自身免疫病和自身抗体检测详解演示文稿

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IIF法检测ANA阳性常见荧光染色模型
细胞核 细胞浆 细胞骨架 细胞周期
均质型 核糖体型 肌动蛋白型 中心体型
• 自身免疫:是指机体免疫系统对自身抗原
发生免疫应答,产生自身抗体和(或)致 敏淋巴细胞的现象。
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与自身免疫性疾病相关的基本概念
• 自身免疫病:
是指在各种内外因素的作用下, 自身免疫反应过强,超过了生理性自 身免疫反应的强度且持续相当长时间, 造成对正常细胞、器官的功能与结构 的破坏,呈现与此损伤相关的临床表 现及免疫学异常。
的人群中发生强直性脊柱炎的可能仅为
2%,而第一级HLA--B27阳性的亲属
中,发生强直性脊柱炎的危险性达
20%。
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自身免疫病的基本特征
系统性红斑狼疮(SLE)的家族发病率也 较高,在SLE第一代亲属中发病率达3%-5%,同胞姐妹发病率更高,特别是单卵 双胎更为常见 。在1980年的调查中35组 单卵双胎的患者中,有22组患SLE,共患 病率达62.9%,而双卵双胎8组中仅1组患 病,为12.5%。
免疫印迹法(IB):
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自身免疫病常规实验室检查
• 血常规:
• RA:80%贫血,活动期PLT升高。 SLE:WBC,PLT,Hb均可能降底。 免疫血管炎:WBC增高。 对药物引起的骨髓抑制的监测。
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自身免疫病常规实验室检查
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自身抗体的检测方法
金标免疫斑点法
[原理]:斑点反应板上固相纯化抗原与 血清中抗体形成复合物,胶体金标记 抗人IgG单抗与复合物结合,形成肉眼
可见的红色圆斑点。本法用于快速检测 血清中抗体。
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自身抗体的检测方法
免疫印迹法(IB):
尿常规:
SLE:尿蛋白及RBC的出现表明肾脏损伤。
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自身免疫病常规实验室检查
肝功能:如有异常,应鉴别是何种性质(自
身免疫肝病?) 病原感染常规检查
肝炎病毒:HAV、HBV、HCV、HDV、
HEV、HGV…… EBV,TB……
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自身抗体的检测方法
ELISA法与IIF法比较,有操作 简便,结果判断较客观,无需荧光显 微镜等优点,现在一些医院用ELISA
法来作检测ANA的筛选方法。
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自身抗体的检测方法
颗粒凝集法(PA) [原理]:以检测抗脱氧核糖核蛋白体(抗
DNP抗体)为例。从小牛胸腺中提取脱氧 核糖核蛋白(DNP)抗原,致敏聚苯乙烯 乳胶,制成抗DNP抗体乳胶凝集试剂,当 血清中存在抗DNP抗体时,便与乳胶颗粒 上的DNP抗原结合,使乳胶颗粒相互凝集 出现肉眼可见的凝集颗粒。
(SLE)。
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自身免疫病的基本特征
• 自身免疫病的发生与多因素相关,包 括遗传因素、性别差异、年龄大小、 气候环境及地理位置等。
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自身免疫病的基本特征
遗传因素: 强直性脊柱炎(AS)患者90%为
HLA--B27阳性,然而在HLA--B27阳性
• 核均质型:ds-DNA或抗组蛋白?
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自身抗体的检测方法
• 斑点型(S):抗SSA、抗SSB?
