3种淡水蚌消化酶活力的初步研究
响应面法优化高压脉冲电场辅助酶解河蚌肉工艺
响应面法优化高压脉冲电场辅助酶解河蚌肉工艺近年来,高压脉冲电场辅助酶解技术在食品工业中得到了广泛应用。
河蚌肉是一种传统美食,具有高蛋白、低脂肪、低胆固醇等特点。
但是,河蚌肉中的蛋白酶酵素会导致其遭受变质。
因此,如何提高河蚌肉酶解的效率和质量,成为了相关领域的研究重点。
本文采用响应面法优化高压脉冲电场辅助酶解河蚌肉的工艺。
通过对工艺参数的优化,探究高压脉冲电场辅助酶解河蚌肉的最佳工艺条件,为工业化生产提供了理论基础和实践指导。
1. 实验设计1.1 单因素试验法在单因素试验法中,分别选择四种操作参数进行优化,包括:高压脉冲电场强度、酶解时间、酶解温度和酶添加量。
通过对每种操作参数的不同水平进行试验,得到不同操作参数对酶解效果的影响。
1.2 响应面法在单因素试验法的基础上,采用响应面法进一步优化高压脉冲电场辅助酶解河蚌肉的工艺。
响应面法通过建立数学模型,探究各因素之间的相互作用关系,确定最佳工艺条件。
2. 实验方法2.1 材料采用新鲜河蚌肉作为实验材料,鲍鱼酶作为酶解酶。
2.2.1 河蚌肉样品的制备河蚌肉可先进行处理,包括洗净、切块等。
将制好的样品装入样品袋中,放入高压脉冲电场器中,加入适量的酶溶液,进行不同条件下的酶解实验。
2.2.2 高压脉冲电场辅助酶解实验将添加了酶溶液的样品置于高压脉冲电场器中,设定所需的工艺参数。
按照不同条件进行酶解实验。
高压脉冲电场辅助酶解时间约为1小时。
2.2.3 酶解产物的检测将酶解产物离心、过滤和浓缩,然后进行质量分析,包括蛋白质含量、溶解度等指标的检测。
3. 结果与分析通过单因素试验发现,高压脉冲电场强度、酶解时间、酶解温度和酶添加量对酶解效果会产生影响。
3.1.1 高压脉冲电场强度的优化结果表明高压脉冲电场强度对酶解效果影响显著。
当高压脉冲电场强度为70 kV/cm时,可获得最佳的蛋白质含量和溶解度。
3.1.3 酶解温度的优化建立高压脉冲电场强度、酶解时间、酶解温度和酶添加量之间的数学模型,以蛋白质含量和溶解度为响应值,进行响应面分析。
3种淡水蚌消化酶活力的初步研究
Pr m a y S ud n t e Di e tv z m e Ac i ii s o i r t y o h g s i e En y tv te f
Th e m n tc M u s l r e Li e i s es
F I h.a g一 E iin ,Q A u ,H O C e Z 1 IO H i A h n ,WA G Z e ,HU N h n N h A G C eg
t s s es s we h tte s q nc s he e mu s l ho d t a h e ue e wa C. pl a a >A. wo dina > H. c mi gi. An h s q e e o ciii s f i t c o a u n i d t e e u nc fa tvte o t e e e y e n b t t ma h a d i tsi e fe c s e ssmia vi. amya e >c luls >pr ta e. M e n h s nz m si o h so c n ne tn so a h mu s lwa i lr. z ls el ae oe s a whie. l al tr e e z l h e n ymea tvte n t tma h we ehih rt n i hei e tn s Ther to o my a ea tvt opr ta e a tv— c iiisi he so c r g e ha n t ntsi e . ai fa l c iiy t oe s ci i s t n ia e h tA. wo d a a s et rf rwae e s wh r ag e h d hihe o t n so tr h u sa c s, a d y i d c t d t a o i n Wa b te o trara e e l a a g rc n e t f sa c y s b tn e n C. pl aa sbetrf rc nto fag e c nti i bu da tpr ti . T edie tv iiy o c mi i n sac nd pr— i t wa te o o r lo a o a nnga n n oens h g sie a l fH c l b t u ng ii tr h a o ti s t e h o me wo musel S tc ud h v o d a lc iiy t o d s u c so u g e. ensWa bewe n te f r rt s s, O i o l a e g o pp ia lt o fo o r e fble a a b l Ke o d y w r s: lmnei s e e; a ls i t mu s l c mya e; pr ta e; c lu a e oe s e ll s
蚌的解剖实验报告
蚌的解剖实验报告引言蚌是一种常见的水生动物,属于软体动物门。
它们在水中生活,通常生活在湖泊、河流和池塘中。
本实验旨在通过解剖蚌的身体结构,了解其内部器官的组织结构和功能。
材料与方法1. 实验材料:新鲜的蚌、手套、手术刀、显微镜和玻片。
2. 实验方法:- 戴上手套,将蚌放在实验台上。
- 使用手术刀轻轻切开蚌的外壳,注意不要损伤内部器官。
- 将被切开的蚌观察放在显微镜上,用显微镜观察其内部结构并进行实时记录。
实验结果通过解剖我们发现以下蚌的内部结构:外壳蚌的外壳是由两个壳瓣组成的,用于保护其内部器官,并提供结构支持。
鳃我们可以看到,蚌的鳃位于其身体的一侧。
鳃是呼吸器官,用于吸取水中的溶解氧供身体代谢所需。
心脏我们可以观察到蚌的心脏位于其身体的中间部位。
蚌的心脏是一个类似管状的器官,负责泵送血液循环。
肝脏蚌的肝脏位于其心脏之下,呈现黄色。
肝脏是一个重要的消化腺体,负责合成和储存能量物质。
肠道蚌的肠道贯穿于其整个身体,起到消化和吸收的作用。
我们可以观察到肠道中含有一定量的食物颗粒。
生殖器官发现蚌的生殖器官位于其肠道附近。
蚌是雌雄同体的动物,意味着它们同时具有雄性和雌性生殖器官。
结论通过对蚌的解剖实验,我们深入了解了蚌的内部结构。
蚌的身体结构和功能高度适应水生环境的特点。
其中,其外壳能够给予其良好的保护作用,鳃则是呼吸的重要器官,心脏和肝脏则负责维持身体机能。
肠道负责消化和吸收,而生殖器官则让蚌能够繁衍后代。
本实验为我们提供了一个深入了解蚌的机会,也为后续的研究提供了基础。
通过对蚌的解剖实验,我们可以更好地了解鲍的内部结构和功能,并为更深入的研究和保护这一物种提供指导。
参考文献(请参考不少于三篇相关文献,列出完整的引用格式)。
几种贝类消化酶活力的比较
