液质联用检测人体血浆中的阿奇霉素
液质联用检测人体血浆中的阿奇霉素
技术，这主要由于阿奇霉素自身结构中缺少共轭体系，造成
紫外吸收能力较弱，且该方法在进行浓度测定中往往存在较
多的杂质干扰、波长较短等缺陷，且阿奇霉素的留存时间也
相对较长（ 可达到 １１ｍｉｎ） ，难以开展后续生物样品的分析工
作；电化学法和生物法的浓度测定则具备准确性不高、灵敏
准确灵敏、高效简洁的应用优势，对于人体血样阿奇霉素浓度含量测定具有明显的促进优化作用。
关键词：液质联用技术；ＬＣ－ＭＳ；阿奇霉素
一、 引言
作为基本的 １５ 元环大环内酯抗生素类物质，阿奇霉素
表现具备口服吸收性良好、酸性条件下性能稳定、抗菌性能
优异、组织选择性集中等优点，对于阿奇霉素人体血浆浓度
测定的研究，已经得到了国内外药学机构的重点关注。 对于
当日的标准曲线，计算质控样品的浓度，并计算日内精密度
和日间精密度，日内 ＲＳＤ％ 范围为－ ６．５６ ～ ９．８３，日间 ＲＳＤ％
范围为－３．５０ ～ ０．８５。
取阿奇霉素对照品系列溶液，按“ 血浆样品处理” 项下
的方法制备低、中、高三个浓度（ 阿奇霉素 ６．００，３００，８００ ｎｇ ／
ｍＬ） 的质量控制血浆样品各 ６ 份，按 “ 血浆样品处理” 项下
融 ５ 次，血浆样品最长可在－２０℃ 、－８０℃ 条件下放置 １０９ 天。
四、 结语
本实验中选用同位素阿奇霉素－ｄ３ 为内标，待测药物阿
奇霉素和内标阿奇霉素－ｄ３ 峰形均良好，且二者保留时间相
近，也不存在相互干扰。
研究显示，阿奇霉素在酸性环境中较为稳定。 流动相加
入 ０．１％ 甲酸后将促进待测物的质子化。 故最终选用 ０．１％
阿奇霉素的含量及有关物质的HPLC方法学研究
37 Journal of China Prescription Drug Vol.19 No.3·实验研究·阿奇霉素是大环内酯类抗生素之一，属于抗菌药物，能够针对很多敏感细菌引起的感染进行治疗，在医院许多科室都会用到该药物，对各种气管和肺部炎症，以及对皮肤和软组织的感染等都具有良好的治疗效果，但需要根据患者的病情需要，来循证地选择药物进行治疗。
阿奇霉素的作用机制是通过和50 s核糖体亚单位结合阻碍细菌转肽过程，从而抑制细菌蛋白质的合成。
HPLC是高效液相色谱，根据研究资料显示，该方法适宜于分离、分析高沸点、热稳定性差、有生理活性及相对分子量比较大的物质，目前被广泛应用于核酸、肽类、内酯、高聚物、人体代谢产物、表面活性剂，抗氧化剂、杀虫剂、除锈剂的分析等的临床分析[1]。
本次研究通过对阿奇霉素样品实施HPLC方法学对其含量及有关物质进行检测，分析该研究方法的实际效果，现报告如下。
1 资料与方法1.1 检测项目该研究的色谱柱为Agilent C8柱，柱温设置成40℃，检测波长设置成254 nm，流动相是调制成pH7.0左右的0.5 mol/L磷酸二氢铵溶液-乙腈，流速设置成1 ml/min，进样量设置成10μl，借助外标面积法对阿奇霉素的含量进行计算[2]。
1.2药物与设备阿奇霉素原料药由武汉金方欣恒科技有限公司提供，本次研究的设备为医院最新的高效液相色谱仪，VWD紫外检测器，乙腈为色谱纯，磷酸二氢铵溶液为分析纯。
1.3 检测溶液供试品溶液（含量测定）：用适量的阿奇霉素供试品与流动相溶解充分稀释后，形成含量为1 mg/1 ml的溶液；对照品溶液（含量测定）：用适量的阿奇霉素对照品与流动相溶解充分稀释后，形成含量为1 mg/1 ml的溶液；供试品溶液（有关物质测定）：用适量的阿奇霉素供试品与流动相溶解充分稀释后，形成含量为2 mg/1 ml的溶液；对照品溶液（有关物质测定）：取1 ml有关物质测定的供试品溶液，放置在100 ml的容量瓶中，与流动相溶解充分稀释至刻度；检测波长的选择：选择254 nm 作为检测波长[3]。
液质联用技术对保健品中添加西药成分的检测
天津中医药大学中药学院2005级本科生毕业论文液质联用技术对保健品中添加西药成分的检测专业：中药学姓名：彭友明指导教师：朱小兰天津中医药大学2009年6月液质联用技术对保健品中添加西药成分的检测中药学院2005级中药学2班彭友明指导教师朱小兰工程师摘要摘要目的:建立LC-MS/MS甄别保健品中可能添加的西药成分的方法。
方法：采用C18色谱柱，梯度洗脱：流动相A为乙腈溶液，流动相B为水（含0.2%甲酸，5mmol醋酸铵），波长扫描范围为220-340m，流速为1mL/min。
选择正负离子同时扫描方式检测。
