09 离心技术

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第十章---离心技术2009

第十章---离心技术2009
受到的向外的力。离心力(Fc)的大小等于离心 加速度ω2r与颗粒质量m的乘积,即:
F=mω2r
2、相对离心力(relative centrifugal force,RCF):
由于各种离心机转子的半径或者离心管至旋转轴中心的距 离不同,离心力而受变化,RCF就是实际离心场转化为重 力加速度的倍数。
RHale Waihona Puke F 4 2N2rm沉淀(核糖核蛋白体)
上清液(可 溶性组分)
用于分离大小、形状显著不同的组分,根据颗粒沉降速度 不同得以分离。
特点:
• 优点:操作简易,离心后用倾倒法即可将上清液与沉淀 分开,并可使用容量较大的角式转子。
• 缺点是:须多次离心,沉淀中有夹带,分离效果差,不 能一次得到纯颗粒,沉淀于管底的颗粒受挤压,容易变性失 活。
18
四、沉降系数
在单位离心力场中,颗粒的沉降速度谓 之“沉降系数”。
S d 2 o
2
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五、沉降时间 六、转子常数 七、分子量计算
M SRT
D1
0

八、离心机
(一)离心机的分类
1.按转速高低及是否有冷冻来分 (1)普通离心机,小于6000rpm (2)高速离心机,8000-25000rpm (3)超速离心机,25000-80000rpm 2.按结构分类 (1)台式离心机 (2)立式离心机 (3)沉降式离心机 (4)转头式离心机 (5)电动式离心机
水平转子
离心管装在转头的吊 桶里,离心时离心管与旋 转轴垂直。其最大速度Vmax = 65,000rpm,最大离心力 400000g。
区带转子(又称Anderson):
• 区带转头的构造是由旋转钵、带有四个翼的转头心和密封 装置等部件组成。

离心技术

离心技术

离心技术离心技术是根据颗粒在匀迷圆周运动时受到一个外向的离心力的行为发展起来的一种分离分析技术。

1.用于工业生产的,如化工、制药、食品等工业大型制备用的离心技术,转速都在每分钟5000转以下。

2.用于生物、医学、化学等实验室分析研究的,转速从每分钟几千到几万转以上,此类技术的使用目的在于分离和纯化样品,以及对纯化样品的有关性能进行研究。

一、基本原理1.离心力Centrifugal force (F)F=mω2rω:旋转角速度(弧度/秒) r:旋转体离旋转轴的距离(cm)m:颗粒质量2.相对离心力Relative centrifugal force (RCF)RCF 就是实际离心力转化为重力加速度的倍数RCF=F离心力/F重力= mω2r/mg= ω2r/gg为重力加速度(980.70g/sec2)同为转于旋转一周等于2π弧度,因此转子的角速度以每分钟旋转的次数(每分钟转数n 或r/min)表示:一般情况下,低速离心时常以r/min来表示,高速离心时则以g(或数字Xg)表示。

用“X g”表示每分钟转速可以真实反映颗粒在离心管不同位置的离心力。

Dole&Cotzias 制作了转子速度和半径相对应的离心力列线图(图2—15)。

3.沉降系数Sedimentation coefficient (S)当转子内样品绕着旋转轴离心时,样品沉降率是由样品颗粒的大小、形状、密度和溶剂的粘度、密度以及离心加速度决定的,在一般情况下,样品的沉降特征可以用沉降系数来表示:S:是指单位离心场中粒子移动的速度。

S的物理意义是颗粒在离心力作用下从静止状态到达等速运动所经过的时间。

S在实际应用时常在10-13秒左右,故把沉降系数10-13秒称为一个Svedberg单位,简写S,单位为秒,1S二1×10-13秒。

对一定的样品,在一定的介质中,样品沉降系数S 也常保持不变。

文献中常用沉降系数以描述某些生物大分子或亚细胞器大小。

医学离心技术

医学离心技术

医学离⼼技术摘要:离⼼技术在⽣物科学,特别是在⽣物化学和分⼦⽣物学研究领域,已得到⼗分⼴泛的应⽤,每个⽣物化学和分⼦⽣物学实验室都要配置各种型式的离⼼机。

离⼼技术主要⽤于各种⽣物样品的分离和制备,⽣物样品悬浮液在⾼速旋转下,由于巨⼤的离⼼⼒作⽤,使悬浮的微⼩颗粒(细胞器、⽣物⼤分⼦的沉淀等)以⼀定的速度沉降,从⽽与溶液分离,⽽沉降速度取决于样品的质量、⼤⼩和密度。

关键词:离⼼技术应⽤发展中药研究新型离⼼技术离⼼技术(centrifugal technique)是根据颗粒在作匀速圆周运动时受到⼀个外向的离⼼⼒的⾏为⽽发展起来的⼀种分离技术。

