瞬时外向钾电流在糖尿病心肌病电重构中的作用
Kv4.3通道蛋白在心力衰竭调节中的分子机制
Kv4.3通道蛋白在心力衰竭调节中的分子机制刘星【摘要】Kv4.3 K +channel,the core of the transient outward potassium current (Ito) functional structure,plays a crucial role in the early phase of repolarization of myocardial cells .The downregulation of Kv4.3 K +channel leads to prolongation of action potential duration ( APD) and increase of intercellular Ca 2+,thus affecting Ca 2+handling and excitation-contraction coupling in the myocardial cells .Moreo-ver,increased intracellular Ca2+could activate calcium/calmodulin dependent protein kinaseⅡ( CaMKⅡ) and calmodulin neural phospha-tase,which is linked to the development of myocardial hypertrophy and heart failure .Inaddition,downregulated Kv4.3 K +channel leads to CaMKⅡdissociation from Kv4.3-CaMKⅡcomplex and then activates isolated CaMKⅡ,which accellerates heart failure process .Upregula-tion of Kv4.3 K +channel inhibits excessive activation of CaMKⅡand its related harmful consequences ,hence this is likely a potential target for the therapy of heart failure .%Kv4.3通道蛋白作为瞬时外向钾电流的核心功能结构,在心肌细胞早期复极化中发挥重要作用.Kv4.3通道蛋白下调致使动作电位时程延长,钙离子内流增加,从而影响心肌细胞钙调节和兴奋收缩耦联;增加的胞内钙离子激活钙/钙调素依赖性蛋白激酶Ⅱ(CaMKⅡ)和钙调神经磷酸酶,导致心肌肥厚和心力衰竭的发生.此外,Kv4.3通道蛋白下调促使CaMKⅡ从Kv4.3-CaMKⅡ复合物中分离并激活,加速心力衰竭过程.上调Kv4.3通道蛋白可抑制CaMKⅡ过度活化及其严重后果,可能是治疗心力衰竭的一大靶点.【期刊名称】《心血管病学进展》【年(卷),期】2017(038)002【总页数】4页(P163-166)【关键词】心力衰竭;Kv4.3通道蛋白;瞬时外向钾电流;钙离子激活钙/钙调素依赖性蛋白激酶Ⅱ;心律失常;分子机制【作者】刘星【作者单位】武汉大学中南医院心血管内科,湖北武汉430071【正文语种】中文【中图分类】R541.6心肌细胞表面的钾离子通道蛋白众多，其中重要的一种就是构成瞬时外向钾电流(Ito)的通道蛋白，即Kv通道蛋白，在心肌细胞动作电位早期复极化和平台期电压水平调控中发挥重要作用。
转化生长因子β在心室结构重构和电重构中的作用
转化生长因子β在心室结构重构和电重构中的作用付明鹏【摘要】转化生长因子β(TGF-β)是一组细胞外分泌型信号多肽.TGF-β信号主要通过膜上的受体和膜内Smad分子进行转导.最近研究证实,TGF-β与心室结构重构和电重构密切相关.TGF-β对心室结构重构的影响主要表现在促进心肌细胞肥大,同时使细胞外基质合成增加和阻碍基质的降解而导致组织纤维化改变.有限的研究结果表明,TGF-β可能通过调节肌浆网钙容量及其发生改变的频率和幅度从而减慢一过性Ca2+流到达峰值的时间和衰减的速度等途径影响心室电重构.%The type (3 transforming growth factors! TGF-p )is a group of pleiotropic cytokines,TGF-p signal is manily transduced through transmembranous receptors and intracellular mediator SMADs. Recent studies have revealed that TGF-p is closely related with ventricle structural and electrical remodeling. Its influence on ventricle structural remodeling is mainly displayed in promoting myocardial cell hypertrophy,moreover, it makes the extracellular matrix synthesis increase and inhibits extracellular matrix degradation, which will lead to tissues fibrosis. Limited studies have revealed that TGF-p may reduce the time of intracellular Ca2 + transients to peak and the rate of decay to impact electrical remodeling through the way such as adjusting sarcoplasmic Ca2 + content and the frequency and amplitude of its change.【期刊名称】《医学综述》【年(卷),期】2012(018)011【总页数】3页(P1617-1619)【关键词】转化生长因子β;心室;结构重构;电重构【作者】付明鹏【作者单位】云南省第二人民医院心内科,昆明,650021【正文语种】中文【中图分类】R318:11充血性心力衰竭发生、发展过程中的一个重要环节是心室重构，心室重构包括结构重构和电重构。
心肌细胞瞬时外向钾电流与相关疾病的研究进展
1． 1 结构 Ito 核心区域 结 构 具 有 典 型 电 压 依 赖 性 钾 通 道 （ Kv） 特
征，由四个结构相同的 α 亚单位组成，每个亚单位主要包含 三部分： 6 个跨膜序列（ s1 ～ s6） 构成的 Kv 主体部分，及 N 端 和 C 端［1］。N 端和 C 端分别与 s1 和 s6 相连； s5 和 s6 之间 的 39 个氨基酸多肽形成 P 环； 4 个 α 亚单位中的 s5-P-s6 共 同构成了离子通道孔 ［2］。带正电荷的 s4 片段是钾通道的 膜电压感受器，在去极化阶段朝细胞外方向移动，引起通道 构型改变，诱发通道开放，使 K + 流出细胞，产生外向电流。 N 段和 C 端主要在亚基装配、通道表达和辅助调控上起作 用［3］。 1． 2 分类
