用化学发光共振能量传递到石墨烯量子点来检测卵巢癌生物标记CA
功能化氧化石墨烯携带PD-L1_siRNA抑制肝癌细胞的恶性生物学行为
激光生物学报ACTA LASER BIOLOGY SINICAVol. 32 No. 4Aug . 2023第32卷第4期2023年8月收稿日期：2023-05-05；修回日期：2023-05-29。
基金项目：湖南省研究生科研创新项目（QL 20210136）；2021年湖南省企业科技特派员项目（2021GK 5015）；湖南省自然科学基金面上项目（2021JJ 30453）；国家自然科学基金面上项目（81872256）。
作者简介：李志伟，博士研究生。
∗ 通信作者：李立民，讲师，主要从事生物材料与医用电子学方面的研究。
E-mail: fblwlee@ 。
功能化氧化石墨烯携带PD -L1 siRNA 抑制肝癌细胞的恶性生物学行为李志伟a ，单丽红a ，刘曦冉a ，闵 洋a ，丁小凤a ，李立民b*（湖南师范大学 a. 生命科学学院基因功能与调控研究室；b. 工程与设计学院，长沙 410081）摘 要：程序性死亡受体1（PD-1）/程序性死亡配体1（PD-L 1）信号通路主要参与免疫负调控作用，且在许多类型的肿瘤的恶性发展中具有关键作用。
PD-L 1的高表达可促进肝细胞癌（HCC ）的侵袭，提高肿瘤复发的风险。
另外，PD-L 1常作为免疫检查点的阻断靶点，主要通过单抗将其中和，引发抗肿瘤免疫反应。
因此，PD-L 1是HCC 免疫治疗中极具潜力的靶点之一。
本文主要探究纳米级功能化氧化石墨烯（GO-PEI-PEG ）携带PD-L1 siRNA 对肝癌细胞的恶性生物学行为的影响。
研究结果显示，将GO-PEI-PEG/PD-L1 siRNA 转染至MHCC 97H 细胞后，细胞的增殖和迁移均被抑制，细胞周期阻滞在G 1期，且细胞凋亡的数目增多。
进一步研究发现，GO-PEI-PEG/PD-L1 siRNA 对MHCC 97H 细胞的抑制作用是通过阻碍AKT 信号通路激活实现的。
这些试验结果表明，GO-PEI-PEG 具备优秀的递送性能，携带PD-L1 siRNA 可有效干扰PD-L 1表达，进而抑制肝癌细胞的恶性生物学行为，这为治疗HCC 提供了更安全、有效的递送新策略。
量子点电化学发光及其在生物分析中的应用
量子点电化学发光及其在生物分析中的应用席强;王捷;陈钰;刘仲明【摘要】量子点作为一种新型的电化学发光体具有独特的理化性质,是电化学发光分析领域的研究热点之一.本文简要介绍了量子点电化学发光的机理,回顾了近几年来功能化量子点作为电化学发光体在免疫分析、核酸分析、适体分析、细胞表面聚糖分析等方面的应用,并对其今后的发展方向作了展望.【期刊名称】《化学研究》【年(卷),期】2014(025)002【总页数】8页(P209-216)【关键词】量子点;电化学发光;机理;免疫分析;核酸分析【作者】席强;王捷;陈钰;刘仲明【作者单位】广州军区广州总医院医学实验科,广东广州510010;华南理工大学生物科学与工程学院,广东广州510006;广州军区广州总医院医学实验科,广东广州510010;广州军区广州总医院医学实验科,广东广州510010;广州军区广州总医院医学实验科,广东广州510010【正文语种】中文【中图分类】O657.1电化学发光（Electrochemiluminescence，ECL），又称电致化学发光，是指在电极上施加一定的电压形成电生物质，电生物质之间或电生物质与体系中某些组分之间通过电子转移生成激发态，不稳定的激发态在跃迁回基态的过程中辐射出光子的现象［1］.与光致发光相比，电化学发光作为一种新的分析技术，其主要的优点是不需要外部光源.这样就避免了杂质光和光散射的问题，提高了检测的灵敏度［2］.ECL分析技术由于集成了电化学电位可控性和化学发光分析的高灵敏度的优点，已成为一种强有力的分析技术.自2002年BARD课题组［3］首次于《Science》上报道了硅量子点（Si Quantum Dots，Si QDs）在有机溶液中的电化学发光以来，基于量子点的电化学发光体系引起了广泛的关注.许多不同尺寸和形状的量子点，如CdS［4］、CdSe［5］、CdTe［6］、ZnS［7］等不仅在有机相中，而且在水溶液中也能产生电化学发光.与传统的电化学发光体系相比，基于量子点的电化学发光更具可控性，体系也更加温和，在免疫分析、核酸探针分析、适体分析等方面获得了越来越多的关注.量子点作为新型的ECL发光体，发光性质与其表面状态及尺寸有着较大的关系［8］.电子和空穴可通过电化学氧化还原过程注入量子点的表面或中心导带，进而产生ECL辐射.与经典的［Ru（bpy）3］2＋／TPrA体系电化学发光机理类似，量子点的电化学发光机理也主要有自由基湮灭和共反应物参与两种.当对电极施加双阶跃正负脉冲电势时，在电极附近将会同时产生氧化态和还原态的QDs，二者相互碰撞形成激发态QDs＊和基态QDs，激发态的QDs在返回基态的弛豫过程中辐射出光子.这种反应一般被称作“自由基湮灭”反应，其机理如下：基于这类反应机理的量子点常在有机溶剂中进行，主要有CdSe［9］、CdTe ［10］、PbS［11］、Si［3］等.其中，Si量子点电化学发光体系是湮灭型量子点ECL体系的一个典型例子.BARD研究小组［3］发现，在乙氰溶液中对铂金电极同时施加氧化和还原电势时，Si QDs在阳极氧化生成QDs·＋，在阴极还原生成QDs·－.电极附近扩散层中的这两种电生产物相互碰撞发生湮灭反应，形成激发态的Si QDs＊，Si QDs＊返回基态时在620 nm处释放光子.对于这种湮灭反应，需要同时存在氧化产物和还原产物，并且要求氧化产物和还原产物具有足够的稳定性以便彼此碰撞产生激发态分子.在共反应物存在的条件下，量子点的电化学发光通常只需对电极施加单一的电势即可.共反应物是一些在氧化或还原时可以产生具有强还原性或强氧化性的中间体物质，产生的中间体能和电化学发光体系中的氧化性或还原性量子点生成激发态分子，如、TPrA［12］、DBAE［13］、、等.由于湮灭型量子点ECL体系要求同时产生氧化态和还原态，而水溶液中能允许的电势跨度太小，因此该体系常常要求纯净的无水无氧环境，不利于进一步的应用研究.而共反应物的存在则能很好地克服这些缺点，因此该类型ECL反应体系目前应用最广泛.以“氧化－还原”型的QDs／DBAE电化学发光体系为例［13］，其反应过程可表述如下：与TPrA、DBAE等“氧化－还原”型共反应物体系不同的是，在“还原－氧化”型共反应物体系中，共反应物和QDs均被还原，还原后的共反应剂形成强氧化物并将还原性的QDs氧化形成激发态，激发态在返回基态的过程中释放出光子.参与该类型反应体系的阴极共反应物主要有、H2O2、CH2Cl2等.以／QDs共反应物体系为例，其反应过程为：［4］：免疫分析是一种常用的生物分析方法，它主要是基于抗体（或抗原）作为选择性试剂来分析和测定各种抗原（或抗体）及半抗原以及能发生免疫反应的多种生物活性物质（如蛋白质、激素、抗生素和药物等），具有非常高的选择性和灵敏性.根据在反应中是否将QDs标记于抗体（或抗原）上可将其分为非标记免疫分析和标记免疫分析两大类［18］.立体障碍策略是QDs非标记型免疫分析中最常用的方法.该方法是基于免疫反应后形成的绝缘复合物阻碍共反应物与电极之间的电子传递，从而实现对目标分析物的灵敏检测.JIE等［4］利用半胱胺自组装技术和金纳米颗粒（Au－NPs）的信号放大策略，将巯基乙酸（Thioglycolic Acid，TGA）修饰的CdS量子点固定于金电极表面，发展了一种用于检测低密度脂蛋白（LDL）的非标记型QDs－ECL免疫传感器（图1）.当存在LDL时，其与QDs表面的ApoB－100反应形成免疫复合物绝缘层阻碍溶液中的S2O82－与金电极之间的电子传递，从而导致发光强度的降低.该方法的线性范围为0.025～16μg·L－1，最低检测限（LOD）为6ng·L－1.为了进一步拓宽该类免疫传感器的线性范围和提高其灵敏度，随后该课题组［19］利用碳纳米管（CNT）良好的导电性和壳聚糖（CHIT）优良的成膜性将CdSe量子点固定于工作电极表面.