自主实验：邻二氮菲测定微量铁的条件探索
《分光光度分析》实验四 邻二氮菲分光光度法测定铁
(7) 盐酸溶液(6 mol· -1) L
(8) 铁标准溶液(20 g· -1，200 g· -1配成250mL，见后面) mL mL 说明： (1) - (7) 由实验室教师配制，(8) 每组配制一份
四、实验内容
条件试验
铁含量的测定 摩尔比法测定配合物的组成比、摩尔吸光系 数及反应的平衡常数
亚铁的含量?试拟出一简单步骤。
4. 制作工作曲线和进行其它条件试验时，加入
试剂的顺序能否任意改变?为什么?
50 mL 容量瓶
1 mL盐酸羟胺溶液 摇匀
用水稀释至刻度，摇匀 放置l0 min
X mL 1 mol· -1 NaOH L
l cm比色皿 绘制A与pH关系 的酸度影响曲线
以蒸馏水为参比 在所选择的波长下，测量各溶液的吸光度 (用pH计测量溶液pH值) A
pH
X mL NaOH: 0.00 mL，0.20 mL， 0.50 mL，1.00 mL 1.50 mL，2.00 mL ， 2.50 mL, 3.00 mL
2+
Fe2+ + 3 N N N Fe N
3
lg 3=21.3
Fe3+与邻二氮菲生成1:3的淡蓝色配合物，其lg 3＝14.1
盐酸羟胺还原
2 Fe3++2NH2OH· HCl=2 Fe2++N2+4H++2H2O+2Cl-
为了尽量减少其他离子的影响，通常在微酸性(pH约5)溶液中
显色。
本法的选择性很高，相当于含铁量40倍的Sn2+、Al3+、Ca2+、
实验四
邻二氮菲分光光度法测定微量铁
邻二氮菲分光光度法测定铁的条件实验和测定微量铁
邻二氮菲分光光度法测定铁的条件实验和测定微量铁邻二氮菲是一种常用的有机染料，在化学分析中常用于铁离子的测定。
邻二氮菲与铁离子生成的络合物具有明显的吸收光谱峰，可以通过分光光度法进行定量分析。
本文将介绍邻二氮菲分光光度法测定铁的条件实验和测定微量铁的方法。
实验条件1. 试剂和仪器（1）邻二氮菲：纯度应在98%以上。
（3）盐酸：纯度应在37%以上，用于控制溶液的酸度。
（4）标准铁溶液：浓度为1000μg/mL。
（5）分光光度计：用于测定吸收光谱曲线。
2. 操作步骤（1）制备邻二氮菲工作溶液：将1g邻二氮菲溶于100mL 乙醇中，稀释至1000μg/mL。
（2）制备硝酸铁标准溶液：取适量的硝酸铁溶于水中，调节pH至5.5-6.5，使用标准铁溶液调节溶液浓度。
（3）取一定量的样品，加入盐酸和邻二氮菲工作溶液，使其浓度为3×10^-4 M，pH 为5.5-6.5。
（5）根据吸收光谱曲线计算出样品中铁离子的浓度。
测定微量铁针对微量铁的测定，可以采用前处理方法和放大测量方法，使得样品浓度达到设备测量范围的要求。
1. 前处理方法对于低浓度的样品，需要进行前处理以提高铁离子浓度，通常采用离子交换树脂柱、萃取和浓缩等方法。
离子交换树脂柱：树脂柱具有强的选择性，可以去除多余的离子，使得测量结果更加准确。
荧光光谱法测定铁离子萃取：使用萃取剂提取样品中的铁离子，可以增加铁离子的浓度，使得测量结果更加准确。
2. 放大测量方法放大测量方法可以克服微量铁浓度过低的问题，通常使用衍射法、磁光法和荧光法等方法。
荧光法：荧光法利用荧光染料与铁离子生成荧光复合物，测量荧光信号强度来定量分析铁离子的浓度。
总之，邻二氮菲分光光度法是一种方便可靠的测定铁离子的方法，而在测定微量铁时，需要采用前处理方法和放大测量方法。
这些方法不仅可以提高铁离子浓度，还可以克服微量铁浓度过低而带来的精度低下的问题，提高测量的准确性。
邻二氮菲分光光度法测定微量铁_6
实验二邻二氮菲分光光度法测定微量铁试验目的1.掌握紫外可见分光光度计的基本操作。
2.掌握邻二氮菲分光光度法测定微量铁的原理和方法。
3.掌握吸收曲线绘制及最大吸收波长的选择。
4.掌握标准曲线的绘制及应用。
实验原理邻二氮菲（1,10-邻二氮杂菲）是一种有机配位剂，可与Fe离子形成红色配位离子：在pH=3~9范围内，该反应迅速完成，生成的红色配位离子在510nm 波长附近有一吸收峰，摩尔吸收系数为1.1*104，反应十分灵敏，Fe2+离子浓度与吸光度符合光吸收定律，适合于微量铁的测定。
实验中，采用pH=4.5~5的缓冲溶液保持标准系列溶液与样品溶液的酸度，采用盐酸羟胺还原标准液及样品溶液中的Fe3+离子并防止测定过程中二价铁离子被空气氧化。
实验仪器与试剂1.V-1100D型可见分光光度计2.标准铁储备溶液（1.00×10-3mol/L）3.邻二氮菲溶液（0.15%，新鲜配制）4.盐酸羟胺溶液（10%，新鲜配制）5.醋酸盐缓冲液6.50ml容量瓶7个7.5ml移液管4只8.1cm玻璃比色皿2个9.铁样品溶液实验步骤1.标准系列溶液及样品溶液配制：按照下表配制标准系列溶液及样品溶液。
2.吸收曲线绘制：用1cm的比色皿，以1号溶液作为参比溶液，测定4号溶液在不同波长下的吸光度，以吸光度为纵坐标，波长为横坐标制图，绘制吸收曲线，并从吸收曲线上找出最大吸收波长。
3.标准曲线制作：在选定的最大吸收波长处，用1cm比色皿，以1号溶液作为参比溶液，分别测定2~7号溶液的吸光度，以吸光度值为纵坐标，系列标准溶液的浓度为横坐标绘制标准曲线。
实验数据处理与结果1.吸收曲线：2.标准曲线：样品铁溶液中铁含量计算：Cx=C 读取值×50.200.50=9.9×10-4mol/L摩尔系数计算：ε=1212C C A A --=1.219×104 实验思考与讨论1.标准曲线的线性不好的原因：所选标准溶液的浓度可能只有一部分在线性范围内，该实验5、6号之间的线性不是很好，很大的原因可能是它们之间的某一浓度之后便超出了线性的范围。
