A771726在大鼠体内肝肠循环的研究
大鼠再生肝8种细胞的PPARγ信号通路相关基因转录谱预示脂类代谢活动
大鼠再生肝8种细胞的PPARγ信号通路相关基因转录谱预示脂类代谢活动秦波;郭学强;徐存拴【摘要】为了解大鼠肝再生中肝细胞、胆管上皮细胞、卵圆细胞、星形细胞、窦内皮细胞、库普弗细胞、陷窝细胞、树突状细胞等8种肝脏细胞的PPARγ信号通路相关基因转录谱及其预示的脂类代谢活动,按本卷2期张丽君[1]等方法分离大鼠再生肝8种细胞,检测它们的PPARγ信号通路基因表达谱,分析其预示的生理活动.结果表明,41个PPARγ信号通路相关基因在大鼠肝再生中发生了有意义的表达变化,其中上调、下调和上/下调的基因为9、9、23个,呈现15种表达相关性.相应细胞的基因数为10、6和1,10、12和2,7、7和O,16、8和3,18、7和1,10、6和1,11、20和0,13、9和4.它们的转录谱预示,胆管上皮细胞和星形细胞的脂肪合成、星形细胞和树突状细胞的胆固醇代谢、8种肝脏细胞的脂肪酸运输和脂肪细胞分化、星形细胞、窦内皮细胞和树突状细胞的脂肪酸氧化和糖异生、胆管上皮细胞和树突状细胞的能量代谢增强.上述结果表明,PPARγ信号通路与大鼠肝再生密切相关.【期刊名称】《河南科学》【年(卷),期】2010(028)007【总页数】5页(P786-790)【关键词】大鼠肝再生;Rat Genome 230 2.0芯片;PPARγ信号通路;基因表达谱分析【作者】秦波;郭学强;徐存拴【作者单位】河南师范大学,生命科学学院,河南新乡,453007;河南省-科技部共建细胞分化国家重点实验室培育基地,河南新乡,453007;河南省-科技部共建细胞分化国家重点实验室培育基地,河南新乡,453007;河南师范大学,生命科学学院,河南新乡,453007;河南省-科技部共建细胞分化国家重点实验室培育基地,河南新乡,453007【正文语种】中文【中图分类】Q418肝脏由多种细胞组成，有重要的生理功能和很强的再生能力[2].一般认为，肝再生涉及PPAR γ信号通路在内的多种生理生化活动[3，4].研究表明，PPAR γ信号通路调控脂肪生成、胆固醇代谢、脂肪酸运输、脂肪酸氧化、脂肪细胞分化等多种脂类活动[5-8].过去，我们已以再生肝组织为材料研究了PPAR γ信号通路与大鼠肝再生的相关性，并取得了许多重要成果[9].但肝脏由肝实质细胞、肝非实质细胞、血细胞等细胞组成[10]，从细胞水平了解PPAR γ信号通路在各种再生肝细胞中作用能更好地揭示肝再生机理，为此，本期用percoll密度梯度离心结合免疫磁珠分选方法分离大鼠再生肝的肝细胞、胆管上皮细胞、卵圆细胞、星形细胞、窦内皮细胞、库普弗细胞、陷窝细胞、树突状细胞等8种细胞[11]，用大鼠全基因组基因表达谱芯片Rat Genome 230 2.0检测它们的PPAR γ信号通路基因在大鼠肝再生中表达变化，用H－Cluster等软件分析这些基因在大鼠肝再生中表达模式[12]，用生物信息学和系统生物学等方法分析它们的转录谱预示的脂类代谢活动.现将有关结果报告如下.SD纯系大鼠饲养、大鼠2/3肝切除模型的建立、大鼠8种肝脏细胞的分离与鉴定、Rat Genome 230 2.0芯片检测、数据处理及芯片检测结果的可靠性分析、大鼠PPARγ信号通路相关基因和肝再生相关基因的确认等按徐存拴、章静波方法[11]进行.资料表明，PPAR γ信号通路涉及57个基因，Rat Genome 230 2.0芯片含上述的50个基因.用该芯片检测大鼠再生肝8种细胞的基因表达谱表明，41个基因在肝再生中发生了有意义的表达变化.其中，肝细胞、胆管上皮细胞、卵圆细胞、肝星形细胞、窦内皮细胞、库普弗细胞、陷窝细胞、树突状细胞的相应基因数为17、24、14、27、26、17、31、26. 表达上调、下调和上/下调的基因数分别为 10、6 和 1，10、12 和 2，7、7 和 0，16、8 和 3，18、7 和 1，10、6 和 1，11、20 和 0，13、9 和 4（表 1）.用H－Cluster软件分析大鼠肝再生中PPAR γ信号通路相关基因的表达相关性表明，它们呈现15种表达相关性.促进脂肪生成的基因scd1在再生肝的胆管上皮细胞和星形细胞中表达上调，促进胆固醇代谢的基因cyp8b1、cyp27a1在星形细胞和树突状细胞中表达上调，促进脂肪酸运输的基因lpl、olr1和促进脂肪细胞分化的基因fabp4在8种细胞的多个时间点表达上调，促进脂肪酸氧化的基因ppargc1a、cpt1a和促进糖异生的基因pck2在星形细胞、窦内皮细胞和树突状细胞中表达上调（图1）.用生物信息学和系统生物学等方法分析大鼠肝再生中PPAR γ信号通路相关基因表达变化预示的细胞代谢活动表明，促进脂肪生成的基因fads2、scd1，胆固醇代谢的基因cyp8b1，脂肪酸运输的基因lpl、olr1、acsl6，脂肪细胞分化的基因fabp4，脂肪酸氧化的基因cpt1a等表达上调，预示大鼠肝再生中相应活动增强（图2）.PPAR γ是脂类代谢的重要调节因子，能够调节脂肪酸吸收、脂肪合成和脂肪沉积，是保持脂类内环境稳定的主要调节因子[13-14].研究表明，PPAR γ促进胆管上皮细胞和树突状细胞的胆固醇代谢基因cyp7a1、肝星形细胞的cyp27a1表达上调，与Maeda等的研究结果一致[15].胆管上皮细胞和星形细胞的促进脂肪合成基因scd1、fads2在大鼠肝再生中表达增强，预示PPAR γ促进相应细胞的脂肪合成增强.8种肝脏细胞的fabp4、卵圆细胞的plin、星形细胞和陷窝细胞的adipoq均为促进脂肪细胞分化基因，它们在肝再生中表达增强.8种细胞的lpl和olr1、星形细胞、窦内皮细胞、库普弗细胞和树突状细胞的acsl6均为促进脂肪酸运输基因，它们在肝再生中表达增强，预示PPAR γ促进相应细胞的脂肪酸运输，与Moyes等[16]和Chui等[17]的研究结果一致.胆管上皮细胞的ehhadh和acox2、星形细胞和窦内皮细胞的cyp4a1和acox1、8种肝脏细胞的ppargc1a均为促进脂肪酸氧化基因，它们在大鼠肝再生中表达增强，与Guo等的研究结果一致[18].上述结果表明，PPARγ信号通路参与大鼠再生肝细胞的脂类代谢调节.应当指出，Rat Genome 230 2.0芯片检测的是基因表达情况，尚不能较准确地反映蛋白质合成情况[19]，其对大鼠再生肝8种细胞脂类代谢的调节作用也有待用基因添加、基因干涉等方法加以证实.【相关文献】［1］张丽君，常翠芳，徐存拴.大鼠再生肝8种细胞的嘌呤核苷酸代谢基因转录谱预示的代谢活动［J］.河南科学，2010，28（2）：167－171.［2］Michalopoulos G K.Liver regeneration after partial hepatectomy：critical analysis of mechanistic dilemmas［J］.Am J Pathol，2010，176（1）：2－13.［3］Kountouras J，Boura 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三七总皂甙对大鼠体内肝卵圆细胞增殖的调控及机制
