光谱法研究地塞米松与牛血清白蛋白的相互作用
荧光光谱法研究塞曲司特与牛血清白蛋白的相互作用
［ ］ Ｍｉ ｒ Ｒ，Ｊｉ Ｎ ．Ｓ ｒ ｃ ｄｆ ｄｍｅ ｏ ｅａ ｏｄｄ ｅ ６ ｓ ａＰ ｈ ａ Ｋ ｕｆ ｅｍｏｉｅ ｔ ｔ ｘｔ ｌａｅ — ｎ ａ ｉ ｈｒ ｅ ｒｔｒｅｔｓｆ ｎ ａｃｄｍａｒｐ ａｅｕ ｔ ｅ［ ］ ｕ ａ－ ｙｈｏｙ ｒｅｈ ｅ ｃｏｈ ｇ ｐａ Ｊ ．ＪＤｒｇ Ｔ ｒ ｅｏ ｎ ｋ
高三尖 杉酯 碱包 封 实验 初步 报 告 ［ ］ Ｊ ，中华血 液 学杂 志 ，
１９ ，９ ５ ：６ ２ ４ ９ ８ １ （ ） ２３— ６ ．
［ ］ 葛卫红 ， ４ 连燕舒 ， 汪小海 ， ，高渗法制备过程 中红细胞 及其 等
吗啡载体的形态学［ ］ Ｊ．中国药学杂志 ，０４３ （ ）２０２２ ２０ ，９ ４ ：７ － ． ７ ［ Ｋ ｓ Ａ，Ｆｅｈｕ Ｌ，ＰｔｌＫ ５］ ｒ ｅ Ｃ ｕ ｒｅａｆＣ ａｅ Ｒ，ｅ ａ．Ｍ ｕｅｅ ｔｒｅｔ ｔ １ ｏ ｓ ｒ ｈｏｙｅ ｙ ｃｒｅｓｏｍｏｃｌ ｄｄｗｔ ｅｈｔ ｘｔ Ｊ ．Ｂｏ ｃｎｌ ｐ ａ ｉｒ ｓ ｔ ａｙｂａｅ ｉ ｍ ｔｏ ｅａｅ［ ］ ｉｅｈｏ － ｒ ｉ ｌ ｈ ｒ ｔ Ａ
Ｂｏ ｃｎｌ ｐ ｌ ｉ ｈｍ，９ ８ １ （ ） １４—１０ ｉｅｈｏ Ａｐ ｏ ｅ １８ ，０ ２ ：５ ｔ Ｂ ｃ ６，
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参 考 文 献
光谱法研究金霉素和土霉素与牛血清白蛋白的相互作用
图 1 金霉素和土霉素的结构式
本实验用荧光光谱和紫外 - 可见吸收光谱法研 究在模拟人体生理条件下 , 金霉素和土霉素与牛血
收稿日期 : 2008- 09- 20 基金项目 : 国家自然科学基金资助项目 ( 20562009); 江西省自然科学基金资助项 目 ( 0620041) ; 中科 院长春应化 所电分析 化学重点实验室项目 ( SKLEAC2004- 3); 长江学者及创新团队项目 ( IRT0540) 作者简介 : 倪永年 ( 1946- ), 男 , 教授 , 博士生导师 E- ma i:l ynn@ i ncu. edu. cn
[ 2- 3]
N aC l的溶液中 , 配制成 3 . 0
m o l L 的储备液。将其溶液保存于 4 ! 以
-1
下 , 使用时 根据所 需进行 稀释。 缓冲溶 液为 0 . 05 m o l/L T ris- H C l ( pH = 7 . 4), 先配制 0 . 2 mo l L 的 T ris溶液 , 准确称取 2 . 422 3 g 三羟基甲氧基氨基 甲烷 ( T ris , 上海蓝季科技发展有限公司 ), 溶于二次 水再转入 100 mL 的容量瓶中, 取出其中 25 mL 后再 加入 45 m L 0 . 1m ol /L 盐酸溶液于 100 mL 的容量瓶 中加二次水进行定容。实验所用的 试剂均为分析 纯 , 实验用水为二次水。 1 2 实验方法 在比色皿中加 3 mL T ris- H C l缓冲溶液 ( p H= 7 . 4) , 加入 8 L BSA ( BSA - 金属离子 ) 溶液 , 采用 标准加入法分别加入金霉素和土霉素溶液 , 选择激 发和发射的狭缝宽度都为 15 nm, 激发波长 280 nm, 在 300~ 500 nm 范 围 内扫 描 BSA 的 荧光 光 谱及 BSA 在金霉素和土霉素作用下的荧光光谱 , 测其相 对荧光强度。在紫外 - 可见分光光度计上测金霉素 和土霉素的吸收光谱。
光谱法研究山柰酚与牛血清白蛋白的相互作用
光谱法研究山柰酚与牛血清白蛋白的相互作用裘兰兰;李悦;林锐;何华;朱鸣阳【摘要】目的利用荧光光谱研究了山柰酚与BSA之间的相互作用.方法利用Stern-Volmer方程,计算山柰酚分子与牛血清白蛋白的出双分子碰撞猝灭常数Kq 和静态猝灭结合常数Ka.结果双分子碰撞猝灭常数Kq分别为15.20×1012L/(mol·s)(298K),13.41×1012L/(mol·s)(310K),10.70×1012L/(mol·s)(318 K),静态猝灭结合常数Ka分别为3.491×105L/mol(298 K),8.183×105 L/mol(310 K),11.35×105 L/mol(318 K),并能形成一个结合位点.结论中药小分子山柰酚分子确实与牛血清白蛋白结合,且通过静态猝灭的方式对BSA的内源荧光进行猝灭.【期刊名称】《中国生化药物杂志》【年(卷),期】2014(000)006【总页数】3页(P175-177)【关键词】光谱法;山柰酚;牛血清白蛋白;相互作用【作者】裘兰兰;李悦;林锐;何华;朱鸣阳【作者单位】盐城卫生职业技术学院盐城,224005;中国药科大学分析化学教研室,南京210009;盐城卫生职业技术学院盐城,224005;中国药科大学分析化学教研室,南京210009;中国药科大学天然药物国家重点实验室,南京210009;中国药科大学分析化学教研室,南京210009【正文语种】中文【中图分类】R631山柰酚(kaempferol),化学名为3,4',5,7-四羟基黄酮,来源于姜科植物山柰、小檗科植物窝儿七等多种植物的根茎、全草及干燥成熟果实中(见图1)［1-2］。
近年来,山柰酚因其显著的药理作用及良好的生物利用度了广大医药工作者的关注,在临床上表现为具有抗菌、止咳、支气管炎、糖尿病、白内障、抗癌、抗癫痫、抗氧化剂、解痉、抗溃疡、利胆利尿等［3-5］。
光谱法研究几种中药小分子与牛血清蛋白相互作用的开题报告
光谱法研究几种中药小分子与牛血清蛋白相互作用的开题报告一、研究背景随着中药学的发展，越来越多的中药被用于治疗不同种类的疾病。
中草药中的小分子化合物是其起作用的重要成分，这些化合物能够与蛋白质相互作用，从而影响生物体内相关的生物过程。
因此，研究小分子与蛋白质之间的相互作用对于深入了解中草药的作用机理具有重要意义。
牛血清蛋白是一种具有免疫调节和免疫调控功能的重要蛋白质，其在免疫学、药学等领域得到广泛应用。
研究小分子与牛血清蛋白的相互作用可以为新药物的研发提供有价值的信息。
光谱法是一种常用的研究小分子与蛋白质相互作用的方法。
光谱法既包括吸收光谱、荧光光谱，还包括紫外光谱、红外光谱等。
因此，通过光谱法研究几种中药小分子与牛血清蛋白相互作用，可以为深入研究中草药的作用机理和新药物的研发提供有价值的信息。
二、研究目的本研究旨在通过光谱法研究几种中药小分子与牛血清蛋白相互作用，探究其相互作用机理。
三、研究内容及方法1. 研究内容本研究将选择几种中药中的小分子化合物，通过光谱法研究其与牛血清蛋白的相互作用，包括吸收光谱、荧光光谱、紫外光谱、红外光谱等。
2. 研究方法（1）实验药物的制备和检测：选择几种中药中的小分子化合物作为实验药物，制备不同浓度的药物溶液，并经过不同的检测方法鉴定纯度。
（2）蛋白质的制备和检测：采用牛血清蛋白作为研究对象，制备不同浓度的蛋白质溶液，并经过不同的检测方法鉴定纯度。
（3）光谱法研究：将实验药物和蛋白质混合后进行光谱法研究，包括吸收光谱、荧光光谱、紫外光谱、红外光谱等。
通过比较药物与蛋白质混合后的光谱和单独的药物和蛋白质的光谱，探究其相互作用机理。
四、研究意义本研究可以从光谱学的角度，对几种中草药中的小分子化合物与牛血清蛋白的相互作用进行研究，为深入了解中草药作用机理及新药物的研发提供有益的参考。
此外，本研究的结果也有助于推动中草药的现代化、产业化及国际化发展。
光谱法研究8Q5SAC与牛血清白蛋白相互作用的开题报告
光谱法研究8Q5SAC与牛血清白蛋白相互作用的开题报告一、研究背景及意义目前，蛋白质的药物研发已成为医药领域的热点，而细胞因子逆转录病毒(HIV)是一种具有高度变异性和复杂性的病毒，且导致艾滋病的发生和传播。
