RGD-TRAIL抗肿瘤作用的细胞筛选研究
肿瘤细胞对TRAIL耐受机制以及克服耐受性的研究进展
木
肿 细 对 ＲＩ 受 制 及 服 受 研 进 瘤 胞 Ｔ ＡＬ 机 以 克 耐 性的 究 展 耐
聂金梅 徐雅 君 邢永梅 李亨芬 邹 金 白如玉 刁 勇・
华侨大学分 子药物学研 究所， 福建 泉州 ３ ２ ２ ６０ １
ｐ ｏ ｅ ｎ Ｓ ａ ，ｓｕ ｉ ｓｈ ｖ ｏ ｕ ｅ ｎ ｔ ｅ ｍｅ ｈ ｎ ｓ ｏ ｐ ｐ ｏ ｉ ｉ ｄ ｃ ｄ ｂ ＲＡＩ ｎ ｈ ｒ ｃ ｓ ｅ ｎ ｏ ｖ ｄ ｉ ｈ ｅ ｅ ｏ ｍｅ ｔ ｆ ｒ ｔ ｉ ． ｏｆ ｒ ｔ ｄ ｅ ａ ｅ ｆ ｃ ｓ ｄ ｏ ｈ ｃ ａ ｉｍ ｆａ ｏ ｔ ｓｓ ｎ ｕ ｅ ｙ Ｔ Ｌ ａ ｄ ｔ ｅ ｐ ｏ ｅ ｓ ｓｉ ｖ ｌ ｅ ｎ ｔ ｅ ｄ ｖ ｌ ｐ ｎ ｏ ＴＲＡＩ ｅ ｉ ｔ ｎ ｅＴＲＡＩ — ｅ ｉｔ ｎ ｕ ｕ ｓｃ ｎ ｂ ｅ ｓ ｎ ｉ ｚ ｄ ｔ Ｌ ｒ ｓｓａ ｃ ． Ｌ ｒ ｓｓ ａ ｔ ｍｏ ｒ ａ ｅ ｒ － ｅ ｓｔ ｅ ｏ ＴＲＡＩ ｙ ｃ ｍｂ ｎ ｎ ｔ ｉ Ｌ ｂ ｏ ｉ ｉ ｇＴＲＡＩ ｔ ｈ ｍｏ ｈ ｒ ｐ ｕ ｉｓ ｏ ｒａ ｉｔｏ ． Ｌ ｗｉ ｃ ｅ ｔ ｅ ａ ｅ ｔ ｒｉｒ ｄ ａ ｉ ｎ ｈ ｃ Ｔｈ ｓ ｒ ｖ ｅ ｏ ｕ ｅ ｎ ｔ ｅ ａ ｏ ｔ ｔｃ ｓｇ ａ ｌｎ ａ ｈ ｙ ｉ ｄ ｃ ｄ ｂ ｉ ｅ ｉ ｗ ｆ ｃ ｓ ｓ ｏ ｈ ｐ ｐ ｏ ｉ ｉ ｎ ｌ ｇ ｐ ｔ ｗａ ｎ ｕ ｅ ｙ ＴＲＡＩ ｅ ｅ ｔ ｒ ． ｅ ｍｅ ｈ ｎ ｓ ｆＴＲＡＩ ｅ ｉｔ ｎ ｅ ａ ｄ ｔ ｅ ｉ Ｌ ｒ ｃ ｐ ｏ ｓＴｈ ｃ ａ ｉｍｓ ｏ Ｌ ｒ ｓ ｓａ ｃ ｎ ｈ ｐ ｔ ｎ ｉ ｌ ａ ｕ ｅ ｈ ｔ ａ ｅｔ ｋ ｎ ｔ ｖ ｒ ｏ ｈ ｍ ｒ ｌｏ ａ ｄ ｅ ｓ ｄ ｏｅ ｔ ａ ｍｅ ｓ ｒ ｓｔ ａ ｎ ｂ ａ ｅ ｏ ｏ ｅ ｃ ｍｅｔ ｅ ａ ｅａ ｓ ｄ ｒ ｓ ｅ ． ｃ
RGD 在肿瘤治疗中的研究进展
Chavakis等证实RGD肽能完全抑制低氧诱导条件下早 期血管内皮生长因子（VEGF）的促血管生成作用。
RGD 肽作为载体在肿瘤治疗 中的应用
作为RGD肽的受体，αvβ3整合素在肿瘤血管内皮细胞 上大量表达，它不仅是血管内皮细胞标志物，而且在 血管生成过程中起重要作用，可作为肿瘤血管导向治 疗的药靶。配体 RGD肽则作为载体，携带着效应分子， 抑制肿瘤生长和新生血管的形成。
iRGD
iRGD(immobilized RGD) 肽的序列为CRGDRGPDC, 其中的RGD 序列具有整合素靶向的功能, 能够靶向到 整合素表达较高的肿瘤部位，而经过肿瘤附近特定酶 切割之后的R 残基片段,则能够与肿瘤细胞表面的NRP1(神经纤毛蛋白受体) 相互作用, 介导发生细胞膜穿透 效应。利用iRGD 肽直接与药物或分子探针联合加入， 打到靶向治疗肿瘤的效果。
Poethko 等发现 RGDfE 二聚体 [c(RGDfE)-HEG]2–K 较单体 c(RGDfE)-HEG 靶向能力强。
Boturyn 等报道了一系列的环状 RGDfK 四聚体，并发 现增加肽的多样性可以显著的增强ανβ3的亲和力及细 胞的内摄作用。
Chen 等报道了64Cu 和18F 标记的环状 RGD 肽四聚体 八聚体用于肿瘤的 PET 显像。
rgd肽对肿瘤细胞粘附及迁移的抑制作用粘附是肿瘤侵袭和转移的始动因素在肿瘤侵袭三个相互协调的基本过程中肿瘤细胞首先通过膜表面受体integrinscadherins和laminin受体等粘附于基底膜及细胞外基质的成分纤维粘连蛋白fibronectinfn层粘连蛋白lamininln和iv型胶原蛋白typeivcollagen上然后肿瘤细胞以蛋白酶降解基底膜和基质最后定向运动穿越基底膜和基质并经血道和淋巴道向远处转移
RGD肽在肿瘤治疗中的研究进展
Ｔｈｅ Ｒｅｓｅａｒ ｃｈ ｏｎ Ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ ｏｆ ｔｈｅ Ｒｏｌｅ ｏｆ ＲＧＤ－ ｐｅｐｔｉｄｅｓ ｉｎ Ｔｕｍｏｒ Ｔｈｅｒ ａｐｙ
２００５ 年第 ３２ 卷第 １９ 期
中国肿瘤临床
ＲＧＤ 肽在肿瘤治疗中的研究进展
·１１３５·
·综 述·
!!!!!肖 斌 朱永红 综述 邹全明 审校 !!!!!第三军医大学医学检验系临床微生物及免疫教研室 （ 重庆市 ４０００３８）
摘要 ＲＧＤ 肽是一类含有精氨酸－ 甘氨酸－ 天 冬 氨 酸 （ Ａｒｇ－ Ｇｌｙ－ Ａｓｐ） 的 短 肽 ， 作 为 整 合 素 和 其 配 体 相 互 作 用 的 识别位点， 介导细胞与细胞外基质及细胞之间的相互作用。肿瘤细胞或者新生血管可以特异表达某些整合素如 αｖβ３， 能 以 一 定 的 亲 和 力 结 合 ＲＧＤ 肽 ， 成 为 肿 瘤 治 疗 的 新 靶 点 。 因 此 ， ＲＧＤ 肽 在 肿 瘤 治 疗 中 的 应 用 已 成 为 研 究 热 点。放射性核素标记的 ＲＧＤ 肽是一类很有前景的肿瘤显像剂。此外 ＲＧＤ 肽可以诱导肿瘤细胞凋亡且作为载体在肿 瘤靶向治疗中发挥重要作用。
·１１３６·
中 期
可 以 筛 选 出 针 对 不 同 整 合 素 的 配 体 ［ １］ 。 在 一 些 肿 瘤 细胞或者肿瘤新生血管内皮细胞常特异性地高表达 某 些 整 合 素 受 体 ， 如 αｖβ３ 或 αｖβ５， 这 类 受 体 可 以 作为肿瘤靶向治疗的靶点， 利用 ＲＧＤ 肽竞争结合整 合素受体， 抑制肿瘤迁移和肿瘤新血管生成［２］。 ２ ＲＧＤ 肽在肿瘤显像中的应用
TRAIL在肿瘤免疫治疗中的应用进展
