高矿化度条件下石油烃降解菌种的筛选与评价

０ ０
０
０ ０
０
酵母 膏／ ｇ
０
０ ０
０
Ｏ １ ．０ ０ ５ ０ ．０ ０
０５ ０ ．０
０ ０
０５ ０ ．０
绵羊 红细 胞／ ０ ｇ
Ｎａ ／ｇ ＣＩ ０２ ０ ．０
Ｃ Ｓ Ｊｇ ｕＯ
Ｏ０ １ ． ０
Ｏ０ １ ． ０
培养 基 培养 基 培 养基 培养基
Ｏ２０ ． ０ ２００ ． ０ ０ ０ ． ０ ２ ５００ ．０ ０ ０ ０ ０
Ｎ ，Ｏ Ｈ， Ｊｇ Ｎ
１ ０ ．０ ０
０１０ ． ０
０１０ ． ０
０
０
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０
牛 肉膏／ ｇ
蛋 白胨／ ｇ
Ｏ３０ ． ０
齐 齐 哈 尔 大 学 学 报
取１ Ｌ 含油污水水样 ，接人２０ Ｌ ｍ ５ 富集培养基 ，３ ｃ摇床振荡培养４ 。取０ Ｌ富集液涂布到筛选 ｍ ０Ｉ Ｃ ８ ｈ ．ｍ ２ 培养基平板 ，３ ℃恒温培养４ 。挑取生长较好 、菌落较大的菌株分别在细菌 、真菌和放线菌分离培养基 ７ ８ ｈ 平板上分离 、 纯化 ，纯化后的菌种在原油培养基平板上驯化３ ４次 ， ～ 获得石油降解菌种。观察菌株的生长 情况 、菌落特征和菌体形进行初次筛选。
达 ２． ８ ％、５ ． ５ １ ％。偏酸或偏碱环境 均不利于菌体生长 ，培养温度对 ２株菌体生 长和石油 降解 率影 响较大 ，晟佳 温 ５ 度是 ３ ℃。在 高矿化度条件下 ，菌株对原汕仍有降解作用 ，降黏率为 ４ ％以上 。原油组分分析结果表 明，菌种在 ５ ０ 以原油为碳源培养后 ，使原 油组 分中沥青质 、非烃及芳烃类含量均发生变化 。 关键词 ：石油降解 ；菌种筛选 ；矿化度 ；降黏率
液 在６０ｎ 处 的光 密度 值 Ｏ ０ ｍ Ｄ，测 定其 生长 曲线 。 （ ２）降黏率 的测 定
表 ２ 石油 烃降 解菌性 能 测定结 果
将筛选 出的菌种在３ ℃、１０ ／ ｉ ５ ２ ｍ ｎ ｒ 摇床培养 ，观测 发酵液ｐ 值 、 Ｈ 原油黏度 、凝点 的变化 ，结果见表２ 。 从表 ２ 可看出， ４ Ｊ 降黏率 ２ ． Ｊ 降黏率 ５ ． Ｊ ８ ％， ８ ５ Ｊ １ ％。 ５ 所以 Ｊ 、 Ｊ 可作为石油烃降解菌 ，接种至斜面保存 。 Ｊ Ｊ８ ４
将得到 的菌株 分 别接人 发 酵培 养基 ，０（、５ ｒｉ ３ ｏ １０ｒ ｎ ＝ ／ ａ
摇床上培养３ ， 观察石油降解情况。 ｄ 每个筛选摇瓶中加 １ Ｌ ０ 石油醚萃取 ，取上清液 ，用石油稀释５倍 ，测定 ｍ Ｏ 各菌种石油降解率 ，再进行二次筛选。 （） １ 菌体生长量 的测定 菌液按２ Ｌ Ｌ接种到液体油培养基中，摇床振荡 ／ ｍ 培养 ，以液体油培养基为对照 ， 间隔２ ４ ｈ取样测定培养
１０ ．０ ０
０
０
Ｏ３０ ． ０
１０ ．０ ０
０３０ ．０
１０ ．０ ０
Ｍｇ０ ‘ Ｈ２／ ０２０ Ｓ ４ ７ ０ｇ ．０
ＦＳ Ｊｇ ｅＯ Ｃ Ｃｄｇ ａｌ
ＺＳ ｎ Ｏｄｇ
０００ ． ０ ０１０ ．０
００ ０ ．２