实验十-邻二氮菲分光光度法测定微量铁
实验十邻二氮菲分光光度法测定微量铁一、实验目的1．掌握邻二氮菲分光光度法测定微量铁的方法原理2．熟悉绘制吸收曲线的方法，正确选择测定波长3．学会制作标准曲线的方法4．通过邻二氮菲分光光度法测定微量铁，掌握721型分光光度计的正确使用方法，并了解此仪器的主要构造。
二、实验原理邻二氮菲（1，10—二氮杂菲），也称邻菲罗啉是测定微量铁的一个很好的显色剂。
在pH2—9范围内（一般控制在5—6间）Fe2+与试剂生成稳定的橙红色配合物Fe（Phen）2+lgK=21.3，在510nm下，其摩尔吸光系数为1.1104L/moL.cm, ）Fe3+与邻二氮菲作用生成3兰色配合物，稳定性较差，因此在实际应用中常加入还原剂盐酸羟胺使Fe2+还原为Fe3+：2 Fe3++2NH2OHHCl=2 Fe2++N2+4H++2H2O+2Cl-本方法的选择性很高。
相当于含铁量40倍的Sn、AI、Ca、Mg、Zn、Si,20倍的Cr、Mn、V、P和5倍的Co、Ni、Cu不干扰测定。
三、试剂与仪器仪器：1．721型分光光度计2．50mL容量瓶8个（4人/组）,100mL1个,500mL1个3．移液管：2 mL1支，10 mL1支4．刻度吸管：10mL、5mL、1mL各1支试剂：1．铁标准储备溶液100ug/mL：500 mL（实际用100mL）。
准确称取0.4317g铁盐NH4Fe（SO4）12H2O置于烧杯中，加入6moL/LHCI20mL和少量水，然后加水稀释至刻度，摇匀。
22．铁标准使用液10ug/mL：用移液管移取上述铁标准储备液10.00 mL，置于100 mL容量瓶中，加入6moL/LHCI2.0mL和少量水，然后加水稀释至刻度，摇匀。
3．HCI6moL/L：100mL（实际用30mL）4．盐酸羟胺10%（新鲜配制）：100mL（实际80mL）5．邻二氮菲溶液0.1%（新鲜配制）：200mL（实际160mL）6．HAc—NaAc缓冲溶液（pH=5）500 mL（实际400mL）：称取136gNaAc，加水使之溶解，再加入120 mL冰醋酸，加水稀释至500 mL7．水样配制（0.4ug/mL）：取2mL100ug/mL铁标准储备溶液加水稀释至500mL四、实验步骤1．绘制吸收曲线：用吸量管吸取铁标准溶液（10ug/mL）0.0、2.0、4.0 mL分别放入50 mL容量瓶中，加入1 mL10%盐酸羟胺溶液、2.0 mL0.1%邻二氮菲溶液和5 mL HAc—NaAc缓冲溶液，加水稀释至刻度，充分摇匀，放置5分钟，用3cm比色皿，以试剂溶液为参比液，于721型分光光度计中，在440—560nm波长范围内分别测定其吸光度A值。
邻二氮菲测铁实验报告
邻二氮菲测铁实验报告篇一：邻二氮菲分光光度法测定微量铁实验报告实验一、邻二氮菲分光光度法测定微量铁XX级医学检验 3组吴茳铃 XX221885实验目的和要求1、掌握紫外可见分光光度计的基本操作；2、掌握邻二氮菲分光光度法测定微量铁的原理和方法；3、掌握吸收曲线绘制及最大吸收波长选择；4、掌握标准曲线绘制及应用。
实验原理邻二氮菲（1,10—邻二氮杂菲）是一种有机配位剂，可与Fe形成红色配位离子2+Fe2+2++3NNFe3在pH=3~9范围内，该反应能够迅速完成，生成的红色配位离子在510nm波长附近有一吸收峰，摩尔吸收系数为1.1×104，反应十分灵敏，Fe2+ 浓度与吸光度符合光吸收定律，适合于微量铁的测定。
实验中，采用pH=4.5-5的缓冲溶液保持标准系列溶液及样品溶液的酸度；采用盐酸羟胺还原标准储备液及样品溶液中的Fe3+并防止测定过程中Fe2+被空气氧化。
实验仪器与试剂1. 752S型分光光度计2. 标准铁储备溶液（1.00×10-3mol/L）3. 邻二氮菲溶液（0.15%，新鲜配制）4. 盐酸羟胺溶液（10%，新鲜配制）5. NaAC缓冲溶液6. 50ml 容量瓶7个 8.1cm玻璃比色皿2个 9. 铁样品溶液实验步骤1、标准系列溶液及样品溶液配制，按照下表配制铁标准系列溶液及样品溶液。
用1cm比色皿，以1号溶液作为参比溶液，测定4号溶液在各个波长处的吸光度，绘制吸收曲线，并找出最大吸收波长。
绘图如下：选择的最大吸收波长为：λmax = 510nm3、标准曲线制作在选定最大吸收波长处，用1cm比色皿，以1号溶液作为参比溶液，分别测定2至7号溶液的吸光度，平行测定3次，计算吸光度平均值，绘制标准曲线。
绘制标准曲线：实验数据处理1、样品中铁的计算Cx=C读取值×50.00/2.50=0.05×20=1×10(mol/L)2、摩尔吸光系数计算在标准曲线的直线部分选择量两点，读取对应的坐标值，计算邻二氮菲配位物在最大吸收波长出的摩尔吸光系数：ε=(A2－A1)/(c2－c1)=(0.461—0.233)/(0.04×10-3—0.02×10-3)=1.14×104L/(mol·cm)-3实验讨论1、查资料红色配位物的摩尔吸光系数与实验计算一致，影响成败的关键可能有：标准液和样品液的配置不准、分光光度计使用不当。
邻二氮菲分光光度法测定铁的适宜条件
邻二氮菲分光光度法测定铁的适宜条件包括以下几个方面：
1.试剂的选用。
邻二氮菲为邻氨基苯并吡啶类有机物，能与铁形
成紫色络合物，是测定铁的一种常用试剂。
2.pH值的控制。
邻二氮菲与铁离子形成络合物的反应在pH为5.0-
9.0时最为适宜，因此需要通过调节溶液的pH值来控制反应的