・
３６・ ６
临床肿瘤学杂志 ２０ ０ ８年 ４月第 １ ３卷第 ４期
Ｃ ｉｅｅＣｉｉ ｌ ｎｏｏｙ Ａ ｒ ２ ０ ， ｏ．３ Ｎ ． ｈｎｓ ｌ ｃ ｃｌｇ ， ｐ． ０８ Ｖ ・
Ｔ Ａ Ｌ在 肿 瘤 免 疫 治 疗 中 的 应 用 进 展 Ｒ Ｉ
因为缺 乏 Ｄ Ｄ而不能启动凋亡通路 。 Ｔ ＡＩ Ｒ Ｌ与 Ｄ ４或 Ｄ ５结合后 使受 体三 聚化 ， 着募 集 Ｒ Ｒ 接 受体分 子 相关死亡结构域 （ｄｐｏ ｌ ｕｅｆ － ｓｃ ｔ ａｏ ｔ ｍｏ ｃｌ ａ ａ ｏｉ ｅ ｒ ｅ ｓｓ ａｄ ｄａ ｏ ａｎ Ａ Ｄ） 以及前 ｃ ｐ ｓ ８ 形成 死亡诱 导信 号 ｅｔ ｄｍ ，Ｆ Ｄ ， ｈ ｉ ｓ ａ ａｅ ， 复合体 （ ｅｔ－ ｄ ｃ ｇｓ ｎ ｉｇｃｍ ｌｘ ＩＣ） ｄ ａ ｉ ｕｉ ｉ ａ ｎ ｏ ｐｅ ，Ｄ Ｓ 。前 ｃ ｐｓ ｈ ｎ ｎ ｇｌ ｓ ａ ａｅ ８在 Ｄ Ｓ ＩＣ水 平 被 活 化 后 ， 直 接 活 化 下 游 的效 应 分 子 可 ｃｐ ｅ ， ｓｓ ３ ａ ａ 也可通过裂解 Ｂ ｌ ｃ ２家 族成员 之一 Ｂｄ 启动线 粒 － ｉ， 体途径 ， 导细胞凋亡 。 诱
多 种 肿 瘤 细 胞 凋 亡 ， 对 正 常 细 胞 没 有 影 响 ， 而 具 有 很 好 而 因
相似 的结 构 而与 前 ｃ ｐｓ ｓ ａ ａｅ８竞 争 募 集 至 Ｄ Ｓ 从 而 影 响 ＩＣ， ｃｓａｅ８的活化 ， ａｐｓ 阻止 凋亡 信 号下 传 。在 线粒 体 凋 亡途 径 ， ｃ ２家族 的抗凋亡成员如 Ｂ ｌ 、ｃ． Ｌ Ｍｃ一 Ｂｌ － ｃ２Ｂ１ 、 ｌ － Ｘ １等的过表 达， 以及 Ｂ ｘ Ｂ ｋ Ｂｍ、 ａ ａ 、 ａ 、ｉ Ｂ ｄ等促凋亡成员表达及 功能失调均 可导致 凋 亡 受 阻 。此 外 凋 亡 抑 制 蛋 白 ｌＰ家 族 成 员 如 Ａ
TRAIL体外诱导人肝星形细胞LX-2 凋亡作用及调控机制
TRAIL体外诱导人肝星形细胞LX-2 凋亡作用及调控机制高杰;赵勇华;康鹏;梁明;李树臣【期刊名称】《肝脏》【年(卷),期】2010(015)002【摘要】目的研究肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(TRAIL)诱导肝星形细胞凋亡情况及调控机制.方法用RT-PCR检测LX-2中α-SMA mRNA和DR5 mRNA的表达;MTT比色法、流式细胞术检测外源性TRAIL对LX-2细胞增殖和诱导细胞凋亡的影响;采用Western blot检测Bax、Caspase3表达.结果培养的LX-2表达α-SMA mRNA和DR5 mRNA逐渐增加,TRAIL可以抑制其细胞增殖,与剂量相关(P<0.05).与对照组比较,TRAIL诱导活化的LX-2细胞凋亡明显增加(P<0.05),Western blot分析显示TRAIL作用下,LX-2线粒体Bax、细胞质Caspase3表达上调.结论外源性TRAIL可以诱导活化的LX-2凋亡,其机制与DR5及线粒体Bax表达上调有关.【总页数】4页(P109-112)【作者】高杰;赵勇华;康鹏;梁明;李树臣【作者单位】150086,哈尔滨医科大学第二医院感染病科;150086,哈尔滨医科大学第二医院感染病科;150086,哈尔滨医科大学第二医院感染病科;150086,哈尔滨医科大学第二医院感染病科;150086,哈尔滨医科大学第二医院感染病科【正文语种】中文【相关文献】1.大黄素在体外诱导人肝癌Hep3b细胞凋亡的作用及机制 [J], 倪华;王钦2.索拉菲尼增强TRAIL 诱导人肝癌细胞凋亡的作用及机制探讨 [J], 全梅芳;钟志宏;杨军3.辐射诱导表达载体pEgr-hTRAIL的构建及其对肿瘤细胞的体外诱导凋亡作用 [J], 朴春姬;田梅;刘林林;杨巍;李修义4.TRAIL/死亡受体5途径在缺氧再给氧诱导人肝细胞凋亡中的作用及相关机制 [J], 曹丽丽;李幼平;李胜富;程峰;龙丹5.TRAIL诱导人肝星状细胞系LX-2凋亡及DR5与Bax调节作用 [J], 高杰;赵勇华;康鹏;梁明;李树臣因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
抗肿瘤药物TRAIL的研究进展
作用关系，导致其耐药性依然是必须解决的重点问
2.3 TRAIL 的临床试验
题，这也极大地阻碍了其临床应用。同时，在先前的
Байду номын сангаас
尽管克服 TRAIL 耐药性的创新方法迅速发展， 临床试验中，基于 TRAIL 的疗法在很大程度上未能
但临床前研究依然只有很少进入临床试验。临床上 与其他现有的化学疗法发挥协同作用而显著延长肿
关键词：TRAIL；肿瘤细胞；凋亡；肿瘤治疗 中图分类号：R979.1 文献标识码：A
Advances in Research on Anti-Tumor Drugs of TRAIL
JIANG Ouhao1, HE Xinyi2, ZHANG Xiao2* (1. No.3 Company, School of Basic Medical Sciences, Air Force Medical University, Shaanxi Xi'an 710032; 2. Department of Biochemistry and Molecular Biology, School of Basic Medical Sciences, Air Force Medical University,
通路和内源性凋亡通路两条凋亡通路。如图 1 所示， 度上增加了 TRAIL 的稳定性，也保持了其相应的治 外源性凋亡通路主要由细胞外信号刺激，细胞膜表 疗学功能 [4]。另一个改进的策略是在 TRAIL 重组蛋