因此，HIV药物的研究和开发一直是医药行业的重点。
在HIV的药物研发中，应用光谱法研究HIV与蛋白质的相互作用已成为一种重要的手段。
牛血清白蛋白(BSA)是一种常见的运载蛋白，其在体内分布广泛。
与许多其他药物一样，HIV药物必须被加工和稳定才能通过血液循环到达目的地。
因此，研究HIV与BSA的相互作用，对于揭示HIV药物的转运和代谢机制，以及提高HIV药物的稳定性和生物利用度具有重要的意义。
二、研究目标本研究旨在应用光谱法研究8Q5SAC与BSA的相互作用，并探究两者之间的结合常数、结合状态及结合作用力等参数，为进一步揭示HIV药物的转运和代谢机制，以及提高HIV药物的稳定性和生物利用度提供参考。
三、研究内容1. 制备8Q5SAC与BSA的复合物采用平衡透析法制备8Q5SAC与BSA的复合物，并通过超滤法测定复合物纯度。
2. 采用荧光光谱法研究8Q5SAC与BSA的相互作用采用荧光光谱法研究8Q5SAC与BSA的相互作用，测定其荧光强度变化及结合常数等参数，探究8Q5SAC与BSA的结合状态及结合作用力等参数。
3. 计算结合常数(Ka)和热力学参数根据荧光光谱法测得的数据，通过计算测得8Q5SAC与BSA的结合常数(Ka)以及热力学参数，包括Gibbs自由能变化(ΔG)、焓变化(ΔH)和熵变化(ΔS)等参数。
四、研究预期结果本次研究预计可以测定8Q5SAC与BSA的荧光强度变化及结合常数等参数，进一步探究两者之间的结合状态及结合作用力等参数，计算出其结合常数(Ka)和热力学参数，并为进一步揭示HIV药物的转运和代谢机制，以及提高HIV药物的稳定性和生物利用度提供参考。
Triton X-100与牛血清白蛋白的相互作用
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万方数据 本文系国家自然科学基金重点项目资助课题。
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分析化学
第 %F 卷
〔$〕 光寿命， 约 ! "# ） 根据图 % 数据， 由猝灭曲线起始部分求得 &’( 的表观猝灭常数 ! ) 为 $*+ , -.-〔!〕 4- 4（/01 2 3） ・ 此值大于水溶液中猝灭剂对生物分子的最大扩散猝灭常数 -5. , -.-. 一个数量级 # ， 以上， 表明动态碰撞不是引起 &’( 荧光猝灭的主要原因。
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几种药物小分子与牛血清白蛋白相互作用的光谱法研究的开题报告
几种药物小分子与牛血清白蛋白相互作用的光谱法研究的开题报告题目：几种药物小分子与牛血清白蛋白相互作用的光谱法研究摘要：牛血清白蛋白是一种重要的载体蛋白，能够与各种小分子药物发生相互作用。
基于这种相互作用，我们可以通过光谱法研究药物小分子与牛血清白蛋白的相互作用过程。
本报告旨在通过分析各种小分子药物与牛血清白蛋白的相互作用的光谱法研究，进一步探讨其相互作用过程及机制。
研究背景：许多药物都是通过与载体蛋白相互作用来达到生物学效应的。
牛血清白蛋白是一种重要的载体蛋白，能够与各种小分子药物发生相互作用。
光谱法是一种定量研究药物分子与载体蛋白相互作用的常用手段之一，如荧光光谱法、紫外吸收光谱法和圆二色光谱法等。
通过这些光谱法，我们可以揭示小分子药物与牛血清白蛋白之间的专一性、亲和性和结合方式等信息。
因此，本研究旨在通过光谱法研究药物小分子与牛血清白蛋白的相互作用过程。
研究目的：本研究旨在通过光谱法研究几种药物小分子与牛血清白蛋白的相互作用过程，并探讨其相互作用的机制。
具体研究包括以下方面：1.利用荧光光谱法探究小分子药物与牛血清白蛋白的结合常数、结合位点和结合方式等信息；2.利用紫外吸收光谱法研究药物小分子与牛血清白蛋白的相互作用过程，探讨药物分子与牛血清白蛋白之间的相互作用机制；3.通过圆二色光谱法研究药物小分子与牛血清白蛋白的二级结构变化，探究药物分子对牛血清白蛋白结构的影响。
研究方法：本研究采用光谱法对几种药物小分子与牛血清白蛋白的相互作用进行研究，主要包括以下方法：1.荧光光谱法：利用荧光光谱法测定药物小分子与牛血清白蛋白之间的结合常数、结合位点和结合方式等信息，获得药物小分子与牛血清白蛋白的相互作用特征；2.紫外吸收光谱法：利用紫外吸收光谱法测定药物小分子与牛血清白蛋白之间的相互作用过程，探讨药物分子与牛血清白蛋白之间的相互作用机制；3.圆二色光谱法：通过圆二色光谱法研究药物小分子与牛血清白蛋白的二级结构变化，探究药物分子对牛血清白蛋白结构的影响。
光谱和伏安法研究沙丁胺醇与牛血清白蛋白的相互作用
光谱和伏安法研究沙丁胺醇与牛血清白蛋白的相互作用张秋兰;倪永年【摘要】模拟人体生理条件（pH＝7．4）下，用伏安法、荧光、紫外和圆二色谱法研究沙丁胺醇（SAL）与牛血清白蛋白（BSA）的相互作用。
用 Stern-Volmer 和双对数方程处理荧光数据，得到沙丁胺醇与 BSA 的结合常数为3．12×106 L·mol-1、结合位点数约为1。
循伏安法确定了 SAL 与 BSA 的结合比，并计算了结合常数，结果与用双对数方程计算得到的常数吻合。
用紫外和圆二色谱验证了BSA 与沙丁胺醇作用时构象的改变。
%Under the imitated physiological conditions (pH = 7.4),the interaction between salbutemol (SAL)and bovine serum albumin (BSA)was investigated by the fluorescence,UV-vis spectroscopy,volta-mmetry and circular dichroism.Voltammetric results indicated the formation of the SAL2-BSA complex. Experimental data were processed with Stern-volmer plot and Line weaver-Burk equation.The way of fluo-rescence quenching was static quenching,and then calculated the binding constant (3.12 10 6 L· mol-1 ) and binding sites(~1)and the thermodynamics parameters.The changes in the secondary structure of BSA after its binding with the ligand were studies with UV-vis and circular dichroism spectroscopy.The second-ary structure alteration of BSA in the presence of salbutemol were observed.【期刊名称】《南昌大学学报（理科版）》【年(卷),期】2014(000)001【总页数】5页(P69-73)【关键词】光谱法;伏安法;圆二色谱;沙丁胺醇;牛血清白蛋白;相互作用【作者】张秋兰;倪永年【作者单位】南昌大学食品科学与技术国家重点实验室，江西南昌 330031;南昌大学化学系，江西南昌 330031【正文语种】中文【中图分类】O657.3沙丁胺醇(Salbutamol，简称SAL)，是一种β-兴奋剂[1]，化学学名为1-(4-羟基-3-羟甲基苯基)-2-(叔丁胺基)乙醇。