交联剂3－氨基丙基三乙氧基硅烷（APTES）的加入使得该方法的LOD低至1ng·L－1.除了APTES，交联剂聚二烯丙基二甲基氯化铵（PDDA）也被用于传感界面的修饰，结合纳米材料的信号放大作用使得对人免疫球蛋白G（Human Immunoglobulin G，HIgG）的LOD低至0.6ng·L－1［20］.相对于非标记免疫分析，基于QDs的标记免疫分析更多的是采用夹心免疫模式.各种纳米材料［21－22］被广泛用来负载信号抗体，并以此用于免疫夹心分析的信号示踪.这种方法使得单个生物识别事件所结合的电化学发光标记物大大增加，从而使得其灵敏度较传统的单标记ECL免疫方法有了很大的提高，检测限大大降低.最近，QIAN等［23］利用Si纳米球良好的生物相容性和较大的比表面积，以此来负载CdTe量子点和二抗，实现了对肿瘤标志物的高灵敏度、低检测限的分析.与仅用CdTe QDs作为单标记相比，ECL强度提高了约6.6倍.该免疫传感器对IgG的检测下限可达1.3ng·L－1.ZHANG等［24］设计合成了一种多孔的PtRu合金，并将其用作CdTe量子点的信号放大载体，使得对人绒毛膜促性腺激素（Human Chorionic Gonadotropin，HCG）的检测限低至0.8ng·L－1.石墨烯与碳纳米管一样具有良好的导电性和高的比表面积，可负载更多的信号分子，从而提高检测灵敏度［25］.LIU等［22］以金磁纳米颗粒（MPNs）和经PDDA和QDs修饰的石墨烯分别作为一抗和二抗载体，构建了一种用于肿瘤标志物CA125检测的“三明治”型免疫传感器（见图2）.这种借助磁珠的超顺磁性的分析方法，使得免疫复合物的分离和富集变得更加便捷，同时也使检测灵敏度得到了进一步的提高.在各种各样的核酸检测技术中，基于ECL生物传感器的方法由于其应用范围广、仪器简单、时空可控性好而受到广泛的关注［26－27］.常以QDs作为发光剂与生物识别分子（如ssDNA或亲和素）相连，进行核酸ECL分析.例如，将DNA探针的一端通过Au－S键固定于Au电极上，然后与生物素化的目标DNA杂交，最后加入亲和素化的量子点［28］（见图3）.如存在目标DNA，则经HNO3溶解的Cd2＋在S2O82－溶液中将会产生强烈的电化学发光现象.这种基于ECL信号增强的生物传感器与目标DNA在0.005～5μmol·L－1的浓度范围内呈现良好的线性关系，其LOD可达10pmol·L－1.利用分子生物学的方法对样品中检测对象进行信号放大可实现分析方法的高灵敏度，甚至达到单分子检测的要求.目前基于分子生物学方法的信号放大策略主要包括滚环扩增（RCA）［29］、剪切酶放大技术［30］、等温循环扩增［31］等.例如，ZHOU等［32］通过使用双纳米粒子标记的三重DNA探针和等温循环扩增技术，构建了一种高灵敏度、高特异性检测单核苷酸多态性的QDs－ECL传感器（见图4）.在含有共反应物S2O82－溶液及存在突变DNA（mutant DNA，mDNA）的情况下，由于mDNA与三重茎环DNA具有较强的结合自由能，致使三重茎环DNA构象改变以及Probe 2的分离，最终解除金纳米粒子（Au NPs）和CdTe对CdS的猝灭作用，同时也触发了后续的聚合反应.在链置换和Nb.BbvCⅠ内切酶（一种能识别并切割特异的双链DNA序列的内切核酸酶）作用下，mDNA得到了极大地扩增并导致ECL信号的增强.利用该策略所构建的ECL－SNP传感器的LOD可低达35amol·L－1.其创新地在两种探针上连接上了两个猝灭剂，使背景信号变得更低，在Klenow聚合酶和Nb.BbvCⅠ内切酶作用下使得目标mDNA不断地被循环放大.核酸适体（aptamer）是近年来发展起来的一类新型识别分子，由于具有相对分子质量小、可化学合成、稳定性好、无毒等优点，而引起了广泛关注［33］.同目前生物分析中常用的抗体相比，aptamer与靶标结合的特异性及亲和力与抗体相当甚至更强.由于它折叠后形成的特定三维结构能与特定靶标，如激素、蛋白质、小分子结合，所以近年来在QDs－ECL分析中受到越来越多的关注［34］.HUANG等［35］构建了一种基于量子点的竞争型核酸适体ECL传感器用于小分子物质ATP的检测（见图5）.在金电极上，亲和素化的CdSe／ZnS核－壳式量子点与生物素化的cDNA相连并与ATP竞争性地结合anti－ATP适配体探针.在共反应物S2 溶液中，ECL强度的降低与ATP浓度在0.018～90.72μmol·L－1范围内呈良好的线性关系.虽然该方法的检测灵敏度有待提高，但具有很高的特异性.此外，也拓宽了QDs－ECL分析应用范围.通过类似的方法，该课题组［34］又对溶菌酶进行了检测.此外，方禹之课题组［36］通过电沉积CTS－CdS QDs到碳纳米管（CNTs）上再结合aptamer构建了一种免标记的QDs－ECL传感器用于凝血酶检测.此种核酸适体传感器避免了繁琐的标记过程，具有构建简单的优点. 多糖是细胞表面糖脂和糖蛋白的重要组成成分，在细胞粘附、信号转导、免疫应答以及肿瘤的生长转移等方面具有重要作用［37］.目前，对于细胞表面多糖的检测，主要是基于其与凝集素的特异性识别行为来进行的.HAN等［38］利用凝集素对细胞表面聚糖的特异性识别及功能化CdSe QD作为ECL发光剂构建了一种新颖的用于监测活细胞表面聚糖动态表达的QDs－ECL细胞传感器.细胞表面多糖量的多少与ECL信号强度在一定范围内呈反比关系.由于量子点具有较大的斯托克斯位移，发射光谱窄，因此可被用作电化学发光共振能量转移（RET）的供体.陈洪渊课题组［39］设计了一种利用CdS QDs－［Ru（bpy）3］2＋作为供体－受体对进行ECL－RET的传感策略用于检测SMMC－7721细胞（见图6）.当［Ru（bpy）3］2＋标记的SMMC－7721细胞通过免疫反应被捕获到CdS量子点修饰的玻碳电极（GCE）上时，通过供体－受体之间的ECL－RET将会使［Ru（bpy）3］2＋在620nm处产生另一个ECL峰.该方法对SMMC－7721细胞的检测下限可达12.5cells ·mL－1.随后该研究小组［40］利用类似的策略构建了一种芯片微分析平台用于癌细胞表面多种肿瘤标志物的快速分析.除了以上基于生物分子间特异性识别策略来构建的传感方法外，一些利用目标分析物或其产物对ECL体系具有明显抑制效应的分析方法也被用于QDs－ECL生物传感器的设计［41－43］.例如LIU等［15］首次利用作为CdTe QDs的共反应物，酪氨酸酶催化反应产物作为湮灭剂，构建了一种超灵敏的ECL分析方法用于酪氨酸的检测.激发态的CdSe QDs与酪氨酸酶催化产物苯醌之间通过能量转移而发生湮灭，从而导致ECL强度的显著降低.该方法对酪氨酸的检测下限可达0.1pmol·L－1.随后该课题组［44］又发现多巴胺的氧化产物对／CdSe QDs电化学发光体系具有强烈抑制作用，从而发展了一种具有良好选择性并可用于多巴胺检测的抑制型QDs－ECL分析方法.QDs因其优异的理化性质而逐渐成为生物分析领域极具竞争力的ECL发光剂，尤其是其尺寸可控的发光行为使得量子点可用于多组分生物分析，但同时也面临一些诸如生物毒性、灵敏度偏低、非特异性结合、工作电位较高等很多实际问题.利用低毒性的生物相容性分子对QDs进行包裹修饰，或合成低毒（或非毒性）的量子点（如碳量子点、石墨烯量子点、金属纳米簇等）并研究其相关的ECL机理将成为今后QDs－ECL生物传感器研究的重点.在信号放大方面，随着纳米科技与生物技术的迅猛发展，将一些新型的纳米材料（如多孔Si纳米球、树状聚合物、石墨烯等）和生物放大技术（如滚环扩增、等温循环扩增、剪接酶放大等）结合起来，将是目前QDs－ECL在生物分析中的一个重要趋势.通过与核酸适体技术相结合，QDs－ECL可以高选择性地检测小分子、蛋白质和其它生物分子.总之，QDs－ECL分析技术在临床诊断、药物分析、食品检测等领域的广泛应用将促使QDs－ECL不断向着高通量、多组分、集成化、微型化以及实时动态监测方向发展.