山药多糖 结构
山药多糖的结构鉴定
山药多糖的结构鉴定摘要:本实验对新鲜山药分离纯化得到的多糖进行结构表征。
通过对山药多糖的结构分析,为进一步利用山药开发医药、保健食品提供基础。
通过标准曲线分析得到山药多糖的糖醛酸含量为12.0%,乙酰基含量为18.5%。
傅立叶红外光谱结果分析表明多糖中含有糖醛酸,与化学法分析结果一致。
气相色谱-质谱联用分析结果显示山药多糖是由两种单糖组成的杂多糖,分别为葡萄糖和半乳糖,且摩尔比为1.52:1。
将样品甲基化后进行GC-MS分析得到3种类型的残基组成,分别为1,3-葡萄糖残基、-1-半乳糖残基、-1,6-半乳糖残基。
关键词:山药多糖;结构;仪器分析STRUCTURAL CHARACTERIZATION OF POL YSACCHARIDE FROM CHINESE YAMAbstract: The structure characterization of polysaccharide from Chinese Yam was analyzed in this study, which can support further development as healthcare food and pharmaceuticals in the future. The main contents and results are as follows: The chemical analysis results showed that the pure polysaccharide contained 12.0% uronic acid and 18.5% acetyl. Fourier infrared transformation analysis showed that the purified polysaccharide had the characteristic absorptive peaks, and that it contained uronic acid. Based on methylation and GC-MS analysis, the purified polysaccharide was composed of glucose and galactose with a molar ratio of 1.52:1, mainly including 1,3-linked-glc, 1-linked-gal and 1,6-linked-gal.Keywords: Yam polysaccharide; structure; instrumental analysis1.引言1.1 研究背景及意义山药是薯蓣属植物的地下块茎。
2017营养师论文范例2-山药中活性多糖的功效
山药中活性多糖的功效某……单位……. 邮编…….摘要:本文主要介绍了山药活性物质多糖的功能和山药的发展前景。
关键词:山药多糖;功能;发展前景1 前言山药,原名薯蓣,又名大薯、山薯、佛掌薯、山芋、薯药等,为一年生或多年生缠绕性藤本植物,在我国栽培种植分布广、面积大、种植历史悠久,主产区分布在广东、广西、河南、河北、陕西等省(区)。
山药不仅含有蛋白质、糖类、维生素、脂肪、胆碱和淀粉酶等成分[1],还含有碘、钙、铁和磷等人体不可缺少的无机盐和微量元素。
每百克山药(干)热量324千卡、能量1356 KJ、蛋白质9.4 g、脂肪1g、碳水化合物70.8 g、膳食纤维1.4 g、灰分3.8 g、硫胺素0.25 ug、核黄素0.28mg、维生素E0.44mg、钙62mg、磷17mg、钾269mg、钠104.2mg、铁0.4 mg、锌0.95 mg、硒3.08ug、铜0.63 mg、锰0.23 mg、胡萝卜素0.02 mg、维生素B10.08 mg、维生素B20.02mg、维生素C0.4 mg、尼克酸0.3 mg。
山药含21 种营养成分,16种氨基酸,胆碱、蛋白质、多酚氧化酶、维生素C、甘露多糖,精氨酸、尿囊素和3、4―二羟基苯乙胺等,山药中含有皂苷元,是合成冠心病的新药的主要原料。
山药含铁量是人参的3~4 倍,常作滋补强壮剂入药,常食山药能够降低脂肪酸的沉积,促进脂肪酸的分解功能。
山药味甘、性平,入肺、脾、肾经;不燥不腻;具有健脾补肺、益胃补肾、固肾益精、聪耳明目、助五脏、强筋骨、长志安神、延年益寿的功效。
主治脾胃虚弱、倦怠无力、食欲不振、久泄久痢、肺气虚燥、痰喘咳嗽、肾气亏耗、腰膝酸软、下肢痿弱、消渴尿频、遗精早泄、带下白浊、皮肤赤肿、肥胖等病症。
《本草纲目》概括五大功用“益肾气,健脾胃,止泄痢,化痰涎,润皮”山药煮粥或者用冰糖煨熟后服用,对身体差、肠炎、肾亏等慢性病均有疗效。
《名医别录》说:“补五劳七伤,去冷风,镇心神,安魂魄,补心气不足,开达心孔、多记事”。
山药有效成分及药理作用的研究进展
山药有效成分及药理作用的研究进展摘要:山药为薯蓣科,具有补肾易肺生津之功效,作为中国传统中医药中一味常用的药材,有极高的营养价值,且价格低廉,适于各种人群食用。
山药功效极多其主要成分包括:多糖、皂苷、山药素、粗纤维、果胶、糖蛋白、黏液质等。
具有美容养颜、增强体质、促进消化等功效关键词:山药;多糖;药理作用有效成分:1.多糖山药多糖可用于预防癌症,同时对免疫调节具有很理想的疗效。
山药多糖由多种糖类组成结构较为复杂,因此山药具有较大的分子质量,且分子质量大小不等。
组成山药的多糖主要有:杂多糖、均多糖、蛋白复合多糖等。
蛋白质构成了山药黏液质的主要成分,甘露醇次之,甘露聚糖和植酸构成了山药黏液质B的复合物。
研究人员先后从山药中提取出山药多糖RDPS—1、山药多糖RP等,研究表明,多糖在山药中含量丰富,含量较高,应该为山药主要药理作用的主要有效成分。
1.微量元素多位研究人员实验证实山药内含有较为丰富的微量元素,其机制可能为山药对微量元素的富集。
研究表明山药含有29种元素,其中磷的含量最高。
不同的发射光谱得到的结果不同,通过离子发射光谱检测到Cu、Co、Zn、Fe等含量仅次于磷。
而通过火焰原子吸收光谱法得到的结果是K、Ca的含量最高,而Zn、Cu的含量较之离子发射光谱得到的结果则相对较低。
研究还发现不同地域土壤和不同品种的山药对各种无机元素的富集量和能力也有很大不同。
1.蛋白质与氨基酸各国研究数据表明山药中氨基酸的含量约达到了1/10,种类在15种以上,各类氨基酸的含量也不尽相同。
丝氨酸、精氨酸在绝大多数山药的游离氨基酸中含量排名第一。
不同品种的山药中所含氨基酸种类都很丰富,约在15-17种以上。
其总含量为2.86%~6.64%,平均含量为4.95%。
1.尿囊素山药中含有尿囊素,尿囊素可广泛应用于临床,具有消炎杀菌、缓解疼痛的作用,此外还可用于麻醉。
尿囊素对治疗皮肤性疾病有较好的作用,其使细胞生长增殖的作用也可用于损伤皮肤的修复。
山药多糖的制备及其体外抗氧化活性
21 0 0年 3月
ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ
化
学 研
究
中 国科 技 核 心 期 刊
h y@ h n . d . n xj e u eu c
C H EM I CAI
RESEARC H
山药 多糖 的 制备及 其体 外抗 氧化 活 性
尚晓娅, 锦, 1徐春兰, 任 曹 , 牛卫宁, 钦传光
( 北 工 业 大 学 生 命 科 学 院 ,陕西 西 安 7 0 7 ) 西 10 2
摘
要: 提取 L药 粗 多 糖 并 进 行 精 制 , 析 了 山药 多糖 的单 糖 组 成 , 研 究 了 山 药 多 糖 的 体 外 抗 氧 化 活 性 .结 果 U 分 并
表 明 ,L l 药精 制 多糖 纯 度 较 高 , I 由鼠 李糖 、 拉 伯 糖 、 露 糖 、 萄 糖 和 半 乳 糖 组 成 .体 外 抗 氧 化 活 性 测 试 结 果 表 阿 甘 葡
关键词 : 山药 ; 糖 ; 备 ; 氧化 活性 多 制 抗
