园林植物与观赏园艺专业毕业论文 [精品论文] cdna-aflp技术分离桂花香气相关基因
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园林植物与观赏园艺专业毕业论文 [精品论文] cDNA-AFLP技术
分离桂花香气相关基因
关键词：cDNA-AFLP 技术分离桂花香气相关基因
摘要：桂花(OsmanthusFragrans)是木犀科木犀属的代表种，是优良的园林绿化树种和香花树种。
本研究以桂花的花蕾为材料，运用cDNA-AFLP技术，分离桂花花香形成过程中差异片段，通过克隆测序，BLAST分析，获得的6个可能与香味相关的基因片段，为下一步揭示桂花香味物质代谢途径奠定基础，希望为花卉香味的遗传改良提供一条新途径，主要试验结果如下： 1建立适合桂花花蕾总RNA的提取技术体系采用改良热硼酸法，改良 Tris-硼酸法，试剂盒提取桂花花蕾总RNA，比较结果显示试剂盒法提取的总KNA，条带完整，质量好，纯度高，适合开展试验。
2利用cDNA-AFLP技术分离桂花花香形成过程中差异基因采用末端两个选择性碱基的16条EcoRⅠ引物和16条MseⅠ进行选择性扩增，共256对引物组，通过筛选，确定160对引物组进行扩增。
试验共回收差异条带100带，获得50条测序结果。
在NCBI数据库中进行BLAST比对，发现有31条序列在nr库中搜索到相似性较高的基因。
另外17条序列没有搜索到同源序列，推测为未知基因。
分析显示31个TDFs中6个TDFs可能与植物香气成分相关，分别命名为20Gox2，C4H1，CCD4，AACT，CFAT，LOX。
3采用RT-PCR 技术分离CFAT和LOX的3'端序列选取其中两个可能与桂花香气相关基因片段CFAT和LOX，设计引物，采用RT-PCR技术扩增其3'端序列，分别进行克隆、测序和拼接，获得了CFAT3'末端，共862bp，
LOX3'末端，共1588bp。
本研究将为进一步研究桂花花香相关物质的代谢途径，以及为花卉香味的遗传改良奠定基础。
正文内容
桂花(OsmanthusFragrans)是木犀科木犀属的代表种，是优良的园林绿化树种和香花树种。
本研究以桂花的花蕾为材料，运用cDNA-AFLP技术，分离桂花花香形成过程中差异片段，通过克隆测序，BLAST分析，获得的6个可能与香味相关的基因片段，为下一步揭示桂花香味物质代谢途径奠定基础，希望为花卉香味的遗传改良提供一条新途径，主要试验结果如下： 1建立适合桂花花蕾总RNA的提取技术体系采用改良热硼酸法，改良 Tris-硼酸法，试剂盒提取桂花花蕾总RNA，比较结果显示试剂盒法提取的总KNA，条带完整，质量好，纯度高，适合开展试验。
2利用cDNA-AFLP技术分离桂花花香形成过程中差异基因采用末端两个选择性碱基的16条EcoRⅠ引物和16条MseⅠ进行选择性扩增，共256对引物组，通过筛选，确定160对引物组进行扩增。
试验共回收差异条带100带，获得50条测序结果。
在NCBI数据库中进行BLAST比对，发现有31条序列在nr库中搜索到相似性较高的基因。
另外17条序列没有搜索到同源序列，推测为未知基因。
分析显示31个TDFs中6个TDFs可能与植物香气成分相关，分别命名为20Gox2，C4H1，CCD4，AACT，CFAT，LOX。
3采用RT-PCR 技术分离CFAT和LOX的3'端序列选取其中两个可能与桂花香气相关基因片段CFAT和LOX，设计引物，采用RT-PCR技术扩增其3'端序列，分别进行克隆、测序和拼接，获得了CFAT3'末端，共862bp，
LOX3'末端，共1588bp。
本研究将为进一步研究桂花花香相关物质的代谢途径，以及为花卉香味的遗传改良奠定基础。