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自身抗体的检测方法
• 着丝点型(ACA):抗着丝点抗体。
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自身抗体的检测方法
• 抗纺锤体抗体
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自身免疫病常规实验室检查
• 抗核抗体谱(ANAs) • 抗中性粒细胞胞浆抗体(ANCAs) • 类风湿关节炎相关抗体 • 自身免疫性肝病相关抗体 • 抗磷脂抗体 • 其它……
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抗核抗体谱(ANAS)的检测
抗核抗体(ANA)是自身抗体中
的一组抗体。ANA的研究,从发现狼 疮(LE)细胞算起,迄今40多年来,人 们对ANA的认识不断加深,已衍生出具 有不同临床意义的二十余种ANA,形成
了抗核抗体谱(ANAS)。
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抗核抗体谱(ANAS)的检测
抗核抗体: 传统定义:顾名思义是指抗细胞核抗原
成分的自身抗体的总称。
间接荧光染色技术(IIF) • 特异性高:阴阳性结果的信号强度对比明显。
每种已结合的抗体在相应抗原的位置产生典 型的荧光模型。
• 基质中抗原谱完整,可检测多种抗体,并且 检出率高。
• 当制备酶免试剂所需要的抗原太困难或复杂 时,可选择间接免疫荧光法。
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自身抗体的检测方法
常见的自身免疫性疾病图片资料
• 干燥综合症(SS)
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常见的自身免疫性疾病图片资料
• 皮肌炎/多发性肌炎(DM/PM)
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自身抗体的检测
• 自身抗体:是指抗自身细胞内,细胞表面 和细胞外抗原的免疫球蛋白。
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自身抗体的检测
• 自身抗体是自身免疫病的重要标记, • 每种自身免疫病都伴有特征性的自身抗体, • 某些自身抗体因对疾病的诊断具有高度的特异性,
已成为诊断某些疾病的血清标记性抗体或特异性 抗体, • 某些自身抗体与疾病的活动性有相关性,个别的 自身抗体被证实参与了组织的免疫病理损伤。
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• 如标本为阳性,已稀释血清中的特异性抗体将与包 被在固相上的抗原结合。
• 第二步,已结合的抗体与荧光素标记的抗人抗体结合, 然后在荧光显微镜下观察结果。
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自身抗体的检测方法
间接荧光染色技术(IIF)
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自身抗体的检测方法
自身免疫病常规实验室检查
肾功能:免疫肾病(SLE?血管炎?) 肌酶:多发性肌炎/皮肌炎(PM/DM) 尿酸:痛风?
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自身免疫病常规实验室检查
免疫血清学检查
免疫球蛋白、血清蛋白电泳(高球蛋的血 症)。
ESR、CRP(急性期蛋白):对病情活动性 的判断。
CH50、C3、C4:SLE活动期均降底。 ASO:链球菌感染,风湿热。
细胞免疫---致敏淋巴细胞
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与自身免疫性疾病相关的基本概念
• 隐蔽抗原:机体有些组织成分由于解剖位 置的特殊性,正常情况下终生不与免疫系 统接触,称为隐蔽抗原。
眼晶状体、葡萄膜---交感性眼炎;
精子—男性不育。
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与自身免疫性疾病相关的基本概念
非器官特异性
• 桥本甲状腺炎 类天疱疮
自身免疫性肾小球肾炎 系统性红斑狼疮
• 原发性粘液水肿 恶性贫血
肺肾出血综合征
干燥综合征
• 甲状腺机能亢进 自身免疫性萎缩性胃炎 绝经过早(少数病例) 类风湿关节炎
• Addisino病
自身免疫性肝炎
男性不育(少数病例) 硬皮病
• 1型糖尿病
原发性胆汁性肝硬化 溃疡性结肠炎
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自身免疫病的基本特征
性别差异和年龄大小: 强直性脊柱炎(AS)多见于年轻男性,
其发病年龄从4---90岁不等,但以15---20 岁多见,男女比列为9--10:1,但最近有人 调查发现男女比列约为1.5--3:1,只不过 女性 强直性脊柱炎患者起病缓慢,病情 较轻,易被误诊。
自身抗体的检测
自身抗体检测的临床意义
• 有助于自身免疫病的早期诊断; • 有助于判断疾病的活动性和预后,观
察治疗反应,指导临床用药; • 有助于进一步研究和阐明自身免疫性
疾病的发病机制。
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自身抗体的检测方法