０００ ．１ Ｏ００ ．１
００ ０ ．２
１ 石油烃 降解菌种 的采 集和培养
筛选菌种所用样品来 自 低渗透油 田油井产 出水 ， 该产出水具有矿化度高的特点。 实验采用 ４ 种培养基 ：富集培养基 、油平板培养基 、血平板培养基 、斜面培养基 ，见表 １ 。灭菌采用
湿 式灭 菌法 ，１１Ｃ，灭菌 ２ ａｎ ２ ｏ ０ｒ 。 ｉ
表 １ 培养 基配 方 富集 油 平板 血 平板 斜 面 富集 油平板 血 平板 斜 面 培养 基 培 养基 培养 基 培 养基
ＫＨＰ Ｊｇ ， ． Ｏ Ｋ Ｐ Ｊｇ Ｈ２Ｏ ０５０ ．０ Ｏ５０ ．０ Ｏ２０ ． ０ ０２０ ． ０ ０ ０ ０ ０ 酵母 浸粉 ／ ｇ 原油／ ｇ
赵 天逸 ，吴景春 ，郜 志伟
（ 东北石汕大 学 提高采 收率教育部重 点实验室 ， 龙江 大庆 １３１ ） 黑 ６３８
摘要 ：为 了获得高效石油降解菌 种 ，以原油为唯一碳源 ，从油水混合物 中分离 筛选 出菌株。研究不同的温度 、转
速等对菌体生长情况和石油 降解 率的影响 。在实验条件下 ， ２株优势菌在适宜 的条件下 对石油的降黏率可分别高
第 ２ 卷第 ４ ７ 期 ２ １ 年 ７月 ０１
齐 齐 哈 尔 大 学 学 报
Ｊ ｒａｌ ｆ ｑｈ ｒＵｎｖ ｒ ｉ ｏｕ ｎ ｉａ ｉｅ ｓｔ ｏ Ｑｉ ｙ
Ｖ １ ７Ｎｏ４ ｏ 度条件 下石油烃 降解 菌种 的筛选与评价
用高。污水中含有的原油等 ，由于不能被完全降解而在环境 中造成累积效应 ，污染环境。这类污水的处理 己经成了一个亟待解决 的问题 。目前 ，应用微生物技术处理油田污水 ，已经开展了相关研究 ，并取得了一 些进展 ，分离筛选 出了能够降解原油的菌种。 本研究以油井产出的污水为菌源 ，以石油为唯一碳源 ，进行分 离、筛选 ，得到降解石油优势菌株 ，对 其进行培养条件优化 ，评价其降解原油性能。
０
０
水／ ｍＬ
１０ ０
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１０ ０
尿 素／ ｇ
Ｏ１０ ．０
Ｏ１０ ． ０
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ｐ Ｈ值
７４ －
７４ ．
７ ． ４
７４ ．
２ 石油烃降解菌性能测定
收 稿 日期 ：２ １－２ ２ ０ １０ — ８
作者简介：赵天逸（９０ ，女，黑龙江大庆人 ，主要从事提高采收率技术方面的研究 ，ｗ ５９ ６ ． ｍ １９ 一） ６２ ＠１３ｔ 。 ｏ
中图分类号 ：Ｘ ４ ７１ 文献标识码 ：Ａ 文章编号 ：１０ — ８Ｘ（ １）４ ０ ５ — ３ ０ ７ ９ ４ ２ １ — ０ ７ ０ ０ ０
微生物处理技术以其生产费用低 、不产生二次污染 、可在原位进行修复等特点而被视为一项具有广阔
前景的高新技术。微生物驱油 、解堵等技术已经在油田进行 了大量的现场试验 ，取得 了良好效果。油 田普 遍采用注水开采方式 ，导致油井产出液含水量增加 ，常用的污水处理系统对污水 中原油的去除效果差 ，费