中 图分 类 号 : 8 ; 8 TQ 2 1 R 2 4 文献标识码 : A 文 章编 号 : 0 8 1 1 f 0 0 0 — 0 7 —0 1 0 — 0 1 1 ) 2 0 2 5 2
Pr p r to n e a a i n a d Anto i a tPr p r i s o l s c h r d s i x d n o e te f P0 y a c a i e
f o Di s o e r m o c r a Oppo i e Th n o s s t u b Ro t
SHANG a — a Xio y ,REN Jn,CAO n i Ga g,XU u —a ,NI W e nn ,QI Ch a — u n Ch n ln U i ig N u n g a g
山药——化学成分,药理作用,医药应用等
制药0702 制药0702 李想 龚援 徐杰 邹维波 2009.10
1
主要内容
科属 种类和分布 山药的形态特征 山药种质的鉴别和鉴定 山药的加工 化学成分研究 山药的药理作用 山药的开发利用研究
2
科属
域: 真核域 Eukarya 界: 植物界 Plantae 门: 被子植物门 Magnoliophyta 纲: 单子叶植物纲 Liliopsida 目: 薯蓣目 Dioscoreales 科: 薯蓣科 Dioscoreaceae
18
薯蓣皂苷元的含量测定 皂苷元的含量测定
薯蓣皂苷元的含量测定方法有多种:重量法,比色法,薄层扫描法, 薯蓣皂苷元的含量测定方法有多种:重量法,比色法,薄层扫描法, 气相色谱法,高效液相色谱法等。在现代的分析方法中, 气相色谱法,高效液相色谱法等。在现代的分析方法中,普遍采用的 是高效液相色谱法( ),其中以反相高效液相色谱法 是高效液相色谱法(HPLC),其中以反相高效液相色谱法(RP),其中以反相高效液相色谱法( HPLC)为多。赵景婵等采用正相高效液相色谱法测定穿龙薯蓣中薯 )为多。 蓣皂苷元的含量, 色谱柱, 蓣皂苷元的含量,Shim-pack CLC-Sil色谱柱,石油醚:异丙醇(98: 色谱柱 石油醚:异丙醇( : 2)为流动相,检测波长 线性关系较好。 )为流动相,检测波长206nm,线性关系较好。都述虎等用 线性关系较好 都述虎等用RPHPLC测定穿龙薯蓣中薯蓣皂苷元的含量,uBOndapak C18 柱,甲 测定穿龙薯蓣中薯蓣皂苷元的含量, 测定穿龙薯蓣中薯蓣皂苷元的含量 醇为流动相, 检测器, 醇为流动相,DAD检测器,检测波长 检测器 检测波长208nm,外标法测定。在反相 ,外标法测定。 高效液相色谱法中,流动相多为乙晴-水系统 可用C8 C18柱,DAD 水系统, 高效液相色谱法中,流动相多为乙晴 水系统,可用 柱 检测器。由于薯蓣皂苷元为甾烯醇,结构中没有共轭, 检测器。由于薯蓣皂苷元为甾烯醇,结构中没有共轭,只有紫外末端 吸收, 检测器的检测波长多在203到210nm之间,所以检测灵敏 之间, 吸收,DAD检测器的检测波长多在 检测器的检测波长多在 到 之间 度偏低,且基线易漂移,尤其是在梯度洗脱时。 度偏低,且基线易漂移,尤其是在梯度洗脱时。蒸发光散热检测器 (ELSD)则能很好的解决这一问题,其响应值只与样品品质有关而与 则能很好的解决这一问题, 则能很好的解决这一问题 紫外吸收无关。反相高效液相色谱法以其简单易行,精确度高, 紫外吸收无关。反相高效液相色谱法以其简单易行,精确度高,分离 度好,专属性强等优点被分析人员广泛采用。 度好,专属性强等优点被分析人员广泛采用。
怀山药主要成分测定1
第二章:怀山药主要成分测定2.1蛋白质含量测定:凯氏定氮法试样处理:称取0.2g ~2. 00 g固体试样或2. 00 g ~5. 00 g半固体试样或吸取10.00 mL~25. 00 mL液体试样(约相当氮30 mg~40 mg),移人干燥的100 mL或500 mL定氮瓶中,加人研碎的0.5g硫酸铜,10 g硫酸钾及20 mL浓硫酸,稍摇匀后于瓶口放一小漏斗,将瓶以45°角斜支于有小孔的石棉网上。
小心加热,待内容物全部炭化,泡沫完全停止后,加强火力,并保持瓶内液体微沸,至液体呈蓝绿色澄清透明后,再继续加热30分钟。
取下放冷,小心加20mL蒸馏水。
放冷后,移人100 mL容量瓶中,并用少量水洗定氮瓶,洗液并人容量瓶中,再加水至刻度,混匀备用。
同时做试剂空白试验。
测定:装好定氮装置,于水蒸气发生瓶内装水至三分之二处,加人数粒玻璃珠,加甲基红指示液数滴及数毫升硫酸,以保持水呈酸性,用调压器控制,加热煮沸水蒸气发生瓶内的水。
向接收瓶内加人10 mL硼酸溶液(20g/L)及1滴~2滴混合指示液,并使冷凝管的下端插人液面下,准确吸取10 mL试样处理液由小漏斗流人反应室,并以10 mL 水洗涤小烧杯使流人反应室内,棒状玻塞塞紧将10 mL氢氧化钠溶液(400 g/L)倒人小玻杯,提起玻塞使其缓缓流人反应室,立即将玻塞盖紧,并加水于小玻杯以防漏气。
夹紧螺旋夹,开始蒸馏。
蒸馏5 min。
移动接收瓶,液面离开冷凝管下端,再蒸馏1 min。
然后用少量水冲洗冷凝管下端外部。
取下接收瓶。
以硫酸或盐酸标准滴定溶液(0. O5mol/L)滴定至灰色或蓝紫色为终点。
同时准确吸取10 mL 试剂空白消化液按上述操作。
2.2山药多糖的含量测定:多糖含量的测定方法采用苯酚-硫酸法苯酚一硫酸法是利用多糖在浓硫酸水合产生高温的作用下,迅速发生水解反应释放出单糖,并迅速脱水生成糠醛衍生物,然后与苯酚缩合生成490nm处有最大吸收峰的有色化合物来进行测定的。
山药多糖对Ⅰ型糖尿病大鼠血糖血脂及肝肾氧化应激的反应
山药多糖对Ⅰ型糖尿病大鼠血糖血脂及肝肾氧化应激的反应引言山药( Rhizoma Dioscoreae) 是我国传统中药,别名怀山药、土薯、山薯、山芋等,其营养丰富,具有补脾养胃,生津益肺,补肾涩精等很重要的保健与药用价值. 山药的化学成分主要有山药粘液质、山药多糖、淀粉、氨基酸、脂肪酸、微量及常量元素、薯蓣皂苷、胆碱、多巴胺、山药碱、淀粉酶、多酚氧化酶、磷酸酶、维生素 C 等. 现代药理研究表明,山药具有抗衰老、抗氧化、提高应激力、增强免疫力、降血脂、抗肿瘤、抗突变等功效,且主要活性成分是山药多糖( Rhizoma Dioscoreae polysaccharide,简称RDP) . 何云报道了在CCl4诱导的昆明小鼠急性肝损伤模型中,在给予山药多糖处理后,小鼠血清中丙氨酸转氨酶和天冬氨酸转氨酶活性,肝、心肌、肾、脑和血清中的MDA 都显著降低. 此外,有文献报道山药多糖能剂量依耐性地降低四氧嘧啶诱导的Ⅰ型糖尿病大鼠的血糖水平.糖尿病是严重危害人类健康的代谢性疾病,因其发病机理不同主要分为Ⅰ型和Ⅱ型. Ⅰ型糖尿病也称为胰岛素依赖型糖尿病,多发生在儿童和青少年,多饮、多尿、多食及消瘦症状明显,血糖水平高,体内胰岛素绝对不足,容易发生酮症酸中毒,必须注射胰岛素治疗才能获得满意疗效,否则将危及生命. 其发病机制主要是自身免疫系统被破坏,即胰腺细胞被破坏,导致机体胰岛素分泌下降或缺乏,此外还受遗传和环境因素的影响.目前国内外诱导糖尿病模型的药物主要有链脲佐菌素( STZ) 和四氧嘧啶. STZ 是一种氨基葡萄糖-亚硝基脲,对一定种属动物的胰岛细胞有选择性破坏作用,能诱发许多动物产生糖尿病,一般采用大鼠和小鼠制造动物模型. STZ 通过葡萄糖转运蛋白2( GLUT2) 进入胰腺细胞,一方面造成DNA 的甲基化和片段化,另一方面产生一系列的氧自由基,从而对细胞产生毒性. Ⅰ型糖尿病与Ⅱ型糖尿病动物模型的制备与STZ 的给药方式有关,采用小剂量分次给药方法可建立与人类Ⅱ型糖尿病表现相似的大鼠糖尿病模型,采用较大剂量一次性注射的给药方法则可建立与人类Ⅰ型糖尿病表现相似的大鼠糖尿病模型. 本实验采用大剂量一次性注射的方法建立Ⅰ型糖尿病模型大鼠来研究山药多糖对糖尿病血糖血脂的影响.1 材料与方法1. 