食用菌生产技术 食用菌的菌种保藏

实验六食用菌菌种保藏

一,实验目的和内容

目的:了解并掌握菌种保藏的常用方法及其优缺点.

内容:1,学习斜面传代保藏方法.

2,学习液体石蜡保藏方法.

二,实验材料和用具

斜面菌种;原种；栽培种；老化菌种；干缩菌种；污染菌种

无菌水,液体石蜡,;

无菌试管,无菌滴管,接种环,干燥器,冰箱等,

三, 操作步骤

下列各方法可根据实验室具体条件与需要选做.

(一)斜面传代保藏法

l.贴标签取各种无菌斜面试管数支,将注有菌株名称和接种日期的标签贴上,贴在试管斜面的正上方,距试管口2～3cm处.

2.斜面接种将待保藏的菌种用接种环以无菌操作法移接至相应的试管斜面上,；

3.培养：将菌种置于20℃-28℃培养5～7d.

4.保藏斜面长好后,可直接放入4℃冰箱保藏.为防止棉塞受潮长杂

菌,管口棉花应用牛皮纸包扎,或换上无菌胶塞,亦可用熔化的固体石蜡熔封棉塞或胶塞.

保藏时间依种类而不同，可保存2～6个月,移种一次;.此法的缺点是容易变异,污染杂菌的机会较多.

(二)液体石蜡保藏法

l.液体石蜡灭菌在250mL三角烧瓶中装入100mL液体石蜡,塞上棉塞,并用牛皮纸包扎,12l℃湿热灭菌30min,然后于40℃温箱中放置l4d(或置于105～110℃烘箱中lh),以除去石蜡中的水分,备用.

2.接种培养同斜面传代保藏法.

3.加液体石蜡用无菌滴管吸取液体石蜡以无菌操作加到已长好的菌

种斜面上,加入量以高出斜面顶端约1cm为宜.

4.保藏棉塞外包牛皮纸,将试管直立放置于4℃冰箱中保存.

利用这种保藏方法,可保藏1～2年.

5. 活化恢复培养用接种环从液体石蜡下挑取少量菌种,在试管壁上

轻靠几下,尽量使油滴净,再接种于新鲜培养基中培养.由于菌体表面粘有液体石蜡,生长较慢且有粘性,故一般须转接2次才能获得良好菌种.

(三) 原种保藏法

l. 原种制作按原种操作步骤制作谷粒原种或短枝条原种；

2. 贴标签将注有菌株名称和接种日期的标签贴在菌种瓶或袋上,

3. 培养：将菌种置于适宜温度下培养20～60d.

4.保藏：挑选生长健壮的,可直接放入4℃冰箱保藏.为防止棉塞受潮长杂菌,瓶口棉花应用牛皮纸包扎,或用熔化的固体石蜡熔封棉塞。

保藏时间依种类而不同，可保存6～12个月,移种一次;.此法的缺点是容易老化,四问题和思考

1.如何防止菌种管棉塞受潮和杂菌污染

2. 你选用什么方法保存菌种试设计一个实验方案.

3.试述各种菌种保藏方法的优,缺点.