结果：通过分子量、质谱碎片信息和在液相色谱上的保留特征,初步判断保健品里掺有的西药成分双氯芬酸钠和布洛芬，通过与对照品的分析对比进行了确证，并对其含量进行了测定。
结论：该方法选择性强,灵敏度高,可作为分析检测在保健品中添加西药成分的有效方法。
关键词:保健品；双氯芬酸纳；布洛芬；LC-MS/MSIdentification and Determination of Illegal Medicament Added in Health Care Productsby LC-MS/MSAbstract Objective: To develop a high performance liquid chromatography - electro-spray mass spectrometry method for identifying illegally adulterated in Health Care Products. Methods: A C l8 column was used with the mobile phase acetonitrile and water（contains 0.2％formic acid and 5mmol Ammonium acetate）by gradient elution, the detection wavelength was 220-340nm, the flow rate was l mL/min. Electro-spray ionization (ESI) source was applied and operated in the positive and negative ion mode. Results: Using the method, two compounds - Diclofenac Sodium and Ibuprofen had been detected. Also their content had been determined. Conclusion: The method is accurate, simple and sensitive, and it can be used for determination the illegal medicament which added in Health Care Products.Keywords :Health Care Products; Diclofenac Sodium; Ibuprofen; LC-MS/MS绪言 (1)液质联用技术对保健品中添加西药成分的检测1材料与方法 (2)1.1 仪器和试剂 (2)1.2 色谱条件 (2)1.3 质谱条件 (2)1.4 标准溶液的配制 (3)1.5 样品处理 (3)2结果 (4)2.1 药物组分的确认 (4)2.2 提取工艺的优化 (8)2.3 线性实验 (9)2.4 精密度实验 (10)2.5 回收率实验 (11)2.6 药物含量测定 (12)3讨论 (13)4结论 (16)参考文献 (17)综述 (18)参考文献 (22)译文 (23)英文原文 (27)致谢 (33)近年来，随着社会消费水平的不断提高，保健品市场日益兴旺。
高效液相色谱法测定阿奇霉素片的含量
高效液相色谱法测定阿奇霉素片的含量摘要】目的：结合组高效液相色谱检测方法来对阿奇霉素药品的有效成分的含量进行分析。
方法：应用CLC-CN检测法来实现固定检测需要，选用0.1mol/L规格的磷酸二氢钾与乙腈、甲醛混合溶剂作为本次成分测定实验的流动相，将该流动相放置在酸碱度为2-25的溶液之中，确定溶液每分钟的固定流速，对柱的基本温度以及紫外检测波加以控制，在预定灵敏度之下对待测药品加以测定，最后通过验证工作对成分测定结果进行检验。
结果：在含量测定研究活动之中，确保药品的成分中的其他杂质与待测成分分离，在100mg/L到1000mg/L的线性范围之中，峰面积与药品浓度具有比较好的线性关系。
药品回收率高达100.3%。
结论：本次阿奇霉素药品成分测定实验选用的测定方法比较容易实现，可以实现高速测定的需求，其重新性与灵敏性也比较好。
【关键词】高效液相色谱法；测定实验；阿奇霉素片；成分含量阿奇霉素片属于常规抗生素药物之一，与一般的抗生素相比，阿奇霉素片的特殊之处在于其属于半合成类型的大环内酯药品，阿奇霉素片的药用价值比较高，不仅仅在西方国家的药店之中有所记载，在我国的药店之中也有所体现，其能够对受到敏感细菌影响而形成的疾病起到一定的治疗效果，常被用于治疗下呼吸道感染、支气管炎以及急性中耳炎等疾病。