1 试剂山药粗多糖由本实验室苗潇磊师兄提取制备,本实验对该粗多糖进行了如下处理: 1 000 g山药粗多糖浸膏于60 ℃混悬于95%乙醇( 2 L) 4 h4℃放置过夜取沉淀冷冻干燥实验用山药多糖RDP( 359 g) . 经测定,实验用RDP 中总多糖含量为41. 9%,蛋白含量为29. 7%,还原性单糖含量为31. 9%.检测大鼠空腹血糖( FBG) 、血清糖化血红蛋白( GHb) 、甘油三酯( TG) 、总胆固醇( TC) 、高密度脂蛋白胆固醇( HDL-C) 、低密度脂蛋白胆固醇( LDL-C) ,以及组织中丙二醛( MDA) 、超氧化物歧化酶( SOD) 、过氧化氢酶( CAT) 、谷胱甘肽过氧化物酶( GSH-Px) 、还原型谷胱甘肽( GSH) 的试剂盒均购自南京建成生物工程研究所( 江苏,中国) . 链脲佐菌素购自Sigma ( Saint Louis,MO,USA) . 强生稳豪型( ONETOUCHUltra) 血糖试纸购自Johnson( USA) .1. 2 糖尿病大鼠造模及动物处理45 只SPF 级雄性SD 大鼠( 180 200 g) 购于湖北省武汉疾病预防控制中心( 合格证号: SCXK( 鄂) 2008-0005,No. 4200695012) . 大鼠购回后适应喂养一周,此阶段平均每 3 天清理鼠笼一次,之后随机分为造模组29 只和正常组18 只. 大鼠隔夜禁食12 h 后,造模组大鼠按40mg /kgbw 一次性腹腔注射STZ ( 用pH 4. 4 柠檬酸缓冲液配置浓度为1%的STZ 溶液) ,每天一次,连续两次,正常组大鼠则注射等体积的柠檬酸缓冲溶液,于注射7 d 后取尾静脉血,测造模组大鼠血糖值.随机血糖值16. 7 mmol /L,且伴有明显多饮、多尿、多食,且体重下降的大鼠,确定为糖尿病造模成功,血糖值 16.7 mmol /L 的大鼠弃之. 整个实验期间所有的大鼠均分笼饲养,饲养温度保持在20 25 ℃之间,相对湿度在40% 70%之间,自由取食、进水,昼夜交替时间为12 h /12 h.在确定造模成功血糖稳定后,将实验大鼠随机分为 6 组: 正常对照组( normal control,NC) ; 正常给药低剂量组( NC-80,每日按照80 mg /kgbw 灌胃山药多糖溶液) ; 正常给药高剂量组( NC-240,每日按照240 mg /kgbw 灌胃山药多糖溶液) ; 糖尿病对照组( diabetic control,DC) ; 糖尿病给药低剂量组( DC-80,每日按照80 mg /kgbw 灌胃山药多糖溶液) ; 糖尿病给药高剂量组( DC-240,每日按照240 mg /kgbw灌胃山药多糖溶液) ,每组5 只大鼠,连续给药4 周. 山药多糖溶液用生理盐水配制,各组大鼠均自由饮水及进食.4 周后,动物禁食16 h,自由饮水,次日称重后用50%葡萄糖溶液按照2 g /kg 体重进行灌胃. 分别于葡萄糖灌胃后0,30,60,90 及120 min 尾尖针刺取血,用血糖仪测定血糖; 根据口服糖耐量试验( OGTT) 结果绘制血糖-时间曲线,实验结果用曲线下面积来表示. 次日大鼠禁食12 h,各组大鼠眼眶取血,部分抗凝测定糖化血红蛋白水平,部分于4 000 r /m 离心10 min 分离出血清测定血糖及血脂水平,然后颈椎脱臼处死,解剖后检测各主要器官发生病变情况,分离出肝脏、肾脏组织,剪取少量肝脏、肾脏保存于- 80 ℃超低温冰箱中,用于组织中抗氧化酶及MDA 的测定.1. 3 数据处理结果以平均数标准差表示,组间比较使用Student-Newman-Keuls 多重比较以计算显著性差异,当p 0. 05,则具有统计学意义; 当p 0. 01,则具有显著性差异.2 实验结果2. 1 山药粗多糖对Ⅰ型糖尿病大鼠血糖、血脂及GHb 的影响山药多糖对Ⅰ型糖尿病大鼠空腹血糖( FBG) 、血脂( TC、TG、LDL-C、HDL-C) 及GHb 的影响见表1. 与NC 组大鼠相比,DC 组大鼠体内出现糖脂代谢紊乱,其FBG、TC、TG、LDL-C 及GHb 均有显著升高( p 0. 01 或0. 05) ,HDL-C 无明显变化,表明大鼠造模成功. 与DC 组相比,DC 给药组FBG、TC、TG、LDL-C 及GHb 水平均剂量依赖性降低,HDL-C 水平剂量依赖性升高( p 0. 05) . 与NC 组相比,NC 高剂量给药组FBG 及TC 有一定程度降低作用,其他无明显变化.2. 2 山药粗多糖对Ⅰ型糖尿病大鼠OGTT 的影响各实验组大鼠口服葡萄糖耐量实验结果见图1. 与NC 组相比,DC 组大鼠在空腹、30、60、90、120 min 血糖浓度都显著高于正常组,并且其曲线下面积( AUC0 120 min) 也显著高于正常组( p 0. 001) . 与DC 组相比,糖尿病大鼠在经过RDP 各剂量治疗后,血糖浓度升高现象均得到较明显改善,DC-80 组大鼠曲线下面积具有显著性降低( p 0. 05) . 实验结果表明,RDP 显著改善了由STZ 所诱导的糖尿病大鼠的糖耐量受损.2. 3 山药粗多糖对Ⅰ型糖尿病大鼠肝脏抗氧化酶及MDA 的影响RDP 给药后对Ⅰ型糖尿病大鼠肝脏氧化应激的影响见表2. 与NC 组相比,DC 组大鼠的肝脏抗氧化酶水平显著下降( p 0. 05) ,脂质过氧化水平MDA 显著提高( p 0. 05) ,这与糖尿病大鼠体内产生高氧化应激相符. 与DC 组相比,糖尿病大鼠在给予RDP( 高剂量240 mg /kg. bw) 4 周后,其肝脏抗氧化酶( CAT、GSH-Px 和SOD) 活性及GSH 含量均有一定程度上升( p 0. 05) ,脂质过氧化MDA 水平显著降低( p 0.01) . 此外,与NC 组相比,NC 大鼠仅高剂量给药后肝脏MDA 水平有一定程度降低( p 0. 05) ,其他指标均无变化.3 讨论糖尿病是一种最常见的人类代谢性疾病,其特点是胰岛素分泌缺陷和/或激活缺陷引起的高血糖.糖尿病血糖的降低是糖尿病治疗的主要目标,而糖化血红蛋白能很好地反映糖尿病状态下的平均血糖水平.。
中药山药的成分及药理学研究
118山药是传统的保健食品之一,也是药食同源的植物,在我国很多地方都可种植。
山药味甘平,入肺、归脾、益肾,具有益气养阴之功效,可以治疗慢性肠炎、脾虚久泻、肺虚咳喘等症。
一、中药山药的成分1.脂肪酸。
经气相色谱-质谱法检测,山药中共含有27种脂肪酸,其中饱和脂肪酸18种,在脂肪酸总量中约占51%,主要成分为软脂酸;不饱和脂肪酸9种,在脂肪酸总量中约占49%,主要成分为油酸、亚油酸及亚麻酸。
在所有山药中,怀山药的脂肪酸含量最多,这也是怀山药具有营养保健作用的原因之所在。
2.蛋白质和氨基酸。
山药中富含的蛋白质具有抗羟自由基和DPPH自由基活性的功效,还具有碳酸酐酶活性,可以抑制胰蛋白酶的活性,调节人体的酸碱平衡,并对呼吸系统起到保护作用。
山药中含有多种氨基酸,其中包括多种人体必需的氨基酸,并且山药中的总氨基酸含量越丰富,必需氨基酸的含量就越高。
例如,新鲜怀山药中的粗蛋白含量为3.59%,总氨基酸含量为2.71%,其中必需氨基酸的含量为1.05%,氨基酸种类高达17种之多。
在山药所含的游离氨基酸中,精氨酸和丝氨酸的含量最多,对新鲜山药进行水解氨基酸检测,发现谷氨酸的含量最高,天冬氨酸及精氨酸次之。
另外,部分山药还含有抗突变物质,长期食用有助于预防各类肿瘤疾病。
3.酯类。
山药中含有棕榈酸、-胡萝卜苷、柠檬酸双甲酯、壬二酸、油酸等12种酯类化合物。
4.多糖类。
多糖是山药的主要活性成分,具有抗肿瘤、调节免疫功能的作用。
山药多糖的结构及组成较为复杂,不同的实验分离方式可以提取出不同的多糖成分,如均多糖、杂多糖、糖蛋白等,这些多糖的相对分子质量也各不相同,从几千到几百万都有。
5.尿囊素。
尿囊素是一种乙内酰脲衍生物,在医药、农业、化妆品等领域都有着广泛的应用。
山药中的尿囊素具有麻醉、消炎等功效,有望在鱼鳞病、表皮角化等疾病中药山药的成分及药理学研究的治疗中发挥作用。