在心脏不同区域，Kv 表达具有差异性。其中 Kv4． 2 和 Kv4． 4 主要分布于心室外层，Kv1． 4 主要存在于心室内层， Kv4． 3 则在各层心室间均有表达且差异不明显。Kv4． 2 和 Kv4． 3 的通道动力学及电生理学性质与心室外层心肌 Ito，fast 相似，Kv1． 4 则 与 心 室 内 层 心 肌 Ito，slow 相 似［5］。Kv4． 2 和 Kv4． 3 介导的 Ito，fast 电流密度较 Kv1． 4 介导的 Ito，slow 电流密度 大，约为其 5 ～ 6 倍。在心室复极 1 期，由于 Ito 跨壁电不均一 性，将产生明显的 Ito 离子流强度差异和强大的 Ito 离子流梯 度。
3 Ito 与心脏疾病
3． 1 J 波综合征 J 波是由 Ito 介导、在心电图上紧随 QRS 波群之后的一个
圆顶或驼峰状小波。正常生理情况下，人心电图的 J 波常部 分或全部重于 QRS 波群中。由于 Ito 分布具有组织特异性， 当心室内、外层细胞 Ito 动力学发生改变，导致 复 极 1、2 期 “切迹”差异过大，就会形成心室复极初期跨室壁电位差，表 现为心电图上 J 波或 J 点抬高［11］。临床上常见的相关疾病 主要有原发性心室颤动（ 简称室颤） 、室性心动过速（ 简称室 速） 以及 Brugada 综合征等，目前认为这些疾病均与 2 相折 返有关。2 相折返引起的室性早搏（ 简称室早） 常落在 T 波 降支上，形成 R-on-T 现象，可诱发转化为多形性室速或室 颤［12］。Márquez 等［13］发现抑制 Ito 可以延长 APD，减少室早， 终止 2 相折返，最终起到防治 Brugada 综合征的作用。KCNE3 基因的错义突变会上调 Ito 密度，产生 Brugada 综合征的 心电图特征。Ito 激活物 NS5806 能上调 Ito 密度，诱发 2 相折 返性室 速，表 明 Ito 上 调 可 作 为 Brugada 综 合 征 的 标 志［14］。 Giudicessi 等［15］通过 检 测 健 康 人 和 Brugada 综 合 征 患 者 的 DNA 中编码 Kv4． 3 的 KCND3 基因的突变与表达情况，发现 Brugada 综合征患者的 Kv4． 3-L450F 和 Kv4． 3-G600R 表达上 调，使 Ito 密度峰值增加 146． 2% 和 50． 4% 。 3． 2 心力衰竭（ 简称心衰）
肺癌切除术后心房颤动发生的危险因素及发病机制研究进展
肺癌切除术后心房颤动发生的危险因素及发病机制研究进展戴伟;王小文;黄春;向小勇;蒋迎九;吴庆琛【摘要】Postoperative atrial fibrillation (POAF) is a frequent complication occurring in patients after lung cancer surgery.POAF is associated with an increased risk of mortality and morbidity,and increases the costs of the postoperative care.The underlying mechanisms involved in POAF development are multifactorial and for the moment far from being fully elucidated.This review summarized recent clinical researches on the risk factors and mechanisms of POAF,the results of which may lead to a more effective strategy for the prevention of POAF after lung cancer surgery.%术后心房颤动(postoperative atrial fibrillation,POAF)是肺癌切除术后常见并发症之一.POAF导致患者术后并发症发生率和死亡率增加、住院时间延长及住院费增加等一系列不良后果.目前,肺癌POAF的病因及具体发病机制尚未完全阐明,且缺乏有效的风险评估工具.该文就肺癌POAF发生的相关危险因素、可能发病机制等研究进展进行综述,为其防治研究提供参考.【期刊名称】《上海交通大学学报（医学版）》【年(卷),期】2018(038)005【总页数】5页(P573-577)【关键词】肺癌切除术;心房颤动;危险因素;机制【作者】戴伟;王小文;黄春;向小勇;蒋迎九;吴庆琛【作者单位】重庆医科大学附属第一医院胸心外科,重庆400016;重庆医科大学附属第一医院胸心外科,重庆400016;重庆医科大学附属第一医院胸心外科,重庆400016;重庆医科大学附属第一医院胸心外科,重庆400016;重庆医科大学附属第一医院胸心外科,重庆400016;重庆医科大学附属第一医院胸心外科,重庆400016【正文语种】中文【中图分类】R655.3术后心房颤动（postoperative atrial fibrillation，POAF）指无心房颤动（简称房颤）病史的患者，术前未发生任何类型的房颤，而在术后新发生的房颤，也叫术后新发房颤。
药理简答论述题
药理简答论述题1．简述动作电位各时相中的参与电流。
快反应细胞的动作电位时程中有多种电流参与。
动作电位0期由内向钠电流介导；复极1期主要由瞬时外向钾电流介导；平台期是内向电流和外向电流平衡的结果，内向电流为L-型钙电流和晚钠电流，外向电流为延迟整流钾电流；复极3期主要由延迟整流钾电流介导；静息期由内向整流钾电流控制。
慢反应细胞动作电位是内向电流和外向电流相互消长的结果，复极过程中，内向Na+/Ca2+交换电流逐渐减小，平台期激活的I k至舒张期也逐渐减小，而起搏电流（I f）激活，膜除极至-50mV时，T-型钙电流（I Ca(T)）激活，至舒张末期时L型钙电流（I Ca(L)）激活，进而引起动作电位。
2．简述抑制心脏钠电流对动作电位特征的影响及对心脏传导性、自律性、不应期的影响。
抑制钠电流可使动作电位0相除极速率减慢，动作电位超射值降低，降低快反应自律细胞的自律性，减慢快反应细胞的传导性，延长快反应细胞的不应期。
3．抗心律失常药物的分类，各类特点及代表药。
抗心律失常药分为四大类：Ⅰ、钠通道阻滞药；Ⅱ、β肾上腺素受体拮抗药；Ⅲ、延长动作电位时程药（钾通道阻滞药）；Ⅳ、钙通道阻滞药。
Ⅰ类-钠通道阻滞药根据钠通道阻滞药的作用强度，本类药物又分为三个亚类，即Ⅰa，Ⅰb，Ⅰc。
Ⅰa类适度阻滞钠通道，降低动作电位0相上升速率，不同程度抑制心肌细胞膜K+、Ca2+通透性，延长复极过程，且以延长有效不应期更为显著，代表药有奎尼丁，普鲁卡因胺等。
Ⅰb类轻度阻滞钠通道，轻度降低动作电位0相上升速率，降低自律性, 缩短或不影响动作电位时程，代表药有利多卡因，苯妥英等。
Ⅰc类明显阻滞钠通道，显著降低动作电位 0相上升速率和幅度，减慢传导性的作用最为明显，代表药有普罗帕酮、氟卡尼等。
Ⅱ类-β肾上腺素受体拮抗药减慢4相舒张期除极速率而降低自律性，降低动作电位0相上升速率而减慢传导性，代表药有普萘洛尔等。
Ⅲ类-延长动作电位时程药抑制多种钾电流，延长动作电位时程和有效不应期，但对动作电位幅度和去极化速率影响很小，代表药有胺碘酮等。
