CytoFLEX流式细胞分析仪快速入门
beckman cytoflex流式细胞仪基本原理
beckman cytoflex流式细胞仪基本原理
Beckman Coulter CytoFLEX流式细胞仪是一种基于流式细胞术原理的仪器，用于分析和计数细胞悬浮液中的细胞。
其基本原理包括以下几个步骤：
1. 流体流动：细胞悬浮液被注入到仪器中，并通过液体系统被送入流动腔室。
流体的流动会使细胞在一个个单独的微小流速中依次通过腔室。
2. 光源激发：流过流动腔室的细胞会经过一束高能、单色的激光光束的照射。
光束能够激发细胞中存在的特定荧光分子或染料。
3. 荧光检测：被激发后，细胞会发射特定波长的荧光信号。
仪器会使用一套光学元件来收集并分离不同波长的荧光光子，然后传送到光电增强器中进行放大。
4. 光电转换：光电增强器将收到的荧光信号转化为电信号，并经过调制和放大。
5. 数据采集：经过光电转换后的信号会通过数据采集系统，数字化并存储。
这些数据会被分析软件解读并生成相关的结果和图形。
通过以上步骤，CytoFLEX流式细胞仪可以提供细胞的计数、表型分析、蛋白质表达分析以及细胞周期等信息。
同时，它还
可以通过设定门控条件来筛选出特定的细胞亚群，实现更精确的细胞分析。
流式细胞仪的使用程序
流式细胞仪的使用程序------血液病实验诊断中心一.开机程序1.检查稳压器电源,打开电源,稳定5分钟。
2.打开储液箱,倒掉废液, 并在废液桶中加入400ml漂白水原液。
打开压力阀,取出鞘液桶,将鞘液桶加至4/5满(一般可用三蒸水,做分选必须用PBS 或FACSFlow),合上压力阀。
确实盖紧桶盖,检查所有管路是否妥善安置。
3.将FACSCalibur开关打开,此时仪器功能控制钮的显示应是STANDBY,预热5-10分钟。
排出过滤器内的气泡。
4.如果需要打印,打开打印机电源。
5.打开电脑,等待屏幕显示出标准的苹果标志。
6.执行仪器PRIME功能一次,以排除Flow cell中的气泡。
7.分析样品时,先用FACAFlow 或PBS进行HIGH RUN约2分钟。
做过分选后,每次开机后需冲洗管道:向分选装置上装上两个50ml离心管,不接通浓缩系统,摁下右下角白色按钮开始冲洗。
待自动停止后接通浓缩装置,同上法冲洗一次。
二.预设获取模式文件(Acquisition Template Files)1.从苹果标志中选择CELLQuest见一个新视窗,可利用此视窗编辑一个获取模式文件。
2.选取屏幕左列绘图工具中的Dot plot,绘出一个或多个Dot Plots(点图)。
从Dot Plot对话框中选取Acquisition作为图形资料来源,并确定适当的x 轴和y轴参数。
3.选取屏幕左列绘图工具中的Histogram,同上法可绘出Histogram(直方图)。
4.将此视窗命名后储存于FACStation G3\BD Applications \CELLQuestFolder \EXP文件夹中,下次进行相同实验时可直接调用。
. 本计算机中已设定两个模式文件:ACQ和EXP,储存于FACStation G3\BD Applications \CELLQuest \EXP文件夹中,ACQ用于细胞DNA检测, EXP用于细胞表面标志分析。
贝克曼cytoflex参数
贝克曼cytoflex参数摘要：1.贝克曼cytoflex 简介2.贝克曼cytoflex 参数详解3.贝克曼cytoflex 参数的应用领域4.贝克曼cytoflex 参数的优缺点分析5.总结正文：【贝克曼cytoflex 简介】贝克曼cytoflex 是一款流式细胞仪，广泛应用于细胞生物学、免疫学、生物医学等领域。
其独特的设计理念和高精度的测量技术，使得它在科研和临床检测中具有重要的作用。
【贝克曼cytoflex 参数详解】贝克曼cytoflex 的参数主要包括以下几个方面：1.激光器参数：贝克曼cytoflex 使用的是空气冷却式激光器，具有高效率、低噪声的优点。
其激光波长范围覆盖了350-800 nm，可以满足大部分细胞测量的需求。
2.检测器参数：贝克曼cytoflex 采用的是光电二极管阵列检测器，具有高灵敏度和快速响应的特点。
其检测范围覆盖了280-850 nm，可以实现对细胞各个通道的精确测量。
3.细胞分类参数：贝克曼cytoflex 具有多种细胞分类模式，可以根据细胞大小、形状、荧光强度等特征对细胞进行分类。
4.数据处理参数：贝克曼cytoflex 具有强大的数据处理功能，可以对测量得到的数据进行实时分析和处理，提供各种统计报表和图形。
【贝克曼cytoflex 参数的应用领域】贝克曼cytoflex 的参数在多个领域都有广泛的应用，包括：1.基础科研：用于研究细胞的生长、分化、凋亡等过程。
2.临床检测：用于检测血液、淋巴液等体液中的细胞数量和功能状态。
3.药物研发：用于评估药物对细胞的影响和药物筛选。
【贝克曼cytoflex 参数的优缺点分析】贝克曼cytoflex 的参数具有以下优点：1.高精度：贝克曼cytoflex 使用的是高精度的激光器和检测器，可以提供准确的测量结果。
2.高效率：贝克曼cytoflex 具有多种细胞分类模式，可以快速对细胞进行分类和分析。