随着对阿奇霉素药品的研究逐渐深入，医疗人员还对其治疗风湿类疾病的功能进行了扩展，阿奇霉素对于多种感染细菌具有极好的消除效果，对于合并感染情况也能够起到一定的影响效果。
在制备阿奇霉素片时，制备人员要确保阿奇霉素这种有效成分的含量，本文对有效的测定方法进行研究。
1 材料与方法1.1 一般材料高效液相色谱仪，包括LC-10Avp高压泵，SPD-10Avp紫外检测器，DGU-12A在线脱气机，CTO-6A柱恒温箱，C-R3A色谱积分仪；阿奇霉素标准品(批号980615，每1mg的效价为918U 的阿奇霉素，即为98.00%)；注射用门冬氨酸阿奇霉素冻干粉剂(批号20001209)；注射用硫酸阿奇霉素冻干粉剂(浙江尖峰药业有限公司，批号020508)；甲醇及乙腈均为色谱纯，磷酸二氢钠为分析纯，水为纯化水。
LC-MS/MS法测定健康人体血浆中阿齐沙坦的浓度及在药代动力学研究中的初探
Determination of azilsartan in healthy human plasma by liquid chromatography-tandem mass spectrometry and its preliminary study on pharmacokinetics*
药 物 分 析 杂 志 Chin J Pharm Anal 2017,37(4)
代谢分析
·7 3 7·
LC-MS/MS 法测定健康人体血浆中阿齐沙坦的 浓度及在药代动力学研究中的初探 *
曹聪 1，2，郑运亮 2，胡兴江 2，刘健 2，吴国兰 2，申屠建中 1，2**
（1. 浙江大学医学院，杭州 310058；2. 浙江大学医学院附属第一医院临床药学研点项目（2011ZX09401003-003） ** 通信作者 Tel： （0571）87236560；E-mail：stjz@ 第一作者 Tel：18072727152；E-mail：caocong214@
摘要 目的：为临床研究阿齐沙坦人体药动学建立一种高效、专一的液相色谱 - 串联质谱（LC-MS/MS）方 法，并将其应用于阿齐沙坦在中国健康人群药动学研究。方法：含阿齐沙坦血浆样本与内标混合后经乙腈 处理，以含 5 mmol·L-1 甲酸铵溶液 - 乙腈为流动相，SB-Aq 色谱柱（3.0 mm×100 mm，3.5 μm）为分析柱， 采用 API 4000 型液质联用系统，流速 0.6 mL·min-1，室温下测定；采用负离子模式，MRM 扫描，阿齐沙坦 m/z 455.2 → 411.2 和内标奥美拉唑 m/z 344.1 → 193.9。9 例健康受试者口服 40 mg 阿齐沙坦片，于不同时 间点分别采集静脉血进行药代动力学分析。结果：阿齐沙坦和内标的保留时间分别为 4.17 和 4.77 min，标 准曲线在 0.01~10.0 mg·mL-1 范围内线性良好（r=0.998 6±0.000 9），最低定量限 10 ng·mL-1，日内、日间批 间差异均小于 12%，准确度在 89.2%~110.2%，回收率在 83.2%~96.2% 之间，所有的稳定性考察项目均符合 要求。药动学结果显示，健康受试者口服阿齐沙坦片 40 mg 后，阿齐沙坦在人体内平均达峰时间 tmax=2.22 h，平均半衰期 t1/2=10.15 h。结论：本测定方法适用于阿齐沙坦的药动学研究和血药浓度监测。 关键词：阿齐沙坦；血管紧张素受体拮抗剂；阿齐沙坦酯；前体药物；奥美拉唑；血浆药物浓度分析；药代动 力学；液相色谱质谱联用
反相高效液相色谱荧光检测法测定血浆及膀胱中阿霉素的浓度
011
012383 ±0102
6192
014 018875 ±01004 4139
110 119384 ±01009 4140
日间
A s/ Ai ( x ±s) RSD ( %) 012476 ±01002 7140 018881 ±0104 4192 119645 ±0110 5127
314 回收率测定
血浆样品预处理 离心试管加入肝素抗凝血浆
110 ml ,精密加入 10μg·ml - 1内标溶液 20μl ,混匀 , 加二氯甲烷2异丙醇 (9∶1) 5 ml ,涡旋混匀 2 min ,4000 r·min - 1离心 15 min ,取 4 ml 有机层于 40 ℃水浴挥 干 ,残渣用甲醇 50μl 溶解 ,取 20μl ,作 HPLC 测定 。
ZHANG Hong2wen , QIAN Li2xin , WANG Wei2qing , QIAN Jing ,Ou Ning , SHAO Zhi2gao