面受体 TNF 超家族的死亡受体 DR4（TRAIL-R1）、 白上连接一些特性分子，以增加重组蛋白的药代动力
统中半衰期短的问题而受到很大限制。通过开发新 的给药方法，能够有效延长其体内治疗的半衰期，但
RGD肽抗肿瘤机制及进展
RGD肽抗肿瘤机制及进展管箫玉;李庆伟;王继红【摘要】近年来,癌症严重影响了人类的健康与生活。
研发一种能够靶向有效的治疗肿瘤细胞而又不引起相关副作用的抗肿瘤药物已成为人类面临的重大挑战。
随着研究的深入,已经证明精氨酸-甘氨酸-天冬氨酸( Arg-Gly-Asp,RGD)肽作为整合素与其配体相互作用的竞争性拮抗剂,有望成为有效的抗肿瘤治疗靶向药物。
整合素具有在肿瘤细胞表面高表达的特点,其与细胞外基质( ECM)蛋白相结合,能够介导肿瘤的侵袭和转移。
而整合素与ECM的识别位点就是RGD序列。
迄今为止在人体内已发现67种蛋白质中含有RGD模体序列,其中包含纤维蛋白原、玻连蛋白、层黏连蛋白等ECM蛋白。
这些ECM蛋白通过RGD序列位点与整合素结合,从而引起细胞与细胞外基质间的黏附、迁移、浸润和增殖等一系列生理行为。
而外源RGD肽可以竞争性拮抗ECM与整合素的结合,因此这些RGD肽在肿瘤的诊断与治疗上发挥着极其重要的作用。
本篇文章主要论述了RGD肽及其衍生物的抗肿瘤机制及其研究的进展。
【期刊名称】《吉林医药学院学报》【年(卷),期】2015(000)005【总页数】5页(P361-365)【关键词】RGD;整合素;肿瘤细胞【作者】管箫玉;李庆伟;王继红【作者单位】辽宁师范大学生命科学学院，辽宁大连 116029;辽宁师范大学生命科学学院，辽宁大连 116029; 辽宁师范大学七鳃鳗研究中心，辽宁大连116029;辽宁师范大学生命科学学院，辽宁大连 116029; 辽宁师范大学七鳃鳗研究中心，辽宁大连 116029【正文语种】中文【中图分类】R734.2如今，癌症的发病率和死亡率明显增高。
在肿瘤的侵袭和转移过程中，肿瘤细胞与细胞外基质的黏附是引起侵袭和转移的关键环节，整合素作为细胞黏附分子家族的重要成员，在这一过程中起到至关重要的作用。
整合素与配体间相互作用的识别位点为精氨酸-甘氨酸-天冬氨酸(Arg-Gly-Asp,RGD)，因此RGD序列对肿瘤细胞与细胞外基质以及肿瘤细胞之间的黏附起了关键作用[1]。
一种表达TRAIL蛋白质的大肠杆菌在制备肿瘤治疗药物中的用途[发明专利]
![一种表达TRAIL蛋白质的大肠杆菌在制备肿瘤治疗药物中的用途[发明专利]](https://img.taocdn.com/s3/m/0c859803856a561253d36f89.png)
专利名称：一种表达TRAIL蛋白质的大肠杆菌在制备肿瘤治疗药物中的用途
专利类型：发明专利
发明人：张学敏,张海英,梁冰
申请号：CN200510087112.6
申请日：20050727
公开号：CN1903373A
公开日：
20070131
专利内容由知识产权出版社提供
摘要：本发明公开了一种表达TRAIL蛋白质的大肠杆菌在制备肿瘤治疗药物中的用途。
本发明利用大肠杆菌的肿瘤靶向性，制备了携带TRAIL基因大肠杆菌，该大肠杆菌可以定位于机体肿瘤及转移的肿瘤组织，在肿瘤组织集聚，把TRAIL带到肿瘤部位，避免了TRAIL对正常组织与器官的毒性作用，也使TRAIL能在肿瘤局部发挥更强、更持久的作用。
本发明表达TRAIL蛋白质的大肠杆菌能抑制或延缓肿瘤组织的生长，可以用于制备肿瘤治疗的药物，具有非常广阔的市场前景。
申请人：中国人民解放军军事医学科学院生物医学分析中心
地址：100850 北京市海淀区太平路27号
国籍：CN
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RGD共修饰脂质在脑胶质瘤靶向性研究中的应用分析
RGD共修饰脂质在脑胶质瘤靶向性研究中的应用分析摘要】脑胶质瘤是被世界卫生组织所公认的死亡率较高的病症，该瘤体良恶性生长发育速度及病程时间存在显著差异性，并且由于该瘤体位于神经组织复杂的脑部，给临床治疗工作带来一定难度。
RGD肽是一种能够有效识别肿瘤细胞表面整合素受体的特异性环状三肽，具有较强的靶向性而被广泛应用于脑胶质瘤的临床治疗工作中。
为了进一步探究RGD共修饰脂质在脑胶质瘤靶向性研究中的应用效果，本次研究对以往临床研究成果做一综述，以推动其得到更广泛应用。
【关键词】修饰脂质；脑胶质瘤；神经组织；靶向性研究【中图分类号】R73-3 【文献标识码】A 【文章编号】2095-1752（2015）03-0033-02RGD modified total lipid in glioma targeted research on the application of analysis Diao Jinfu.The people's liberation army general hospital, Beijing 100000, China; Zhang Zhiwen. The people's liberation army general hospital first affiliated hospital, Beijing 100000, China【Abstract】Glioma is recognized by the world health organization's mortalityrate is higher, the growth of malignant tumors had good speed and there were significant differences in course of time, and due to