3.高灵活性：贝克曼cytoflex 的参数可以根据实际需求进行调整，满足不同场景的需求。
cytoflex操作规程
cytoflex操作规程CytoFLEX流式细胞分析仪是一种高性能、多参数流式细胞仪，广泛应用于细胞分析、免疫学研究、荧光染色等领域。
为了保证操作安全和数据准确性，以下是CytoFLEX 操作规程。
1. 开机准备a. 检查仪器电源是否插入正确，打开电源开关。
b. 检查电脑是否连接到CytoFLEX流式细胞分析仪。
c. 启动分析软件，如CytExpert。
d. 检查流式细胞分析仪的滤光片配置是否正确。
2. 设定仪器参数a. 在主界面上选择“Acquisition”进行实验参数设置。
b. 选择合适的波长和功率来激发和检测样品中的荧光染料。
c. 根据样品类型和实验要求，设置正确的流速和取样量。
3. 样品制备a. 根据实验要求，选择合适的细胞悬液和染色方法。
b. 遵循标准的样品制备过程，包括细胞计数、离心和悬浮液的制备。
c. 样品处理过程中要保持无菌条件，避免污染和细胞损伤。
4. 样品加载a. 在样品管中加入合适的染料和细胞悬液。
注意避免气泡的产生。
b. 将样品管放入样品架中，确保样品管与固定夹密封紧密。
5. 调节仪器设置a. 使用设置好的仪器参数进行样品调试。
b. 如有需要，调整观察点、光强和阈值，以获得最佳的数据。
6. 开始实验a. 点击软件界面上的“Acquisition”按钮，开始采集样品数据。
b. 实时监控样品流速和染料发光情况，如有异常情况要及时停止实验检查。
7. 数据保存和分析a. 实验完成后，保存数据文件到指定的位置。
b. 使用分析软件对采集到的数据进行后续分析和图表绘制。
8. 清洁和关机a. 关闭采集软件和电脑。
b. 使用清洁剂和纸巾擦拭仪器外壳、玻璃仪器件和样品台面。
c. 关闭CytoFLEX流式细胞分析仪的电源开关。
以上是CytoFLEX操作的基本规程，用户在使用时要按照操作要求仔细操作，确保数据的准确性和仪器的正常运行，同时在实验过程中遵循实验安全规范，确保操作的安全性。
流式细胞仪操作流程(单标)
流式细胞仪操作流程(单标)一、开机(务必按照此顺序开机)1、打开下面的小门，推上电源2、打开插线板电源开关3、开电脑4、打开流式细胞仪开关二、软件准备1、打开软件2、点击菜单栏的Cytometer，待流式细胞仪与电脑自动连接后会自动出现startup 和shutdown选项，点击startup，系统提示按确定。
（等待5～6min startup 完成后再继续）2、在出现的Browser栏中依次选择new folder——new experiment——new specimen——new tubes，按照实验组数给new specimen编号，按照每一组实验试管数给new tubes 编号。
3、在右边显示屏中拽出Global sheet，点击Dot Plot绘制散点图，点击Histogram绘制直方图。
以FITC单标抗体为例，首先绘制FSC-A为横坐标、SSC-A为纵坐标的散点图（图1），然后绘制以FITC-A为横坐标、SSC-A为纵坐标的散点图（图2），最后绘制以FITC-A为横坐标、count为纵坐标的直方图（图3）。
4、点击菜单栏中的populations，选择create statistics view。
三、上机操作1、将试管放置在流式细胞仪上，在左侧显示屏的Acquisition Dashboard中点击acquire data，此时流式细胞仪开始工作。
2、根据图1中细胞的位置，在Cytometer FACScanto 栏中的parameters标签中调节FSC和SSC的电压大小，使主群细胞在图1上处于居中的位置。
3、点击右侧显示屏的Polygon Gate按钮，在图1中选择要求测量的主群细胞，可见图1中出现P1，并且其中的细胞变成红色。
4、选择图2、图3，分别在左侧显示屏的Inspector-Dot Plot栏中点击P1的复选框，可见图2、3中的图象均变成红色，即要求细胞仪检测选定的细胞P1。
CytoFLEX流式细胞分析仪快速入门
1. 每隔一个月清洁一次流动室。 a. 机器待机时，选择“细胞分析仪”菜单中的深度 清洁，然后等待至过程结束。
注意
可能会出现仪器损坏。请勿将清洁溶液放置在流动室中超过 24 个小时。 b. 等待半个小时，然后选择充注以清除剩余清洁溶液。 c. 等待至充注循环完成，然后运行“日常清洁”。
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显示并保存。
• 结果部分的绿色图标 • 结果部分的红色图标
表明通过。 表明失败。
6. 若 QC 失败，请充注仪器、初始化并重复操作 QC。
注释 若 QC 同一天连续失败两次，请联络 Beckman Coulter 代表。
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CytoFLEX 流式细胞分析仪快速入门 数据采集
数据采集
创建实验
重要 对于每个新批次编号，下载对应的目标值文件，并参考步骤 2.