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《临床肝胆病杂志》推荐使用的规范医学名词术语
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大鼠在体肠吸收方法研究
大鼠在体肠吸收方法研究目的介绍大鼠在体及离体肠吸收的实验方法及研究进展。
方法对有代表性的文章进行分析，归纳和整理。
结果综述了药物在体及离体肠吸收的操作及应用。
结论采用大鼠在体及离体模型对药物肠道吸收行为作出科学的评价。
标签：大鼠；肠吸收；方法1 大鼠在体模型1.1单向灌流模型1.1.1实验方法[1，2] 将禁食大鼠，ip0.2g/ml乌拉坦溶液麻醉（5ml/kg），行固定设置，采取红外灯保证试验体温在37℃，随后按照腹部中心线切开腹腔3cm，将试验段肠行两端标准切开之后置入管道结扎。
将生理盐水（37℃）按照一定流速灌肠清洁，随后完全排空生理盐水，连接装置，按照事先准备的使用药液（37℃）进行供罐，统计记录液体灌流时间，并收集不同时间段内外流积液，并精确量取流出液体积和供试液减少的体积数或重量。
1.1.2特点通过直接测定灌入量和流出量的体积或重量变化，借以判断某种物质的吸收情况。
廖正根等人运用单向灌流模型并采用HPLC法分别测定桂枝茯苓胶囊内容物的灌流液以及直接溶解有這3种成分的灌流液在肠灌流过程中的浓度变化[2]。
结论：桂枝茯苓胶囊中3种有效成分在大鼠小肠主要以被动扩散方式吸收。
1.2循环灌流模型1.2.1实验方法[3，4] 将禁食大鼠ip戊巴比妥钠40mg/kg，麻醉后固定。
沿腹中线切开腹腔（约 2.5cm），在实验肠管两端各切一小口，在上端小口处插入直径为0.3cm的玻璃管，并用线扎紧。
用注射器将37℃的生理盐水缓缓注入肠管，洗去肠管内容物至净。
然后在实验肠管下端小口处插入玻璃管，并用线扎紧。
将肠管两端的玻璃管与蠕动泵的胶管连接，形成回路，开动蠕动泵。
先以一定流速循环10min后，将流速调为2.5ml/min，分别于回流后0.25、0.5、1.0、1.5、2.、2.5、3.0h取样5ml，经0.45μm微孔滤膜滤过，分别用测定药物的浓度。
1.2.2特点循环一定时间后，分析肠管内，外液中物质浓度的变化，测定其运转情况。
【doc】大鼠心,肝功能11项生化旨标正常参考值的测定及肠源性内毒素血…
大鼠心,肝功能11项生化旨标正常参考值的测定及肠源性内毒素血……'幕翥.天]T津MU科:.'附曩吾神曩孵疗效比较疾病种类倒敷)有魏()无就()总率幔阻肺感染3932(821)7(17.9)01O0支扩并呻内感染107(知)3(3O)01O0肺炎77(100)001O0睁癌并感染31(33.3)1(333)1(33.3)66.6旨计s947(79.7)l1(18.6)l(1.7)98.3讨论难治性肺部感染是内科的常见病多发病.由于慢性阻塞性肺气肿,支气管扩张等疾病常反复发生肺内感染,导致抗菌素的反复大剂量多种应用,耐药菌株越来越多,近年来呼吸道感染的病原体发生很大变化,感染菌株异常复杂.由于上述疾病易患于中老年人,此年龄组由于胸腺的萎缩,使机体免疫力低下,故使用一般抗菌素不能取得满意疗效.胸腺肽系小牛胸腺提取的具有生物活性的多肽.主要作用于T细胞系统,有调节和增强机体的细胞免疫功能,增强机体的抗病能力,与抗菌素联合应用可达到增强疗效的作用.目前肺内感染以厌氧菌较为常见,约占66,国内外已有报出[.甲硝唑通过其还原产物与厌氧菌细胞内脱氧核糖核酸相反应,干扰细菌竹生长,繁殖最终杀灭厌氧菌.羟氨苄青霉素为口服广谱半合成青霉素,口服吸收好,血药浓度较氨苄青霉素高.并能渗入痰液达到抗菌浓度,其作用较氨苄青霉素略强.对溶血性链球菌,草绿色链球菌,肺炎球菌,金黄色葡萄球菌.白喉杆菌,破伤风杆菌,梭状芽胞杆菌,痢疾杆菌等有高效,,因此,3种药联合应用增强了机体的免疫力,提高了抗呼吸道感染的有效性,且作用强起效快,在临床上,特别是久病,机体免疫力低下的患者,值得选用此种方法.参考文献1吴同果.等.氧哌嘛青霉紊与庚大霉素联合浩疗难治性肺部感染.临床荟萃,1994F9(4),1712孙瑞元.定量药理学.北京t人民卫生出版杜.1987{843曾明安.甲碚哇在内科瘴睛应用中的进展.临床荟萃. 1994}9(1)39(1995—11—22收稿)s}一7l大鼠5-,肝功能1l项生化指标正常参考值的测定及肠源性内毒素血症时的改变天津市南开医院检验科'/砷斛醮栅斯期室胖,————1,c,,f一,动物实验在医学理论和实践研究中已广泛应用,其常用生化指标的正常参考值国内外作者虽有诸多报道,但多取自传统的经典的手工操作测得值口].鉴于国内现已广泛应用自动生化分析,测试方法也多有变化,加之报告结果又改用sI单位.因此,对健康动物各项生化指标正常参考值范围进行测定是有必要的,有助于从事实验研究工作的参考.Wistar大鼠是常用实验动物之一,所以我们对其心,肝功能的l1 项生化指标进行了测定,另因内毒素血症在成人呼吸窘迫综合症,多器官功能衰竭,弥漫性血管内凝血,中毒性休克综合症等疾病的发生,发展中起重要作用,所以我们又同时观察了大鼠肠源性内毒素血症时上述指标的改变,并与正T7,,f9/6三常参考值进行了比较,现将结果报告如下材料与方法一,动物:Wistar大鼠.健康,活泼,禁食16小时后体重120g~5g,雌雄兼用.购白天津市药物研究院动物房.二,材料:(一)内毒素(E.coliO11l:B'):Lipopolysac—charidesigmaehemkalco.Lot63H4011(二)5-羟色胺肌酸酐硫酸盐(5一Hydrox- ytryptaminecreatininesulfatecomplex, serotonin).sigmachemicalco.1ot112H0781. (三)醋酸铅:分析纯.天津化学试剂三厂.批号930427.(四)试剂盒;ALAT.ASAT.LDH+a—HBDH.ALP,7一GT.TP和ALb使用北京中生公司产品,CK,T—BiL使用瑞士ROCHE公司产品,TBA使用日本第一化学产品.(五)COBASMIRAPLUS全自动生化分析仪:瑞士国ROCHE公司生产.三,方法:(一)动物分组:共分3组,每组10只wtar大鼠.I+正常对照组(N):不经任何处理,禁食16小时,但不禁水.在乌拉坦麻醉下,分离颈总动脉取血,供正常参考值测定.2.造模后3小时组(M1):大鼠肠源性内毒素血症动物模型的制作一参照文献口并略作改变.大鼠禁食】6小时,但不禁水,经尾静脉按20mg/kg体重注射醋酸铅(溶于0+2ml无热原重蒸镏水中),再注入lmg/kg体重的5一羟色胺(溶于0+2ml的无热原生理盐水中),后立即经口向胃灌注内毒素20mg/kg体重(溶于0.5ml无热原生理盐水中).3小时后,在乌拉坦麻醉下,分离颈总动脉取血供测定用.3.