几种贝类消化酶活力的比较安贤惠;李联泰;林春梅【期刊名称】《淮海工学院学报(自然科学版)》【年(卷),期】2007(016)001【摘要】以缢蛏(Sinonovacula constricta)、剖刀蛏(Cultellus scalpellum)、文蛤(Meretrix linnaeus)、栉孔扇贝(Chlamys farreri)、杂色鲍鱼(Haliotis diversicolor)等为研究对象,分别制备并检测其消化腺中的消化酶,通过福林-酚法测定蛋白酶、碘-淀粉比色法测定淀粉酶和橄榄油乳化水解滴定法测定酯酶的酶活力,比较不同材料消化酶比活力的差异.结果表明5种贝类消化腺中蛋白酶活力大小依次为栉孔扇贝、缢蛏、剖刀蛏、杂色鲍鱼和文蛤,淀粉酶酶活力大小依次为杂色鲍鱼、文蛤、栉孔扇贝、缢蛏和剖刀蛏,酯酶活力用橄榄油乳化水解滴定法没有检测到差别.【总页数】3页(P57-59)【作者】安贤惠;李联泰;林春梅【作者单位】淮海工学院,江苏省海洋生物技术重点建设实验室,江苏,连云港,222005;淮海工学院,江苏省海洋生物技术重点建设实验室,江苏,连云港,222005;淮海工学院,江苏省海洋生物技术重点建设实验室,江苏,连云港,222005【正文语种】中文【中图分类】Q55【相关文献】1.几种贝类中药钙含量的测定及其红外光谱的比较研究 [J], 陈志强;武志富;高艳萍2.几种帘形目贝类rDNA ITS序列的比较 [J], 刘相全;包振民;胡景杰;王师;方建光;王如才3.北草蜥和中国石龙子几种消化酶活力比较研究 [J], 孙建礼;贾守菊;陈盛想;徐文新4.北草蜥几种消化酶活力比较 [J], 孙建礼;张永普;贾守菊5.几种贝类消化酶同工酶比较分析和遗传关系探讨 [J], 安贤惠;李联泰;林春梅因版权原因,仅展示原文概要,查看原文内容请购买。
三角帆蚌对藻类滤食及消化的研究
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晶杆, 是一个具有消化酶的胶状物质构成的晶杆状 构造, 其功能主要是帮助消化。
三角帆蚌无专门捕食器官, 靠鳃上的纤毛与唇 上的纤毛扇动产生水流, 水中生物和有机碎屑随水 流从进水管经过鳃时会被过滤或截取下来, 过滤下 来的颗粒在纤毛摆动下经鳃腹部的食物凹槽送到唇 片。经唇片筛选的食物颗粒如适宜 ( 大小合适、有 机物含量较高 ) 则被吞食进入消化道, 不适宜的颗 粒则以假粪的形式被排出体外。
Chang ing curve of Ch lo rophyta. s re la tive content in the pond and the a lim entary canal
26
淡水渔业
2 006 年
在池塘水样中发现藻类共 5门 26属, 在三角 帆蚌的消化道中发现以上 5个门中的 23个属。除
与同一样本中栅藻数量的比来作为这种藻的相对含 量, 将各藻类在池塘和消化道各部分中的相对含量
肠、直肠四处藻类的种类及出现个数 合计见表 1。 绘成曲线图 ( 图 1~ 4) , 从图中可以直观地看出各
直肠中已经是粪便, 因此在直肠出现的藻类就是没 藻类在池塘和消化道各部 分中相对含量的 变化情
有消化的。在实验中发现栅藻在蚌消化道各个部分 况。
2 结果与分析
211 池塘及三角帆蚌消化道各部分中藻类的鉴定 与统计结果
F ig1 1
图 1 蓝藻门各藻类在池塘及消化道 各部分中 相对含量变化图
Chang ing curve o f Cyanophy ta. s re lative content in the pond and the a lim entary canal
关键词: 三角帆蚌 (H y riop sis cum ingii Lea); 藻类; 滤食; 消化
氨氮胁迫对背角无齿蚌三种酶活性的影响
we t p w t h n r a e o n i t e i c e s fAmmo img L o c n r t n . h n t e Ammo i mg L o c n a u h na / N c n e t i s W e a o h na / N c n e t — r t n wa 0 mg L, e a t i f O i e a o a c e s g tt ema i m . d t e e ra e i s 1 / t ci t o D n h p tp n r a o t x mu An h n d c e s d a o h vy S o h l t t e i c e s ft e c n e t t n , u ih rt a e c n o r u i l wi t n r a e o o c n ai s b th g e h n t o t lgo p;a e r g f . te hh h r o h r tt a e o 5 h n 2
C HENG Ja HU a —ig, AO Yu c i in, B oqn R —a ( oeeo i c ne , aca gU i r t, a ̄i ac ag 30 1P C C l g f f Si csN nhn n esy J n nhn 0 3 R ) l Le e v i i N 3
几种贝类消化酶活力的比较
Ab t a t s r c :Th c i i e f d g s i e f r n s o i o o a u a c n t it e a tvt s o i e tv e me t f S n n v c l o sr c a, C le l ss a p lu , i u t lu c l e l m
关 键词 : 缢蛏 ; 消化酶 ; 贝类; 活力 酶
中图分类 号 : 5 Q5
文献标 识码 : A
Co pa a i eS u y o h tv te fDif r ntS a h l m r tv t d n t e Ac i iiso fe e e s el
O .Th m y a e a tv t f Ha i t i e sc l r r n e i t a d t e n x e p c i ey b i g T e a ls c i iy o l i d v r io o a k d f s , n h e t r s e tv l en o s r
人们对 酶 的认 识 起 源 于生 产 与 生 活实 践 , 我 在 国 , 们在 尚不清楚 酶 为何物 、 人 也不 了解ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ 性质 时就
根据生 产和生 活 的经 验 积 累 , 广泛 应 用 酶进 行 酿 酒 造醋 等 。进 入 1 9世 纪 , 国学 者 经过 多方 位 研究 , 各 对酶 的特性和 功能 有 了深入 的 了解 , 其概 念 也 逐 步
M eerxLin e s ha s a rr n l t ies oo r eemie n t ep p r rti n a u ,C lmy reia d Hai i d vri lr weed tr n d i h a e. f os c
《水利渔业》2006年总目次
罗 氏沼虾套 养花鱼 健 康养 殖技术 骨 32 .8 黄鳝亲鳝养 殖及 产卵适宜生 态环境 的研究 32 .9 温度对 中华 鳖稚 鳖最大摄食率 、 转化 效率 和生长的影响
3. 31
原子吸收光谱 法测定黄颡鱼体 中微 量元素的初步研究 3 7 . 黄颧鱼生长激 素 e N D A序列克隆及其序列 分析 3 1 .O 5种帘蛤科贝类随机扩增 多态性 D A比较分析 N 海洋 贝类抗癌 免疫 活性的研究进展 微 藻多糖生物合成 的研究进展 几种 鱼红细胞脆性 的研究 3 1 .4 3 1 .6 3 1 .9 3 2 .1
云南裂腹鱼 繁殖生 物学研究
12 . 4 12 .6 12 ,8 12 .9 13 ,1 13 .2 13 4 13 .6 2 2 .4 2 2 6 2 2 .7 2 3 .1
2 3 .2
4 1 .0
4.1 2
密度和投饵频率对凡纳滨对虾存活和生长的影响
温度对克 氏原螯 虾幼虾发育 和存 活的影响 H G剂量和受精方 式对黄鳝繁殖 的影 响 C P C管对 黄鳝最大摄食 率的影响 V 湖北牛 山湖 红鳍原舶的个体生 殖力 南 门峡水库 高 白鲑移植 及生 物学观测
p H对 丁鳓仔鱼和稚鱼肠及肝胰脏蛋 白酶活性的影 响 13 .