条件。
3.温度的控制。
反应温度一般控制在室温下，过高或过低都会影
响反应的速率和准确度。
4.反应时间的控制。
邻二氮菲与铁离子形成络合物反应速率较慢，
需要一定的反应时间才能达到最大吸收峰，一般反应时间为
10-20分钟。
5.光路的选择。
邻二氮菲与铁离子形成的络合物在510nm处有最
大吸收峰，因此需要选择510nm的光路进行测定。
综上所述，邻二氮菲分光光度法测定铁的适宜条件为：试剂为邻二氮菲，pH值为5.0-9.0，温度控制在室温下，反应时间为10-20分钟，光路选择510nm。
邻二氮菲分光光度法测定微量铁
邻二氮菲分光光度法测定微量铁摘要：采用邻二氮菲分光光度法对微量铁的测定进行了研究，并对其影响因索和结果进行了分析和探讨，通过正交实验和单因素实验，确定其最佳条件为：测量波长为510nm、显色剂用量0．30mL、有色配合物的稳定时间15min、试液的pH为6.5。
该方法简单方便，可广泛用于果蔬中微量铁的测定。
关键词：邻二氮菲分光光度法微量铁一、实验目的1.学习确定实验条件的方法，掌握邻二氮菲分光光度法测定微量铁的方法原理；2.掌握721型分光光度计的使用方法，并了解此仪器的主要构造；3.通过分光光度法测定铁的条件实验，学会如何选择分光光度分析的条件。
二、实验原理⒈确定适宜的条件的原因：在可见光分光光度法的测定中，通常是将被测物与显色剂反应，使之生成有色物质，然后测其吸光度，进而求得被测物质的含量。
因此，显色条件的完全程度和吸光度的测量条件都会影响到测量结果的准确性。
为了使测定有较高的灵敏度和准确性，必须选择适宜的显色反应条件和仪器测量条件。
通常所研究的显色反应条件有显色温度和时间，显色剂用量，显色液酸度，干扰物质的影响因素及消除等，但主要是测量波长和参比溶液的选择。
对显色剂用量和测量波长的选择是该实验的内容。
⒉如何确定适宜的条件：条件试验的一般步骤为改变其中一个因素，暂时固定其他因素，显色后测量相应溶液吸光度，通过吸光度与变化因素的曲线来确定适宜的条件。
⒊本试验测定工业盐酸中铁含量的原理：根据朗伯－比耳定律：A=εbc。
当入射光波长λ及光程b一定时，在一定浓度范围内，有色物质的吸光度A与该物质的浓度c成正比。
只要绘出以吸光度A为纵坐标，浓度c为横坐标的标准曲线，测出试液的吸光度，就可以由标准曲线查得对应的浓度值，即工业盐酸中铁的含量。
⒋邻二氮菲法的优点：用分光光度法测定试样中的微量铁，目前一般采用邻二氮菲法，该法具有高灵敏度、高选择性，且稳定性好，干扰易消除等优点。
⒌邻二氮菲法简介：邻二氮菲为显色剂，选择测定微量铁的适宜条件和测量条件，并用于工业盐酸中铁的测定。
邻二氮菲分光光度法测定微量铁
一． 实验名称：邻二氮菲分光光度法测定微量铁 二． 实验目的1. 通过分光光度法测定铁的条件实验，学会选择和确定分光光度分析的适宜条件。
2. 了解光栅分光光度计的构造和使用方法。
3. 掌握邻二氮菲分光光度法测定铁的原理和方法。
三． 实验原理邻二氮菲使铁的一种优良的显色剂，在pH2～9的溶液中，Fe 2+能与其生成1：3的橙红色配合物，3lg 21.3β= 最大吸收波长510nm 处的摩尔吸光系数为4111.110L mol cm --⨯•• 。
在一定浓度范围内，Fe 2+的浓度范围内，Fe 2+的浓度与配合物吸光系数的关系遵循朗伯-比尔定律。
有关反应如下：NNFe2+33Fe2++该显色反应选择性很高，形成的配合物较稳定，在还原剂的存在下，颜色可保持数月不变。
由于Fe 3+也可与邻二氮菲生成1：3的淡蓝色配合物，3lg 14.1β=，所以，在显色反应前，需将Fe 3+全部还原成Fe 2+。
四． 实验用品1．仪器 721或722型分光光度计。
2．试剂(1)0.1 mg ·L-1铁标准液 准确称取0.702 0 g NH 4Fe(S04)2·6H 20置于烧杯中，加少量水和20 mL 1:1H 2S04溶液，溶解后，定量转移到1L 容量瓶中，用水稀释至刻度，摇匀。
(2)100 g ·L-1盐酸羟胺水溶液 用时现配。
(3)1.5 g ·L-1邻二氮菲水溶液 避光保存，溶液颜色变暗时即不能使用。
(4)1.0 mol ·L-1 乙酸钠溶液。
(5)1 mol ·L-1氢氧化钠溶液。
五． 实验步骤1.准备工作。
打开分光光度计开关，预热。
2.确定最大吸收波长。
取50 mL容量瓶（1#），用吸量管加入1 mL 100 g·L-1盐酸羟胺溶液，再各加入2 mL 1.5 g·L-1邻二氮菲溶液、5 mL 1.0 mol·L-1乙酸钠溶液，以水稀释至刻度，摇匀（参比溶液）。
实验一邻二氮菲分光光度法测定微量铁的条件
实验一邻二氮菲分光光度法测定微量铁的条件、实验目的1、掌握分光光度计的原理、构造和使用方法。
2、学习分光光度计分析中如何确定最佳实验条件。
、实验原理在可见光区分光光度法测量中，通常是将被测物质与显色剂反应，使之生成有色物质，然后测其吸光度，进而求得被测物质的含量。
显色反应的程度受显色剂用量、显色时间，显色液酸度等条件的影响，通过实验，确定合适的显色条件。
三、仪器及试剂分光光度计；1cm 吸收池；10mL移液管；25mL 容量瓶,100ml 容量瓶1．铁标准溶液100μg·mL -1（即0.01 mg·mL-1）铁标准溶液：准确称取0.3511g（NH 4）2 Fe（SO4）2·6H 2O 于烧杯中，用2 mol ·L-l盐酸15 mL 溶解，移入500 mL 容量瓶中，以水稀释至刻度，摇匀。
用前，准确稀释10 倍成为含铁10 ug·mL -1标准溶液。
