同步导数荧光光谱法测定食品中3种芳香族氨基酸_朱燕舞
荧光光度法同时测定氨基酸口服液和注射液中的三种芳香族氨基酸
酪 氯酸 （ ｒ 、 氨 酸 （ ｙ ） 苯 丙 氨 酸 （ ｈ ） Ｔｙ ） 色 Ｔｐ和 Ｐ ｅ 均 为 生 化试剂 （ 海 生 化 制 剂 厂 生 产 ） 分 别 用 水 作 上 ，
溶 剂配 成 １ ／ １ ０ｍｇ Ｌ和 １ ０ ｍｇ Ｌ的 储 备 ０ ｍｇ Ｉ ０ ／ ， ０ ／ 液 ， ｉ２ （４ Ｎａ Ｈ 缓 冲 溶 液 ｐ Ｎａ Ｐ ）一 Ｏ ｌ Ｈ＝７． ２按 文 献 ［ ］
摘
要 ： 三 种 芳 香 族 氨 基 酸 即 色 氨 酸 、 氨 酸 和 苯 丙 氨 酸 混 合 体 系 的荧 光 光 谱 进 行 了 测 定 ， 时 用 多 元 线 性 回 归 对 酪 同
（ Ｌ 、 成 分 回 归 （ Ｃ 和 偏 最 小二 乘 法 （ Ｌ ） 化 学 计 量 学 方 法 对 光 谱 数 据 直 接 进 行 解 析 。结 果 表 明 ， 光 谱 Ｍ Ｒ） 主 Ｐ Ｒ） Ｐ Ｓ等 对
Ｍ ａ ． ０２ ｒ ２ ０ ）１ ０ １ ４ １ ０ —０ ６ （ ０ ２ ０ —０ ７ —０
荧光 光 度 法 同 时 测 定 氨 基 酸 口服 液 和 注 射 液 中的 三 种 芳 香 族 氨 基 酸
李 东华 ， 永 年 倪
（ 昌 大 学 化 学 系 ， 西 南 昌 ３ ０４ ） 南 江 ３ ０ ７
严 重 重 叠 且 响 应 信 号 相 差 较 大 的氨 基 酸 多 组 分 分 析 体 系 ， 用 多 元 线 性 回 归测 定 时 误 差 较 大 ， 主 成 分 回 归 和 偏 采 而
最 小 二 乘 法 则 能取 得 较 为 满 意 的 结 果 。 关 键 词 ： 基 酸 ； 光分 光 光 度 法 ； 组 分 分 析 氨 荧 多
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第２ ６卷 第 １ 期
叶酸与某些芳香族氨基酸相互作用的荧光光谱研究及分析应用
Ａ 。 ／Ａ 。 ＝２ ７ ７ ｎ ｍ／ ３ ０ ４ ｎ ｍ（ Ｔ ｙ ｒ 体 系） 、 Ａ ／Ａ 。 ＝２ ８ ９ ｎ ｍ／ ３ ５ ３ ｎ ｍ（ Ｔ ｒ ｐ体 系 ） 、 Ａ 。 ／Ａ ＝ ２ ６ １ ｎ ｍ／ ２ ８ ４ ｎ ｍ（ Ｐ ｈ ｅ
作者简介： 董存智 （ １ ９ ５ ４一 ） ， 男， 山东蓬莱人， 教授， 研究方 向： 分子光谱
第 ３期
董存 智等 ： 叶 酸与 某 些芳 香族氨 基 酸相 互作 用的 荧光 光谱研 究及分析 应 用
３ ３
２ 结果 与讨论
２ ． １ 荧 光光 谱
Ｔ ｙ ｒ 、 Ｔ ｉ ｐ和 Ｐ ｈ ｅ 等３ 种芳香族氨基酸都有一定强度 的荧光， 实验条件下 Ｆ Ａ的加入， 使得 ３ 种芳香族氨 基 酸 的荧 光均 发生 猝灭 ， 实验 结果 如 图 １ 所示． 实验 发现 ， ３种芳 香族 氨基 酸 的荧 光强度 随 Ｆ Ａ浓度 的增 大而 降低， 而荧光发射峰位保持不变．
２ ． ４ 反应 时 间的 影响
在试验条件下， 改变静置时间， 考察静置时间对体系荧光强度的影响． 实验结果表明， Ｆ Ａ与 ３ 种芳香族 氨 基 酸 的反 应在 ２ ０ ｍｉ ｎ内完 成， 体 系 的荧 光 强度 在 ２ ０—９ ０ ａ ｒ ｉ ｎ之 间保 持 稳定 ， 故本 试 验 的反 应 时间选 择 为
２ ０ １ ３丘
２ ． ６ 共存 离子 的影响
在选 定 实验 条件 下， 考察 常见 物质 对 Ｆ Ａ测定 的干扰 ， 结 果表 明， 对１ ． ０ ｍｇ ／ Ｌ的 Ｆ Ａ溶 液 ， 相对 误差 ＜４ － ５ ％时， 各种物质 允许共存 的量分别 为： Ｎ Ｈ １ ５ ０ ０ ｍｇ ／ Ｌ ； 淀粉 、 ｃ 卜、 尿素 、 ｓ Ｏ 、 Ｚ ｎ ２ ２ ０ ０ ｍ ｇ ／ Ｌ ； 葡 萄 糖 １ ０ ０ ａｇ ｒ ／ Ｌ ； 肝 素钠 、 Ｍｇ 、 Ｋ ５ ０ ｍｇ ／ Ｌ ； 白氨酸 、 半胱 氨 酸 、 甘 氨酸 、 Ｌ ａ ３ ２ ５ ａｇ ｒ ／ Ｌ ； 维 生素 Ｃ １ ５ ｍｇ ／ Ｌ ； 维 生素 Ｋ ３ 、 维生素 Ｂ ６ １ ． ５ ｍ ｇ ／ Ｌ ． 其 中维生 素 Ｋ ３ 、 维生素 ｃ和维 生素 Ｂ ６的干扰可 以通过 去活 硅藻 土除 去ｎ 引 ． ２ － ７ 样 品分 析 取 不 同厂家 生产 的叶酸 片适量 （ 规 格： ５ ｍ ｇ ／ 片） ， 将其 研 细 ， 加少许 稀氢 氧化 钠溶 解 （ 超声 波 助溶 ） ， 定容
荧光分析法在药物分析中的应用
CT利用组织密度的不同造成对x射线透过率不同，对机体一定厚度的层面进行扫描，并利用计算机重建三维图像。小动物 CT (微型cT )作为一种最新的cT成像技术，具有微米量级的空间分辨率(大于9um)，并可以提供三维图像。
小动物 C T
4、小动物 MRI
MRI 依据所释放的能量在物质内部不同结构环静中不同的衰减，绘制出物体内部的结构图像。相对于CT， MRI具有无电离辐射性 ( 放射线 ) 损害、的软组织分辨能力 ， 以及无需使用 比剂 即可显示血管结构等的独特优点。对于核素和可见光成像，小动物MRI的优势是具有微米级的高分辨率及毒性；在某些应用中，MRI能同时获得生理、分子解剖学的信息， 这些正是核医学、光学成像的弱点。对于小动物研究，小动物MRI是一个功能强大、多用途的成像系统， 但是 MRI 的敏感性较低(微克分子水平)，与核医学成像技术的纳克分子水平相比，低几个数量级，所以它不是最理想的成像系统。随着多模式平台的发展， 如MRI／PET，可以从一个仪器中得到更全面的信息。
胶束增敏荧光分析法是在胶束溶液中对药物的含量进行测定的荧光分析方法。表面活性剂的作用之一是在溶液中产生胶束环境，胶束环境对物质分子有如下作用: 胶束环境对分子极性较小的弱荧光物质具有一定程度的增溶作用，所以对于此类物质，可用表面活性剂作为增溶剂; 胶束环境对有一定荧光性质的物质分子的荧光发射具有增敏增稳作用，因此，对于此类物质，可用表面活性剂对其作用，使其起到增敏增稳的效果。 综合以上分析，对于某些几乎没有荧光性或荧光性很弱的药物用直接荧光方法无法进行分析测定时，可以通过使用表面活性剂产生胶束环境，从而使该药物的荧光强度得到一定程度的增强。
这个技术主要应用于药物研发的以下几个方面：
核素成像
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荧光光谱法研究亚甲蓝与三种芳香族氨基酸的相互作用
Ｓ ｔ ｕｄ ｙ ｏ ｆ ｉ ｎｔ ｅ ｒ ａ ｃ ｔ ｉ ｏ ｎ ｏ ｆ ｍｅ ｔ ｈｙ ｌ ｅ ｎｅ ｂｌ ｕｅ ｗｉ ｔ ｈ ｔ ｈｒ ｅ ｅ ａ ｒ ｏ ｍａ ｔ ｉ ｃ ａ ｍｉ ｎ ｏ
ａ ｃ ｉ ｄ ｓ ｂ ｙ ｌｕｏ ｆ ｒ ｅ ｓ ｃ ｅ ｎ ｃ ｅ ｓ ｐｅ ｃ ｔ ｒ ｏ ｓ ｃ ｏ ｐ ｙ
Ｚ ＨＵ Ｙａ ｎ ・ ＷＵ’， Ｉ ＡＩ Ｐ ｅ ｎ ｇ — ｌ ｉ ａ ｎ ｇ ， Ｗ Ｕ Ｘｉ ａ ｏ — ｘ ｉ ａ ｏ ， Ｚ ＨＯ Ｕ Ｊ ｉ ｅ — ｍｅ ｉ ， Ｊ Ｉ ＡＮＧ Ｈｕ ａ ｎ ，
光猝 灭波长分别 位于 ３ ４ ６ 、 ３ ０ ３和 ２ ８ ２ ｎ ｍ。其荧 光猝灭值 （ 一 Ｆ ） 在 一定范 围内与 ＭＢ成正 比， 用于测定 ＭＢ具 有高灵敏度 。通 过 Ｓ ｔ ｅ ｒ ｎ ． Ｖ ｏ ｌ ｍ ｅ ｒ 作 图及 温度 的影响 ， 表明 Ｍ Ｂ与三种芳香 族氨基酸之间 以摩尔 比 １： １ 形成基 态复合物 ， 均产生显 著的静态猝灭 ， 相互 作用力较强 ， 其 中 ＭＢ主要 通过疏水作用与 Ｔ ｒ ｐ结合 ， 与Ｔ ｙ ｒ 和Ｐ ｈ ｅ 之 间 的结合 过程以静 电作用力 为主。 关键词 ： 亚 甲蓝 ； 色氨酸 ； 酪氨酸 ； 苯丙氨酸 ； 荧 光猝灭
荧 光 光 谱 法 研 究 亚 甲蓝 与 三 种 芳 香 族 氨 基 酸 的 相 互 作 用
朱 燕舞 ， 赖 彭亮 ， 吴笑 笑， 周 洁梅 ， 江 欢 ， 王均胜 ， 邓 宁， 何建波
（ 合肥 工业 大 学化 学 与化 工学 院 ， 可控化 学 与材 料 化 工安 徽省 重 点实验 室 ， 安徽 合肥 ２ ３ ０ ０ ０ ９ ）
导数同步荧光光谱法同时测定食品中的合成色素
导数同步荧光光谱法同时测定食品中的合成色素摘要随着我国时代的发展以及经济社会的繁荣，我国的社会居民在日常的生活过程中加强了对于食品安全问题的关注。
在这样的背景之下，为了进一步削减食品色素对于相关居民身体健康等因素的影响，我国的食品安全部门在食品检测的过程中加强了对于导数同步荧光光谱法的运用。
本文基于此，分析探讨导数同步荧光光谱法的内涵，并就该方法对食品合成色素的检测进行论述。
关键词导数同步；荧光光谱法；食品安全；合成色素引言作为一种常用的食品添加剂，食用色素在食品生产中的运用往往能够提升食品的色彩，从而增强居民的食欲，提升食品的销售量。
但事实上，作为一种化学合成材料，食用色素的过度食用往往也会导致各类食品安全问题，并对社会居民的身体健康状况造成威胁。
本文基于此，分析探讨食品安全监测部门如何采取导数同步荧光光谱法进行食品合成色素[1]的检测。
1 实验分析1.1 仪器与试剂在借助导数同步荧光光谱法进行食品合成色素检测的过程中，检验人员需要采用荧光分光光度计、紫外-可见分光光度计以及分析天平进行相关的作业。
此外，为了确保实验的科学开展，实验检验人员还需要对试剂进行科学的选择。
在本次实验过程中，检验人员需要进行胭脂红标准储备液、日落黄标准储备液、氨-氯化铵缓冲液的配制。
在本次实验的过程中，为了减少溶液杂质对于实验的影响，实验人员所采用的纯净水均为二次蒸馏水。
2 实验步骤在开展导数同步荧光光谱法同时测定食品合成色素的实验过程中，实验人员需要选取-1.0 mL的氨-氯化铵缓冲液放置在比色管中，并取一定量的胭脂红、日落黄标准工作液，定容至2 mL。
随后，实验人员需要将检测的激发波长控制在200～400 nm范围内，并对光谱一阶进行求导工作。
在这一过程中，实验人员在零交点波长处测定出另一物质（日落黄、胭脂红）的导数同步荧光值d F/dλ，最红再以d F/dλ值与所对应物质（胭脂红、口落黄）浓度绘制出标准工作曲线图。
基于导数-恒基体同步荧光的纺织品中萘胺同分异构体快速定量检测
生命科学仪器 2023年第21卷/第5期研究报告31作者简介:李娜,硕士,E -m a i l :s a v a n n a h _1114@163.c o m ㊂通讯作者:李耀群,厦门大学,教授,E -m a i l :y a o qu n l i @x m u .e d u .c n ㊂谢堂堂,深圳海关工业品检测技术中心,正高级工程师,E -m a i l :t a n g t a n gx i e @139.c o m ㊂基金项目:福建省科技计划项目(项目号:2022Y 4008);国家自然科学基金(项目号:22274137)资助基于导数-恒基体同步荧光的纺织品中萘胺同分异构体快速定量检测李 娜1 魏嘉雯1 吴平平1 赵 妍1 谢堂堂2* 李耀群1*(1.厦门大学,福建厦门3610052.