维生素+K1、酚磺乙胺与氨甲苯酸在输液中的配伍稳定性考察

维生素Ｋ１、酚磺乙胺与氨甲苯酸在输液中的配伍稳定性考察
武　超１
，程　钢２
，许杜娟
１，２
（１．安徽医科大学药学院，安徽合肥　２３００３２；
２．安徽医科大学第一附属医院药剂科，国家中医药管理局中药化学三级实验室，安徽合肥　２３００２２）
摘要：目的　研究维生素Ｋ１、酚磺乙胺、氨甲苯酸与０．９％氯化钠或５％葡萄糖注射液配伍后在避光或光照条件下的稳定性。

方法　采用高效液相色谱法测定维生素Ｋ１、酚磺乙胺、氨甲苯酸与输液配伍后避光或光照条件下１２ｈ内药物的含量，并观测配伍溶液的外观、ｐＨ值的变化。

结果　时间、光条件和输液种类均未对配伍溶液的外观性状和ｐＨ产生明显影响。

在避光条件下，配伍溶液中三种药物含量均无明显变化；而光照条件下，酚磺乙胺和氨甲苯酸含量无变化，维生素Ｋ１含量显著下降。

结论　避光条件下，维生素Ｋ１、酚磺乙胺、氨甲苯酸在１２ｈ内配伍稳定。

关键词：维生素Ｋ１；酚磺乙胺；氨甲苯酸；配伍；稳定性；高效液相色谱法ｄｏｉ：１０．３９６９／ｊ．ｉｓｓｎ．１００９－６４６９．２０１４．１２．００７
ＣｏｍｐａｔｉｂｌｅｓｔａｂｉｌｉｔｙｏｆｖｉｔａｍｉｎＫ１，
ｅｔａｍｓｙｌａｔｅａｎｄａｍｉｎｏｍｅｔｈｙｌｂｅｎｚｏｉｃａｃｉｄｉｎｉｎｆｕｓｓｉｏｎｓｏｌｕｔｉｏｎｓ
ＷＵＣｈａｏ１
，ＣＨＥＮＧＧａｎｇ２
，ＸＵＤｕ－ｊｕａｎ
１，２
（１．ＳｃｈｏｏｌｏｆＰｈａｒｍａｃｙ，ＡｎｈｕｉＭｅｄｉｃａｌＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｈｅｆｅｉ　２３００３２，Ｃｈｉｎａ；
２．ＤｅｐａｒｔｍｅｎｔｏｆＰｈａｒｍａｃｙ，Ｔｈｉｒｄ－ＧｒａｄｅＰｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌＣｈｅｍｉｓｔｒｙＬａｂｏｒａｔｏｒｙｏｆＳｔａｔｅＡｄｍｉｎｉｓｔｒａｔｉｏｎｏｆ
ＴｒａｄｉｔｉｏｎａｌＣｈｉｎｅｓｅＭｅｄｉｃｉｎｅ，ＴｈｅＦｉｒｓｔＡｆｆｉｌｉａｔｅｄＨｏｓｐｉｔａｌｏｆＡｎｈｕｉＭｅｄｉｃａｌＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｈｅｆｅｉ　２３００２２，Ｃｈｉｎａ）