【相关文献】［1］MIAO Wujian.Electrogenerated chemiluminescence and its biorelated applications ［J］.Chem Rev，2008，108（7）：2506－2553.［2］HU Lianzhe，XU Guobao.Applications and trends in electrochemiluminescence ［J］.Chem Soc Rev，2010，39（8）：3275－3304.［3］DING Zhifeng，QUINN B M，HARAM S K，et al.Electrochemistry and electrogenerated chemiluminescence from silicon nanocrystal quantum dots［J］.Science，2002，296（5571）：1293－1297.［4］JIE Guifen，LIU Bo，PAN Hongcheng，et al.CdS nanocrystal－based electrochemiluminescence 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临床分子生物学检验智慧树知到期末考试章节课后题库2024年湖南师范大学
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（）答案:错16.染色体的形态最典型和清晰的阶段是有丝分裂间期。
（）答案:错17.PCR 技术的本质是核酸重组技术。
（）答案:错18.双脱氧链终止法测序需要加入双脱氧核苷酸。
（）答案:对19.Tm 主要与 A-T 含量有关。
（）答案:错20.产前诊断的金标准是对羊水或脐带血细胞进行染色体核型分析。
（）答案:对21.16SrRNA基因作为细菌分类鉴定的靶基因的优点有（）答案:多信息###长度适中###多拷贝22.关于沙眼衣原体的分子生物学检验，正确的是（）答案:RAPD技术不适用于血清学分型###PCR扩增靶基因序列主要有外膜蛋白基因、隐蔽性质粒DNA和16S rRNA基因序列###PCR-RFLP可用于CT分型###LCR技术适合于高危人群普查时大批量标本的检测23.SELDI-TOF-MS中蛋白质芯片系统的组成主要包括（）答案:芯片###芯片阅读器###分析软件24.CYP450基因分型检测的分子生物学方法有（）答案:实时荧光定量PCR###等位基因特异性PCR###基因芯片###PCR-RFLP25.临床分子生物学实验室检测方法的选择原则包括（）答案:根据本地区患者的承受能力选择###根据实验室的技术特点选择###根据检测目的选择###根据实验室的实验条件选择26.PML-RARa融合基因常用的检测方法有（）答案:RT-PCR###荧光原位杂交###荧光定量PCR27.原癌基因激活的机制包括（）答案:易位激活###癌基因甲基化程度降低###原癌基因扩增###点突变28.法医物证学的主要内容有（）答案:种族和种属认定###性别鉴定###个体识别###亲子鉴定29.关于DHPLC技术的描述正确的是（）答案:灵敏度和特异性高###自动化程度高###是分析异质性突变的首选方法###可实现高通量检测30.理想的质控品应满足以下要求（）答案:稳定、价廉、同一批次可大量获得###无已知的生物传染危害性###基质与待测样本一致###阳性质控品所含待测物浓度接近试验的决定性水平###靶值或预期结果已知31.乙型肝炎病毒的核酸类型是（）答案:双股DNA32.TPMT是下列哪类药物在体内代谢的关键酶（）答案:嘌呤类33.采集用于PCR检测的血清样本时，不宜选择使用的抗凝剂是（）答案:肝素34.奥美拉唑在体内代谢主要受哪种药物代谢酶的影响？（）答案:CYP2C1935.PCR的退火温度通常比引物的Tm值（）答案:低约5℃36.HLAI类抗原的特异性取决于（）答案:α重链37.可以用来分辨16SrRNA基因不能鉴别的非常接近的菌种和种内菌株的是（）答案:16S-23S rRNA基因38.单细胞基因扩增一般采用下列哪项技术增加检测的敏感性和特异性（）答案:巢式PCR39.Southern 印迹杂交中常用的核酸变性剂是（）答案:氢氧化钠40.DNA指纹的分子遗传学基础是（）答案:DNA的多态性41.新一代测序技术最显著的特点是（）答案:高通量42.微卫星异常的检测方法有（）答案:DNA测序43.PCR的引物Tm值的计算公式为（）答案:Tm= 2(A+T)+4(G+C)44.PCR循环中的延伸时间取决于（）答案:扩增产物的长度45.线粒体基因组22个tRNA可转录几种tRNA （）答案:20种46.保证结果准确可靠的先决条件是（）答案:分析前质量控制47.肿瘤的分子诊断策略有（）答案:检测肿瘤相关基因48.在PGD中诊断单基因疾病的主要手段是（）答案:单细胞PCR技术49.焦磷酸测序法突出的优势是（）答案:较长的读长50.寡核苷酸探针的最大优势是（）答案:可以区分仅仅一个碱基差别的靶序列51.非整倍体筛选的诊断方法主要借助于下列哪项技术（）答案:FISH52.乙型肝炎病毒可分为多少个基因型？（）答案:853.TaqMan 探针技术要求扩增片段应为（）答案:50～150bp54.目前对肺癌遗传易感性主要集中在如下哪几个领域（）答案:DNA修复能力55.临床分子生物学检验的核心技术是（）答案:核酸扩增技术56.临床分子生物学检验标准化的前提是（）答案:标准品57.临床基因扩增检验实验室设计的原则主要包括（）答案:分区设置###控制空气流向58.质量管理体系文件具有法规性、唯一性和时效性三大特性。
化学发光法检测CA153,CA125,CA199在肺癌及消化道其他肿瘤中的临床意义
化学发光法检测CA153，CA125，CA199在肺癌及消化道其他肿瘤中的临床意义目的研究分析化学发光法检测CA153，CA125，CA199在肺癌及消化道其他肿瘤中的临床意义。
方法选择自2012年8月～2013年7月来我院进行治疗的癌症患者60例作为研究对象，命名为观察组，其中肺癌患者30例，其他癌症包括胰腺肿瘤、胃癌等患者共计30例，另选同期的健康人60例作为对照组，分别于空腹时采集两组患者的外周静脉血，通过化学发光法检测其CA153、CA125、CA199的水平。
结果分别对比对照组和观察组的检查结果，发现观察组中良性肿瘤患者的CA153、CA125、CA199水平明显低于恶性肿瘤患者，对照组患者的CA153、CA125、CA199水平明显低于观察组患者。
结论对于肺癌以及其他消化道类肿瘤的诊断方面，采用化学发光法检测CA153、CA125、CA199具有特异性，可以提高诊断的准确率。
标签：化学发光检测；肺癌；消化道类肿瘤；临床意义近年来，各类医学检测技术水平在不断地飞速发展，对于各种在以往比较那解决的疾病也提出了诸多诊断和治疗的手段，为人们的健康水平的提高提供了极大的保障，由于人们受到不健康的生活习惯以及污染严重的生活环境的影响，肺癌的发病率在逐渐的增加[1]，不过随着人们对于癌症的认识的逐渐深入，发现肿瘤标记物在癌症的诊断中具有比较重要的意义，所谓的肿瘤标记物就是指癌症患者的癌组织中会出现免疫球蛋白、各种酶以及激素，这些与癌症相关联的的物质就被称为肿瘤标记物[2]，而采用化学发光法进行免疫分析是目前比较先进的一种高效检测方法，本文选择自2012年8月～2013年7月来我院进行治疗的癌症患者60例和60例健康人作为研究对象，研究分析化学发光法检测糖类抗原CA153、CA125、CA199在肺癌及消化道其他肿瘤中的临床意义，现做报告如下。
1资料与方法1.1一般资料本为选择自2012年8月～2013年7月来我院进行治疗的癌症患者60例和60例健康人作为研究对象，分别命名观察组和对照组，其中观察组患者中，男性患者32例，女性患者28例，年龄42～75岁，肺癌患者30例（其中良性肿瘤18例，恶性肿瘤12例），其他癌症包括胰腺肿瘤12例、胃癌18例（其中良性肿瘤15例，恶性肿瘤15例；对照组中男性30例，女性30例，年龄43～74岁，两组人员在年龄及性别方面没有显著的差异，具有可比性。