罗非鱼过氧化 氢酶活性的初步研究 黄鳝性逆转研究进 展 丁麟不同群体 I 1 T 区序列分析 S 白鲫 组织器官 同工 酶的生化与遗传分析 橄 榄蛏 蚌软组织 4 种微量元 素含量分析 鱼类消化酶活性 的影 响因索 L 肉碱对水产动物生 长免 疫与水体生态环境的影响 一
・
61 .6 61 .9 62 .4 6 2 .6 62 .9 6 3 .0 6 3 .2
三角帆蚌怀珠蚌与非怀珠蚌免疫力差异性研究
三角帆蚌怀珠蚌与非怀珠蚌免疫力差异性研究作者:肖调义刘敏来源:《湖南饲料》 2012年第5期肖调义1 刘敏2(1.湖南农业大学动科院,长沙410000 ;2.湖南九鼎科技(集团)有限公司,岳阳414000)摘要:取1-5 龄不同蚌龄的三角帆蚌怀珠蚌与非怀珠蚌若干只,提取其外套膜、心脏、斧足、鳃四个组织的粗酶液,然后利用丙酮酸钠作底物,加入还原性辅酶NADH(烟碱胺腺嘌呤二核苷酸)生成NAD。
据NAD在340nm处无吸光度显示,根据吸光度的降低情况来了解酶的反应速度,从而测定超氧化物歧化酶(SOD)的活性。
结果表明:在三角帆蚌的心脏和斧足中,怀珠蚌和非怀珠蚌的1、2、3、4 和5龄蚌的机体免疫力无显著性差异;在外套膜和鳃中,怀珠蚌的机体免疫力为5 龄蚌>1、2、3、4 龄蚌,而非怀珠蚌的1、2、3、4 和5 龄蚌的机体免疫力无显著性差异。
关键词:三角帆蚌;组织;蚌龄;SOD;差异性三角帆蚌(Hyriopsis cumingii)-又称“翼蚌”、“劈蚌”,简称帆蚌。
它属于软体动物门(Mollusca)、瓣鳃纲(Lamellibranchia)、真瓣腮目(Eulamelli原branchia)、蚌科。
它广泛分布于湖南、湖北、安徽、江苏、浙江、江西等省,尤以我省洞庭湖以及中型湖泊分布较多。
三角帆蚌资源虽然较丰富,但随着珍珠养殖业的发展,该蚌捕捞数量猛增,导致天然资源衰退。
因此,积极开展三角帆蚌的基础性研究已势在必行,具有重要的现实意义。
近年来由于育珠技术的普及与珠农的趋利,造成大规模无序发展,养殖技术有一定的限制和所采用的蚌种种质混杂导致三角帆蚌因近亲繁殖,造成育珠蚌抗病能力差,造成淡水珍珠养殖病害的发生和大批死亡。
本试验通过对三角帆蚌怀珠蚌怀珠蚌与非怀珠蚌免疫力差异性研究,揭示其机体的自我调控机理。
以期为生产实践中最大限度地发掘机体本身的调控效能,提高淡水珍珠产量、品质和养殖成活率。
超氧化物歧化酶(SOD)是一种肽链大分子的金属酶,能促使过氧化物游离基转化成过氧化氢和氧,从而清除炎症过程中伴随产生的过氧化物游离基,而有强大的抗炎作用。
河蚌肉酶解软化工艺探讨
S t ud y o n t h e Mu s s e l M e a t En z y ma t i c S o f t Pr o c e s s i ng
东平湖鲤鱼不同消化器官中3种消化酶活力的比较
农 学 中旬 刊 *动 物 科 学
2 0 1 4年 1 2 月
产生 l /  ̄ mo 1 分 子葡萄 糖 的酶量 为 1个 活 力单 位 。酶 的 活力 以 比活力 表 示 ,单 位 为酶 活 力 单位 / mg蛋 白
东平湖鲤 鱼不 同消化 器 官 中 3种 消化 酶活 力 的比较
张 龙 岗 , 安 丽 , 杨 玲 , 刘 羽 清 , 付 佩 胜(
票
淡 水 水 产 遗 传 育 种 )
[ 摘 要 ] 探 讨 了东 平 湖 鲤 鱼 3种 主 要 消 化 酶 ( 胃蛋 白酶 、 淀 粉 酶 、 脂 肪 酶 ) 在 消 化 道 不 同部 位 ( 肝胰 脏 、
长江大 学学报 ( 自然科学版) 2 0 1 4 年1 2 月号农学 中旬刊 第 1 1 卷第3 5 期 J o u r n a l o f Y a n g t z e U n i v e r s i t y( N a t S c i E d i t ) D e c . 2 0 1 4 .V o 1 . 1 1 No . 3 5
1 . 3 消化 酶 活力 测定 3种 酶 活力 的测 定均 采用 购 自南京 建成 生 物工程 研究 所 的试剂 盒进 行测 定 。 胃蛋 白酶 活力 定义 为 :在 p H8 . 0和 3 7 ℃条 件下 水浴 1 0 mi n , 胃蛋 白酶 每分 钟 水解 产 生 1 F mo 1 分 子
胃、肝 胰 脏与 肠道 ,剔 除各 器 官外 面 的脂肪 与结 缔 组织 后 ,用 预 冷 ( CC)的 生理 盐 水 冲洗 干 净 ,并 用 滤纸 吸干 水分 ,分 别 称重 ,每 克加 5 ml 生理盐水 ( 4 ℃) ,用 剪 刀 剪 碎 ,再 以玻 璃 匀浆 器 匀 浆 ,匀 浆 液
三角帆蚌Hgriopsis cumingii肉酶解工艺的研究
三角帆蚌Hgriopsis cumingii肉酶解工艺的研究
杨文鸽;黄晓春;庄荣玉;徐大伦;董明敏
【期刊名称】《食品与发酵工业》
【年(卷),期】2003(029)001
【摘要】探讨了As1.398中性蛋白酶水解三角帆蚌肉的具体工艺条件.通过正交实验,确定其最佳水解条件为:温度50℃,酶用量2.8%,肉水比1∶2,时间9h.综合考虑各方面的因素,在实际生产中可采用40~45℃,酶用量2.4%,肉水比1∶2或1∶1,时间8h对蚌肉进行酶解.水解液可用于生产功能性蛋白饮料及调味配料.