the complexity of the tumors located in nerve tissue of the brain, bring certain difficulty to the clinical treatment. RGD peptide is a kind of integration can effectively identify the tumor cell surface receptor specificity of annular three peptide, has strong targeted and are widely usedin clinical treatment of glioma. In order to further explore the RGD modified total lipidin application effect in the study of brain glioma targeting property, the research onthe previous clinical research results make a review, to promote its wider application.【Key words】Modification of lipid; Glioma; Nervous tissue; Targeted research前言：随着医学技术不断发展，关于脑胶质瘤的靶向治疗研究已经取得了突破性进展，在丰富临床治疗手段的同时，也在一定程度上降低了因脑间质瘤引发的死亡率，对提高患者生存周期、改善其生活质量、推动临床工作进一步发展均起到了重要的推动作用。
TRAIL和EGFR配体寡肽与力达霉素辅基蛋白融合蛋白制备过程的优化
TRAIL和EGFR配体寡肽与力达霉素辅基蛋白融合蛋白制备过程的优化朱大强;陈淑珍【摘要】Objective To optimize the preparation process of the fusion protein Ec-LDP-TRAIL expressed in the form of inclusion body. <br> Methods Based on the selective antitumor activity of TRAIL in tumor cells rather than normal cells, and the target of EGFR ligand peptide, we constructed a bi-specific fusion protein consisting of TRAIL, EGFR ligand peptide and lidamycin. Conditions of fermentation of engineering bacteria, preparation and dissolution of inclusion body, Ni2+affinity chromatography of the target protein and refolding through stepwise dialysis were investigated. <br> Results After optimization, the purity of fusion protein Ec-LDP-TRAIL was more than 95% by immobilized Ni2+ affinity chromatography under denaturing conditions. Besides that, after optimization of the refolding process using orthogonal design, the yield of active fusion protein Ec-LDP-TRAIL was 2.2 mg from 1 L LB medium which was 2-fold higher than that of the initial refolding conditions. The purified fusion protein Ec-LDP-TRAIL could bind to both human epidermoid carcinoma A431 cells and human large cell lung carcinoma H460 cells. <br> Conclusions Optimization of preparation process for Ec-LDP-TRAIL expressed as the form of inclusion body provides the experimental basisfor the future development and production of the protein. Furthermore, it might serve as a relatively practical system for the preparation of otherTRAIL-based proteins expressed in the form of inclusion body.%目的对以包涵体形式表达的 TRAIL 和 EGFR 配体寡肽与力达霉素辅基蛋白融合蛋白 Ec-LDP-TRAIL 的制备过程进行优化。
TRAIL 抗癌作用的分子机制
生生物效应 。
在 caspase28 激活不充分时 , 它可以直接切割底 物 Bid (Bcl22 家族的促凋亡蛋白) , 切割产物的 C2端 作用于线粒体 ,通过促使 Cyt2c 的释放而启动线粒体 依赖的凋亡途径 。