深圳海关工业品检测技术中心,广东深圳518067)摘要 2-萘胺是纺织品中禁用的一种致癌芳香胺,其与同分异构体1-萘胺(非禁用)的结构㊁性质相似,传统检测方法在检测纺织品实际样品时可能会造成阳性结果的误判,因此相关检测标准要求采用多种方法对阳性结果进行复查确认㊂目前常规的复查方法为气相色谱-质谱联用法和高效液相色谱法,存在操作复杂㊁耗时长等弊端,因此开发一种简单㊁快速的方法用于鉴别和定量纺织品中的致癌芳香胺及其异构体具有重要意义㊂导数-恒基体同步荧光法具有灵敏度高㊁选择性好㊁可消除背景干扰等特点,已广泛地应用于复杂基质中物质的测定㊂为了实现纺织品中1-萘胺(1-N A )和2-萘胺(2-N A )的快速鉴别定量,建立了一种导数-恒基体同步荧光分析法㊂研究确立了一条合适的恒基体同步荧光扫描路径,提高1-N A 和2-N A 的光谱分辨率;结合一阶导数技术消除背景干扰,得到1-N A 和2-N A 的净信号㊂以上两种技术的结合,能够保持较高的灵敏度和选择性,同时避免了耗时的物理分离过程且无需多次扫描㊂整个光谱的扫描过程可在2分钟内完成㊂实验结果表明,1-N A 和2-N A 的检出限分别为0.001m g /L (相当于纺织品中的0.1m g /k g )和0.006m g /L (相当于纺织品中的0.6m g /k g),远远低于国家标准中规定的限量(20m g /k g);1-N A 的加标回收率在89.1~122.1%之间,2-N A 的加标回收率在88.5~111.0%之间,相对标准偏差均小于9.3%;将所提出的方法与H P L C 法作统计比较,得到的测试结果之间无显著差异㊂因此,所提出的方法具有较高的选择性㊁灵敏度,能够准确㊁可靠地鉴别和定量2-N A 及其同分异构体1-N A ,可应用于纺织品中禁用芳香胺的实际检测㊂关键词 禁用芳香胺;同分异构体;恒基体同步荧光法;导数技术;快速检测R a p i d q u a n t i t a t i v e d e t e c t i o n o f n a p h t h yl a m i n e i s o m e r s i n t e x t i l e s b a s e d o n D e r i v a t i v e -M a t r i x I s o p o t e n t i a l S yn c h r o n o u s F l u o r e s c e n c e L I N a 1,W E I J i a -w e n 1,WU P i n g -p i n g 1,Z H A O Y a n 1,X I E T a n g -t a n g 2*,L I Y a o -q u n 1*(1.X i a m e n U n i v e r s i t y ,X i a m e n ,F u ji a n ,361005;2.S h e n z h e n C u s t o m s a n d Q u a r a n t i n e B u r e a u I n d u s t r i a l P r o d u c t s T e s t i n g T e c h n o l o g y C e n t r e ,S h e n z h e n ,G u a n g d o n g ,518067)ʌA b s t r a c t ɔ2-n a p h t h y l a m i n e (2-N A )i s a p r o h i b i t e d c a r c i n o ge n i c a r o m a t i c a m i n e i n t e x t i l e s .I t i s s i m i l a r i n s t r u c -t u r e a n d p r o p e r t i e s t o t h e i s o m e r 1-n a p h t h yl a m i n e (1-N A )w h i c h i s n o n -p r o h i b i t e d ,w h i l e t r a d i t i o n a l d e t e c t i o n m e t h o d s m a y c a u s e f a l s e p o s i t i v e r e s u l t s w h e n t e s t i n g t e x t i l e s a m p l e .T h e r e l e v a n t s t a n d a r d s r e q u i r e t h e u s e o f m u l t i pl e m e t h o d s f o r r e -e x a m i n a t i o n a n d c o n f i r m a t i o n w h e n a p o s i t i v e r e s u l t i s d e t e c t e d .A n d t h e c u r r e n t c o n v e n -t i o n a l r e -e x a m i n a t i o n m e t h o d s a r e g a s c h r o m a t o g r a p h y -m a s s s p e c t r o m e t r y a n d h i g h p e r f o r m a n c e l i qu i d c h r o m a -t o g r a p h y ,w h i c h h a v e d i s a d v a n t a g e s s u c h a s c o m p l i c a t e d o p e r a t i o n a n d t i m e -w a s t i n g .I t i s o f g r e a t i m p o r t a n c e t o d e v e l o p a s i m p l e a n d r a p i d m e t h o d f o r t h e i d e n t i f i c a t i o n a n d q u a n t i f i c a t i o n o f c a r c i n o ge n i c a r o m a t i c a m i n e s a n d t h e i r i s o m e r s i n t e x t i l e s .D e r i v a t i v e m a t r i x i s o p o t e n t i a l s y n c h r o n o u sf l u o r e s c e n c e s p e c t r o s c o p y ha s t h e c h a r a c t e r i s t i c s o f h i g h s e n s i t i v i t y ,g o o d s e l e c t i v i t y a n d e l i m i n a t i o n o fb ac k g r o u nd i n te rf e r e n c e ,a n d i s w i d e l y us e d i n t h e d e t e r m i n a t i o n o f s u b s t a n c e s i n c o m p l e x s a m p l e s .I n o r d e r t o r e a l i z e t h e r a pi d i d e n t i f i c a t i o n a n d q u a n t i f i c a t i o n o f 1-N A a n d 2-N A i n t e x t i l e s ,a s y n c h r o n o u s f l u o r e s c e n c e a n a l y s i s m e t h o d c o m b i n e d w i t h d e r i v a t i v e t e c h n o l o g y wa s e s t ab l i s h e d .E s t a b l i s h i n g a p r o p e r sc a n n i n g t r a j e c t o r y o f m a t r i x i s o p o t e n t i a l s y n c h r o n o u s f l u o r e s c e n c e s p e c t r o s c o p y (M I S F S )c a n i m p r o v e s p e c t r a l r e s o l u t i o n o f i s o m e r s .W h e n M I S F S c o m b i n e d w i t h f i r s t d e r i v a t i v e t e c h n i q u e ,t h e b a c k gr o u n d i n t e r f e r e n c e i s e l i m i n a t e d a n d t h e s e n s i t i v i t y a n d s e l e c t i v i t y a r e b o t h i m p r o v e d .M e a n w h i l e ,t i m e -w a s t i n g p h ys i c a l s e p a r a t i o n p r o c e s s a n d m u l t i -s c a n n i n g a r e a v o i d e d .T h e s c a n n i n g t i m e i s a b o u t 2m i n .A c c o r d i n g t o t h e e x pe r i -研究报告生命科学仪器 2023年第21卷/第5期32m e n t r e s u l t s ,t h e d e t e c t i o n l i m i t s f o r 1-N A a n d 2-N A a r e 0.001m g /L (c o r r e s p o n d i n g t o 0.1m g /k gi n t e x t i l e s )a n d 0.006m g /L (c o r r e s p o n d i n g t o 0.6m g /k g i n t e x t i l e s ),r e s p e c t i v e l y .A n d t h e s pi k e d r e c o v e r i e s o f 1-N A a n d 2-N A a r e 89.1-122.1%a n d 88.5-111.0%w i t h t h e r e l a t i v e s t a n d a r d d e v i a t i o n l e s s t h a n 9.3%,r e s p e c t i v e l y .C o m p a r i n g t h e p r o p o s e d m e t h o d w i t h H P L C ,t h e t e s t r e s u l t s o f a b o v e t w o m e t h o d s s h o w n o s i gn i f i c a n t d i f f e r e n c e .T h e p r o p o s e d m e t h o d o b t a i n s s a t i s f a c t o r y e x p e r i m e n t a l r e s u l t s ,w h i c h i s o f s i gn i f i c a n c e f o r t h e p r a c t i c a l d e t e c t i o n o f 1-N A a n d 2-N A i n t e x t i l e s .