造模后24小时组(M2):与上述M1组同样造模,但于造模后24小时再取血测定.(二)生化指标的测定:1+心功能:测定了心肌4种酶类,即ASAT,LDH,a—HBDH及CK,均为"速率法".2.肝功能;测定了ALA T,ALP,一GT3种酶,均为"速率法".而TP,ALb,T—BiL及TBA均为终点法."实验结果寰1太一心,肝功麓11褒生化指标正常●考懂测定(n=1∞注:酶粪测定均为37℃条件下的测得值.表2,表3同此寰2太■■—性内●素●疽对心■一落的彤响(n一10)衰3大置肺潭性内毒素●盎对肝功奠的群响(n--10)讨论随着现代科技的发展,医学检验的进步也很快.特别是卫生部关于《首批淘汰35种临床检验方法的规定》下达后,许多检验方法有了较大变化,另外,废除老单位,改用国际统一使用的法定单位,使化验结果的正常参考值有了很大变动,这些变化自然也会影响到动物实验领域.从事动物实验研究工作的人们对此虽有所了解,但长期沿用旧制,积习难移,本文对新形势下常用动物之一的Wistar大鼠的11项常用生化指标的正常参考值进行测定是有意义的.需要特别说明的是CK酶的正常参考值.CK可有3种同功酶,即来源于脑组织的CK--BB,来源于心肌细胞的CK—MB和主要来源于骨骼肌细胞的CK--MM.本文测定使用的血标本因系分离颈总动脉后得到的动脉血,术中对骨骼肌有破坏引起CK—MM的释放增多而致总CK活性增高,因此本CK测定结果可能是偏高的.正常情况下,肠腔内有大量细菌和内毒素,而其中80被肝脏摄取.腹内感染是常见的危重疾患,部分患者可出现败血症,感染性休克和多器官衰竭].这是由于肠遭内毒素大量增加,可对肝细胞及毛细管上皮细胞产生直接损害作用.由于肝血窦细胞的损害又减弱了肝脏对内毒素的解毒作用,致使内毒素从门静脉血中"溢出"而进入体循环中,形成肠源性内毒素血症.本文在对l1项生化指标正常参考值测定的同时,又采用经口投予大量内毒素的方法,并经静脉注入醋酸铅和5一羟色胺以提高机体对内毒素的敏感性,夙而造成肠源性内毒素血症的动物模型.内毒素主要成份是脂多糖(LPS),由3部分组成:外层为O一特异性多糖,中层为核心多糖,内层为类脂A,后者主要起毒性作用.内毒索类脂A磷酸基可以与肝细胞膜上的特异受体相结合,直接损害肝细胞造成肝窦淤血和肝细胞坏死.其间接作用是受累器官(包括心脏)的巨噬细胞在LPS的刺激下过多地分泌多种具有不同生物活性的多肽类细胞因子(Cy—tokine)而致病理性损害血浆中的各种酶类系来自血细胞和各组织中,当器官或组织受损时,细胞膜通透性增加,它们便会渗入血液而引起血清中这些酶的活性增高,提示心,肝功能已受损,我们的实验结果表明,大鼠造模后3小时除TP和ALb外,各项心,肝功能指标都比正常对照组高,说明内毒素血症确实是造成机体心,肝等脏器损害的重要原因.参考文献1李牲,等译.毒性实验中宴验动物各种指标的正常值.北京:凡民卫生出版社,19842侯瑞*,等.瑰罩扩治疗肠蔼【性由毒素血盎的实验研究中华外科杂志,1.99114(29):2483Pain工A.andI~i[eyM.E.Exl~rimantalandelinc~studyDfLactul~eino~trumtireJaun击Br,J.surg一1986+73:7754秦明赦.愎由感染时内毒索开导的免疫细胞学反应与通里攻下法的影响.中国中西医结台杂志.1993;13(5):266 (19~5—0~-08收稿)。
三七总皂苷对大鼠肝脏药物代谢酶酶活性、mRNA及蛋白表达的影响
三七总皂苷对大鼠肝脏药物代谢酶酶活性、mRNA及蛋白表达的影响研究三七总皂苷对大鼠肝脏药物代谢酶酶活性、mRNA及蛋白表达的影响。
将Wistar雄性大鼠随机分为9组，给予受试药后，提取肝脏微粒体，肝脏总RNA 和总蛋白，分别采用底物探针法、荧光定量PCR技术和Western blot，检测三七总皂苷对肝脏药物代谢酶相关亚型酶活性、mRNA和蛋白质表达3个水平的调节作用。
实验的结果是三七总皂苷能显著诱导CYP1A2和CYP2E1酶活性和mRNA表达，同时对CYP2E1的蛋白表达水平也有显著诱导作用；三七总皂苷显著诱导CYP3A mRNA表达，但对CYP3A酶活性水平无明显的影响；三七总皂苷对CYP1A1和CYP2B mRNA表达和酶活性均无明显影响。
三七总皂苷对不同的P450亚型的调节作用具有选择性，主要的调节亚型是CYP1A2和CYP2E1，临床应用时，尤其是与CYP1A2和CYP2E1代谢有关药物合用时，应充分考虑到可能产生的药物相互作用以避免潜在的不良反应和毒副作用，同时对CYP2E1的诱导作用是否与人参皂苷清除自由基作用有关值得进一步研究。
标签：三七总皂苷；细胞色素P450；荧光定量PCR技术由五加科植物三七根中有效成分三七总皂苷（Panax notoginseng saponins，简称PNS）提取物制成的血栓通注射液、注射用粉针血塞通，已广泛应用于临床治疗瘀血阻络、脑血管疾病后遗症、视网膜中央静脉阻塞等疾病[1-2]，与其他药物联合使用也较为常见，如与纳洛酮等药物联合使用用于脑梗死急救[3]。
目前，有关中药注射剂安全性的问题报道日益增多，由药物诱导或抑制细胞色素P450导致的药物间的相互作用日益受到关注，但是有关中药复方及中药复方对CYP450的影响作用的系统研究尚未展开，有关PNS对细胞色素P450的影响的研究还不够全面，本实验将从酶活性水平、mRNA表达和蛋白质表达3个水平研究PNS对P450的多个亚型影响，为完善该药的代谢性相互作用和指导临床合理用药奠定基础。
来氟米特片(爱诺华)
来氟米特片曾用名爱诺华说明书英文名 LEFLUNOMIDE TABLETS拼音名 LAIFUMITE PIAN药品类别解热镇痛及非甾体抗炎镇痛药性状本品为白色薄膜衣片，除去薄膜衣呈白色。
药理毒理本品为一个具有抗增殖活性的异口恶唑类免疫抑制剂，其作用机理主要是抑制二氢乳清酸脱氢酶的活性，从而影响活化淋巴细胞的嘧啶合成。
体内外试验表明本品具有抗炎作用。
来氟米特的体内活性主要通过其活性代谢产物 A771726(M1)而产生。
药代动力学本品口服吸收迅速，在胃肠粘膜与肝中迅速转变为活性代谢产物A771726 （M1），口服后6～12小时内A771726的血药浓度达峰值，口服生物利用度约 80%，吸收不受高脂肪饮食影响。
单次口服50或100mg后24小时，血浆A771726 浓度分别为4或8.5μg/ml。
A771726主要分布于肝、肾和皮肤组织，而脑组织分布较少；A771726血浆浓度较低，血浆蛋白结合率大于99%，稳态分布容积为 0.13L/kg。
A771726在体内进一步代谢，并从肾脏与胆汁排泄，其半衰期约10 天。
适应症适用于成人类风湿关节炎，有改善病情作用。
用法用量由于来氟米特半衰期较长，建议间隔24小时给药。