桂花(OsmanthusFragrans)是木犀科木犀属的代表种，是优良的园林绿化树种和香花树种。
本研究以桂花的花蕾为材料，运用cDNA-AFLP技术，分离桂花花香形成过程中差异片段，通过克隆测序，BLAST分析，获得的6个可能与香味相关的基因片段，为下一步揭示桂花香味物质代谢途径奠定基础，希望为花卉香味的遗传改良提供一条新途径，主要试验结果如下： 1建立适合桂花花蕾总RNA 的提取技术体系采用改良热硼酸法，改良 Tris-硼酸法，试剂盒提取桂花花蕾总RNA，比较结果显示试剂盒法提取的总KNA，条带完整，质量好，纯度高，适合开展试验。
2利用cDNA-AFLP技术分离桂花花香形成过程中差异基因
采用末端两个选择性碱基的16条EcoRⅠ引物和16条MseⅠ进行选择性扩增，共256对引物组，通过筛选，确定160对引物组进行扩增。
试验共回收差异条带100带，获得50条测序结果。
在NCBI数据库中进行BLAST比对，发现有31条序列在nr库中搜索到相似性较高的基因。
另外17条序列没有搜索到同源序列，推测为未知基因。
分析显示31个TDFs中6个TDFs可能与植物香气成分相关，分别命名为20Gox2，C4H1，CCD4，AACT，CFAT，LOX。
3采用RT-PCR技术分离CFAT 和LOX的3'端序列选取其中两个可能与桂花香气相关基因片段CFAT 和LOX，设计引物，采用RT-PCR技术扩增其3'端序列，分别进行克隆、测序和拼接，获得了CFAT3'末端，共862bp，LOX3'末端，共1588bp。
本研究将为进一步研究桂花花香相关物质的代谢途径，以及为花卉香味的遗传改良奠定基础。
桂花(OsmanthusFragrans)是木犀科木犀属的代表种，是优良的园林绿化树种和香花树种。
本研究以桂花的花蕾为材料，运用cDNA-AFLP技术，分离桂花花香形成过程中差异片段，通过克隆测序，BLAST分析，获得的6个可能与香味相关的基因片段，为下一步揭示桂花香味物质代谢途径奠定基础，希望为花卉香味
的遗传改良提供一条新途径，主要试验结果如下： 1建立适合桂花花蕾总RNA 的提取技术体系采用改良热硼酸法，改良 Tris-硼酸法，试剂盒提取桂花花蕾总RNA，比较结果显示试剂盒法提取的总KNA，条带完整，质量好，纯度高，适合开展试验。
2利用cDNA-AFLP技术分离桂花花香形成过程中差异基因
采用末端两个选择性碱基的16条EcoRⅠ引物和16条MseⅠ进行选择性扩增，共256对引物组，通过筛选，确定160对引物组进行扩增。
试验共回收差异条带100带，获得50条测序结果。
在NCBI数据库中进行BLAST比对，发现有31条序列在nr库中搜索到相似性较高的基因。
另外17条序列没有搜索到同源序列，推测为未知基因。
分析显示31个TDFs中6个TDFs可能与植物香气成分相关，分别命名为20Gox2，C4H1，CCD4，AACT，CFAT，LOX。
3采用RT-PCR技术分离CFAT 和LOX的3'端序列选取其中两个可能与桂花香气相关基因片段CFAT 和LOX，设计引物，采用RT-PCR技术扩增其3'端序列，分别进行克隆、测序和拼接，获得了CFAT3'末端，共862bp，LOX3'末端，共1588bp。
本研究将为进一步研究桂花花香相关物质的代谢途径，以及为花卉香味的遗传改良奠定基础。
桂花(OsmanthusFragrans)是木犀科木犀属的代表种，是优良的园林绿化树种和香花树种。
本研究以桂花的花蕾为材料，运用cDNA-AFLP技术，分离桂花花香形成过程中差异片段，通过克隆测序，BLAST分析，获得的6个可能与香味相关的基因片段，为下一步揭示桂花香味物质代谢途径奠定基础，希望为花卉香味的遗传改良提供一条新途径，主要试验结果如下： 1建立适合桂花花蕾总RNA 的提取技术体系采用改良热硼酸法，改良 Tris-硼酸法，试剂盒提取桂花花蕾总RNA，比较结果显示试剂盒法提取的总KNA，条带完整，质量好，纯度高，适合开展试验。