2. 1. 4 效应器的作用 效应 caspase 被激活后激发的凋亡效应主要有
1 TRAIL 及其受体的结构及功能
自从 TRAIL 通过 EST检索被发现后 , 人们就开 始了对其结构和功能的探索和研究 。TRAIL 是通过 与其受体相互结合后而发挥生物学功能的 。目前已 发现了与 TRAIL 特异性结合的 5 个受体 , 其各自的
收稿日期 :2001 - 09 - 14 ;修回日期 :2001 - 11 - 25 基金项目 : 山东大学重大项目启动基金 (413028) ; 国家自然科学基 金委海外青年合作基金
的分子机制 ,为广大医务工作者进一步深入研究和开发 TRAIL 这一新型抗癌分子奠定基础 。
关键词 : TRAIL ;肿瘤 ;凋亡
中图分类号 : R730. 51
文献标识码 :A
文章编号 :1671 - 170X( 2002) 02 - 0111 - 04
The Mechanisms of a New Type Anti2tumor Molecule ———TRAIL
DR5 主要分布于外周血淋巴细胞和骨骼肌细 胞 。通过接头分子 FADD/ MOTR1 传递信息 (但 Mac2 farlane 等 [3 ] 报道 , DR5 也参与不依赖于接头 分 子 FADD/ MORT1 的凋亡通路[2 ]) , 并依赖于 caspase 家 族的级联反应诱导凋亡 。DR5 是 p53 的下游靶位 ,其 介导的 p53 依赖性调节在人和鼠中有高度的保守 性 , 并可以在野生型 p53 表达的细胞内被 DNA 损伤 剂诱导表达 。DR5 的表达受阿霉素 、TNF2α 和一些 DNA 损伤剂的调节 , 但与其它受 p53 调节的基因不 同的是 ,DR5 不受紫外线照射的调节 。DR5 能够以组 织特异性方式激活 NF2κB 。 1. 3 诱骗受体 ( decoy receptor ,DcR)
RGD肽在肿瘤靶向纳米给药系统中的应用
St rait Pharmaceut ical Journal Vol 23 No 6 2011
Richards 等 11 研究发现 RGD 肽一级 序列后 紧跟色 氨酸 和谷氨酸残基可有最大 亲和性。现 已证实, 环化 肽具有 更稳 定的结构和 更强的亲和性 12 。含 有两个 二硫键 的环形 RGD 多肽对肿瘤 新生血管内皮 细胞的抑 制效力 最强, 是含 单一二 硫键环形 RGD 多肽的 20 倍, 是线性 RGD 多肽的 200 倍 13 。 将 RGD 肽与其它物质进行生物耦联 也是 R GD 肽修饰的常见 方法之一。研究 发现, RG D 肽 与 抗癌 药、PEG 、PEU 、EAA 等 的耦联物在抗细胞黏附和抗肿瘤转移能力较其对应非耦联肽 强。通过形 成多聚体也可 以提高 RGD 肽对整 合素受体 的结 合率和选择性。Poethko 等 14 的体 外结 合研究 表明 RGD 多 聚体对 v 3 受体亲和力大小顺 序为: 单体 < 二聚 体< 四聚体 < 八聚体。 3 RGD 肽在肿瘤靶向纳米给药系统中的应用 3 1 RGD 肽修饰的肿瘤靶向脂质体给药系 统 脂 质体是一 种由天然的或合成的类脂形成的类似于生物膜双分子层的囊
3 2 RGD 肽修饰的肿瘤靶向聚合物肿束给 药系统 胶束是 一种自组装纳米化胶体粒子, 具有疏水性内核与亲水性 外壳, 主要应用于递送水难溶性药物。尤其是两亲性聚合物形成的
胶束, 作为药物载体具 有许多 优势, 具有较 高的稳 定性, 并能 广泛应用于多种类型的水难溶性药物的递送。在聚合物端基 上连接 RGD 肽, 通过 R GD 肽 与肿瘤新生 血管上的 整合素受 体竞争结合, 可将药物运输到肿瘤部位, 是近年来针对肿瘤新 生血管的靶向治疗研究热点 20, 21 。
化疗药物增强重组可溶性TRAIL抗肿瘤作用
化疗药物增强重组可溶性TRAIL抗肿瘤作用王明婕;刘彦信;李晓玲;史娟;刘士廉;郑德先【期刊名称】《中国医学科学院学报》【年(卷),期】2004(026)005【摘要】目的探讨化疗药物对重组可溶性TRAIL(rsTRAIL)抗肿瘤作用的影响及其分子机制.方法 13株不同肿瘤细胞经rsTRAIL处理后,采用MTS-PMS染色法和流式细胞仪技术测定细胞凋亡率,观察肿瘤细胞对rsTRAIL的敏感性;化疗药物与rsTRAIL联合作用于敏感性不同的肿瘤细胞检测细胞敏感性的变化;免疫印迹技术分析TRAIL受体DR5蛋白表达.结果 13株肿瘤细胞中约46.2%(6/13)的细胞株对rsTRAIL敏感;化疗药物CHX、CP和8-CA可显著提高肿瘤细胞株对rsTRAIL细胞毒作用的敏感性;8-CA和TRAIL联合作用可上调DR5的蛋白表达.结论化疗药物CHX、CP和8-CA可增强rsTRAIL的抗肿瘤作用.【总页数】5页(P524-528)【作者】王明婕;刘彦信;李晓玲;史娟;刘士廉;郑德先【作者单位】中国医学科学院,中国协和医科大学,基础医学研究所医学分子生物学国家重点实验室,北京,100005;中国医学科学院,中国协和医科大学,基础医学研究所医学分子生物学国家重点实验室,北京,100005;中国医学科学院,中国协和医科大学,基础医学研究所医学分子生物学国家重点实验室,北京,100005;中国医学科学院,中国协和医科大学,基础医学研究所医学分子生物学国家重点实验室,北京,100005;中国医学科学院,中国协和医科大学,基础医学研究所医学分子生物学国家重点实验室,北京,100005;中国医学科学院,中国协和医科大学,基础医学研究所医学分子生物学国家重点实验室,北京,100005【正文语种】中文【中图分类】Q785【相关文献】1.重组人可溶性 TRAIL 的制备及其联合硼替佐米诱导肿瘤细胞的凋亡作用 [J], 李雪燕;徐霞2.携带人可溶性TRAIL基因的重组腺病毒在肺癌细胞中的转染效率及表达特性研究 [J], 朴春姬;田梅;杨巍;李修义3.重组人可溶性TRAIL在毕赤酵母中表达与纯化及其抗肿瘤细胞活性 [J], 黄晓平;王晓;董浩;赵小峰;李招发;王启钊;许瑞安;刁勇4.重组可溶性TRAIL的表达及其诱导A549和H460wt细胞凋亡 [J], 刘磊;方艳秋;许淑芬;谭岩5.Sorafenib联合重组人可溶性TRAIL蛋白对K562细胞增殖抑制和凋亡诱导的研究 [J], 王阿慧;凌艳英;庄秋容;邓家德因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
