超高效液相色谱-质谱法(UPLC-MS)检测7种合成甜味剂的方法的建立

分析与检测
甜味剂是能够赋予食品甜味的物质的总称，适量添加可使食品具有适口的感觉、良好的风味，又可保留新鲜的味道。

甜味剂按其来源分为人工甜味剂和合成甜味剂。

人工甜味剂主要是指一些具有甜味但不是糖类的化学物质，甜度一般比蔗糖高十倍至数百倍；其化学性质稳定，耐热、耐酸碱，不易出现分解失效现象，不具有任何营养价值[1]。

常见的人工甜味剂有糖精钠、甜蜜素、安赛蜜、阿斯巴甜、纽甜、阿力甜、三氯蔗糖与糖精等。

如果超量使用，则会危害人体健康，为此，国家对甜味剂的使用范围及用量进行了严格规定。

为确保合成甜味剂的合理使用，必须对添加种类及含量进行准确测定[2]。

本文通过实验建立了测定食品中7种甜味剂的超高效液相色谱-质谱法。

1　试验部分
1.1　仪器与试剂Waters Xevo TQ-S液相色谱质谱联用仪；湖南赫西仪器装备离心机，甲醇（HPLC纯）；实验室自制超纯水；甲酸（色谱级），甲酸铵（分析纯），乙腈（HPLC纯）；安赛蜜、糖精钠、甜蜜素、阿斯巴甜、阿力甜、纽甜与三氯蔗糖（均≥98%）。

1.2　色谱条件
色谱柱：C18柱（2.1 mm×100 mm，
1.7 μm）；流动相：A为0.1%（体积分数）
甲酸-5 mmol/L甲酸铵水溶液，B为
乙腈；柱温：35 ℃；进样量：10 μL，
流动相的洗脱程序见表1。

表1　流动相的洗脱程序
时间/min流速（mL/min）A B
00.258020
80.252080
8.10.258020
120.258020
1.3　质谱条件
离子源：ESI；扫描方式：负离子
扫描；检测方式：多反应监测扫描模
式（MRM）,干燥气温度：500 ℃；气
体流速：1 000 L/Hr。

表2　七种甜味剂质谱参数和保留时间
化合物母离子定量离子锥孔压/V碰撞能/V保留时
间/min
安赛蜜161.93783023 1.16
纽甜377.2200.31520 5.2
阿斯 巴甜293.1199.82516 2.06
糖精钠181.9541.73021 1.22
阿力甜330.2312.61814 2.86
甜蜜素17879.93024 1.32
三氯 蔗糖3943593611 1.87
1.4　样品前处理
取3 g左右样品于50 mL离心管
中，加入20 mL甲醇-水（1∶1）超声
提取30 min，加入2 mL 10.6%的亚
铁氰化钾和22%的乙酸锌涡旋1 min
混匀后，于10 000 r/min速率下离心
20 min，上清液转移至100 mL容量
瓶中，重复提取一次，合并上清液，
用甲醇-水（1∶1）定容至刻度线，过
0.22 μm有机滤膜，供液相色谱-质谱
仪器上机检测。

2　结果与讨论
2.1　流动相条件的选择
参照SN/T3538-2013《出口食品
中六种合成甜味剂的检测方法液相色
谱一质谱/质谱法》检测标准[3]，分
别用纯水、0.1%乙酸铵溶液和0.1%
甲酸-5 mmol/L甲酸铵溶液作流动
相水相，以甲醇和乙腈作为有机相进
行试验，最终确定流动相为0.1%甲
酸-5 mmol/L甲酸铵溶液和乙腈。

2.2　标准曲线的建立与分析
以空白糕点样品为基质制备基质
空白标准溶液，7种甜味剂用空白标
准溶液配制成系列标准浓度。

图1是
七种甜味剂样品的质谱图，实现了7
种样品的同时检测。

将质谱检出的峰
面积与标准溶液浓度进行拟合计算出
超高效液相色谱-质谱法（UPLC-MS）检测7种合成甜味剂的方法的建立
□ 张作松　启东市综合检验检测中心摘　要：建立液相色谱-质谱法对食品中添加的糖精钠、甜蜜素、安赛蜜、阿斯巴甜、纽甜、阿力甜与三氯蔗糖进行检测。

样品加入50%甲醇溶液后再添加蛋白质沉淀剂亚铁氰化钾和乙酸锌，去除蛋白质，超声、离心提取，上清液过 0.22 μm有机滤膜制成待测样品供检测，流动相为0.1%甲酸-5 mmol/L甲酸铵水溶液和乙腈，梯度洗脱，在负离子模式下通过MRM模式采集数据，加标浓度分别为1、5、10 mg/kg时，加标回收率在78.3%～117.4%，相对标准偏差（RSD）在1.95～6.33。

关键词：液相色谱-质谱；糖精钠；甜蜜素；安赛蜜；阿斯巴甜；纽甜；阿力甜；三氯蔗糖
Jun. 2020 CHINA FOOD SAFETY 109
110 食品安全导刊 2020年6月
T
logy
科技
分析与检测
目标物的线性回归方程、相关系数、
线性范围和检出限，如表3所示。

回
收率试验的加标浓度分别为1、5、 10 mg/kg，每份样品分别测定5
次，
图1　7种合成添加剂的色谱图
平均回收率在78.3%～117.4%，相对标准偏差（RSD）在1.95至6.33。

3　结论
本文通过液相色谱-质谱法检测
糕点中的甜味剂，参考SN/T3538-
2013《出口食品中六种合成甜味剂的
检测方法液相色谱-质谱/质谱法》，并优化质谱和色谱条件，提高检测效率，为甜味剂检测提供一种高效、快捷的检测方法。

利用液相色谱-质谱
联用技术建立同时测定多组分甜味剂的方法将成为将来食品安全检测技术的发展方向之一，确保检测结果的准确性。

参考文献
[1]刘婷,吴道澄.食品中使用的甜味剂[J].中国调味品,2010,35(11): 35-39.
[2]舞太鹏,马康.合成甜味剂检测技术的研究进展[J].化学分析计量,2017,26(6):109-115.
[3]中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局.SN/T3538—2013出口食品中六种合成甜味剂的检测方法液相色谱一质谱/质谱法[S].北京:中国质检出版社,2013.
表3　7种合成甜味剂的线性回归方程及相关系数
目标物线性回归方程
相关系数线性范围/
（mg/kg）检出限/
（mg/kg）安赛蜜348.875x+8123.620.99950.5～501纽甜
2615.04x-2455.590.9994
0.5～50
1阿斯巴甜816.516x-329.7670.99910.5～501糖精钠106.731x-421.3820.99790.5～501阿力甜1078.01x-406.234
0.99950.5～501甜蜜素
1923.94x+1399.790.99990.5～501
三氯蔗糖25.7522x-36.36460.9989
0.5～50
2.5。