ʌK e y wo r d s ɔB a n n e d a r o m a t i c a m i n e s ;I s o m e r s ;M a t r i x i s o p o t e n t i a l s y n c h r o n o u s f l u o r e s c e n c e s p e c t r o s c o p y ;D e r i v a -t i v e t e c h n i q u e ;R a pi d d e t e c t i o n 中图分类号:O 657.3 文献标识码:A D O I :10.11967/2023211006引言偶氮染料由于具有染色性能突出㊁色谱齐全㊁合成简单等特点成为纺织品印染工艺中应用最广泛的一类合成染料[]㊂来源于偶氮染料的部分芳香胺危害人体健康和环境安全[3,4],因此被各个国家立法禁止㊂目前国家标准中明确禁止的芳香胺有24种,规定限量值为20m g /k g [5]㊂而在偶氮染料的生产或还原过程中不可避免引入禁用芳香胺的同分异构体㊂芳香胺同分异构体由于结构类同㊁性质相似,容易造成阳性结果的误判㊂因此,各国/地区检测方法均要求区分禁用芳香胺的同分异构体㊂其中,中国国家标准G B /T 17592-2011中规定必要时,选用另一种或多种方法对异构体进行确认 ㊂国际标准I S O 14362-1:2017提供了薄层层析法㊁高效液相色谱法㊁高效液相色谱-质谱法㊁气相色谱-质谱法㊁毛细管电泳法等多种方法,并明确规定了指出 禁用芳香胺存在同分异构体,应采用多种方法进行确认㊂图1 1-萘胺(左)和2-萘胺(右)的分子结构F i g .1S t r u c t u r e o f 1-N A (l e f t )a n d 2-N A (r i gh t )纺织品中禁用芳香胺的常用检测手段有气相色谱-质谱联用法(G C -M S )和液相色谱法等[]㊂而同分异构体具有相同或相似的色谱行为或质谱图,即使色谱检测过程中,有些致癌芳香胺及其异构体的出峰时间稍有差异,但由于出峰时间太过相近,很难判断是否为禁用的芳香胺㊂在24种禁用芳香胺中2-萘胺(2-N A )是对人体的致癌作用最为严重的芳香胺之一㊂在致癌芳香胺的实际检测中,常检出的2-N A 的同分异构体1-萘胺(1-N A )是非禁用芳香胺㊂纺织品中禁用芳香胺的同分异构体干扰成为了行业难题㊂而目前,针对同时测定纺织品中1-N A 和2-N A 的相关研究较少,由于1-N A 和2-N A 的色谱保留时间相近㊁质谱图相同,主要是通过优化G C-M S 的升温程序或优化液相色谱流动相条件等[10,11],扩大二者的保留时间差从而实现对1-N A 和2-N A 的同时检测,但这些方法需要消耗大量的化学试剂㊁所用仪器设备昂贵㊁所需检测时间长㊂因此,建立一种快速鉴别和定量纺织品中1-N A 和2-N A 的方法是十分必要的㊂同步荧光分析法相比于常规荧光分析法具有简化光谱㊁窄化谱带㊁减少散射光干扰等特点,适用于混合物的分析[]㊂其中恒基体同步荧光法(M I S F S)是一种能够解析光谱紧密重叠的混合物且能克服基质背景干扰的分析技术,其基本原理是:将基体荧光强度相同的点连接起来形成荧光等高线图,沿着基体某一荧光等高线扫描,获得的荧光强度一致;恒基体同步荧光扫描路径表现为经过被测物最大激发和发射波长位置的一段荧光等高线㊂该方法常与导数技术联用,在整个扫描过程中,基体的导数信号为零,扫描所得的信号为被测物的净信号㊂因此,导数-恒基体同步荧光法已广泛应用于生物复杂基质中物质的检测[]㊂1-N A 和2-N A 的荧光性质相似,基本荧光光谱严重重叠,常规荧光法无法分辨㊂目前一阶导数-恒波长同步荧光法已用于同时测定1-N A 产品中的1-N A 和2-N A [19],在p H=7.5的磷酸缓冲溶液中,当波长差为120n m 时,两组分的谱峰仍存在重叠而未完全分离,因此需利用零交点法避免二者之间的测定干扰,且该方法未见应用于纺织品的分析㊂而染色纺织品中含有各种杂质,目标分析物的信号可能会受到基体的干扰,从而影响测定的准确性㊂本文建立一种染色纺织品中1-N A 和2-N A 的导数-恒基体同步荧光(D M I S F S )检测方生命科学仪器 2023年第21卷/第5期研究报告33法,能够对2种芳香胺进行同时准确定性㊁定量分析㊂所提出的方法只需对样品溶液简单处理,可应用于纺织品实际样品中1-N A 和2-N A 的快速检测㊂该方法快速便捷㊁灵敏度高,可为纺织品中致癌芳香胺的实际检测工作提供新分析手段㊂1 实验部分1.1 仪器设备 实验室自组装的多功能荧光仪:该仪器配备150W 的氙灯电源(北京赛凡光电仪器有限公司)㊁激发和发射单色仪(北京赛凡光电仪器有限公司);控制荧光仪的软件由实验室采用C 语言编写;导数光谱通过电子微分器获得㊂光谱测定使用1.0c mˑ1.0c m 石英荧光带塞比色皿(宜兴市晶科光学仪器有限公司)㊂荧光等高线图由基于E x c e l 的V i s u a l B a s i c 程序和O r i gi n 软件绘制㊂根据G B /T 17592-2011实际样品的处理所需设备:R C T b a s i c 型加热磁力搅拌器(德国I K A ),R E -52C 型旋转蒸发仪(巩义予华仪器有限责任公司)㊂1.2 试剂 1-N A 和2-N A 标准品购于上海泰坦科技股份有限公司㊂根据G B /T 17592-2011实际样品的处理所需试剂:乙醚(C 2H 5O C 2H 5)㊁柠檬酸(C A )㊁氢氧化钠(N a OH )及无水乙醇(C 2H 5OH )均购于国药集团化学试剂有限公司,连二亚硫酸钠(N a 2S 2O 4)购于北京百灵威科技有限公司,硅藻土(S i O 2㊃n H 2O )购于上海泰坦科技股份有限公司㊂以上所用试剂均为分析纯;实验用水均为超纯水,由厦门大学M i l l i -Q 水处理系统净化㊂母液:用无水乙醇分别配制400m g/L 1-N A 和2-N A 储备液于25m L 棕色容量瓶,储存于4ħ冰箱中,待稀释使用㊂1.3 实际样品前处理 样品前处理参照国家标准G B /T 17592-2011中6.1和6.2步骤[20]进行㊂还原裂解:称取1.0g 纺织样品,剪成5mm ˑ5mm 小片置于反应器中㊂加入17.0m L 已预热的柠檬酸盐缓冲溶液(70ʃ2ħ),密封反应器并用力振摇后,置于(70ʃ2)ħ恒温水浴中保温30m i n ,使样品充分润湿㊂随后加入3.0m L 连二亚硫酸钠溶液,密闭振摇后,再次将反应器置于(70ʃ2)ħ恒温水浴中保温30m i n ,取出后2m i n 内冷却至室温㊂萃取:将反应液全倒入提取柱中吸附15m i n ,分别用20.0m L 乙醚洗提4次反应器中的试样,然后将洗液倒入提取柱中,收集乙醚提取液于圆底烧瓶中㊂浓缩:将上述圆底烧瓶中的乙醚溶液旋转蒸发,浓缩至近干后,准确移取1.0m L 乙醇加入圆底烧瓶中,混匀,静置㊂1.4 恒基体同步荧光扫描路径的建立 为了建立适用于纺织品样品中1-N A 和2-N A 同时测定的恒基体同步荧光法,需要建立一条最佳的扫描路径以获得最佳的恒基体同步荧光光谱,即具有良好的光谱分辨性和较强的荧光强度㊂基于恒基体同步荧光光谱法的原理,为了获得较高的检测灵敏度,在由基于E x c e l 的V i s u a l B a s i c 程序和O r i gi n 软件绘制的荧光等高线图上选择经过荧光强度最大区域的等高线轨迹作为恒基体同步荧光扫描路径;经过调整轨迹上的点的个数㊁间距㊁扫描长度等条件从而获得最佳扫描路径,如图3中的曲线AM B 所示㊂1.5 测定方法 激发㊁发射单色仪狭缝宽度均为5n m ;利用控制荧光仪的软件中的T O P O 程序扫描建立的最佳路径,由A 端的起点开始沿着路径扫描至B 端的终点,依次得到1-N A 和2-N A 的信号,得到最佳恒基体同步荧光光谱㊂其中速率参数T i m e c o n s t a n t f o r T O P O=5.0E -07㊂1.6 校准和分析参数 取20.0μL 处理获得的空白实际样品溶液用无水乙醇稀释至2.0m L ,利用标准加入法制备不同浓度的混合物溶液,使用所建立的最佳扫描路径扫描恒基体同步荧光光谱以获得校准曲线和回收率㊂2 结果与讨论2.1 基本荧光光谱 1-N A 和2-N A 是一对同分异构体,具有相同分子式而具有不同结构,1-N A 和2-N A 均易溶于乙醇,且乙醇溶剂相对绿色环保,因此本实验选用乙醇作为溶剂㊂图2展示了1-N A ㊁2-N A 及其混合物在乙醇溶剂中的基本激发㊁发射荧光光谱㊂1-N A (λe x =332n m ,λe m =427n m )和2-N A (λe x =346n m ,λe m =404n m )的激发波长差和发射波长差分别为14n m 和23n m ㊂由于二者的分子结构极其相似,光谱严重重叠,且谱带较宽,混合物在乙醇溶剂中的基本发射光谱仅显示一个主峰,若不经过复杂的物理分离过程,利用常规荧光方法将无法鉴别1-N A 和2-N A ㊂由于恒基体同步荧光光谱能解析光谱严重重叠的混合物,因此本文提出建立D M I S F S 用于1-N A 和2-N A 的快速鉴别定量㊂研究报告生命科学仪器 2023年第21卷/第5期34图2 1-萘胺(0.40m g/L ,紫色曲线)㊁2-萘胺(0.40m g /L ,绿色曲线)及其混合物(0.40m g/L 1-萘胺和0.40m g/L 2-萘胺,红色曲线)的归一化荧光光谱F i g .2N o r m a l i z e d f l u o r e s c e n c e s pe c t r a of 1-N A (0.40mg /L ,p u r p l e l i n e ),2-N A (0.40m g/L ,g r e e n l i n e )a n d t h e i r m i x t u r e (0.40m g /L 1-N A ,0.40m g/L 2-N A ,r e d l i n e)2.2 最佳的恒基体同步荧光光谱 基于1-N A和2-N A 的复合荧光等高线图,建立了一条最佳的等高线扫描路径,如图3中的曲线AM B 所示㊂该扫描路径是通过连接两条分别来自1-N A 和2-N A 的等高线得到的㊂曲线AM 是2-N A 等高线的一部分,其尽可能地经过了1-N A 的最高激发㊁发射波长点:λe x =332n m ,λe m =427n m ;同理,曲线M B 是1-N A 等高线的一部分,也尽可能地经过了2-N A 的最高激发㊁发射波长点:λe x=346n m ,λe m =404n m ㊂A 点和B 点分别为1-N A 和2-N A 的光谱峰值的测量点㊂图3 1-萘胺(0.40m g/L ,紫色实线)和2-萘胺(0.40m g/L ,绿色实线)的复合荧光等高线图及选定的扫描轨迹(红色短线)F i g .3C o m p o s i t e f l u o r e s c e n c e c o n t o u r m a p c o n t a i n i n g1-N A (0.40m g /L ,p u r p l e l i n e ),2-N A (0.40m g/L ,b l u e l i n e )a n d t h e s e l e c t e d i s o p o t e n t i a l t r a j e c t o r y (r e d d o t -t e d l i n e)为了方便展示和定量,以测定序列为x 轴㊁同步荧光强度为y 轴绘制恒基体同步荧光光谱㊂沿着路径扫描先后经过A 点和B 点,可分别依次得到1-N A 和2-N A 的信号,图4(A )展示了1-N A ㊁2-N A 及其混合物的恒基体同步荧光光谱㊂尽管1-N A 和2-N A 得到了较好的分辨,但两种成分之间存在相互的背景干扰,导数技术能够消除恒定荧光信号的干扰,如图4(B )所示㊂结合一阶导数后,在扫描AM 段路径过程中2-N A 的信号被消除,只保留了1-N A 的导数信号;图4 1-萘胺(0.40m g/L ,紫色实线)㊁2-萘胺(0.40m g /L ,绿色实线)及其混合物(0.40m g/L 1-萘胺和0.40m g /L 2-萘胺,红色实线)的(A )零阶㊁(B )一阶-恒基体同步荧光光谱F i g.4(A )Z e r o a n d (B )F i r s t o r d e r d e r i v a t i v e -M I -S F s p e c t r a o f 1-N A (0.40m g /L ,p u r pl e l i n e ),2-N A (0.40m g /L ,g r e e n l i n e )a n d t h e i r m i x t u r e (0.40m g/L 1-N A ,0.40m g/L 2-N A ,r e d l i n e )同理,在扫描M B 段路径只显示了2-N A 的导数信号㊂因此,混合溶液中的1-N A 和2-N A 的导数同步荧光强度与同浓度的1-N A ㊁2-N A 单组分标准溶液的导数荧光强度一致,1-N A 和2-N A 的谱峰极值点强度值可用于定量分析㊂利用该方法能在2分钟内一次扫描快速鉴别混合溶液中的1-N A 和2-N A ㊂2.3 方法的选择性 为了验证所提出的方法能检测1-N A 的独立信号,固定2-N A 的浓度为0.40m g/L ,考察1-N A 在0.04~1.00m g/L 范围内混生命科学仪器 2023年第21卷/第5期研究报告35合溶液的一系列一阶导数同步荧光光谱;同理,固定1-N A 浓度为0.40m g/L ,测定2-N A 在0.04~10.00m g/L 范围内混合溶液的一系列一阶导数同步荧光光谱,以考察方法检测2-N A 信号的独立性㊂由图5(A )和5(B )可知,1-N A 和2-N A 在对应的检测点上信号明显,且不存在相互干扰,信号相互独立㊂图5(A )当2-萘胺浓度为0.40m g/L 时,1-萘胺的一阶导数恒基体同步荧光光谱(0.04~1.00m g/L );(B )当1-萘胺浓度为0.40m g /L 时,2-萘胺的一阶导数恒基体同步荧光光谱(0.04~10.00m g/L )F i g .5A s e r i e s o f f i r s t o r d e r d e r i v a t i v e -M I S F s pe c -t r a of (A )1-N A (0.04~1.00m g/L )i n t h e p r e s e n c e o f 2-N A a t 0.40m g /L ;(B )2-N A (0.04~10.00m g/L )i n t h e p r e s e n c e o f 1-N A a t 0.40m g/L 同时,如图6所示,空白市售纺织样品溶液在本方法条件下的D M I S F 光谱中没有其他的物质信号干扰,且同浓度的1-N A 和2-N A 在无水乙醇和空白样品溶液中的D M I S F 光谱基本重合,说明市售纺织样品溶液中其他物质在本方法条件下基本不存在基质干扰㊂本方法在实际样品中具有较高的选择性㊂2.4 线性范围和检测限的测定 1-N A 和2-N A 的校准曲线是通过在空白纺织样品溶液中添加一系列浓度的标准溶液获得的㊂采用标准加入法扫描一系列混合物溶液的D M I S F 光谱,通过线性回归方程构建校准曲线㊂实验结果表明,在1-N A 和2-N A 各自的检测点上,对应的D M I S F信号强度分别在0.04~1.00m g/L 和0.04~10.00m g/L 范围内与浓度呈良好的线性关系,线性相关系数分别为0.9948和0.9983,如图7所示㊂根据I U P A C 的定义,检出限(L O D )和定量限(L O Q )的计算公式分别为L O D=3S b/m 和L O Q =10S b /m (其中S b 为扫描11份空白样品的标准偏差,m 为校准曲线的斜率)㊂计算可得1-N A 和2-N A 的检出限分别为0.001m g/L (相当于纺织品中的0.1m g /k g )和0.006m g /L (0.6m g/k g ),定量限分别为0.003m g /L (0.3m g /k g )和0.022m g /L (2.2m g /k g)㊂所提出的方法所能测得的最低浓度远远低于国家标准G B 18401-2010中规定2-N A 的限量(20m g /k g ),这表明了该方法适用于纺织品中1-N A 和2-N A 的测定㊂图6 稀释100倍的空白样品溶液(橙色实线)㊁加标0.40m g /L 1-萘胺和0.40m g/L 2-萘胺的乙醇(蓝色短线)和空白样品溶液(粉色实线)的一阶导数恒基体同步荧光光谱F i g .6 F i r s t o r d e r d e r i v a t i v e -M I S F s pe c t r a of b l a n k s a m p l e s o l u t i o n d i l u t e d 100t i m e s (o r a n ge l i n e )a n d t h e m i x t u r e (0.40m g /L 1-N A a n d 0.40m g/L 2-N A )i n e t h a n o l (b l u e d o t t e d l i n e )a n d s a m p l e (pi n k l i n e )研究报告生命科学仪器 2023年第21卷/第5期36图7 (A )1-萘胺和(B )2-萘胺的校准曲线(导数荧光强度用绝对值表示)F i g.7C a l i b r a t i o n c u r v e b e t w e e n d e r i v a t i v e f l u o r e s -c e n c e i n t e n s i t y a n d t h e c o n c e n t r a t i o n o f (A )1-N A a n d (B )2-N A (D e r i v a t i v e f l u o r e s c e n c e i n t e n s i t y i s e x pr e s s e d i n a b s o l u t e v a l u e)2.5 人工合成混合样品的测定 为了测试所提出的方法对1-N A 和2-N A 定量测定的适用性,验证方法的准确性和可靠性,基于建立的扫描路径对几种不同比例的合成二元混合物的D M -I S F 光谱进行测定㊂表1展示了1-N A 和2-N A 的检测结果,1-N A 和2-N A 的回收率是通过校准曲线计算获得的㊂根据实验结果可知,1-N A 的加标回收率为89.1~122.1%,2-N A 的加标回收率为88.5~111.0%,相对标准偏差表1 不同人工合成混合物的回收率T a b l e 1 R e c o v e r i e s o f d i f f e r e n t s yn t h e t i c m i x t u r e s 样品加标浓度/m g ㊃L -1检测浓度/m g㊃L -1平均回收率ʃR S D%(n =3)1-N A /2-N A 1-N A /2-N A 1-N A /2-N A10.10/4.000.12/4.28122.1ʃ1.7/103.9ʃ2.70.20/4.000.21/3.79106.8ʃ3.1/94.8ʃ1.20.20/0.400.20/0.44102.5ʃ3.2/109.7ʃ3.80.40/0.400.38/0.3795.0ʃ1.0/93.5ʃ2.10.80/0.100.73/0.1091.1ʃ0.3/100.3ʃ4.920.10/4.000.10/3.91102.1ʃ1.3/97.8ʃ0.90.20/4.000.20/3.76100.8ʃ0.7/94.1ʃ0.30.20/0.400.21/0.44105.1ʃ4.1/111.0ʃ9.30.40/0.400.36/0.3592.4ʃ0.4/88.5ʃ0.50.80/0.100.71/0.0989.1ʃ0.1/96.0ʃ5.3 (R S D%)均小于9.3%㊂所提出的方法用于混合物中1-N A 和2-N A 的测定,具有良好的准确性㊂2.6 实际样品测试 将所提出的方法应用于3种纺织品实际样品(其中样品A 为市面上的阳性样品,样品B 和样品C 为阴性样品)的测定,并将测试结果与H P L C -U V-V i s 的测试结果进行比较㊂实验结果表明,本方法能够对实际样品中的1-N A 和2-N A 进行准确地定量分析;同时如表2所示,利用t 检验法评价所提出的方法与H P L C -U V-V i s 法之间的差异㊂当显著水平α为0.05时,计算所得1-N A 的|t |值为0.210,2-N A 的|t |值为0.346,均小于临界值t 0.05(4)=2.306,因此所提出的方法与H P L C -U V-V i s 得到的测试结果之间无显著差异㊂而与H P L C-U V-V i s 相比,D M I S F S 法更快速㊁便捷,消耗溶剂少㊂表2 D M I S F S 法和H P L C -U V -V i s 法得到的实验结果比较T a b l e 2 C o m p a r i s o n o f t h e e x pe r i m e n t r e s u l t s o b t a i n e d b y DM I S F S a n d H P L C -U V -V i s 1-N A 的测量结果/m g ㊃k g-1加标值检测值a ʃR S D%D M I S F S H P L C -U V-V i s 样品A 0N DbN D样品B5.004.41ʃ0.555.52ʃ0.4510.009.24ʃ0.6310.39ʃ0.43样品C10.0010.73ʃ1.629.80ʃ0.4515.0018.43ʃ0.3215.26ʃ0.2120.0022.62ʃ1.0220.13ʃ0.10S t u d e n t st -t e s tc0.210(2.306)2-N A 的测量结果/m g ㊃k g-1加标值检测值a ʃR S D%D M I S F SH P L C -U V-V i s 样品A014.73ʃ1.1014.09ʃ0.57样品B10.0010.68ʃ1.0811.89ʃ0.4310.0011.14ʃ3.5610.09ʃ1.02样品C 5.005.96ʃ1.345.33ʃ0.1712.0013.35ʃ1.2410.86ʃ0.18N D N D S t u d e n t s t -t e s tc0.346(2.306) a .三次平行实验b .N D 表示未检测出c .括号中的数值表示t 在95%置信水平下的列表值3 结论本文基于D M I S F S 方法建立合适的扫描路径可克服纺织品样品中复杂基质的干扰而鉴别样品中的1-N A 和2-N A ,并且能够对其准确定量㊂通过实验测得1-N A 和2-N A 的检出限分别为0.1m g /k g 和0.6m g /k g,远远小于国标中规定的生命科学仪器 2023年第21卷/第5期研究报告37限量(20m g /k g);重复性测试结果表明不同比例人工合成样品中1-N A 和2-N A 回收率的R S D%均小于9.3%;加标实际纺织样品中的1-N A 和2-N A 的D M I S F S 测量值与目前常用方法的H P L C 测量值结果一致㊂综上所述,所提出的D M I S F S 方法具有高度的选择性㊁灵敏度,定量结果准确㊁可靠;与目前常用方法相比,更加快速简便㊁成本低,为纺织品中禁用芳香胺同分异构体的实际检测中提供一种有效新方法㊂参考文献[1]B H A T A P ,G O G A T E P R.D e g r a d a t i o n o f n i t r o ge n -c o n -t a i n i n g h a z a r d o u s c o m p o u n d s u s i n g ad v a n ce d o x i d a t i o n p r o c e s -s e s :A r e v i e w o n a l i p h a t i c a n d a r o m a t i c a m i n e s ,d ye s ,a n d pe s t i c i d e s [J ].J o u r n a l of H a z a r d o u s M a t e r i a l s ,2021,403:123657.[2]B A L ÇI K U ,C HO R M E Y D S ,A Y Y I L D I Z M F ,e t a l .L i qu i d p h a s e m i c r o e x t r a c t i o n b a s e d s e n s i t i v e a n a l y t i c a l s t r a t e g y fo r t h e d e t e r m i n a t i o n o f 22h a z a r d o u s a r o m a t i c a m i n e p r o d u c t s o f a z o d y e s i n w a s t e w a t e r a n d t a p w a t e r s a m p l e s b y GC-M S s ys t e m [J ].M i c r o c h e m i c a l J o u r n a l ,2020,155:104712.[3]D A I P ,Z H A N G Z Y ,HO U X F ,e t a l .R a p i d S E R S i n s p e c -t i o n o f c a r c i n o g e n i c a r o m a t i c a m i n e s i n t e x t i l e s b y u s i n g l i qu i d i n t e r f a c i a l a s s e m b l e d A u a r r a y [J ].T a l a n t a ,2021,234:122651.