2利用cDNA-AFLP技术分离桂花花香形成过程中差异基因
采用末端两个选择性碱基的16条EcoRⅠ引物和16条MseⅠ进行选择性扩增，共256对引物组，通过筛选，确定160对引物组进行扩增。
试验共回收差异条带100带，获得50条测序结果。
在NCBI数据库中进行BLAST比对，发现有31条序列在nr库中搜索到相似性较高的基因。
另外17条序列没有搜索到同源序列，推测为未知基因。
分析显示31个TDFs中6个TDFs可能与植物香气成分相关，分别命名为20Gox2，C4H1，CCD4，AACT，CFAT，LOX。
3采用RT-PCR技术分离CFAT 和LOX的3'端序列选取其中两个可能与桂花香气相关基因片段CFAT 和LOX，设计引物，采用RT-PCR技术扩增其3'端序列，分别进行克隆、测序和拼接，获得了CFAT3'末端，共862bp，LOX3'末端，共1588bp。
本研究将为进一步研究桂花花香相关物质的代谢途径，以及为花卉香味的遗传改良奠定基础。
桂花(OsmanthusFragrans)是木犀科木犀属的代表种，是优良的园林绿化树种和香花树种。
本研究以桂花的花蕾为材料，运用cDNA-AFLP技术，分离桂花花香形成过程中差异片段，通过克隆测序，BLAST分析，获得的6个可能与香味相关的基因片段，为下一步揭示桂花香味物质代谢途径奠定基础，希望为花卉香味的遗传改良提供一条新途径，主要试验结果如下： 1建立适合桂花花蕾总RNA 的提取技术体系采用改良热硼酸法，改良 Tris-硼酸法，试剂盒提取桂花花蕾总RNA，比较结果显示试剂盒法提取的总KNA，条带完整，质量好，纯度高，适合开展试验。
2利用cDNA-AFLP技术分离桂花花香形成过程中差异基因
采用末端两个选择性碱基的16条EcoRⅠ引物和16条MseⅠ进行选择性扩增，共
256对引物组，通过筛选，确定160对引物组进行扩增。
试验共回收差异条带100带，获得50条测序结果。
在NCBI数据库中进行BLAST比对，发现有31条序列在nr库中搜索到相似性较高的基因。
另外17条序列没有搜索到同源序列，推测为未知基因。
分析显示31个TDFs中6个TDFs可能与植物香气成分相关，分别命名为20Gox2，C4H1，CCD4，AACT，CFAT，LOX。
3采用RT-PCR技术分离CFAT 和LOX的3'端序列选取其中两个可能与桂花香气相关基因片段CFAT 和LOX，设计引物，采用RT-PCR技术扩增其3'端序列，分别进行克隆、测序和拼接，获得了CFAT3'末端，共862bp，LOX3'末端，共1588bp。
本研究将为进一步研究桂花花香相关物质的代谢途径，以及为花卉香味的遗传改良奠定基础。
桂花(OsmanthusFragrans)是木犀科木犀属的代表种，是优良的园林绿化树种和香花树种。
本研究以桂花的花蕾为材料，运用cDNA-AFLP技术，分离桂花花香形成过程中差异片段，通过克隆测序，BLAST分析，获得的6个可能与香味相关的基因片段，为下一步揭示桂花香味物质代谢途径奠定基础，希望为花卉香味的遗传改良提供一条新途径，主要试验结果如下： 1建立适合桂花花蕾总RNA 的提取技术体系采用改良热硼酸法，改良 Tris-硼酸法，试剂盒提取桂花花蕾总RNA，比较结果显示试剂盒法提取的总KNA，条带完整，质量好，纯度高，适合开展试验。
2利用cDNA-AFLP技术分离桂花花香形成过程中差异基因
采用末端两个选择性碱基的16条EcoRⅠ引物和16条MseⅠ进行选择性扩增，共256对引物组，通过筛选，确定160对引物组进行扩增。