The First Affiliated Hospital with Nanjing Medical University ( Nanjing 210029 , China)
Y = 010038 + 010854 X ( r = 019982 , n = 5) 。 313 精密度试验
按“312”项方法配制 300 、100 、20 ng·ml - 1高 、中 、 低 3 种浓度的含药血浆 ,按“血浆样品预处理”项下 步骤作 1 天内和连续 5 天的测定 ,记录峰面积 。结
江苏药学与临床研究 2006 年第 14 卷第 1 期
反相高效液相色谱荧光检测法测定血浆及膀胱中阿霉素的浓度
张宏文 Ξ 钱立新 王蔚青 钱 靖 欧 宁 邵志高
液质联用法测定人血浆中罗红霉素及其生物等效性研究
液质联用法测定人血浆中罗红霉素及其生物等效性研究冯婉玉，徐冬辉，刘婷立（中国医科大学附属第一医院临床药理教研室，辽宁沈阳１１０００１）［摘要］目的：建立人血浆中罗红霉素高效液相色谱－质谱联用测定法（ＨＰＬＣ－ＭＳ），研究罗红霉素胶囊的生物等效性。
方法：采用双交叉试验设计，血样用乙酸乙酯－异丙醇（９５：５）混合液提取，ＨＰＬＣ－ＭＳ分离测定，根据血药浓度－时间数据估算主要药动学参数和相对生物利用度，评价生物等效性。
结果：罗红霉素两制剂的ｔ１／２分别为（９．２±３．７）和（９．３±４．０）ｈ，Ｔｍａｘ分别为（２．１±０．６）和（２．１±０．８）ｈ，Ｃｍａｘ分别为（１１８２３．０±３１５７．０）和（１１８５６．０±２９７０．０）ｎｇ／ｍｌ，ＡＵＣ０－ｔ分别为（１４８８００．０±４２３１２．０）和（１３６４４３．０±３９６５３．０）ｎｇ·ｈ／ｍｌ。
ＡＵＣ０－∞分别为（１６２８０８．０±４８９７７．０）和（１４９６５０．０±４８０７７．０）ｎｇ·ｈ／ｍｌ。
受试制剂的相对生物利用度为（１１１．２±２２．９）％。
受试制剂ＡＵＣ０－ｔ和Ｃｍａｘ的９０％置信区间为参比制剂相应参数的１００．９％￣１１７．８％和９１．３％￣１０７．４％，符合生物等效性指导原则。
结论：本法简便，灵敏准确。
罗红霉素两制剂生物等效。
［关键词］罗红霉素；高效液相色谱－质谱联用；生物等效性［中图分类号］Ｒ９６９．１［文献标识码］Ａ［文章编号］０２５８－４６４６（２００７）０４－０４２９－０３ＢｉｏｅｑｕｉｖａｌｅｎｃｅｏｆｒｏｘｉｔｈｒｏｍｙｃｉｎｉｎｈｕｍａｎｐｌａｓｍａｄｅｔｅｒｍｉｎｅｄｂｙＨＰＬＣ－ＭＳ罗红霉素（ｒｏｘｉｔｈｒｏｍｙｃｉｎ，ＲＭ）是红霉素Ａ的衍生物，具有对酸稳定、口服吸收好、生物利用度高、不良反应小、抗菌活性广等优点，其体外抗菌作用与红霉素类相似，体内抗菌作用比红霉素强１￣４倍［１］。
LC—MS／MS法测定大鼠血浆中阿霉素的药物浓度及应用
LC—MS／MS法测定大鼠血浆中阿霉素的药物浓度及应用目的建立液相色谱-串联质谱（LC-MS/MS）法测定大鼠血浆中阿霉素的血药浓度，并用于阿霉素载药纳米粒的体内药动学研究。
方法色谱柱采用Shim-pack XR-ODS柱（2.0 mm×100 mm，2.2 μm），仪器采用API 4000三重四极杆串联质谱仪，采用多反应监测（multiple reaction monitoring，MRM）定量离子对为m/z544.2→m/z396.9（阿霉素）和m/z357.3→m/z133.8（吡格列酮，内标）；甲醇沉淀蛋白法处理样品。
结果阿霉素在2.0～2000 μg/L范围内线性关系良好，定量下限为2.0 μg/L，血浆中的内源性物质不干扰阿霉素的测定；日内和日间精密度RSD均小于±15.0%；阿霉素低、中、高3个QC浓度的提取回收率分别为（92.1±5.9）%、（82.8±2.9）%和（80.1±9.7）%，基质效应分别为（91.1±2.4）%、（82.1±1.7）%和（81.2±2.5）%。
结论该方法适用于阿霉素纳米粒在大鼠体内的药物动力学研究。
标签：液相色谱-串联质谱；阿霉素；药动学研究；含量测定阿霉素主要通过嵌入DNA而抑制核酸的合成，产生细胞毒性作用，属周期非特异性药物，对各种生长周期的肿瘤细胞都有杀灭作用[1]。
由于心脏毒性较大，在实体瘤内部渗透性差，临床应用受到极大的限制[2-3]。
由于纳米给药系统具有靶向性、缓释性、降低药物毒性和提高药物稳定性等特点，阿霉素的纳米靶向传递是当前研究的热点[4-5]。
由于纳米制剂给药量小，需要建立灵敏、高效的体内药物浓度测定方法进行药动学研究。