近年来,科学家陆续发现了尿囊素的多种药用功能,比如对糖尿病、肝硬化、骨髓炎等疾病都有一定的治疗效果。
山药多糖RDPS_I组分的纯化及理化性质的研究_赵国华
山药多糖RDPS -I 组分的纯化及理化性质的研究*赵国华1 李志孝2 陈宗道11(西南农业大学食品科学学院,重庆,400716)2(兰州大学应用有机化学国家重点实验室,兰州,730070)摘 要 山药经水浸提分离,浸提液脱蛋白,透析,乙醇沉淀物经DE AE -52纤维素及Sephadex G -100色谱纯化得白色粉末状多糖RDPS -I 。
Sepharose CL -6B 凝胶色谱分析表明RDPS -I 为多糖纯品。
定性化学反应表明RDPS -I 不含核酸、蛋白质、酚类物质和糖醛酸,是一种非淀粉类中性纯粹多糖,比旋光度[α]22D (H 2O )为+188.4(c =0.8),特性粘度[η]为16.48×10-3(mL /g ),相对分子质量为42200,完全酸水解后纸层析及气相色谱分析确定RDPS -I 的糖基组成为葡萄糖、甘露糖和半乳糖,摩尔比为1∶0.37∶0.11。
关键词 山药,多糖,理化性质 第一作者:博士,讲师。
*国家自然科学基金重点资助项目(No .39730480) 收稿时间:2002-01-11,改回时间:2002-09-08 山药,拉丁名为Dioscorea opposita Thunb ,薯蓣科薯蓣属植物,《本草纲目》对其的记载是“益肾气,健脾胃,止泻痢,化痰涎,润皮毛”,现代医学研究表明,山药具有多种生物活性,如延缓衰老[1],防治糖尿病,抗氧化,促进免疫功能[21],抗突变[3],降血糖[4]等功能。
并认为山药中的主要功效成分是山药多糖。
但有关山药多糖的分离纯化和理化性质只有一些较为粗略的研究报道,缺乏系统而深入的研究。
本文详细研究了山药水溶性多糖组分RDPS -I 的分离纯化方法和它的理化性质,为山药多糖的进一步研究和利用奠定了基础。
1 材料与方法1.1 供试材料山药,由西南农业大学实验农场提供。
1.2 主要试剂DE AE -纤维素(DE -52)为Whatman 公司产品,Sephadex G -100,Sepharose 和已知分子质量的Dextran 为Phar macia 公司产品,标准单糖为E .Merck 公司产品。
山药多糖的生物活性及研究进展
功能 , 山药多糖作 为山药主要的活性成分( 孙峰等 , 2 0 0 6 ) 。现就山药多糖的理化性质及生物学功能作
一
综述 , 并展望其应用前景。 1山药 多糖 的理化 性质
【 收稿 日 ̄] 2 0 1 4 —1 — 0 9
( 2 0 0 6 ) 也曾纯化分离出 2 种山药多糖 , 分别命名为 D T A和 D T B ; 显示 D T A为单一多糖 , 由果糖和葡萄
化痰涎 , 润皮毛” 之功效 。 山药含有淀粉 、 蛋白质、 淀 粉酶 、 脂肪 、 多糖 、 维生素 、 氨基酸和多种微量元素 ,
现代医学研究表 明, 山药具有多方面的生物活性和
成, 酸性多糖 Ⅱ是由阿拉伯糖 、 木糖 、 阿卓糖 、 葡萄
糖、 甘露糖组成。赵国华等( 2 0 0 3 ) 纯化出 1 种单一 多糖组分 , 单糖组成为葡萄糖 、 甘露糖和半乳糖 , 以 仅一 D 一 ( 1 —3 ) 一葡 聚糖 为 主链 , 在 6 - 0位有 O . r 一 D 一 ( 1 —2 ) 一 低聚甘露半乳糖支链 的杂多糖 。 蔡婀娜等
特优点 , 研究应用抗菌肽代替抗生素作饲料添加剂 极具 有很 广泛 的应 用前 景 。
参 考文献 : ( 略)
我国是养禽大国, 但禽产品出 口量在 国际市场
・
2 8・
广东饲料 第 2 3 卷第 2 期
2 0 1 4年 2 月
量 组仍 显 著 高于低 剂 量组 和 对 照组 ( 张红 英 , 2 0 0 7 ;
淋巴细胞包括 T淋 巴细胞和 B淋巴细胞 , 分别 由胸腺 、 法 氏囊和骨髓诱导 、 分化和发育而来 , 主要 存在于血液和外周免疫器官中。 山药多糖可以极显 著地提高 T 淋 巴细胞的增殖能力 , 高、 中、 低3 个剂 量均能引起 N K细胞活性 的极显著增高 , 其 中以中 剂量效果最好( 赵 国华等 , 2 0 0 2 ) 。陈写书等( 2 0 0 9 )
山药多糖的分离纯化及其结构鉴定
以及GC- MS分析测定该中性糖为葡萄糖和甘露糖组成, 其摩尔比为0.56∶0.44。红外光谱和NMR谱分析
显示该中性糖有α- 异构体吡喃己糖环, 它们归属为α- D- 葡萄糖和α- D- 甘露糖。
关键词: 山药; 多糖; 纯化; 结构
中图分类号: TS201
文献标识码: A
文章编号: 1005- 9989(2007)05- 0109- 04
ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ
分离纯化获得山药水溶性多糖的理化性质测定 显示: 硫酸- 苯酚反应和硫酸- 蒽酮反应呈阳性, 考 马斯亮蓝反应呈阴性, 这与山药水溶性多糖的紫外 扫描图所反应的在260nm和280nm处未见核酸和蛋白 质的特征峰的结果一致(见图3)。菲林试剂反应呈阴 性, 碘- 碘化钾反应呈阴性, 说明山药水溶性多糖中 不含淀粉。分离纯化获得山药水溶性多糖的比旋光 度[α]D为+162.5°。分离纯化获得样品的理化性质测定 结果显示, 样品纯度高, 属于水溶性中性多糖。
树莓多糖的提取率在3.44%到5.70%之间波动。
4 结论
本试验采用热水浸提法提取树莓多糖的最佳工 艺为温度100℃、提取时间60min、物液比为1∶10, 分 析表明温度因素是影响多糖提取率的主要因素, 此
条件下树莓多糖的提取率在3.44% ̄5.70%波动。
参考文献: [1] 田庚元.天 然 多 糖 的 研 究 与 应 用[J].中 草 药,2000,(10):40-
由图1可以看出, 在不添加离子强度的洗脱条件 下山药水溶性多糖在DEAE- Cellulose52上只有一个 峰, 而且收集该峰的糖液浓缩, 经Sephadex G- 100 (见图2)追踪检测, 仍然为一个峰, 这说明山药水溶 性多糖在经过DEAE- Cellulose 52柱即可完全分离。
山药的化学成分及多糖的提取和应用
山药的化学成分及多糖的提取和应用赵丽玲(浙江经贸职业技术学院,浙江杭州 310018)摘要:山药是薯蓣科多年生宿根植物山药(Dioscores oppositaThunb.)的块根,主产于河南、广东、广西等省,以河南焦作市(古怀庆府)所产最佳,又称“怀山药”。
《本草纲目》记载其能“益肾气,健脾胃,止泻痢,化痰涎,润皮毛”。
现代医学研究表明,山药具有增强免疫、抗氧化、抗衰老、抗肿瘤、降血糖等多种生物活性,其主要功效成分是山药多糖【1】。
研究表明山药多糖具有较显著的增强免疫、抗氧化、抗衰老、治疗糖尿病和抗肿瘤等作用。
关键词:山药、多糖、提取分离引言:山药是我国传统的药食同源食物之一。
主产于河南,湖南、湖北、江西等省区亦产。
以焦作一带出产的山药品质最好、药效最高,又称怀山药。
表面黄白色或淡黄色,有纵皱纹及须根痕。
去皮者称“光山药”,表面白色,光滑细腻,有微细维管束线纹。
质坚实,断面白色,粉质。
味微酸,带黏性。
本品性平,味甘。
用于治疗脾虚食少、久泻不止、慢性肠炎、肺虚喘咳、肾虚遗精、慢性肾炎、糖尿病、遗尿、白带等病症。
山药主要含有蛋白质、糖类、维生素、脂肪、胆碱和淀粉酶等成分,并含有碘、钙、铁和磷等人体不可缺少的微量元素,具有很高的营养价值及药用价值【2】。
1山药的化学成分研究1.1山药黏液质黏液质是一种多糖与蛋白质的复合体。
研究发现,山药的独特之处为山药含大量的黏液质,黏液质中含有人量的黏液蛋白质和黏液多糖。
在山药粘液质复合体中,量白质约占47.6%,多糖的含量约为52.%【3】。
近年来研究证明,山药黏液质可刺激和调节人体的免疫系数,增强人体的抵抗力。