非酶的化学发光共振能量的转移
非酶的化学发光共振能量的转移法：选择性好、灵敏度高的检测银离子的一种有效的方法一种灵敏的非酶的化学发光的方法被用来检测银离子。
这种测定基于化学发光共振能转移在鲁米诺和荧光素与三元络合物（荧光素、邻二氮杂菲和银离子）的形成之间。
含有银离子的标准溶液范围集中在1.0×10-7M和2.5×10-4M之间，用所提议的方法测定，观察到标准曲线是在这个范围内是线性的，相关系数是0.9993。
这种测定对银离子的极限被估计是5.0×10-8M。
所提方法的优点是与其它方法相比，它具有高选择性和低检出限。
1．介绍CRET法涉及到从化学发光给体到荧光团受体的非辐射能量转移。
因为没有外部光源在CRET方法中被用来激发，所以由外部光源激发的非特定的信号是最小化的。
最近，Ren和他的工作伙伴报告了在化学发光作为给体和量子点作为受体的CRET法。
Zhang及其它人为腺嘌呤核苷三磷酸盐在癌细胞中呈现开发了一种以化学发光共振能量的转移法为基础的测定。
Willer 和他的工作伙伴证明了CRET法在检测适体衬底络合物、汞离子和DNA这三种物质方面的应用。
Bi及其他人为了选择性好、灵敏度高的检测DNA和蛋白质，基于CRET 系统开发了一种氧化石墨烯平台。
这些研究表明，CRET系统是一种检测生物分子的强大的技术。
然而，许多以前的CRET工作报道，用辣根过氧化酶催化H2O2氧化Luminol产生化学发光的反应的方法已经被使用。
不幸的是，涉及到的外源酶限制了CRET系统的通用性。
在大多数的案例中，由于酶的催化，使得测定变得复杂，例如，在研究中干扰生物的相互作用。
银是一种商业重要性的金属。
银化合物和含银产品在工业和医药方面的使用增加已经导致银在环境样品中含量的增加。
银离子已经展现出对水生生物很高的毒性，因此，水溶液中银离子的检测对环境监测和生物医药科学非常重要。
贡献了许多努力在银离子的传感器系统的设计上，包括肽涂层硫化镉量子点系统，基于氧化石墨烯的荧光的DNA传感器，电致化学发光生物传感器，比率荧光传感器，纳米自身催化传感器，核酸功能化，硒化镉/硫化锌量子点系统。
化学发光法检测CA125和CA153在卵巢肿瘤诊断中的临床意义
・１ ３ ・ ｌ５
化 学 发 光 法 检 测 Ｃ １５和 Ｃ １３ Ａ２ Ａ ５ 在 卵 巢肿 瘤 诊 断 中的 临床 意 义
胡 蓉 （ 庆 市合 川 区人 民 医院检 验科 重庆 重 ４ １２ ） ０５０
【 摘要 】 目的 探讨化 学发 光法检 测糖 类抗 原 １５ Ｃ １５ 和糖类抗 原 １３ Ｃ １３ 在卵 巢肿瘤诊 断 中的 临床 意 ２ （Ａ２） ５（Ａ５）
ｓｒ ｅｕｍ ｅ ｅ ｓｏ Ａ ２ ｄ ＣＡ ５ ｎ ｐ ｔ ｎ ｓｏ ｏｈ ｇ ｏ ｐ ｒ ｏ ａ ｅ ｎ ａ ｙ ｅ Ｒｅ ｕ ｔ Ｉ ｏ ａ ｉｏ ｔ ｅ ｔ ｙ ｃ ｎ ｒ ｌ ，ｔ ｅ ｓ ｒ ｌｖ ｌ ｆＣ １ ５ ａ ｎ １ ３ ｉ ａｉ ｔ ｆｂ ｔ ｒ ｕ ｓｗｅ ｅ ｃ ｍｐ ｒ ｄ ａ ｄ ａ ｌ ｚ ｄ． ｓ ｌｓ ｎ ｃ ｍｐ ｒｓ ｎ ｗｉｈ ｈ ａ ｈ ｏ ｔｏｓ ｈ ｅ － ｅ ｎ ｌ ａ ｌ ｖ ｌ ｆＣ １ ５ ａ ｄ ＣＡ １ ３ ｉ ａｉ ｎ ｓｗｉ ｌ ｎ ｎ ｎ ｅ ｉｎ ｏ ａ ｉ ｎ ｎ ｏ ｌｓ ｒ ｉ ｎ ｆ ａ ｄ ｌ ｖ ｔ ｄ，ｔ ｅ ｒｄ ｆ ｒ ｎ ｅｗａ ｔｔｓ － ｍ ｅ ｅ ｓｏ Ａ ２ ｎ ５ ｎ ｐ ｔ ｔ ｔ ｍａ ｉ ａ ｔａ ｄ ｂ ｎ ｇ ｖ ｒａ ｅ ｐ ａ ｍｓ ｗｅ ｅ ｓｇ ｉ ｃ ｎ ｙ ｅｅ ａ ｅ ｅ ｈ ｇ ｉ ｈ ｉ ｉ ｅ ｅ ｃ ｓｓａ ｉ ｉ ｆ ｔ
患者 Ｃ １５和 Ｃ １３的水 平均 明显提 高， Ａ２ Ａ５ 差异具有统计学意义（Ｐ ＜ ．５ 。与健康对照组 患者相 比 ， ００ ） 恶性和 良性 卵巢
肿瘤组 患者 Ｃ １５和 Ｃ １３的阳性 率明显提 高 ， Ａ２ Ａ５ 差异具有统计学意义 （ ＜ ．５ 。结论 Ｐ ００ ） 和Ｃ ５ Ａ１３对于卵巢癌的诊 断均具有一定的特 异性。在进 一步的研 究 中， 可以采 用联合检测 ， 以期待提 高诊 断的准确性 。
肿瘤标志物分析统计学方法
肿瘤标志物分析统计学方法肿瘤具有高死亡率、高转移率和高复发率，是危害人类健康的重大疾病。
诊断肿瘤的传统方法有病理组织活检、核磁共振成像（magnetic resonance imaging，MRI）、电子计算机断层扫描（computed tomography，CT）、B超、X线胸片、内镜检查等。
这些检查对于肿瘤早期的检测效果十分有限，部分检测方法不仅价格昂贵，且会给患者带来痛苦。
因此，在肿瘤早期阶段开展快速、有效的检测十分必要，不仅可以达到早发现、早治疗的目的，还可以改善患者就医体验。
肿瘤标志物的筛检对于肿瘤早期检测具有重要意义[1]。
肿瘤标志物是指由肿瘤组织或宿主与肿瘤相互作用所产生的一类活性物质，能够提示肿瘤存在与生长变化。
肿瘤标志物常常存在于血清、细胞、尿液、体液或组织中，常见的有癌胚蛋白、肿瘤抗原、酶类标志物、激素、糖类抗原等。
肿瘤标志物检测具有操作便捷、标本易获取、非侵入性、价格低廉、易于动态监测疾病等优点。
肿瘤标志物的检测对于肿瘤的预防、早期诊断与鉴别诊断、辅助肿瘤分类、疾病监测、指导治疗和预后判断有重要作用，可有效弥补其他医学技术对肿瘤诊断、治疗及预后判断的不足[2]。
肿瘤标志物种类繁多，检测方法也各异，本文将几种常见肿瘤标志物检测方法的研究进展作一综述。
1、放射免疫分析放射免疫分析是一种传统的检测肿瘤标志物的方法，是将放射性核素检测技术与抗原抗体结合特异性的特点相结合，以定量微量物质。
放射免疫分析多使用放射性核素125I，因其具有放射性高、易标记、衰变过程中释放的射线易于被检测等优势，逐渐替代了3H和14C而被广泛使用。
放射性核素标记具有高灵敏度、易于商品化等优势，曾被广泛应用，但与其他方法[3]相比，存在试剂盒使用寿命短、有放射性污染风险等缺点，目前已逐渐被其他检测方法取代。
2、化学发光免疫分析化学发光免疫分析是目前常用和较为成熟的肿瘤标志物检测技术，其利用化学发光物质作为标记物，根据发光信号的强度来判断待测物质的量。
血清高迁移率族蛋白A2、糖链抗原19-9联合ROMA指数对卵巢癌的诊断价值
ＤＯＩ：１０．７６８３／ｘｘｙｘｙｘｂ．２０２０．０５．０１７收稿日期：２０１９－０９－２９基金项目：河南省医学科技攻关计划项目（编号：２０１８０２０１５７）。
作者简介：张镛镛（１９８５－），女，河南商丘人，硕士，主治医师，研究方向：妇产科疾病的临床诊断与治疗欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁氉氉氉氉。
本文引用：张镛镛，王芳，雷利娜，等．血清高迁移率族蛋白Ａ２、糖链抗原１９ ９联合ＲＯＭＡ指数对卵巢癌的诊断价值［Ｊ］．新乡医学院学报，２０２０，３７（５）：４７１ ４７４．ＤＯＩ：１０．７６８３／ｘｘｙｘｙｘｂ．２０２０．０５．１７．【临床研究】血清高迁移率族蛋白Ａ２、糖链抗原１９ ９联合ＲＯＭＡ指数对卵巢癌的诊断价值张镛镛１，王 芳２，雷利娜１，薛秀珍１（１．河南科技大学第一附属医院妇产科，河南 洛阳 ４７１０００；２．郑州大学第二附属医院妇产科，河南 郑州 ４５００００）摘要： 目的 探讨高迁移率族蛋白Ａ２（ＨＭＧＡ２）、糖链抗原１９ ９（ＣＡ１９ ９）联合ＲＯＭＡ指数对卵巢癌的诊断价值。
方法 选择２０１６年３月至２０１８年３月于河南科技大学第一附属医院行卵巢切除术患者９８例为研究对象，其中卵巢癌患者４６例（卵巢癌组），良性卵巢疾病患者５２例（良性卵巢疾病组）；另选择同期体检健康女性５０例为健康对照组。
采用酶联免疫吸附试验检测受试者血清ＣＡ１９ ９和ＨＭＧＡ２水平，采用全自动电化学发光仪检测血清人附睾蛋白４和糖链抗原１２５水平，并计算ＲＯＭＡ指数，采用受试者工作特征（ＲＯＣ）曲线分析血清ＣＡ１９ ９、ＨＭＧＡ２及ＲＯＭＡ指数对卵巢癌的诊断价值。