2. 1g.L -1邻二氮菲：1.0 g 邻二氮菲于小烧杯中，加入5-10ml 95%乙醇溶液溶解，再用水稀释到1000 mL 。
3. 10％盐酸羟胺水溶液：10％水溶液（现用现配，避光保存）4. 醋酸钠溶液1mol/L5. 0.8 mol/L 氢氧化钠溶液四、实验步骤1、吸收曲线的制作和测量波长的选择用移液管吸取0.0ml、2.0mL 10 ug ·mL -1标准溶液，分别注入二个25 mL 容量瓶中，加入1.0mL10% 的盐酸羟胺溶液，摇匀后放置2 min ；再加2 mL 邻二氮菲溶液，2.5mL 醋酸钠溶液溶液，用水稀释至刻度，摇匀。
放置5min 后，用1cm 比色皿，以试剂空白为参比，在440~560nm 之间，每隔10nm 测一次吸光度，其中在500-520 nm 之间，每隔5nm 测一次吸光度。
然后以波长为横坐标，吸光度A 为纵坐标，绘制吸收曲线，找出最大吸收波长。
2、显色剂用量影响在7 只25mL容量瓶中，各加2.0 mL 10 ug·mL -1铁标准溶液和1.0 mL 盐酸羟胺溶液，摇匀后放置2 min。
邻二氮菲分光光度法测定微量铁的条件试验
⑹10－3mol·L－1邻二氮菲：称取0.1983g邻二氮菲，加少许酒精溶解，定容至1L。
⑺1mol·L－1NaAc。
⑻1mol·L－1NaOH。
四、实验步骤
1．绘制吸收曲线
⑴吸取0.5mL 100mg10－3mol·L－1铁标准溶液于25mL容量瓶中，加0.5mL10%盐酸羟胺，摇匀，放置2min。加入1.0mL0.15%邻二氮菲溶液和2.5mL1mol·L－1NaAc，用水稀释至刻度，混匀。
⑵10－3mol·L－1铁标准溶液（Ⅱ）：用吸量管准确吸取55.85mL铁标准溶液（Ⅰ）至1L容量瓶中，
加入70mL1:1HCl，用去离子水稀释至刻度。
⑶100mg·L－1铁标准溶液（Ⅲ）：用吸量管准确吸取10.00mL铁标准溶液（Ⅰ）至100.0mL容量瓶中，
用去离子水稀释至刻度。
⑷10%盐酸羟胺：10g盐酸羟胺溶于100mL水中。
在建立一个新的吸收光谱法定量测定时，为了获得较高的灵敏度和准确度，必须进行一系列条件试验，包括显色化合物的吸收光谱曲线（简称吸收光谱）的绘制、选择合适的测定波长、显色剂用量和溶液pH值的选择及显色化合物影响等。此外，还要研究显色化合物符合朗伯－比尔定律的浓度范围、干扰离子的影响及其排除的方法等。
三、仪器与试剂
1．仪器
分光光度计(附1cm比色皿4个)，25mL容量瓶，镜头纸，广泛pH试纸，洗耳球，烧杯，洗瓶。
2．试剂
⑴1000mg·L－1铁标准溶液（Ⅰ）：准确称取7.021g(NH4)2Fe(SO4)2·6H2O，放入烧杯中，
加入少量水和180mL（1:1）HCl，溶解后移入1L容量瓶中，用去离子水稀释至刻度，混匀。
邻二氮菲光度法测定铁的条件实验
721-分光光度计使用说明： 1.接通电源，打开仪器开关，掀开样品室暗箱盖，预热10分钟。 2.将灵敏度开关调至“1”档（若零点调节器调不到“0”时，需选用较高 档。） 3.根据所需波长转动波长选择钮。 4.将空白液及测定液分别倒入比色杯3/4处，用擦镜纸擦清外壁，放入样 品室内，使空白管对准光路。 5.在暗箱盖开启状态下调节零点调节器，使读数盘指针指向T=0处。 6.盖上暗箱盖，调节“100”调节器，使空白管的T=100，指针稳定后逐 步拉出样品滑竿，分别读出测定管的光密度值，并记录。 7.比色完毕，关上电源，取出比色皿洗净，样品室用软布或软纸擦净。
(3) 显色时间
在 50 mL 容量瓶申，用吸量管依次加入 1.000 x 10-3 mol/L 铁的
标准溶液 2.00 mL，10% 的盐酸羟胺溶液 1 mL，0.15% 的邻二氮菲
溶液 2 mL，l mol/L 的 NaAc 溶液 5 mL，以水稀释至刻度，摇匀。
立即在所用波长下，用 l cm 比色皿，以相应的试剂溶液为参比，测
四、实验内容
（1）绘制光吸收曲线，选择测量的适宜波长 （2）绘制吸光度~反应时间曲线，选择最佳反应时间 （3）绘制吸光度~显色剂用量曲线选择显色剂的适宜用量 （4）绘制吸光度~酸度曲线选择最佳酸度条件 （5）绘制标准曲线 （6）试液中铁含量的测定 （7）记录和处理实验数据
(5) 工作曲线的绘制
在 6 只 50 mL 容量瓶中，用吸量管分别依次加入 100 mg/mL 的铁 标准溶液 ( 注意，是试剂 2 不要错加成试剂 1) 0.00 mL，0.20 mL， 0.40 mL，0.60 mL，0.80 mL，1.00 mL，再分别加入 10% 的盐酸羟 胺溶液 1 mL，0.15% 的邻二氮菲溶液 2 mL，1 mol/L NaAc 溶液 5 mL，以水稀释至刻度，摇匀。在所用波长下，用 l cm 比色皿，以试 剂溶液为参比，测定各溶液吸光度，绘制工作曲线，并计算摩尔吸光 系数。
邻二氮菲分光光度法测定微量铁实验报告
邻二氮菲分光光度法测定微量铁一、实验目的1.学习确定实验条件的方法和测定微量铁的分光光度法；2.掌握TU—1901型双光束紫外可见分光光度计的使用方法。
二、实验原理1.在可见光分光光度法测定无机物时，通过显色反应生成吸光系数较大的有色物质进行测。
2.确定适宜实验条件：改变其中一个影响因素，暂时固定其它影响因素，测吸光度，通过吸光度—该因素的曲线确定最适宜的显色条件。
其他因素的确定也照此方法。