Ａｂｓｔｒａｃｔ：Ｏｂｊｅｃｔｉｖｅ　Ｔｏｅｘｐｌｏｒｅｃｏｍｐａｔｉｂｌｅａｎｄｌｉｇｈｔｓｔａｂｉｌｉｔｙｏｆｈｅｍｏｓｔａｔｉｃｓｉｎ０．９％ｓｏｄｉｕｍｃｈｌｏｒｉｄｅｉｎｆｕｓｉｏｎａｎｄ５％ｇｌｕｃｏｓｅｉｎｆｕ－ｓｉｏｎ，ｗｈｉｃｈｃｏｎｔａｉｎｅｄｖｉｔａｍｉｎＫ１，ｅｔｈａｍｓｙｌａｔｅａｎｄａｍｉｎｏｍｅｔｈｙｌｂｅｎｚｏｉｃａｃｉｄ．Ｍｅｔｈｏｄｓ　ＡｎＨＰＬＣｍｅｔｈｏｄｗａｓａｐｐｌｉｅｄｔｏｍｅａｓｕｒｅｃｏｎ－
ｃｅｎｔｒａｔｉｏｎｏｆｖｉｔａｍｉｎＫ１，ｅｔａｍｓｙｌａｔｅａｎｄａｍｉｎｏｍｅｔｈｙｌｂｅｎｚｏｉｃａｃｉｄｉｎｔｗｅｌｖｅｈｏｕｒｓ．ＴｈｅｃｈａｎｇｅｏｆｔｈｅａｐｐｅａｒａｎｃｅａｎｄｐＨｉｎｃｏｍｐａｔｉｂｌｅｓｏｌｕｔｉｏｎｓｗａｓｏｂｓｅｒｖｅｄ．Ｒｅｓｕｌｔｓ　ＴｈｅａｐｐｅａｒａｎｃｅａｎｄｐＨｏｆｔｈｅｃｏｍｐａｔｉｂｌｅｓｏｌｕｔｉｏｎｓｓｈｏｗｅｄｎｏｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｃｈａｎｇｅｕｎｄｅｒｔｈｅｄｉｆｆｅｒｅｎｔｃｏｎｄｉｔｉｏｎｓｏｆｔｉｍｅ，ｌｉｇｈｔａｎｄｉｎｆｕｓｉｏｎ．Ｕｎｄｅｒｔｈｅｄａｒｋｃｏｎｄｉｔｉｏｎ，ｔｈｅａｐｐｅａｒａｎｃｅａｎｄｃｏｎｔｅｎｔｓｏｆｔｈｅｔｈｒｅｅｄｒｕｇｓｉｎｔｈｅｓｏｌｕｔｉｏｎｈａｄｎｏ
ｏｂｖｉｏｕｓｃｈａｎｇｅ．Ｕｎｄｅｒｔｈｅｃｏｎｄｉｔｉｏｎｏｆｌｉｇｈｔｉｎｇ，ｔｈｅｃｏｎｔｅｎｔｓｏｆｅｔａｍｓｙｌａｔｅａｎｄａｍｉｎｏｍｅｔｈｙｌｂｅｎｚｏｉｃａｃｉｄｄｉｄｎｏｔｃｈａｎｇｅ，ｂｕｔｔｈｅｃｏｎｔｅｎｔｓｏｆｖｉｔａｍｉｎＫ１ｆｅｌｌ．Ｃｏｎｃｌｕｓｉｏｎｓ　Ｕｎｄｅｒｔｈｅｄａｒｋｃｏｎｄｉｔｉｏｎ，ｔｈｅｔｈｒｅｅｋｉｎｄｓｏｆｈｅｍｏｓｔａｔｉｃｓａｒｅｓｔａｂｌｅｉｎｔｗｅｌｖｅｈｏｕｒｓ．
Ｋｅｙｗｏｒｄｓ：ｖｉｔａｍｉｎＫ１；ｅｔａｍｓｙｌａｔｅ；ａｍｉｎｏｍｅｔｈｙｌｂｅｎｚｏｉｃａｃｉｄ；ｃｏｍｐａｔｉｂｌｅ；ｓｔａｂｉｌｉｔｙ；ＨＰＬＣ作者简介：武　超，男，硕士研究生
通信作者：许杜娟，女，主任药师，硕士生导师，研究方向：肿瘤药理
学和临床药学，Ｅ－ｍａｉｌ：ｘｕｄｕｊｕａｎ６３６５＠ｙａｈｏｏ．ｃｏｍ．ｃｎ
维生素Ｋ１、酚磺乙胺、氨甲苯酸作为临床常用
配伍止血药，因其价格低廉、不良反应少而被广泛应用。