结果 卵巢癌组患者血清ＨＭＧＡ２、ＣＡ１９ ９水平和ＲＯＭＡ指数均高于良性卵巢疾病组和健康对照组（Ｐ＜０．０５）；良性卵巢疾病组血清ＨＭＧＡ２、ＣＡ１９ ９水平和ＲＯＭＡ指数高于健康对照组（Ｐ＜０．０５）。
共振能量转移分子显像在生物医学中的应用
共振能量转移分子显像在生物医学中的应用聂大红;唐刚华【摘要】共振能量转移分子显像(RETI)能显著改善光信号强度和组织穿透性,可用于活体深度组织光学显像。
共振能量转移(RET)是指发生在近距离的供体与受体之间的能量转移,包括非放射共振能量转移和放射共振能量转移。
RETI 是基于共振能量转移的光学成像技术,主要包括荧光共振能量转移显像(FRETI)、生物发光共振能量转移显像(BRETI)、化学发光共振能量转移显像(CRETI)和放射共振能量转移显像(RRETI)。
目前,RETI 是分子显像研究的热门领域,已用于生物医药学研究各领域。
本文对RETI 技术原理及其在生物医学中的应用进行综述。
%Resonance energy transfer molecular imaging (RETI)can markedly improve signal intensity and tissue penetrating capacity of optical imaging,and have huge poten-tial application in the deep-tissue optical imaging in vivo.Resonance energy transfer (RET)is an energy transition from the donor to an acceptor that is in close proximity, including non-radiative resonance energy transfer and radiative resonance energy trans-fer.RETI is an optical imaging technology that is based on RET.RETI mainly contains fluorescence resonance energy transfer imaging (FRETI),bioluminescence resonance energy transfer imaging (BRETI ), chemiluminescence resonance energy transfer imaging (CRETI),and radiative resonance energy transfer imaging (RRETI).RETI is the hot field of molecular imaging research and has been widely used in the fields of biology and medicine.This review mainly focuses on RETI principle and application in biomedicine.【期刊名称】《同位素》【年(卷),期】2016(029)004【总页数】9页(P248-256)【关键词】共振能量转移分子显像;荧光共振能量转移;生物发光共振能量转移;化学发光共振能量转移;放射共振能量转移【作者】聂大红;唐刚华【作者单位】中山大学附属第一医院广东省医用放射性药物转化应用工程技术研究中心，广东广州 510080; 中山大学附属第一医院放疗科，广东广州 510080;中山大学附属第一医院广东省医用放射性药物转化应用工程技术研究中心，广东广州 510080; 中山大学附属第一医院核医学科，广东广州 510080【正文语种】中文【中图分类】R817.4随着生命科学研究的深入，无论是疾病临床诊疗，还是基础研究，都迫切需要一种高度灵敏、快速、可靠、操作简便、易自动化的分析技术。
发光石墨烯量子点的应用及未来展望
发光石墨烯量子点的应用及未来展望摘要作为石墨烯家族的最新成员，石墨烯量子点(graphene quantum dots，GQDs)除了具有石墨烯优异的性能之外，还因其明显的量子限域效应和尺寸效应而展现出一系列新颖的特性，吸引了各领域科学家们的广泛关注。
在这篇论文中，我们主要综述了石墨烯量子点的制备方法以及潜在应用，此外还说明了石墨烯量子点的发光机制以及对于其的展望。
关键词：石墨烯量子点，发光材料，应用1 引言碳是地球上储量最丰富的元素之一，一次又一次得带给我们各种明星材料。
1985年,克罗托、科尔和斯莫利三位科学家发现了富勒稀(C60)。
1996年获得诺贝尔化学奖,这是零维碳材料的首次出现。
而1991年碳纳米管的发现则成了一维碳材料的代表。
1947年就开始了石墨烯的理论研究,用来描述碳基材料的性质,迄今有60多年历史。
直到2004年,Novoselov和Geim (英国曼彻斯特大学教授)利用微机械剥离法使用胶带剥离石墨片,首次制得了目前最薄的二维碳材料—石墨稀,仅有一个原子厚度,2010年他们获得了诺贝尔物理奖,从此石墨稀成了物理学和材料学的热门研究对象。
石墨烯量子点(GQDs)，一种新型的量子点，当GQDs尺寸小于100 nm时，就会拥有很强的量子限制效应和边缘效应,当尺寸减小到l0nm时,这两个效应就更加显著,会产生很多有趣的现象，这也引发了广大科学家的研究兴趣。
GQDs具有特殊的结构和独特的光学性质,即有量子点的光学性质又有氧化石墨烯特殊的结构特征。
GQDs的粒径大多在10 nm左右,厚度只有0.5到1.0 nm,表面含有羟基、羰基、羧基基团,使得其具有良好的水溶性。
GQDs的合成方法不同,尺寸和含氧量不同,使紫外可见吸收峰位置不同。
不同的合成方法使GQDs的光致发光性质不同,光致发光依赖于尺寸、激发波长、pH以及溶剂等。
有些GQDs 还表现了明显的上转换发光特性,GQDs不仅拥有光致发光性质还有优越的电致化学发光性能。
化学发光在线考试-肿瘤五项高血压五项
化学发光在线考试-肿瘤五项&高血压五项以下属于非小细胞肺癌的是（）鳞癌(正确答案)腺癌(正确答案)大细胞癌(正确答案)肝癌SCC的中文名称是（） [单选题]鳞状细胞癌相关抗原(正确答案)胃泌素释放肽神经元烯醇化酶人附睾蛋白小细胞肺癌的特异性标志物有（）SCCPRO-GRP(正确答案)NSE(正确答案)CEACyfra211肺癌经典联检套餐是（）SCC(正确答案)PROGRP(正确答案)NSE(正确答案)CEA(正确答案)Cyfra211(正确答案)CA199HE4常用于（）癌的辅助诊断及治疗监测 [单选题] 乳腺癌前列腺癌卵巢癌(正确答案)肺癌CA242、CA50常用于（）的辅助诊断大肠癌(正确答案)胰腺癌(正确答案)胃癌(正确答案)肝癌以下哪些项目是目前罗氏所不具备的（）CA242(正确答案)SCCPROGRPCA50(正确答案)HE4以下哪些项目是雅培所不具备的（）CA242(正确答案)SCCPROGRPCA50(正确答案)HE4以下哪些项目是安图所不具备的（）CA242(正确答案)SCCPROGRP(正确答案)CA50HE4(正确答案)以下哪些是SCC的常见影响因素（）汗液(正确答案)唾液(正确答案)皮屑(正确答案)头发(正确答案)迈瑞PROGRP项目的室温样本稳定性是（） [单选题] 3h4h6h8h(正确答案)迈瑞新增的高血压项目有（）肾素(正确答案)醛固酮(正确答案)血管紧张素I血管紧张素II关于高血压诊断标注描述正确的是（） [单选题]收缩压≥90或舒张压≥140收缩压≥140或舒张压≥90(正确答案)收缩压≥120或舒张压≥80收缩压≥80或舒张压≥120迈瑞高血压项目推荐的比对系统是（） [单选题]安图索林(正确答案)新产业贝克曼（放免）原发性醛固酮增多症引起的高血压属于继发性高血压（） [判断题]对(正确答案)错迈瑞发光检测肾素的（） [单选题]活性浓度(正确答案)以下中国专家共识中关于原醛症筛查说法正确的是（）持续性血压>160/100 mmHg需要筛查原醛症(正确答案)高血压合并阻塞性呼吸睡眠暂停患者需要筛查原醛症(正确答案)联合使用4种降压药物,其中包括利尿剂, 血压处在正常值的患者也需要筛查原醛症(正确答案)高血压合并自发性或利尿剂所致的低钾血症的患者也需要筛查原醛症(正确答案)以下英文简称与中文名称对应正确的是（）Renin--醛固酮ALD--肾素ARR--醛固酮/肾素比值(正确答案)PA--原发性醛固酮增多症(正确答案)肾素浓度检测易受pH的影响（） [判断题]对错(正确答案)肾素活性检测的优势是稳定性好，CV值低，缺点是难以实现实验室之间的结果一致性（） [判断题]对错(正确答案)原醛症的确诊试验有（）生理盐水输注试验(正确答案)卡托普利试验(正确答案)口服高钠饮食(正确答案)氟氢可的松试验(正确答案)关于ARR筛查前准备说法错误的是（） [单选题]停用对ARR 有影响的药物减少正常钠盐摄入。