[4]Y E X W ,P E N G Y ,N I U Z Y ,e t a l .N o v e l a p pr o a c h f o r t h e r a p i d s c r e e n i n g o f b a n n e d a r o m a t i c a m i n e s i n d ye d t e x t i l e s u -s i n g a c h r o m o g e n i c m e t h o d [J ].A n a l y t i c a l a n d B i o a n a l y t i c a l C h e m i s t r y,2018,410:2701.[5]中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局,中国国家标准化管理委员会.G B 18401-2010国家纺织产品基本安全技术规范[S ].北京:中国标准出版社,2011.[6]C HO R M E Y D S ,Z AMA N B T ,MA L T E P E E ,e t a l .S i m u l -t a n e o u s D e t e r m i n a t i o n o f H a r m f u l A r o m a t i c A m i n e P r o d u c t s o f A z o D y e s b y G a s C h r o m a t o g r a p h y –M a s s S p e c t r o m e t r y[J ].J o u r n a l o f A n a l y t i c a l C h e m i s t r y,2020,75(10):1330-1334.[7]C R E T T A Z S ,KM P F E R P ,B R ÜS C HW E I L E R B ,e t a l .S u r v e y o n h a z a r d o u s n o n -r e gu l a t e d a r o m a t i c a m i n e s a s c l e a v a g e p r o d u c t s o f a z o d y e s f o u n d i n c l o t h i n g te x t i l e s o n t h e S w i s s m a r k e t [J ].J o u r n a l of C o n s u m e r P r o t e c t i o n a n d F o o dS a f e t y,2020,15(1):49-61.[8]T O L G Y E S I A ,K.S H A R MA B .Q u a n t i f i c a t i o n o f a r o m a t i ca m i n e s d e r i v e d f r o m a z o c o l o r a n t s i n t e x t i l eb y i o n-p a i r i n gl i q u i d c h r o m a t o g r a p h y t a n d e m m a s s s p e c t r o m e t r y[J ].J o u r n a l o f C h r o m a t o g r a p h y B ,2020,1137:121957.[9]叶曦雯,何静,李莹.液液萃取-分散液液微萃取-气相色谱-质谱联用测定纺织废水中痕量禁用偶氮染料[J ].色谱,2020,38(02):255-263.[10]王田田.利用G C -M S 对1-萘胺和2-萘胺快速定性[J ].针织工业,2013,11:63-64.[11]K AM P F E R P ,C R E T T A Z S ,N U S S B A UM E R S ,e t a l .Q u a n t i t a t i v e d e t e r m i n a t i o n o f 58a r o m a t i c a m i n e s a n d p o s i -t i o n a l i s o m e r s i n t e x t i l e s b y h i g h -p e r f o r m a n c e l i qu i d c h r o -m a t o g r a p h y wi t h e l e c t r o s p r a y i o n i z a t i o n t a n d e m m a s s s p e c t r o m e t r y[J ].J o u r -n a l o f C h r o m a t o g r a p h y A ,2019,1592:71.[12]陈健,黄俊仕,刘木华.基于同步荧光光谱的鸡肉中甲磺酸达氟沙星和氧氟沙星残留快速检测方法研[J ].光谱学与光谱分析,2021,41(5):1367-1372.[13]H A Y E S H V ,W I L S O N W B ,S A N T A N A A M ,e t a l .D e -t e r m i n a t i o n o f m o l e c u l a r m a s s 302p o l y c y c l i c a r o m a t i c h y-d r o c a r b o n s i n S t a n d a r d R e f e r e n c e M a t e r i a l 1597a b y re v e r s e d -p h a s e l i q u i d c h r o m a t o g r a p h y a n d c o n s t a n t e n e r g y s yn c h r o -n o u s f l u o r e s c e n c e s p e c t r o s c o p y [J ].M i c r o c h e m i c a l J o u r n a l ,2019,149:104061.[14]A T T A L A K ,E I S S A M S ,H A S A N M A ,e t a l .A n e n -h a n c e d f i r s t d e r i v a t i v e s y n c h r o n o u s s pe c t r of l u o r i m e t r i c m e t h -o d f o r d e t e r m i n a t i o n o f t h e n e w l y c o-f o r m u l a t e d d r u gs ,a m l o d i p i n e a n d c e l e c o x i b i n p h a r m a c e u t i c a l p r e pa r a t i o n a n d h u m a n p l a s m a [J ].S pe c t r o c h i m i c a A c t a P a r t A :M o l e c u l a r a n d B i o m o l e c u l a r S p e c t r o s c o p y,2020,240:118533.[15]E L S H A R K A S Y M E ,WA L A S H M ,B E L A L F ,e t a l .C o n v e n t i o n a l a n d f i r s t d e r i v a t i v e s y n c h r o n o u s s p e c t r o f l u o r i -m e t r i c m e t h o d s f o r t h e s i m u l t a n e o u s d e t e r m i n a t i o n o f c i s a -t r a c u r i u m a n d n a l b u p h i n e i n b i o l o g i c a l f l u i d s [J ].S p e c t r o -c h i m i c a A c t a P a r t A :M o l e c u l a r a n d B i o m o l e c u l a r S p e c t r o s -c o p y,2020,228:117841.[16]MUH AMMA D A ,A L I A B B A F A L I H S ,L I U Y H ,e t a l .D e r i v a t i v e m a t r i x -i s o p o t e n t i a l s y n c h r o n o u s s pe c t r of l u o r i m -e t r y :a s o l u t i o n f o r t h e d i r e c t d e t e r m i n a t i o n o f u r i n a r y δ-a m i n o l e v u l i n i c a c i d [J ].N e w J o u r n a l o f C h e m i s t r y ,2019,43(46):18092.[17]MU R I L L O P U L G A R ÍN J A ,G A R C ÍA B E R M E J O L F ,R O D R ÍG U E Z S B .M a t r i x i s o p o t e n t i a l s yn c h r o n o u s f l u o r e s -c e n c e s p e c t r o m e t r y fo r t h e d e t e r m i n a t i o n o f g i b b e r e l l i c a c i d i n w a t e r m e l o n a f t e r u l t r a v i o l e t -i r r a d i a t i o n [J ].R S C A d -v a n c e s ,2014,4(11):5671.[18]L I U Q ,HU A N G W ,A L I A B B A F A L I H S ,e t a l .A n o v e lr a p i d m e t h o d f o r s i m u l t a n e o u s d e t e r m i n a t i o n o f t h r e e d i a g-n o s t i c a l l y i m p o r t a n t p o r p h y r i n s i n e r y t h r o c y t e s u s i n g h y-p h e n a t e d s y n c h r o n o u s f l u o r e s c e n c e t e c h n i qu e s [J ].T a l a n t a ,2012,88:663-668.[19]郭丽敏,郭祥峰,贾丽华.导数同步荧光法同时测定1-萘胺和2-萘胺[J ].应用化学,2010,27(5):611-614.[20]中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局,中国国家标准化管理委员会.G B /T 17592-2011纺织品禁用偶氮染料的测定[S ].北京:中国标准出版社,2011.。
同步荧光光谱法快速鉴别食用油
同步荧光光谱法快速鉴别食用油
毛立新;郭建荣;吴旭;郭洁丽
【期刊名称】《食品科学》
【年(卷),期】2014(035)008
【摘要】利用同步荧光光谱法鉴别沙棘果油、沙棘籽油、核桃油、菜籽油、芝麻油、亚麻仁油.结果显示:不同食用油荧光光谱具有明显的差异,在激发波长250～720nm范围内,沙棘果油、沙棘籽油、核桃油、亚麻仁油、芝麻油和菜籽油的最大激发波长范围分别为315～450、520～650、315～490、300～500、300～550、300～490nm.在激发光与发射光波长差为90nm、激发波长250～720nm的条件下,对6种不同食用油进行同步荧光扫描,利用主成分分析得分图可以直观、快速地区分鉴别各种食用油.