4. 使用屏幕左侧的批次编号-下拉列表 球对应的批次编号。
，选择与 QC 荧光微
5. 选择 始 QC。
，将已准备的 QC 样品试管插入样品试管托架，然后选择
以开
注释 QC 可能需要数分钟。QC 荧光微球的最低流速为 100 事件/秒。一旦完成，结果就会自动
4. 请熟悉工具栏。
图形 统计资
料 层级
5. 利用“图表”工具
门 缩放 标尺
增益 阈值 撤消/恢复
新建所需直方图或点状图。
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CytoFLEX 流式细胞分析仪快速入门 数据采集
6. 设置所需样品流速，然后选择“采集”面板上的
，以起动激光器和流体。
7. 将样品管装入样品端口，然后选择
以开始采集和显示数据。
关闭
1. 从“文件”菜单打开任一实验，并初始化仪器。 2. 在“细胞分析仪”菜单中选择日常清洁。
FACAria 流式细胞仪操作程序
一、准备工作1，清洗偏转板，防止盐离子影响电荷加载，电流偏转。
1）用超纯水沾湿医用棉签，擦拭偏转板所有金属物件。
再用干棉签擦干。
2）5ml注射器吸超纯水，清洗缝隙。
用滤纸先吸水，再用干棉签擦干。
2，鞘液桶加液3，喷嘴超声，喷嘴放入超纯水中，超声2min。
用滤纸吸干水分，晾干。
二、开机启动1，启动电脑，密码BDIS，点开软件，无密码2，机箱侧面依次打开总机开关，蓝色、红色激光。
3，液流启动：Cytometer----Fiuid Setup1）气路（透明管）、液路（蓝色管），从乙醇桶上拔下，插到鞘液桶2）闭合喷嘴从侧面放入到喷嘴位置，旋转至12点方向3）取下闭合喷嘴4）将超声过的喷嘴放入喷嘴位置。
4，喷嘴压力切换：菜单栏中Sort---Sort Setup----70um（选择当前使用的喷嘴大小）5，液流调整：点开电脑界面中70um图标栏里的Stream，从打叉状态变为打勾。
查看是否都处于正常状态：1）打开仪器机箱，查看液流是否流到废液槽。
如果偏离，拧开两边的螺丝，左右推动使液流到达槽内，拧好螺丝。
2）查看电脑界面，液流图像是否稳定，如果有黑白灰图片变化，用棉签擦拭偏转板上方3）查看电脑界面，液流是否在中央，如果不是，可以手动调整仪器摄像头，或者重新插好喷嘴。
4）机箱中查看激光束是否完好通过，用干棉签挡住通过位置，如果看到激光射出，则正常。
然后关闭主机箱外盖。
调整液流：通过调整振幅来实现。
1）振幅Ampl，数值调大，使液流断滴在上1/3处，即2滴连续液流。
2）频率Freg，一般不动。
3）Gap：当喷嘴为70um时，数值一般为7、8、9。
100um时，为10,、11、12。
4）当Ampl和Gap都稳定时，把实际值（后面）手动输入到确定值的框内（前面）。
5）点击Stream Spot，锁死数值，保持液流稳定。
Drop1：实际值和确定值，变化幅度保持在10以内。
Gap：实际值和确定值，变化幅度保持3以内。
Partec CyFlow Space标准化操作规程
CyFlow Space流式细胞仪操作规程一、开机前检查1.确认所有线缆连接正常。
2.确认废液瓶已被清空，鞘液瓶装入2/3鞘液。
3.确认废液瓶内已加入消毒剂。
二、开机顺序1.按住UPS开关按钮2秒钟，至绿色指示灯亮起。
2.打开流式细胞仪主机电源开关及激光开关。
3.打开计算机主机及显示器开关。
4.打开打印机开关。
三、软件使用步骤1.双击计算机桌面上的“FloMax” 图标，显示欢迎使用界面，点击“确定”（如下图）进入软件，仪器自动初始化。
2.点击软件界面中底部按钮行中的“仪器设臵”按钮，随后软件将弹出仪器设臵相关的菜单。
3.选择“读取”按钮，在“C:\ FloMax”文件夹中选择“*.ist”4.在软件界面中的右上角有两个“关闭”按钮，点击下方的灰色“关闭”按钮，并确认软件初次打开时的默认模板被关闭。
5.读取模板：在软件界面中的左上角“文件”菜单中点击“打开”，选择“C：\FloMax”文件夹中的“*.fcs”。
6.此时仪器处于待机状态，可以上样检测标本。
四、样本处理及检测操作步骤1.标本处理：取约0.5cm2样品放于平面塑料培养皿内，加500ul DNA 1 Step试剂，使用尖锐的刀片切割样品，之后再加入1500ul的DNA 1 Step试剂，将样本及液体用滤网过滤到样品管中，避光染色1min。
2.将样品管插入仪器后，自动开始样品测试，采集的数据达到实验要求后，可以直接拔下样品管，终止测试。
仪器会执行一次自动清洗，结束之后，可以进行下一个测试。
五、保存检测结果1.待每个测试结束并自动清洗完成后，可对检测结果进行保存。
点击“FloMax”软件中“文件”菜单中的“保存”按钮,选择“本地磁盘(D:)”并将检测结果保存在“检测结果”文件夹中，名称可按需输入。
六、生成并打印中文报告1.所有检测结束后需要关闭所有结果或模板。
2.将已经保存并需要生成报告的结果调入FloMax软件，调入方式和“读取模板”的方式相同。
FACAria流式细胞仪操作程序
一、准备工作1，清洗偏转板，防止盐离子影响电荷加载，电流偏转。