这项技术应⽤很⼴,诸如分离出化学反应后的沉淀物,天然的⽣物⼤分⼦、⽆机物、有机物,在⽣物化学以及其它的⽣物学领域常⽤来收集细胞、细胞器及⽣物⼤分⼦物质。

⼀、离⼼技术分类根据离⼼原理,按照实际⼯作的需要,⽬前已设计出许多离⼼⽅法,综合起来⼤致可分三类。

1.平衡离⼼法根据粒⼦⼤⼩、形状不同进⾏分离,包括差速离⼼法(differential velocity centrifugation)和速率区带离⼼法(rate zonal centrifugation)。

[1]2.等密度离⼼法(jsopycnic centrifugation)⼜称等⽐重离⼼法,依粒⼦密度差进⾏分离,等密度离⼼法和上述速率区带离⼼法合称为密度梯度离⼼法。

[2]3.经典式沉降平衡离⼼法⽤于对⽣物⼤分⼦分⼦量的测定、纯度估计、构象变化等。

差速离⼼法、速率区带离⼼法、等密度离⼼法是制备超速离⼼法的三种⽅法。

[3] (⼀)差速离⼼法它利⽤不同的粒⼦在离⼼⼒场中沉降的差别,在同⼀离⼼条件下,沉降速度不同,通过不断增加相对离⼼⼒,使⼀个⾮均匀混合液内的⼤⼩、形状不同的粒⼦分部沉淀。

操作过程中⼀般是在离⼼后⽤倾倒的办法把上清液与沉淀分开,然后将上清液加⾼转速离⼼,分离出第⼆部分沉淀,如此往复加⾼转速,逐级分离出所需要的物质,常⽤于其他分离⼿段之前的粗制品提取。

离心技术原理

离心技术原理

离心技术原理
离心技术是一种常用的分离方法,它基于物质在离心力作用下的不同沉降速度来实现分离目的。

离心技术的原理主要涉及两个方面:离心力和沉降速度。

首先,离心技术利用离心机产生的离心力来加速分离物质。

离心机通常由一个旋转的容器和一个电动机组成。

当电动机启动时,容器以高速旋转。

由于离心力是与旋转速度的平方成正比的,因此高速旋转能够产生强大的离心力。

离心力是指物体在旋转运动中受到的离心加速度,它的作用是将物质向外推离离心轴线。

离心机的设计目的是使离心力尽可能均匀地作用于容器内的物质,以实现有效的分离效果。

其次,离心技术利用不同物质的沉降速度来实现分离。

沉降速度是指物质在液体中下沉的速度,它取决于物质的密度、形状和粒径等因素。

在离心过程中,由于离心力的作用,密度较大或较大颗粒的物质会沉降得更快,而密度较小或较小颗粒的物质则沉降得较慢。

通过调整离心机的转速和离心时间,可以控制不同物质的沉降速度,从而实现物质的分离。

总之,离心技术利用离心力和物质的沉降速度来实现分离。

离心机通过旋转产生离心力,将物质分离为不同的组分,使得密度大的物质向外沉降,密度小的物质留在上层。

离心技术在生物医学、化学、环境等领域具有广泛的应用,例如可用于细胞分离、DNA提取、蛋白质纯化等。

离心技术

离心技术

离心技术离心技术是利用离心力,依据物质的沉降系数、扩散系数和浮力密度的差异而进行物质的分离、浓缩和分析的一种专门技术。

各种离心机是实现其技术目的的仪器保证。

离心技术是利用离心力,依据物质的沉降系数、扩散系数和浮力密度的差异而进行物质的分离、浓缩和分析的一种专门技术。

各种离心机是实现其技术目的的仪器保证。

离心技术就其原理来说属于一种物理的技术手段,目前在农业、医药、食品卫生、生物制品、生物工程、细胞生物学、分子生物学和生物化学等诸多领域里得到了广泛的应用,使离心机,尤其是超速离心机已成为现代生物化学实验室中不可缺少的必备设备。

为了满足生产、科研和教学的不同需要,不同类型、不同规格和不同用途的离心机应运而生,且随着整个科学技术的发展不断地得到改进、提高和更新。

现将离心机分类如下:1.不同类型的离心机不仅具有不同的构造,而且具有不同的应用范围。

普通离心机的最大转速在10000 rpm以下,最大相对离心力小于10000×g,容量从几十毫升至几升,分离形式是固液沉降分离,转子有角式和外摆式,其转速不能严格控制,通常不带冷冻系统,于室温下操作。

这种离心机多用交流整流电动机驱动,电机碳刷易磨损,转速由电压调压器调节,起动电流大,速度升降不均匀,一般转头是置于一个硬质钢轴上,因此离心前精确平衡离心管及其内容物极为重要,否则易造成的离心机损坏。

在现代实验室中,普通离心机通常在下列情况下用于物质的分离和提取:(1)沉淀有粘滞;(2)沉淀颗粒小,容易透过滤纸;(3)沉淀量过多而疏松;(4)沉淀量过少,而需要定量分析;(5)母液粘稠;(6)母液量很少,分离时需减少损失;(7)沉淀和母液需迅速分离;(8)一般胶体溶液。