ACEI和ARB类药物在心房颤动治疗中的应用
for PLASMINOGEN as a shared genetic risk factor of coronary arterydisease and periodontitis[J]Circ Cardiovasc Genet，2015，8(1)：159—167[29]Zhou X,Han X,Wittleldt A,et al.Long non-coding RNAANRILregulatesinflammatoryresponsesasanovelcomponentof NF-k B pathway[].RNA Biol,2016,13(1):98—108. [30]HoldtLM，Ho f mannS，SassK，etal AluelementsinANRILnon-coding RNA at chromosome9p21modulateatherogenicce l functionsthroughtrans-regulationofgenenetworks[J]PLoS Genet，2013，9(7)：e1003588[31]Zhou X，Han X，Wi t feldt A，etal Long non-coding RNAANRILregulatesinflammatoryresponsesasanovelcomponentofNF-kappaB pathway[].RNA Biol,2016,13(1)：98—108.[32]HarismendyO，NotaniD，Song X，etal9p21DNA variantsassociated withcoronaryarterydiseaseimpairinterferon-gamma signa l ingresponse[J]Nature，2011，470(7333)：264—268 [33]Ba t leTE，LynchRA，FrankDA Signaltransducerandactiva-toroftranscription1activationinendothelialce l sisanegative regulatorofangiogenesis[J]CancerRes，2006，66(7)：3649—3657[34]Katze MG，HeY，Gale M，Jr Virusesandinterferon：afightforsupremacy[J]NatRevImmunol，2002，2(9)：675—687(收稿日期：2019—07—18)ACEI和ARB类药物在心房颤动治疗中的应用房越，梁兆光摘要：心房颤动是临床最常见的心律失常之一。
钾离子通道相关疾病
钾离子通道相关疾病作者：马艳芳赵秀丽杨春丽拜承萍来源：《医学信息》2015年第03期摘要：钾离子通道种类繁多，分布广泛，功能复杂，参与多种疾病的发生发展。
离子通道病的提出，为许多疾病的治疗提供了新的思路。
本文就钾离子通道相关疾病做一简要综述，为临床新药的研究提供精确的分子靶点。
关键词：钾离子通道；相关疾病；离子通道病在离子通道中，钾离子通道是目前发现的亚型最多、功能最复杂的一类离子通道，也是临床与科研的热点领域[1]。
新近研究发现钾离子通道与很多疾病有关系，并提出了"离子通道疾病"这一概念。
复习相关文献，总结钾离子通道具体与哪些疾病有关或关系较为密切，为钾离子通道制剂的临床应用提供参考。
1 钾离子通道的分类钾离子通道是一类存在于生物膜上并对钾离子具有一定选择性通透能力的蛋白复合物，它能控制细胞膜内外钾离子的动态平衡，调节细胞膜电位，参与一系列生理或病理生理过程[2]。
钾离子通道的分类很多，根据钾通道的特性分为5类，简述如下。
1.1 电压依赖性钾通道（Kv）电压依赖性钾通道（Kv）[3]，又称电压敏感性钾通道（Kv），根据PCR等技术，Kv又可分为Kv1 ，Kv2，Kv3，Kvβ等若干类型，每一类型通道根据不同功能又可分为若干亚型，如；Kv4.2 ，Kv1.3，Kv1.5等，亚型之间电生理与药理学功能有很大不同；此外，Kv通道超家族包括Kvα亚单位和辅助亚单位两部分，根据Kvα亚单位的编码来源，Kv通道超家族又可分为三大亚家族分别是：Shaker 类Kv 亚单位、ether-a-go-go （eag）类Kv亚单位、KvLQT1 （KCNQ）类Kv 亚单位[4]。
1.2 瞬时性外向钾通道（transient outward K channels，Ito）瞬时性外向钾通道，主要位于心肌细胞膜上，参与形成去极化时的一过性外向钾电流（Ito）。
影响动作电位的时程和兴奋的传导，参与心率失常的发生。
30建立DCM模型的方法主要有以...
目录1 瞬时外向钾电流在糖尿病心肌病电重构中的作用 (1)1.1 中文摘要 (1)1.2 英文摘要 (3)1.3 前言 (6)1.4 1.5 1.6 材料与方法 (8)结果 (20)讨论 (29)1.7 结论 (38)1.8 参考文献 (39)1.9 英汉缩略词对照表 (44)2 致谢 (46)3 糖尿病的发病机制及诊断治疗（综述） (48)瞬时外向钾电流在糖尿病心肌病电重构的作用摘要目的：糖尿病心肌病(Diabetic cardiomyopathy, DCM)严重心律失常的发生率非常高，其一旦发生不仅恶化心功能加重心肌损伤，而且极易导致患者死亡。
目前多数学者认为糖尿病心肌病恶性心律失常的发生与心室肌电重构现象有关。
Tomaselli在对心衰及心室肥大研究中发现心室电重构表现为动作电位时程(Action potential duration, APD)和有效不应期（Effective refractory period，ERP）延长，复极延迟[1],但是其细胞离子流变化基础尚不完全清楚，而多数认为是由瞬时外向钾电流（Transient outward potassium current，Ito）减少引起[2]。
目前对于糖尿病心肌病心电重构研究较少，尚不清楚在糖尿病心肌病电重构中Ito 是否起重要作用。
本研究通过链脲佐菌素（Streptozotocin，STZ）腹腔注射建立糖尿病大鼠糖尿病心肌病模型，利用膜片钳技术检测大鼠心室肌细胞Ito变化，从而了解其在电重构中的作用。
方法：本实验选用20只健康成年SD大鼠作为实验大鼠，随机分为两组：1）对照组（n=10）,2)DCM组（n=10）。
对照组持续喂养普通饲料，DCM组持续喂养高脂饲料12周。
通过药物诱导建立糖尿病心肌病模型：在DCM组使用1％链脲菌素腹腔注射，对照组则以等量柠檬酸缓冲液腹腔注射。
通过病理组织学证实为糖尿病心肌病心肌病理学改变。
建模成功后分别对两组大鼠采用改进的耐钙成年大鼠急性酶分离方法分离心肌细胞，运用膜片钳技术以全细胞模式分别记录两组大鼠心室肌单细胞的Ito和膜电容，并运用Clampfit 10.1、OriginPro 8.0软件进行数据分析作图以及SPSS11.0软件分析比较两组大鼠心室肌的Ito的变化。
普伐他汀减轻大鼠急性心肌梗死后瞬时外向钾电流的表达