目前，阿霉素的体内测定方法主要有HPLC-UV[6]、荧光光度法[7-8]、HPLC-FLU[9-12]和液相色谱-串联质谱（LC-MS/MS）[13-15]等方法，以荧光检测方法为主，液相-质谱联用法报道较少。
高效液相色谱-质谱联用法测定人体内阿奇霉素血药浓度
：８ ， ｐ Ｈ调节 至 ６ ． ０ ） ， 流速 １ ｍ ｌ ／ ｍ ｉ ｎ， 控制柱温为 ４ ０ ￣ Ｃ， 检测 波长为 ２ １ ０ ｎ ｍ， 定量方法 为峰 面积外标 法。结 果 阿奇 霉
素血 药浓度 线性 范围在 ０ ． １ — ４ ． ０ ｔ Ｌ ｇ ／ ｍ ｌ ， ｒ＝ ０ ． ９ ９ ９ ８ ， 日内精 密度 １ ． ２ ５％ 一 ４ ． ４ １ ％， 日间精密度 ２ ． ７ ９ ％～ ６ ． ８ ３ ％ 。结论
ｓ ｅ ｒ ｕ ｍ．Ｍｅ ￣ｏ ｄ ｓ Ａ ｍ ｏ ｂ ｉ ｌ ｅ ｐ ｈ ａ ｓ ｅ ｏ ｆ Ｃ Ｌ Ｃ—Ｃ Ｎ（ ２ ５ ０ ｍｍ × ４ ． ６ ｍ ｍ， ５ Ｉ ｘ ｍ） ， Ｎ ａ Ｈ ２ Ｐ ０ ４ ｍ ｅ ｔ ｈ ｙ ｌ ａ ｌ ｃ ｏ ｈ ｏ ｌ ａ ｃ ｅ ｔ ｏ ｎ ｉ ｔ ｒ ｉ ｌ ｅ（ ８ ５ ：７ ：８ ） ，Ｃ Ｌ Ｃ—Ｃ Ｎ ｃ ｏ ｌ ｕ ｍｎ（ １ ５ ０ ｍｍ ×６ １ ０ ｍｍ Ｉ Ｄ， ５ ｍ）ａ ｎ ｄ ｃ ｏ ｌ ｕ ｍｎ ｔ ｅ ｍ ｐ ｅ ｒ ａ ｔ ｕ ｒ ｅ ａ ｔ ４ ０ ｏ Ｃ ｗ ｉ ｈ ｔ ｕ ｌ ｔ ｒ ａ ｖ ｉ ｏ ｌ ｅ ｔ ｄ ｅ ｔ ｅ ｃ ｔ ｉ ｖ ｅ ｗ ａ ｖ ｅ ｌ ｅ ｎ ｇ ｔ ｈ ｏ ｆ ２ １ ０ ａ ｍ ａ ｎ ｄ ａ ｌ ｆ ｏ ｗ ｒ ａ ｔ ｅ ｏ ｆ １ ｍ ｌ ／ ｍｉ ｎ ｗ ｅ ｌ ＇ ￣ａ ｐ ｐ ｌ ｉ ｅ ｄ ｆ ｏ ｒ ｔ ｈ ｉ ｓ ｄ ｅ ｔ ｅ ｍｉ ｒ ｎ ａ ｔ ｉ ｏ ｎ ．Ａ ｚ ｉ ｈｒ ｔ ｏ ｍ ｙ ｃ ｉ ｎ ｉ ｎ ｓ ｅ ｒ ｕ ｍ ｗ ａ ｓ ｅ ｘ ｔ ｒ ａ ｃ ｔ ｅ ｄ ｗ ｉ ｔ ｈ ｃ ｈ ｌ ｏ ｒ ｏ ｆ ｏ ｒ ｍ ２ １ ａ ２ ｈ ｅ ｘ ａ ｎ ｅ（ ３ ： ２）Ｒｅ ｓ ｕ ｌ ｔ ｓ Ｔ ｈ ｅ ｌ ｉ ｎ ｅ ａ ｒ ｒ ａ ｎ ｇ ｅ ｗ ａ ｓ
高效液相色谱-质谱联用法测定血浆中阿奇霉素浓度：
（ｏ ｔｉ ｎ ． ％ ａ ｅ ｔ ａ ｉ ） ｅ ａ ｏ （ ５： ５ ａ ｄ ｔｅ ｓｌ ｔ ｒ ｍ ｎ ｏ ｓ ｆ ｅｅｔ ｎ Ｔ ｅ ｈ ａ ｈ ｏ ｎ ｅｓ ｏａ ｙ ｔ ｋ ｃ ｎａ ｉｇ ０ １ ｎ ｃ ｔ ｅ ｃ 一ｍ ｔ ｎ ｌ ３ ６ ） ｎ ｈ ｅｅ ｅ ｆ ｇ ｅ ｔ ｉ ｏ ｄ ｔｃ ｏ ． ｈ ｅ ｌ ｙ ｖ ｌ ｔ ｒ ｒｌ ｏ ａ ｄ ｈ ｃｄ ａ ｎ ｒ ｉ ｔ ｕ ｅ ｌ ｏ
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液质联用技术检测保健食品、中成药中非法添加化学药物
液质联用技术检测保健食品、中成药中非法添加化学药物【摘要】本文综述了近年来保健食品、中成药中非法添加化学药物的主要检测方法液-质联用法。
【关键词】保健食品；中成药；化学药；非法添加镇静安眠类、降糖类、抗风湿类、补肾类、平喘类等保健食品、中成药中违规添加化学药物的情况时有报道。
检测方法主要检测方法有化学反应法、薄层色谱法、紫外分光光度法，红外光谱鉴别法、高效液相色谱法，液-质联用、毛细管电泳一质谱分析方法、毛细管区带电泳一电化学检测法等。
为了能查出“添加剂”真正成分，现在药检所采用了标准以外的部分补充检验方法。
现就检测保健食品、中成药中非法添加化学药物应用最广泛的液-质联技术进行综述。
1 液相色谱一质谱／串联质谱联用在非法添加方面展示了应用前景是以HPLC为分离手段，MS为检测器的一门综合性分析技术，在药物分析研究中得到广泛应用。
张翠英, 李振国, 徐仅铃［1］用HPLC-MS法测定止咳平喘制剂中非法添加茶碱、醋酸泼尼松、醋酸地塞米松。
通过比较样品的质谱图和对照品质谱图，得出多批次样品被检出含茶碱、醋酸泼尼松、醋酸地塞米松。
2 由于保健食品的成分更加复杂，应用液质联用技术可达到快速准确的分析王柯，胡青，崔益泠，季申［2］建立检测减肥类中药及保健食品中28种非法添加药物的专属性方法：样品经甲醇提取，采用液相色谱-离子阱质谱联用法测定。