1）用超纯水沾湿医用棉签，擦拭偏转板所有金属物件。
再用干棉签擦干。
2）5ml注射器吸超纯水，清洗缝隙。
用滤纸先吸水，再用干棉签擦干。
2，鞘液桶加液3，喷嘴超声，喷嘴放入超纯水中，超声2min。
用滤纸吸干水分，晾干。
二、开机启动1，启动电脑，密码BDIS，点开软件，无密码2，机箱侧面依次打开总机开关，蓝色、红色激光。
3，液流启动：Cytometer----FiuidSetup1）气路（透明管）、液路（蓝色管），从乙醇桶上拔下，插到鞘液桶2）闭合喷嘴从侧面放入到喷嘴位置，旋转至12点方向3）取下闭合喷嘴4）将超声过的喷嘴放入喷嘴位置。
4，喷嘴压力切换：菜单栏中Sort---SortSetup----70um（选择当前使用的喷嘴大小）5，液流调整：点开电脑界面中70um图标栏里的Stream，从打叉状态变为打勾。
查看是否都处于正常状态：1）打开仪器机箱，查看液流是否流到废液槽。
如果偏离，拧开两边的螺丝，左右推动使液流到达槽内，拧好螺丝。
2）查看电脑界面，液流图像是否稳定，如果有黑白灰图片变化，用棉签擦拭偏转板上方3）查看电脑界面，液流是否在中央，如果不是，可以手动调整仪器摄像头，或者重新插好喷嘴。
4）机箱中查看激光束是否完好通过，用干棉签挡住通过位置，如果看到激光射出，则正常。
然后关闭主机箱外盖。
调整液流：通过调整振幅来实现。
1）振幅Ampl，数值调大，使液流断滴在上1/3处，即2滴连续液流。
2）频率Freg，一般不动。
3）Gap：当喷嘴为70um时，数值一般为7、8、9。
100um时，为10,、11、12。
4）当Ampl和Gap都稳定时，把实际值（后面）手动输入到确定值的框内（前面）。
5）点击StreamSpot，锁死数值，保持液流稳定。
Drop1：实际值和确定值，变化幅度保持在10以内。
Gap：实际值和确定值，变化幅度保持3以内。
此视为稳定液流。
流式细胞仪的使用流程
流式细胞仪的使用流程1. 简介流式细胞仪 (Flow Cytometer) 是一种先进的生物学实验设备，用于检测和分析细胞的形貌、大小、形态、功能和数量等特征。
它可通过流式技术将单个细胞排列成单个的流束，然后通过激光器进行激发和检测，实现对细胞的高通量分析。
本文将介绍使用流式细胞仪的具体使用流程，帮助用户能够正确、高效地操作该设备。
2. 准备工作在正式操作流式细胞仪之前，需要做一些准备工作：2.1 样本准备•从培养皿中取出待分析的细胞，并进行适当的处理，如洗涤、离心等。
•将细胞悬浮液转移至离心管中，并进行适当的离心操作，以获得较为纯净的细胞样本。
2.2 仪器准备•打开流式细胞仪的电源开关，并等待设备启动完成。
•根据实验需要，调整仪器的相关参数，如流速、激发光源、检测通道等。
•准备合适的背景溶液，用于样本的稀释和冲洗。
3. 操作步骤了解了准备工作后，下面将介绍流式细胞仪的具体操作步骤：3.1 样本准备与装载•使用移液器将经过处理的细胞悬浮液取出一定量至样本管中。
•观察样本管中的细胞悬浮液是否均匀分散，如果存在沉淀则轻轻摇晃样本管使之均匀。
3.2 仪器设置•在流式细胞仪的操作界面上设置相应的参数，如流速、激发光源、检测通道等。
•检查仪器的液路系统是否正常工作，如检查液体的流速、流量传感器是否正常等。
3.3 校准仪器•使用已知样本进行仪器的校准。
通常使用亮度微珠进行仪器的调整和刻度。
•在仪器设置界面选择亮度微珠的通道，并进一步设定检测参数以达到最佳校准效果。
3.4 样本测试•将样本管装载至流式细胞仪中的样本架上，确保样本与仪器的光学系统的光路对准。
•启动流式细胞仪，开始测试。
•根据实验需要，选择合适的激发光源和检测通道，进行样本的快速测试。
•在测试过程中，可根据实验需要采集样本的荧光和散射信号，以及其他额外的参数。
3.5 数据分析•测量完成后，通过流式细胞仪软件导出所测细胞的数据文件。
•使用相应的数据分析软件对所测细胞的数据进行分析和解读。
流式细胞仪操作步骤
流式细胞仪操作步骤一、样品准备1. 确认样品是否符合实验要求，如细胞浓度、荧光标记等。
2. 根据实验需求，选择合适的试管和细胞样品。
3. 确认样品中是否有杂质或污染物，必要时进行离心和洗涤。
4. 尽可能缩短样品处理时间，避免细胞活性受到影响。
二、样品上机1. 打开流式细胞仪，确认仪器正常工作。
2. 将样品加入到流式细胞仪的样品管中。
3. 根据实验需求，设置合适的流速和压力。
4. 开始采集数据，观察仪器工作状态，确保数据准确可靠。
三、参数设置1. 根据实验需求，选择合适的荧光标记和检测参数。
2. 根据细胞类型和特性，设置合适的门控和阈值。
3. 确认仪器校准和定标工作已完成。
4. 根据需要，设置多色分析，以便于进行细胞分群和定量分析。
四、数据采集1. 在采集数据时，观察仪器工作状态，确保数据准确可靠。
2. 根据实验需求，确定采集的数据量，确保数据具有代表性。
3. 记录采集数据的时间和条件，以便于后续数据分析。
4. 在采集数据时，注意观察细胞活性、浓度和分布情况，及时调整实验条件。
五、数据分析1. 使用专业软件对采集的数据进行处理和分析。