【总页数】4页(P90-93)
【作者】杨文鸽;黄晓春;庄荣玉;徐大伦;董明敏
【作者单位】宁波大学生命科学与生物工程学院,宁波,315211;宁波大学生命科学与生物工程学院,宁波,315211;宁波大学生命科学与生物工程学院,宁波,315211;宁波大学生命科学与生物工程学院,宁波,315211;宁波大学生命科学与生物工程学院,宁波,315211
【正文语种】中文
【中图分类】TS254
【相关文献】
1.三角帆蚌(Hyriopsis cumingii Lea)血细胞初步研究 [J], 罗文;朱柳锋;郑大恒
2.人工育珠对三角帆蚌(Hyriopsis cumingii)遗传基因影响的初步研究 [J], 杨品红;王志陶
3.三角帆蚌(Hyriopsis cumingii)珍珠钙代谢的周年性变化研究* [J], 曾文涛; 罗文; 郑大恒
4.三角帆蚌(Hyriopsis cumingii)珍珠钙代谢的周年性变化研究 [J], 曾文涛; 罗文; 郑大恒
5.三角帆蚌Hgriopsiscumingii肉酶解工艺的研究 [J],
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3种淡水育珠河蚌血细胞类型的研究
文章编号:0490 6756(2002)0z 0068 053种淡水育珠河蚌血细胞类型的研究杨军,石安静(四川大学生命科学学院,成都610064)摘要:作者以圆背角无齿蚌、三角帆蚌和褶纹冠蚌为材料,通过多种染色方法并结合酸性磷酸酶、非特异性酯酶和过氧化物酶等3种酶对血细胞的显示定位,可将3种淡水育珠蚌的血细胞分为:颗粒细胞、无颗粒细胞、透明细胞和类淋巴细胞四种类型.作者认为,透明细胞可能是颗粒细胞衰老形成的.关键词:血细胞;圆背角无齿蚌;三角帆蚌;褶纹冠蚌中图分类号:Q24 文献标识码:A贝类的免疫系统与脊椎动物相比,没有体液免疫,不能产生免疫球蛋白.血细胞在贝类机体的防御机制中起着重要作用,但是直到目前为止,对血细胞的功能仍然不十分清楚,其中一个重要原因是对血细胞的类型认识不清楚.研究者对此分歧较大,Moore [1]将血细胞分为3类,即一种无颗粒细胞和两种颗粒细胞;Ch enery [2]根据多种文献,将瓣鳃纲软件动物的血细胞分为8类.后来,Cheng [3]将血细胞的分类方法简化,根据血细胞细胞器的性质、细胞核的形态及其染色亲和性、血细胞的发生,将血细胞分为两大类:非颗粒细胞(透明细胞)、颗粒细胞.已有的研究报道多为海产贝类,淡水贝类研究极少,国内只有沈亦平[4]用Giemsa 染色和苏木精 伊红染色方法,对淡水褶纹冠蚌的血细胞做过初步的研究.为此,我们用多种染色方法、酶组化方法比较研究了我国3种淡水珍珠蚌 圆背角无齿蚌、三角帆蚌和褶纹冠蚌的血细胞,期望为贝类血细胞分类和功能研究以及珍珠养殖中蚌病的防治提供有益的资料.1 材料和方法1.1 材料圆背角无齿蚌(A nodonta w oodiana p acif ica Heude)采自成都郊区龙泉驿大面铺,三角帆蚌(H yr iop sis cumingii Lea)购自四川安岳珍珠场,褶纹冠蚌(Cr istaria p licata Leach)购自浙江珍珠场.1.2 方法1.2.1 Wright 氏染色 将抽取的蚌血液,滴在载玻片上静置15min,吸去液体,晾干.滴加Wrig ht 氏染液染4min,然后加入等量的蒸馏水染色8min,水洗,晾干,在光学显微镜下观察.1.2.2 Giemsa 伊红染色 将蚌的血液滴在载玻片上,静置15min,吸去液体,放入纯甲醇中固定10m in,晾干.滴加伊红染液,将玻片放入湿盒中,染色24h.水洗,晾干后,用Giemsa 染色15min,水洗,晾干,在光学显微镜下观察.1.2.3 M ay Gr nwald 染色(Jenner 氏伊红美兰染色) 滴蚌血液于载玻片上,静置15m in,吸去液体,晾干,滴加M G 染色5m in,然后滴加等量蒸馏水再染色10min,水洗,晾干,在光学显微镜下观察.1.2.4 显示酸性磷酸酶(ACP) 用偶氮偶联法(Lojda,1962;Barka &Anderson,1962),底物用萘酚AS BI 磷酸,反应时的温度为32 ,反应60min.对照组加NaF.1.2.5 显示非特异性酯酶(NE) 用偶氮偶联法(Lojda &Fric,1964),底物用 醋酸萘酚,反应时的温度收稿日期:2002 03 082002年4月第39卷增刊四川大学学报(自然科学版)Journal of Sichuan U niversity (N atural Science Edition)A pr.2002Vol.39Issue32 ,反应10~15min,对照组中不加 醋酸萘酚.1.2.6 显示过氧化物酶(PO) 用3,3 二氨基联苯胺法(Graham &Karnovsky,1966),在Tris HCl 缓冲液(pH 7.5)中反应15m in,对照组中不加3,3 二氨基联苯胺盐酸盐.2 结果2.1 Wright 氏染色在圆背角无齿蚌中,观察到4种细胞:无颗粒细胞、颗粒细胞、透明细胞和类淋巴细胞.(1)无颗粒细胞的细胞核呈紫红色或红色,形状多为椭圆形,也有呈柱状或不规则状.胞质较多,染成蓝色,无颗粒.胞体伸展,形状多样,胞质突起大而长,伸展较远,常相互连接或是与其他类型细胞相连接构成网状(图版 1, 3, );(2)颗粒细胞胞体多为圆形,细胞核呈圆形或椭圆形,多偏位于胞体的一侧,染成红色或紫红色.胞质内充满球状颗粒,颗粒致密着色较深.(图版 1, 3, );(3)透明细胞核多为圆形,呈红色或紫红色.胞体宽大,形状较圆,有的为扇形.胞质的内容物稀少,着色很浅,呈透明状,无伪足(图版 2);(4)类淋巴细胞相对于其他3类细胞的体积较小,核深染呈蓝紫色,多为圆形,占据细胞体积的大部分,只在核的边缘能见到少量的蓝色胞质(图版 3: ).在三角帆蚌中,血细胞也为上述4种类型细胞,与圆背角无齿蚌比较,其颗粒细胞数目很多,透明细胞数量很少.在褶纹冠蚌中,血细胞也分为上述四种类型,其颗粒细胞数与圆背角无齿蚌相近,无颗粒细胞数目比圆背角无齿蚌多,类淋巴细胞数目也要多一些.表1 3种蚌各类型细胞的比例颗粒细胞(%)无颗粒细胞(%)透明细胞(%)类淋巴细胞(%)圆背角无齿蚌39.631.228.50.7三角帆蚌56.734.78.10.5褶纹冠蚌37.841.019.1 2.12.2 Giemsa 伊红染色和M ay Gr nwald 染色经Giemsa 伊红染色后,胞质呈蓝紫色,能清楚地反映细胞的形态,但不能显示胞质中内容物的差异,在所有细胞中不容易观察到颗粒成分,难于区分颗粒细胞与无颗粒细胞.经M ay Gr nwald 染色后,颗粒呈深蓝色,但颗粒的形态并不清楚,比较模糊,细胞核着色较浅呈蓝色.2.3 酸性磷酸酶(ACP)活性部分颗粒细胞几乎都表现出很强的酸性磷酸酶活性(图版 4, ),有些颗粒细胞只是部分颗粒表现出活性(图版 7, ).