色谱条件：Agilent ZORBAX SB-C 18(2.1 mm×150 mm，5μm)，柱温30℃,28种化合物分为7个液相系统，分别以不同比例的0.5%甲酸溶液-乙腈或0.5%甲酸溶液-甲醇进行梯度洗脱；质谱条件：离子源ESI，雾化气压力2.07×105 Pa，干燥气流速8 L/min，干燥气温度350℃，自动扫描模式。
通过与标准谱库中保留时间和多级质谱图的双重对比，对样品中非法掺加的药物进行定性鉴别。
结果：在1000批供试品中，分别检测到芬氟拉明、咖啡因、西布曲明及其2个衍生物、番泻苷A、番泻苷B、酚酞和二甲双胍。
液质联用技术与酶放大免疫法检测血浆地高辛浓度的两种方法比较
地高辛（digoxin ，DIG ）是毛地黄属植物中提取的洋地黄类强心药，临床应用已有百年历史，是治疗心力衰竭较为经典的药物，是当代医学最早用于治疗心血管疾病的药物之一[1]。
由于DIG药理作用广泛，具有治疗窗狭窄、安全范围较小和个体差异大的特点，因此，进行治疗药物浓度监测（TDM ），为临床医生提供准确数据，预防中毒、调整给药方案、维持有效血药浓度、提高疗效十分重要[2]。
目前，监测地高辛浓度的方法有微粒子酶联免疫（microparticle enzyme immunoassay ，MEIA ）法、酶放大免疫（enzyme-multiplied immunoassay technique ，EMIT ）法、放射免疫测定（radioim -munoassay ，RIA ）法、荧光免疫测定（fluorescent immunoassay ，FIA ）法、化学发光免疫法（chemilu-minescent immunoassay ，CLIA ）、高效液相（high performance liquid chromatography ，HPLC ）法和高效液相-串联质谱（high performance liquid chro-matography-tandem mass spectrometry ，HPLC-MS/MS ）法等[3]。
由于分析方法间的差异以及分析体系的不同，相同样本待测组分的测定结果有较大差异。
大多数情况下，这种差别对临床判断影响较小，但如果血药浓度监测值在临界值附近时，对临床进行个体化治疗带来问题[4]。
因此，本研究建立HPLC -MS/MS 测定地高辛血药浓度的方法，并与目前临床采用的免疫学原理检测方法进行比较。
1材料与试剂1.1仪器API4000液相色谱-串联质谱仪购自美国Applied Biosystems 公司，Analyst 1.5.1分析操作软件、生化分析仪、Centrifuge 5804R 离心机购自德国Eppendorf 公司；电子天平购自Mettler 托利多仪器有限公司；XW-80A 涡旋器购自姜堰康健医疗器具有限公司；Million-Q 纯水发生仪购自美国milli-Q 公司。
液质联用检测人体血浆中的氯卡色林
液质联用检测人体血浆中的氯卡色林1.摘要采用HPLC法进行人体血浆中的氯卡色林浓度测定。
方法:Agilent EC-C18 4.6*50mm2.7 m色谱柱，水相：0.1% 甲酸水溶液，有机相：乙腈：甲醇（1：1）（含0.1% 甲酸），流速0.6mL/min，柱温为25℃。
实验用样品则需要进行乙腈提取进样，监测模式为SRM，进行内标法定量分析（氯卡色林中间体IV为内标）。
结果：氯卡色林的线性定量范围为 0.100 ng/mL~50.0ng/mL,高、中、低 3 个浓度质控样品的平均提取回收率为 90.73%、89.66%、87.42%，内标平均提取回收率为 94.77%。
结论：本方法对于测定人血浆中氯卡色林浓度的可靠性。
2.关键词氯卡色林；肥胖；LC-MS /MS；血浆浓度3.引言与既往研发上市的5羟色胺受体的激动剂相比，氯卡色林选择性针对5-HT2C受体，亲和力分别是5-HT2A和5-HT2B受体的15倍和100倍。
在临床使用的治疗浓度下，避免了激动5-HT2A和5-HT2B受体带来的潜在不良反应。
在既往临床试验中已经确认氯卡色林具有良好的减肥作用，而对心脏瓣膜和肺动脉压力没有影响。
与别的减肥药不同，氯卡色林在减肥的同时，还能改善心率压、降低低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)水平以及降低糖尿病患者的糖化血红蛋白水平。
CAMELLIA-TIMI 61研究评估其长期用药的心血管安全性，并评估在患有心血管疾病或患有心血管高危的2型糖尿病（T2DM）的超重或肥胖的成年人中主要不良心血管事件（MACE）的发生率。
即长期使用Belviq®治疗不会增加MACE的发生率。