2. 根据实验需求，对数据进行去噪、归一化和定量分析。
3. 进行细胞分群、细胞周期和细胞凋亡等分析。
4. 对数据进行统计学分析和可视化展示。
六、结果输出1. 根据分析结果，输出相应的图表和数据表格。
2. 对结果进行解释和注释，以便于读者理解和应用。
3. 如果需要，可将结果整理成报告形式，提供给相关人员参考和使用。
七、质量控制八、实验室清理。
快速掌握使用流式细胞仪进行细胞分析的方法
快速掌握使用流式细胞仪进行细胞分析的方法细胞分析是生命科学中的重要研究手段之一，而流式细胞仪作为一种高效、准确的细胞分析工具，被广泛应用于细胞学、免疫学、生物医学等领域。
本文将介绍如何快速掌握使用流式细胞仪进行细胞分析的方法，以帮助读者更好地利用这一技术进行科研工作。
一、流式细胞仪的基本原理流式细胞仪是一种能够实现细胞的快速、高通量分析的仪器。
其基本原理是将细胞悬浮液通过细管引入流式细胞仪中，然后通过激光照射细胞，测量细胞在不同参数上的散射和荧光信号，从而获取细胞的相关信息。
二、准备实验样本在使用流式细胞仪进行细胞分析之前，首先需要准备好实验样本。
样本可以是细胞悬浮液，也可以是组织细胞的单细胞悬浮液。
为了保证实验的准确性，样本的制备应遵循一定的操作规范，如细胞的处理、染色等。
三、设置流式细胞仪参数在进行细胞分析之前，需要根据实验的需要设置流式细胞仪的参数。
主要包括激光的选择和功率、滤光片的选择、检测通道的设置等。
不同的实验目的和细胞类型可能需要不同的参数设置，因此在设置参数时应根据实际情况进行调整。
四、样本的注射和分析在样本准备和参数设置完成后，可以开始进行样本的注射和分析。
首先将样本注入流式细胞仪的样本室中，然后启动仪器进行分析。
在分析过程中，需要确保样本的流速适中，以避免细胞堵塞或过度稀释。
同时，还需要注意细胞在仪器中的稳定性，避免因仪器震动等原因导致数据的不准确。
五、数据分析与结果解读流式细胞仪在分析过程中会生成大量的数据，因此需要进行相应的数据分析与结果解读。
常见的数据分析方法包括细胞计数、细胞分类、细胞周期分析、蛋白质表达水平分析等。
通过对数据的分析与解读，可以得出相应的结论，并进一步指导后续的研究工作。
六、常见问题及解决方法在使用流式细胞仪进行细胞分析的过程中，可能会遇到一些常见问题，如细胞堵塞、信号干扰等。
针对这些问题，可以采取相应的解决方法，如调整样本的稀释倍数、优化参数设置等。
CytoFLEX常规操作流程
CytoFLEX常规操作流程开机流程1.检查鞘液和废液容器。
验证并确认鞘液容器中有足够的鞘液且废液容器已排空。
2.打开细胞分析仪背面的电源总开关，等待细胞分析仪完成启动，再打开电脑。
3.登入 Windows 操作系统并选择 CytExpert 桌面图标，以打开软件。
4.检查屏幕下方的仪器状态栏，无异常提示即可点击采集栏中的初始化按钮，初始化仪器。
5.在菜单栏中点击细胞仪，在下拉菜单中选择开机流程，按提示完成开机操作：将装有约2ml去离子水放置于上样器中，点击开始。
仪器质控流程1.取质控微球，摇匀后滴一滴微球至装有500μl PBS的样品试管中，混匀，上样。
2.点击菜单栏中的质控，进入质控流程。
3.在批号栏中选择与质控微球对应的靶值文件，点击开始，等待仪器自动完成质控。
注：如果没有对应的靶值文件，或者QC不通过，请联系仪器工程师。
关机流程1.准备好一管有效氯浓度为0.5～1%的次氯酸洗液及一管去离子水。
2.点击菜单栏中的细胞仪，在下拉菜单中点击每日清洗。
3.根据提示，先上次氯酸清洗液，选择清洗时间(常规检测洗3-5min，样本粘性比较大的实验比如周期凋亡等适当延长到6-8min)，然后再选择等时间的去离子水清洗即可。
仪器维护1.每天关机前请参照关机流程完成每日清洗操作。
2.每周一次对于样品台进行清洁。
用有效氯浓度为0.5%左右的漂白水擦拭样品台表面，以及半自动进样器底部。
3.至少每月执行一次深度清洗，或者仪器超过两周未使用时也建议进行深度清洗。
将仪器置于待机模式后，在菜单栏中的细胞仪选项下选择深度清洗，按照提示完成深度清洗即可。
允许清洁溶液留在流动室中约 30 分钟。
如果您需要延长清洁时间，请勿超过 24 小时。
在深度清洁循环期间，该装置的电源可关闭。
仪器清洗瓶中所用的Contrad 70清洗液使用十次或半年一换。
实验流程1.准备好实验样本，了解实验所用的染料特性，选择正确的通道检测。
2.如果之前已经建有相应的实验方案，在导航窗口中点击打开实验，然后打开之前建好的xit格式的实验文件，接着在试管栏中添加新的实验管，上样即可。
CytoFLEX简易操作指南
CytoFLEX简易操作一、检查鞘液桶、废液桶鞘液桶：废液桶：鞘液桶补充足够的鞘液，保证鞘液桶和废液桶，盖子连接完好。
鞘液：仪器运行时电脑右下角图标会显示是否完好：绿色即完好，否则会呈红色，并发出刺耳的警报声。
二、开机（建议最长两周开机一次）1.打开仪器开关（开关按键在仪器左后方）2.打开工作站开关3.打开显示屏开关三、开软件：双击打开“Cy tExpert”软件。
打开后界面如下图所示：四、做液路清洗1、上超纯水2 mL离心管装2/3的超纯水即可，装在上样器上即可。