RGD序列肽及其衍生物抑制肿瘤侵袭转移的研究进展
RGD序列肽及其衍生物抑制肿瘤侵袭转移的研究进展刘丽艳;刘进军;王宏伟【期刊名称】《承德医学院学报》【年(卷),期】2006(023)002【摘要】肿瘤的侵袭转移过程相当复杂,涉及肿瘤细胞、血管内皮细胞与细胞外基质(extracellular matrix,ECM)的相互作用和血小板瘤栓的形成。
研究还发现许多病理过程都与正常的ECM作用相关,肿瘤的侵袭和转移过程中肿瘤细胞与ECM成分的粘附是触发肿瘤细胞侵袭过程后续事件的关键步骤。
据此人们研究发现了与肿瘤细胞粘连有关的ECM受体中主要粘附识别的氨基酸序列—Arg-Gly-Asp(精氨酰-甘氨酰-天冬氨酸,简称RGD),受此启发人们合成了许多RGD多肽及衍生物,从而竞争、干扰肿瘤细胞与ECM的相互作用,达到抑制肿瘤转移的目的。
有关研究按RGD结构特点分述如下:1 RGD线性肽Hayman等研究了有RGD序列的多肽,体外合成了RGDS、GRGDSP、GRGDSPC、GRGDAP,发现它们具有抑制正常大鼠肾、变异的鼠肾、鼠BALB/C373、人骨肉瘤(MG-63)和人纤维肉瘤(HT1080)细胞的粘连,而不含RGD的序列肽则无此作用。
GRGDS与鼠B16-F10黑色素瘤细胞共同静注入C57BL鼠体内,结果发现GRGDS阻止肿瘤细胞在肺中滞留而抑制肿瘤细胞的肺转移[1],且GRGDS还能抑制骨肉瘤(Sao-2)细...【总页数】3页(P169-171)【作者】刘丽艳;刘进军;王宏伟【作者单位】承德医学院化学教研室,河北,承德,067000;承德医学院化学教研室,河北,承德,067000;承德医学院化学教研室,河北,承德,067000【正文语种】中文【中图分类】R73-37【相关文献】1.RGD均叉肽合成及其对高转移肿瘤细胞的黏附抑制作用 [J], 刘丽艳;陈治宇;赵铁华2.放射性核素标记RGD肽及衍生物的研究进展 [J], 邵武国;秦红斌3.抗粘附肽RGD和YIGSR对肿瘤侵袭、转移能力的抑制作用 [J], 邓淑华;赵铁华;高巍;杨鹤松;石艳华;曹凯4.RGD肽联合丝裂霉素C对荷人膀胱癌T24裸鼠肿瘤生长的抑制作用 [J], 李辽源;沈周俊;杨明;张海滨;徐文峰5.RGD序列合成肽抑制喉癌细胞增殖的实验研究 [J], 冯佳鹏;鲁建光因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
以TRAIL为靶点的肿瘤治疗研究进展
以TRAIL为靶点的肿瘤治疗研究进展
林海;侯敢;黄迪南
【期刊名称】《生命科学》
【年(卷),期】2007(19)5
【摘要】肿瘤坏死因子相关凋亡配体(tumor necrosis factor-related apoptosis-inducing ligand,TRAIL)是肿瘤坏死因子(tumor necrosis factor,TNF)超家族成员。
TRAIL与其受体结合后启动凋亡信号转导,选择性地诱导肿瘤细胞凋亡,而对正常组织细胞没有明显的伤害,而且一些药物和细胞因子可协同TRAIL诱导肿瘤细胞凋亡。
本文就TRAIL及其受体、TRAIL诱导凋亡的机制以及影响凋亡的因素和途径,以TRAIL为靶点的肿瘤治疗的研究现状作一综述。
【总页数】4页(P492-495)
【关键词】肿瘤坏死因子相关凋亡配体;受体;细胞凋亡;肿瘤治疗
【作者】林海;侯敢;黄迪南
【作者单位】广东医学院生物化学与分子生物学研究所
【正文语种】中文
【中图分类】Q7;R730.54
【相关文献】
1.以TRAIL为靶点的妇科肿瘤治疗研究进展 [J], 鲁艳明;张淑兰
2.肿瘤坏死因子诱导凋亡配体(TRAIL)抗肿瘤治疗研究进展 [J], 胡璧;王建军;徐根兴
3.脑肿瘤治疗的新靶点：脑肿瘤干细胞的研究进展 [J], 王慧慧;关方霞;杨波
4.巨噬细胞在炎症诱发肿瘤中的作用及其充当肿瘤治疗靶点的研究进展 [J], 曹晓沧;陈梦诗;赵辉;任贺;黄鹤;孟庆威
5.以TRAIL为靶点的肿瘤生物治疗研究 [J], 庄国洪;朱迅
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肝癌组织及肝癌细胞株中TRAIL受体的检测