【总页数】5页(P67-71)
【作者】毛立新;郭建荣;吴旭;郭洁丽
【作者单位】山西大学生命科学学院,山西太原 030006;山西大学生命科学学院,山西太原 030006;山西大学生命科学学院,山西太原 030006;山西大学生命科学学院,山西太原 030006
【正文语种】中文
【中图分类】TS221
【相关文献】
1.基于同步荧光光谱法对食用油和煎炸油鉴别研究 [J], 冯苏敏;孙淑敏;谢岩黎
2.基于近红外光谱法和聚类分析法快速鉴别食用油种类 [J], 马健
3.拉曼光谱结合距离匹配法快速鉴别掺伪食用油 [J], 吴静珠;张宇靖;石瑞杰;陈岩;刘翠玲
4.利用同步荧光光谱快速鉴别潲水油 [J], 孙艳辉;安海洋;贾小丽;王娟
5.煎炸食用油质量变化的同步荧光光谱研究 [J], 贾艳华;徐晓轩;杨仁杰;梁骏;周新勇;张存洲
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同步荧光法测定食品中维生素B1
同步荧光法测定食品中维生素B1
蒋淑艳
【期刊名称】《光谱实验室》
【年(卷),期】1997(014)002
【摘要】本文研究了食品中维生素Ｂ１的同步荧光法测定条件，采用氯化钾－乙醇作柱层析洗脱液，碱性介质中氧化后立即调为中性，并加入表面活性剂ＯＰ对体系增稳增敏，取代丁醇萃取，经济方便，用于几种粮食样品的测定，结果满意。
【总页数】3页(P83-85)
【作者】蒋淑艳
【作者单位】烟台大学化学院
【正文语种】中文
【中图分类】TS201.24
【相关文献】
1.平行因子-同步荧光法测定食品中维生素B1,B2和B6 [J], 倪永年;蔡英俊
2.HPLC与UV法测定维生素B1注射液中维生素B1含量的比较 [J], 解瑞辉
3.高效液相色谱法测定甲硫氨酸维生素B1注射液中甲硫氨酸和维生素B1的含量[J], 黄榕珍
4.HPLC法测定维生素B1注射液中维生素B1含量 [J], 陆春波;林仙军;阮鑫;陈晓林
5.HPLC法测定维生素B1注射液中维生素B1含量 [J], 陆春波;林仙军;阮鑫;陈晓林
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导数同步荧光光谱-小波-SGA-LSSVR联用快速测定鸭蛋蛋清中新霉素残留含量
导数同步荧光光谱-小波-SGA-LSSVR联用快速测定鸭蛋蛋清中新霉素残留含量赵进辉;袁海超;刘木华;徐将;肖海斌【摘要】新霉素在巯基乙醇存在的条件下与邻苯二甲醛生成的衍生物具有强荧光特性,可实现鸭蛋蛋清中新霉素残留含量的荧光测定.在模型建立过程中,分析了波长为280～390 nm光谱范围内的三维同步荧光光谱,确定检测鸭蛋蛋清中的新霉素含量的最佳波长差△λ为110 nm；然后利用db10小波的2层分解对一阶导数同步荧光光谱进行去噪处理,并利用分段遗传算法(SGA)优选出了14个特征波长；最后应用最小二乘支持向量回归(LSSVR)建立了鸭蛋蛋清中的新霉素含量的预测模型,其模型预测集的决定系数(R2)和预测均方根误差(RMSEP)分别为0.9671和1.713.结果表明,SGA能有效提取出鸭蛋蛋清中新霉素对应的特征波长,有利于提高LSSVR模型预测精度,可实现鸭蛋蛋清中新霉素残留含量的快速测定.【期刊名称】《分析化学》【年(卷),期】2013(041)004【总页数】7页(P546-552)【关键词】导数同步荧光法;最小二乘支持向量回归(LSSVR);分段遗传算法(SGA);小波;新霉素;蛋清【作者】赵进辉;袁海超;刘木华;徐将;肖海斌【作者单位】江西农业大学工学院/生物光电及应用重点实验室,南昌330045;江西农业大学工学院/生物光电及应用重点实验室,南昌330045;江西农业大学工学院/生物光电及应用重点实验室,南昌330045;江西农业大学工学院/生物光电及应用重点实验室,南昌330045;江西农业大学工学院/生物光电及应用重点实验室,南昌330045【正文语种】中文1 引言新霉素(Neomycin，NEO)属于氨基糖苷类抗生素，可用于治疗畜禽细菌性肠炎。
目前，一些养殖户常将新霉素添加到动物饲料中，用于预防由细菌感染引起的早期损伤和肠炎。
但新霉素具有耳毒性、肾毒性、神经毒性和过敏反应等毒副作用，若长期用于鸭饲料中，将会大量残留在鸭肉及鸭蛋中，人们长期食用这类鸭肉及鸭蛋，可能会对人体造成耳毒性、肾毒性等危害。
7-羟基香豆素与三种芳香族氨基酸作用的荧光光谱研究
7-羟基香豆素与三种芳香族氨基酸作用的荧光光谱研究江欢;朱燕舞;王燕;何建波【摘要】运用荧光光谱和紫外光谱研究7-羟基香豆素UBM分别与色氨酸Trp,酪氨酸Tyr和苯丙氨酸Phe三种芳香族氨基酸的相互作用.结果表明在模拟人体生理条件下,UMB能引起上述氨基酸发生荧光猝灭,最大猝灭波长依次为347,303和282 nm,猝灭机制均为静态猝灭,相互之间均以摩尔比1∶1形成了复合物,且得到两种温度下UMB与Trp,Tyr和Phe反应的表观平衡常数Kc分别为298.15 K时2.993×106,7.858×104和1.186×103 L· mol-1,310.15K时2.702×104,1.063×105和8.352×103 L· mol-1.热力学函数变化表明UMB与以上三种氨基酸结合作用较强,其中UMB-Trp相互作用力是氢键或范德华力,UMB-Tyr和UMB-Phe相互作用主要以疏水作用为主,同时都可能存在偶极-偶极之间的相互作用.%The interaction between umbelliferone (UMB) with tryptophan (Trp),tyrosine (Tyr) and phenylalanine (Phe) was studied by using fluorescence (FS) and ultraviolet (UV) spectroscopy.The results show that UMB can strongly quench the fluorescence of the three aromatic amino acids with the maximum quenching wavelengths at 347,303 and 282 nm,respectively.Data analyses based on the Stern-Volmer curve and the UV spectroscopy show that static quenching occurred through the formation of the complexes of UMB with each aromatic amino acid in a molar ratio of 1 ∶ 1.The binding constant Kc of UMB with Trp,Tyr and Phe is 2.993×106,7.858×104 and 1.186× 103 L · mol-1 (298.15 K) and 2.702× 104,1.063× 105 and 8.352× 103 L · mol-1 (310.15 K),respectively.The thermodynamic parameters indicate that UMB has a strong interactionwith the three aromatic amino acids.Hydrogen bond and Van der Waals force may play a major role in the reaction of UMB with Trp,whereas hydrophobic interaction should be responsible for the binding of UMB with Tyr and Phe.In addition,the dipole-dipole interaction may be another factor in the reactions between UMB and the three aromatic amino acids.【期刊名称】《光谱学与光谱分析》【年(卷),期】2013(033)008【总页数】6页(P2117-2122)【关键词】7-羟基香豆素;芳香族氨基酸;荧光光谱法;紫外光谱法【作者】江欢;朱燕舞;王燕;何建波【作者单位】合肥工业大学化学工程学院,可控化学与材料化工安徽省重点实验室,安徽合肥230009;合肥工业大学化学工程学院,可控化学与材料化工安徽省重点实验室,安徽合肥230009;合肥工业大学化学工程学院,可控化学与材料化工安徽省重点实验室,安徽合肥230009;合肥工业大学化学工程学院,可控化学与材料化工安徽省重点实验室,安徽合肥230009【正文语种】中文【中图分类】O433.5引言香豆素是一类肉桂酸内酯，广泛分布于植物中，具有优异的抗真菌、抗溃疡、抗凝血、利尿、镇痛、催眠等性能，被广泛应用于生物、医药、染料、聚合物科学等领域［1－3］。
高效液相色谱法测定香蕉中3种胺类物质
高效液相色谱法测定香蕉中3种胺类物质罗云;赵方方;马晨;吕岱竹;王明月【摘要】建立了高效液相色谱法测定香蕉中5-羟色胺、色氨酸和褪黑素的分析方法:香蕉样品经甲醇漩涡提取,采用多壁碳纳米材料(MWCNTs)分散固相萃取净化.5-羟色胺、色氨酸和褪黑素的分离采用C18色谱柱,以0.05 mol/L乙酸钠水溶液-甲醇为流动相.目标物质的线性范围为0.25～5mg/L,标准曲线相关系数均在0.99以上;平均加标回收率(n=6)为74.0％～110％,RSD≤3.99％.该方法简单快捷,重复性好,可用于香蕉中5-羟色胺、色氨酸和褪黑素的测定.【期刊名称】《热带作物学报》【年(卷),期】2018(039)004【总页数】5页(P780-784)【关键词】香蕉;5-羟色胺;色氨酸;褪黑素;高效液相色谱法【作者】罗云;赵方方;马晨;吕岱竹;王明月【作者单位】华中农业大学食品科学技术学院,湖北武汉430070;中国热带科学院分析测试中心,海南海口 571101;中国热带科学院分析测试中心,海南海口 571101;中国热带科学院分析测试中心,海南海口 571101;中国热带科学院分析测试中心,海南海口 571101;中国热带科学院分析测试中心,海南海口 571101【正文语种】中文【中图分类】S668.1香蕉作为世界四大水果之一，因其口感独特、香甜美味，深受广大消费者的喜爱。