为了快速达到稳态血药浓度，参照国外临床试验资料并结合Ⅰ期临床试验结果，建议开始治疗的最初三天给予负荷剂量一日50mg(5片)，之后给予维持剂量一日20mg(2片)。
在使用本药治疗期间可继续使用非甾体抗炎药或低剂量皮质类固醇激素。
建议开始治疗的最初三天给予负荷剂量一日50mg，之后给予维持剂量一日20mg或10mg。
不良反应主要有腹泻、瘙痒、可逆性肝脏酶(ALT和AST)升高、脱发、皮疹等。
在国外临床试验中，来氟米特治疗1339例类风湿关节炎病人中，发生率≥ 3 ％的不良事件包括：乏力、腹痛、背痛、高血压、厌食、腹泻、消化不良、胃肠炎、肝脏酶升高、恶心、口腔溃疡、呕吐、体重减轻、关节功能障碍、腱鞘炎、头晕、头痛、支气管炎、咳嗽、呼吸道感染、咽炎、脱发、搔痒、皮疹、泌尿系统感染等。
大鼠肝功能正常指标
大鼠肝功能正常指标1. 引言肝脏是人体最大的内脏器官之一，具有重要的生理功能。
肝功能的评估对于了解肝脏健康状况、诊断疾病以及监测治疗效果至关重要。
大鼠作为常用的实验动物模型，其肝功能正常指标的研究对于相关领域的科学研究和药物研发具有重要意义。
本文将从生理指标、生化指标和病理指标三个方面对大鼠肝功能正常指标进行综述，旨在为相关研究提供参考和指导。
2. 生理指标2.1 肝重量肝脏是人体最大的内脏器官，其重量可以反映肝脏的生理状态和功能。
一般情况下，成年大鼠的肝重约占体重的2-3%。
肝重的变化可以反映肝脏发生病理改变的程度，如肝功能不全、肝纤维化等。
2.2 肝体积肝体积是指肝脏在三维空间中所占据的体积大小。
肝体积的测量可以通过影像学方法，如CT扫描、MRI等。
肝体积的变化可以反映肝脏的生理状态和肝脏病变的程度。
2.3 血供肝脏是人体血液循环的重要器官之一，约占全身血容量的1/6。
肝脏的血供主要来自门静脉和肝动脉。
正常情况下，门静脉血流量约占总肝血流量的70-80%，肝动脉血流量约占20-30%。
血供的改变可以反映肝脏的功能状态和血液循环的状况。
3. 生化指标3.1 肝酶肝酶是肝脏细胞内存在的一类酶，其活性可以反映肝细胞的功能状态。
常用的肝酶指标包括丙氨酸氨基转移酶（ALT）、天门冬氨酸氨基转移酶（AST）、碱性磷酸酶（ALP）等。
正常情况下，肝酶的活性较低，当肝脏发生病理改变时，肝酶的活性会升高。
3.2 肝功能指标肝功能指标是评估肝脏功能的重要指标，其中包括血清总蛋白、白蛋白、球蛋白、谷丙转氨酶（GGT）、总胆红素等。
这些指标可以反映肝脏合成蛋白质、解毒代谢和胆汁排泄功能的情况。
3.3 脂质代谢指标肝脏在脂质代谢中起着重要作用，因此脂质代谢指标也是评估肝脏功能的重要指标之一。
常用的脂质代谢指标包括血清总胆固醇、甘油三酯、低密度脂蛋白胆固醇（LDL-C）、高密度脂蛋白胆固醇（HDL-C）等。
4. 病理指标4.1 肝组织形态学肝组织形态学观察是评估肝脏病理状态的重要手段。
大鼠原位肝移植解剖重建研究进展
大鼠原位肝移植解剖重建研究进展
吴伟康;李霄;王旭丹;丁睿;陶开山
【期刊名称】《器官移植》
【年(卷),期】2024(15)3
【摘要】大鼠肝移植模型的构建,为解决临床肝移植术后并发症及围手术期治疗等问题提供了理想的动物模型。
随着对大鼠肝移植模型建立的深入研究,逐渐形成了经典的“二袖套”法。
然而,在移植手术过程中,手术视野差、血管扭转、胆道损伤和无肝期较长等问题仍是传统方法无法避免的。
目前国内外大鼠肝移植模型改进方式主要围绕肝上下腔静脉、门静脉、肝下下腔静脉和胆管这4个重要解剖结构的重建展开。
为此,本文就肝上下腔静脉、门静脉、肝下下腔静脉和胆管重建领域的最新进展进行整理总结,以便为大鼠肝移植模型的构建提供参考,促进肝移植技术的进一步发展。
【总页数】5页(P469-473)
【作者】吴伟康;李霄;王旭丹;丁睿;陶开山
【作者单位】空军军医大学西京医院肝胆胰脾外科
【正文语种】中文
【中图分类】R617;R-322
【相关文献】
1.建立大鼠心脏死亡供体原位肝移植模型方法的研究进展
2.大鼠原位肝移植模型手术方法的研究进展
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来氟米特不良反应风险分析
精神症状、意识障碍，如谵妄、昏迷等；⑥恢复期：２～３周后病情及脏器功能好转〔１〕。
毒蕈中毒后，根据其损伤的器官及症状出现的时间顺序，可分三类：①早期综合征（６ｈ内）：消化道、神经及过敏毒性；②晚期综合征（６～２４ｈ）：肾脏、肝脏及肌肉毒性；③延迟综合征（超过１天）：横纹肌溶解、迟发的神经、肾脏毒性〔２〕。
本文患者既往体健，既往无重要脏器功能损害，生病前无发热、剧烈运动等病史，本次误食毒蘑菇后出现了胃肠炎表现，２天后该患者病情加重，出现乏力、肌肉酸痛，检查发现肌酸激酶，肌酸激酶同工酶、血肌红蛋白升高明显，谷丙、谷草转氨酶升高与肌钙蛋白不平行，结合病史特点，考虑该患者急性毒蕈中毒所致横纹肌溶解，其以横纹肌溶解为主要表现，多系统器官功能障碍为继发损害。
过往关于急性毒蕈中毒的报告，常见的临床表现为肝肾损害，报道横纹肌溶解的不多。
横纹肌溶解时抽血检查发现血液中出现肌红蛋白含量异常升高，肌红蛋白会阻塞肾小管，造成急性肾功能或其他器官功能衰竭。
其溶解原理：中毒会导致肌细胞膜完整性受损，水和Ｃａ、Ｎａ离子渗到细胞内，Ｋ、Ｐ、肌红蛋白渗出细胞外，最终胞浆内Ｃａ离子浓度异常升高，钙超载影响肌动蛋白、肌球蛋白，并活化胞内蛋白酶，导致肌肉坏死〔３〕。
细胞内Ｃａ离子增多，还可活化内切酶切断ＤＮＡ核小体，神经细胞死亡，并发脑功能损害〔４〕。
本患者中毒后出现横纹肌溶解的表现，并出现神志淡漠、意识障碍，出现ＣＯ２分压升高，２型呼衰，考虑与中毒后中枢性损害和横纹肌溶解致中枢周围呼吸功能衰竭有关。
随着临床研究的不断深入，多数学者倾向于使用血液灌流（Ｈｐ）＋血液滤过／血液透析方法血液净化治疗；血液灌流主要适用于清除脂溶性高、易与血浆蛋白结合的中、大分子毒物，对血液中肌红蛋白等有害物质也具有较好的清除作用。
蕈毒素以蛋白结合毒素为主，属于中大分子，常规血液透析不易清除，通过血液灌流中的活性炭可快速有效清除，但Ｈｐ仅能清除毒物本身，不能纠正毒素引起的病生变化，运用ＣＶＶＨ可清除代谢产物、炎症因子，维持水电解质酸碱平衡。
高效液相色谱用于肝硬化大鼠肠道通透性的测定