MACE定义为心血管疾病导致的死亡、非致命性心肌梗死、非致命性中风，在心血管事件高危的超重和肥胖患者中的发生率。
氯卡色林通过选择性激活下丘脑上具有抑制食欲作用的阿片黑皮质素前体神经元上的5-羟色胺2C（5-HT2C）受体，使患者减少食物消耗，提高饱腹感。
液质联用串联质谱法测定人血浆中达托霉素浓度_张文静
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研 究 方 向 临 床药 学
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达 托霉 素
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２２ 色谱 条 件 的 选 择 及 优 化 ．
１ ． 准 品 将 ３ｍｇ阿 奇霉 素依 次 配 制 成 ７ ００ 、７ ． ． １标 ２ ５ ．０ ３ ５０ ０、 １７５ 、３７ 、６８ ８ ．０ ９ ．５ ４ ．８和 ２ ． ｇｍ 溶 液 。 称 取 ２ｍ ３４ ｎ ／ ｌ ４ ｇ红霉 素
［］ 张 菁 ， 蓓 宁 ， 婴 元 ． ２ 郭 张 阿奇 霉 素 ｌ 药 代 动 力 学 研 究 册． 国 ｌ 药 临床 中 临床 理 学 杂 志 ，９ ６ １ （）８ — ２ １９ ，２２：９ ９ ．
③精密度实验 ： 对浓度为 ４６ 、７ ０和３０ ０．／］ ． ３． ９ ５ ０ ． ｇ 的阿奇 ０ ｍ
素对照 品（ 中国药 品生 物制 品检定 所）甲醇 、 ； 乙腈 和 甲酸（ ｒ Ｍｅ－
ｃ ｋ公 司 ， 色谱 纯） 。
１ 实验 过 程 ． ２
文 献 显 示 ， Ｅ Ｉ 离 子 化 的方 式 下 ， 奇 霉 素易 与 内 在 Ｓ正 阿 标 红霉 素 生成 『 Ｈ］而选 择 反应 检Ｎ （Ｒ 模 式 可有 效 防止 Ｍ＋ ， Ｓ Ｍ） 诸 多 外界 因素 对 检测 结 果 的干 扰 ，从 而保 证 实验 结 果 的准 确 。因此 ， 研究 选 取 了正离 子 检测 模式 和 Ｓ 本 ＲＭ模 式 。由于 碎 片离 子 ５ １１ ９ ．６的强 度 比其 他 碎 片高 ．故选 用 此 碎 片离 子
平． 现将 结果 报道 如下 ：
１实 验
１１仪 器 与 试 剂 ．
品 ， 算低 、 、 ３个 浓度 的提 取 回收 率 为 ９ ．３ ９ ．２ 。 计 中 高 ４１％－ ７４ ％
⑤稳定性实验 ： 取浓度为 ４ ９ ３． 、０ ． ｇ ］ ． 、７ ０ ３０ ０ｎ／ 的阿奇霉 ６ ５ ０ ｍ
ＣＨＩＡ ＭＯＤＥ Ｎ ＭＥ Ｉ ＮＥ 中 国 当代 医 药 Ｎ Ｒ ＤＣｌ
４ １
素样 本 ， 如前 步 骤 操 作 ， 察各 个 样 品在 室 温 、２ ℃冰箱 反 观 一０ 复冻 融 ３次和 长期 冷冻 三种 情 况下 的稳 定性 ， 果表 明各 样 结
品稳定 性 较好囡
２ 结 果 与 讨 论 ２１质 谱 条 件 的 选 择 及 优 化 ．
Ｆｎ ｉａ ｉｎｇｎ公 司 Ｌ — ／ ， Ｓ 离 子 源 ， 奇 霉 素 ， 霉 Ｃ ＭＳＭＳ Ｅ Ｉ 阿 红
后可裂 解为 ｍ ｚ ９ ． ／ １ ６和 ５ ６２ ５ １ ７ ．６的碎 片 。以此作 为定量 分析
已证 实 ， 用克 拉 霉素 作 内标 时可 能有 交叉 污染『 而 以 选 ３ １ 。 红霉 素 作 内标 时 ． 奇 霉素 和 红 霉素 峰 形 均较 好 、 留 时 间 阿 保 相似 。 在与 液一 液萃 取 和直接 蛋 白质 沉淀 法 比较 后 ， 两者 均显 示 出 良好 的线 性关 系 。 同时 ， 以甲醇 直接 沉 淀法 处理 血 浆样
（）１ １ １ ２ ３ ：８ — ８ ．
对 每一 浓度 进行 ３个 样本 分 析 ， 准 曲线为 ｌ （０ ４ ００ ３＋ 标 ， ０ ２ ￣ ．０ ） ＝． （． ６ ００ ４ ，＝ ．９ ～ ． ９ 线 性 范 围为 ２３ ～ ０ ． ｇ ｌ ０ ０ ￣ ．０ ）ｒ ０９ ７ ０９ ， ０ ９ ．４ ６ ０ ０．／ 。 ０ ｍ
（ 收稿 日期 ：０ ９ １— １ ２０ — ２ ２ ）
于 １％，符合要求。④ 回收率实验 ：取浓度为 ４６ 、７ ０ ０ ． ３． 、 ９ ５
３ ００ ｇｍｌ ０ ．０ｎ／ 的样 品 。 取空 白血 浆加 入标 准 溶液 和 内标 ． 制 配
阿奇 霉 素 低 、 、 ３个 浓 度 （．９ ３ ．０ ３ ００ ｇｒ ） 中 高 ４６ 、７５ 、０ ． ｎ／ａ 的样 ０ ，