BSA与CTAB相互作用的荧光光谱研究
涂 逢樟 ，俞 芸 ，上官 昌汾
龙岩 ３ ６ ４ ０ ０ ０ ）
（ 龙岩 学院化 学与材 料 学 院 ，福 建
摘 要 ：在模拟生理条件下 ， 用荧光光谱法研究了十六烷基三甲基溴化铵（ Ｃ Ｔ Ａ Ｂ ） 与牛血清白蛋白（ Ｂ Ｓ Ａ ） 的相互作用。结果
表明 ：Ｂ Ｓ Ａ分子 中色氨 酸和酪氨酸残基具有荧光发射性质 ，以 ２ ８ ０ ｎ ｍ激发 Ｂ Ｓ Ａ， 在３ ４ １ ｎ ｍ处有很强 的荧光发射 。在加入 Ｃ Ｔ Ａ Ｂ后 ， 发现 Ｃ Ｔ Ａ Ｂ—Ｂ Ｓ Ａ强荧 光峰的位置蓝移 ， 且荧光 强度随着 Ｃ Ｔ Ａ Ｂ浓度 的增大而 明显减 弱 ， 说明 Ｃ Ｔ Ａ Ｂ对 Ｂ Ｓ Ａ有荧 光猝 灭现象 ， 猝灭 以静 态猝灭为主 ，由 Ｓ ｔ ｅ ｒ ｎ —Ｖ ｏ ｌ ｍｅ ｒ 方程求得 Ｃ Ｔ Ａ Ｂ表观猝灭 常数 Ｋ ＝１ ． ４ ６ ９×１ ０ ”Ｌ・ ｍ ｏ ｌ ～ ・ Ｓ ～。得 到了 Ｃ Ｔ Ａ Ｂ与 牛血清 白蛋 白 分子间的结合常数 和热力学参数 。利 用已有的计算方法 ， 建 立了相应的计算机程序 ， 使计算结果更合理 。 通 过与常见公 式计算 的结 果进行 比较 ， 所 建立的方法得到 了比较满意 的结果 。
Ｃｅ ｔ ｙ ｌ ｔ ｒ ｉ ｍｅ ｔ ｈ ｙ ｌ ａ ｍｍ ｏ ｎ ｉ ｕ ｍ Ｂｒ ｏ ｍｉ ｄ ｅ ｂ ｙ Ｆｌ ｕ ｏ ｒ ｅ ｓ ｃ ｅ ｎ ｃ ｅ Ｓ ｐ ｅ ｃ ｔ ｒ ｏ ｍｅ ｔ ｒ ｙ
荧光光谱法研究甜蜜素与牛血清白蛋白的相互作用
荧光光谱法研究甜蜜素与牛血清白蛋白的相互作用潘军辉;万宇俊;张萌;蒲超群;王亚萍;张国文【摘要】In the current study,the interaction of sodium cyclamate with bovine serum albumin (BSA)under simulative physiological conditions (pH 7.4)was investigated by fluorescence spectroscopy technique.The observed result of fluorescence quenching indicated that a ground state complex was formed between sodi-um cyclamate and BSA,resulting in the intrinsic fluorescence quenching of BSA.The binding constant K at 25°C was calculated to be 3.05×103 L mol-1 ,and the number of binding sites were approximately equal to 1.The calculated enthalpy change (ΔHθ)and entropy change (ΔSθ)values by Van't Hoff equation was -3.46 KJ·mol-1 and 48.23 J·mol-1 ·K-1 ,respectively.These findings suggested that hydrophobic inter-actions and hydrogen bonding were the main forces to maintain the stability of the BSA-sodium cyclamate complex.The site markers competitive experiments revealed the binding of sodium cyclamate to BSA pri-marily in the subdomain IIA (Site I)of BSA.Analysis of synchronous fluorescence spectra demonstrated that the hydrophobicity around tryptophan residues increased and the polarity weakened,but there was no obvious effect on the microenvironment of tyrosine residues ofBSA.Moreover,the effects of some metal i-ons on the binding constant of BSA-sodium cyclamate interaction revealed that the presence of Zn2+ and Mg2+ could increase the stability of the BSA-sodium cyclamate complex,while the stability of the complex decreased in the presence ofCa2+ ,Fe3+ and Cu2+ ,respectively.%在生理酸度（pH 7．4）条件下，利用荧光光谱法研究了甜蜜素与牛血清白蛋白（BSA）的相互作用。
光谱法研究诱惑红与牛血清白蛋白的相互作用
光谱法研究诱惑红与牛血清白蛋白的相互作用刘建民;曾晓丹;朱宝存;朱琳【摘要】采用荧光光谱、紫外吸收光谱、同步荧光光谱和圆二色光谱研究了诱惑红(AR)与牛血清白蛋白(BSA)的相互作用;讨论了AR对BSA荧光的猝灭机理.荧光光谱与紫外吸收光谱表明,AR使BSA的荧光猝灭属于静态猝灭.根据热力学参数焓变(△H＜0)和熵变(△S＞0)可推断AR和BSA的相互作用力主要为静电引力.在298 K,303 K,308 K温度下,两者间的结合常数分别为3.72×105,3.13×105,2.96×105L· mol-1,结合位点数为1.1.当AR与BSA的浓度比为1∶1时,两者间的结合距离为2.59 nm.同步荧光光谱、三维荧光光谱和圆二色光谱研究结果表明,在结合过程中BSA的构象发生了变化.【期刊名称】《理化检验-化学分册》【年(卷),期】2016(052)011【总页数】6页(P1251-1256)【关键词】光谱法;诱惑红;牛血清白蛋白;相互作用【作者】刘建民;曾晓丹;朱宝存;朱琳【作者单位】嘉兴兴美达环保科技有限公司,嘉兴314300;吉林化工学院分析测试中心,吉林132022;济南大学资源与环境学院,济南250022;吉林化工学院化学与制药工程学院,吉林132022【正文语种】中文【中图分类】O657.3诱惑红（AR）色泽鲜艳、着色力极强、合成成本相对较低，是常用的人工合成红色色素之一，曾被广泛应用于糖果包衣、冰淇淋、雪糕、饮料等行业［1-4］。
诱惑红中含有苯环或氧杂蒽等结构（见图1），而这些结构不仅会给人体细胞带来损害，还极易引起膀胱癌、肝癌、淋巴瘤等疾病，因此已被限量使用。
血清白蛋白是生物体内血浆中最丰富的载体蛋白，在生物体内承担着储存、运输等重要作用［5］。
特定的螺旋结构，使得其可以与许多内源和外源性化合物、生物小分子相结合。
因此血清白蛋白也成为医学、化学等领域中重要的研究对象之一。
牛血清白蛋白的共振光散射光谱法测定
收稿日期:2007212218 修回日期:20082042213通讯联系人:田 媛,女,副教授,主要从事光谱化学分析研究.第24卷第6期Vol.24 No.6分析科学学报J OU RNAL OF ANAL YTICAL SCIENCE 2008年12月Dec.2008文章编号:100626144(2008)0620685204牛血清白蛋白的共振光散射光谱法测定牧 丹,吴立航,高德江,孙滟涛,邓新煜,田 媛3,张寒琦(吉林大学化学学院,长春130012)摘 要:通过测量β2巯基乙醇(β2M E )2十二烷基苯磺酸钠(SDBS )2牛血清白蛋白(BSA )体系的共振光散射强度,建立了一种测定BSA 的快速、简便的共振光散射光谱法。