离心管盖子一定要呈打开状态。
2、执行细胞仪3、开机流程4.确认已将超纯水装进上样器点击“初始化”点击“开始”显示“液路自检”开机流程完成，点击“关闭”。
五、做质控（QC），建议一到两周做一次1、配制QC液1滴beads(用前混匀)+250 微升纯水，涡旋混匀。
（4摄氏度最多保存一周，最好现配现用），配好的QC液，转移到2 mL离心管，装到上样器上，切记保持离心管盖子打开状态。
Beads：不用的时候4摄氏度保存。
2、质控/标准化——启动质控/标准化——设置——靶值库——选择咱们所购买的QC beads批号（新批号导入）。
注：工程师装机时已经导入现有的这瓶QC beads批号，可省略这一步骤。
等买了新的QC beads，需执行此操作。
质控/标准化：启动质控/标准化：靶值库：导入QC批号：左上角为现有的质控微球的批号。
3、待机——初始化——选择批号——开始待机：选择批号：开始：仪器自动按照流程显示进行数据图：4、完成后出现质控报告质控通过，完成。
绿色对勾，即质控通过。
红色叉叉，则质控不通过。
5、质控完成后，执行清洗（利用鞘液清洗进样器口，不用外加鞘液）清洗：清洗位置：六、清洗质控微球质控微球残留在液路中，有可能会影响实验结果，因此需要进行质控微球清洗。
可做FSC*SSC，FITC-A*count，Time*FITC-A的清洗方案，建立一个名为cleanse的方案保存在桌面，方案包含FSC*SSC散点图和直方图，依次（1）蓝色清洗液跑2分钟，需手动停止；（2）超纯水4分钟（一般比蓝色清洗液多两分钟），需手动停止；直到直方图105信号强度左右无信号峰为止，若有峰，继续重复清洗过程。
贝克曼cytoflex参数
贝克曼cytoflex参数
（最新版）
目录
1.贝克曼 cytoflex 简介
2.贝克曼 cytoflex 参数分类
3.贝克曼 cytoflex 参数详细介绍
4.贝克曼 cytoflex 参数的应用领域
5.贝克曼 cytoflex 参数的优缺点
正文
贝克曼 cytoflex 是一款流式细胞仪，广泛应用于生物科学和医学研究领域。
它可以对单个细胞进行快速、准确的测量和分析，为研究者提供大量有价值的信息。
为了更好地了解贝克曼 cytoflex，我们需要对其参数有一个全面的认识。
贝克曼 cytoflex 的参数主要分为以下几个方面：
1.激光器参数：包括激光波长、激光功率等，这些参数决定了流式细胞仪可以检测的细胞类型和检测灵敏度。
2.检测器参数：包括检测器类型、检测器灵敏度等，这些参数决定了流式细胞仪可以检测到的细胞信号的强度和准确度。
3.样品处理参数：包括样品稀释、样品温度等，这些参数影响着流式细胞仪的测量结果的准确性和重复性。
4.数据处理参数：包括数据采集速率、数据存储方式等，这些参数影响着流式细胞仪的测量效率和数据质量。
贝克曼 cytoflex 参数的应用领域非常广泛，包括细胞计数、细胞分类、细胞表面标志物检测、细胞凋亡检测等。
不同的应用领域需要不同的
参数设置，研究者需要根据实际需求进行选择。
贝克曼 cytoflex 参数的优点在于其灵敏度高、测量速度快、数据质量好，可以大大提高研究者的工作效率和研究质量。
然而，其也有一些缺点，如设备价格昂贵、操作复杂、需要专业人员进行维护等。
流式细胞仪使用指南
流式细胞仪流式细胞仪（Flowcytometry）是对细胞进行自动分析和分选的装置。
郑州大学附属洛阳中心医院（中心医院）于2015年6月新引进流式细胞仪，开展流式细胞检测技术，为生物医学与临床检验学发展提供了一个全新的视角和强有力的手段。
什么是流式细胞技术？流式细胞术（Flow Cytometry，简称FCM）是一种快速、准确、客观的同时检测直线流动状态中单个细胞多项物理及生物学特性，加以分析定量的技术。
具有以下优点：①检测速度快，分析样本量大在极短时间内可分析大量细胞，这是流式不同于其他细胞分析仪器的主要特点，可以每秒钟上万个细胞的速率进行测量。
②可检测的样本种类多样各种细胞（如外周血，骨髓，实体组织，悬浮或贴壁培养的细胞），微生物，人工合成微球。
流式细胞仪有哪些组成部分？①液流系统主要形成层流系统，聚集细胞；②光学系统：产生和收集化学信号电子系统；③光信号转化为电信号，进行信号处理。
流式细胞仪在临床上有哪些应用？淋巴细胞是正常机体免疫系统功能最重要的一大细胞群，在免疫应答过程中，未梢血淋巴细胞发育成为功能不同的亚群。
各亚群的数量和功能发生异常时，就能导致机体免疫紊乱并产生病理变化。
FCM可以同时检测一种或几种淋巴细胞细胞表面抗原，将不同的淋巴细胞亚群数量的测定来监控病人的免疫状态，指导治疗。
HLA-B27是在有核细胞上表达的Ⅰ型MHC分子，在淋巴细胞的表面尤为丰富。
根据流行病学统计结果显示，HLA-B27阳性的人患多种遗传性免疫疾病的机率，比一般人要高很多。
如强直性脊柱炎（ankylosing spondylitis，AS）是脊柱及其附属组织的慢性进行性炎性疾病，流式细胞仪便捷，准确的特点可以用来对强直性脊柱炎进行检测与疗效观察。