有报道称维生素Ｋ１注射液辅料中的吐温８０与酚磺乙胺发生化学反应［１］
，而存在配伍禁忌。

我
们对本院维生素Ｋ１配伍使用情况进行调查时，发
现维生素Ｋ１、酚磺乙胺
［２］
和氨甲苯酸配伍使用普
遍，但未见对三种药物配伍后各自含量测定的相关研究，因此对其配伍稳定性的探讨十分必要。

本文模拟临床给药设计三种药物配伍，通过高效液相色谱法
［３－６］
测定不同时间段光照或避光条件下三种药
物各自的含量，探究三种药物配伍后的稳定性。

１　仪器与试药
１．１　仪器　Ａｇｉｌｅｎｇｔ１２００高效液相色谱仪（美国Ａｇｉｌｅｎｇｔ公司）；ｐＨＳ－３Ｃ型酸度计（上海雷磁仪器厂）；电子天平（ＦＡ２００４，上海精科天平）。

１．２　试药　维生素Ｋ１对照品（中国药品生物制品检定所，纯度９９．６％，批号：１００１５６－２０１２０５）；氨甲苯酸对照品（中国药品生物制品检定所，纯度９９．８％，批号：１００９２１－２００７０１）；酚磺乙胺对照品（中国药品生物制品检定所，纯度９９．５％，批号：１００１３４－２０１１０３）；维生素Ｋ１注射液（上海现代哈森药业有限公司，批号：１２０６２７７１，规格：１ｍＬ：１０ｍｇ）；氨甲苯酸注射液（上海信谊金朱药业有限公司，批号：１３０２０２，规格：１０ｍＬ：１００ｍｇ）；酚磺乙胺注射液（上海第一生化药业有限公司，批号：１２０８５９，规格：２ｍＬ：０．５ｇ）；０．９％氯化钠注射液（上
海大冢制药有限公司，批号３Ｆ８５Ｆ３，规格：２５０ｍＬ：２．２５ｇ）；５％葡萄糖注射液（上海大冢制药有限公司，批号３Ｅ９５Ｆ３，规格：２５０ｍＬ：１２．５ｇ）；注射用水（湖南科伦制药有限公司；批号Ｋ１３０５０５２Ｄ，规格：５００ｍｌ）。

无水乙醇、甲醇均为色谱纯。

实验用水均为注射用水。

２　方法与结果２．１　色谱条件与方法适用性评价２．１．１　色谱条件　维生素Ｋ１含量测定
［７］
：采用
ＡｇｉｌｅｎｔＴｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓＥｃｌｉｐｓｅＸＤＢ－Ｃ１８（４．６ｍｍ×２５０
ｍｍ，５μｍ），以无水乙醇－水（９０∶１０）为流动相，流速
１．０ｍＬ·ｍｉｎ－１
；检测波长２５４ｎｍ；进样量：２０μＬ。

酚磺乙胺、氨甲苯酸含量测定采用Ｄｉａｍｏｎｓｉｌ５μＣ１８柱（４．６ｍｍ×２５０ｍｍ，５μｍ），以０．０５ｍｏｌ·Ｌ－１
的磷酸二氢钾溶液－甲醇（９６∶４）为流动相，流速
为１．０ｍＬ·ｍｉｎ－１
，检测波长为２２７ｎｍ，进样量：２０
μＬ。

２．１．２　方法适用性评价　按照“２．２配制方法”配制溶液，以“２．１色谱条件”进样，得色谱图
１。

Ａ
Ｂ
Ｃ
Ｄ
Ｅ
Ｆ
图１　ＨＰＬＣ色谱图
注：Ａ．０．９％氯化钠溶液；Ｂ．５％葡萄糖溶液；Ｃ．氨甲苯酸与酚磺乙胺混合对照品５％葡萄糖溶液（酚磺乙胺色谱条件）；Ｄ．维生素Ｋ１对照品０．９％氯化钠溶液（维生素Ｋ１色谱条件）Ｅ．三种样品混合溶于０．９％氯化钠溶液（酚磺乙胺色谱条件，光照）Ｆ．三种样品混合溶于０．９％氯化钠溶液（维生素Ｋ１色谱条件，光照）。