高速离心机能够对样品溶液中的悬浮物质进行高纯度的分离、浓缩、精制和提取,多用于血液、细胞、蛋白质、酶、病毒、激素等的分离制备。

超速离心机目前主要用于:(1)测定生物大分子和高分子聚合物的沉降系数(S)、扩散系数(D)和分子量(M);(2)研究生物大分子的大小和形状;(3)研究生物大分子的缔合、离解和降解;(4)追随分离高分子的提纯过程,鉴定其均一程度,测定其组成和浓度;(5)分离提纯血清脂蛋白;(6)发现异常血清蛋白质成分等。

离心技术的名词解释

离心技术的名词解释

离心技术的名词解释离心技术是一种常见于工程及实验室等领域的物理过程,通过利用离心力来实现物质分离、纯化或者精细加工等目的。

它借助离心力将混合物中的不同成分分开,以达到提取或分离特定目标物质的目的。

离心技术被广泛应用于生物医药、化学工程、食品加工等多个领域,企业和研究机构常常将其作为一种重要的实验工具。

离心技术的原理在于利用旋转的离心机产生的离心力驱使物质在离心机的管道或离心机具中旋转,通过离心力的作用将混合物中的纯化目标物质或者杂质分离出来。

离心力的大小依赖于物体离旋转轴线的距离和旋转速度,而离心技术的应用则需要根据目标物质的特性以及实验所需的纯度、产量和分离效率等因素来确定旋转速度和离心时间。

离心技术的应用十分广泛。

在生物医药领域,离心技术常用于细胞分离、血液分离、蛋白质纯化等。

例如,细胞培养中,通过离心技术可以将培养液中的细胞与培养基分离,以用于进一步的实验或制备纯净的细胞样本。

在血液分离中,离心技术被用于将红细胞、白细胞和血浆分离开来,以满足不同的临床需求。

另外,在蛋白质纯化中,离心技术可以去除蛋白质混合物中的细胞碎片、脂质和其他杂质,从而提供更纯净的蛋白质样品。

在化学工程领域,离心技术的应用也非常广泛。

例如,在有机合成中,离心技术可以将反应产物与反应溶剂分离,以便进行下一步的处理或纯化。

在制药工业中,离心技术被用于分离药物原料中的杂质,提高药物的纯度和效果。

另外,离心技术还可以应用于废水处理、催化剂的回收等领域,以实现资源的高效利用和环境保护。

离心技术在食品加工行业也有重要的应用。

例如,在酿酒过程中,离心技术可用于分离发酵液中的酒糟和酒液,提高酒品质量。

在乳制品加工中,离心技术可用于分离乳脂和乳清,以便生产黄油、奶油、乳清蛋白等产品。

此外,在果汁生产中,离心技术被用来除去果汁中的果渣和杂质,提高果汁的质量和口感。

综上所述,离心技术是一种利用离心力实现物质分离、纯化或者精细加工的技术。

它在生物医药、化学工程和食品加工等多个领域都发挥着重要的作用。

离心技术

离心技术

所以 rpm = 1000 RCF 11.2r
利用此公式可以进行相对离心力和转数的计算,例如:已 知 一 个 离 心 机 转 头 的 半 径 r=254mm (25.4cm), 速 度 rpm=4200, 求RCF?
根据公式 RCF = 11.2r(rpm 1000)2
RCF = 11.2 25.4 (4200 1000)2 = 5018g
二级真空系统。这种泵的真空度可达133.322 10-3pa
3.3.4光学系统:
a 转头识别:通过离心腔内的光学扫描系统,对安装的转 头进行扫并把扫描的信号与本机设定的转头比较以此识别 。 b测速:通过转头底黑白相间的花边进行测定, c沉降带检测:通过光学系统将运行中的离心状态显示出 来。
3.3.5控制系统: 控制系统是离心机的指挥中心。 a速控:包括设速、测速、控速等 设速:是在离心前设定离心时所需速度。 测速:在离心机启动后通过光电检测器测定运行的真实 速度 控速:包括提速、恒速、限速、减速等。 b温控:包括制冷启动、恒温、加温除霜
4转头的基本参数与性能
4.1转头K因子:
转头K因子是转头的常数,它表示转头大小和转速之间的关系。出 厂时就被标定了,以表示每个转头的分离性能。用公式表示为: (rmax/rmin ) S=2.533 1011ln──── (rpm)2.T S:表示颗粒的沉降系数(单位:Sec) rmax:为转头最大半径(单位:cm) rmin:为转头最小半径(单位:cm) rpm:为转头的允许速度(单位:转/分)
超速离心
1概述 2离心的基本理论 3离心机的分类与构造 4转头的基本参数与性能 5离心技术 6安全操作与离心机的保养
1概述
1.1离心技术过程的发展

离心技术(课件)

离心技术(课件)

离心技术概述离心技术的基本原理离心机的主要构造和类型制备性超速离心的分离方法密度梯度液的选择分析型超速离心机离心操作的注意事项第一节概述一、离心技术的概念离心技术是根据一组物质的密度和在溶液中沉降系数不同(浮力不同),用不同离心力使其从溶液中分离、浓缩和纯化的方法。