有ACP 活性的颗粒细胞,在所有颗粒细胞中占多数.无颗粒细胞(图版 7, )和透明细胞的ACP 活性很弱或是没有ACP 活性.类淋巴细胞没有ACP 活性.这4类血细胞表现出的ACP 活性在3种蚌中均类似,但也有一定的差异.在褶纹冠蚌中表现出ACP 活性的血细胞比例最高,在三角帆蚌和圆背角无齿蚌中则相对较少.2.4 酸性非特异性酯酶(NE)活性表现出活性的细胞主要是颗粒细胞以及少量的无颗粒细胞,有活性的颗粒细胞一般是部分颗粒表现出活性(图版 5, ),只有极少数颗粒细胞的全部颗粒有活性(图版 6, ).在褶纹冠蚌中,有活性的细胞较多;在三角帆蚌中,相对较少;圆背角无齿蚌最少.2.5 过氧化物酶(PO)活性在这3种蚌中,表现出PO 活性的都是颗粒细胞(图版 9, ),活性区呈深黑色或棕黑色的颗粒状,但不是所的颗粒细胞都有PO 活性.褶纹冠蚌表现出活性的血细胞比例最高.在圆背角无齿蚌只有少部分颗粒细胞有活性.在三角帆蚌中没有观察到有PO 活性的血细胞.69增刊 杨军等:3种淡水育珠河蚌血细胞类型的研究图版3 讨论尽管对贝类血细胞的分类已有不少的研究,但是迄今仍然没有形成一个公认的分类标准,这在一定程度上反映了贝类血细胞本身组成的复杂性.不同的研究者在研究了不同贝类的血细胞后,提出了各种不同的分类方法.我们结合染色和酶组化方法研究了3种淡水蚌的血细胞,认为可将这3种淡水蚌的血细胞分为4类:颗粒细胞、无颗细胞、透明细胞和类淋巴细胞.从形态上,它们之间区分明显,各有特点,3种酶显示的结果也表明,在这4类细胞的细胞质中的内容物也有差异.3种酶在颗粒细胞中分布较多,在无颗粒细胞则较70四川大学学报(自然科学版) 第39卷少,在透明细胞和类淋巴细胞中几乎没有.由酸性磷酸酶、非特异性酯酶和过氧化物酶在颗粒细胞中的分布差异表明,颗粒细胞中的颗粒的化学组分是不同的.而且同样一种酶并不是都出现在所有颗粒细胞中,有些颗粒细胞有这种酶,而有的则没有.Granath 等[5]研究了蜗牛Biomp halar ia glabr ata 的血细胞认为,在ACP,NE 和PO 3种酶中多数细胞能合成一种以上的酶,而有些细胞只能合成其中一种酶.我们的实验结果也显示,颗粒细胞在合成酶的种类和数量上是有差异的.有的研究者根据颗粒的大小或嗜酸/碱性来进一步将颗粒细胞分为几个亚类,我们认为这并不能真正反映颗粒组成的复杂性.颗粒细胞中的颗粒是什么性质的物质呢?酸性磷酸酶(ACP)是溶酶体的标志酶,过氧化物酶(NE)主要分布于微体.颗粒细胞有颗粒表现出ACP 活性,也有颗粒显示出NE 活性,这表明有的颗粒可能是溶酶体,有的颗粒可能是微体.部分无颗粒细胞表现出ACP,NE 活性,特别是NE 活性较强,这表明无颗粒细胞的内容物仍然比较复杂.类淋巴细胞胞质少,也不表现出ACP,NE,PO 活性.在其他一些贝类中也发现了类似的类淋巴细胞[6],然而对它的功能并不清楚.我们在研究中发现,在透明细胞与颗粒细胞之间存在着中间类型细胞.这些中间类型细胞兼具透明细胞与颗粒细胞的某些特征:有较宽大的胞体,胞质十分稀薄呈透明状,核位于胞体中心附近或靠近胞体边缘,但在紧挨核的某一侧有着与颗粒细胞相似的极细颗粒成分.这些颗粒密集排列聚集在核附近,并不散布到周围的胞质中,与周围稀薄呈透明状的胞质对比明显.同时,颗粒组分在这些中间类型细胞中呈现出连续变化的趋势:有的中间类型细胞在核周围出现极密集的颗粒深染区,有伪足伸出,胞体形状不规则,接近颗粒细胞(图版 8, );有的在这块深染区,颜色变浅,颗粒排列疏松并出现空泡状结构(图版 8, );有的在核旁边的深染区,颜色更浅,少量颗粒成弥散状,胞体直径增大,大致成扇形,几乎无伪足,接近透明细胞(图版 8, ).在这些中间类型细胞中,检测到ACP 和NE 活性,活性区是核旁边的深染区.通过颗粒细胞与透明细胞之间关系的研究,表明两者之间有着某种关联.Sm inia 等[7]在3种淡水蜗牛中都观察到一种大的圆形血细胞,胞质几乎染不上色,呈透明状,他们认为这是一类衰老的细胞,因为在形态上这类细胞表现出退行性特征:隆起的核和胞质、解体的细胞器.同时在体外非最适条件下,这类细胞数量增加.Sminia 提到的这种细胞极类似于透明细胞.在蚌血细胞研究中,人们认为在各类血细胞之间是有相互联系的,存在着由一类细胞发育成另一类细胞的过程,但具体到是什么类型的细胞有这样的过程,却有不同的看法[8~10].从颗粒细胞与透明细胞之间存在的中间类型细胞看,可能颗粒细胞在生命过程中逐渐失去颗粒,而衰老形成透明细胞.要最终决定它们之间的关系以及蚌血细胞的发生、衰老的整个过程,还需要更多的实验证据.参考文献:[1] M oore C A,et al ,Bio l.Bull,1977,152:105-119.[2] Chenery D P.Biol.Bull,1971,140:353-368.[3] Cheng T C,Bivalv es.In:Invertebrate Blood Cell (Edited by Ratcliffe N A,Row ley A F )[M ].London:Academic Press,1981.231-300.[4] 沈亦平,等,水生生物学报,1993,17:190-192.[5] Granat h W O ,et al .J.Exp.Zool,1983,226:205-210.[6] M cCormick Ray M G,et al .J.Inv ertebr Pathol,1991,58:291-230.[7] Sminia T ,et al .J.M orphol,1980,165:31-39.[8] Fr ier man E M ,et al .J.N atl.Cancer Inst,1976,56:319-324.[9] Cheng T C,et al .J.Invertebr Pathol,1975,26:341-351.[10] M ix M C.M ar.Fish Rev,1976,38:37-41.71增刊 杨军等:3种淡水育珠河蚌血细胞类型的研究72四川大学学报(自然科学版) 第39卷Study on the Classification in Hemocytes of Three Kindof Freshwater Pearl ClamsYAN G Jun,SHI A n j ing(Colleg e of L ife Science,Sichuan U niv ersity610064,China)Abstract:The hemocytes of freshwater pearl clams,A nodonta w oodiana p acif ice Heude,Hyr iop sis cumingii Lea,and Cristaria p licata Leach w ere studied comparatively using various staining techniques,enzyme hiso chem isty.On the basis of characteristics and morphological criteria,their hemocy tes were classified into four major categories:granulocyte,agranulocyte,hy alinocyte and lymphocyte like cell.The relation of those types cells may be that the snile granulocyte formed hyalinocy te.Key words:hemocyte;A nodonta w oodiana p acif ica H eude;H yriopsis cumingii Lea;Cr istar ia p licata Leach。