对比三种药物的高效液相色谱，维生素Ｋ１、酚
磺乙胺、氨甲苯酸在各自色谱条件下有明显色谱吸收峰，可以使用该色谱条件进行相关分析研究。

２．２　溶液的制备２．２．１　对照品贮备液制备　维生素Ｋ１对照品贮备液：精密称取维生素Ｋ１对照品４７．５ｍｇ，置１００ｍＬ量瓶中，加无水乙醇稀释至刻度，摇匀，即得。

酚磺乙胺与氨甲苯酸混合对照品贮备液：精密称取酚磺乙胺对照品４０ｍｇ与氨甲苯酸对照品４．０５ｍｇ，置１００ｍＬ量瓶中，加水稀释至刻度，摇匀，即得。

２．２．２　供试品溶液制备　模拟临床样品溶液：模拟临床常用给药方案分别取维生素Ｋ１３ｍＬ，酚磺乙胺１２ｍＬ，氨甲苯酸３０ｍＬ置于２５０ｍＬ０．９％氯化钠注射液或５％葡萄糖注射液中，混匀，即得。

维生素Ｋ１供试品溶液：取模拟临床样品溶液２ｍＬ用维生素Ｋ１流动相稀释至１０ｍＬ，摇匀，即得。

酚磺乙胺与氨甲苯酸混合供试品溶液：取模拟临床样品溶液３０μＬ用酚磺乙胺流动相稀释至１０ｍＬ，摇匀，即得。

２．３　线性关系考察２．３．１　维生素Ｋ１线性关系　分别精密吸取维生素Ｋ１对照品贮备液１２５、２５０、５００、７５０μＬ、１ｍＬ，置于１０ｍＬ量瓶中，加水稀释至刻度，摇匀，分别取２０μＬ注入液相色谱仪，于２５４ｎｍ波长处测定峰面积。

以峰面积（Ｙ）为纵坐标、浓度（Ｘ）为横坐标绘制标准曲线，得回归方程Ｙ＝４６．１３３Ｘ－４５．６９１，ｒ＝
０．９９９６。

结果表明：维生素Ｋ１在５．９１～４７．３１ｍｇ·Ｌ－１浓度范围内呈良好的线性关系。

２．３．２　酚磺乙胺、氨甲苯酸混合对照品溶液线性关系　分别精密吸取酚磺乙胺与氨甲苯酸混合对照品贮备液２５０、５００、７５０μＬ、１、１．２５ｍＬ，置于１０ｍＬ量瓶中，加水稀释至刻度，摇匀，取２０μＬ注入液相色谱仪，在２２７ｎｍ波长处测定峰面积。

以峰面积（Ｙ）为纵坐标、浓度（Ｘ）为横坐标绘制标准曲线，得酚磺乙胺回归方程Ｙ＝２０．３４５Ｘ－３．５７，ｒ＝０．９９９８；得氨甲苯酸回归方程Ｙ＝７９．１５Ｘ－３．０５，ｒ＝０．９９９４。

结果表明：酚磺乙胺在９．９５～４９．７５ｍｇ·Ｌ－１浓度范围内呈良好的线性关系；氨甲苯酸在１．０１～５．０５ｍｇ·Ｌ－１浓度范围内呈良好的线性关系。

２．４　精密度实验　精密吸取维生素Ｋ１对照品贮备液５００μＬ，置于１０ｍＬ量瓶中，加维生素Ｋ１流动相稀释至刻度，摇匀，取２０μＬ注入液相色谱仪，连续进样６次，记录色谱图及峰面积，峰面积的ＲＳＤ为１．３０％。