二、离心技术的应用分离出化学反应后的沉淀物,天然的生物大分子、无机物、有机物,在生物化学以及其它的生物学领域,常用来收集细胞、细胞器及生物大分子物质。

第二节离心技术的基本原理一、离心力(F)F = m·a = m·ω2 r a —粒子旋转的加速度,m —沉降粒子的有效质量ω—粒子旋转的角速度,r—粒子的旋转半径( cm )二、相对离心力(RCF)RCF 就是实际离心力转化为重力加速度的倍数RCF=F离心力/F重力=mω2r/mg=ω2r/g g为重力加速度(980.7cm/sec2)在离心管的不同部位距旋转中心轴的距离也不同,那么在一定的转速下其RCF值也各不相同三、沉降系数(S) S是指单位离心场中粒子移动的速度。

S在实际应用时常在10-13秒左右,故把沉降系数10-13秒称为一个Svedberg单位,简写S,量纲为秒。

通过分析型离心机可以测得某种悬浮颗粒或生物高分子的沉降系数沉降系数S的两个重要用途1、预计沉降时间对已知S值的物质,可计算出在离心管中完成沉降所需要的时间2、测定物质分子质量由测得的某物质的沉降系数,可计算出其分子质量:四、沉降时间Ts第三节离心机的分类和结构一、离心机的分类1、按工作原理分为制备型(用于分离)和分析型2、按离心速度分为:普通<6000 rpm,6000g高速离心机<25000rpm,<89000g超速离心机>25000rpm,(最大85000rpm,600,000g)3、按特殊用途分为大容量、低温冷冻、立式台式、连续流动式。

二、离心机的结构1、转动装置:超速离心机主要由驱动和速度控制、温度控制、真空系统和转头四部分组成。

(参考资料)离心技术

(参考资料)离心技术
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一.离心技术 (Centrifuge)
利用溶液中颗粒密度、大小等特性,用旋转产生的 离心力使不同特性颗粒从溶液中分离并沉降,从而 达到分离、浓缩、提纯和鉴定的目的,称为离心技 术。
* 分离细胞或其他的悬浮颗粒;
* 从组织或细胞匀浆中分离细胞器; * 分离病毒和大分子,包括DNA、RNA、蛋白质和脂类。
特点: 密度梯度介质,且密度较低,
介质的最大密度应小于被分离生物颗粒的最 小密度( p> m )。
离心时间(t),不能使所有颗粒都沉到管底。
24
密度梯度离心-等密度梯度离心法
(isodensity centrifugation)
原理:离心时采用包括各种颗粒密度范围的梯度介质, 被分离颗粒达到与其相同的密度介质时不再移动,形成 一系列区带,然后从管底收集。
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密度梯度离心-移动区带离心法
(moving-zone centrifugation)
原理:用梯度蔗糖或甘油作为介质,将 要分离的样品放在介质表面,形成一个 狭带,然后超速离心,使不同密度的颗 粒以不同的速度向管底方向移动,形成 一系列区带,从管底小孔中分次收集各 种颗粒成分。
23
用途: 分离有大小和密度差异的细胞或细胞器。
dx/dt
s(秒)=
= 2r2(p- m)
w2x
9
dx: 颗粒与转轴中心的距离 r: 颗粒直径
dt:颗粒沉降所需时间
w: 角速度 X: 转子半径
p : 颗粒密度 m : 溶液介质密度 : 溶液介质粘度
S =1×10-13s
8
决定沉降速度的因素:
颗粒大小;颗粒密度;溶液介质密度和粘度
9
2.相对离心力(RCF):重要指标

离心技术

离心技术

36
甩平式转头 36,000
5×5
55
垂直管转头 100,000 8×5
<2
近垂直管转头 78,000
8×5
4
效果 较好
好 较好

离心管
塑料离心管:聚乙烯(PE)管,纤维素(CAB) 管,聚碳酸酯(PC)管,聚丙二醇酯(PP)管 等。
不锈钢离心管
离心方法介绍及举例
沉淀离心 差速分级离心 密度梯度离心 淘洗离心 连续流离心






600 rpm



垂直转头(vertical tube rotor)
垂直转头:是指离心管与旋转轴成平行方向。当 转头旋转时,离心管中的液体层改变方向,与旋 转轴成垂直方向。当离心结束后,液层又随转速 的降低慢慢恢复原位。
承受的最大离心速度在100, 000 r/min左右,最大 离心力在700, 000g 。
近垂直管转头 超速 连续离心转头 低、高、超速
1989年,(日)Hitachi Koki;(美) Beckman公司
1965年,(英)MSE公司
角转头(angle rotor)
角转头:离心管放置的位置与转头的旋转轴之间 成一个固定角度,通常在14-40℃之间。 承受的最大离心速度在100,000 r/min,最大离心 力可达800,000 × g。 适用于差速离心,也可用于等密度离心。 特点:容量大,转头内容纳的离心管多。
1955年,Anderson发明了区带转头,并用区带离 心法首次证明了DNA双螺旋结构半保留复制的假说;
1955年以后,开始了超速、高速、低速大容量离 心机以及分析用超速离心机的商品化生产;