淡水蚌类发生与发育研究进展
淡水蚌类发生与发育研究进展陈修报;杨健【摘要】淡水蚌类是水域生物多样性的重要组成部分,对水体的物质循环和能量流动起着巨大的作用,且具有较高的营养、经济和生态价值.由于栖息环境的改变、过度捕捞、水体污染、缺少寄生鱼和受到外来物种的入侵,其资源状况不容乐观.而且它们繁殖生物学具有特殊,生活周期较长,这就给全面把握其完整生活史带来困难.本文综述了国内外有关淡水蚌类配子的发生、胚胎发育、寄生,稚蚌、幼蚌以及成蚌的生长发育研究的最新进展,旨在总体上了解其生活史全过程的特点及繁殖生物学意义,从而为淡水蚌类资源保护和增殖以及生物指示物的开发提供参考.【期刊名称】《中国水产科学》【年(卷),期】2011(018)004【总页数】9页(P944-952)【关键词】淡水蚌类;发生;发育;生活史【作者】陈修报;杨健【作者单位】南京农业大学渔业学院,江苏无锡 214081;中国水产科学研究院淡水渔业研究中心,中国水产科学研究院内陆渔业生态环境与资源重点开放实验室,江苏无锡 214081;南京农业大学渔业学院,江苏无锡 214081;中国水产科学研究院淡水渔业研究中心,中国水产科学研究院内陆渔业生态环境与资源重点开放实验室,江苏无锡 214081【正文语种】中文【中图分类】Q17淡水蚌类是指软体动物门(Mollusca)、瓣鳃纲(Lamellibranchia)、真瓣鳃目(Eulamellibranchia)、蚌科(Unionidae)的贝类。
目前已知的有142个属,在世界主要动物区系的分布为: 古北界26属、新北界51属、热带界6属、新热带界20属、东洋界38属以及大洋洲界1属[1]。
它们不仅在水生态系统的食物网结构、水质调控和物质循环等方面起着重要作用[2-4],而且具有较高的经济价值,如培育珍珠[5-6],提取抗肿瘤成分[7]等。
此外,因其具有分布广泛、营固着生活、对污染物的耐受力强等特点[8-9],近几年,一些淡水蚌类[如,背角无齿蚌(Anodonta woodiana)[10-13]、无齿蚌 Anodonta piscinalis[14]]还被用作指示生物监测和评价水体持续性污染物的时空动态。
响应面法优化提取三角帆蚌粗多糖及分离纯化和一级结构表征的研究
响应面法优化提取三角帆蚌粗多糖及分离纯化和一级结构表征的研究摘要:本课题主要是对三角帆蚌多糖(HCPS)的提取、纯化和一级结构表征进行研究。
首先,在单因素的基础上,采用三因素三水平Box-Behnken设计和响应面分析法优化提取三角帆蚌多糖(HCPS)。
结果表明,最佳条件为:提取温度80℃, 提取时间4.5h,固液比为:1:8(v / w),在此条件下,粗多糖得率为3.66%。
粗HCPS通过DEAE-cellulose 52色谱和Sephadex G-100色谱分离得到三种组分:HCPS-1, HCPS-2 和HCPS-3,各自的得率分别为HCPS-1 26.91% HCPS-2 30.18%为和HCPS-3 3.93%。
通过傅里叶变换-红外光谱法,液相色谱方法和气相色谱法对进行结构研究,表明:HCPS-3与HCPS-1或HCPS-2相比结构上具有很大差异。
关键词:优化;多糖;提取;纯化;三角帆蛙1 介绍从植物、附生菌和动物中提取的多糖包含物已经被广泛应用在传统中医药一些疾病的治疗方面。
蚌类是生物多糖资源的一个研究热点。
据报道,蚌类多糖具有潜在的生物功能,如:抗肿瘤、抗病毒、免疫调节、抗氧化等等。
因此,从各种各样的蚌类中发现和鉴定新多糖已经成为一个研究热点。
在中国,三角帆蚌作为淡水珍珠贝家族的一员是最经济、最重要的贻贝种类。
在世界市场上,95%的淡水贻贝来自于中国,而95%的淡水贻贝来自于三角帆蚌。
在中国质量高的三角帆蚌被广泛的养殖。
但是三角帆蚌下脚料(淡水贻贝生产废弃物)多被用于动物饲料和肥料当中。
事实上,这些下脚料可以应用于食品和医药的原材料中。
据报道,三角帆蚌在传统中医药中用于治疗一些疾病。
另外,最近研究表明,三角帆蚌下脚料富含多糖,这些多糖具有营养和药理功能,如:抗肿瘤、增强免疫力、抗炎症和抗老化。
但是,对于三角帆蚌多糖(HCPS)的提取、纯化、结构特征和生物活性的研究关注还少。
因此,本研究详细报道了HCPS提取参数的优化和精制HCPS的一级特征。
水产动物消化酶的研究概况
水产动物消化酶的研究概况1唐黎,姜海波,陈骏驰,许重大连水产学院生命科学与技术学院 (116023)E-mail:tang_xiao_xia@摘要:本文综述了鱼类、甲壳类、棘皮动物以及软体动物消化酶研究的状况。
讨论了这些水生动物的消化酶活力与食性、食物组成、环境条件、个体发育的不同阶段等因素的关系。
研究消化酶不仅可为水产养殖业中优化人工饵料问题提供依据,而且作为工具酶在生物工程技术上有很大的利用价值。
关键词:水产动物消化酶概况人工饵料1.引言酶是生物体中具有催化功能的蛋白质,也叫生物催化剂,生物体中的化学反应很少是在没有催化剂的情况下进行的。
酶的突出特征是它们的高度催化能力和专一性。
而且酶的活性可以被调节,与不同能量形式的转化密切相关。
总之,酶在生物体内起着非常独特和关键的作用。
从1897年人类认识酶开始,到1936年建立起酶是蛋白质的观点,这段时期酶学发展速度十分惊人,酶学的各种观点不断的得到丰富,近几十年酶学的发展仍然很快,各种高端分析仪器的应用,使得酶学的研究更为深入。
到现在已知的有近2000种酶类,而且对其在细胞代谢活动中的作用等方面作了详尽的鉴定和描述,但酶学覆盖的范围很广,仍有很多的未知领域有待探索,所以酶学的发展很有前途。
消化酶是酶的一种,因此具有酶的所有特征,它主要是由消化腺和消化系统分泌的营消化作用的酶类。
在消化酶中,又依消化对象的不同而大致可划分为蛋白酶、淀粉酶、脂肪酶和纤维素酶等几种。
目前,国内外报道的对于水产动物消化酶的研究以蛋白酶和淀粉酶这两种酶为最多。
从水产动物种类上来看,以鱼类、甲壳类等的研究较多。