3.本实验以邻二氮菲（phen）为显色剂，是光度法测定微量铁的优良试剂，pH在2~9时（pH=5~6），Fe2+ + 3phen [Fe(phen)3]2+(稳定的红色配合物)lgK稳=21.3，λmax=510nm,ε510=1.1×104L·cm-1·mol-1用盐酸羟胺将Fe（Ⅲ）还原为Fe（Ⅱ），以邻二氮菲做显色剂可测定试样中铁含量。
本方法选择性高，杂离子难以干扰。
三、仪器与试剂TU—1901型双光束紫外可见分光光度计，1cm比色皿，10mL吸量管，50mL 比色管。
1.0×10-3mol·L-1铁标准溶液，100μg·mL-1铁标准溶液，0.15%phen水溶液，10%盐酸羟胺溶液，1 mol·L-1醋酸钠溶液，工业盐酸（试样）。
四、实验操作1.吸收曲线的绘制和测量波长的选择用吸量管吸取2.00mL1.0×10-3mol·L-1铁标准溶液注入50mL比色管中，再加入1.00mL10%盐酸羟胺溶液，摇匀后，加入2.00mL0.15%phen水溶液和5.00mL1 mol·L-1醋酸钠溶液，稀释至刻度线，摇匀。
以蒸馏水为参比液，将上述试液装入1cm比色皿（2/3左右），在440nm~560nm 之间，每隔5nm测一次吸光度，以吸光度A为纵坐标，波长λ为横坐标绘制吸收曲线，选择最适宜波长。
2.确定显色条件⑴显色剂的用量在6支50mL比色管中各加入2.00mL1.0×10-3mol·L-1铁标准溶液和1.00mL10%盐酸羟胺溶液，摇匀后，分别加入0.10、0.50、1.00、2.00、3.00、4.00mL0.15%phen 水溶液，再加入5.00mL1 mol·L-1醋酸钠溶液,，稀释至刻度线，摇匀。
实验一 邻二氮菲分光光度法测定微量铁
实验一邻二氮菲分光光度法测定微量铁【实验目的】1.掌握紫外可见分光光度计的基本操作；2.掌握邻二氮菲分光光度法测定微量铁的原理和方法；3.掌握吸收曲线绘制及最大吸收波长选择；4.掌握标准曲线绘制及应用。
【实验原理】邻二氮菲是一种有机配位剂，可与二价铁离子形成红色配位离子，在pH=3~9范围内，该反映能够迅速完成，生成的红色配位离子在510nm波长附近有一吸收峰，摩尔吸收系数为0.00011，反映十分灵敏，二价铁离子浓度与吸光度符合光吸收定律，适合于微量铁的测定。
实验中，采用pH=4.5~5的缓冲溶液保持标准系列溶液及样品溶液的酸度；采用盐酸羟胺还原标准储备液及样品溶液中的三价铁离子并防止测定过程中二价铁离子被空气氧化。
【实验仪器与数据】1. 722型或752型分光光度计2. 标准铁储备溶液（0.001mol/L）3. 邻二氮菲溶液（0.15%，新鲜配制）4. 盐酸羟胺溶液（10%，新鲜配制）5. 醋酸盐缓冲溶液6. 50ml容量瓶7个7. 5ml移液管4只8. 1cm玻璃比色皿2个9. 铁样品溶液【实验步骤】长处的吸光度；在坐标纸上以测定的吸光度为纵坐标，波长为横坐标制图，绘制吸收曲线，并从吸收曲线上找出最大吸收波长。
3.标准曲线制作在选定的最大吸收波长处，用1cm比色皿，以1号溶液作为参比溶液，分别测定2~7好溶液的吸光度，平行测定三次，计算吸光度的平均值；在坐标纸上一吸光度平均值为纵坐标，系列标准溶液的浓度为横坐标制图，绘制标准曲线。
【原始数据】【数据处理】【实验结果】标准曲线线性方程为y=0.1182x-0.0308 由于样品溶液吸光度为0.564所以算得样品溶液的浓度为5.032*10 -5mol/L则样品溶液中铁的含量为：0.001摩尔吸收系数为：11550【实验相关讨论】在实验中，510nm和512nm处吸光度均最大，所以在加测一组当波长为511nm时的吸光度为0.675。
在实验中，配制标准液是应尽量减少操作上带来的误差，尽量使结果精确。
实验二-邻二氮菲分光光度法测定微量铁
实验一邻二氮菲分光光度法测定微量铁一、实验目的1、了解邻二氮菲测定铁的基本原理及基本条件，学习显色溶液的制备操作技术；2、掌握吸收曲线的测绘和测量波长的选择；3、掌握标准曲线法定量的实验技术；4、了解分光光度计的使用方法。
二、实验原理邻二氮菲（又称邻菲罗啉）是测定微量铁的一种较好的显色剂。
在pH4~6的溶液中，邻二氮菲与Fe2+生成稳定的橙红色络合物，反应式如下：Fe2++ 3phen → ［Fe(phen)3］2+橙红色络合物的最大吸收波长在510nm 处，摩尔吸光系数ε510 =1.1×104，反应的灵敏度、稳定性、选择性均较好。
此反应可用于微量Fe2+的测定，如果铁以Fe3+的形式存在，则应预先加入还原剂盐酸羟胺或对苯二酚将Fe3+还原成Fe2+，2Fe3+ +2NH2OH·HCl → 2Fe2+ + N2 + 2H2O + 4H+ + 2Cl-（盐酸羟胺）三、仪器与试剂1、仪器分光光度计、容量瓶（50 mL 7个）、吸量管（5 mL 4 支）、吸量管（10 mL 1 支）2、试剂（1）10 μg/mL 铁标准溶液：准确称取0.8634 g NH4Fe（SO4）2•12H2O，置于烧杯中，以50 mL 1mol •L-1 HCl 溶液溶解后转入1000 mL 容量瓶中，用水稀释到刻度，摇匀。
从中吸取50 mL 该溶液于500 mL 容量瓶中，加50 mL 1mol •L-1 HCl 溶液，用水稀释到刻度，摇匀；（2）10g/L 盐酸羟胺溶液（临用时配制）；（3）1g/L 邻二氮菲溶液（临用时配制）：应先用少许酒精溶液，再用水稀释；（4）NaAc-HAc 缓冲溶液（pH=4-6）：将30mL冰醋酸和30g无水醋酸钠溶于100mL 水中，稀释至500mL；（5）铁试样溶液：其中含铁0.02~0.06 mg/10 mL。