离心技术名词解释

离心技术名词解释

离心技术名词解释
离心技术是根据物质颗粒在做匀速圆周运动时受到外向的离心力的行为而发展起来的一种分离技术。

当物体围绕一中心轴做圆周运动时,运动物体就受到离心力的作用,旋转速度越高,运动物体所受到的离心力越大。

如果装有悬浮液或高分子溶液的容器做高速水平旋转,强大的离心力作用于溶剂中的悬浮颗粒或高分子,会使其沿着离心力的方向运动而逐渐背离中心轴。

在相同转速下,容器中不同大小的悬浮颗粒或高分子溶质会以不同的速率沉降,经过一定时间的离心操作,就有可能实现不同悬浮颗粒或高分子溶质的有效分离。

在生命科学研究中广泛使用的离心机,就是基于上述基本原理设计的。

这项技术应用很广,诸如分离出化学反应后的沉淀物、天然的生物大分子以及细胞、细胞器等。

离心技术

离心技术

主要用于样品作密度梯度离心,如用于线粒体、 叶绿体、细胞核等的分离和密度梯度离心。
3、区带转子 区带转头无离心管,主要由一个转子桶和可旋开 的顶盖组成,转子桶中装有十字型隔板装置,把 桶内分隔成四个或多个扇形小室,隔板内有导管, 梯度液或样品液从转头中央的进液管泵入,通过 这些导管分布到转子四周。 分离效果好 转速高 容量大 回收梯度容易 不影响分辨率
Dole和Cotzias制作了与离心机转子速度和半径相对 应的RCF的列线计算图
将离心机转数换算 为RCF时,首先,在 标尺上取已知的 和 在r/min标尺上取已 知的转数,然后, 将两点间划一条直 线,在图中间RCF标 尺上的交点即为相 应的RCF(g)。
半径 RCF 转速 r/min
二、浮力
电动机 转子 驱动和速度控制 温度控制 真空系统 20000~25000rpm 50000~80000 rpm 89000×g 510000×g
容量
几十毫升至 几升
3升
几十毫升至2升
三类制备性离心机的比较
特性 低速离心机 高速冷冻离心机 超速离心机 差速沉降分离 和密度梯度区 带分离 分离形式 固液沉降分离 固液沉降分离
应用及特点 差速离心法适用于大小和密度相差较大、不稳 定、易变性、易受梯度介质损伤的颗粒。 差速离心的分辨率不高,沉淀系数在同一个数量 级内的各种粒子不容易分开,常用于其他分离手 段之前的粗制品提取。
应用及特点 优点
操作简单 可使用容量较大的角式转子 分离时间短、重复性高 样品处理量大
2. 生物、医学、化学
转速从每分钟几千到几万转以上,目的在
于分离和纯化样品,以及对纯化的样品有关性能进
行研究。
第一节
离心分离的基本原理

超现代实验技术:离心技术

超现代实验技术:离心技术

超速离心技术超速离心技术是利用物质的沉降系数、浮力、质量等方面的差异,利用强大的离心力场,使样品中的混合物得以分离、浓缩、纯化和鉴定的技术。

离心技术现在已经成为分子生物学和生物化学研究中不可缺少的一项重要技术。

离心技术可分为制备型和分析型两类。

在生物学领域可以利用这种方法,分离提取各种细胞及其亚细胞物质,如细胞膜、细胞核、染色体、线粒体、叶绿体、溶酶体、核蛋白体等。

也可以鉴定蛋白质、酶及核酸的纯度。

处理的样品可多可少,少至0.2mL以下。

离心技术的范围相当广泛.目前,利用这种技术分离各种亚细胞物质、酶、病毒、质粒及各种核酸.因此,为分子生物学、生物化学和医学的发展,提供了有利的手段。

自从1926年瑞典物理学家Svedberg制成世界上第一台超速离心机(45000转/分)到现在已有快80年的历史,在这期间,离心机的发展是非常迅速的.特别是在50年代以后发展的更快,例如,美国贝克曼(Beckman)公司和杜邦苏凡尔(Dupont Sorvall)公司,英国测量科学设备公司(MSE),日本的日立(HITACHI)公司以及德国的海吕斯(Heraeus)公司,都生产出各种离心机产品,如普通离心机、高速离心机和超速离心机.从简单的低速高容量的制备离心机到用于精密分析的超速离心机,应有尽有。

美国贝克(Beckman)公司的超速离心机居世界领先地位,采用了大规模集成电路,计算机程序控制,分离-检测,全部实现自动化;最高转速可达13多万转/分钟,并配有各种型号的垂直转头、水平转头、固定角转头、区带转头、连续转头等,供用户选用,不但操作简单、节省时间,而且进一步提高了的分离效率。