考察了p H 值、β2M E 和SDBS 的浓度、试剂的加入顺序等因素对共振光散射强度的影响。
实验结果表明,在p H 值为2.4,β2M E 的浓度为0.71mol ・L -1,SDBS 的浓度为6.5×10-4mol ・L -1条件下,测定BSA 的线性范围为1.0×10-8～7.0×10-7mol ・L -1,检出限为6.0×10-9mol ・L -1。
将该法应用到合成样品中BSA 及人血清样品中总蛋白的测定,所得结果与传统的考马斯亮蓝法的测定结果基本一致。
关键词:共振光散射光谱法;牛血清白蛋白;β2巯基乙醇;十二烷基苯磺酸钠中图分类号:O657.39 文献标识码:A蛋白质是人们认识细胞功能和疾病过程的关键,是生命科学的基础。
蛋白质含量的测定在临床医学、生命科学的研究方面有着十分重要的意义。
蛋白质含量的测量方法很多,常用的经典方法有定氮法、双缩脲法(Biuret 法)、Folin 2酚试剂法(Lowry 法)、考马斯亮蓝法(Bradford 法)等[1]。
共振光散射光谱法是近几年发展起来的一种新的分析技术。
该方法简单,灵敏度高,可以用普通的荧光分光光度计测量,因此在蛋白质[2]和核酸[3]等生物大分子的研究中得到了广泛的应用。
Diludine与牛血清白蛋白相互作用的光谱研究
Diludiｎe与牛血清白蛋白相互作用的光谱研究摘要：在模拟动物体生理条件下，应用荧光光谱和紫外可见吸收光谱法研究了Ｄｉｌｕｄｉｎｅ与牛血清白蛋白（ＢＳＡ）的相互作用，结果表明，Ｄｉｌｕｄｉｎｅ对ＢＳＡ有较强的荧光猝灭作用，根据不同温度下Ｄｉｌｕｄｉｎｅ对ＢＳＡ的荧光作用及Ｓｔｅｒｎ－Ｖｏｌｍｅｒ方程得到Ｄｉｌｕｄｉｎｅ与ＢＳＡ反应的结合常数Ｋ为１．２３×１０６Ｌ／ｍｏl（２９８Ｋ）和２．２７×１０４Ｌ／ｍｏl（３０３Ｋ）。
根据Ｌｉｎｅｗｅａｖｅｒ－Ｂｕｃｋ，结合位点数为０．９３８７（２９８Ｋ）和０．６７４０３（３０３Ｋ）。
热力学参数△Ｈ和△Ｓ分别为１．８４×１０－３Ｊ／ｍｏl和－１．９１×１０３Ｊ／ｍｏl，热力学数据说明Ｄｉｌｕｄｉｎｅ与ＢＳＡ之间主要以静电作用力与疏水作用力相互结合。
根据Ｆｏｒｓｔｅｒ非辐射能量转移理论，求出Ｄｉｌｕｄｉｎｅ与ＢＳＡ间的结合距离ｒ＝４．５８ｎｍ。
关键词：Ｄｉｌｕｄｉｎｅ；牛血清白蛋白；荧光光谱；荧光猝灭；紫外光谱Ａｂｓｔｒａｃｔ：Ｕｎｄｅｒｔｈｅｉｍｉｔａｔｅｄｐｈｙｓｉｏｌｏｇｉｃａｌｃｏｎｄｉｔｉｏｎｏｆａｎｉｍａｌｂｏｄｙ，ｔｈｅｉｎｔｅｒａｃｔｉｏｎｓｂｅｔｗｅｅｎＤｉｌｕｄｉｎｅａｎｄｂｏｖｉｎｅｓｅｒｕｍａｌｂｕｍｉｎ（ＢＳＡ）ｗｅｒｅｉｎｖｅｓｔｉｇａｔｅｄｂｙｆｌｕｒｅｓｃｅｎｃｅａｎｄＵＶ－Ｖｉｓｓｐｅｃｔｒｏｓｃｏｐｙ．ＩｔｗａｓｓｈｏｗｎｔｈａｔＤｉｌｕｄｉｎｅｈａｄａｑｕｉｔｅｓｔｒｏｎｇａｂｉｌｉｔｙｔｏｑｕｅｎｃｈｔｈｅｆｌｕｏｒｅｓｃｅｎｃｅｌａｕｎｃｈｉｎｇｆｒｏｍＢＳＡ．ＡｃｃｏｒｄｉｎｇｔｏｔｈｅｑｕｅｎｃｈｉｎｇｏｆｔｈｅｆｌｕｏｒｅｓｃｅｎｃｅａｎｄＳｔｅｒｎ－Ｖｏｌｍｅｒｅｑｕａｔｉｏｎ，ｔｈｅｂｉｎｄｉｎｇｃｏｎｓｔａｎｔＫｏｆｔｈｅｃｏｍｐｏｕｎｄｔｈａｔＤｉｌｕｄｉｎｅａｎｄＢＳＡｆｏｒｍｅｄweｒｅ１．２３×１０６Ｌ／ｍｏl （２９８Ｋ）ａｎｄ２．２７×１０４Ｌ／ｍｏl（３０３Ｋ）．ＡｃｃｏｒｄｉｎｇｔｏＬｉｎｅｗｅａｖｅｒ－Ｂｕｃｋｅｑｕａｔｉｏｎ，ｔｈｅｎｕｍｂｅｒｏｆｂｉｎｄｉｎｇｓｉｔｅs weｒｅ０．９３８７（２９８Ｋ）ａｎｄ０．６７４０３（３０３Ｋ），ａｎｄｔｈｅｔｈｅｒｍｏｄｙｎａｍｉｃｐａｒａｍｅｔｅｒｓ△Ｈwas １．８４×１０－３Ｊ／ｍｏl ａｎｄ△Ｓwas －１．９１×１０３Ｊ／ｍｏl，ｗｈｉｃｈｅｘｐｌａｉｎed ｔｈｅｂｉｎｄｉｎｇｐｏｗｅｒｓｂｅｔｗｅｅｎＤｉｌｕｄｉｎｅａｎｄＢＳＡwere ｅｌｅｃｔｒｏｓｔａｔｉｃａｎｄｈｙｄｒｏｐｈｏｂｉｃｉｎｔｅｒａｃｔｉｏｎ．ＢａｓｅｄｏｎＦｏｒｓｔｅｒｔｈｅｏｒｙｏｆｎｏｎ－ｒａｄｉａｔｉｏｎｅｎｅｒｇｙｔｒａｎｓｆｅｒ，ｔｈｅｂｉｎｄｉｎｇｌｏｃａｌｉｔｙｒwas ４．５８ｎｍ．Ｋｅｙｗｏｒｄｓ：Dｉｌｕｄｉｎｅ；ｂｏｖｉｎｅｓｅｒｕｍａｌｂｕｍｉｎ；ｆｌｕｏｒｅｓｃｅｎｃｅｓｐｅｃｔｒｕｍ；ｆｌｕｏｒｅｓｃｅｎｃｅｑｕｅｎｃｈｉｎｇ；ｕｌｔｒａｖｉｏｌｅｔｓｐｅｃｔｒｕｍＤｉｌｕｄｉｎｅ属有机物中吡啶衍生物，无嗅、无味，化学性质稳定，分子式为Ｃ１３Ｈ１９ＮＯ４，化学名称为２．６－二甲基－３．５－二乙酯基－ｌ．４－二氢吡啶。
光谱法研究尼美舒利与牛血清白蛋白的相互作用
光谱法研究尼美舒利与牛血清白蛋白的相互作用刘里;成飞翔【摘要】利用荧光、同步荧光和紫外可见光谱来研究牛尼美舒利(Nime)与血清白蛋白(BSA)的相互作用.结果表明:Nime能猝灭BSA的荧光,遵循静态猝灭过程.通过分析同步荧光光谱可知,Nime改变了BSA的二级结构,使BSA腔内疏水环境的极性减弱.BSA的亚螺旋域ⅡA是主要结合位置,离酪氨酸残基更近,有微弱的药物负协同作用.BSA能运输Nime,是一个自发过程,其作用力类型主要为静电作用力.结合位置实验表明Nime与BSA的结合主要发生在亚螺旋域ⅡA.有微弱的药物负协同作用.对于Nime,有一个结合位点.焓为负值,熵为正值,表明在结合过程中静电作用力起了主要作用.另外,它是一个自发放热过程.我们的研究结果可能对尼美舒利的临床研究和疗效具有参考价值.【期刊名称】《南京师大学报（自然科学版）》【年(卷),期】2016(039)002【总页数】6页(P50-55)【关键词】尼美舒利;荧光猝灭;相互作用【作者】刘里;成飞翔【作者单位】曲靖师范学院化学化工学院,云南曲靖655011;曲靖师范学院化学化工学院,云南曲靖655011【正文语种】中文【中图分类】O657.3尼美舒利（Nime）是一种非甾体抗炎药，因抗炎、解热镇痛作用比对乙酰氨基酚和布洛芬起效更快，而且几乎全部通过尿液排泄，即使多次服用也不会出现积累现象［1］，所以被一致认为一个具有良好发展前途的药物［2］.目前已在50多个国家使用，其市场规模超过10亿美元.但该药对中枢神经和肝脏造成损伤的案例时常出现，因此被禁止用于12岁以下儿童.牛血清白蛋白（简称BSA）因价格低廉，在分子结构和氨基酸序列上与人血清白蛋白极其相似，被广泛地用于与药物相互作用的研究［3］.至今还未见光谱法研究Nime与BSA的结合特征的报道.本文优化了体系的实验条件，探讨了Nime与BSA的相互作用机理，测定了3个温度下的结合位点数、热力学常数，分析了Nime与BSA结合对蛋白质构象的影响、体内常见共存物质的影响、药物的协同作用、作用力类型以及结合位置等.这些研究为临床上尼美舒利的用药安全提供理论依据.1.1 仪器与试剂上海虹益仪器仪表有限公司pHS-3C型精密酸度计，上海一恒科技有限公司HWS12型超级恒温水浴，日本日立公司F-4600型荧光光谱仪，美国瓦里安技术中国有限公司Cary 50型紫外-可见光谱仪.牛血清白蛋白（98%，上海楷样生物技术有限公司），尼美舒利（99%，百灵威科技有限公司），其它试剂均为分析纯，实验用水为超纯水.1.2 试验方法依次加入 Nime溶液（0、3.243、4.865、6.486、8.108、9.729、11.351、12.972、14.594、16.215、17.837、19.458、21.079 5）×10-5mol·L-（1编号依次为1～13），1.0×10-5mol·L-1的BSA 1.5 mL，0.5 mol·L-1NaCl溶液2.0 mL和0.1 mol·L-1pH=7.4的缓冲溶液1.5 mL，于10.0 mL比色管中，定容摇匀，分别在291.6 K、301.6 K、311.6 K温度下，孵育40 min后扫描荧光光谱和同步荧光光谱.