品， 将更 适 于高 通量 生物 样 品分 析 ， 在本 研究 结 果 中亦 得到
证实。
的产物离子。取受试者 的空 白血浆 ， 分别加入 ２ ． ｇ 的标 ３ ４ｎ ｍｌ ４ 准溶 液 和 内标溶 液（．０ｇｍ１ １ ｌ取 受 试者 口服 给药 后 ０５ ／ ） ０ ； 各
血浆样品， 依同法操作， 空白血浆中无内源性物质干扰＿ 】 １ 。②标
问 Ｒ Ｄ值 均 小 于 １． 。测 定 ２ 健 康 男 性 口服 ５０ｍ 受 试 试 剂 和参 比制 剂 １２ｈ内 的 血 药浓 度 。 结 论 ： Ｓ ００ ％ ４名 ０ ｇ ９ 用 Ｈ Ｌ— ／ Ｐ Ｃ ＭＳＭＳ法 检 测人 体血 浆 阿奇 霉素水 平 ， 验结 果 准确 。 检 测血 药浓 度 的有 效方 法 。 检 是
准 曲线 ： 阿奇霉 素储备 液加空 白血浆 ． 成相 当于 阿奇 霉素 取 制
２３ 、． 、．８ １ ． 、７５ 、５ ０ １ ０ 、０ ． ｇ 的 样 品 ． ． ４ ９９３ 、８ ５ ３ ． ７ ． 、５ ． ３ ０ ０ｎ ／ ４ ６ ７ ０ ０ ｏ０ ０ ｍｌ
【 参考 文献 】
［］ 王 佩， 玉珍 ． 大 环 内酯类 抗 生 素一 １ 李 新 阿奇 霉素 叨． 国新 药 杂 志 ，９ ６５ 中 １９ ，
对 照 品 ， 释 至 ０５ ／ 。 稀 ．０ｇｍ］
１ ． 检测血 浆样 品 ．２ ２
１０ ｌ 浆 中加 入 １ １内 标 溶 液 ０ 血 ０
（． ｍ１， ０５ ｇ ） 再加入 ３ ０ 甲醇 ， 心后抽 取 １ １ ０／ ０ ｌ 离 ０ 上清检 测 。 ｌ． － ３绘制标 准 曲线和 配置 质控 样 品 １０ 血浆中加入 １ ２ ０ ０ 阿奇 霉素标 准系 列溶液 ， 配制 为浓度 为 ２３ 、 ． 、．８ １ ．５ ． ４６ ９３ 、 ８ 、 ４ ９ ７
２０ ２第７第 期 ０年 月 １ ５ １ 卷
生物 医药
液质联用检测人体血浆中的阿奇霉素
陈 湛 芳
（ 岛 市妇 女儿 童保 健 中心 药剂 科 ， 青 山东 青 岛 ２ ６ １ ） ６ ０ １
【 摘要】目的 ： Ｈ Ｌ — ／ 以 Ｐ Ｃ ＭＳ ＭＳ法 测定 人 体血 浆 阿奇 霉素水 平 。方 法 ： 乙腈： ４ ：００１ 水＝ ０６ （．％甲酸和 ０１ ．％醋 酸铵） 电喷 ， 雾 正离 子方 式检 测 。结 果 ： 线性 范 围 ２３ ～ ０ ． ｇｍｌ定量 下 限为 ２３ ｇｍ ， ．４ ６ ００ ｎ ／ ， ０ ． ｎ ／ ｌ 回收率 为 ９ ． ％～ ７４ ％ ， ４ ４１ ３ ９ ．２ 日内 和 日
霉素 质量 控制 样 品进 行分 析 ， 日内及 日间相 对 标准 偏 差 均 小
［］石晶 ， ３ 宋洪杰 ， 李珍． 阿奇霉素 片的人 体药物动力学及相对生物利用
度 ［ ． 国 医药 工业 杂 志 ，０ １８ （）２ ５ ２ ７ Ｊ中 ］ ２ ０ ，２５： １— １ ． 『］ 刘 新 ， 敬 娟 ， 哲 ． 奇 霉 素 分 散 片 人 体 相 对 生 物 利 用 度 及 药 动 学 ４ 纪 刘 阿 咖． 医学 理 论 与 实践 ，０ ６ １ （）２ ９ ２ １ ２ ０ ，９２ ：２ — ３ ．
可使浆 样 品 处 理 方 法 的 选 择 ．
于 阿 奇 霉素 血 浆 浓 度 为 ４６ 、 ７５ 、０ ．０ｎ ／ ｌ 作 为质 控 ．９ ３ ．０ ３ ００ ｇｍ ，
样品。
１ ． 验 方法 学评 价 ① 专 属性 ：在 Ｅ １ ．４检 ２ ｓ 正离 子化 方 式下 ， 阿奇 霉素与 内标红霉 素生 成［ Ｈ１ 子离 子峰 ， Ｍ＋ 分 产物 离子 扫描
『 关键 词】阿奇霉 素 ； 体血 浆 ； Ｌ ＭＳ ＭＳ 人 ＨＰ Ｃ— ／ ［ 中图分类 号】 ７ ．＋ Ｒ９ ８１ ５ 【 文献标 识 码】Ｂ ［ 文章编 号】 １ ７ — ７ １ ２ １ ０ ｂ） ０ １ ０ ６ ４ ４ ２ （ ０ ０）２（ 一 ４ — １
笔者采 用 Ｈ Ｌ — ／ Ｐ Ｃ ＭＳ ＭＳ法 测 定 人 体 血 浆 阿 奇 霉 素 水
３ ．０、５０ 、 ５ ．０、０ ．０ ６ ００ ｇｍｌ的样 品 ， 每 一 ７５ ７ ．０ １ ００ ３ ００ 、 ０ ．０ ｎ ／ 对
浓 度 的 ３样 本 进行 分 析 。取 １０ ｌ 白 血浆 ， 制 成 相 当 ０ 空 配
研究 显示 ， 奇霉 素 在 酸性 环 境 中较 为稳 定 ． 动 相 加 阿 流 人 ０１ 甲酸后 将 促 进待 测 物 的质 子 化 。 ． ％ 而加 入 ０１ ．％醋 酸铵