同时还发现,它们能显著降低小鼠血糖黏度,增加血液中的白细胞,并增强白细胞的吞噬能力,因而可作为医治糖尿病和肿瘤化疗的辅助药。
1.2多糖山药多糖是山药目前公认的主要药效成分。
由于研究者所采用的提取分离方法的不同以及所用的山药材料不同,对于其组成及结构文献报导不一【4】。
山药多糖研究概述
阚建全等研 究发 现, 山药活性 多糖对3 种致突 变物及黄 曲霉毒 素的致突变
性均有 显著 的抑制 作用 。 明山药活性 多糖具 有抗突变 活性Байду номын сангаас 表 其作用机 制主要 是通 过抑 制突变物 对菌株 的致 突变 作用而 实现 的。 2 5 山药多糖 的肝损 伤保护作 用 孙 设宗等探 讨 山药多糖对 小 鼠C L 肝 损伤 的保护作 用及可 能作用机制 , C4 发现 山药 多糖可减 轻实 验性肝损 伤所致 炎性 反应 , 降低肝体 指数, 降低血清 中 A T S 活性和 M A L 、A T D 的含量 : 提高肝 细胞 中G H的含 量及 降低 MA的含 量 。 S D 表
0 3 : l 。再利用蒽 酮 B 1 7 0 1 1 硫酸 比色 ,以葡萄糖 作为对 照进行 凝胶色谱 分析 , 测 定 R P 2 的相对 分子质 量为 4 2 0 DS I 20。 顾林 等对水 溶中性 多糖的水解 产物进 行薄层 层析 ,初步 认为 山药水溶 性
自由基 的作用 ,对 实验性 肝损伤 有保护 作用 ,镁 离子 、山药多糖 联合应用 有
1山药 多糖化学 性质
1 1 山药多糖 的分离纯 化 . 乔 善义等依 次用 水提取, 乙醇和 十六烷 基三 甲基溴 胺盐沉 淀 法得到 粗多 糖 ,再利 用葡聚糖 凝胶 柱层析 和高 效液相层 析纯化 到酸 性多糖 部位 P T P 。进
一
多抗 肿瘤 活性 ,发 现 5 m k 对 L w S 癌有显 著地抑 制作用 , 0 g・ g 1 ei肺 而对 B 6 1
黑色 素瘤没有 明显 作用, 等于或 高于 10m k一 的 RP — 对 B 6 5 g・ g 1 D S I 1 黑色素瘤 和 Lw S e i 肺癌都 有显著 的抑制 效果, 中等剂量 (5 g k— ) 且 10m ・ g 1作用最 佳。 他 们进一 步将 多糖 化学 改性发现 , 度羧 甲基化 、 低 低度 甲基化和 中度 乙酰 化均 能 显著地 提高 多糖 的抗 肿瘤活 性,而部 分降解和 硫酸 酯化会使 多糖的抗 肿瘤活
山药多糖的降糖机制研究
山药多糖的提取工艺
提取方法:采用水提醇沉法提取山药多糖
提取工艺流程:原料→清洗→破碎→热水浸提→过滤→浓缩→乙醇 沉淀→离心分离→洗涤沉淀→干燥→产品
最佳提取工艺条件:浸提温度为90℃,浸提时间为4h,液料比为 20∶1,乙醇沉淀体积分数为80%
注意事项:提取过程中应严格控制温度、时间、液料比和乙醇体积 分数等参数,以保证提取效率和产品质量
山药多糖的分子结构
分子组成:由多个单糖分 子聚合而成
聚合方式:通过糖苷键连 接
分子量:大小不一,取决 于聚合程度
结构特征:具有分支状结 构,较为复杂
山药多糖的理化性质
山药多糖是一 种水溶性膳食 纤维,具有较 高的持水力和
膨胀力
山药多糖的化 学结构由多个 单糖分子通过 糖苷键连接而 成,具有复杂
的分支结构
安全性评价与质量控制的展望
未来发展方向:建立更加完善的安全性评价体系,加强质量控制标准制定 技术创新:利用现代科技手段提高安全性评价与质量控制的准确性和可靠性 国际合作:加强国际间的交流与合作,共同推进安全性评价与质量控制技术的发展 人才培养:加强相关专业人才培养,提高安全性评价与质量控制领域的研究水平
山药多糖可开发成新型降糖药物, 具有广阔的市场前景
未来研究方向:深入探讨山药多 糖与其他降糖药物的协同作用机 制,为临床治疗提供更多选择
05
山药多糖的安全性评价与质量控制
安全性评价的方法与结果
安全性评价方 法:急性毒性 试验、长期毒 性试验、致畸 致突变试验等
结果:未发现 山药多糖具有 明显的毒性作 用,长期使用
降血糖的临床应用
山药多糖具有调节胰岛素分 泌、促进糖代谢的作用
山药多糖可降低血糖水平, 改善糖尿病症状
山药多糖rdps-i的结构分析及抗肿瘤活性
山药多糖Ρ∆ΠΣ2Ι的结构分析及抗肿瘤活性赵国华 3 李志孝 陈宗道西南农业大学食品科学学院 重庆 兰州大学应用有机化学国家重点实验室 甘肃兰州摘要 目的研究山药多糖的化学结构和抗肿瘤活性∀方法用水提取山药块茎粗多糖 经≥ √ 反复脱蛋白 次 透析后经⁄∞ ∞2 ∏ 及≥ ¬ 2 柱色谱纯化得山药多糖 ⁄°≥2 ∀经完全酸水解!部分酸水解 用°≤ ≤ 高碘酸氧化 ≥ 降解 甲基化分析 及 ≤ 等研究山药多糖的化学结构∀并用小鼠移植性实体瘤研究了 ⁄°≥2 的体内抗肿瘤作用∀结果 ⁄°≥2 的分子量为 比旋光度为≈Α⁄1 β 1 特性粘度为≈Γ 1 ≅ # ∀ ⁄°≥2 是由葡萄糖!甘露糖和半乳糖以 Β 1 Β 1 的摩尔比组成 以Α2∆2 ψ 2 为主链 在 2Ο位有Α2∆2 ψ 2 2Β2∆2 2 支链的杂多糖∀ ⁄°≥2 对移植性黑色素 和 肺癌有很强的抑制作用∀结论 ⁄°≥2 是由葡萄糖!甘露糖和半乳糖构成的杂多糖 有很强的体内抗肿瘤活性∀关键词 山药 多糖 结构 抗肿瘤中图分类号 文献标识码 文章编号 ΣτρυχτυραλαναλψσισανδαντιτυµοραχτιϖιτψοφΡ∆ΠΣ2ΙπολψσαχχηαριδεφροµΧηινεσεψαµ∏ 2 ∏ 2¬ ≤ ∞ 2(1.ΦοοδΧολλεγε,Σουτη2ΩεστΑγριχυλτυραλΥνιϖερσιτψ,Χηονγθινγ400716,Χηινα;2.ΝατιοναλΛαβορατορψοφΑππλιεδΟργανιχΧηεµιστρψ,ΛανζηουΥνιϖερσιτψ,Λανζηου730000,Χηινα)Αβστραχτ Αιµ× ∏ ∏ ∏ ∏ √ ≤ Μετηοδσ× ∏ ≤ ¬ ¬ ⁄°≥2 ∏ ∏ ≥ √ ⁄∞ ∞2 ∏ ≥ ¬ 2 ∏ ∏ ∏ °≤ ≤ ¬ ≥ ≤ × ∏ √ ινϖιϖο ∏ ¬ Ρεσυλτσ ⁄°≥2 ∏ Β 1 Β 1 Α2∆2 2 Α2∆2 ψ 2 2Β2∆2 2 ∏ ≈Α ⁄ 1 β 1 ≈Γ 1 ≅ # ⁄°≥2 ∏ ∏ ινϖιϖο Χονχλυσιον ⁄°≥2 ∏ √Κεψωορδσ ≤ ∏ ∏ ∏山药是传统药食同源食物 为薯蓣科薯蓣属植物 ∆ιοσχορεαοπποσιτα× ∏ 的块茎 有益肾气!健脾胃!止泻痢和化痰涎之功效∀其水煎剂有延缓衰老!收稿日期 2 2基金项目 国家自然科学基金重点资助项目3通讯作者× ƒ ¬∞2 ∏ ∏ ∏ 防治糖尿病!抗突变及降血糖等作用 对其皂苷及尿囊素等成分的研究已有报道≈ ∀其总多糖有明显的抗氧化!增强免疫调节作用≈ 但对其多糖组分的纯化!化学结构和抗肿瘤活性尚未见报道∀为促进对山药多糖的进一步开发和应用 本文对其主要多糖 ⁄°≥2 的分离纯化!