记录不含Nime的空白溶液的荧光强度为F0和含有Nime溶液的荧光强度为F.按照上述方法扫描Nime-BSA体系的吸收光谱.2.1 反应条件的影响2.1.1 缓冲溶液缓冲溶液的选择不同，对Nime与BSA相互作用的影响不大（图1）.其中，Tris-HCl缓冲溶液效果对其相互作用最佳.2.1.2 pH值在Tris-HCl缓冲范围内，体系的F0/F随溶液pH值变化而改变（图2A）.pH=7.4时，达到最佳.由图2B可知，Tris-HCl用量为1.5 ml时，ΔF达到最大值.最终确定pH=7.4，0.015 mol·L-1Tris-HCl作为Nime与BSA相互作用的缓冲溶液.2.1.3 BSA的浓度固定其它实验条件，改变BSA的浓度，测定BSA溶液分别为：1.5×10-6mol·L-1至1.5×10-5mol·L-1时对体系的荧光强度的影响（图3）.7.5×10-6mol·L-1BSA 作为反应的浓度最佳.2.1.4 试剂加入顺序图4是不同的加入顺序对Nime与BSA相互作用的影响.加入顺序影响Nime与BSA结合，Nime→BSA→NaCl→Tris-HCl的加入顺序最佳.2.1.5 孵育时间考察225 min内孵育时间对体系的影响（图5）.实验表明，Nime与BSA的相互作用在299.6 K温度下需要25 min才能完成并稳定.2.2 荧光光谱由于BSA分子中存在着酪氨酸（Tyr）、色氨酸（Trp）等能够发射荧光的芳香性氨基酸残基，所以它是一种典型的内源荧光物［3］.其最大激发和发射波长（λex/λem）位于280 nm/340 nm处.从图6可知，随着Nime浓度的增加，λem（移到344 nm）处BSA的荧光强度逐渐降低，说明Nime对BSA的荧光有明显的猝灭作用.2.3 猝灭机理荧光猝灭机理通常可分为动态猝灭和静态猝灭［3-5］.在静态猝灭中，生成了新物质，起主要作用的是新物质的稳定性，温度越高，稳定性越差，Ksv越小［3-5］.在动态猝灭中Ksv会随着温度的升高而增大，因为分子扩散起主导.猝灭过程遵循Stern-Volmer方程［3-5］：F0/F=1+Kqt［0Nime］=1+Ksv［Nime］，式中［Nime］为Nime浓度，Kq为速率常数；t0为荧光寿命，10-8s数量级左右［3-5］.在291.6 K，301.6 K，311.6 K时作Stern-Volmer方程（表1），3个温度下的Kq值比最大动态猝灭速率常数2.0×1010L·mol-1·s-1）［3-5］大2个数量级，与动态猝灭机理相违背.由图7可知，随着温度的升高，直线斜率即Ksv降低，与静态猝灭机理吻合.Lineweaver-Burk双倒数方程［6-8］：（F0-F）-1=F0-1+（KLBF［0Nime］）-1，其中：KLB常用来分析静态猝灭过程.用（F0-F）-1对［Nime］-1作不同温度下的L-B曲线（图8），计算KLB值列于表1中，KLB值都在104数量级以上，表明Nime与BSA形成的复合物稳定性较好.随着温度的升高，KLB略有下降，这与因静态猝灭方式而形成的复合物随温度升高而越不稳定的作用机理正好相符合. 另一种推断猝灭机理的重要方法是紫外吸收光谱法［4-6］，由图9的紫外吸收光谱可知，Nime-BSA体系的吸收峰从280 nm蓝移到265 nm，吸收峰的强度也增加了，表明推断Nime与BSA静态猝灭机理是合理的.2.4 结合常数Kb和结合位点数n尼美舒利与BSA的结合常数Kb以及结合位点数n双对数方程［6-8］lg［（F0-F）/F］=lgKA+nlg［Nime］［6-8］.由lg［（F0-F）/F］对lg［Nime］作图，由直线截距可得结合常数Kb，斜率可求n（表1）.n值接近于1，表明尼美舒利与BSA可形成1个结合位点.Kb为106数量级，表明Nime与BSA之间有很强的结合作用.当温度由291.6 K到301.6 K时，Kb变化不大；但当温度升高到311.6 K 时，Kb值减少1个数量级，表明尼美舒利与BSA的相互作用对温度变化比较敏感，高温不利于血清白蛋白在体内运转、贮存和分配尼美舒利.2.5 作用力类型根据热力学公式ΔG=ΔH-TΔS=-RTlnK和ln（K2/K1）=（1/T1-1/T2）ΔH/R ［8-10］计算291.6 K，301.6 K，311.6 K温度下Nime与BSA结合反应的吉布斯自由能变ΔG，焓变ΔH及熵变ΔS（表2）.由表2可得，ΔG＜0，ΔH＜0且ΔS＞0，表明BSA与Nime的结合是自发进行的放热反应，主要作用力为静电作用力.2.6 结合位置的确定亚螺旋域IIA（含有酪氨酸和色氨酸）或IIIA（含有酪氨酸）是大多数药物在BSA 上结合位置［11-13］.比较激发波长为280 nm、295 nm时Nime-BSA体系荧光程度的变化便可知道.由图10可知，λex=280 nm，295 nm的Nime-BSA光谱曲线平行，表明色氨酸和酪氨酸残基都参与其中；λex=280 nm激发曲线比λex=295 nm的降低程度更大，表明亚螺旋域ⅡA是主要结合位置［8-10］. 2.7 药物协同作用药物的协同作用常用Hill方程［11-13］进行分析：E=（F0-F）/F0，1/E对1［/Nime］作图，截距为1/Em，lgE（Em-E）=lgK+nHlg［Nime］，式中，nH 为Hill系数，K为结合常数，E为饱和分数.由表2可知，各温度下的nH值略小于1，表明Nime与BSA结合时有微弱的药物负协同作用，即Nime分子结合到BSA位点上后，对后继药物分子与蛋白质的结合有微弱的阻碍作用.这种负协同作用可能是由于药物分子结构决定的，Nime浓度的加大，导致后续Nime对BSA 的亲和性减弱.随着温度的升高，nH值变化很小，表明Nime的药物协同作用对温度的改变不敏感.2.8 Nime对BSA构象的影响同步荧光光谱法是分析药物小分子对影响蛋白质的构象的常用方法，在Δλ=15nm（显示酪氨酸特征）和Δλ=60 nm（显示色氨酸特征）［6-8］条件下绘制Nime-BSA体系的同步荧光光谱（图11）.由图可知，随Nime浓度的增大，λem 发生红移，酪氨酸和色氨酸的荧光强度逐渐降低，表明BSA腔内疏水环境的极性增强，疏水性减弱.酪氨酸残基的猝灭程度大于色氨酸残基，表明Nime与BSA相结合的位点偏向于酪氨酸.2.9 共存物的影响实验中对常见金属离子、有机物和糖类等共存物质对Nime与BSA相互作用的影响，结果列于3中.从表3中可以看出，当相对误差≤±5.0%，Nime浓度为3.243×10-5mol·L-1时，K+、NH4+、Na+、Zn2+、Ba2+、NO3-、Cl-、SO42-、糖类和有机物等几乎不影响Nime对BSA的作用强度，但是Fe3+和Cu2+等对体系的干扰较大，可通过加入EDTA和硫脲将其掩蔽.因此，BSA可作为荧光探针对Nime的含量进行测定，这一方法具有良好的选择性.应用紫外和荧光光谱法研究推断出尼美舒利与BSA的相互作用是静态猝灭过程，两者通过静电作用力相互作用，因有1个结合位点，药物能被蛋白质转运和储存；有微弱的药物负协同作用，结合位置在BSA的亚螺旋域ⅡA中，靠近酪氨酸残基，Nime与BSA相互作用对BSA构象产生影响.探究了常见金属离子、有机物和糖类等共存物质对Nime与BSA相互作用的影响，其中Fe3+和Cu2+对其相互作用影响较大.BSA可作为荧光探针对Nime进行含量测定.这些重要信息对尼美舒利的临床研究具有参考价值，并为后续非甾体抗炎药的研发提供了理论依据.［1］岑彦艳，覃容欣，李小丽，等.尼美舒利解热镇痛抗炎作用比较研究［J］.