近年来,对于棘皮动物、软体动物消化酶的研究也有较多的报道。
2.关于鱼类消化酶的研究有关鱼类消化酶的研究已有大量的报道,对于鱼类消化道中消化酶的研究,是了解鱼类消化生理的重要内容,对于鱼类养殖过程中人工饵料的合理配制也具有重要意义。
在这方面的研究工作国外要比国外开展得早而多,冯克研究了鲤鱼(Cyprinus carpio)、狗鱼(Esox)肝胰脏蛋白酶活性,北御门研究了鰤鱼(Seriola quinqueradiata)、虹鳟(Salmo gairdneri)的胃、肠、幽门垂蛋白酶及淀粉酶[1、2]。
河蚌是怎样取食的原理
河蚌是怎样取食的原理河蚌(学名:Sinanodonta woodiana)是一种淡水贝类,它们生活在湖泊、河流和水库中,广泛分布于亚洲地区。
河蚌的取食原理涉及到它们的饮食习性、口器组织和摄取机制等方面。
河蚌是滤食性动物,其主要取食方式是通过过滤水中的悬浮性颗粒物、有机物和微生物等。
以下是河蚌取食的原理的详细描述:1.饮食习性:河蚌是无牙无舌的,它们没有明显的饮食偏好,可以摄食多种有机物和小颗粒物。
一般来说,河蚌会在水中摄食细菌、藻类、浮游生物和有机碎屑等。
2.口器组织:河蚌的口器主要由黑质和尖齿组成。
黑质是一种由蛋白质和甘露醇组成的黏液状物质,它可以起到过滤和捕捉食物颗粒的作用。
尖齿可以帮助河蚌将颗粒物从水中获取,并将其引入到河蚌的口腔中。
3.摄取机制:当河蚌张开贝壳时,水可以通过贝壳间的缝隙进入到河蚌的体内。
当河蚌闭合贝壳时,通过一种称为操作肌的肌肉的收缩,它们可以将水挤出身体,而无需张开贝壳。
通过这种方式,河蚌可以保持自身周围的水环境流动。
水的流动过程中,河蚌的黑质会发生振动,从而将水中的颗粒物聚集在一起。
一旦颗粒物被聚集在一起,河蚌的黑质会粘附在颗粒物上,并将其引入到河蚌的口腔中。
在口腔中,食物颗粒将会被处理和消化。
消化过程主要依赖于河蚌的内脏器官,包括具有消化酶(如淀粉酶和蛋白酶)的肝脏和肠道。
此外,河蚌的悬浮性饵料摄取还会受到多种环境因素的影响,例如水中颗粒物的浓度、颗粒物的粒径、水温和光照等。
研究表明,颗粒物的浓度和颗粒物的粒径对河蚌的摄食率有着重要影响。
总的来说,河蚌通过自身的饮食习性、口器组织和摄取机制,以及环境因素的影响,实现了对水中颗粒物和有机物的取食。
河蚌的取食原理对于维持水生生态系统的平衡,净化水质具有重要意义。
新安江流域安徽段蚌类初步调查
新安江流域安徽段蚌类初步调查
李伟;邱阳;张耀宇;胡长玉;杨雨玲
【期刊名称】《黄山学院学报》
【年(卷),期】2022(24)5
【摘要】为了解新安江流域安徽段蚌类种类组成及分布特征,利用徒手采集、三角拖网、抄网、蚌耙捕捞等方法,于2020年6月—2021年1月对新安江流域安徽段9个重要区段蚌类资源进行了调查。
共采集标本2118份计23种,隶属1科(蚌科)10属,中国特有种达16种,圆顶珠蚌在各站点均为优势种。
以昌溪河、扬之河区段蚌类多样性(香浓威纳、辛普森指数)和均匀度(Pielou均匀度指数)相对较高,丰乐河、练江河、渐江河区段相对较低。
调查结果表明新安江流域蚌类资源较为丰富,但各区段蚌类分布与群落结构组成具有差异性。
【总页数】5页(P28-32)
【作者】李伟;邱阳;张耀宇;胡长玉;杨雨玲
【作者单位】黄山学院新安江流域生态环境保护研究中心;黄山学院生命与环境科学学院
【正文语种】中文
【中图分类】Q958.1
【相关文献】
1.安徽省淡水蚌类初步调查
2.新安江流域安徽段践行“两山论”的模式探索
3.安徽省新安江流域主要控制断面目标生态水量分析
4.典型流域生态补偿对区域技术创
新的非线性影响——基于新安江流域安徽段面板数据的门槛效应检验5.新安江流域水西河(黄山学院段)浮游植物群落结构周年调查
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第36卷 第4期Vol 136No 14淡 水 渔 业Freshwater Fisheries2006年7月Jul 12006 收稿日期:2006-02-16资助项目:国家863计划(编号2002AA601011-02-02)“贝类控藻量效规律及其水质净化的研究”内容第一作者简介:费志良(1962- ),男,研究员,主要从事水生生态学研究。
E mail:fzl_hy@1631com 通讯作者:黄成(1962- ),男,副教授,主要从事水生生物学教学与研究。
E mail:huangcheng2008@sina 1com3种淡水蚌消化酶活力的初步研究费志良1,2,乔 慧3,郝 忱2,王 喆3,黄 成3(11南京师范大学地理科学学院,南京 210097;21江苏省淡水水产研究所,南京 21001731南京大学生命科学学院,南京 210093)摘 要:对褶纹冠蚌、背角无齿蚌、三角帆蚌的淀粉酶、蛋白酶、纤维素酶进行了测定和研究。
结果显示,3种蚌的3种消化酶的比活力大小顺序均为:褶纹冠蚌>背角无齿蚌>三角帆蚌。
3种消化酶比活力在3种蚌的胃、肠部大小顺序均为:淀粉酶>纤维素酶>蛋白酶,且胃部3种酶比活力都大于肠部。
A /P 值比较显示,背角无齿蚌适合投放到淀粉物质含量较高的藻类富集水域,褶纹冠蚌适合用来控制蛋白质含量丰富的藻类,三角帆蚌对淀粉类和蛋白类食物消化能力介于二者之间,对蓝绿藻食物源都有很好的适应性。
关键词:淡水蚌;淀粉酶;蛋白酶;纤维素酶中图分类号:S95413;Q95911406 文献标识码:A 文章编号:1000-6907-(2006)04-0003-03Pr i m ary Study on the D i gesti ve Enzy m e Acti v iti es ofThree L i m neti c M usselsFE I Zhi 2liang 1,2,Q I A O Hui 3,HAO Chen 2,WANG Zhe 3,HUANG Cheng3(11School of geographical science,N anjing N or m al U niversity,N anjing 210097;21Freshw ater F ishery Institute of J iangsu Province,N anjing 210017;31School of L ife Science,N anjing U niversity,N anjing 210093)Abstract:Activities of a mylase,p r otease and cellulase in C ristaria plicata (Leach ),A nodonta w oodiana (Heude )and Hyriopsis cum ingii (Lea )were investigated and analyzed in this paper .The comparis on of the activities of three enzy