化学结构及抗肿瘤活性进行了研究∀##药学学报 ° ∏ ≥材料和方法仪器 ≥÷型红外光谱仪 ≥ ∏ ≤2 型气相色谱仪 ∂2 石英毛细管柱 1 ≅ ∏ 2 型超导核磁共振仪 ° Π 型色质联用分析仪 ° 型旋光仪 • 型高压液相色谱仪 ≥2 柱 ≥ ¬ ≥∞2 型示差检测仪∀试剂⁄∞ ∞2 ∏ ⁄∞2 为• 产品 ≥ ¬ 2 及⁄ ¬ 系列标准品为° 产品 三氟醋酸 标准单糖和糖醇为∞ 产品 硼氢化钠为 产品∀1山药多糖的化学结构提取与纯化山药 干重 粉碎 经乙醚脱脂后用水浸提 离心除去淀粉 上清液真空浓缩后 用≥ √ 法脱蛋白 次 置透析袋中对自来水透析 透析内液真空浓缩至一定体积 加乙醇沉淀 离心收集白色沉淀 溶剂干燥得山药粗多糖 1 ∀取山药粗多糖 用⁄∞ ∞2纤维素柱纯化 水洗脱 分部收集 主峰多糖乙醇沉淀 干燥得 ⁄°≥ 1 ∀取 1 ⁄°≥再经≥ ¬ 2 凝胶色谱柱纯化 蒸馏水洗脱 主峰多糖乙醇沉淀 冷冻干燥后得 ⁄°≥2 多糖 1 ∀纯度及分子量测定用高压液相色谱法 分析柱为 ≥2 柱 洗脱剂为双蒸馏水 流速为 1 # 常温测定∀样品 ⁄°≥2 及⁄ ¬ 系列标准品分别经 ° ≤分离 根据洗脱峰的形状判断样品的纯度 以⁄ ¬ 系列标准品的分子量对数与对应的洗脱体积作标准曲线 再根据 ⁄°≥2 的洗脱体积求得其分子量∀糖组成测定≈ ∗ ⁄°≥2 加 # 三氟醋酸 ׃ 封管后在 ε水解 冷却后减压蒸干除去׃ ∀用纸色谱法 °≤ 检测水解产物 展开剂为乙酸乙酯2吡啶2醋酸2水 Β Β Β 用苯胺2邻苯二甲酸试剂显色∀剩余水解物减压干燥过夜后加入盐酸羟胺 及无水吡啶 溶解后在 ε反应 冷至室温 加入无水醋酸酐 在 ε下继续反应 冷至室温 加入 摇匀 用氯仿萃取乙酰化产物进行气相色谱 ≤ 分析∀部分酸水解取 ⁄°≥2 用 1 # 的׃ 封管 置烘箱中在 ε水解 减压蒸干 再加甲醇 蒸干 重复 次 将׃ 去除干净∀水解物加水溶解后于透析袋中处理 袋外部分浓缩后干燥得 ⁄°≥2 2 组分 袋内部分浓缩后再经≥ ¬ 2 柱纯化后得 ⁄°≥2 2 组分 对 ⁄°≥2 2 和 ⁄°≥2 2 进行糖组成分析和甲基化分析∀甲基化反应取经°干燥的 ⁄°≥2 溶于无水二甲亚砜 中 在氩气保护下注入甲基亚磺酰负离子 1 室温反应 ∀置于冰浴至内容物冻结 滴加碘甲烷 ∀封口后在室温下反应 ∀用氩气将碘甲烷驱净∀加水 用氯仿萃取甲基化产物 次 每次 合并氯仿层用水洗 次 加无水硫酸钠过夜∀过滤除去无水硫酸钠 减压蒸去氯仿 真空干燥得暗黄色的甲基化产物 经红外光谱确认样品甲基化完全后 相继用甲酸和 # ׃ 水解并乙酰化 产物加氯仿 1 溶解 即可进行 ≤及 ≤2 ≥分析≈ ∀高碘酸氧化及Σµιτη降解取 ⁄°≥2 加 1 # 高碘酸钠 ε暗处进行氧化反应 分光光度法 间断检测反应过程 待反应完全后 按文献≈ 处理反应液 经完全酸水解! 还原!乙酰化后进行 ≤分析∀ΙΡ,1ΗΝΜΡ及13ΧΝΜΡ光谱分析取 ⁄°≥2 与 压片后在 ≥÷红外光谱仪常规测定∀另取 ⁄°≥2 溶于⁄1 中 测定 及 ≤ ∀2山药多糖的抗肿瘤活性≈取小鼠体内传代的 黑色素瘤细胞或 肺癌细胞瘤块 称重 分别用 ° 培养液稀释按质量浓度制成 Β 和 Β 的细胞悬液 1 Π只 接种于试验≤ Π 小鼠右前肢腋部皮下∀接种后 开始每天给予低剂量组 ⁄ !中等剂量组 ⁄ 和高剂量组 ⁄ 分别为 和 # 的多糖受试物 次 对照组 ≤ 给予等量的生理盐水 连续 周 结束后 颈椎脱臼处死小鼠 先称体重 再小心剥出肿瘤组织并称重 按下式计算体内肿瘤抑制率∀结果与讨论1Ρ∆ΠΣ2Ι的化学结构山药块茎粉碎后经热水浸提!乙醇沉淀!脱蛋白得 ⁄°≥粗多糖∀经⁄∞ ∞2纤维素离子交换色谱及≥ ¬ 2 柱色谱进一步分离纯化 得白色无定形粉末状多糖 ⁄°≥2 ∀ ⁄°≥2 溶解后经 ° ≤色谱得到其洗脱曲线是一对称的单一峰 图 证明 ⁄°≥2 已是均一多糖∀元素分析此多糖不含氮 比##药学学报 ° ∏ ≥旋光度为≈Α ⁄ 1β 1 特性粘度为≈Γ 1 ≅#° ≤测得其分子量为∀ƒ ∏ ° ≤ ⁄°≥2⁄°≥2 经完全酸水解产物用°≤法检测发现有葡萄糖!甘露糖和半乳糖的斑点 表明 ⁄°≥2 是一种杂聚糖图 是标准单糖的糖腈乙酸酯衍生物的 ≤图 按出峰的先后依次为鼠李糖!岩藻糖!阿拉伯糖!木糖!甘露糖!葡萄糖!半乳糖和内标肌醇∀图 是 ⁄°≥2 完全水解物的糖腈乙酸酯衍生物的 ≤图 表明 ⁄°≥2 是由葡萄糖!甘露糖和半乳糖组成 摩尔比为 Β 1 Β 1∀ƒ ∏ ≤ ∏ ⁄°≥2 甲基化产物水解!还原!乙酰化后进行 ≤2 ≥分析 数据与文献≈ 对照结果见表 ∀Ταβλε1 ΤηερεσυλτσοφµετηψλατεδαναλψσισοφΡ∆ΠΣ2Ιανδιτσηψδρολψσατεσ∏×3≥Π2 2∂ 2 ψ2 22 ψ 2 2ψ 2 2 ψ 2 2ψ 2 2 ψ2 2ψ 2 2 ψ×3√2Ο2 2 2 2 由表 可知 ⁄°≥2 主要是以 2连接的葡萄糖残基为主∀ ⁄°≥2 部分酸水解后获得两个组分 ⁄°≥2 2 为透析袋外的部分 糖组成分析发现只有甘露糖和半乳糖 甲基化分析为 2 2 和 2 2 及 2 2 Β Β ∀ ⁄°≥2 2 为透析袋内部分纯化得到的多糖 糖组成分析发现只含葡萄糖甲基化分析其连接方式为 ψ 连接的葡聚糖分子量约为 ∀由此可以初步认为 ⁄°≥2 的主链是 ψ 连接的葡聚糖 侧链由甘露糖和半乳糖构成 其连接方式为 ψ 连接∀在 2位连有低聚甘露半乳糖分支∀ ⁄°≥2 经高碘酸氧化 每摩尔己糖残基消耗 1 理论值为 1生成甲酸 1 理论值为 1 ≈ ∀≥ 降解产物经 ≤分析发现主要为葡萄糖和甘油 葡萄糖是 2葡萄糖残基和2葡萄糖残基的降解产物 而甘油是 2半乳糖残基和 2甘露糖残基的降解产物∀这与甲基化分析的结果相吻合∀图 是 ⁄°≥2 的 ≤ 图谱 经与文献≈ ∗ 比较 将其碳信号归属于表 ∀Ταβλε2 Ασσιγνµεντοφ13ΧΝΜΡχηεµιχαλσηιφτσοφΡ∆ΠΣ2Ι≥∏ ∏ ≤≤ ≤ ≤ ≤ ≤ ≤ Α ψ Α ψ Α ψ Β ψ2图 中≤ 的 个强吸收峰都在∆ ∆ 11 1 以下在 ⁄°≥2 的图 中有 个强吸收峰也都处在∆ 1 ∆ 1 11 以上表明 ⁄°≥2 的糖苷键类型主要是Α2型 但同时也发现在 ⁄°≥2 的 ≤ 谱中有 个较弱的≤ 信号处在∆ ∆ 1 以上 在 中也有 个 信号处在∆ 1 ∆ 1 以下 表明 ⁄°≥2 的糖苷键中也存在少量的Β2构型 Α2型≤ 信号在∆ 以下 信号在∆ 1 以上 Β2型≤ 信号在∆ 以上 信号在∆ 1 以下 ≈ ∀在 ⁄°≥2 的红外光谱 图 中 1 1 和 1的吸收峰表示 ⁄°≥2 中的糖环构型为吡喃型 呋喃型糖环在此区间上只有两个强吸收峰 而 1的吸收峰是∆2吡喃葡糖的非对称环伸缩振动的特征吸收峰∀ 1是甘露糖的特征吸收峰≈∀##赵国华等 山药多糖 ⁄°≥2 的结构分析及抗肿瘤活性ƒ ∏≤ ∏ ⁄°≥2ƒ ∏∏ ⁄°≥2ƒ ∏ ∏ ⁄°≥22 Ρ∆ΠΣ2Ι的抗肿瘤活性由表 可见 #⁄°≥2 对 肺癌有显著地抑制作用 而对 黑色素瘤没有明显作用 等于或高于 # 的 ⁄°≥2 对 黑色素瘤和 肺癌都有显著的抑制效果且中等剂量 #作用最佳∀Ταβλε3 ΙνηιβιτορψεφφεχτοφΡ∆ΠΣ2Ιονχανχερχελλινµιχεινϖιϖο≤ ∏ ×∏ Π Π≤ ?⁄ ? ⁄ ? 333 ⁄? 33∏ ≤ ? ≤⁄ ? 33 ⁄ ? 333 ⁄? 333ν ξ?σ33Π 1 ϖσ ≤ 333Π 1 ϖσ ≤Ρεφερενχεσ≈ ∏ ƒ ⁄ ÷ εταλ √≈ ΧηινΤραδιτΗερβ∆ρυγσ 中草药 24≈ • ≠ ÷ εταλ × ∏ ∏∏ ≤ ≈ ΑχταΝυτρΣιν 营养学报 24≈ ÷ ∏ƒ ≤ ≠ ≤ ∏ ∏ ∏Ποδοπηψλλυµοµοδι• √ σπραθυε≈ ΑχταΧηεµΣιν 化学学报 54≈ ° √ ⁄ ∞ °⁄ εταλ∏ 2 2 ∏ ≈ ΧαρβοηψδρΡεσ 5≈ ÷ ∏ ≤ ≤ ≠ εταλ × ∏ ∏¬ √ √ Ασπαραγυσχοχηινχηινενσισ≈ ΑχταΠηαρµΣιν 药学学报 35≈ ≥√ ≥≈ ΧαρβοηψδρΡεσ 5≈ ƒ ≈##药学学报 ° ∏ ≥ΦορειγνΜεδΣχι Πηαρµ 国外医学2药学分册 4≈ • ΜετηοδσινΧαρβοηψδρατεΧηεµιστρψ ςολ ΓενεραλΠολψσαχχηαριδε ≈ ≠ °≈ ∏ ≤ ∏ ∞ ∏ ∏ √ ≈ ΙντϑΧανχερ 8≈ ƒ ∏ ∏ ¬≈ ΧηεµΙνδ Λονδον 7≈ ° ∏ ∏ ∏ ≈ Πηψτοχηεµιστρψ32≈ • ΒιοχηεµιχαλΡεσεαρχηΜετηοδοφΓλψχοχονυγαλεσ 复合多糖生化研究技术 ≈ ∏ √ °≈ ° ≤ 2 ∏ ≈ ΑδϖΧαρβοηψδρΧηεµΒιοχηεµ 38##赵国华等 山药多糖 ⁄°≥2 的结构分析及抗肿瘤活性。