普伐他汀减轻大鼠急性心肌梗死后瞬时外向钾电流的表达杨海燕;佘强;张玉方【摘要】Objective To investigate pravastatin effects on acute myocardial infarction (AMI) in rat. Methods AMI model was developed by the left anterior descending coronary artery ( LAD) ligation in rats and the animals were randomly divided into 24-hour group, 1-week group, 4-week group and pravastatin group(20 mg/kg). Accordingly, the sham-operation group was established. Kv1. 4 、Kv4. 2 and Kv4. 3 mRNA and protein were measured with free right ventricular wall of each group using Real-time polymerase chain reaction (real time-PCR) and western blot. Results The expression of Kvl. 4 mRNA and protein was up-regulated after 24 hours in AMI; the expression of Kv4. 2 and Kv4. 3 mRNA and protein was down-regulated, the former lowest in 4-week group and the latter lowest in 24-hour group; Kvl. 4 mRNA ( P < 0. 01 ) and protein ( P < 0. 05 ) of pravastatin group was lower than 4-week group, Kv4. 2 ( P < 0. 05 , P < 0.05) and Kv4. 3 ( P < 0. 01, P < 0. 05 ) mRNA and protein of pravastatin group were higher than 4-week group. Conclusions The expression of Kvl.4 mRNA and protein increased while Kv4. 2 and Kv4. 3 mRNA and protein depressed after AMI in rat, pravastatin may decrease the variance of Ito.%目的探讨普伐他汀对大鼠急性心肌梗死(AMI)后瞬时外向钾电流(Ito)表达的影响.方法结扎大鼠前降支建立AMI模型,分为24h组、1周组、4周组及普伐他汀干预(20 mg/kg)组,并设假手术组,real-time PCR及Western-blot分别检测大鼠右心室游离壁Kvl.4、Kv4.2、Kv4.3 mRNA及蛋白质表达.结果 Kvl.4 mRNA及蛋白质表达在AMI后24h开始增高；Kv4.2 mRNA及蛋白质表达在AMI后24h逐渐降低,4周组更低；Kv4.3 mRNA及蛋白质表达在AMI后各时间点均降低,24h组最低；普伐他汀组与4周组比较,Kv1.4 mRNA(P ＜0.01)及蛋白质(P＜0.05)表达更低,而Kv4.2(P ＜0.05,P＜0.05)、Kv4.3(P＜0.01,P＜0.05) mRNA及蛋白质表达增高.结论大鼠AMI后Kv1.4 mRNA及蛋白质表达明显增高,而Kv4.2、Kv4.3 mRNA及蛋白质表达明显降低,普伐他汀可能减轻上述变化.【期刊名称】《基础医学与临床》【年(卷),期】2013(033)004【总页数】4页(P472-475)【关键词】急性心肌梗死;瞬时外向钾电流;普伐他汀;大鼠【作者】杨海燕;佘强;张玉方【作者单位】重庆市第三人民医院老年心血管科,重庆400014;重庆医科大学附属第二医院心血管内科,重庆400016;重庆市江北区第一人民医院药剂科,重庆400020【正文语种】中文【中图分类】R541.4急性心肌梗死(acute myocardial infarction，AMI)后心肌细胞膜离子通道的异常活动，形成电重构，可能是导致AMI后出现心律失常的原因。
内向整流钾通道及其在心肌细胞电活动中的重要意义5页word文档
整流是一种物理现象，指正方向的导通远远大于逆方向的导通。
就电学而言，指的是电流在导体内流动时，正方向的电导（ conduction ）远远大于逆方向的电导。
从钾离子流来说，当膜电位处在钾的电－化学平衡电位（ E K ）时，净跨膜钾流为零。
当膜电位负于 E K 时， K + 内流；而当膜电位正于 E K 时， K + 外流。
前者为内向电流，后者为外向电流。
如果不存在整流现象的话，钾流的电流－电压关系应是一条直线或基本上是一条直线。
图 4 － 2 是兔心室肌细胞 I K1 电流的电流－电压关系曲线。
横轴是膜电位， 0 左侧细胞内为负， 0 右侧细胞内为正。
纵轴是膜电流，本图为I K1 钾电流， 0 以下为内向电流， 0 以上为外向电流。
从本图可以看出，当膜电位负于－ 80mV 时（超极化）， I K1 的 K + 流呈直线向下的内向电流。
当膜电位去极化时， I K1 的 K + 流没有按内向电流的斜率呈直线向上的外向电流，而是趋向平坦，也就是向下移位或内向移位，这就是内向整流现象，故 I K1 钾流又称为内向整流钾流。
图 4－2 兔心室肌细胞 I K1 电流的电流－电压关系曲线实验证明， I K1 通道的内向整流现象并非由于门控活动引起，而是膜电位去极化时，细胞内的 Mg 2+ 和多胺（如腐胺、亚精胺、精胺）移向 I K1 通道内口并堵塞之，钾离子不能循 I K1 通道外流，从而出现内向整流现象。
在实验中，如果移去细胞内的 Mg 2+ 和多胺，则 I K1 通道的内向整流现象消失。
快反应心肌细胞在静息电位（或最大舒张电位）水平时， I K1 通道处于开放状态。
在动作电位去极化的过程中，由于内向整流现象， I K1 通道逐步被堵塞，到去极化达－ 20mV 以上时， I K1 通道几乎完全被堵塞，K + 通过 I K1 通道的外流量几乎为零。
正由于 I K1 通道的内向整流特性和 I K 通道的延迟激活特性，细胞内 K + 很难流出细胞外，造成复极化困难而使动作电位呈现平台期。
牵张刺激对乳大鼠心房肌细胞瞬时外向钾电流和内向整流钾电流的影响
牵张刺激对乳大鼠心房肌细胞瞬时外向钾电流和内向整流钾电流的影响胥亚楠;杨龙;杨天和;邓春玉;罗淋;覃智芳;唐倩;杨君【摘要】目的：探究牵张刺激对乳鼠心房肌细胞瞬时外向钾电流（Ito）、内向整流钾电流（IK1）和动作电位时程（ APD）的影响。
方法：取1日龄SD乳大鼠心脏，分离、消化获得心房肌细胞。
于细胞牵引装置培养24 h分组：对照组不予牵张刺激；牵张组予增加12％硅胶膜面积牵张刺激24 h。
膜片钳全细胞记录方法记录细胞膜Ito、IK1和APD的变化。
结果：在＋60 mV刺激电压水平，牵张组Ito 密度与对照组相比明显降低[（1.6±0.4）pA/pF vs （12.1±2.9） pA/pF，P＜0.01]。
在-120 mV刺激电压下，牵张组IK1密度较对照组增大[（-10.8±0.8）pA/pF vs （-8.8±0.9） pA/pF，P＜0.01]。