高效液相色谱用于肝硬化大鼠肠道通透性的测定华中医学杂志2008年第32卷第2期?113??论着?经验?高效液相色谱用于肝硬化大鼠肠道通透性的测定△(430030武汉)华中科技大学同济医学院附属同济医院感染科覃慧敏吴春明李洪涛李国军宋建新【摘要】目的建立通过双糖吸收试验评价肝硬化大鼠肠道通透性的高效液相色谱法(HPLC).方法建立四氯化碳诱导大鼠肝硬化模型.采用HPLC检测30例正常大鼠和30例肝硬化大鼠尿液标本中甘露醇和乳果糖排出率比值.以NH2柱(4.6mmX250rnrnX5inrn,Warters)为色谱柱;柱温为室温;流动相为乙腈:水70:30(V/V);流速为1.0ml/min;进样量为20l.示差折光检测器(RID2000).结果在上述色谱条件下,尿样中甘露醇和乳果糖能得到良好基线分离,甘露醇和乳果糖的出峰时问分别为6.721rain和9.242rain.该法检测甘露醇和乳果糖的线性范围分别为5～1000Fg/ml,2.5~500Fg/ml.甘露醇的加样回收率在92.7～98.0,乳果糖的加样回收率在91.3～97.4.肝硬化大鼠肠道通透性(乳果糖/甘露醇比值:0.03578±0.01245)显着高于正常大鼠(0.02563±0.00871).结论HPLC检测肠道通透性具有准确性高,重复性好,简便灵敏等特点,可用于肝硬化大鼠肠道通透性的测定和监测.【关键词】高效液相色谱;肝硬化;肠道通透性;乳果糖;甘露醇DetectionofintestinalpermeabilityincirrhoticratsusingHPLG.Q1NGHuiming,肌,Chunming,SONGJianxingeta1.PDepartmentofInfectiousDiseases,TongjHospital,TongjiMedicalCollege,HuazhongUniversityofScienceandTechnology,Wuhan430030[Abstract]ObjectiveToevaluatetheintestinalpermeabilityincirrhoticratsbyusingtwo-sug arabsorptiontestwithahighperformanceliquidchromatography(HPLC).MethodsLiver-cirrhosismodelinratswa sinducedbycarbontetrachloride. Thirtyurinesamplesofthecirrhoticratsandthehealthycontrolwerecollectedrespectivelyaft ertestsolutionadministrated,andanalyzedonaNH2columnofHPLCwithrefractiveindexdetector2000.Temperatureofc olurlln:ambienttemperature.Mobilephase:CH3CN/H20(70/30,v/V).Flowrate:1.0ml/mirLInjectionvolume:20F1.Re sultsUndertheseCOndi—tions.theretentiontimeofmannitolandlactulosewere6.271min,9.242minrespectively.The recoveryrateragedfrom92.7to98.0formannitoland91.3～97.4forlactulose.Asignificantrisein8hoururinaryL/Mexcretionratioswas foundinthecirrhoticrats(0.03578±0.【)1245)comparedtothatofcontrol(0.02563±0.00871)(P<0.05).ConclusionThemethodofdetectionoftheL/MratiobyHPLCisrapid,sensitive,accurateandreproduciblean dmaybeareliablemethodtoe—valuateandmonitorintestinalpermeabilityincirrhoticrats.[Keywords]Highperformanceliquidchromatography;Cirrhosis;Intestinalpermeability;L actulose;Mannitol自发性细菌性腹膜炎(SBP)为临床上失代偿期肝硬化患者常见的严重并发症.现已明确肠黏膜屏障功能受损,肠道通透性升高造成肠道细菌,内毒素移位是肝硬化患者SBP发生及发展的主要致病机制Eli.因此建立一种能够反映肝硬化时肠道通透性变化情况的有效方法对于SBP的防治具有重要意义.目前,直接观察肠道通透性较为困难,多采用间接方法进行研究,即通过观察肠道大分子物质通透性的改变间接证实肠道屏障功能的变化.本研究以甘露醇和乳果糖作为探针,采用高效液相色谱法(HPLC)测定肝硬化大鼠尿中甘露醇和乳果糖排出湖北省卫生厅科研基金课题(NX200506);为通讯作者; 现工作单位为三峡大学第一临床医学院率比值,以建立一种测定和监测大鼠肠道通透性的有效方法,现将结果报道如下.材料与方法一,模型的制作SD雄性大鼠,体重200~250g(同济医学院实验动物中心提供),自由进食水,间断饮10乙醇.皮下注射40～50四氯化碳油溶液,剂量为0.3ml/100g,每周2次,连续12周.每4周随机抽取1只进行解剖,观察肝硬化大鼠模型进展情况.取肝硬化大鼠30只,另取正常大鼠30只作为对照.二,主要仪器和试剂仪器:德国SchambeckSFDGmbH高效液相色谱系统;SystemGoldV810(美国Beckman公?114?司);RID2000示差折光检测器;NH2色谱柱(4.6mm×250mm×5mm,Warters);超声振荡仪;分析天平.试剂:乳果糖标准品和甘露醇标准品(色谱纯,Sigma公司);乳果糖分子探针(SolvayPharma—ceuticalsB.V,荷兰);甘露醇分子探针(分析纯,上海惠兴生化试剂有限公司);乙腈(色谱纯,天津四友试剂公司);硫柳汞;醋酸;阴阳离子交换树脂;超纯水.三,尿样的收集及测量前准备受试前禁食8～12h,经口灌胃.取2ml乳果糖/甘露醇混合液(含乳果糖100mg,甘露醇5() mg),用灌胃器插入食管上端缓慢灌注.收集6h尿液,记总量,将尿样加适量防腐剂(硫柳汞0.2mg/m1)置于一20℃保存,待尿样收齐后检测.将冰冻贮存的样品解冻,摇匀,取4ml离心(1()000r/ rain)10min,以去除尿中的沉淀物.取上清加入5醋酸2～3滴,加热煮沸3～5min,冷却后再离心(10000r/min)10min,以去除尿中的蛋白.重复上述操作一遍,然后再取上清2ml经阴阳离子交换树脂去除离子,经0.22m滤器过滤.用超声振荡仪振荡20min后(以去除气泡)上机分析待检.四,方法1.标准溶液的配制取乳果糖标准品5g,甘露醇标准品2.5g,精密称取,加流动相1L制成标准品溶液,浓度分别为5mg/ml,2.5mg/ml.梯度溶液的配制:精密量取上述溶液1,2,10,20,50, 100,200m1分别置1L量瓶中,加流动相稀释至刻度,摇匀作为标准溶液.2.色谱条件色谱柱为NH2柱(4.6mm×250mm×5mm,Waters);高压泵为S9404SM不锈钢微量泵SS0.01～3.0;柱温为室温;流动相为乙腈:水为70:30(V/V);流速为1.0ml/mim进样量为20l;RID2000示差折光检测器.3.