香蕉不仅富含糖、蛋白质、维生素、微量元素等营养成分，还含有类胡萝卜素、多酚、多糖等活性成分，具有抗氧化、抗溃疡、降血糖、治腹泻、抗肿瘤、抗抑郁等保健功效[1]。
香蕉具有众多功能成分而被广泛关注。
关于香蕉多糖、多酚的研究已有不少，而有关香蕉中功能性成分胺类物质的文献报道较少，其中色氨酸(tryptophan，Trp)是人体必需氨基酸，体内无法合成，必须从食物中摄取。
色氨酸是合成5-羟色胺(serotonin，5-HT)和褪黑素(melatonin，MT)的前体。
高效液相色谱-荧光检测法同时测定蔬菜中3种磺胺类药物残留
高效液相色谱-荧光检测法同时测定蔬菜中3种磺胺类药物残留李学德;鲜啟明;刘红玲;花日茂;许珊珊;陈海燕;于红霞【期刊名称】《分析化学》【年(卷),期】2010(38)3【摘要】建立了蔬菜中3种磺胺类药物(SAs)的高效液相色谱-荧光检测法.蔬菜样品用甲醇提取3次,将提取液浓缩干,用0.1mol/L HCl溶解残渣,经荧光胺衍生化后,用反相柱(ODS)分离,以乙腈和0.5%醋酸为流动相进行梯度洗脱,用荧光检测器检测.3种SAs的检出限(LOD)为1.02～1.29 μg/g,方法的定量限(LOQ)为3.4～4.3 ng/g(鲜重).蔬菜样品中SAs的添加浓度在0.2～1.0 ng/g范围内,3种SAs的平均回收率均大于87%,日内与日间RSD均小于10%.实际蔬菜样品测定结果表明,3种SAs在不同蔬菜中均有不同程度检出,总含量为0.0726～0.3709 μg/g(鲜重).【总页数】5页(P429-433)【作者】李学德;鲜啟明;刘红玲;花日茂;许珊珊;陈海燕;于红霞【作者单位】南京大学环境学院,污染控制与资源化研究国家重点实验室,南京,210093;安徽农业大学资源与环境学院,安徽省农产品安全重点实验室,合肥,230036;南京大学环境学院,污染控制与资源化研究国家重点实验室,南京,210093;南京大学环境学院,污染控制与资源化研究国家重点实验室,南京,210093;安徽农业大学资源与环境学院,安徽省农产品安全重点实验室,合肥,230036;安徽农业大学资源与环境学院,安徽省农产品安全重点实验室,合肥,230036;安徽农业大学资源与环境学院,安徽省农产品安全重点实验室,合肥,230036;南京大学环境学院,污染控制与资源化研究国家重点实验室,南京,210093【正文语种】中文【相关文献】1.高效液相色谱-在线柱后衍生荧光检测法同睚测定水产品中14种磺胺类药物残留[J], 郑斌;余海霞;杨会成;廖妙飞;傅光明;张小军2.高效液相色谱-荧光检测法测定水产品中4种磺胺类药物残留量 [J], 张小军;郑斌;陈雪昌3.改良QuEChERS/HPLC-光化学在线衍生荧光检测法测定猪肉中18种磺胺类药物残留量 [J], 许旭;耿丹丹;肖远灿;胡风祖4.在线柱后衍生-高效液相色谱-荧光检测法同时测定牛肉中16种磺胺类药物残留[J], 许旭;肖远灿;耿丹丹;皮立;董琦;胡风祖5.高效液相色谱-荧光检测法测定鸡肉中5种磺胺类药物残留 [J], 邓樱花;李林;张洪权;黄元乔因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
低温恒能量同步荧光法同时快速检测食品中多种多环芳烃
低温恒能量同步荧光法同时快速检测食品中多种多环芳烃张伟;周娜;李呐;谢永生;骆和东;李耀群【期刊名称】《光谱学与光谱分析》【年(卷),期】2009(029)010【摘要】恒能量同步荧光法应用于多环芳烃的检测可以提高选择性,低温可使谱带呈指纹特征,提供常温光谱无法获得的光谱细节信息,有助于实现对复杂基体中多环芳烃的检测.文章结合恒能量同步荧光扫描技术与斯波斯基低温技术,建立了食品中多种多环芳烃的低温恒能量同步荧光同时快速分析方法.对低油脂样品直接用正辛烷浸泡,高油脂样品也只需要增加皂化萃取,即可进行光谱扫描来检测食品样中的多种多环芳烃.对两种类璎的实际样进行加标回收实验,回收率为80.2%～98.9%,定量工作曲线线性较好(r≥0.993 8).该方法选择性好、操作简便快捷、费用低廉.【总页数】4页(P2806-2809)【作者】张伟;周娜;李呐;谢永生;骆和东;李耀群【作者单位】厦门大学化学化工学院,现代分析科学教育部重点实验室,福建,厦门,361005;厦门大学化学化工学院,现代分析科学教育部重点实验室,福建,厦门,361005;厦门大学化学化工学院,现代分析科学教育部重点实验室,福建,厦门,361005;厦门大学化学化工学院,现代分析科学教育部重点实验室,福建,厦门,361005;厦门市疾病预防控制中心,福建,厦门,361021;厦门大学化学化工学院,现代分析科学教育部重点实验室,福建,厦门,361005【正文语种】中文【中图分类】O657.3【相关文献】1.大气飘尘中多环芳烃的超声波萃取- 恒能量同步荧光法测定 [J], 章汝平;陈克华;何立芳2.恒能量同步荧光法测定茶叶中多环芳烃 [J], 何立坚;章汝平3.恒能量同步荧光法测定土壤中多环芳烃的研究 [J], 史兵方;杨秀培;兰翠玲;蔡成翔4.竹炭固相萃取-恒能量同步荧光法测定河水中多环芳烃 [J], 何立芳;张著森;林水东;章汝平5.恒能量同步荧光法测定焦化厂气溶胶中多环芳烃 [J], 何立芳;章汝平;邱如斌因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
C18柱串联冠醚手性柱高效分离3种芳香族氨基酸对映体-2019年精选文档
C18柱串联冠醚手性柱高效分离3种芳香族氨基酸对映体1引言手性是自然界的基本属性，手性分子对映异构体因其结构的差异而具有不同的光学性能和生物活性[1～3]。
氨基酸是蛋白质最基本的组成单元，大多数的氨基酸都存在手性中心，故在临床诊断和食品分析等领域均涉及氨基酸的手性分离与分析[4，5]。
常见的α氨基酸大多是L构型，是人体重要的营养物质；而如阿尔茨海默症等某些重要的生理疾病则与D构型的氨基酸的浓度变化息息相关[6]。
芳香族氨基酸是指含有芳香环的氨基酸，包括苯丙氨酸、酪氨酸、色氨酸等[7]。
在蛋白质化学和临床诊断与研究中，对芳香族氨基酸定量分析有着重要意义[8]。
手性化合物的拆分通常以正相色谱居多，可以获得较好的分离效果。
然而，反相手性色谱具有毒性小、成本低的优点，并与实际样品具有更好的相容性。
近年来，反相手性色谱固定相和反相手性色谱拆分都得到了快速发展[9]，出现了一些适用于含水样品中外消旋体分离的反相色谱分析方法[10～12]。
然而，单一色谱柱常不能有效解决复杂样品的手性分离分析问题，色谱柱串联技术的提出，使这一问题得到一定程度的解决[13]。
C18柱与手性柱进行串联，可同时发挥两类色谱柱的作用，有助于进一步提升色谱分离效能。
目前，已有C18柱串联手性柱拆分外消旋体的报道。
Sardella[14]等利用C18柱与奎宁手性柱串联，同时拆分了甲状腺素和三碘甲状腺氨酸对映体。
Perera等[15]将C18柱分别与3种手性柱串联，对16种手性药物进行了拆分，手性化合物之间得到了较好分离，结果也表明手性柱和流动相的选择是影响串联分离的重要因素。
目前还未见此串联技术用于手性氨基酸的分离。
氨基酸的分离常需使用专用的氨基酸柱，对色谱分离条件有特定的要求，有时还需要柱前衍生[16]或使用手性添加剂[17]。
本研究以3种芳香族氨基酸（结构如图1所示）外消旋体为拆分对象，建立了C18柱串联手性冠醚柱同时拆分多种氨基酸对映体的反相色谱方法，实现了多种氨基酸对映体的高效分离，也为多种手性化合物的同时分离提供了新思路。
超高效液相色谱—串联质谱法测定聚酰胺厨具中23种初级芳香胺的迁移量
超高效液相色谱—串联质谱法测定聚酰胺厨具中23种初级芳香胺的迁移量朱丽娜;姜鹤【期刊名称】《理化检验:化学分册》【年(卷),期】2022(58)11【摘要】将表面积为0.6 dm~2聚酰胺厨具样品浸泡在100 mL 3%(质量分数)乙酸溶液中,于(100±3)℃加热2 h,再重复浸泡两次。
收集各浸泡液1 mL,用0.22μm 针式滤膜过滤,滤液供优化的仪器工作条件测定。
以CORTECS T3色谱柱(100 mm×2.1 mm, 2.7μm)为固定相,以不同体积比的含0.1%(体积分数)甲酸的甲醇溶液和水的混合溶液为流动相进行梯度洗脱,分离后的初级芳香胺(PAAs)在电喷雾离子源正离子(ESI~+)模式以及多反应监测(MRM)模式下用串联质谱法(MS/MS)检测。
结果显示:23种PAAs的质量浓度均在1~20μg·L^(-1)内与其对应的峰面积呈线性关系,检出限(3S/N)为0.04~0.5μg·L^(-1);对阴性样品进行3个浓度水平的加标回收试验,所得回收率为90.9%~107%,测定值的相对标准偏差(n=6)为0.40%~7.3%。
方法用于10种聚酰胺厨具的分析,仅在平底铲、饭勺、薯压、汤勺等4款厨具中检出了4,4′-二氨基二苯甲烷(4,4′-MDA)、4-氯邻甲苯胺(4-CoT)和对氯苯胺(4-CA),检出量(0.4~1.3μg·kg^(-1))随浸泡次数的增加而降低。
【总页数】7页(P1321-1327)【作者】朱丽娜;姜鹤【作者单位】上海乐朗检测技术有限公司【正文语种】中文【中图分类】O657.63【相关文献】1.超高效液相色谱-串联质谱法测定具色塑料餐具中33种初级芳香胺的残留量和迁移量2.液相色谱-串联质谱法测定食品接触材料中28种初级芳香胺的迁移量3.超高效液相色谱-串联质谱法同时测定食品级聚苯乙烯和聚乙烯色母粒中33种初级芳香胺4.高效液相色谱-串联质谱法快速测定水基食品模拟物中28种受限芳香族伯胺的迁移量5.高效液相色谱-串联质谱法测定食品接触材料及制品中33种初级芳香胺的迁移量因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
高效液相色谱法直接测定芳香族氨基酸
高效液相色谱法直接测定芳香族氨基酸
朱霞石;徐素琴
【期刊名称】《分析化学》