精密吸取酚磺乙胺与氨甲苯酸混合对照品贮备液７５０μＬ，置于１０ｍＬ量瓶中，加酚磺乙胺流动相稀释至刻度，摇匀，取２０μＬ注入液相色谱仪，连续进样６次，记录色谱图及峰面积，酚磺乙胺和氨甲苯酸峰面积的ＲＳＤ分别为２．１７％、３．５１％。

２．５　重复性实验　精密量取维生素Ｋ１供试品溶液，酚磺乙胺与氨甲苯酸混合供试品溶液各６份，按“２．１．１色谱条件”分别测定其含量，记录色谱图及峰面积，维生素Ｋ１、酚磺乙胺和氨甲苯酸峰面积的ＲＳＤ分别为０．２２％、０．１５％、０．１２％，结果证明本方法重复性好。

２．６　回收率实验　分别取维生素Ｋ１对照品、酚磺乙胺对照品、氨甲苯酸对照品与空白辅料，按照处方工艺，制成相当于主药浓度的８０％、１００％、１２０％分别置于１００ｍＬ量瓶中，摇匀，取２０μＬ注入液相色谱仪，计算回收率。

结果为维生素Ｋ１、酚磺乙胺、氨甲苯酸的平均回收率分别为１００．３１％、１０１．１９％、９９．０５％，ＲＳＤ分别为１．０９％、２．０３％、３．４２％（ｎ＝９）。

２．７　配伍稳定性考察　取模拟临床样品溶液分别置于暗室或光照条件下，于０，１，２，３，４，５，６，８，１０，１２ｈ按２．２．２配制方法分别配制供试品溶液，取２０μＬ注入液相色谱仪。

按上述色谱条件测定混合溶液中三种药物各自的含量以及混合溶液的ｐＨ值并观察外观性状。

配制过程均在暗室环境中进行。

结果表明避光条件和光照条件下混合溶液的外观在０～１２ｈ内均为浅黄色。

记录各时间点峰面积，将峰面积代入回归曲线计算各时间点配伍液中药物的含量。

以配伍即刻时间（０ｈ）的含量为１００％，计算各时间点药物的相对百分含量，结果见表１，２。

表１，２显示三种止血药物配伍后避光条件下含量稳定；而光照条件下维生素Ｋ１降解较快，０．９％氯化钠注射液和５％葡萄糖注射液中１２ｈ后分别为５８．０％和６２．３％；酚磺乙胺、氨甲苯酸含量在光照条件下１２ｈ内含量稳定。