• 间接荧光染色技术(IIF)实验原理
• 细胞、组织切片或纯化的、生化性质明确的物质均可作 为检测自身抗体或病原体抗体的抗原基质。
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常见的自身免疫性疾病图片资料
• 系统性红斑狼疮(SLE)
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常见的自身免疫性疾病图片资料
• 类风湿性关节炎(RA)
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常见的自身免疫性疾病图片资料
• 系统性硬化症(PSS)
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自身抗体的检测方法
ELISA法检测ANA [原理]:利用ELISA法,搜集细胞核和细
胞浆抗原,如ds-DNA、Histones、Sm、
RNP、SSA、SSB、Scl-70、centromere、
Jo-1等混合液包被微孔板,检测抗核抗
体。
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解——复发——缓解——迁延的临床特 征,以致成为终身痼疾。
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自身免疫病的基本特征
• 免疫抑制剂(肾上腺皮质激素、环磷 酰胺)治疗有一定疗效,但副作用与 不良反应严重,停药后常易复发。
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自身免疫性疾病临床“病谱”
• 器官特异性
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自身免疫性疾病发生的原因
机体抗原特异性淋巴细胞发生异常,对正常 组织发生免疫应答状态;
机体自身组织成分发生改变从而引起的免疫 应答状态。
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自身免疫病的基本特征
• 多数自身免疫病的病因不清,有些自 身免疫病的发生和复发似乎与某些外 因有关,但大多数自身免疫病是“自 发”地发生的,目前未找到肯定的外 因。
现代定义:是指抗细胞内所有抗原成分 的自身抗体的总称。
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抗核抗体谱(ANAS)的检测
ANA检测—IIF法(金标准) 1、90%以上实验室使用Hep-2细胞为底物; 2、为人来源培养细胞(人喉癌细胞),据有 核大、细胞结构清晰特点; 3、便于结构观察及荧光染色核型分析; 4、 核抗原丰富、特异性强、有完整的ANA抗 原谱(细胞核、浆、骨架、周期); 5、可预测分析ANA靶抗原范围; 6、 经验性强。
多发性肌炎/皮肌炎
• 重症肌无力
原发性硬化性胆管炎
克隆氏病
混合性结缔组织病
• 多发性硬化症 自身免疫性溶血性贫血 交感性眼炎
系统性血管炎
• 脱髓鞘疾病
特发性血小板减少性紫癜 晶状体源性葡萄膜炎 抗磷脂综合征
• 寻常天疱疮
特发性粒细胞减少症
药物性狼疮
自身免疫性疾病有一百多种,发病率占世界人口的10% 自身免疫性疾病几乎遍布临床各科(非手术科) 疑难病症?
自身免疫病和自身抗体检测详 解演示文稿
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(优选)自身免疫病和自身抗 体检测
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与自身免疫性疾病相关的基本概念
• 免疫 机体识别和排除抗原性异物的功能,
也就是机体免疫系统对抗原刺激所产生的 以排除抗原为目的的生理过程。
体液免疫--- 产生抗体
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自身免疫病的基本特征
• 系统性红斑狼疮(SLE)是最常见的自身 免疫性疾病之一,发病的男女比列为1:9, 在生肓年龄甚至可高达1:30,而且多发生 于20--40岁的孕龄妇女。
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自身免疫病的基本特征
• 大多数自身免疫病呈现出发作——缓
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自身免疫病的基本特征
• 血液中可检出高滴度的自身抗体和 (或)与自身组织成分起反应的致敏 淋巴细胞。
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自身免碍的范围取决于自 身抗原分布:
器官特异性自身免疫病:桥本氏甲状腺炎, 非器官特异性自身免疫病:如系统性红斑狼疮
[原理]:用SOS-聚丙烯酰胺凝胶电泳,将抗原按
分子量大小予以分离,再将其转移至硝酸纤维 薄膜,如果受检血清含有相应抗原的自身抗体, 则在相应位置会发生免疫反应,再加酶标抗体, 底物,显色液和终止液,在抗原抗体反应的位 置出现显色带,与标准带相比较。
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自身抗体的检测方法
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