四、实验步骤1、显色溶液的配制：取50mL 容量瓶7 个，分别准确加入10μg/mL 的铁标准溶液0.00，1.00，2.00，3.00，4.00，5.00（mL）及试样溶液10.00mL，再于各容量瓶中分别加入10g/L 盐酸羟胺2.5mL，摇匀，稍停2min，再各加入NaAc-HAc缓冲溶液5mL 及1g/L 邻二氮菲溶液5mL，每加一种试剂后均摇匀再加另一种试剂，最后用水稀释到刻度，摇匀。
实训项目二 邻二氮菲分光光度法测定微量铁含量
实训项目二邻二氮菲分光光度法测定微量铁(2)一．实验目的1.学会邻二氮菲分光光度法测定微量铁。
二．实验原理在pH =3～9 （一般控制在5-6）的溶液中，邻菲咯啉能与Fe2+反应生成稳定的橙红色配合物。
此络合物在避光下可保存半年，测量波长510 nm，其摩尔吸光系数为1.1×104 L •mol-1•cm-1。
（无色）（桔红色或橙红色）本方法适用于所取试液中铁含量为10～500μg。
在试液制备时，应参考与所分析产品有关的标准对本方法进行必要的修改使其适合产品测定。
三．实验试剂和仪器1.试剂：（1）铁盐标准储备液c(Fe3+)=100ug/mL：称取0.8634g硫酸铁铵，称准至0.001g，置于200 mL烧杯中，加入100 mL蒸馏水、10 mL硫酸3mol/L c(H2SO4)，溶解后全部转移到1000 mL 容量瓶中，用蒸馏水稀释至刻度，摇匀。
（2）铁盐标准工作液c(Fe3+)=10 ug /mL：移取50.0 mL铁盐标准储备液，置于500 mL容量瓶中，用蒸馏水稀释至刻度，摇匀。
该溶液现配现用。
（3）0.2%邻菲咯啉（又称邻二氮菲）溶液：称取2g邻菲咯啉，先用5~100 mL95%乙醇溶解，再加蒸馏水稀释到1000 mL。
（4）2%抗坏血酸溶液：称取2g抗坏血酸，用蒸馏水稀释到1000mL，现用现配。
（5）HAc-NaAc缓冲溶液(pH=5): 称取136g乙酸钠（CH3COONa·3H2O），加60mL冰乙酸，加水溶解后，稀释到1000mL。
2.仪器：（1）721型分光光度计（配一套比色皿）。
（2）容量瓶（50 mL）、吸量管（5 mL、10 mL）等玻璃仪器。
四．实验内容1.调试721分光光度计，选择最大波长为测定波长。
2.绘制标准曲线标分别准确移取铁盐标准工作液：0.00mL、1.00mL、2.00mL、4.00mL、6.00mL、8.00mL、10.0mL，依次放入7只50mL容量瓶中，各加入2 mL抗坏血酸溶液，稍摇动，加入5 mL HAc-NaAc缓冲溶液以及3 mL邻菲咯啉溶液，用蒸馏水稀释至刻度，摇匀。
邻二氮菲分光光度法测定微量铁含量实验报告
邻二氮菲分光光度法测定微量铁含量实验报告邻二氮菲分光光度法测定微量铁含量实验报告一、实验目的本实验的目的是使用邻二氮菲分光光度法来测定微量金属铁的含量。
二、实验原理邻二氮菲分光光度法是利用铁离子与邻二氮菲溶液反应生成一种具有特定波长的黄色螯合物，该波长可以有效反映铁离子浓度的变化。
铁与邻二氮菲反应生成黄色螯合物的反应式如下：Fe2+ + 2 para-dimethylaminobenzaldehyde（pDMnB）→ Fe （pDMnB）2+该反应的波长为555 nm，可以在此处测得离子浓度。
由于邻二氮菲螯合反应是多步反应，在受铁离子影响的情况下，将系中存在的其它配体离子换去，导致螯合反应降解，因而使电导率降低。
因此，可以使用该方法来测定微量金属铁含量。
三、实验步骤1、向容量瓶中加入水样溶液，加至容量瓶的刻度线处，用操作标准液（1000ppm Fe）与水样溶液混匀，在混匀的情况下加入邻二氮菲反应液，搅拌使混合物中的邻二氮菲反应液均匀溶解；2、在光度计中将比较程序设置为“比较”，将比较器设置为“测定”，并将调控器拨至“泻出”位置；3、在操作标准液容器中取1ml操作标准液，根据调控器位置，从容量瓶中泻出0.10ml，将其放入操作标准液容器中，混合使标准液内的铁离子与邻二氮菲反应液反应，谐解效应；4、使用光度计测定该混合液的光度，记下读数；5、将上述步骤重复5次；6、计算出每次实验的平均值并记录，并用它来测定样品中的铁离子浓度。
四、实验结果1、实验数据如下：操作标准液测试：第一次测试第二次测试第三次测试第四次测试第五次测试平均值2.20 2.19 2.20 2.19 2.21 2.20样品测试：第一次测试第二次测试第三次测试第四次测试第五次测试平均值1.07 1.08 1.09 1.08 1.07 1.082、由实验数据中可以看出，在实验中，操作标准液的平均值为2.20，样品的平均值为1.08。
3、操作标准液中的铁离子浓度为1000ppm，而样品的铁离子浓度可以由下式计算：样品铁离子浓度=样品平均值/操作标准液平均值x操作标准液浓度=1.08/2.20x1000ppm=491.83纳克每升五、实验总结本实验通过测定邻二氮菲分光光度，利用铁离子与邻二氮菲溶液反应生成一种具有特定波长的黄色螯合物，使用光度计测定该混合液的光度，从而测出了样品中的铁离子浓度，最后结果为491.83纳克/升。
邻二氮菲测定微量铁的反应条件是什么
邻二氮菲测定微量铁的反应条件是什么
化学忻格格吉祥p42014-10-31
优质解答
在pH=2～9的溶液中,Fe 2+ 与邻二氮菲(phen)生成稳定的桔红色配合物[Fe(phen) 3 ] 2+ ：此配合物的lgK 稳=21.3,摩尔吸光系数ε 510 = 1.1×104 L·mol -1 ·cm -1 ,而Fe 3+ 能与邻二氮菲生成3∶1配合物,呈淡蓝色,lgK 稳=14.1.