表１　维生素Ｋ１＋酚磺乙胺＋氨甲苯酸＋０．９％ＮＳ
时间／ｈｐＨ
避光（相对百分含量％）
维生素Ｋ１酚磺乙胺氨甲苯酸
ｐＨ光照（相对百分含量％）
维生素Ｋ１酚磺乙胺氨甲苯酸
０４．２２１００．０１００．０１００．０４．２０１００．０１００．０１００．０１４．２２９９．７９８．５９９．５４．１８９３．７９８．０９９．３２４．２１９９．１９８．３９９．４４．１８９３．２９７．８９９．１３４．２１１００．５９８．２９９．４４．１６９１．９９７．６９９．３４４．１６１００．４９８．３９９．２４．１１８７．３９７．６９９．０５４．１５１００．０９７．９９９．３４．０７８６．９９７．６９９．５６４．１４１００．３９８．１９９．３４．０５７８．３９７．４９９．０８４．１７９９．０９７．３９９．１４．１１７２．６９８．０９９．４１０４．１９９９．３９８．９９８．８４．０６６７．５９８．１９８．１１２４．１７９９．８９８．１９９．１４．０９５８．０９７．５９９．５
表２　维生素Ｋ１＋酚磺乙胺＋氨甲苯酸＋５％ＧＳ
时间／ｈｐＨ
避光（相对百分含量％）
维生素Ｋ１酚磺乙胺氨甲苯酸
ｐＨ光照（相对百分含量％）
维生素Ｋ１酚磺乙胺氨甲苯酸
０４．３１１００．０１００．０１００．０４．２１１００．０１００．０１００．０１４．３１９９．８９９．９９９．７４．２０９４．４９９．９９９．８２４．３０９９．４９９．８９９．９４．１９９３．２１００．０１００．０３４．２７９９．６９９．８９９．８４．１８９１．９９９．６９９．６４４．２５１００．３９８．１９８．０４．１６８８．２９７．７９８．３５４．２４９９．９９９．６９９．７４．１５８７．５１００．２１００．４６４．２３１００．５９７．５９７．５４．１４７８．６１００．１１００．０８４．２１９８．０９９．０９９．７４．１７７６．０９８．０９９．２１０４．１９９９．２９８．３９８．５４．２０６８．６９９．６９９．５１２４．２５９８．７９７．３９９．２４．１５６２．３９８．８９８．４
３　讨论
３．１　实验配伍方案的选择　维生素Ｋ１，酚磺乙胺和氨甲苯酸常联合用于止血，但其配伍稳定性如何尚有争论［１，８－９］。

我们统计了本院２０１３年１月１日至２０１３年１２月３１日有关维生素Ｋ１配伍使用情况，统计结果表明２０１３年度本院配伍使用维生素Ｋ１处方共１６２０８张，其中维生素Ｋ１、酚磺乙胺、氨甲苯酸配伍处方为７２２９张，占维生素Ｋ１配伍总量的４４．６％，最常用配伍方案为维生素Ｋ１３ｍＬ、酚磺乙胺１２ｍＬ、氨甲苯酸３０ｍＬ溶于２５０ｍＬ０．９％氯化钠注射液或５％葡萄糖注射液中，本实验采用上述配伍方案进行配伍稳定性考察。

３．２　流动相的确立　据报道，酚磺乙胺和氨甲苯酸的实验流动相选择有甲醇∶磷酸二氢钾（４∶９６，ｐＨ为３．５８）流速为０．７ｍＬ·ｍｉｎ－１；甲醇∶磷酸二氢钾（１０∶９０）。

预实验中我们采用上述两种流动相并在流速０．７ｍＬ·ｍｉｎ－１和１．０ｍＬ·ｍｉｎ－１下实验，结果发现在流动相为甲醇∶磷酸二氢钾（４∶９６），１．０ｍＬ·ｍｉｎ－１时酚磺乙胺和氨甲苯酸峰形对称性好，分离度高，适合高效液相色谱测定。

３．３　模拟临床实验结果比较　在静脉配制中心制度实行的大背景下，从配制药物到临床使用之间存在一定的时间差，配伍条件下药物稳定性的研究十分必要。

比较本实验表１和表２实验数据，得出维生素Ｋ１、酚磺乙胺、氨甲苯酸配伍后，１２ｈ内在避光条件下稳定；光照１ｈ后，维生素Ｋ１在０．９％氯化钠或５％葡萄糖注射剂中含量下降均超过５％。

维生素Ｋ１为２－甲基－３－（３，７，１１，１５－四甲基－２－十六碳烯基）－１，４－萘二酮的反式和顺式异构体混合物，光照条件下易降解［７］，本实验结果与相关报道结果一致［８］。

本实验证明出维生素Ｋ１注射液辅料中的吐温８０在实验设计配伍方案下，不会对酚磺乙胺含量造成显著改变。

此外，氨甲苯酸配伍后的含量保持稳定。

综上所述，避光条件下，维生素Ｋ１、酚磺乙胺、氨甲苯酸在１２ｈ内配伍稳定。

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（收稿日期：２０１４－０３－２５，修回日期：２０１４－０６－１８）。