标准曲线的绘制用SystemGoldV810配套软件对色谱图进行积分处理,得出峰面积积分值.以峰面积积分值为纵坐标,进样浓度(ug/L)为横坐标,建立甘露醇和乳果糖的标准曲线和回归方程. 4.HPLC分析取预处理后的尿样品0.2ml从进样口注入至HPLC仪,由切换阀自动进样20 l.进样后立即开始记录,至待测峰全部出现,基线平稳后停止记录,峰形曲线由计算机自动保存,全部样品分析完毕后再进行计算.5.回收率和乳果糖/甘露醇排出率(L/M)的计算用尿样品加标准品进行测定,计算甘露醇和乳Centra1ChinaMedica1Journa1,2008,V o1.32,No.2果糖的回收率.根据标准曲线和回归方程计算样品中的甘露醇排出率和乳果糖排出率,得出L/M.五,统计学方法用统计分析软件SPSS12.0进行数据分析,数据用±S表示,采用t检验.结果一,标准品,肝硬化大鼠及正常大鼠峰形曲线(图1～图3)在上述色谱条件下,甘露醇和乳果糖标准品溶液,尿液样品中各组分均能实现基线分离, 峰形良好,甘露醇和乳果糖的出峰时间分别为6.721 rain和9.242rain.l60140120蛊100蠡20喜105—50l23456789l0l1l2l3l4时间(min1图1标准品的峰形曲线0l23456789l0l1l2时间(min1图2肝硬化大鼠的尿样峰形曲线3456789l0l1l2时间(min1正常大鼠的尿样峰形曲线二,甘露醇和乳果糖的标准曲线(图4,图5)结果表明甘露醇和乳果糖分别在5～1()()()ug/ml和2.5 ～5()0ug/ml的浓度范围内与积分峰面积呈线性关系.回归方程分别为:YM=4()32.8X+6599.2(RM=0.9992);YJ,=1905.5X+3499.1(RL=0.9992).其中YM为甘露醇浓度,Yl_为乳果糖浓度,X为峰面积IRM 和RL分别为二者的相关系数.三,尿样品中甘露醇和乳果糖的回收率不同浓度甘露醇的加样回收率92.7～98.(),乳果糖的加样回收率为91.3～97.4.肝硬化大鼠的甘瑚舳8导加0一耋一23图华中医学杂志2008年第32卷第2露醇排出率为0.614246±0.190189,乳果糖排出率为0.020052±0.009846;正常健康大鼠的甘露醇排出率为0.502221±0.142862,乳果糖排出率为0.012883±0.006549.旧磐浓度fug/m1)图4甘露醇的标准曲线250000200000旧蝌15000010000050000浓度(ug/m1)图5乳果糖的标准曲线四,肝硬化大鼠和正常大鼠肠道通透性比较(附表)附表显示肝硬化大鼠乳果糖尿中排出率显着高于正常大鼠(P<0.05),L/M比值在肝硬化大鼠中显着增加(P<0.05).附表8h内甘露醇和乳果糖尿中排出率的比值(±s) 讨论肝硬化时由于肠微循环障碍,肿瘤坏死因子一a (TNF-~),一氧化氮(No)和氧自由基增多,常出现肠黏膜屏障功能受损,而肠黏膜屏障功能受损使肠道细菌/内毒素移位导致内源性感染,如SBP,全身炎症反应综合征(SIRS),败血症等_2].肠黏膜屏障功能受损的主要表现就是肠道通透性增加.当肠黏膜通透性增加到一定程度时,大分子物质和细菌即能穿越损伤的肠黏膜进入组织,发生移位.所以肝硬化时可以通过测定大分子物质通透性的改变来反?115?映肠道通透性的变化,以判断肝硬化患者是否存在肠黏膜屏障功能受损和受损程度.利用不被体内代谢的大分子糖类测定肠黏膜通透陛,评估肠黏膜的完整性,是一种无创的诊断肠黏膜屏障功能的方法[3].本研究成功地建立了一种测定大鼠肠道通透性的快速而又简便的方法,即采用高效液相色谱法+示差折光检测器(HPLC-RID)检测大鼠尿中甘露醇和乳果糖排泄率的比值.与传统检测肠道通透性的方法,如同位素探针Cr-EDTA和鲫Tc一rPA法,聚乙二醇类探针法相比,该方法具有明显的优势是灵敏度高,可检测到很微量的甘露醇和乳果糖(10g),较其他方法测定的值低,且标准曲线的线性相关性好(图4,图5).HPLc_RID的另一优势是特异性强(图1～图3).由于该法采用NH2反相柱,不仅能够将尿中的甘露醇和乳果糖完全分离,分别有较恒定的出峰时间(约6.721min和9.242min) 和明确的波峰,而且能使其与尿中的其他成分分离, 使计算机能识别和计算待测物的峰.另外,HPLC- RID还具有操作简便和重现性好的特点.样品仅需离心,煮沸,过滤即可,尿中的其他成分不影响甘露醇和乳果糖的检测;且运用计算机及其软件处理HPLC 测得的数据,实现了样品全自动分析,可随时对样品进行再分析而不必重新进样.HPLC法因其灵敏,准确,重复性好等优点,故在检测肠道通透性方面具有优势[4].本研究采用该方法检测肝硬化大鼠和正常大鼠的肠道通透性,发现前者(L/M值:0.03578±0.01245)显着高于后者(L/M值:0.02563±0.00871) (P<0.05),与国外报道一致[5],证实肝硬化时存在肠黏膜屏障功能受损.参考文献1HillebrandDJ.SpontaneousBacterialPeritonitis.Curr TreatOptionsGastroenterol,2002,5(6):4792Garcia-TsaoG.WiestR.Gutmicroflorainthepatho—genesisofthecomplicationsofcirrhosis.BestPractRes ClinGastroenterol,2004,18(2):3533刘卫,蒋朱明,舒红等.正常国人乳果糖和甘露醇排出率比值.中国医学科学院,1999,21(5):4074LiuH,ZhangS,YuAeta1.Studiesonintestinalper—meabilityofcirrhoticpatientsbyanalysislactuloseand mannitolinurinewithHPLC/RID/MS.BioorgMed ChemLett,2004,14(9):23395ChangqingG,HongchunH,JichangLeta1.Changesof intestinalpermeabilityincirrhoticpatientswithsponta- neousasciticfluidinfection.JournalofZhenzhouUniver—sity(MedicalSciences),2005,1(40):85收稿日期:2007—10—20。
大鼠肝再生中肝细胞的应激反应相关蛋白的研究
·84·84２０１７年第４期农业科技人和动物的肝脏具有极强的再生能力，大鼠肝７０％切除后可在７－１０天内基本恢复原有的体积和功能。
指机体突然受到强烈有害刺激（如创伤、手术、失血、感染、中毒、缺氧、饥饿等）时，通过下丘脑引起血中促肾上腺皮质激素浓度迅速升高，糖皮质激素大量分泌。
应激的最直接表现即精神紧张。