牵张组动作电位复极50％（ APD50）和复极90％（ APD90）均较对照组明显缩短[（10.5±1.4）ms vs （15.5±2.4）ms，（30.0±2.8） ms vs （56.3±3.6） ms，P＜0.01]。
结论：牵张刺激可降低乳大鼠心房肌细胞Ito密度，增大IK1密度，缩短APD，这可能是压力负荷增大致心房电重构的基础之一。
%[ABSTRACT]AIM:Toinvestigatetheeffectsofmechanicalstretchontransi entoutwardpotassiumcurrent(Ito), inward rectifier potassium current ( IK1 ) and action potential duration ( APD) of cultured neonatal rat atrial myocytes . METHODS:Neonatal rat atrial myocytes were isolated and cultured on silicone sheeting with or without stretch for 24 h. The silicone membrane area was increased by 12%in stretched group.The cells without stretch served as control .Ito, IK1 and APD were recorded by the technique of whole-cell patch clamp.RESULTS:Compared with control group, Itodensity in stretched myocytes was significantly reduced [(1.6 ±0.4) pA/pF vs (12.1 ±2.9) pA/pF, P<0.01], whereas IK1 density was increased [(-10.8±0.8) pA/pF vs (-8.8 ±0.9) pA/pF, P<0.01].The APDs at 50%and 90%levels of repolarization ( APD50 and APD90 ) in the stretched cells were obviously decreased than those in non-stretched cells [(10.5 ±1.4) ms vs (15.5 ±2.4) ms, (30.0 ±2.8) ms vs (56.3 ±3.6) ms, P<0.01].CONCLUSION: Stretch stimulation leads to the reduction of Ito density, the increase in IK1 density and the shortness of APD in cultured rat atrial neonatal myocytes , which may contribute to atrial electrical remodeling induced by pressure overload .【期刊名称】《中国病理生理杂志》【年(卷),期】2014(000)008【总页数】4页(P1489-1492)【关键词】牵张;心房肌细胞;膜片钳技术;钾电流;动作电位【作者】胥亚楠;杨龙;杨天和;邓春玉;罗淋;覃智芳;唐倩;杨君【作者单位】贵阳医学院附属人民医院心内科，贵州贵阳550002;贵阳医学院附属人民医院心内科，贵州贵阳550002; 遵义医学院第三附属医院心内科，贵州遵义563003;贵阳医学院附属人民医院心内科，贵州贵阳550002;广东省人民医院医学研究中心，广东广州510080;贵阳医学院附属人民医院心内科，贵州贵阳550002;遵义医学院第三附属医院心内科，贵州遵义563003;贵阳医学院附属人民医院心内科，贵州贵阳550002;贵阳医学院附属人民医院心内科，贵州贵阳550002【正文语种】中文【中图分类】R363心房颤动(房颤)常高发于有高血压、心力衰竭(心衰)等基础疾病的患者[1]。
心肌细胞的急性分离及瞬时外向钾电流的记录
心肌细胞的急性分离及瞬时外向钾电流的记录张丹;王鑫;王晞;徐超【摘要】目的在利用全细胞膜片钳技术研究离子通道时,分离出结构功能完整、生理状态良好、耐钙的单个心肌细胞至关重要,文中主要探讨心肌细胞分离及瞬时外向钾电流记录的影响因素.方法使用改良的体外心脏恒温灌流,酶解消化得到单个心肌细胞,并采用全细胞膜片钳技术记录瞬时外向钾电流.结果用全细胞膜片钳技术可获得生理状态良好的心肌细胞,并成功的记录到瞬时外向钾电流.结论全细胞膜片钳技术方法简便、稳定,细胞存活率高,并且易于进行全细胞膜片钳实验.【期刊名称】《医学研究生学报》【年(卷),期】2010(023)008【总页数】3页(P792-794)【关键词】心肌细胞;分离;瞬时外向钾电流;全细胞膜片钳技术【作者】张丹;王鑫;王晞;徐超【作者单位】430060,武汉,武汉大学人民医院心内科;430060,武汉,武汉大学人民医院心内科;430060,武汉,武汉大学人民医院心内科;430064,武汉,武汉科技大学附属天佑医院心内科【正文语种】中文【中图分类】R331.310 引言膜片钳技术(patch-clamp technique)对离子通道的功能及细胞功能的调控研究起到了关键作用。
运用膜片钳研究细胞膜的电生理特性,成功的关键在于细胞膜与微电极间是否能形成高阻抗封接。
本实验运用改进的恒温灌流酶解法制备单个心肌细胞,并完成膜片钳实验。
1 材料与方法1.1 单个心肌细胞的急性分离取清洁级 2月龄健康 SD雄性大鼠 8只,体重 200～250g,由华中科技大学同济医学院动物中心提供,湖北省实验动物质量合格证为00001850,湖北省实验动物设施合格证为 00001172。
饲养条件为屏障环境,温度20～26℃,日温差≤3～4℃,相对湿度 40%～70%,换气次数 10～20次 /h,气流速度0.1～0.2 m/s,空气洁净度10000级,落下细菌数≤3个 /皿,噪声≤60 db,工作照度15～300 1x,动物照度 15～20 1x,人工光照,昼夜明暗交替时间 12/12h。
瞬时外向钾电流及其调控因素的研究进展
的激活 、失活和复活均呈现电压依赖性 ,对 42氨基吡 啶 (42AP)敏感 ,还可被钡抑制 。 Ito1又可分为激活慢 , 失活也慢的 Slow Ito ( Ito, s )和激活快 ,失活也快的 Fast Ito ( Ito, f ) [ 2 ] ,其中心外膜主要含有 Ito, f ,而心内膜主要分 布 Ito, s。另外一种慢成分 Ito2 [ 3 ] , Ito2是非 42A P敏感的 钙离子敏感的电流 ,主要由氯离子介导 ,对咖啡因 、颅 痛定及斯里兰卡肉桂碱较敏感 。本文的 Ito特指 Ito1 。 2 瞬时外向钾电流的分布
心血管病学进展 2009年第 30卷第 6期 A dv Ca rd iovasc D is, N ovem ber 2009, V ol. 30, N o. 6
瞬时外向钾电流及其调控因素的研究进展 3
张紫冠 综述 李卫华 审校 (福建医科大学附属厦门第一医院心内科 厦门市心血管病研究所 , 福建 厦门 361003)