中国现代应用药学，2014，31（8）：933-934.［2］陈沫，卢永翎，杭太俊，等.尼美舒利分散片在健康人体内的药代动力学及生物等效性的LC-MS/MS研究尼美舒利分散片制备的处方工艺优选［J］.药物分析杂志，2013，33（1）：30-32.［3］ BOGDAM S.Fluorescence study of sinapic acid interaction with bovine serum albumin and egg albumin［J］.J flurescence，2003，13（4）：349-356.［4］ LAKOWICZ J R.Principles of fluorescence spectroscopy［M］.3rd ed.New York：Springer Press，2006：285-292.［5］许金钩，王尊本.荧光分析法［M］.3版.北京：科学出版社，2006：23-49. ［6］刘里，成飞翔.光谱法研究头孢替唑钠与牛血清白蛋白相互作用［J］.江西师范大学学报（自然科学版），2014，38（6）：639-644.［7］刘里，成飞翔.光谱法研究洛索洛芬钠与牛血清白蛋白的相互作用及共存金属离子的影响［J］.中国生化药物杂志，2014，35（1）：21-24.［8］刘保生，杨超，王晶.硫酸头孢匹罗与牛血清白蛋白结合反应的发光机理［J］.发光学报，2011，32（3）：293-299.［9］ CYRIL L，EARL J K，SPERRY W M.Biochemists handbook［M］.London：Epon Led Press，1961：84-96.［10］ROSS D P，SUBRAMANTAN S.Thermodynamics of protein association reactions：forces contributing to stability［J］.Biochemistry，1981，20（11）：3 096-3 102.［11］SULKOWSKA A，MACIAZEK-JURCZYK M，BOJKO B，etpetitive binding of phenylbutazone and colchicine to serum albumin in multidrug therapy：a spectroscopic study［J］.Journal of molecular structure，2008，881（1）：97-106.［12］MACIAZEK-JURCZYK M，SULKOWSKA A，BOJKO B，etal.Fluorescence analysis of competition of phenylbutazone and methotrexate in binding to serum albumin in combination treatment in rheumatology［J］.Journal of molecular structure，2009，919（1）：334-338.［13］XU H，GAO S L，LÜ J B，et al.Spectroscopic investigations on the mechanism of interaction of crystal violet with bovine serum albumin ［J］.Journal of molecular structure，2009，919（1）：334-338.。
四种抗生素与牛血清蛋白相互作用的紫外吸收光谱研究
四种抗生素与牛血清蛋白相互作用的紫外吸收光谱研究作者：薛春霞董社英来源：《湖北农业科学》2014年第16期摘要：利用紫外吸收光谱法研究了头孢地尼（CDR）、克林霉素（CLMC）、罗红霉素（RM）和卡那霉素（KLMC）4种抗生素类药物与牛血清白蛋白（BSA）的相互作用，并对其结合反应机理进行初步探讨，同时以CDR分子为基体研究了BSA对药物分子的影响。
结果表明，在人体生理pH值试验条件下CDR、CLMC、RM及KLMC与BSA的结合常数分别为1.02×105、1.24×104、1.38×103、1.04×103 L/mol，用Scatchard拟合法求得CDR与BSA的结合常数为0.88×105 L/mol，两种方法结果基本一致。
关键词：牛血清白蛋白；克林霉素；罗红霉素；卡那霉素；头孢地尼；紫外吸收光谱法中图分类号：O657.3 文献标识码：A 文章编号：0439-8114（2014）16-3855-04Abstract： The interactions between bovine serum albumin（BSA） and four antibiotics including Cefdinir（CDR）， clindamycin（CLMC）， roxithromycin（RM）， Kalamycin （KLMC）were analyzed with UV absorption spectrometry. The binding mechanism was discussed. The effect of BSA on CDR molecule was studied. The results showed that the binding constants of CDR–BSA， CLMC-BSA， RM-BSA and KLMC-BSA under physical pH were 1.02×105，1.24×104， 1.38×103 and 1.04×103 L/mol， respectively. The result of CDR-BSA obtained from Scatchard fitting method was 0.88×105 L/mol， similar to that from the Lineweaver-Burk method.Key words： bovine serum albumin（BSA）； clindamycin；roxithormycin； kalamycin；cefdinir； UV absorption spectroscopy血清白蛋白是血浆中一种重要的运输蛋白，当药物分子进入人体后，通过血浆的贮存和运输，达到受体部位发生药理作用。
光谱法研究头孢尼西钠与牛血清白蛋白的相互作用
光谱法研究头孢尼西钠与牛血清白蛋白的相互作用刘里;李艳芳;成飞翔【摘要】Obiective To explore the interaction of cefonicid sodium(CS) with bovine serum albumin(BSA) by fluorescence and absorption spectroscopy. Methods The rate constant(Kq), quenching constant(Ksv), static fluo-rescence quenching association constant(KLB),binding site number(n) and binding constant(Kb) were calculated using Stern-Volmer, Lineweaver-Burk and double logarithm equations. Results CS was able to bind to BSA. The probable quenching mechanism of BSA by CS was mainly static quenching due to the formation of a CS-BSA com-plex. The results of thermodynamic