荧光共振能量转移-荧光寿命显微成像(FRET-FLIM)技术在生命科学研究中的应用进展
Vol 41, No. 4, pp 1023-1031April !2021第41卷，第4期2021 年 4 月光谱学与光谱分析SpectroscopyandSpectralAnalysis荧光共振能量转移■荧光寿命显微成像(FRET-FLIM )技术在生命科学研究中的应用进展罗淋淋123!牛敬敬3!莫蓓莘林丹樱3!刘琳1 ' 2*1深圳大学生命与海洋科学学院，广东省植物表观遗传学重点实验室,广东深圳5180602.深圳大学龙华生物产业创新研究院,广东深圳5180603 深圳大学物理与光电工程学院!广东 深圳 518060摘 要 细胞是动植物结构和生命活动的基本单位$细胞过程的一个重要特点就是其生化组分在时空调控上的相互作用关系$然而,利用传统的生化方法(如酵母双杂交系统、pull-down 系统等)很难在空间上评估活细胞内分子间的相互作用$光学技术的快速发展，为研究活细胞中生物分子的时空动态提供了新的遗传 研究工具,其中荧光共振能量转移-荧光寿命显微成像(FRET-FLIM )技术在实时探测分析活细胞中生物大分子构象变化和分子间动态相互作用过程具有独特的优势，如：实现对活细胞的实时“可视化”研究，同时具有高时空分辨率&检测更加灵敏、结果可信度高&且基于简易的数学运算完成简单快捷的分析程序$介绍 FRET-FLIM 技术的理论背景知识,对比了该技术与传统蛋白相互作用技术研究的利弊,同时归纳了其在蛋白相互作用、细胞生物学和疾病诊断等方面的最新应用研究进展,最后总结和讨论了 FRET-FLIM 技术的未来发展趋势，以期能够为揭示活细胞的结构和细胞过程相关研究提供新的见解$关键词 荧光共振能量转移&荧光寿命显微成像&蛋白相互作用&疾病诊断中图分类号：O433.4文献标识码：RDOI ： 10. 3964/j. issn. 1000-0593(2021)04-1023-09引言随着人类对生命现象本质的探究，科学家对生命科学问题的研究日益深入，这推动了非生物学科(如数学、化学、物理学、信息科学等)与生命科学相互交叉和相互融合的热潮$20世纪90年代，商用共聚焦显微镜的问世为研究活细胞中不同蛋白的共表达提供了便利的工具(1)$与传统宽场成像方法相比，共聚焦显微镜的光学分辨率和视觉对比度都大幅提高，能够呈现高质量的彩色图像，但是其空间分辨率仍无法 突破衍射极限(大约200 nm ),因而无法用于研究生物分子 间的相互作用$ 2006年以后，许多超分辨率成像技术应运而生,如受激发射损耗显微术(stimulated emission depletion,STED )、 结 构 光 照 明 显 微 术 (structure i l uminationmicroscopy , SIM )、光激活定位显微术(photoactivatable localization microscopy , PALM )和随机光学重构显微术(stochasticopticalreconstruction microscopy !STORM ) 等!收稿日期：2020-03-30,修订日期：2020-07-12基金项目：国家重点研发计划项目(2016YFD0101803),广东省创新创业团队项目(2014ZT05S078),广东省基础与应用研究基金项目(2019A1515011222),深圳市基础研究面上项目(JCYJ20190808112207542)资助作者简介：罗淋淋，1988年生，深圳大学生命与海洋科学学院光生物学博士研究生e-mail : 1in S luo@163. com通讯作者e-mail %linliu @它们的分辨率都能突破衍射极限，最高空间分辨率可达到10nm ,使光学显微镜步入纳米时代[24) $超分辨成像技术由于其高成像分辨率的优势对科学家在活细胞分子水平上的研究 起到了显著的促进作用，如活细胞内生物大分子结构的观察，遗传信息的编码及表达的研究，都对生命过程和疾病发 生机理的理解具有重要的意义(5-7] $然而，这些成像技术仅能较好地获取其结构特征，对体内蛋白质-蛋白质的相互作用所体现的生物功能信息分析特异性不强$荧光寿命显微成像(fluorescence lifetime imaging micros copy , FLIM )技术是研究细胞内生命活动状态的一种非常可靠的方法$荧光寿命是荧光团在返回基态之前处于激发态的 平均时间，是荧光团的固有性质，与样品浓度、样品吸收、 光漂白和激光激发强度等因素无关(切，相反地，荧光寿命对荧光团所处的微环境非常敏感，如细胞中温度、pH 值分 布、离子浓度、氧浓度、分子结合或溶液疏水性等，因而它能十分灵敏地反映激发态分子与周围微环境的相互作用及能量转移(10)$ FLIM 技术就是对荧光探针分子的荧光寿命进行1024光谱学与光谱分析第41卷成像，能实现对细胞内诸多生化参数的定量测量，尤其是结合了荧光共振能量转移（forster resonance energy transfer, FRET）的FRET-FLIM技术$FRET本身不是一种成像技术，而是一个物理过程，指两个携带不同荧光基团的大分子之间或同一分子的不同荧光团之间通过电偶极相互作用所发生的非辐射能量转移（1「12）。
氮掺杂石墨烯量子点的电化学发光分析及可视化检测
摘要摘要石墨烯量子点因其尺寸小于波尔半径，因而具有很强的量子限制和边缘效应以及其它一些新颖的特性，在很多领域，石墨烯量子点都表现出潜在的应用价值，例如生物医学和生物成像，化学生物传感器，光电器件，热导体以及光催化等等。
为发掘石墨烯量子点的特性及其应用领域，针对石墨烯量子点的表面修饰逐渐引起了重视。
经理论研究和实验探究表明，表面功能化和异原子掺杂两种方式能够有效地改善石墨烯量子点的光学以及电子性能，从而产生新的现象和独特的性质。
本文以石墨烯量子点为研究对象，在研究其电化学发光性质的基础上，通过氮掺杂和表面功能化两种方式对其改性，研究功能作用化对石墨烯量子点光学性质的影响，并基于此建立了分别用于测定葡萄糖、过氧化氢的电化学发光分析方法和金属锰离子（Ⅱ）的可视化检测方法。
主要研究内容如下：1.通过超声-光照下过氧化氢氧化氧化石墨烯片的方法制备了石墨烯量子点，研究了此石墨烯量子点的电化学发光性质；基于过氧化氢对石墨烯量子点独特电化学发光信号的抑制作用以及葡萄糖氧化酶的催化作用，构建了一种灵敏检测葡萄糖的ECL 生物传感器。
在优化的测定条件下，ECL信号的抑制率与葡萄糖浓度在1.2~120.0pM 的范围内呈线性关系，方法检出限为0.3pM。
2.合成了鲁米诺功能化的氮掺杂石墨烯量子点（luminol-NGQDs）纳米复合物；研究发现，在luminol-NGQDs复合物体系中，luminol和NGQDs之间能够发生电化学发光共振能量转移（ECL-RET），其中luminol作为能量供体、NGQDs作为能量受体，因此复合物体系产生强的阳极ECL发射而无需额外使用共反应试剂；基于过氧化氢对luminol-NGQDs的ECL信号的增敏作用，建立了一种灵敏检测过氧化氢的ECL方法，方法的线性范围为3.3×10-8~7.4×10-5M，相关系数为0.9986，检出限为1.0×10-8M。