指各种过强的不良刺激，以及对它们的生理、心理反应的总和。
目前，对肝再生的研究，主要集中在这个复杂的过程。
肝再生终止和肝组织结构重塑机制等问题仍不清楚。
因此，阐述调控肝再生中肝细胞机构重塑的分子机制，不仅有助于全面认识肝再生，同时对肝脏疾病等有重要的意义。
本论文通过检索ＮＣＢＩ、ＫＥＧＧ网站资料，查阅相关文献，综合整理出参与大鼠肝再生中肝细胞应激反应相关的信号通路的蛋白质；用蛋白双向电泳（ｔｗｏ ｄｉｍｅｎｓｉｏｎａｌ ｅｌｅｃｔｒｏｐｈｏｒｅｓｉｓ，２Ｄ）结合质谱（ｍａｓｓ ｓｐｅｃｔｒｏｍｅｔｒｙ，ＭＳ）分析、同位素标记相对和绝对定量（ｉｓｏｂａｒｉｃ ｔａｇｓ ｆｏｒ ｒｅｌａｔｉｖｅ ａｎｄ ａｂｓｏｌｕｔｅ ｑｕａｎｔｉｔａｔｉｏｎ，ｉＴＲＡＱ）等生物高通量分析方法检测了大鼠肝再生中肝细胞在不同时间点相关蛋白的表达变化。
以大鼠部分肝切除后恢复不同时间的肝组织为材料，用Ｒａｔ Ｇｅｎｏｍｅ ２３０ ２．０芯片检测细胞应激反应等相关信号通路的蛋白质在大鼠再生肝肝细胞中表达情况，筛选出与大鼠肝再生中肝细胞相关的蛋白质；探讨细胞应激反应相关基因表达的蛋白质的作用。
结果表明，生长抑制和ＤＮＡ损伤诱导（ｇｒｏｗｔｈ ａｒｒｅｓｔ ａｎｄ ＤＮＡ－ｄａｍａｇｅ ｉｎｄｕｃｉｂｌｅ ｐａｔｈｗａｙ，ＧＡＤＤ４５）、缺氧诱导因子（ｈｙｐｏｘｉａ－ｉｎｄｕｃｉｂｌｅ ｆａｃｔｏｒ，ＨＩＦ Ｓｉｇｎａｌｉｎｇ）、肿瘤抑制蛋白ｐ５３（ｔｕｍｏｒ ｓｕｐｐｒｅｓｓｏｒ ｐ５３，ｐ５３）、血管内皮生长因子（ｖａｓｃｕｌａｒ ｅｎｄｏｔｈｅｌｉａｌ ｇｒｏｗｔｈ ｆａｃｔｏｒ，ＶＥＧＦ）、ｐ３８有丝分裂原蛋白激酶（Ｐ３８ ｍｉｔｏｇｅｎ－ａｃｔｉｖａｔｅｄ ｐｒｏｔｅｉｎ ｋｉｎａｓｅｓ，ｐ３８ ＭＡＰＫ）、红细胞起源的核因子２介导的氧化应激反应（ＮＲＦ２－ｍｅｄｉａｔｅｄ Ｏｘｉｄａｔｉｖｅ Ｓｔｒｅｓｓ Ｒｅｓｐｏｎｓｅ，ＮＲＦ２）等６条信号通路与细胞应激反应密切相关，以及恐惧反应、缺血反应、缺氧反应、饥饿反应、对氧化的反应、对未折叠蛋白的反应、对药物毒物化学物质反应和物理刺激等相关生理反应相关。
急性肝衰竭大鼠胃肠运动改变与肠神经元关系研究
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动物实验：芍药苷通过调控肠道菌群改善胆汁淤积
动物实验：芍药苷通过调控肠道菌群改善胆汁淤积胆汁淤积肝脏疾病是一种因各种内外原因，导致有毒胆汁酸过度积累或胆汁流量改变，胆管和肝细胞受损的肝脏疾病，胆汁淤积本身也会进一步加重肝脏的损害[1]。
据统计，我国慢性肝病住院患者胆汁淤积肝脏疾病的发生率高达10.26%，在原发硬化性胆管炎患者中发生率高达75%，肝硬化中可达47.76%[2]。
在胆汁淤积疾病过程中，胆汁酸是胆汁的重要成分，约占胆汁固体成分的85%，胆汁酸在肝脏合成后，进入胆管分泌到胆囊，后进入小肠参与食物消化，最后大部分胆汁酸在回肠末端重新吸收，通过门静脉返回肝脏，另有5%的胆汁酸通过粪便排出[3]，这个过程为胆汁酸的肝肠循环。
因此，任何造成胆汁酸平衡失调的因素都能导致胆汁淤积的形成。
胆汁酸通过肝肠循环将肠道与肝脏连接起来，肠道菌群可调节经肝脏合成排入肠道的胆汁酸，同时肠道菌群的结构和分布又受胆汁酸的影响。
肠道菌群失调与胆汁淤积性肝病密切相关[4]，由于肝脏和肠道经胆管、门静脉和体循环进行双向交流[5]，因此肠道菌群失调可能通过肠-肝轴引起肝脏的炎症性疾病[6]。
研究表明，肠道菌群失调，肠内代谢产物包括肠源性毒素和微生物代谢物通过门静脉进入肝脏，引起肝细胞炎症损伤，激活肝脏免疫应答机制，从而导致肝功能改变[7]。
此外，肠道微生物在肝脏病理生理过程中发挥重要作用，能够通过改变肠道通透性、调节胆碱代谢、调节胆汁酸代谢等来改善肝脏炎症和（或）纤维化[8]。
传统中医药理论将胆汁淤积归属于“黄疸”范畴，处方数据挖掘研究表明，治疗淤胆型肝炎的中药复方汤剂中最常用的中药之一为赤芍，使用频率高达82.61%[9]。
赤芍为毛茛科芍药属植物芍药的干燥根，性凉能泻肝胆之热，味苦可入胆而益胆汁，《神农本草经》中述其“主邪气腹痛，除血痹，破坚积，寒热疝瘕，止痛，利小便”[10]。
“瘀”贯穿淤胆型肝炎始终，使用赤芍可清利肝胆热毒、改善脉道瘀阻的状态；现代药理学研究也证实，大剂量赤芍可通过调节转运蛋白的表达，并调节胆汁酸组成和含量，从而改善胆汁淤积[11]。
《2024年大鼠肝细胞恶性转化与miR-122的动态变化》范文
《大鼠肝细胞恶性转化与miR-122的动态变化》篇一一、引言在肝细胞癌（HCC）的研究中，microRNA（miRNA）的作用逐渐受到关注。
其中，miR-122在肝脏的表达尤为显著，与肝细胞的生长、增殖以及肿瘤的发生、发展密切相关。
本研究以大鼠肝细胞恶性转化为模型，探究miR-122在肝细胞恶性转化过程中的动态变化，以期为HCC的预防和治疗提供新的思路。
二、材料与方法1. 材料本实验选用SD大鼠，并建立肝细胞恶性转化模型。
实验所需试剂及仪器包括：Trizol、逆转录试剂、PCR试剂、实时荧光定量PCR仪等。
2. 方法（1）建立大鼠肝细胞恶性转化模型；（2）采用实时荧光定量PCR技术检测各阶段大鼠肝组织中miR-122的表达水平；（3）统计分析miR-122的表达变化与肝细胞恶性转化的关系。
三、实验结果1. 大鼠肝细胞恶性转化模型的建立通过化学致癌剂处理，成功建立大鼠肝细胞恶性转化模型。
在模型建立过程中，观察到肝细胞形态学变化，并出现异常增殖。
2. miR-122在肝细胞恶性转化过程中的动态变化实时荧光定量PCR结果显示，在肝细胞恶性转化的不同阶段，miR-122的表达水平存在显著差异。
在正常肝组织中，miR-122的表达水平较低；随着肝细胞恶性转化的进展，miR-122的表达逐渐升高；在肝癌组织中，miR-122的表达达到峰值。
3. miR-122表达变化与肝细胞恶性转化的关系统计分析显示，miR-122的表达水平与肝细胞恶性转化的程度呈正相关。
即miR-122表达越高，肝细胞恶性转化的程度越严重。
这一发现提示我们，miR-122可能作为肝癌发生、发展的重要分子标志。
四、讨论miR-122在肝脏的表达及功能已得到广泛研究。
本研究发现，在大鼠肝细胞恶性转化过程中，miR-122的表达水平发生动态变化，且与肝细胞恶性转化的程度呈正相关。
这一发现为我们理解肝癌的发生、发展提供了新的视角。
miR-122的异常表达可能促进肝细胞的生长、增殖，从而加速肝细胞的恶性转化。
A771726大鼠在体小肠吸收动力学