试验共回收差异条带100带，获得50条测序结果。
在NCBI数据库中进行BLAST比对，发现有31条序列在nr库中搜索到相似性较高的基因。
另外17条序列没有搜索到同源序列，推测为未知基因。
分析显示31个TDFs中6个TDFs可能与植物香气成分相关，分别命名为20Gox2，C4H1，CCD4，AACT，CFAT，LOX。
3采用RT-PCR技术分离CFAT 和LOX的3'端序列选取其中两个可能与桂花香气相关基因片段CFAT 和LOX，设计引物，采用RT-PCR技术扩增其3'端序列，分别进行克隆、测序和拼接，获得了CFAT3'末端，共862bp，LOX3'末端，共1588bp。
本研究将为进一步研究桂花花香相关物质的代谢途径，以及为花卉香味的遗传改良奠定基础。
桂花(OsmanthusFragrans)是木犀科木犀属的代表种，是优良的园林绿化树种和香花树种。
本研究以桂花的花蕾为材料，运用cDNA-AFLP技术，分离桂花花香形成过程中差异片段，通过克隆测序，BLAST分析，获得的6个可能与香味相关的基因片段，为下一步揭示桂花香味物质代谢途径奠定基础，希望为花卉香味的遗传改良提供一条新途径，主要试验结果如下： 1建立适合桂花花蕾总RNA 的提取技术体系采用改良热硼酸法，改良 Tris-硼酸法，试剂盒提取桂花花蕾总RNA，比较结果显示试剂盒法提取的总KNA，条带完整，质量好，纯度高，适合开展试验。
2利用cDNA-AFLP技术分离桂花花香形成过程中差异基因
采用末端两个选择性碱基的16条EcoRⅠ引物和16条MseⅠ进行选择性扩增，共256对引物组，通过筛选，确定160对引物组进行扩增。
试验共回收差异条带100带，获得50条测序结果。
在NCBI数据库中进行BLAST比对，发现有31条序列在nr库中搜索到相似性较高的基因。
另外17条序列没有搜索到同源序列，推测为未知基因。
分析显示31个TDFs中6个TDFs可能与植物香气成分相关，分别命名为20Gox2，C4H1，CCD4，AACT，CFAT，LOX。
3采用RT-PCR技术分离CFAT 和LOX的3'端序列选取其中两个可能与桂花香气相关基因片段CFAT
和LOX，设计引物，采用RT-PCR技术扩增其3'端序列，分别进行克隆、测序和拼接，获得了CFAT3'末端，共862bp，LOX3'末端，共1588bp。
本研究将为进一步研究桂花花香相关物质的代谢途径，以及为花卉香味的遗传改良奠定基础。
桂花(OsmanthusFragrans)是木犀科木犀属的代表种，是优良的园林绿化树种和香花树种。
本研究以桂花的花蕾为材料，运用cDNA-AFLP技术，分离桂花花香形成过程中差异片段，通过克隆测序，BLAST分析，获得的6个可能与香味相关的基因片段，为下一步揭示桂花香味物质代谢途径奠定基础，希望为花卉香味的遗传改良提供一条新途径，主要试验结果如下： 1建立适合桂花花蕾总RNA 的提取技术体系采用改良热硼酸法，改良 Tris-硼酸法，试剂盒提取桂花花蕾总RNA，比较结果显示试剂盒法提取的总KNA，条带完整，质量好，纯度高，适合开展试验。
2利用cDNA-AFLP技术分离桂花花香形成过程中差异基因
采用末端两个选择性碱基的16条EcoRⅠ引物和16条MseⅠ进行选择性扩增，共256对引物组，通过筛选，确定160对引物组进行扩增。
试验共回收差异条带100带，获得50条测序结果。
在NCBI数据库中进行BLAST比对，发现有31条序列在nr库中搜索到相似性较高的基因。
另外17条序列没有搜索到同源序列，推测为未知基因。
分析显示31个TDFs中6个TDFs可能与植物香气成分相关，分别命名为20Gox2，C4H1，CCD4，AACT，CFAT，LOX。