mes inthese mussels showed that the sequence was C .plicata >A.w oodiana >H .cum ingii .And the sequence of activities ofthese enzy mes in both st omach and intestines of each musselwas si m ilar,viz .a mylase >cellulase >p r otease .Mean while,all three enzy me activities in the st omach were higher than in the intestines .The rati o of amylase activity t o p r otease activi 2ty indicated that A.w oodiana was better f or water areas where algae had higher contents of starchy substances,and C .plicata was better f or contr ol of algae containing abundant p r oteins .The digestive ability of H .cum ingii in starch and p r o 2teins was bet w een the for mer t w o mussels,s o it could have good app licability t o f ood s ources of blue algae .Key words:li m netic mussele;a mylase;p r otease;cellulase 水体富营养化是当今学术界亟待解决的热点问题之一,解决富营养化问题的核心是抑制浮游植物的过量生长。
而在富营养化的水体中,贝类通过其滤食作用对浮游生物的生物量产生重要的影响。
已有一些文献证明贝类能够滤食水体中的浮游生物以及有机碎屑[1],减少水体中过量繁殖的藻类[2],降低水体的富营养化程度[3]。
作为生态修复技术的一类重要工具物种,贝类目前已受到国内外学者的注意。
本研究对褶纹冠蚌、背角无齿蚌、三角帆蚌等3种滤食性贝类的淀粉酶、蛋白酶、纤维素酶等消化酶进行了初步研究与探讨,以期将不同淡水蚌类滤食不同藻类的特点合理地加以采用,达到净化水质的目的。
1 材料和方法111 实验材料实验所用3种蚌均来自江苏省淡水水产研究所,蚌龄均在3龄,健康无病。
具体规格见表1。
表1 实验样品的个体数及体长、体重(X±SD)Tab11 Body length and body we i ght of s am ple m ussels 样品名称样本数体长(c m)体重(g)褶纹冠蚌51414±11231317±6015背角无齿蚌51218±11621210±4116三角帆蚌51019±01615813±2110112 样品的制备将实验用蚌在水族箱中饲养3d,实验前空腹48h。
实验时,将蚌所带水分尽量吸干,测定体长、体重,置于冰浴解剖盘中解剖。
参照文献[4]取出胃部与肠部,剔除多余脂肪及内容物,用滤纸吸干,称取(012±01005)g组织,加入9倍质量去离子水匀浆;匀浆液离心15m in(4000r/m in),取上清液,置于4℃冰箱中保存待用(存放时间不超过24h)。
113 酶活性测定11311 试剂制备淀粉酶和蛋白酶:试剂均见南京建成生物研究所提供的淀粉酶测试盒和蛋白酶测试盒。
纤维素酶:准确称取01625g羧甲基纤维素钠,溶于100mL醋酸钠缓冲溶液(012mol/L,pH 416)作为底物溶液。
称取2g3,5-二硝基水杨酸溶于蒸馏水中,加入2g氢氧化钠、40g酒石酸钾钠和100mL水,加热溶解后再加入苯酚014g、无水亚硫酸钠011g,待全部溶解后冷却,定容至200mL,制成3,5-二硝基水杨酸显色剂(DNS显色剂),贮于棕色瓶中,放置一周后使用,用之前过滤。
用蒸馏水溶解2710mg葡萄糖定容到25mL,浓度为1108mg/mL,制成标准葡萄糖溶液。
另外配置2mol/L的Na OH溶液若干。
11312 测定方法淀粉酶活性测定采用碘—淀粉比色法进行测定。
酶比活力单位设定:每100mL粗酶液在37℃、pH为710时与底物作用30m in,完全水解10mg淀粉的酶量为一个单位。
蛋白酶活性测定采用福林—酚试剂法测定。
酶比活力单位设定:每1g组织蛋白在37℃、pH710时每分钟分解蛋白生成1μg氨基酸为一个单位。
纤维素酶活性测定采用C MC法,具体操作步骤及计算方法参见王琳等[6]方法。
酶比活力单位设定:每1g组织在50℃、pH为710时每分钟催化纤维素水解成1μmol葡萄糖的酶量为一个单位。
酶的比活力单位定义为:活力单位/mg蛋白,以下以U/mg表示。
淀粉酶、蛋白酶活力及蛋白含量测定方法参见南京建成生物研究所提供的淀粉酶测试盒和蛋白酶测试盒使用说明。
2 结果测定结果见表2、3。
表2 3种蚌胃内消化酶比活力的测定值(X±SD)Tab12 The acti v ity of d i gesti ve enzy m e of the threem ussels i n the sto mach U/mg 样品名称淀粉酶蛋白酶纤维素酶褶纹冠蚌40617±5318a814±119a2419±418a背角无齿蚌44216±7618a312±015b1419±317b三角帆蚌12311±4214b116±014c1718±416c 注:表中不同种蚌的同种酶活上标字母完全不同者表显著差异。
表3同。
表3 3种蚌肠内消化酶比活力的测定值(X±SD)Tab13 The acti v ity of d i gesti ve enzy m e of the threem ussels i n the i n testi n e U/mg 样品名称淀粉酶蛋白酶纤维素酶褶纹冠蚌16715±1818a211±016a618±114b背角无齿蚌9311±2011b018±013c1013±212a三角帆蚌6714±1411c115±013b918±216a211 淀粉酶比活力的比较比较可知,3种蚌的淀粉酶比活力均在胃内很高,而在肠中较低,且褶纹冠蚌消化道内的总淀粉酶比活力为最高,背角无齿蚌次之,三角帆蚌最低(P<0105)。
其中,背角无齿蚌胃内淀粉酶比活力要稍高于褶纹冠蚌,差异不显著(P>0105),但二者胃内淀粉酶比活力都显著强于三角帆蚌的(P< 0105)。
肠中淀粉酶比活力的顺序为:褶纹冠蚌>背角无齿蚌>三角帆蚌(P<0105)。
212 蛋白酶比活力的比较3种蚌胃内的蛋白酶比活力顺序为:褶纹冠蚌>背角无齿蚌>三角帆蚌(P<0105),肠中则为:褶纹冠蚌>三角帆蚌>背角无齿蚌(P<0105)。