流式细胞仪在血小板功能评价方面，在白血病，在肿瘤学上也应用。
血液病多种为肿瘤性免疫性和遗传性疾病，但恶性血液病约占一半以上。
FCM在血液病的发病机制，诊断，分类，治疗和预后判断方面都有广阔的应用前景。
cytoflex 体积法绝对计数
cytoflex 体积法绝对计数CytoFlex是Beckman Coulter公司推出的一系列流式细胞仪产品之一。
在流式细胞仪中，绝对计数是指通过仪器测量的细胞数量，而不是相对百分比。
体积法绝对计数是通过在一定时间内（或一定体积内）测量通过激光束的事件来实现的。
在CytoFlex中，体积法绝对计数通常通过以下步骤实现：
1. 设定流速：在流式细胞仪中，细胞以液体悬浮状态通过激光束。
流速是指液体在仪器中流动的速度。
通过调整流速，可以控制每个细胞通过激光束的时间。
2. 设置触发：触发是指在何种条件下记录一个事件。
例如，可以设置在细胞通过激光束时记录一个事件。
触发条件的设置对于准确计数非常重要。
3. 选择测量参数：选择用于细胞计数的参数。
一般会选择一种或多种荧光染料，以便标记或识别感兴趣的细胞。
例如，使用DNA 染料标记细胞核。
4. 记录事件：当细胞通过激光束时，流式细胞仪会记录一个事件，并根据设置的触发条件记录相应的参数，如荧光强度。
5. 计算绝对计数：利用已知的流速和测得的事件数，可以计算出每个细胞的体积。
通过将测得的细胞数量除以体积，就可以得到绝对计数。
体积法绝对计数通常对于需要精确知道样本中细胞数量的实验非常有用，例如细胞计数、细胞增殖、细胞周期等研究。
在进行这类
实验时，确保仪器的设置和参数选择正确非常重要，以获得准确的绝对计数。
流式细胞仪使用方法
流式细胞仪使用方法
流式细胞仪是一种高效、精准的细胞分析仪器，广泛应用于生物、医学、生态等领域的细胞研究和诊断。
使用流式细胞仪需要以下步骤： 1. 准备样品：将待测细胞或颗粒悬浮在缓冲液中，并且使细胞均匀分散。
2. 调整流速：根据样品大小和含量调整流速。
样品含量高时要降低流速，避免流速过快造成信息遗漏。
3. 线性校准：使用荧光染料或粒子标准品进行线性校准，以保证数据准确性。
4. 过滤样品：使用0.22微米孔径过滤器过滤样品，去除悬浮在样品中的大颗粒。
5. 调节光源：根据样品的荧光信号选择合适的激光波长和强度。
6. 数据分析：通过流式细胞仪软件对数据进行分析和处理，得到所需结果。
需要注意的是，使用流式细胞仪时要注意样品的保存和保护，避免细胞损伤和阳性信号污染。
此外，操作过程中要认真阅读说明书，遵循标准操作程序，确保实验结果的准确性和可靠性。
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3. 验证 USB 配置密钥已连接至 USB 端口。
注意
可能会出现仪器损坏。从流体容器托架取下鞘液容器，并且远离仪器进行充 注，以防止鞘液溢出损坏仪器电路。
4. 从流体容器托架取下鞘液容器，并用提供的鞘液填充鞘液容器。 5. 如有必要，拆下右侧盖子，并填充带有 1 部分 Contrad 70 和 1 部分 DI 水混合的深度清
CytoFLEX 流式细胞分析仪快速入门 启动
2. 请确保所有管线和电缆根据颜色代码连接至仪器。
b
c
d 1. 废液液位传感。与废液传感器电 缆相连。 2. 流动室废液排出。与流动室废液 导管相连。 3. 鞘液液位传感。与鞘液传感器电 缆相连。 4. 废液排出。与废液导管相连。 5. 鞘液回流。与鞘液导管相连。 6. 鞘液流入。与鞘液导管相连。
洁溶液。
警告
漂白剂具有化学伤害危险。为避免接触漂白剂，请使用包括防护眼镜、手套和 适当的实验室服装在内的屏障保护。使用化学药品前，请参阅有关化学品暴露 的安全数据表以了解详细信息。
6. 如有必要，清空废液容器。将 400 mL 5% 至 6% 的漂白剂添加至废液容器。
仪器启动
1. 打开仪器后盖上的电源开关，它位于电源电缆正上方。
8. 使用“阈值”工具 ，或选择
9. 使用“标尺”和“增益”工具 至所需位置。
设置辨别以消除图上不需要的细胞群。
，或选择
以将图上显示的细胞群移动
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CytoFLEX 流式细胞分析仪快速入门 调节设置和补偿
调节设置和补偿
“图表”、“门控”和“统计资料”管理
1. 若要修改图表、门控、统计表或细胞群层级属性，请选择该图表并右击以选择属性 选项。参见以下示例。 • 图表属性 （右击门控）
4. 请熟悉工具栏。
图形 统计资
料 层级
5. 利用“图表”工具
门 缩放 标尺
增益 阈值 撤消/恢复
新建所需直方图或点状图。
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CytoFLEX 流式细胞分析仪快速入门 数据采集
6. 设置所需样品流速，然后选择“采集”面板上的
，以起动激光器和流体。
7. 将样品管装入样品端口，然后选择
以开始采集和显示数据。
重要 对于每个新批次编号，下载对应的目标值文件，并参考步骤 2.