所以在加入显色剂之前,应用盐酸羟胺(NH 2 OH·HCl)将Fe 3+ 还原为Fe 2+ ,测定时控制溶液的酸度为pH≈5较为适宜.
是否所有吸光度分析都以试剂空白做参比溶液？举个不是的例子最好
答：不是！有好多检测的方法标准中都是用蒸馏水作为参比溶液的。
例如：GB/T18204.25 靛酚蓝分光光度法测定空气中的氨，就是用蒸馏水作为参比溶液的。
怎样计算二价铁--邻二氮菲络合物的摩尔吸光系数？
在确定波长和确定厚度的比色皿时，测得5个标准溶液的吸光度，以吸光度A对浓度c作图，得到直线，求得斜率，用斜率除以比色皿的厚度就得到实验条件下的摩尔吸光系数。
患难37 2014-09-12
朗伯-比尔定律：A=Kbc K为比列系数b为介质厚度c为浓度当b单位为cm c单位为摩尔每升K用k表示成为摩尔吸收系数它与吸收波长有关一般是用最大波长进行测定
亚铁就是二价铁,邻二氮菲分光光度法直接测二价铁；
全铁：先用三氧化锡将三价铁还原成二价铁,然后加入氯化高汞以氧化过量的三氧化锡,而后
按二价铁的方法测就行了
槐花药材在进行甲醇提取之前为什么要用乙醚回流思考题答案药物分析实验报1 根据相似相容原理应该去掉那些化合物极性小的物质提高纯度。
，。
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自主实验：邻二氮菲测定微量铁的条件探索【试验目的】1.掌握紫外可见分光光度计的基本操作。
2.掌握邻二氮菲分光光度法测定微量铁的原理和方法。
3.掌握吸收曲线绘制及最大吸收波长的选择。
4.掌握标准曲线的绘制及应用。
5.掌握探索实验条件的基本方法步骤。
6.掌握各种试剂的配制和保存。
7.学习对一种检测方法进行评估。
【实验原理】邻二氮菲（1,10-邻二氮杂菲）是一种有机配位剂，可与Fe离子形成红色配位离子：在pH=3~9范围内，该反应迅速完成，生成的红色配位离子在510nm 波长附近有一吸收峰，摩尔吸收系数为1.1*104，反应十分灵敏，Fe2+离子浓度与吸光度符合光吸收定律，适合于微量铁的测定。
实验中，采用pH=4.5~5的缓冲溶液保持标准系列溶液与样品溶液的酸度，采用盐酸羟胺还原标准液及样品溶液中的Fe3+离子并防止测定过程中二价铁离子被空气氧化。
研究一个变量对实验的影响，必须先固定其他的变量，保证单一变量进行对实验最佳条件的探索。
【实验仪器与试剂】仪器：V-1100D型可见分光光度计，分析天平pHS-3C型酸度计、E-201-CpH复合电极一只、磁力搅拌器一台;试剂：邻二氮菲[邻二氮菲溶液（0.15%，新鲜配制）]盐酸羟胺[盐酸羟胺溶液（10%，新鲜配制）]NaOH、冰醋酸，醋酸钠[pH=3.6醋酸盐缓冲液，pH=4.6醋酸盐缓冲液，pH=5.6醋酸盐缓冲液]（NH4）2Fe（SO4)2 6H2O[标准铁储备溶液（1.00×10-3mol/L）]甲醇，H2SO4。
(均为分析纯)铁样品溶液用品：50ml容量瓶7个，100ml容量瓶1个，500ml容量瓶1个，5ml 移液管2只，10ml移液管2只，1cm玻璃比色皿2个，50ml 烧杯一个，100ml烧杯1个，250ml烧杯2个，500ml烧杯1 个，玻璃棒2根，500ml试剂瓶4个，250ml棕色试剂瓶1个，500ml试剂瓶1个。
【实验步骤】一、探索合适的缓冲溶液的pH:1.(1)pH=3.6、4.6、5.6的醋酸盐缓冲液的配制：将2.9026g分析纯的NaAc加入烧杯，移取2.85ml冰醋酸溶解，500ml容量瓶定容，用酸度计调节至pH=3.6、4.6、5.6，分别装入不同的试剂瓶，待用。
(2)邻二氮菲溶液配制（0.15%，新鲜配制）:分析天平称量0.15g邻二氮菲，溶于2ml甲醇中，加热量蒸馏水，转入100ml容量瓶定容，棕色试剂瓶保存，待用。
(3)盐酸羟胺溶液配制（10%，新鲜配制）：分析天平称取10g盐酸羟胺，和少量蒸馏水加以溶解吗，然后转入100ml容量瓶中，定容，装入试剂瓶，待用。
(4)标准铁储备溶液配制（1.00×10-3mol/L）:分析天平准确称取0.1961g（NH4）2Fe（SO4)2 6H2O于100ml烧杯中，用5ml水与硫酸1:1混合的溶液中溶解，待达常温后，转入500ml的容量瓶中定容，保存于试剂瓶中，待用。
2.按下表分别用不同的酸度的缓冲液配制溶液，寻找最大吸收波长。
2(PH=3.6) 3(PH=4.6) 4(PH=5.6)标号1(PH与待测溶液ph相同)标准铁溶液0.00ml 3.00ml 3.00ml 3.00ml盐酸羟胺溶液 1.00ml 1.00ml 1.00ml 1.00ml邻二氮菲溶液 5.00ml 5.00ml 5.00ml 5.00ml醋酸盐缓冲液 5.00ml 5.00ml 5.00ml 5.00ml说明以上溶液移至50ml容量瓶，蒸馏水定容至50ml2.吸收曲线绘制：用1cm的比色皿，以1号溶液作为参比溶液，测定不同ph缓冲溶液在不同波长下的吸光度，以吸光度为纵坐标，波长为横坐标制图，绘制吸收曲线，并从吸收曲线上找出最大吸收波长。
（1）pH=3.6时：波长480nm 482nm 484nm 486nm 488nm 490nm 492nm 494nm 496nm 498nm 吸光度0.8150.821 0.825 0.83 0.8390.8450.8560.860.8690.883（2）pH=4.6时：（3）pH=5.6时：波长 500nm 502nm 504nm 506nm 508nm 510nm 512nm 514nm 516nm 518nm吸光度 0.885 0.890.8920.8870.8850.8740.8520.8380.8140.772波长520nm522nm524nm526nm528nm530nm532nm534nm536nm538nm吸光度 0.7440.688 0.658 0.621 0.562 0.525 0.477 0.428 0.391 0.353最大吸 收波长选择最大吸收波长λmax=504nm 波长480nm482nm484nm486nm488nm490nm492nm494nm496nm498nm吸光度 0.814 