此外,离心技术也有了很大的发展,有密度梯度离心技术和区带离心技术,为生物大分子的分离、纯化和鉴定提供了优越的手段。

虽然离心机的种类有多种,离心技术也多种多样,但是它们的工作原理基本相似。

在实际工作中用的最多的还是制备型离心。

本课程主要介绍制备型分离技术。

第二章 离心技术

第二章 离心技术

2017/11/26
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4、碳素转头 碳素纤维被誉为“黑色黄金”,由碳元素组成的一 种特种纤维 ,具有耐高温、耐腐蚀、超轻等优点。它 是继石器和钢铁等金属后,被国际上称之为“第三代材 料”。
特点:
A、质量轻,有利于提速; B、耐腐蚀在偏酸性或偏碱性的溶液中均可使用; C、机械强度高,加工容易;
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(4)介质的摩擦力 颗粒在溶液中运动时受到流体的反向阻力称为介质的摩擦 力(Friction)。根据Stoke定律,球形颗粒在溶液中运动时
所受的介质的摩擦力的大小为:
Ff = 6π· η· rp· v
η 为介质的黏滞系数;rP为球形颗粒的半径;v为 球形颗粒在介质中的移动速度
2017/11/26
D、使用寿命长,价格昂贵。
(二)转头的主要参数 1、最大转速 转头的抗拉强度是有限的,与转头的类型、构造 和材料有关 2、最大离心力 3、最大容量
每个转头中容纳离心管数乘以离心管的最大体积
就是该转头的最大容量。
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容量越大,转头越大,转速越低。
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四、离心管的性能及选择
(一)玻璃离心管 绝对不能在高、超速离心机上使用。 (二)塑料离心管
201720171111303036364垂直转头样品颗粒的沉降距离最短离心所需时间也短适合用于密度梯度区带离心离心结束后液面和样品区带要作九十度转向因而降速201720171111303037375连续流动转头用于大量培养液或提取液的浓缩与分离转头与区带转头类似由转子桶和有入口和出口的转头盖及附属装置组成离心时样品液由入口连续流入转头在离心力作用下悬浮颗粒沉降于转子桶壁上清液由出口流出
2017/11/26

离心技术的应用综述

离心技术的应用综述

离心技术的应用综述离心技术(centrifugal technique)是根据颗粒在作匀速圆周运动时受到一个外向的离心力的行为而发展起来的一种分离技术。

这项技术应用很广,诸如分离出化学反应后的沉淀物,天然的生物大分子、无机物、有机物,在生物化学以及其它的生物学领域常用来收集细胞、细胞器及生物大分子物质。

一、基本原理的分类(一)基本原理⒈离心力(centrifugal force,Fc)离心作用是根据在一定角度速度下作圆周运动的任何物体都受到一个向外的离心力进行的。

离心力(Fc)的大小等于离心加速度ω2X与颗粒质量m的乘积,即:其中ω是旋转角速度,以弧度/秒为单位;X是颗粒离开旋转中心的距离,以cm为单位;m是质量,以克为单位。

⒉相对离心力(relative centrifugal force,RCF)由于各种离心机转子的半径或者离心管至旋转轴中心的距离不同,离心力而受变化,因此在文献中常用“相对离心力”或“数字×g”表示离心力,只要RCF值不变,一个样品可以在不同的离心机上获得相同的结果。

RCF就是实际离心场转化为重力加速度的倍数。

式中X为离心转子的半径距离,以cm为单位;g为地球重力加速度(980cm/sec2);n为转子每分钟的转数(rpm)。

在上式的基础上,Dole和Cotzias制作了与转子速度和半径相对应的离心力的转换列线图,见图16-4,在用图16-4将离心机转数换成相对离心力时,先在离心机半径标尺上取已知的离心机半径和在转数标尺上取已知的离心机转数,然后将这两点间划一条直线,在图中间RCF标尺上的交叉点,即为相应的离心力数值。