心房肌组织相比 ,慢性心房颤动患者左右心房的 Ito电 流密度都显著下调 ,但其 Ito激活和失活的动力学和电 压依赖特性与窦性心律病人无差异性 。而 Grammer
等 [ 21 ]也发现心房颤动患者右心房中 Kv4. 3 的 mRNA
表达较正常减少了 61%。 Ito的下调导致心房颤动患 者有效不应期和 APD 的缩短 ,是维持心房颤动的一个
人类右心室心外膜细胞动作电位复极1期末强大的ito离子流易引起动作电位平台期全或无的复极在病理情况下容易形成2相折返在2相折返的基础上通过一个联律间期极短的期外收缩导致心室颤动这可能是brugada综合征等起源于右心室的恶性心律失常疾病的重要电生理机制之一9能呈浓度依赖性地有效抑制ito离子流使心电11
瞬时外向钾电流与心脏疾病
瞬时外向钾电流与心脏疾病蔡本志;潘振伟;杨宝峰【期刊名称】《心血管病学进展》【年(卷),期】2009(030)0z1【摘要】瞬时外向钾电流是存在于心肌细胞膜上的一种钾离子电流,在去极化过程中迅速激活和失活,主要参与了动作电位的Ⅰ期复极,从而影响动作电位形态.瞬时外向钾电流在不同种属、同一种属动物不同部位中的分布存在着差异,因而产生了瞬时外向钾电流的异质性,这种异质性与维持心脏正常电信号传导及心脏疾病的发生都有很大关系.在心肌梗死、心房颤动及心力衰竭等疾病都存在着动作电位时程的延长,这部分是由瞬时外向钾电流下调引起的,因此充分理解瞬时外向钾电流在疾病中的变化,对于治疗心脏疾病具有很重要的意义.【总页数】3页(P50-52)【作者】蔡本志;潘振伟;杨宝峰【作者单位】哈尔滨医科大学药理学教研室,黑龙江,哈尔滨,150081;哈尔滨医科大学药理学教研室,黑龙江,哈尔滨,150081;哈尔滨医科大学药理学教研室,黑龙江,哈尔滨,150081;黑龙江省部共建国家重点实验室,黑龙江,哈尔滨,150081【正文语种】中文【中图分类】R331.3+8;R54【相关文献】1.牵张刺激对乳大鼠心房肌细胞瞬时外向钾电流和内向整流钾电流的影响 [J], 胥亚楠;杨龙;杨天和;邓春玉;罗淋;覃智芳;唐倩;杨君2.瞬时外向钾电流与心脏疾病 [J], 蔡本志;潘振伟（综述）;杨宝峰（审校）3.镧对大鼠海马神经元瞬时外向钾电流和延迟整流钾电流动力学的影响 [J], 杜会枝;杨频4.夹竹桃麻素对过氧化氢所致兔心房肌细胞超速激活延迟整流钾电流及瞬时外向钾电流异常的保护作用 [J], 刘岩;李泱;林琨;田苗;王玉堂;单兆亮5.高浓度姜黄素对大鼠心室肌细胞瞬时外向钾电流和内向整流钾电流的影响 [J], 施通;吴辉;刘付丽;杜永均;高元兴;岳军;徐旭仲因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
不同心功能糖尿病心肌病大鼠瞬时外向钾电流的变化及意义
不同心功能糖尿病心肌病大鼠瞬时外向钾电流的变化及意义刘星;张良胜;杨锦龙;陈俞瑾;诸波;査克岚;杨悠;范忠才【期刊名称】《山东医药》【年(卷),期】2015(000)025【摘要】目的：探讨不同心功能糖尿病心肌病（DCM）大鼠瞬时外向钾电流（Ito）的变化及意义。
方法采用腹腔注射链脲佐菌素制作DCM模型（ DCM 组）；在此基础上采用冠状动脉结扎法制作DCM的心力衰竭模型（ DCM心衰组）。
对照组采用假手术处理。
运用膜片钳技术以全细胞模式分别记录并比较3组心室肌单细胞的Ito变化。
结果冠状动脉结扎术后第3周，DCM心衰组左心室扩大、心功能明显下降，与DCM组及对照组比较有统计学差异（P均＜0．05）。
DCM心衰组与对照组比较，左心室心肌细胞的Ito电流密度显著降低，且出现较早[＋60 mV时，（12．05±9．02）pA／pF vs （32．11±4．52） pA／pF，P ＜0．05；＋70 mV时，（17．70±9．21） pA／pF vs （38．65±5．05） pA ／pF，P＜0．05]；DCM组与对照组比较，左心室心肌细胞的Ito电流密度也明显降低[＋70 mV时，（15．22±9．13） pA／pF vs （38．65±5．05）pA／pF，P＜0．05）]。
DCM组与DCM心衰组及对照组比较，Ito电流的I-V曲线均下移显著；但DCM心衰组与DCM组比较，左心室心肌细胞Ito电流密度变化无统计学意义（P均＞0．05）。
结论随着心功能降低，DCM大鼠Ito电流密度下降，这可能是导致DCM患者发生心律失常的离子基础。
%Objective To investigate the variations and significance of the transient outward potassium current ( Ito) in different cardiac functions of rats with diabetic cardiomyopathy (DCM).Methods We established the DCM animal modelsby intraperitoneal injection of STZ in rats (DCM group), and heart failure models by ligation of the left coronary ar-tery in DCM rats ( DCM with heart failure group ) .Rats in the control group were treated with sham-operation .Whole-cell patch clamp technique was used to record and compare the unicellular changes of Ito current in the left ventricular myocytes of the three groups , respectively .Results The left ventricular dilation and heart dysfunction were only found in the DCM with heart failure group after ligature of the coronary artery in 3th week.Significant difference was found between the DCM with heart failure group and the DCM group, control group (all P<0.05).Compared with control group, Ito density of the left ventricular myocytes was lower and it happened early in the DCM with heart failure gro up [(12.05 ±9.02) pA/pF vs (32.11 ±4.52) pA/pF, at +60 mV, P<0.05;(7.70 ±9.21) pA/pF vs (38.65 ±5.05) pA/pF, at+70 mV, P<0.05].The Ito density was lower in the DCM group as compared with that of the control