【年(卷),期】2009(37)A02
【摘要】芳香族氨基酸包括苯丙氨酸（Phenylalanine，Phe）、酪氨酸（Tyrosine，Tyr）、色氨酸（Tryptophan，Trp）等。
定量分析芳香族氨基酸在蛋白质化学和临床诊断与研究中具有重要意义。
高效液相色谱法（HPLC）是分析氨基酸的常用方法。
文献【3】采用梯度洗脱在不同波长处分别测定Tyr、Phe和Trp，在7min内完成测试。
本研究采用高效液相色谱法（HPLC）-紫外检测，【总页数】1页(P170)
【作者】朱霞石;徐素琴
【作者单位】扬州大学化学化工学院,扬州225002
【正文语种】中文
【中图分类】O657.72
【相关文献】
1.高效液相色谱法直接测定芳香族氨基酸 [J], 朱霞石;徐素琴
2.高效液相色谱法快速测定血清中的芳香族氨基酸 [J], 文江平;唐爱国
3.高效液相色谱法直接测定皮革中的水溶性六价铬 [J], 肖湾;黄亚运;郝晓红;史福霞
4.高效毛细管电泳法直接测定红豆杉悬浮培养细胞中游离芳香族氨基酸 [J], 杨新;
梅兴国;汪爱顺
5.反相高效液相色谱法直接检测芳香族氨基酸 [J], 曲冬梅;弓爱君;高鹤永;邱丽娜因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
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所对应的波长差 以 依 次为 。,
图
,
,
一 。
激发和发射光谱通带宽度均为 管电压为
试验 方法
, 光电倍增 · 一 '。
色氨酸在不同 以 下的同步荧光光谱图
, 扫描速率为
州
、 一
拟
移取 色氨 酸 、酪氨酸 和 苯丙 氨 酸 标 准储 备 溶 液 各 溶液 定容 至 ,用 磷 酸二 氢 钾一 氢 氧化 钠 缓 冲 。 分取 溶液于
书 叭 、﹄
试 验考 察 了
一
的 磷酸 二 氢钾一 氢氧
化钠缓 冲溶 液对测 定 的影 响 。 由于 同一 条件 下苯丙
氨酸荧光强度明显低于酪氨酸和色氨酸 , 故取其荧
几 阳
光强度最大时的酸度作为待测体系的酸度 。结果表 明 在 时 , 苯丙氨酸对应 的荧光强度最大 ,
一 一苯丙氨酸
—
色氨酸
—
酪氨酸
容量瓶 中 , 用缓冲溶液定容 、 摇匀 。 溶液置于 石英 比色皿 中 , 按仪 器 工 作 条件 进 行 同 步荧 光 光谱
扫描 , 以扣 除空 白后 的 同步荧光 强度绘 制 曲线 。
结果与讨论
激 发和发 射 光谱 种氨 基酸标 准溶 液 的荧光 光谱 图见 图
朱燕舞等 同步导数荧光光谱法测定食品中 种芳香族氨基酸
分别为 一, 一 , 一 · 一' 。 其 导数 荧光 强度 呈 线性 关 系 , 检 出限
方法 用 于蜂 蜜 、羊奶粉 和 啤酒样 品 中
中图分类 号 文献标 志码
种芳 香族氛 基酸 的测定 , 回收 率在
文章编号 一 一
一
一
之间。
关键词 同步 导数 荧光光谱 法 芳香族氨 基 酸 食 品
, 〔 议 肠
的一阶导数同步荧光波长为 试验分别选取 此进行
。
波长为
。 测定酪氨酸 的 以 为 。
时, 种
个同步荧光波长差进行一阶导
氨基酸的一阶导数同步荧光光谱见图
刁
数处理 , 获得了 个特征一阶导数同步荧光波长 , 据 种氨基酸的定量分析 , 大大提 高了测定的
灵 敏度 和准确 度 。
体 系酸 度 的选 择
曰 比 日 协 们 ` ﹂
一` 苯 丙氨 酸 溶 液 进 行 测 定 。 结 果 表 明 当相 对 误 差在士 之、 范 围内时 , 、 一、 仇 一、 倍的 认 认 纤、 一、 苏氨酸 、 柠檬 黄 、 葡
氨 酸对酪 氨酸 的干 扰 可 以 忽 略 , 试验 选 取 酪氨 酸 的
一 阶导数 同步 荧光 波长 为 测 定 苯丙 氨酸 的 以 为
作者简 介 朱燕舞 究方向为光学分析 。 一
一 , 女 , 安徽肥 东人 , 副 教授 , 博 士 , 研
光光谱法具有灵敏度 高 、 选择性好等优点 , 但色氨
酸、 酪氨酸和苯丙氨酸三者 的荧光发射光谱 和激发 光谱相互重叠 ,用 常规的荧光光谱法不能实现混合 样中三组分的分别测定 。 同步荧光光谱法具有简化
本 工作 将 同 步 荧 光 与 导 数 光 谱 相 结 合 , 基 于 种 氨基 酸不 同 的同 步 荧 光 光谱 特 性 , 独 立 选 择 同
` — 色氨酸 图 '—
几
酪氨酸
, '—
苯丙氨酸
种氨基 酸的激发和发射光谱
步荧光波长差 以 , 并对 同步荧光光谱进行一阶导数 处理 , 获得三者的同步导数光谱 , 消除了 种氨基酸 同步特 征峰 之 间的 干扰 , 提 高 了其 测 定 的灵 敏 度与
”
图
· 一 ' 酪氨酸混合溶液
色氨酸及色氨酸与酪氨酸混合液 的 一阶导数同步荧光 光谱
的导数 同步 荧光 光谱 在
阴影部 分所 示 。试 验分 别 对
· 一' 色 氨 酸 溶 液 以及
由图
可知 色 氨酸一 酪 氨酸 混合溶 液 与色 氨酸
·
朱燕舞等 同步导 数荧光光谱法测定食品中 种芳香族氰基 酸
娜 侧 籍 友 概 来
早 了 `
友 来 卿 契 概 侧
队 卜 日
尹
石 ,
,一 ,乙 一
山 白 ︸
几
又
曲线
所对应的波长差 以 依次为
, 。,
,
,
, 。
—
色氨酸
—
酪氨酸
— 一 苯 丙氨酸
图
酪氨酸在不 同 以 氨基酸 的同步荧光光谱图
一` 色氨 酸一, 火
一
· 一` 酪氨 酸 混合 溶 液在
型荧 光 分光 光 度计 , 雷 磁 氨基酸 不 同的 同步荧 光 特 性 , 采 用 了 一 型石 得更高 的测定 灵敏 度和 准确度 。 个 以 , 以获 型 超声 波 清 洗 器 ,
型离 心机 。
日立 型 计 , 一
英超 纯水 蒸馏器 ,
色氨酸在不同 以 下的荧光光谱图见图 。
磷 酸 二 氢 钾一 氢 氧化 钠缓 冲溶液 · 一` 磷 酸二 氢 钾 溶 液 和 · 一` 氢 氧化 钠溶 液混合 而 成 。
图
,
,
,
,
图
—
色氨酸
—
酪氨酸
—
苯丙氨酸 时
苯丙氨酸在不 同 以 下的同步荧光光谱
种氨基酸去除空白后在 从 为 的一阶导数同步荧光光谱
以 一 以
”
由图
长为 为 别为 ,
可知 当 以 为
时 , 苯丙 氨 酸荧 光
强 度最 强 , 且 峰形 对称 , 此处 苯丙氨 酸 的同步特 征波 , 介 于 酪 氨 酸 与 色 氨 酸 同步 特 征 峰 之 作 为苯丙 氨酸 的 同步波长 差 。 试 验选 取 色 氨 酸 、酪 氨 酸 和 苯 丙 氨 酸 的 以 分 , 。 可知 在 处 酪氨酸 有 一 弱峰 , 对 , 同步 特征 峰分 别 位于 , , 处 。 种氨基 酸 在不 同 以 下 的 同步 荧 光光 谱 图见 图 由图 见图 间 , 因而很好 地 避 开三 者 之 间 的 干扰 , 试 验 选 取 以
, 矛 了 尹 了,
兮 介 训
, 〕 夕
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一
因
· 一'
,
只
一
· 一 '
一 了
· 一`
, 即
,
眼
色氨 酸 是
、酪氨 酸
和 苯丙 氨酸
要 的作 用
。 由 于 不 同 的食 品 中 氨 基 酸 的 组 成 不
种 含苯环 的芳香 族氨 基酸 , 具 有天 然荧 光 , 是 人
要 友 概 米 葱 侧
5 0 0 。 5
荧光谱 图 、 提高选择性 、 光散射干扰少等特点 , 适合 复杂样 品及 多组分混合物的分析 〔 一 〕。导数光谱具
有减少光谱干扰 , 放大窄带灵敏度 、抑制宽带 , 增强 特征光谱精细结构的分辨能力等特点 , 其与同步荧 光技 术 相结 合 , 可 进一 步改善 分辨 能力 、 消除干 扰 。
同时发 现酪 氨酸 和色 氨 酸 的 荧光 强 度 均 有 所提 高 。
试 验选择 干 扰试 验 。为介 质酸 度 。
图
种氨基酸去除空 白后在 以 为 一阶导数同步荧光光谱
一
时的
以
按试验方 法对
一 ·班 一'酪氨 酸溶 液 和
· 一' 色 氨 酸 、
又 一 一 ·
由图
可 知 在 波长
处 , 色 氨酸 和 苯丙
同、 含量 不 同 , 不 同的人 群对 氨基 酸的需 求种 类也 不
体 营养不 可缺少 的 物质 , 在 生 命 活 动 中起 着 极 为 重
收稿 日期 一 一
尽 相 同 , 因此 , 寻找 并 建 立 一种 快 速 、简便 的 芳香 族 氨基 酸测定方 法 ,对 多种 疾 病 的诊 治监 测 和 食 品 营
'。 “ 、 、 '甘 了 , 毛
、 卜甸 , “ ` —
一
又
— — 一
· 一` 色氨酸溶液 · 一'色氨酸一
一阶导 数 同步荧 光波 长的选择 色氨 酸的 测 定 产 生 一 定 的影 响 。 经 一 阶 导 数 处 理 , 色 氨 酸 的一 阶导 数 同步 荧 光 光谱 图 的波 , , 为进 一 步验证 酪 氨酸 处 是 否对 色 氨 酸产 又 · 又 一 峰和波 谷分 别为 生干扰 见 图 一
养 价值评 价 等均有 重要 的意 义仁〕。
基金项 目 安徽省 自然科学 基金
合肥 工业 大
学博士专项基金
项目
一 。
合肥工业大学创新性实验 计划
目前 测定 色氨 酸 、酪氨 酸 和 苯丙 氨酸 的 方法 有
高效液相 色谱 法川 、 氨 基酸 分析 仪法 川 、 毛细 管 电泳 法固 、 高效 液相 色谱一 质 谱 法困 、高效 液 相 色谱 一 荧光 光谱 法圈 和 毛细 管 电泳 一 荧 光 光 谱 法 叫 等 。 其 中荧
同步导数荧光光谱法测定食 品中 种 芳香 族氨 基 酸
朱燕 舞 `, 陈 燕 , 姚 昌中 ' , 窦 焰 `, 江 欢 `, 王 燕,
合肥工业 大学 化学工程学院 , 合肥 合肥市体 育中学 , 合肥
摘 要 提 出 了同步 导数 荧光光谱 法 同时测 定食 品 中 色氨 酸 、酪氨 酸 和 苯 丙氨 酸 的方 法 。 试 验 表 明 为排 除 干扰 , 色氨 酸 、 酪氨 酸和 苯丙氨 酸 的特 征 同步导数 荧光 波 长 宜选 定 , , , 波 长差 以 为 , , 条件 下进行 同步扫 描 。 种芳 香族 氨基 酸 的 浓度 分 别在 一 定范 围 内与