山药多糖的生理学功能及应用
山药多糖的生理学功能及应用谭春爱1,2张石蕊1杨建武3(1湖南农业大学动物科技学院,湖南长沙,4101282赣州正大实业有限公司,江西赣州,341004),3湖南省饲料工业办公室湖南长沙410011)摘要:本文就山药多糖的理化性质及其生理学功能作一综述,旨在证明山药多糖作为一种新型饲料添加剂的可能性和优越性。
关键词:山药多糖;生物学功能;前景山药(Rhizoma discorea)为薯蓣科植物薯蓣(Dioscorea opposita)的干燥根茎,主要分布于热带和亚热带地区,有600种以上,而我国有93种。
山药具有补脾、补肾、健脾胃、益精、止泻、化痰等功效,是传统的药食同源植物。
本草纲目对其记载有“益肾气,健脾胃,止泻痢,化痰涎,润皮毛”之功效。
山药含有淀粉、蛋白质、淀粉酶、脂肪、多糖、维生素、氨基酸和多种微量元素,现代医学研究表明,山药具有多方面的生物活性和功能,而山药多糖是山药主要的活性成分,由多种成分组成,一级结构中含有α-糖苷键或β-糖苷键结构,单糖组成中含有葡萄糖、半乳糖、甘露糖、果糖、阿拉伯糖等。
现就山药多糖的生物学功能在动物体内的作用展望其应用前景。
1山药多糖的提取方法山药多糖的提取方法有浸提法、超声辅助提取、微波辅助提取、酶法提取等。
浸提温度60-64℃、浸提时间3.2-3.5h和料液比1:20更为合适。
与传统的水提取法相比,超声波提取山药多糖得率提高2倍多,提取时间也缩短为50min。
李金忠等(2005)确定了微波提取的功率464W,料水比1:20,浸提温度60℃,醇沉比4:1,其得率达到了10.52%。
而选用纤维素酶提取最好,山药多糖的提取率为35.66%。
2山药多糖的生理学功能过剩的氧自由基造成的危害主要表现为细胞膜被破坏、血清抗蛋白酶失去活性、损伤基因导致细胞变异,并加速细胞凋亡。
自由基的氧化损伤与肿瘤、炎症等疾病的发病机理有关。
山药粗多糖能清除机体H2O2,O2.和.OH、降低维生素C-ADPH及Fe2+-半胱氨酸诱发的微粒体过氧化脂质的含量,并对黄嘌呤-黄嘌呤氧化酶体产生的超氧自由基及Fenton反应体系产生的轻自由基有清除作用;并能明显提高血红细胞中S0D活力及血CAT活力,提高机体抗氧化活性,减轻小鼠CC14肝损伤所致炎性反应,降低小鼠LPO、MDA和脂褐质含量,0.025g/L-0.25g/L山药多糖显著地抑制缺氧复氧诱导的神经细胞早期凋亡。
山药多糖的研究进展
山药多糖的研究进展王瑞娇; 马凡怡【期刊名称】《《化学研究》》【年(卷),期】2019(030)005【总页数】4页(P547-550)【关键词】山药; 多糖; 提取; 活性【作者】王瑞娇; 马凡怡【作者单位】河南大学天然药物与免疫工程重点实验室河南开封475004【正文语种】中文【中图分类】R284.2多糖是山药中有效成分之一,具有抗肿瘤、抗氧化、抗衰老、增强免疫、降低血糖等作用.山药多糖主要由葡萄糖、半乳糖及甘露糖组成,但其结构尚不明确.山药多糖的构效关系是目前研究的热点.1 山药多糖的提取和分离山药多糖的提取方法主要有水浸提法[1-7]、超声辅助法[5]、超滤浓缩提取法[8]、微波辅助法[10]和酶法[11]等.温度、时间、pH值三种提取条件会对其多糖产率、相对分子量、单糖组成、构象和潜在的生物活性造成影响,尤其温度对多糖结构的影响是最大的(见表1).2 山药多糖的生物活性2.1 抗氧化山药多糖普遍具有抗氧化活性[3, 5-9],且其抗氧化能力的大小和山药多糖相对分子量、糖醛酸含量有关.相对分子量小的山药多糖水溶性较好,与自由基接触的面积大[5],其抗氧化能力较强.糖醛酸的抗氧化作用归因于它们的供氢能力.在多糖中,糖醛酸基团的存在可以触发异头碳的氢原子,较高的含量意味着较强的氢原子供给能力,因此有较低相对分子量和较高糖醛酸含量的山药多糖显示出较强的抗氧化活性.表1 山药的提取Table 1 Extraction of Dioscorea opposita Thunb提取方法提取比例/W:V提取温度/℃提取时间/h其他多糖产量/%相对分子量/Da单糖组成多糖含量/%功能及生物活性参考文献水浸提法1∶880320%醇沉淀 4.6651 25065.80∶19.60∶7.92∶4.89 a63.2540%醇沉淀 2.143523071.10∶19.30∶3.75∶3.89 a64.4360%醇沉淀 0.483479061.60∶22.60∶5.47∶7.05 a80.1380%醇沉淀 1.70363169.60∶13.60∶12.60∶3.17 a56.37乳化、流变性能[1-2]水浸提法1∶8801.55.1916 6191.52∶1 b抗氧化、抗菌[3]水浸提法1∶2010020.51.09:0.51:1.0:3.03:1.77 c免疫调节[4]水浸提法1∶40251.5超声4.3440 30066.87∶10.52∶3.66∶0.28∶2.77∶15.92 d0.841∶40251.53.8536 50048.38∶8.71∶6.46∶0.84∶3.08∶32.15 d0.621∶40501.511.5448 700, 1076 40079.09∶0.46∶15.71∶0.25∶0.08∶4.12 e17.501∶40801.512.3912 000,100 420081.18∶15.10∶0.22∶0.08∶2.99 f6.51还原能力、抗氧化、降血糖[5]水浸提法1∶156****0001∶13.057∶26.56∶6.07∶2.22g410001∶0.024∶0.05∶0.084∶2.59∶0.13∶0.14 g230001∶0.82∶3.86∶2.68∶12.88∶1.29∶0.54 g抗氧化、降血糖、抗肿瘤[6]水浸提法1∶1510030.5∶1.2∶0.3∶0.3 h63.2抗氧化[7]超滤浓缩提取20过滤88.750.8∶24.2∶11.8 i抗增殖[8]降解提取降解13 20005.32% j63.8794 0006.04% j66.4836 0006.54% j68.219 0008.68% j68.33抗氧化、抗诱变、脂质过氧化作用[9]注:a Glu∶Gal∶Man∶Xyl (w/w); b Glu∶Gal(mol/mol); cMan∶GalA∶Glu∶Gal∶Arab (mol/mol); d Rha∶Gal∶Xyl∶Arab∶GlcA∶GalA (w/w); e Rha∶Glu∶Gal∶Xyl∶Arab∶GalA (w/w); f Rha∶Gal∶Xyl∶Arab:GalA (w/w); g Man∶Rha∶GlcA∶Glu∶Gal∶Xyl∶Arab (mol/mol); hMan∶Glu∶Gal∶GlcA (mol/mol); i Glu∶Man∶Gal (w/w); j uronic acid (w/w).其中 Glu:葡萄糖;Gal:半乳糖;Man:甘露糖;Xyl:木糖;GalA:半乳糖醛酸;Arab:阿拉伯糖;Rha:鼠李糖;GlcA:葡萄糖醛酸;uronic acid:糖醛酸. YANG等[3]发现纯化的山药多糖含有糖醛酸,可以清除羟基自由基和超氧自由基,其清除能力随着多糖浓度的增加而提高,但这种能力低于维生素C(Vc). JU等[7]得到的山药多糖含有12.4%的糖醛酸,具有清除羟基自由基的能力,清除效果随着浓度的增加而增加,他们的研究还表明山药多糖是羟基自由基的良好清除剂,并且对猝灭超氧自由基也有相似的清除作用.ZHAO等[5]通过四种方法提取山药多糖,如表2所示,得到相对分子量和组成有所差异的山药多糖UAE、CWE、WWE、HWE,其中UAE和CWE相对分子量分别为4.03×104和3.65×104 Da,水解产物的糖醛酸(GlcA和Gal A)含量分别为18.69%和35.23%.UAE和CWE的相对分子量较低、糖醛酸含量较高,与它们具有良好的抗氧化活性相呼应. ZHU等[6]纯化得到三种多糖CYZ、CYS-1、CYS-2,相对分子量分别为2.2×104、4.1×104和2.3×104 Da,CYS-2的糖醛酸含量明显高于CYS-1 和CYZ,其抗氧化活性按CYS-1、CYZ、CYS-2 粗多糖的顺序增加.ZHANG等[9]所得山药多糖用不同浓度的H2O2和维生素C降解,得到不同相对分子量的山药多糖DP、LP1、LP2和LP3,相对分子量大小分别为1.32×105、9.4×104、3.6×104和9×103 Da,且LP3含有更多的糖醛酸,其抗氧化能力明显高于其他样品.