group [(15.22 ±9.13) pA/pF vs (38.65 ±5.05) pA/p F, at +70 mV, P<0.05].The more depressed I-V curves of Ito were found in both DCM and DCM heart failure groups as compared with the control group , but the changes between DCM and DCM heart failure group were not statistically significant (all P>0.05).Conclusion As the cardiac function decreases , the Ito current density of DCM rats decreases , which may be one of the important ion bases for the occurrence of arrhythmia in DCM patients .【总页数】4页(P16-19)【作者】刘星;张良胜;杨锦龙;陈俞瑾;诸波;査克岚;杨悠;范忠才【作者单位】泸州医学院附属医院，四川泸州646000;永城市人民医院;泸州医学院附属医院，四川泸州646000;泸州医学院附属医院，四川泸州646000;泸州医学院附属医院，四川泸州646000;泸州医学院附属医院，四川泸州646000;泸州医学院附属医院，四川泸州646000;泸州医学院附属医院，四川泸州646000【正文语种】中文【中图分类】R587.2【相关文献】1.大鼠心脏移植物排斥反应时心肌瞬时外向钾电流与心肌细胞动作电位变化的研究[J], 贾一新;孟旭;焦玉清;韩薇;李岩;罗文琦;王宏娟2.糖尿病对大鼠心肌细胞动作电位和瞬时外向钾电流的影响 [J], 张中亚;於席芳;刘鲜梅;贾晓凤;王腾;汪晶晶;黄从新;许家琍;李庚山3.Ghrelin对糖尿病大鼠心肌动作电位和瞬时外向钾电流的影响 [J], 冯丹阳;孙强;陈莉娜;赵正杭;周筠4.瞬时外向钾电流在糖尿病心肌病电重构中的作用 [J], 刘星;张良胜;诸波;査克岚;张雪梅;杨悠;范忠才5.芪玄益心胶囊对糖尿病大鼠缺血心室肌细胞动作电位及瞬时外向钾电流的影响[J], 栗德林;栗明;翟铁军因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
离子通道电流
（三） 其他电流
➢ ICl ：氯离子电流，外流产生一种内向电流， 在起搏细胞旳自动除极化中起一定旳作用；
➢ I Na/Kpump (I pump ) ：钠钾泵电流，每次运转 时泵出3个Na+换进2个K+，因而产生一种微小 旳外向电流，称泵流。
二、钠通道电流
INa 是神经和肌肉，涉及心肌，兴奋或去极 化旳第一种离子流。在心肌细胞，去极化过程 中有无INa参加是产生快反应电位与慢反应电位 旳根本原因。所以，它旳变化对兴奋旳发生及 传播都有主要意义。
Na+通道旳H—H工作模型
5. 钠通道旳电流特点
（1）特点
➢ ① 膜去极化达阈电位（约－70mV）时此电流出现；
➢ ② 膜去极化达Na+平衡电位时消失（约＋30mV）；
➢ ③ 具有时间依赖性（τ＝1ms），虽然膜电位维持在 Na+通道开放所需旳电位水平， Na+电流亦可作为时间旳 函数而消失；
➢ ④ 在膜完全去极阶跃（full depolaring step）之 前将膜维持在一低电压状态，则Na+电流失活，此时再经 一去极化电流也不能激活Na+电流。
➢ 3. 其他内向电流：If 是由Na+携带旳内向电流，属于起搏电
流之一。
（二）携带外向电流旳通道
➢ IK1 ：内向整流钾电流 ➢ IK ：延迟整流钾电流(IKur, IKr, IKs) ➢ Ito ：瞬时外向钾电流 ➢ IKAch ：乙酰胆碱敏感钾电流 ➢ IKATP ：ATP敏感钾电流 ➢ IKCa：钙激活钾通道电流
（4）通道闸门
快Na+电流是Na+经过通道时旳离子电流。故其动力学取 决于Na+通道旳开放状态。根据Hodgkxin-Huxley旳闸门学说 来解释INa旳激活与失活过程。设想，Na+通道有两组带电粒子 起着门控作用。
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瞬时外向钾电流在糖尿病心肌病电重构中的作用目的探讨糖尿病心肌病（DCM）大鼠心室肌细胞瞬时外向钾电流（Ito）的变化，了解其在电重构中的作用。
方法选用20只健康成年SD大鼠，随机分为对照组（n=10）和DCM组（n=10），并通过病理组织学证实为DCM心肌病理学改变。
分别对两组大鼠采用改进的耐钙成年大鼠急性酶分离方法分离心肌细胞，运用膜片钳技术以全细胞模式分别记录两组大鼠心室肌单细胞的Ito和膜电容，并分析比较两组大鼠心室肌Ito的变化。
结果与对照组比较，DCM组大鼠左心室心肌细胞的Ito电流密度显著低于对照组[+70 mV时，（16.80±9.10）pA/pF vs （36.25±5.20）pA/pF]（P＜0.05），DCM组的Ito的I-V曲线明显较对照组下移。
结论DCM的Ito数量明显减少，在DCM心肌电重构中起着重要作用。
Ito的减少及Ito通道的分布密度不同，可导致动作电位时程与有效不应期发生变化，可能与临床严重心律失常的发生有关。
[Abstract] Objective To investigate the changes of the transient outward potassium current （Ito）on ventricular myocardium in diabetic cardiomyopathy （DCM）rat and to explore the meaning of theses changes for ventricular electrophysiological remodeling. Methods 20 healthy adult Spprague-dawley rats were selected and randomly divided into control group （n=10）and DCM group （n=10）.The myocardial pathological alterations of DCM were identified in DCM group by histopathologic test，and cardiomyocytes in both groups were separated by advanced calcium-tolerant separation method.Whole-cell path clamp technique was used to record the unicellular changes of Ito and membrane capacitance in left ventricular myocytes for DCM and control group respectively.All data were analysed and compaired by software. Results Compared with control group，the