parameters indicated that electrostatic force plays the main role in the binding process and the binding process was spontaneous. There was a single class of binding site for the BSA with CS. The primary binding site for CS was located at sub-domainⅡA of BSA and near by tyrosine residue. There was almost some negative cooperative effect. The results obtained from synchronous fluorescence showed that CS could change the microenvironment of Tyrand Trp residues of BSA. Conclusion The interaction between CS and BSA is dynam-ic. There is a single class of binding site for the BSA with CS. The obtained results provide references for its clini-cal application.%目的运用荧光和紫外光谱法,在不同的温度下去探讨头孢尼西钠(CS)与牛血清白蛋白(BSA)的相互作用.方法用Stern-Volmer、Lineweaver-Burk和双对数方程计算了速率常数(Kq)、猝灭常数(Ksv)、静态荧光猝灭缔合常数(KLB)、结合位点数(n)和有效结合常数(Kb).结果 CS能结合BSA.由于生成CS-BSA复合物,头孢尼西钠对BSA的猝灭是静态猝灭机制.热力学参数表明是一个自发过程,其作用力类型主要为静电作用力.BSA的亚螺旋域ⅡA是主要结合位置,离酪氨酸残基更近.有药物负协同作用.同步荧光光谱法表明CS能改变BSA的色氨酸和酪氨酸残基的微环境.结论 CS与BSA发生了静态相互作用,有一个结合位点,为CS的临床研究提供重要的参考依据.【期刊名称】《安徽医科大学学报》【年(卷),期】2017(052)001【总页数】5页(P52-56)【关键词】头孢尼西钠;荧光;猝灭;相互作用;牛血清白蛋白【作者】刘里;李艳芳;成飞翔【作者单位】曲靖师范学院化学化工学院,曲靖 655011;曲靖师范学院化学化工学院,曲靖 655011;曲靖师范学院化学化工学院,曲靖 655011【正文语种】中文【中图分类】O657.3头孢尼西钠(简称CS)为第2代广谱、长效的头孢类抗生素，其细菌的选择性好且无毒，有抗菌作用强、抗菌谱广、耐青霉素酶、过敏反应较青霉素类少见等优点，被广泛应用于临床[1]。
光谱法研究地塞米松与牛血清白蛋白的相互作用
光谱法研究地塞米松与牛血清白蛋白的相互作用倪永年;魏敏;汪双双【期刊名称】《南昌大学学报（理科版）》【年(卷),期】2010(034)003【摘要】在模拟人体生理条件(pH=7.4)下采用荧光光谱和紫外可见-吸收光谱研究了地塞米松(Dexamethasone)与牛血清白蛋白(BSA)的相互作用.荧光光谱实验结果表明地塞米松对BSA的荧光有静态猝灭作用.本工作还研究考察了298 K、302 K和306 K三个温度下地塞米松对BSA的荧光光谱,计算了热力学常数.猝灭常数分别为1.74×106、1.62×106和1.38×106 L·mol-1,结合常数分别为3.36×106、3.28×106和3.21×106 L·mol-1,结合位点数分别为0.81、0.71和0.76.确定了作用力为静电引力.依据F rster非辐射能量转移理论计算了授体-受体间的结合距离.【总页数】5页(P263-267)【作者】倪永年;魏敏;汪双双【作者单位】南昌大学,食品科学与技术国家重点实验室,江西,南昌,330047;南昌大学,化学系,江西,南昌,330031;南昌大学,化学系,江西,南昌,330031;南昌大学,化学系,江西,南昌,330031【正文语种】中文【中图分类】O657.39【相关文献】1.多光谱法和分子对接模拟法研究美满霉素与牛血清白蛋白的相互作用 [J], 王晓霞; 聂智华; 马力通; 崔金龙; 赛华征; 赵文渊2.光谱法研究高效氯氰菊酯与牛血清白蛋白的相互作用 [J], 孙丽莉;张朝;陈刚;彭晓萌;谢映松;胡立中;葛少林3.光谱法与计算机模拟法研究六溴环十二烷与牛血清白蛋白的相互作用 [J], 庹浔;宋继敏;付豪;吕小兰4.多光谱法和分子对接模拟法研究黄腐植酸和牛血清白蛋白的相互作用 [J], 王晓霞;吴昊;聂智华;马力通;崔金龙;赛华征;成建国5.光谱法研究甲苯达唑与牛血清白蛋白的相互作用 [J], 顾佳丽;王思宇;杨丹;黄曦瑶;何茜;秦洪伟因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
光谱法研究芹菜素与牛血清白蛋白的相互作用
光谱法研究芹菜素与牛血清白蛋白的相互作用
光谱法研究芹菜素与牛血清白蛋白的相互作用
在模拟人体的生理条件下(pH=7.40,Tris-HCl),采用荧光光谱研究了牛血清白蛋白与芹菜素的相互作用.研究结果表明牛血清白蛋白与较小浓度的芹菜素间的相互作用属于静态猝灭过程;随着芹菜素浓度的增加,与牛血清白蛋白间的相互作用为静态猝灭和动态猝灭共同作用,但仍以静态猝灭为主.进一步求出了在287K和310K温度条件下静态猝灭的猝灭常数,由求得的热力学参数,证明了芹菜素与牛血清白蛋白之间主要依靠静电引力结合,采用同步荧光光谱技术探讨了芹菜素对牛血清白蛋白构象的影响.
作者：作者单位：刊名：光谱实验室PKU英文刊名：CHINESE JOURNAL OF SPECTROSCOPY LABORATORY 年，卷(期)：2009 26(6) 分类号：O657.32 关键词：芹菜素牛血清白蛋白荧光光谱 Apigenin Bovine Serum Albumin(BSA) Fluorescence Spectroscopy。
三维荧光光谱法和圆二色谱法研究氨基比林与牛血清白蛋白分子的相互作用
三维荧光光谱法和圆二色谱法研究氨基比林与牛血清白蛋白分子的相互作用王晓霞;李松波;马力通;郭贵宝;刘金彦;王正德;闫慧【摘要】该文在模拟生理条件下,采用荧光光谱法、三维荧光光谱法以及圆二色谱法,研究氨基比林(PYM)与牛血清白蛋白(BSA)之间的相互作用.研究结果表明PYM 对BSA有强烈的荧光猝灭作用,其荧光猝灭机制为静态猝灭.由热力学参数判定PYM和BSA的主要作用力为氢键和范德华力,并且相互作用是自发进行的.根据F?rster的偶极-偶极非辐射能量转移理论可以得出PYM与BSA之间的结合距离为2.09 nm.利用三维荧光光谱和圆二色谱技术,分析PYM对BSA蛋白构象的影响,表明PYM与BSA相互作用后使BSA的微环境和构象发生改变.