终浓度添加于生长培养基。