高级食品检验工技能考试——奶粉中亚硝酸盐的测定

高级食品检验工技能考试
——奶粉中亚硝酸盐的测定
一、仪器与试剂
仪器：电子天平（精确值0.01g）、722分光光度计、水浴锅、电炉、温度计、烧杯、玻璃棒、100容量瓶（3个/人）、移液管、刻度吸管、漏斗、量筒、锥形瓶、具塞比色管、比色管架、刻度吸管架
试剂：亚铁氰化钾溶液、乙酸锌溶液、对氨基苯磺酸溶液、盐酸萘乙二胺溶液、亚硝酸钠标准溶液、蒸馏水、奶粉
二、操作步骤
1．亚硝酸钠标准使用液的配制：吸取亚硝酸钠标准溶液（每毫升相当于200ug亚硝酸钠）5.00mL，置于200mL容量瓶中，加水稀释至刻度，此溶液每毫升相当于5.0ug 亚硝酸钠。

2．样品处理：称取0.5g的奶粉（平行做2个样品，并做一个空白），置于100mL烧杯中，以70℃左右的蒸馏水约50mL将样品全部洗入100mL容量瓶中，然后加入1mL 亚铁氰化钾溶液，摇匀，再加入1mL乙酸锌溶液以沉淀蛋白质，冷却至室温后加水至刻度，混匀。

于沸水浴加热5 min，取出后放置0.5h，除去上层脂肪，清液用滤纸过滤。

弃去初滤液约15mL，收集滤液备用。

3．标准曲线的绘制：吸取0.00、0.20、0.40、0.60、0.80、1.00mL亚硝酸钠标准使用液，分别置于6个50mL比色管中。

各加入2.5mL 4g/L对氨基苯磺酸溶液，混匀，静置3-5min后，各加入1.0ml2g/L盐酸萘乙二胺溶液，加水至刻度（50mL），混匀，静置15min，用比色皿以零管调零，于分光光度计538nm波长测定吸光度，绘制标准曲线。

4．样品测定：吸取上述样品处理滤液20.00mL于50mL比色管中，（加入0.10mL亚硝酸钠标准使用液），各加入2.5mL 4g/L对氨基苯磺酸溶液，混匀，静置3-5min后，各加入1.0ml2g/L盐酸萘乙二胺溶液，加水至刻度（50mL），混匀，静置15min，用比色皿以零管调零，于分光光度计538nm波长测定吸光度。

从标准曲线上查出样品
液含亚硝酸盐的量。

同时做试剂空白。

三、计算
x×1000
亚硝酸盐的含量（mg/kg）= —————————
20
m×———×1000
100
x———比色用样品液中含亚硝酸盐的量，µg
m ———样品质量，g
计算结果保留两位有效数字
四、精密度
在重复性条件下获得的两次测定结果的绝对差值不得超过算术平均值的10% 。

盐酸萘乙二胺法（测定亚硝酸盐）
原理
样品经沉淀蛋白质、除去脂肪后，在弱酸性条件下，亚硝酸盐与对氨基苯磺酸重氮化，再与盐酸萘乙二胺偶合形成紫红色的染料，其颜色深浅与亚硝酸根含量成正比，可以比色测定（538nm）。