例已知离心机转数为2500rpm,离心机的半径为7.7cm,将两点连接起来交于RCF标尺,此交点500×g即是RCF值。

⒊沉降系数(sedimentation coefficient,s)根据1924年Svedberg 对沉降系数下的定义:颗粒在单位离心力场中粒子移动的速度。

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碟片式离心机
B、喷嘴排渣碟片离心机
操作:连续式 操作: 应用: 应用: 多用于悬浮液的浓缩。 主要技术参数: 主要技术参数: A、固体浓度<25% ; 、固体浓度<25% B、颗粒d为0.1-100um; 、颗粒d 0.1-100um; C、转鼓直径达900mm; 、转鼓直径达900mm; D、喷嘴2-24个,直径0.5-3.2mm; 、喷嘴2 24个,直径0.5-3.2mm; E、浓缩比达5-20。 、浓缩比达5 20。 常用于抗生素、酶、氨基酸、酵母、淀粉、微生物 或单细胞蛋白质等
若采用具有密度梯度的液体介质,则可更精密地分离组分。 ☆粒子形状不同,沉降速度不同→研究大分子构象
二、超速离心技术分类
1.分析超速离心技术 1.分析超速离心技术 ——相对分子质量的测定← ——相对分子质量的测定←S 蛋白质 核糖核酸酶 血红蛋白 脲酶 Mr 13683 68000 480000 1.64 4.54 18.60 S
概述
离心技术:利用转鼓高速转动所产生的离心力来实 现悬浮液、乳浊液的分离或浓缩的分离技术。
离心分离原理:相对密度差;沉降系数、 离心分离原理:相对密度差;沉降系数、质量及浮力等因子的不同
主要用于固液、液液分离过程
离心沉降 离心过滤 离心分离 和超离心
利用固液两相的 无孔转鼓 悬浮液 相对密度差 或管子 利用离心力并通 有孔转鼓 悬浮液 过过滤介质 利用不同溶质颗 无孔转鼓 不同相对 粒在溶液各部分 或管子 密度液体 分布的差异
——用于线粒体 、 微粒体、 溶酶体 、 病毒、 DNA、 RNA、 —— 用于线粒体、 微粒体 、 溶酶体、 病毒 、 DNA 、 RNA 、 蛋白质等的分离纯化、纯度的检测、 蛋白质等的分离纯化、纯度的检测、沉降系数和相对分子 质量的测定等。 质量的测定等。 ——超离心法是现代生物技术领域研究中不可缺少的实验室 ——超离心法是现代生物技术领域研究中不可缺少的实验室 分析和制备手段。 分析和制备手段。 超离心技术中由于使用的离心机类型是无孔转鼓,所以也属 离心沉降。
管式离心机 Tubular bowl
离心分离设备
3.多室离心机 3.多室离心机
操作:间歇式,粒度筛分,澄清的分 操作: 离液经溢流口或由向心泵排出 应用: 应用: A、液-液分离; 、液B、固相浓度小于5%的固—液分离。 、固相浓度小于5%的固— 主要技术参数: 主要技术参数: A、3-7个分离室(若干同心圆分隔成); B、分离因子2000-8000g; 、分离因子2000-8000g; C、处理能力2.5-10 m3/h; 、处理能力2.5/h; D、颗粒d >0.1µm,固体浓度<5%。 、颗粒d >0.1µ ,固体浓度< 常用于抗菌素液-液萃取分离,果汁和酒类饮料的澄清等。
碟片式离心机
C、活门(活塞)排渣碟片离心机
操作:断续式 操作: 应用: 应用: A、可用于难分离的物料; B、悬浮液分离。 主要技术参数: 主要技术参数: A、固体浓度<5% ; 、固体浓度<5 B、颗粒d为0.1-500um; 、颗粒d 0.1-500um; C、固液密度差>0.01g/cm3 ; 、固液密度差>0.01g/cm D、处理能力达40m3/h; 、处理能力达40m /h; E、离心力强度5000-9000g。 、离心力强度5000-9000g。 可用于难分离的物料,如大肠杆菌。
碟片式离心机
D、活门(活塞)排渣喷嘴 碟片离心机
操作:断续式 操作: 应用: 应用: A、澄清作业; B、细胞收集。 主要技术参数: 主要技术参数: A、离心速度比相同直径的活塞机大23-30%; 、离心速度比相同直径的活塞机大23-30%; B、离心力强度可达15000g。 、离心力强度可达15000g。 可用于酶制剂、疫苗、胰岛素等生产中的澄清;酶生 产中细菌的收集;DNA的收集与澄清。 产中细菌的收集;DNA的收集与澄清。
离心分离原理 二、离心过滤原理
离心过滤是将 料液送入有孔 的转鼓并利用 离心力场进行 过滤的过程, 以离心力为推 动力完成过滤 作业,兼有离 心和过滤的双 重作用。
第二节
离心机分类: 离心机分类: ——离心力 ——离心力 (或转速) 或转速) ——使用温度 ——使用温度 ——容量与用途 ——容量与用途 ——放置方式 ——放置方式 ——排渣方式 ——排渣方式
第九章
概述
固液分离:第一选择为过滤 第二选择为离心分离 固液分离:第一选择为过滤,第二选择为离心分离。 过滤, 离心分离。 应用: 应用: A 、 难过滤的发酵液( d小、η大 、 过滤 v慢)、 甚至不能过 难过滤的发酵液( 过滤v 滤的悬浮液,及忌用助滤剂、 滤的悬浮液,及忌用助滤剂、或助滤剂无效的悬浮液; B、其他难分离的固液分离; C、互不相溶的液—液分离,如液液萃取; 互不相溶的液—液分离, D、不同密度固体或乳浊液的密度梯度分离,如超离心分离 不同密度固体或乳浊液的密度梯度分离, 缺点: 缺点: 分离得到的不是滤饼一样的半干物, A、分离得到的不是滤饼一样的半干物,而是浆状物; B、处理量小; C、设备复杂,价格贵,分离成本高。 设备复杂,价格贵,分离成本高。