肝癌组织及肝癌细胞株中TRAIL受体的检测肖明兵;黄介飞;倪润洲;朱净;张弘;魏群;江枫;鲍柏军【期刊名称】《南通大学学报（医学版）》【年(卷),期】2006(26)2【摘要】目的:检测肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(TNF related apoptosis inducing ligand,TRAIL)受体在原发性肝癌(PHC,简称肝癌)组织及肝癌细胞株HepG2及SMMC7721中的表达,以期选出与肝癌组织中TRAIL受体表达相近的细胞株.方法:收集原发性肝癌组织30例,以常规方法培养人肝癌细胞株HepG2及SMMC7721,以半定量RT-PCR法,对TRAIL受体的表达作半定量检测.结果:30例肝癌组织及HepG2细胞中均有TRAIL受体DR4(death recptor4)、DR5、DcR1(decoy receptor 1)、DcR2的表达,而SMMC7721细胞中不表达DcR1;半定量结果显示肝癌组织及HepG2中DR4及DR5的表达量明显高于DcR1及DcR2;肝癌组织中4对受体间的表达量存在相关性,HepG2细胞中DR4的表达与DcR1及DcR2间存在相关性.结论:HepG2中TRAIL受体的表达类似于肝癌组织.【总页数】4页(P82-84,87)【作者】肖明兵;黄介飞;倪润洲;朱净;张弘;魏群;江枫;鲍柏军【作者单位】南通大学附属医院消化内科,南通,226001;南通大学附属医院消化内科,南通,226001;南通大学附属医院消化内科,南通,226001;南通大学附属医院消化内科,南通,226001;南通大学附属医院消化内科,南通,226001;南通大学附属医院消化内科,南通,226001;南通大学附属医院消化内科,南通,226001;南通大学附属医院消化内科,南通,226001【正文语种】中文【中图分类】R735.7【相关文献】1.TRAIL对SNK-6和SNT-8细胞株的作用及其与TRAIL受体表达的关系 [J], 张迎春;于建渤;唐源;王威亚;杨群培;刘卫平2.STAT3基因在人肝癌细胞株HepG2、Bel7402、SMMC7721和肝癌组织中的表达及意义 [J], 李静;朴云峰;蒋政;安鼎伟;金丽君3.uPA在肝癌细胞株及肝癌组织中的表达及意义 [J], 廖芝玲;罗殿中;林静;杨伟洪;陈罡;曾丽霞4.阳离子脂质体联合转铁蛋白介导肝癌组织特异性载体在人肝癌细胞株中的表达[J], 程香普;段芳龄;张智清;陈庆华;马军;冯常炜;唐芙爱;赵治国;李振峰5.ABCG2在肝细胞性肝癌组织和肝癌细胞株中的表达及意义 [J], 奚忠;江春平;丁义涛因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
TRAIL对耐药相关基因SIRT1的作用
TRAIL对耐药相关基因SIRT1的作用武娟;曹琼;王洁琼;金戈【期刊名称】《中国老年学杂志》【年(卷),期】2013(033)004【摘要】目的观察肿瘤坏死因子相关诱导凋亡配体(TRAIL)在食管癌细胞中的表达及产生的凋亡作用.方法构建真核表达载体pcD-NA3.1(+)-TRAIL利用脂质体瞬时转染人食管癌细胞EC9706,并设立转染空载体组和未转染组作为阴性对照；48 h 后用RT-PCR和免疫细胞化学方法分别检测其在食管癌细胞中mRNA和蛋白水平的表达；流式细胞技术检测转染重组质粒24、48 h后对食管癌细胞产生的凋亡效应；用RT-PCR和免疫细胞化学方法检测SIRT1 mRNA和蛋白表达水平.结果重组真核表达载体peDNA3.1(+)-TRAIL中TRAIL基因能大量表达且对食管癌EC9706细胞产生凋亡效应,并能显著抑制耐药基因SIRT1的mRNA和蛋白水平的表达.结论 TRAIL可抑制食管癌细胞中SIRT1基因表达.【总页数】3页(P847-849)【作者】武娟;曹琼;王洁琼;金戈【作者单位】郑州市儿童医院检验科;郑州大学基础医学院生物化学与分子生物学教研室,河南郑州 450052;郑州大学基础医学院生物化学与分子生物学教研室,河南郑州 450052;郑州大学基础医学院生物化学与分子生物学教研室,河南郑州450052【正文语种】中文【中图分类】R735【相关文献】1.SIRT1在宫颈癌耐药中的作用研究进展 [J], 夏小艳;周小明2.SIRT1在肿瘤耐药中的作用研究进展 [J], 夏小艳;周小明3.CDK5逆转Sirt1在宫颈癌细胞耐药中的作用机制 [J], 陈丽君;王建;范春芳4.SIRT1在非小细胞肺癌TKIs获得性耐药中的调控作用 [J], 李桂芳;原翔;刘怡文;马名扬;孙江涛5.TRAIL与上皮性卵巢癌中耐药相关基因的关系 [J], 张凤喜; 常玉梅; 崔允巍; 王春香; 郭翠莲; 易洁因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
靶向RGD-Gd荧光纳米探针在体外大肠癌细胞的MRI显像研究的开题报告
靶向RGD-Gd荧光纳米探针在体外大肠癌细胞的
MRI显像研究的开题报告
一、研究背景
大肠癌作为常见的消化系统恶性肿瘤之一，常常通过手术、放疗或
化疗治疗。
随着医学技术的不断发展，成像技术在肿瘤诊断和治疗中得
到了广泛应用。
其中，磁共振成像（MRI）因其具有高分辨率、无创伤性和多参数成像等优点，成为临床诊断和研究大肠癌的重要手段。
同时，
荧光成像技术也因其较高的灵敏度和多样化的标记方式，被广泛应用于
生物医学领域的显像和治疗。
二、研究目的
本研究旨在利用靶向RGD-Gd荧光纳米探针，通过MRI对体外大肠
癌细胞的显像进行研究。
探针选择RGD是因为其具有高度亲和力与抗原
表达的能力，可以靶向性地与癌细胞结合。
同时，为提高MRI的成像效果，探针中加入Gd离子（重元素），增强MRI信号。
荧光标记则根据需要进行选择，可以作为探针的荧光指示器，增强成像效果和提高靶向性。
三、研究内容及方法
1. 合成RGD-Gd荧光纳米探针；
2. 体外培养大肠癌细胞，并添加探针进行靶向性成像；
3. 使用MRI对大肠癌细胞及其周围组织进行成像，探究RGD-Gd荧光纳米探针的成像效果；
4. 观察荧光成像效果，探究荧光标记对靶向性和成像效果的影响；
5. 对成像结果进行数据分析与统计。
四、研究意义
本研究有望为大肠癌的早期诊断提供新的手段，同时也可以为肿瘤
治疗和靶向治疗提供更准确的荧光成像和MRI技术支持。
此外，探针的