%The interaction between aminopyrine (PYM) and bovine serum albumin (BSA) were investigated with fluorescence spectroscopy, three-dimensional fluorescence spectroscopy, circular dichroism (CD) spectrum and under imitated physiological conditions. The results show that PYM could strongly quenching the fluorescence of BSA and the quenching process is a static process. The thermoclynamic parameters demonstrated that PYM can spontaneously bind with BSA through hydrogen bonds and Van der Waals forces. The binding distance of 2.09 nm between PYM and BSA was obtained by the F?rster's theory on resonance energy transfer. Three-dimensional fluorescence spectroscopy and circular dichroism (CD) spectrum show that PYM could change the miro-enviroment and conformation of BSA.【期刊名称】《中国测试》【年(卷),期】2017(043)009【总页数】7页(P74-80)【关键词】氨基比林;牛血清白蛋白;荧光猝灭;三维荧光光谱;圆二色谱【作者】王晓霞;李松波;马力通;郭贵宝;刘金彦;王正德;闫慧【作者单位】内蒙古科技大学化学与化工学院,内蒙古包头 014010;内蒙古科技大学化学与化工学院,内蒙古包头 014010;内蒙古科技大学化学与化工学院,内蒙古包头 014010;内蒙古科技大学化学与化工学院,内蒙古包头 014010;内蒙古科技大学化学与化工学院,内蒙古包头 014010;内蒙古科技大学化学与化工学院,内蒙古包头 014010;内蒙古科技大学化学与化工学院,内蒙古包头 014010【正文语种】中文氨基比林又名匹拉米洞（Pyramidon），为解热镇痛药，其镇痛作用强而持久，对胃肠道刺激性小[1]。
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反兴奋剂委员会 已经把人工合成糖皮质列为违禁药 物。
本 文首 次采用 荧 光光 谱 法 研究 了地 塞 米 松 （ 结
构式如图 １ 与牛血清 白蛋 白（ Ｓ ） ） Ｂ Ａ 的相互作用 的 光 谱特征 ， 讨 了地 塞 米 松 对 Ｂ Ａ 的荧 光 猝 灭 作 探 Ｓ 用， 确定了结合常数 、 结合位点数和结合力类型等相 关信息。并采用 同步荧光光谱法研究地塞米松对
体间的结合距离。 关键词 ： 地塞米松 ； 牛血清白蛋 白； 荧光光谱法 ；￣ ｔｒ Ｆｒ ｅ 非辐射 能量转移 ｓ 中图分类号 ：６ ７ ３ ０ ５ ．９ 文献标 志码 ： Ａ
血清 白蛋 白是 血浆 中含 量 最 丰 富 的 载体 蛋 白 ，
０Ｈ
它能与多种内源或外源性物质结合 ， 在体 内起着酸
地 塞米 松 （ Ｅ 溶 液 １ ５ Ｄ Ｘ） ． １×１ ０一ｍ ｌ Ｌ～： ｏ・ 准
类激素药物 ， 具有抗炎 、 免疫抑制 、 抗休克等作用 ， 是 临 床常用 药 。而且 由于糖 皮质 类药 物具 有 良好 的抗 炎镇 痛作用 ， 运 动 员 常用 药 。但 由 于其 对 运 动 员 是
图 １ 地塞米松 （ Ｅ 结构式 Ｄ Ｘ）
Ｂ Ａ构 象 的影响 。 Ｓ
子构象的变化 ， 获取蛋白质分子 的有关信息 ， 已经引 起 了许 多科 技工作 者 的关 注 ＩＪ ４。研 究 药物 与蛋 白
质之 间 的作 用 ， 助 于 了解 药物 在 体 内 的运输 和分 有 布情况 ， 于 阐明药 物 的 作 用机 制 、 药 的设 计 、 对 新 药 代 动力 学 以及 药物 的毒 性都有 非 常重 要 的意义 。
溶液 ， 准确称取 ２４ ２ｇ ．２ 三羟基甲基氨基 甲烷（ ｒ ， Ｔｉ ｓ
２ｏ１） ０９９ 基盒项目： 家自 国 然科学基金资助项目（ ５ ０９ ； ２ ６ ０ ）南昌大学食品科学与技术国家重点实验室项目（ Ｂ ２ ８ ；Ｓ ０２ Ｍ 一０ ０ Ｔ 一 ０７
光 谱 法 研 究 地 塞 米 松 与 牛 血 清 白蛋 白的 相 互 作 用
倪永年 ， 魏敏 汪双双 ，
（ 南昌大学 ａ 食品科 学与技术 国家重点 实验 室， ． 江西 南 昌 ３ ０４ ．． 学 系， ３０ ７ ｂ化 江西 南昌 ３０ ３ ） ３０ １
摘
要： 在模拟人体生理条件 （Ｈ＝７４ 下 采用荧光 光谱 和紫外可见 一吸收光谱研 究 了地 塞米松 （ ｅａ ｅ ａｏ ｅ ｐ ．） Ｄ ｘｍ ｔ ｓｎ ） ｈ
收稿 日期 ：０ ９—１ ２ ２０ ０— ５
Ｌ 的储 备液 。将 溶液 保存 于 ４℃ 以下 ， 用 时根 使
据 所需 进 行 稀 释 。缓 冲溶 液 为 ０ ０ ｌ・Ｌ 的 ． ５ｍｏ
Ｔ ｓ Ｃ （ Ｈ ＝ ． ） 先 配 制 ０ ２ｍｏ Ｌ 的 Ｔｉ ｉ ｆ —Ｈ Ｉｐ ７ ４ ， ． ｌ・ ｒ ｓ
地 塞米松 （ Ｅ Ｄ ｘｍ ｔａｏ ｅ 是一 种 糖 皮 质 Ｄ Ｘ， ｅａ ｅｈｓｎ ）
１ 实 验 部 分
１ １ 仪器 与试 剂 ．
Ａ ｉｅｔ ４ ３紫外 可 见 分 光 光度 计 （ 国 ） Ｐ ｇｌｎ ５ ｉ ８ 美 ，Ｅ Ｌ ５ 光分 光光 度计 （ Ｓ５荧 带恒 温装 置 ） 。
与牛血清 白蛋 白（ Ｓ 的相互作 用。荧光光谱 实验 结果表 明地塞 米松对 Ｂ Ａ的荧 光有静 态猝灭作 用 。本工作 还 Ｂ Ａ） Ｓ 研究考察 了 ２ ８Ｋ、０ ９ ３ ２Ｋ和 ３ ６Ｋ三个温度下地塞米松对 Ｂ Ａ的荧光光谱 ， ０ Ｓ 计算了热力学常数 。猝灭常数 分别 为 １７ ．４×１ １６ ０ 、．２×１ １３ ０ 和 ．８×１ Ｌ・ ｏ～， ０ ｍ ｌ 结合常数分别为 ３ ３ ０ 、． ８×１ 和 ３ ２ ×１ Ｌ・ ｌ 结 合 ．６×１ ３ ２ ０ ．１ ０ ｍｏ～， 位点数分别为 ０ ８ 、．１和 ０ ７ 。确定 了作用力 为静电引力 。依据 Ｆｒｔ 非辐射 能量转移理 论计算 了授体 一受 ． １ ０７ ．６ ０ｅ ｓ ｒ
第３ ４卷第 ３期
２１ ０ ０年 ６月
南昌大学学报 （ 理科版）
Ｊｕｎｌ ｆ ａｃａ ｇＵ ｉ ｒｉ （ ａｕａ Ｓｉ ｃ） ｏ ｒａ ｏ ｎｈｎ ｎ ｅｓｙ Ｎ ｔｒｌ ｃ ｎ ｅ Ｎ ｖ ｔ ｅ
Ｖｏ ． ４ Ｎｏ ３ １３ ．
Ｊｎ ２ １ ｕ ．０ ０
文章编号 ：０ ６— ４４ ２ １ ）３— ２ ３— ５ １０ ０ ６ （０ ０ ０ ０ ６ ０
表现 有潜 在有 害作用 ， 国际 奥林 匹克 委 员 会 和 世界
确 移取 ９６ ．８×１ ～ ｍｏ ・ 地塞 米松 溶液 （ 苏吴 ０ ｌ Ｌ 江 中医药集 团有 限公 司苏州 第 六 制 药厂 ） ．７ｍＬ 用 １５ ， 适 量二 次水 稀 释并 超 声 １ ｎ 定 容 至 １ ５ｍｉ， ０ｍＬ容量 瓶 中 ， 置 在 暗 处 以 防 分 解 。牛 血 清 白蛋 白 Ｂ Ａ 放 Ｓ （ 海 华 美 生 物 有 限 公 司 ， 度 ９ ％ ， 子 量 上 纯 ９ 分 ６ ０ ） 准 确 称 取 ０ １８ｇＢ Ａ， 于 １０ ｍＬ５ ６００ ： ． ９ Ｓ 溶 ０ ０ ｍｍ ｌ Ｌ Ｎ Ｃ 的溶 液 中 ， 制 成 １５ ０ ｔ ｌ ｏ ・ ａＩ 配 ．２ｘ１ ｏ ｏ
度 平衡 以及金 属 离 子 、 基 酸 、 肪 酸 、 氨 脂 药物 等 的贮 存、 运载等重要的作用…。药物分子与血清 白蛋 白 相互 作用 的研 究是介 于 化学 与生命 科学 之 间的边 缘
性课 题 。在蛋 白质 组 学 的 研究 中 ， 讨 有 机 小 式 和相 互 作 用 特 征 ， 以便 发 现药 物类有 机小 分 子的作 用靶 和作 用前 后蛋 白质 分