Ito density on left ventricular myocytes was significantly lower in DCM group than that of the control group [（16.80±9.10）pA/pF vs （36.25±5.20）pA/pF，at +70 mV]（P ＜0.05），and the I-V curve of Ito in DCM group was more depressed than the control group markedly. Conclusion The changes of Ito play an important role in cardiac electrophysiological remodeling of diabetic cardiomyopathy.The reduction of Ito and the variations of Ito density may be lead to the modifications of action potential duration and effective refractory period，which associates with severe arrthymia.[Key words] Diabetic cardiomyopathy；Electrophysiological remodeling；Pacth clamp；Transient outward potassium current糖尿病心肌病（diabetic cardiomyopathy，DCM）是指由糖尿病引起的心脏微血管病变、心肌代谢紊乱和心肌纤维化，最终引起心室肥厚、舒张期和（或）收缩期功能障碍的一种疾病状态[1]。
DCM是一种特异性心肌病，发病率高且其潜在患者数量庞大，极易导致心力衰竭和严重心律失常。
临床研究发现，DCM严重心律失常的发生率非常高，其一旦发生不仅恶化心功能，加重心肌损伤，而且极易导致患者死亡。
目前多数学者认为DCM恶性心律失常的发生与心室肌离子流及其通道改变即电重构现象有关。
瞬时外向钾电流（Ito）是心肌细胞上发现较早的离子流，对于心肌细胞1期复极及平台期形成有重要影响；同时Ito在心内、外膜心肌上的正常分布密度可维持其正常的动作电位时程（active potential duration，APD）离散度，从而起到维持心肌电稳定的作用。
一旦Ito发生结构和功能以及分布的紊乱极易导致心肌的电学改变，临床上可表现为心律失常。
本研究通过链脲佐菌素（streptozotocin，STZ）腹腔注射建立大鼠DCM模型，利用膜片钳技术检测心室肌细胞Ito的变化，以明确Ito电流在DCM心室电重构中的变化情况，从而了解其在电重构中的作用，有助于阐明DCM心室电重构的发生机制及其与心律失常的关系。
1 材料与方法1.1 实验动物健康SD成年大鼠20只，清洁级，雌雄不拘，体重180～220 g，购于第三军医大学医学实验动物中心。
实验中对动物处置符合动物伦理学标准。
1.2 试剂与主要仪器1.2.1 主要试剂胶原酶Ⅱ，血清白蛋白，牛磺酸，乙二醇双四乙酸（EGTA），羟乙基哌嗪乙磺酸（HEPES），谷氨酸，氯化钴，STZ，天冬氨酸钾。
均为Sigma 公司产品。
1.2.2 主要仪器膜片钳放大器（CEZ-2300，Nihon konden，Japan）；A/D转换器（Digidata 1322A，Axon Instruments，USA）；倒置相差显微镜（Axivert-135，Zeiss，Germany）；三维操纵器（WN 203，Narishige，Japan）；电极经横式拉制机（P-97 sutter，USA）；体视显微镜（S8APO，LEICA，Germany）；Langendorff 灌流装置（ML176，Austrilia）等。
1.3 实验方法1.3.1 DCM大鼠造模将20只SD大鼠随机分为对照组（n=10）和DCM组（n=10），对照组始终以普通饲料喂养，DCM组以高脂饮食喂养（20%蔗糖、10%猪油、10%蛋黄粉，0.5%胆固醇和59.5%基础饲料）。
喂养至第6周DCM组以1%STZ 30 mg/kg腹腔注射，对照组以同体积枸橼酸缓冲液一次性腹腔注射。
72 h 后尾静脉取血测空腹血糖，血糖≥11.1 mmol/L判断为2型糖尿病造模结束。
对照组普通饲料喂养6周，DCM组高脂高糖饲料喂养6周[1-2]。
1.3.2 分离心肌细胞将无钙台氏液、KB液和酶液分别用95%O2和5%CO2饱和30 min，打开与Langendorff相连的恒温浴槽相连，检测温度为37℃。
用去离子水冲洗Langendorff系统10 min。
用3%戊巴比妥钠0.2 ml/100 g，肝素4 U/g 对SD大鼠腹腔注射。
麻醉成功后，剪开大鼠胸腔，迅速取出心脏后置于4℃无钙台氏液中，轻轻挤压心脏排出残血，经主动脉逆行插管，固定于Langendorff 灌流装置上。
先用无钙台氏液冲净残存在冠状动脉和心室中的血液，换成消化酶液以8 ml/min持续灌流6～7 min，然后每隔1 min剪取一小块左心室组织，共10次，依次装于盛有KB液的10个小瓶中。
将取下的心肌组织块剪碎，用吸管轻轻吹打，再用200目筛网过滤，得到细胞混悬液，置于氧饱和的KB液保存，室温下1 h后置于4℃冰箱中备用[3]。
1.3.3 全细胞膜片钳记录Ito 取急性酶分离的大鼠心肌细胞，采用全细胞膜片钳记录模式记录电流。
选择细胞膜光滑完整、横纹清楚、无收缩的细胞，制作形成细胞贴附式膜片（cell-attached patch），在此基础上，向微电极内给予较强的负压形成全细胞记录构型。
最后施以Ito电流刺激方案，引导出Ito电流刺激波形。
本实验使用膜片钳放大器（CEZ-2300，Nihon konden，Japan）记录电流信号，经A/D转换器（Digidata 1322A，Axon Instruments，USA）处理后，用Clampex （version 10.1）软件系统采集后储存于计算机中。
采样频率为10 kHz，采样方式为Clampex下的Episodic stimulation[4-5]。
1.4 统计学处理采用Originpro 8.0对数据进行统计分析，计量资料以均数±标准差（x±s）表示，采用t检验，以P＜0.05为差异有统计学意义。
2 结果2.1 心肌细胞的细胞活性镜下可见两种细胞：一种为死亡细胞，细胞挛缩，呈圆形或者椭圆形，横纹消失，细胞溶解，细胞膜破裂；另一种细胞为存活心肌，呈杆状或矩形，横纹清晰，表面干净，折光性好，立体感强（图1箭头）。
图1 分离的心室肌细胞（箭头所指）2.2 病理切片观察结果随机抽取对照组及DCM组各两只大鼠作病理切片检查，结果对照组心肌纤维排列整齐，可见横纹，胞质丰富，细胞间隙正常（图2）。
DCM组心肌细胞呈空泡状，排列紊乱、扭曲，部分心肌纤维断裂、坏死，坏死心肌由纤维组织替代，符合DCM心肌病理变化（图3）。
图2 对照组左室心肌细胞HE染色（×400）图3 DCM组左室心肌细胞HE染色（×400）2.3 心室肌细胞Ito的变化保持电位于-80 mV下，以10 mV为阶跃，自-50 mV除极至+70 mV，钳制时间为300 ms引出Ito（图4～图6）。
通过记录将Ito的电流强度、膜电容、电流密度进行分析。