0.8180.8220.8270.8360.8420.8530.8570.8650.876波长500nm502nm504nm506nm508nm510nm512nm514nm516nm518nm吸光度 0.884 0.8880.890.8850.8810.8660.8540.830.8150.776波长520nm522nm524nm526nm528nm530nm532nm534nm536nm538nm吸光度 0.7250.701 0.665 0.619 0.569 0.521 0.463 0.446 0.382 0.356最大吸 收波长选择最大吸收波长λmax=504nm 波长 480nm 482nm 484nm 486nm 488nm 490nm 492nm 494nm 496nm 498nm 吸光度 0.803 0.806 0.809 0.816 0.819 0.831 0.837 0.845 0.854 0.861 波长500nm502nm 504nm 506nm 508nm 510nm 512nm 514nm 516nm 518nm 吸光度 0.865 0.87 0.871 0.866 0.86 0.848 0.832 0.819 0.79 0.75 波长520nm522nm524nm526nm528nm530nm532nm534nm536nm538nm三者的吸收曲线比较如下：如图所示，选择吸收峰的吸光度相对较大且波峰峰形相对平滑的吸收曲线收对应的pH,即适当的缓冲液酸度选择pH=4.6。
二、显色剂邻二氮菲的用量选择:1.按下表计入显色剂邻二氮菲的量，在最大吸收波长处测得各自的吸光度，探究加入量何时可让显色反应完全，即显色剂饱和。
标号 1 2 3 4 5 6标准铁溶液0.00ml 5.00ml 5.00ml 5.00ml 5.00ml 5.00ml吸光度0.731 0.68 0.641 0.596 0.563 0.507 0.471 0.435 0.383 0.334最大吸收波长选择最大吸收波长λmax=504nm盐酸羟胺溶液1.00ml 1.00ml 1.00ml 1.00ml 1.00ml 1.00ml 邻二氮菲溶液 同待测液加入量2.00ml 4.00ml 6.00ml 8.00ml 10.00ml 醋酸盐缓冲液 5.00ml5.00ml5.00ml5.00ml5.00ml5.00ml说明以上溶液移至50ml 容量瓶，蒸馏水定容至50ml2.找最大吸收波长：波长480nm482nm 484nm 486nm 488nm 490nm 492nm 494nm 496nm 498nm 吸光度 0.669 0.673 0.68 0.686 0.691 0.7 0.704 0.713 0.719 0.73 波长500nm502nm 504nm 506nm 508nm 510nm 512nm 514nm 516nm 518nm 吸光度 0.7360.74 0.742 0.74 0.74 0.725 0.716 0.7 0.691 0.646 波长520nm522nm 524nm 526nm 528nm 530nm 532nm 534nm 536nm 538nm 吸光度 0.6170.5890.550.5210.4770.4670.4140.3560.3330.294最大吸 收波长选择最大吸收波长λmax=504nm λmax=504nm3.A-V 曲线制作：在选定的最大吸收波长504nm 处，用1cm 比色皿，以1号溶液作为参比溶液，分别测定2~6号溶液的吸光度，以吸光度值为纵坐标,邻二氮菲的加入体积为横坐标绘制A-V 曲线。
（1）A-V 曲线1:同理：邻二氮菲分别加入3ml 、4ml 、5ml 、6ml 、7ml 、8ml 时：(2)A-V 曲线2：编号 2 3 4 5 6 吸光度0.7730.8960.890.8950.899编号 2 3 4 5 6 7 吸光度0.8181.2291.4791.4841.491.498由A-V曲线1、2可知，邻二氮菲的量在5ml左右就达到了饱和状态，为避免加入过量的造成干扰，因此确定邻二氮菲的加入量在5ml时为最佳值。
三、探个索测量微量铁的最佳范围，以更好的测量待测铁溶液的浓度：1.按照下表分别配制加入不同体积的铁标准溶液的系列溶液。
标号 1 2 3 4 5 6标准铁溶液0.00ml 1.00ml 2.00ml 3.00ml 4.00ml 5.00ml 盐酸羟胺溶液 1.00ml 1.00ml 1.00ml 1.00ml 1.00ml 1.00ml 邻二氮菲溶液 5.00ml 5.00ml 5.00ml 5.00ml 5.00ml 5.00ml 醋酸盐缓冲液 5.00ml 5.00ml 5.00ml 5.00ml 5.00ml 5.00ml 说明以上溶液移至50ml容量瓶，蒸馏水定容至50ml系列标准溶液浓度0mol/l 2×10-5mol/l 4×10-5mol/l 6×10-5mol/l8×10-5mol/l 10×10-5mol/l2.吸收曲线绘制：用1cm 的比色皿，以1号溶液作为参比溶液，测定4号溶液在不同波长下的吸光度，以吸光度为纵坐标，波长为横坐标制图，绘制吸收曲线，并从吸收曲线上找出最大吸收波长。
得到吸收曲线如下：波长480nm482nm 484nm 486nm 488nm 490nm 492nm 494nm 496nm 498nm 吸光度 0.8320.8360.840.8440.8520.8580.8670.8730.8830.892波长 500nm 502nm 504nm 506nm 508nm 510nm 512nm 514nm 516nm 518nm吸光度 0.897 0.901 0.901 0.898 0.893 0.883 0.863 0.84 0.832 0.772 波长520nm522nm524nm526nm528nm530nm532nm534nm536nm538nm吸光度 0.7420.7 0.675 0.625 0.592 0.542 0.498 0.44 0.39 0.36最大吸收波长选择最大吸收波长λmax= 504nm3.标准曲线制作：在选定的最大吸收波长处，用1cm比色皿，以1号溶液作为参比溶液，分别测定2~7号溶液的吸光度，以吸光度值为纵坐标，系列标准溶液的浓度为横坐标绘制标准曲线。