表2 几种山药多糖的组成和生物活性Table 2 Biactivities of polysaccharides山药多糖相对分子量(×104 Da)GlcA(%)GalA(%)AGI IC50(μg/mL)AAIIC50(mg/mL)UAE4.032.7715.9235.827.41CWE3.653.0832.1527.413.66WWE 4.87,107.64ND4.12263.7519.75HWE1.20,100.42ND2.99274.3647.572.2 抗肿瘤山药多糖同样具有抗癌活性[6, 8].ZHU等[6]从山药中提取到CYS-1、CYS-2及CYZ三种多糖,并研究了其对黑色素瘤细胞的抑制作用.结果发现,CYZ对B16小鼠黑色素瘤细胞没有明显的抑制作用;CYS-2在高剂量时具有显著的抑制作用,在中剂量具有明显的抑制作用; CYS-1在中高剂量范围内对B16小鼠黑色素瘤细胞具有显著的抑制作用;但粗多糖却显示出比任何纯化的多糖更强的抑制活性.究其原因可能是因为粗多糖是聚合物,组成较为复杂,有其他成分共同作用,对黑色素瘤细胞产生影响的不单只有多糖.但其协同抑制作用仍需要进一步研究.XUE等[8]实验得到山药多糖CYP在体外对BGC-823细胞的增殖产生剂量依赖性抑制.当CYP浓度从12.5 μg/mL增加至800 μg/mL时,抑制率从20.5 %增加至52.3 %.但在高浓度的CYP水平下,抑制率的增加率下降,可能是因为高浓度的药物会引起耐药性.CYP抑制癌细胞生长的复杂机制尚不明确.2.3 抗菌YANG等[3]研究了不同山药多糖浓度下对多种菌的抗菌活性,发现其对枯草芽孢杆菌、金黄色葡萄球菌和尼氏杆菌均没有抑制活性,但对大肠杆菌显示出一定的抑制活性,且其抑制活性随样品浓度的增加而提高,最小抑制浓度(MIC)为2.5 g/L.2.4 抗炎LI等[4]发现山药多糖NSCYP对促炎细胞因子如IL-6和TNF-α有一定的影响,通过实时PCR定量IL-6和TNF-αmRNA的含量,发现用200~800 mg/L NSCYP 处理16 h后,与对照组脂多糖(LPS)相比,RAW264.7细胞中IL-6和TNF-αmRNA的转录显著增加,与RT-PCR结果一致,在NSCYP处理下释放到培养基中的IL-6和TNF-α细胞因子显着高于载体对照组. NSCYP诱导IL-6和TNF-α的产生是剂量依赖性的,与LPS处理相当,但作用要强.2.5 增强免疫山药多糖可增强免疫活性的表达[12].LI等[4]对山药多糖NSCYP的增强免疫功能进行了研究,发现其可通过TLR4-NF-κB信号通路对巨噬细胞发挥免疫调节活性,可作为一种潜在的免疫调节剂.2.6 降血糖糖尿病,是身体不再产生足够的胰岛素或无法利用胰岛素的一种慢性疾病[13-14].糖尿病主要分为两类,其中Ⅰ型糖尿病即胰岛素依赖型糖尿病,而Ⅱ型糖尿病主要是胰岛素作用无效[15].近年来许多中药多糖包括山药多糖[16]都被发现有降血糖作用.ZHAO等[5]研究了山药多糖的降低血糖作用,发现餐后血糖的突然增加与通过α-葡糖苷酶和α-淀粉酶将多糖分解代谢为葡萄糖的淀粉水解有关.他们针对患有Ⅱ型糖尿病的个体中α-葡糖苷酶和α-淀粉酶进行研究,通过α-葡萄糖苷酶抑制试验(AGI)和α-淀粉酶抑制试验(AAI)测定山药多糖对这些酶的抑制率.如表2所示,在AGI测定中CWE、UAE、WWE和HWE表现不同的IC50值,介于27.41 mg/L~274.36 mg/L之间,而AAI测定样品的IC50值范围为3.66~47.57 g/L.与其他植物如Livingstone马铃薯相比,山药多糖显示出良好的AGI和AAI活性和降血糖能力,可以作为潜在的降血糖药物.其中HWE相对分子量较大,糖醛酸含量最低,具有最低的降血糖作用.WWE的糖醛酸含量和抗糖尿病活性略高于HWE.CWE具有最高的糖醛酸含量和较小的相对分子量,其AGI和AAI活性最佳.UAE的相对分子量较小,糖醛酸含量较高,降血糖作用接近CWE,与抗氧化呈现相同的变化规律. 2.7 抗突变ZHANG等[9]在不同浓度的过氧化氢和抗坏血酸中,将相对分子量为1.32×105 Da的山药多糖(DP)降解为相对分子量分别为9.4×104、3.6×104、9×103 Da的LP系列(LP1、LP2、LP3)降解多糖.他们利用微核中无定形片段或滞后染色体结果的检测,观察有丝分裂的抑制率,来验证其抗突变活性.结果显示,LP2和LP3的IC50值分别为65.6 mg/L和48.3 mg/L,相对分子量小的LP3显示出最高的抑制率.3 结论山药多糖的单糖组成、相对分子量大小和糖醛酸含量等对其作用机制、功能活性都会产生影响,而相对分子量小、糖醛酸含量高的山药多糖活性更佳.目前,虽然有关山药多糖的研究正不断深入,但仍需进行大量的药理和毒理学实验,以进一步拓展其功能性应用,为山药多糖的开发利用提供新的理论支撑,并带动医药、食品、化妆品等领域的发展.参考文献:【相关文献】[1] MA F, ZHANG Y, LIU N, et al. 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山药多糖大生产工艺
山药多糖大生产工艺一.概述山药多糖,外文名称Polysacchrides from Dioscorea opposita或Chinese yam polysaccharides, 是天然植物山药块基中的水溶性多糖,主要D-葡萄糖、D-甘露糖、D-半乳糖、岩藻糖等单糖组成,平均相对分子质量81000(另有报道为42200),主要由带有分支点的1-4糖甙键连接的葡萄糖骨架构成,同时也含有1-3键型的岩藻糖。
山药多糖为白色粉末状,无甜味,易溶子热水,难溶于高浓度的乙醇、乙醚、丙酮和氯仿等有机溶剂,可水解降级;与硫酸-苯酚试剂作用显棕红色反应,与硫酸-蒽酮试剂反应呈深绿色。
山药多糖有很强的生理活性功能,具有免疫调节作用,抗衰老、抗突变、抗肿瘤和抗氧化作用,在免疫调节方面,山药多糖可不同程度提高T淋巴细胞增殖能力、NK细胞活性、血清溶血素活性、血清IgG含量,也能增加巨噬细胞的吞噬能力,既有非特异性免疫功能,又可提髙特异性细胞免疫和体液免疫功能。
原料山药块茎是一种药膳两用的植物块茎, 主产于我国河南、河北、山东、山西、陕西等地,为山药多糖的可持续性生产提供了丰富绿色资源。
以植物山药为原料,采用水浸醇沉的物理方法提取山药多糖,再用层析法等方法纯化,工艺过程无有害物质生成; 原料清洁,生产中所使用的乙醇等有机溶剂均回收利用,可实现清洁生产。
层析法是当今最为有效的分离、分析方法之一,它具有分离效能高、常温操作、设备简单等特点, 特别适合于天然生物成分的提取与纯化。
经浸提制取山药多糖后的山药滤渣,仍含有丰富的营养和生物活性物质,综合利用价值高,经济效益好。
山药多糖能提高人体免疫力,促进血液中白细胞的吞噬功能,有抗衰老、抗病毒、抗肿瘤、抗突变、抗氧化作用,还有降低血糖、血脂和胆固醇等作用; 山药多糖药用价值高,无毒副作用,对人体有很好的医疗和保健功效,是一种有益于人类的环境友好产品。
二.生产工艺山药中提取多糖工艺是以水为溶剂,加热浸取,浸取液的去杂、分离山药多糖。