制备和优化，也可以为其他疾病的荧光成像和MRI显像提供借鉴和参考。
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胰 岛素 （ Ｂ Ｉ ， 上海 浩哗 公 司 ） ； Ｔ Ｒ Ｙ Ｐ Ｓ Ｉ Ｎ ０ ． ２ ５ ％ Ｅ Ｄ Ｔ Ａ
（ Ｇ ｉ ｂ ｃ ｏ 公司） ； Ｐ Ｂ Ｓ ， ｐ Ｈ ７ ． ２ （ Ｇ ｉ ｂ ｃ ｏ 公司） 。
Ｒ Ｇ Ｄ — Ｔ Ｒ Ａ Ｉ Ｌ （ 常州千红生化制药股份有 限公司 ） 。
Ｃｈ ｉ ｎ ｅ ｓ ｅ Ｊ ｏ ｕ ｒ ｎ ａ Ｉ ｏ ｆ Ｎｅ ｗ Ｄｒ ｕ ｇ ｓ ２ ０１ ５ ， ２ ４（ ９ ）
一
类 生 物新 药 ， 即 靶 向抗 肿瘤 药 物 Ｒ Ｇ Ｄ — Ｔ Ｒ Ａ Ｉ Ｌ ，
将Ｒ Ｇ Ｄ肽 同 Ｔ Ｒ Ａ Ｉ Ｌ融 合 构 建 而 成 ， 它不 仅 保 留了
Ｔ Ｒ Ａ Ｉ Ｌ的诱导 肿瘤 细胞 凋 亡 的 功能 ， 而 且 提 高 了药
物 对肿瘤 的靶 向性 ， 赋予 其更 高 的抗 肿 瘤活性 。 由于 Ｔ Ｒ Ａ Ｉ Ｌ应 用 于 临 床 治 疗 肿 瘤 还 存 在 一 些 问题 ， 且 并非 所有 肿瘤 细 胞都 对 Ｔ药
料
Ｅ ｎ Ｖ ｉ ｓ ｉ ｏ ｎ ２ １ ０ ４型多标 记微孔板检 测仪 （ Ｅ ｎ ｖ ｉ ｓ ｉ ｏ ｎ
２ １ ０ ４ Ｍｕ ｌ ｔ ｉ ｌ ａ ｂ ｅ ｌ Ｒ ｅ ａ ｄ ｅ ｒ ， 美 国 Ｐ ｅ ｒ ｋ ｉ ｎ Ｅ ｌ ｍ ｅ ｒ公 司 ） ；
Ｓ Ａ Ｎ Ｙ Ｏ二 氧化碳培养箱 （ 日本三 洋 公 司 ） ； Ｘ Ｄ Ｓ一 １ Ｂ
ｄ ５ ： 药 物处 理 ７ ２ ｈ后 ， 每 孔加 入 ５ ０ Ｌ （ １ ／ ２培
ｍ ｇ ・ ｍＬ 储 存 液 。再 用培养 基制 备 ３ ． １ ６ Ｘ系列 稀释
的 ５倍供试 品 Ｒ Ｇ Ｄ — Ｔ Ｒ Ａ Ｉ Ｌ溶液 。最 后 ， 每 株 细胞每
孔分 别 加 ２ ０ Ｌ相 应 的 供试 品 Ｒ Ｇ Ｄ ． Ｔ Ｒ Ａ Ｉ Ｌ ５倍 溶
液， 每个药 物浓 度各 ３个复孑 Ｌ 。
Ｘ Ｒ细胞 计数 仪进 行 活 细胞 计 数 。用 培养 基 将 细 胞
悬 液调 整 到适 当的浓 度 。每孔加 ８ ０ Ｌ细胞 悬 液于
９ ６孔 细 胞 培 养 板 ， 最终 细胞 浓度 为 每孔 ３ ０ ０ ０～
５ ０ ０ ０细 胞 。细胞 置 于 ３ ７℃ ， ５ ％ Ｃ Ｏ 和 ９ ５ ％ 湿 度 的培 养箱 培养 ２ ４ ｈ 。
细胞水 平 的药物筛 选 能够直 接观察 被 筛选药 物对 生 命 功 能 的影 响 ， 更 能全 面反 映其 生理 活性特 征 ， 适 应
现代 药物筛 选 的需要 。
因此 ， 本研究选择 ３ ０株人 肿瘤细胞 系开展 Ｒ Ｇ Ｄ －
Ｔ Ｒ Ａ Ｉ Ｌ的敏感 肿 瘤 细胞 筛 选 ， 采用 Ｃ Ｔ Ｇ方 法 测 定药 物在各 个 肿 瘤 细 胞 系 中的 细 胞 增 殖 ５ ０ ％ 抑 制 浓 度 （ Ｉ Ｃ 如 ） ， 来确定 对 Ｒ Ｇ Ｄ — Ｔ Ｒ Ａ Ｉ Ｌ的敏感 肿 瘤细胞 株 ， 为 Ｒ Ｇ Ｄ ． Ｔ Ｒ Ａ Ｉ Ｌ确定临床适应症 提供理论依据 。
型显微镜 （ 重庆光 电集 团） ； Ｂ Ｃ Ｄ一２ １ ５ Ｄ Ｋ型冰箱 （ 海
尔集 团 ） ； Ａ Ｌ ２ ０ ４型 电子 天 平 （ 梅特勒多利多公司） ； Ｖ ｉ — Ｃ ｅ ｌ ｌ Ｘ Ｒ型活细胞计数仪 （ 贝克曼公 司） 。
Ｃ ｅ ｌ ｌ Ｔ ｉ ｔ ｅ ｒ — Ｇ ｌ ｏ （ Ｃ Ｔ Ｇ， Ｐ ｒ ｏ ｍ ｅ ｇ ａ公 司 ） ； Ｒ Ｐ Ｍ Ｉ Ｉ ６ ４ ０培 养基 （ 改 良型 ， Ｔ ｈ ｅ ｒ ｍｏ ｓ ｃ ｉ ｅ ｎ ｔ ｉ ｉ ｆ ｃ 公司） ； Ｄ ＭＥ Ｍ 培养 基 （ Ｇ ｉ ｂ ｃ ｏ公 司 ） ； Ｍｃ Ｃ ｏ ｙ ’ Ｓ ５ ａ培 养 基 （ Ｇ ｉ ｂ ｃ ｏ公 司 ） ； Ｈ ａ ｍ ’ Ｓ Ｆ １ ２ Ｋ培养基 （ Ｇ ｉ ｂ ｃ ｏ 公司） ； Ｌ 一 １ ５培 养基 （ Ｔ ｈ ｅ ｒ ． ｍ ｏ ｓ ｃ ｉ ｅ ｎ ｔ ｉ ｉ ｆ ｃ 公 司） ； Ｆ Ｂ Ｓ （ 胎牛血清 ， Ｇ ｉ ｂ ｃ ｏ公 司 ） ； 牛
１ ０ ６ ６
中 国 新 药杂 志 ２ ０ １ ５年 第 ２ ４卷第 ９期
Ｃ ｈ ｉ ｎ ｅ ｓ ｅ Ｊ ｏ ｕ ｒ ｎ ａ ｌ ｏ ｆ Ｎ ｅ ｗ Ｄ ｒ ｕ ｇ ｓ ２ ０ １ ５ ， ２ ４（ ９）
ｄ ２ ：用 ｄ ｄ Ｈ， ０溶 解供 试 品 Ｒ Ｇ Ｄ － Ｔ Ｒ Ａ Ｉ Ｌ为 １ ． ２
我 们选 取 １ ９种肿瘤 的常见 细胞株 进行 了实 验 ，
来 源 和培养基 情 况见表 １ 。
品， 每个 细胞 株重 复 ３次 。 以等 体 积 培养 基 作 为 空
表 ｌ 实 验用 细胞 系 的来 源 和培养 基情 况
白对照 。
３ Ｃ Ｔ Ｇ 方 法测定 药物 细胞 增殖 Ｉ Ｃ 。 ｄ １ ：收 集 处 于 指 数 生 长期 的细 胞 并 用 Ｖ ｉ — Ｃ ｅ ｌ ｌ
２ 细 胞 系
细胞 接 种浓度 控 制 在 每 孔 ３ ０ ０ ０— ５ ０ ０ ０细胞 ， １ ～ ９孔分别 加 入 ２ Ｏ Ｌ ｃ １～Ｃ ９系列 稀 释浓 度 的供 试品Ｒ Ｇ Ｄ－ Ｔ Ｒ Ａ Ｉ Ｌ（ ４ ０ Ｉ ｘ ｇ ・ ｍＬ ～～ ４ ｎ ｇ ・ ｍＬ ）的样
方
法
１ 药 物配 制方法 和加 样设 计 用 １ ｍＬ ｄ ｄ Ｈ ， Ｏ溶解 １ ． ２ ｍｇ 供试 品 Ｒ Ｇ Ｄ — Ｔ Ｒ Ａ Ｉ Ｌ 为 １ ． ２ ｍｇ ・ ｍ Ｌ 储存 液， 用储 存 液 和 培养 基 配 制 ５ 倍 供试 品 系列 稀释 浓度 。