3采用RT-PCR技术分离CFAT 和LOX的3'端序列选取其中两个可能与桂花香气相关基因片段CFAT 和LOX，设计引物，采用RT-PCR技术扩增其3'端序列，分别进行克隆、测序和拼接，获得了CFAT3'末端，共862bp，LOX3'末端，共1588bp。
本研究将为进一步研究桂花花香相关物质的代谢途径，以及为花卉香味的遗传改良奠定基础。
桂花(OsmanthusFragrans)是木犀科木犀属的代表种，是优良的园林绿化树种和香花树种。
本研究以桂花的花蕾为材料，运用cDNA-AFLP技术，分离桂花花香形成过程中差异片段，通过克隆测序，BLAST分析，获得的6个可能与香味相关的基因片段，为下一步揭示桂花香味物质代谢途径奠定基础，希望为花卉香味的遗传改良提供一条新途径，主要试验结果如下： 1建立适合桂花花蕾总RNA 的提取技术体系采用改良热硼酸法，改良 Tris-硼酸法，试剂盒提取桂花花蕾总RNA，比较结果显示试剂盒法提取的总KNA，条带完整，质量好，纯度高，适合开展试验。
2利用cDNA-AFLP技术分离桂花花香形成过程中差异基因
采用末端两个选择性碱基的16条EcoRⅠ引物和16条MseⅠ进行选择性扩增，共256对引物组，通过筛选，确定160对引物组进行扩增。
试验共回收差异条带100带，获得50条测序结果。
在NCBI数据库中进行BLAST比对，发现有31条序列在nr库中搜索到相似性较高的基因。
另外17条序列没有搜索到同源序列，推测为未知基因。
分析显示31个TDFs中6个TDFs可能与植物香气成分相关，分别命名为20Gox2，C4H1，CCD4，AACT，CFAT，LOX。
3采用RT-PCR技术分离CFAT 和LOX的3'端序列选取其中两个可能与桂花香气相关基因片段CFAT 和LOX，设计引物，采用RT-PCR技术扩增其3'端序列，分别进行克隆、测序和拼接，获得了CFAT3'末端，共862bp，LOX3'末端，共1588bp。
本研究将为进一步研究桂花花香相关物质的代谢途径，以及为花卉香味的遗传改良奠定基础。
桂花(OsmanthusFragrans)是木犀科木犀属的代表种，是优良的园林绿化树种和香花树种。
本研究以桂花的花蕾为材料，运用cDNA-AFLP技术，分离桂花花
香形成过程中差异片段，通过克隆测序，BLAST分析，获得的6个可能与香味相关的基因片段，为下一步揭示桂花香味物质代谢途径奠定基础，希望为花卉香味的遗传改良提供一条新途径，主要试验结果如下： 1建立适合桂花花蕾总RNA 的提取技术体系采用改良热硼酸法，改良 Tris-硼酸法，试剂盒提取桂花花蕾总RNA，比较结果显示试剂盒法提取的总KNA，条带完整，质量好，纯度高，适合开展试验。
2利用cDNA-AFLP技术分离桂花花香形成过程中差异基因
采用末端两个选择性碱基的16条EcoRⅠ引物和16条MseⅠ进行选择性扩增，共256对引物组，通过筛选，确定160对引物组进行扩增。
试验共回收差异条带100带，获得50条测序结果。
在NCBI数据库中进行BLAST比对，发现有31条序列在nr库中搜索到相似性较高的基因。
另外17条序列没有搜索到同源序列，推测为未知基因。
分析显示31个TDFs中6个TDFs可能与植物香气成分相关，分别命名为20Gox2，C4H1，CCD4，AACT，CFAT，LOX。
3采用RT-PCR技术分离CFAT 和LOX的3'端序列选取其中两个可能与桂花香气相关基因片段CFAT 和LOX，设计引物，采用RT-PCR技术扩增其3'端序列，分别进行克隆、测序和拼接，获得了CFAT3'末端，共862bp，LOX3'末端，共1588bp。
本研究将为进一步研究桂花花香相关物质的代谢途径，以及为花卉香味的遗传改良奠定基础。