4. 使用屏幕左侧的批次编号-下拉列表 球对应的批次编号。
，选择与 QC 荧光微
5. 选择 始 QC。
，将已准备的 QC 样品试管插入样品试管托架，然后选择
以开
注释 QC 可能需要数分钟。QC 荧光微球的最低流速为 100 事件/秒。一旦完成，结果就会自动
仪器 QC
重要 验证检测仪配置。确保已为 QC 实验进行正确的仪器设置。若选择了错误设置，则 QC 实验
不能完成或会出现错误结果。Beckman Coulter 建议您使用出厂配置，并确保滤光片放在适当 位置。
1. 选择 QC 菜单中的启动 QC。“采集”屏幕现在换成了 QC 屏幕。
注意
可能会出现错误的 QC 结果。不同的批次编号对应不同的目标值信息。选择错 误的批次编号会导致错误的 QC 结果。
2. 确保可在“批次编号”下拉菜单中选择“QC 荧光微球批次编号”。如果批次编号不可选， 输入特定批次的目标值文件。参见第 4 章“CytoFLEX 流式细胞分析仪使用说明”中的“导 入特定批次-的目标值”。
3. 在 75-mm 的试管中添加 3 滴 Beckman Coulter 公司提供的 QC 荧光微球和 1 mL DI 水以制 备 QC 样品。
• 门控属性 （右击门控）
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• 统计表 （右击统计表）
CytoFLEX 流式细胞分析仪快速入门 调节设置和补偿
• 细胞群层级
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CytoFLEX 流式细胞分析仪快速入门 调节设置和补偿
2. 若要修改图表上的标尺范围，请利用“放大/缩小”工具或平移工具以确定图表上显示 细胞群的区域，或在图表轴附近双-击以查看“图表属性”对话框。
显示并保存。
• 结果部分的绿色图标 • 结果部分的红色图标
表明通过。 表明失败。
6. 若 QC 失败，请充注仪器、初始化并重复操作 QC。
注释 若 QC 同一天连续失败两次，请联络 Beckman Coulter 代表。
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CytoFLEX 流式细胞分析仪快速入门 数据采集
数据采集
创建实验
1. 选择 CytExpert 桌面图标
以打开软件。
2. 在“开始”页面，选择新实验或模板中的新实验以开始新实验，或选择打开实验以继续现 有实验。
注释 模板包含有关硬件和软件设置 （包括使用的通道、增益设置、流速和停止标准）的信
息。
或者，从“文件”菜单选择新实验，模板中的新实验或打开实验。
3. 若未新建试管，请利用“试管工具栏”按钮创建新试管。若要修改试管属性，请高亮试 管名称，然后选择位于“采集”屏幕底部左侧的 。
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1. 显示器 2. 鼠标 3. 键盘 4. 计算机 5. 细胞分析仪 6. 流体容器托架
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© 2015 Beckman Coulter, Inc.
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2. 登录计算机，双-击 以启动 CytExpert。 a. 确保靠近显示器左下方的状态栏上的连接图标为绿色。
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b. 若图标不是绿色，确保仪器 USB 牢固地连接至计算机，并重新启动计算机。 3. 从“细胞分析仪”菜单中选择系统启动程序，并遵循软件提示。
CytoFLEX 流式细胞分析仪快速入门 仪器 QC
B49009AC 2015 年 2 月
CytoFLEX 流式细胞分析仪快速入门
有关详细说明，请参阅 CytoFLEX 流式细胞分析仪使用说明。 仅限研究用。不用于诊断程序。
工作流程
启动
Ô
QC
Ô
创建实验
Ô
调节仪器设置和 补偿
Ô
记录数据 Ô
关闭
启动
仪器准备
1. 确保所有系统连接正确连接。
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CLASS 1 LASER PRODUCT COMPLIES WITH 21 CFR 1040.10 AND 1040.11 EXCEPT FOR DEVIATIONS PURSUANT TO LASER NOTICE NO. 50 DATED JUNE 24, 2007 MANUFACTURED