生物发光共振能量转移
BRET 生物发光共振能量转移技术简介：生物发光共振能量转移（BRET）技术是近10年来出现的一种新的检测蛋白质-蛋白质相互作用的技术.它的最大优势是能在活细胞中实时进行检测，因此能够进行相互作用动力学的研究。
在应用这个系统研究感兴趣的蛋白前，首先需要将Rluc或者EYFP 融合到每个蛋白或者他们的辅蛋白上。
在细胞中，融合蛋白共表达，然后和荧光素酶和其底物腔肠素反应，当能量供体Rluc，能量受体EYFP 之间距离比较近的时候(10-100Å)，那么光将从Rluc(峰值480nm发射)传递到EYFP，形成它的激发，并且发射一个波长在530nm 的发射光，BRET 量化的程度以发射光530nm 和480nm 的比率表示。
实验流程1、用于BRET的表达质粒构建；2、融合蛋白表达检测；3、BRET实验；4、实验结果分析及提交实验报告客户提供1、目的基因cDNA（也可由我公司提供基因克隆）2、用于实验细胞（如果我公司细胞库有可不需提供）公司提供详细实验步骤、使用仪器、及结果分析等详细实验报告。
服务周期和价格具体咨询本公司荧光共振能量转移（FRET）荧光共振能量转移-FRET（Fluorescent Resonance Energy Transfer）指两个荧光发色基团在足够靠近时，当供体分子吸收一定频率的光子后被激发到更高的电子能态，在该电子回到基态前，通过偶极子相互作用，实现了能量向邻近的受体分子转移。
（1）FRET发生条件：能量匹配：供体分子的发射光谱可以被受体分子吸收并产生荧光信号。
供体分子的发射光谱应与受体分子的激发光谱必须有显著重叠（>30%）；作用距离：供体分子与受体分子的作用距离为1-10nm；FRET效率公式：用于计算分子/基团间作用距离R偶极-偶极作用：供体分子与受体分子作用时的向量必须满足一定条件。
（2）FRET的应用：通过FRET技术可以获得有关两个蛋白分子之间相互作用的空间信息（作用距离、作用方向、能量传递效率）。
电化学发光法检测血清人附睾蛋白4联合糖类抗原125对卵巢癌的诊断价值
电化学发光法检测血清人附睾蛋白4联合糖类抗原125对卵巢癌的诊断价值杨飞丹;赵娜【期刊名称】《实验与检验医学》【年(卷),期】2017(35)5【摘要】目的评估血清人附睾蛋白(HE)4联合糖类抗原CA125检测对卵巢癌的诊断价值.方法收集于我院首次就诊并确诊卵巢癌患者(卵巢癌组)149例,卵巢良性患者患者(卵巢良性患者组)172例,以及健康妇女体检者(健康对照组)100例为对照组,采用电化学发光法测定各组血清中的HE4和CA125的中位数浓度用以评估作为卵巢癌诊断指标的临床价值,应用IBM SPSS Statistics 19软件对各组血清浓度中位数进行数据统计分析.结果血清HE4中位数水平,健康对照组与卵巢良性患者组间无差异(P=0.740)、与卵巢癌组间有差异(P=0.000),卵巢癌组与卵巢良性患者组有差异(P=0.000).HE4诊断卵巢癌ROC曲线下面积为0.864,P=0.000,以210pmol/L为临界点起敏感度和特异度分别为87.3%和86.1%;血清CA125中位数水平,健康对照组与卵巢良性患者组间有差异(P=0.000)、与卵巢癌组间有差异(P=0.000),卵巢癌组与卵巢良性患者组有差异(P=0.000),CA125诊断卵巢癌ROC 曲线下面积为0.832,(P=0.000),以60U/ml为临界点起敏感度和特异度分别为77.1%和82.9%;HE4 ROC曲线下面积、敏感度、特异度均大于CA125,HE4、CA125联合检测卵巢癌ROC曲线下面积、敏感度、特异度均大于二者单独检测.结论 HE4+CA125联合检测卵巢癌比HE4、CA125单独检测对早期卵巢癌的诊断价值更高.【总页数】3页(P774-776)【作者】杨飞丹;赵娜【作者单位】荥阳市人民医院检验科,河南荥阳 450199;荥阳市人民医院检验科,河南荥阳 450199【正文语种】中文【中图分类】R446.62;R711.75【相关文献】1.血清人附睾蛋白4联合糖类抗原125检测对浆液性卵巢癌的诊断价值2.血清中人附睾蛋白4和糖类抗原125联合检测对卵巢癌的诊断价值3.糖类抗原125、糖类抗原15-3、糖类抗原19-9和人附睾蛋白4单独及联合检测对卵巢癌的诊断价值4.血清癌胚抗原人附睾蛋白4糖类抗原125糖类抗原199单独和联合检测在卵巢癌中的诊断价值5.血清糖类抗原19-9、糖类抗原125和人附睾蛋白4水平检测对老年卵巢癌患者的诊断和鉴别诊断价值因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
激酶检测方法的最新研究进展
激酶检测方法的最新研究进展刘杨;邹笑然;李琛琛;张春阳【摘要】Kinases are a class of enZymes that catalyZe the transfer of a phosphate group from a high-energy molecule to their substrates ( i.e., phosphorylation ).Kinase-induced intracellular phosphorylation plays important roles in a variety of cellular processes including metabolism, cell signaling, protein regulation, DNA replication and repair.Consequently, kinases have become potential biomarkers for disease diagnosis and drug discovery, and the development of simple and sensitive methods for kinase assay is highly desirable.In this review, we summariZe the recent advances in kinase assays with protein kinase A (PKA), casein kinase-2( CKⅡ) and T4 polynucleotide kinase ( T4 PNK) as the models.We focus on the newly emerging methods for kinase assays including fluorescent, single-molecule detection, colorimetric, chemiluminescent, bioluminescent, and electrochemical and photoelectrochemical methods.Furthermore, we give a new insight into the future direction of kinase assays.%激酶是生物体内一类重要的磷酸转移酶,能够催化磷酸基团由高能磷酸基团供体分子(如ATP)向特定底物分子转移.激酶不但在新陈代谢、细胞信号传导、蛋白质调控、细胞传输等过程中起着关键作用,而且在临床诊断、药物研发及疾病靶向治疗等方面也发挥着重要作用.因此,发展灵敏度高、特异性好的激酶检测方法十分必要.本文以蛋白激酶A(Protein kinase A,PKA)、酪蛋白激酶(Casein kinase-2,CKⅡ)、T4多核苷酸激酶(T4 polynucleotide kinase,T4 PNK)为例,对近年来发展的激酶检测方法进行了综述,着重介绍了荧光分析法、单分子检测、比色法、化学发光和生物发光分析法、电化学和光电化学分析法,并对激酶检测方法的发展方向进行了展望.【期刊名称】《分析化学》【年(卷),期】2018(046)001【总页数】9页(P11-19)【关键词】激酶;灵敏检测;分析方法;评述【作者】刘杨;邹笑然;李琛琛;张春阳【作者单位】山东师范大学化学化工与材料科学学院,济南250014;山东师范大学化学化工与材料科学学院,济南250014;山东师范大学化学化工与材料科学学院,济南250014;山东师范大学化学化工与材料科学学院,济南250014【正文语种】中文激酶(Kinase)是生物体内一类催化磷酸基团由高能磷酸基团供体分子(如ATP)向特定底物分子转移的酶，其催化的磷酸基团转移过程亦称磷酸化。