离心分离设备
一、离心分离设备概述
——生化分离常用高速冷冻离心机 ——生化分离常用高速冷冻离心机
(一)离心机分类
(二)离心机转子及附件
离心分离设备 二、离心沉降设备
沉降式离心机 ——实验室用 ——实验室用 瓶式离心机 ——工业用 ——工业用 无孔转鼓离心机 -管式 -多室式 -碟片式 -卧螺式 (decanter)
离心沉降系数( 离心沉降系数(S) 沉降系数 单位离心力作用下粒子的沉降速率
(单位s ,1S=10-13s) 单位s —常用20℃纯水中的沉降系数SW,20为标准表示 常用20℃纯水中的沉降系数S
离心时间
—已知转速时
K因子(澄清因子) 因子(澄清因子)
估计粒子从离心杯上最近转轴处到最远处所需的时间 —与转子大小和速率有关,是转子的效率因子 转子说明书
三、离心机的选择
基本参数
颗粒d,固液ρ差,η 固体物浓度 产物热稳定性 流量Q, 规模 气溶胶,活cell
选择
基本型号 亚型 低温离心 规格、台数 密封灭菌设计
离 心 机 的 选 择
四、离心技术的应用
包涵体产物分离工艺(牛生长激素分离提取)
离心分离设备 三、离心过滤设备
离心过滤机 设有一个开孔转鼓, 可以分离固体密度大 于或小于液体密度的 悬浮液。可分连续式 和间歇式 a——分批立式轴 ——分批立式轴 b——分批卧式轴 ——分批卧式轴 c——连续锥形滤网 ——连续锥形滤网 d——连续推送式 ——连续推送式 离心过滤设备类型
离心分离设备 活 塞 推 料 离 心 机
超速离心技术分类 超速离心技术分类
三、超速离心设备
分析型超速离心机 制备型超速离心机
真空系统+冷却系统;光学系统
第四节
离心技术的应用
一、离心技术应用注意事项 严格按说明书操作
—配平、管数、装量、保养、预冷、转速、限时、陪护 配平、管数、装量、保养、预冷、转速、限时、
二、离心分离的优缺点
优点—缩短停留时间、无须预处理、可连续操作、易自动化、 优点—缩短停留时间、无须预处理、可连续操作、易自动化、 更适用于除去有害物质、 更适用于除去有害物质、操作费用低 缺点—产热、流水线易淤塞、气溶胶(需防止产生) 缺点—产热、流水线易淤塞、气溶胶(需防止产生)、价格 与维修费用高
——大分子纯度的估计 ——大分子纯度的估计 ——检测大分子中构象的变化 ——检测大分子中构象的变化
超速离心技术分类 2.制备用超速离心技术 2.制备用超速离心技术 ——差速离心-粒子差速离心
变换离心速度t 变换离心速度t ——差速-区带离心:密度梯度离心法、沉降速 差速度法、动态法 控制离心时间 介质:蔗糖、甘油 ——等密度梯度离心:平衡区带离心法 足够离心时间t 足够离心时间t 介质:铯盐
离心分离设备 振 动 卸 料 离 心 机
离心分离设备 螺 旋 卸 料 式 离 心 机
离心分离设备 篮 式 离 心 机
离心分离设备 卧 式 刮 刀 离 心 机
第三节
超离心技术
超速离心技术: 超速离心技术: 根据物质的沉降系数、质量和形状不同, 根据物质的沉降系数、质量和形状不同,应用 强大的离心力( 强大的离心力 ( 105g 以上 ) , 将混合物中各组分 以上) 分离、浓缩、提纯的方法称为超离心法。 分离、浓缩、提纯的方法称为超离心法。
离心分离因子 ,离心分离因数Fr, 离心分离因子Fr,离心分离因数Fr,离心力强度 分离因子Fr ——离心力/重力;离心加速度/ ——离心力/重力;离心加速度/重力加速度
意义:衡量离心设备的离心程度的重要技术参数,用 于离心机的分类 Dole Cotzias转换列线图t Cotzias转换列线图t
离心分离原理
第一节
离心力:
离心分离原理
一、离心沉降原理
离心沉降速度: 离心沉降速度:
球形颗粒沉降的受力情况
离心沉降速率:在强大离心力的作用下,单位时
间内物质运动的距离。 。
离心分离原理
相对离心力(RCF) 相对离心力(RCF) 在离心力场的作用下,颗粒所受的离心力相 当于地球重力的倍数,单位是重力加速度g。
离心分离设备
5、螺旋卸料沉降离心机
操作:连续式 操作: ——立式 ——立式、卧式 立式、 应用: 应用: A、固液分离; B、高浓度的大颗粒。 主要技术参数: 主要技术参数: A、分离因子<6000g;转鼓直径--900mm; 、分离因子<6000g;转鼓直径--900mm; B、适应的颗粒直径2um-5mm,固体含量1-50%; 适应的颗粒直径2um- mm,固体含量1 50% C、固液密度差>0.05g/cm3; 固液密度差>0 05g/cm D、处理量可达60t/h; 处理量可达60t/h; E、操作温度高,可>300°C;操作压力一般为常压。 操作温度高,可>300° ;操作压力一般为常压。 常用于胰岛素及胰酶分离、淀粉精制、污水处理
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