双功能石墨烯量子点的制备及在pH荧光检测和细胞成像中的应用
双功能石墨烯量子点的制备及在pH荧光检测和细胞成像中的应用严平;李在均【摘要】为改善石墨烯量子点的光学性质,设计并合成了五乙烯六胺和十二胺功能化石墨烯量子点(PEHA-GQD-DA).将柠檬酸和五乙烯六胺混合,170℃热解0.5 h 后加入十二胺,继续反应1.5 h得到PEHA-GQD-DA.PEHA-GQD-DA由尺寸仅为1~3 nm的石墨烯片组成,片边缘含有丰富的功能基团.五乙烯六胺的引入显著提高了量子点的荧光发射,荧光量子产率达到72.7%,明显高于单独柠檬酸热解所制备的石墨烯量子点.引入十二胺,使PEHA-GQD-DA容易通过细胞膜磷脂双分子层进入到细胞内部.PEHA-GQD-DA对环境pH值表现出极佳的光学响应行为.在pH 1.0 ~6.5时,荧光强度随pH值增加而线性增强.随pH值的变化,荧光光谱也发生改变,最大发射波长与pH值之间存在良好的线性关系.在pH 6.5~12.0时,荧光光谱不再随pH值变化而变化,但荧光强度随pH值增大而线性减少.常见无机离子和小分子化合物不影响PEHA-GQD-DA对pH值的荧光响应.PEHA-GQD-DA已成功应用于环境水样pH值的荧光检测和Hela细胞成像.%Functional groups may change the electrical characteristics of graphene quantum dots,thus leading to the improvement of their properties and related applications. To improve the optical properties,we designed and synthesized pentaethylene hexamine and dodecylamine functionalized graphene quantum dots (PEHA-GQD-DA). Citric acid was mixed with pentaethylene hexamine and heated at 170℃ for 0.5 h. Then dodecylamine was added and the reaction was continued at 160℃ for 1.5 h to obtain PEHA-GQD-DA. The Yesults revealed that the PEHA-GQD-DA was composed of the graphene sheetsfrom 1 nm to 3 nm,and their edges contained abundant functional groups. The introduction of pentaethylene hexamine greatly improved the fluorescence emission. The fluorescence quantum yield reached72.7%,which was much higher than that of the GQD prepared by the thermal hydrolysis of single citric acid. The introduction of dodecylamine created a special amphiphilic structure that allows the quantum dots more likely to enter cell through the phospholipid bilayer of cell membrane. The PEHA-GQD-DA exhibited an excellent optical behavior for pH value of the medium. Within pH range of 1.0-6.5, the fluorescence intensity increased with the increase of pH value. The fluorescence spectrum sensitively changed with the change of pH value. There was a good linear relationship between the maximum emission wavelength and the pH value. When the pH was in the range of 6.5-12.0,the fluorescence spectrum didn't change with the change of pH value. However, its fluorescence intensity linearly decreased with the increase of pH value. The existence of common inorganic ions and organic small molecules does not interfere with pH response of the quantum dots. The PEHA-GQD-DA has been successfully applied to fluorescent detection of pH value in water samples and Hela cell imaging.【期刊名称】《分析化学》【年(卷),期】2018(046)005【总页数】8页(P670-677)【关键词】双功能石墨烯量子点;光学性能;pH探针;生物成像【作者】严平;李在均【作者单位】江南大学化学与材料工程学院,无锡214122;江南大学化学与材料工程学院,无锡214122【正文语种】中文1 引言pH值对细胞代谢、增殖、吞噬作用、离子转运、信号转导、凋亡等生命过程影响都有一定影响[1]。
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发光
P+hv
A为反应物，P*为产物P的激发态，v为化学发光的频 率，h为普朗克常量。
化学发光分析法的类型
1、直接化学发光和间接化学发光 2、气相化学发光 3、液相化学发光
液相化学发光
液相化学发光是在溶液中进行的化学发光反
应，该反应需要发光物质，常用的有鲁米诺、光
泽精、等，此外还需要合适的氧化剂和催化剂。
液相化学发光不需要外在的激发光源，消除了
背景荧光的干扰信号，降低信噪比。
鲁米诺+H2O2 产物+hv
CA-125：是在人体中的一种生物 分子与它的含量与卵巢癌有关。正常 情况下含量不大于35U/mL。 检测CA-125方法： 利用化学发光 共振能量传递到石墨烯量子点来检测 CA-125的含量。 优点：有很宽的线性范0.1U/mL600U/mL。
化学发光分析法
化学发光：由化学反应提供的能量激 发物质所产生的辐射。
用化学发光共振能量传递到 石墨烯量子点来检测卵巢癌 生物标记CA-125
Detection of the ovarian cancer biomarker CA-125 using chemiluminescence resonance energy transfer to graphene quantum dots