A771726大鼠在体小肠吸收动力学朱熙;李俊;金涌;李淑娟【期刊名称】《安徽医科大学学报》【年(卷),期】2008(043)003【摘要】目的探讨A771726大鼠在体各肠段的吸收动力学特征.方法采用大鼠在体小肠回流装置,以UV法和HPLC法分别测定酚红和A771726的含量.结果大鼠十二指肠﹑空肠﹑回肠﹑结肠2 h后对A771726的吸收百分率分别为36.0%±2.1%、27.5%±4.2%、38.1%±5.1%、22.5%±2.3%,吸收速率常数分别为0.232±0.023、0.172±0.042、0.261±0.044、0.122±0.011(1/h).在低、中、高3种不同浓度下,A771726全肠段的吸收速率常数分别为0.712±0.094、0.719±0.106、0.703±0.143 (1/h),差异无显著性.结论 A771726在大鼠各肠段均有吸收,其吸收机制为被动扩散,吸收动力学为一级吸收.【总页数】4页(P301-304)【作者】朱熙;李俊;金涌;李淑娟【作者单位】安徽医科大学药学院,合肥,230032;安徽医科大学药学院,合肥,230032;安徽医科大学药学院,合肥,230032;安徽医科大学药学院,合肥,230032【正文语种】中文【中图分类】R969.1;R916.4;R971.2;R977.7【相关文献】1.北豆根生物碱在体小肠吸收动力学研究 [J], 阮寅正2.丹皮酚大鼠在体小肠吸收动力学研究 [J], 汤继辉;胡容峰;常宫3.东莨菪素大鼠在体胃、小肠吸收动力学研究 [J], 夏玉凤;戴岳;孟庆玉;王强;仇玲玲4.丹皮酚与丹皮酚-β环糊精包合物大鼠在体小肠吸收动力学对照 [J], 胡容峰;方成武;邹爱峰;梅康康;汤继辉;韩玲玲5.法莫替丁大鼠在体小肠吸收动力学研究 [J], 张莉;陈大为;李芳久;宋爱华;奎罡波因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
阿托伐他汀大鼠体内药动学及肠肝循环研究
阿托伐他汀大鼠体内药动学及肠肝循环研究董婧;陈西敬;宋捷;王广基【期刊名称】《中国药科大学学报》【年(卷),期】2008(39)1【摘要】目的:建立测定大鼠血浆、胆汁中阿托伐他汀的浓度的LC-MS方法,研究其在大鼠体内的药动学和肠肝循环情况。
方法:测定大鼠静脉注射和灌胃给予阿托伐他汀后血浆中的药物浓度,对灌胃给药的吸收程度进行研究;测定大鼠给药后12h 胆汁中的药物浓度,计算其累积排泄率;运用大鼠肠肝循环模型研究阿托伐他汀在大鼠体内从胆汁重吸收的药动学过程,经3P87程序计算药动学参数。
结果:大鼠静脉注射和灌胃给予阿托伐他汀后体内药动学过程均符合二房室一级吸收模型,灌胃给药的绝对生物利用度为10.2%,两种途径给药后12h的胆汁累积排泄率分别是(7.3±1.4)%和(3.3±0.02)%。
大鼠肠肝循环模型表明,胆汁供体组大鼠的AUC和胆汁受体组大鼠的AUC分别是(26383.0±9870.5)ng/mL·min和(2636.8±1815.0)ng/mL·min。
结论:阿托伐他汀在大鼠体内口服吸收程度较低,静脉注射给药后存在肠肝循环现象。
【总页数】5页(P55-59)【关键词】阿托伐他汀;药动学;肠肝循环【作者】董婧;陈西敬;宋捷;王广基【作者单位】中国药科大学药物代谢与动力学研究中心【正文语种】中文【中图分类】R969.1【相关文献】1.基于LC-MS/MS法和酶活法研究阿托伐他汀钙片在Beagle犬体内的药动学与药效学 [J], 王晴;王晶;邵玉凤;韩江彬;盖芸芸;沙春洁;邓雨薇;刘万卉2.雷公藤甲素在正常大鼠和佐剂性关节炎模型大鼠体内的药动学研究 [J], 陈凯丽;易剑峰;翟文静;孙兰;孙文3.吴茱萸碱脂质体在大鼠体内的药动学及小鼠体内的组织分布研究 [J], 邢玉桂4.丹参多酚酸盐对阿托伐他汀钙在心肌缺血大鼠体内的药动学影响 [J], 杨彩艳;邹堃;李宏辉;王博;杨小英;贺罡5.丹红注射液对阿托伐他汀钙在大鼠体内药动学的影响 [J], 朱金燕;彭灿;胡容峰;汤继辉;金涌因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
大鼠的药物肠肝循环模型和应用
大鼠的药物肠肝循环模型和应用
张国琴;林赵田
【期刊名称】《中国抗生素杂志》
【年(卷),期】1991(016)006
【摘要】药物的肠肝循环是药物转运的一重要途径,对药物的行为及疗效有一定影响。
我们建立了大鼠药物肠肝循环模型,对一新型喹诺酮类抗菌药IMB-86001的
肠肝循环行为进行了测定,为临床用药提供参考。
一、材料: 雄性Wistar大
鼠,300～350g,由中国医学科学院动物所繁殖场提供;IMB-86001,淡黄色粉末,由本所有机合成室提供;琼脂培养基,大肠杆菌0111为检定菌;pH7.8～8.0磷酸缓冲
液;SYB-D精密定量输液泵,北京国营青云仪器厂;恒温水浴,北京市医疗设备厂。
二、方法:
【总页数】2页(P460-461)
【作者】张国琴;林赵田
【作者单位】不详;不详
【正文语种】中文
【中图分类】R978
【相关文献】
1.双部位吸收和肠肝循环并存的药动学模型及生物利用度 [J], 周怀梧;沈佳庆
2.T—2毒素及其代谢产物在大鼠胆汁中的排泄和肠肝循环 [J], 李桦;阮金秀
3.药物动力学中肠肝循环的房室模型 [J], 欧阳楷;邵颉;欧阳浩
4.阿托伐他汀大鼠体内药动学及肠肝循环研究 [J], 董婧;陈西敬;宋捷;王广基
5.麦考酚酸在大鼠体内的肠肝循环模型 [J], 夏琴;姜慧婷;支建明;陈冰
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收 由肝 门静 脉进 入全 身循环 ， 这种 现象 为肝肠 循环 。 此现 象主要 发生 在经 胆 汁 排 泄 的药 物 中 ， 肝肠 循 环
１４ ３ 血 浆 中标 准 曲线 的制 备 ．．
取 空 白试 管 分别
加入不 同量 的标 准 品 ， 用氮 气 吹 干 ， 加 入血 浆 ２０ 再 ０ ｌ使其 浓度分别 为 ４０ ２０ １０ ５ 、５６ ２ ／ ， ０ 、０ 、０ 、０２ 、．５ｍｇＬ （ 高浓度 标 曲 ）６ ２ 、．２ １５ ０ ３ 、．９ ／ ，．５３ １５、．６、．９００ ９ｍｇＬ （ 浓度 标 曲 ） 按 血 浆 样 品 处 理 项 下 操 作 ， 低 ， 以样 品
研究 Ａ ７ ７ ６在大 鼠体 内肝 肠循环情 况 。方 ７ １２
（ ｉ —ｅｉｉ ｔ大 鼠血 浆 中 的 Ａ ７ ７６浓 度 ， Ｂｌ Ｒ ｃｐｅ ） ｅ ｎ ７ １２ 研究 其在 大 鼠体 内的肝肠 循环 过程 。
１ 材料 与方法
法 运用配对大 鼠肝肠 循环模 型研究 Ａ ７ ７ ６在大 鼠体 内 ７ １２
１４ Ａ ７ ７ ６的 Ｈ Ｌ ． ７ １２ Ｐ Ｃ检测 方法 １４ １ 色谱 条 件 ． ． 流 动 相 ：． １ｍ ｌＬ甲 酸铵 ０ ０ ｏ ／
氢乳 酸脱 氢 酶 ， 抑 制 淋 巴 细 胞 的活 化 、 殖 及 分 而 增 化； 亦能 够抑制 酪氨 酸激酶 活性 ， 抑制 环氧合 酶 的产 生 等 ¨ ３。Ａ ７７６在体 内半 衰 期 较 长 ， 在 体 内 －１ ７ １２ 其
的药 动学 过程 引人注 目。肝 肠循 环又称 为肠肝 循 环
缓 冲液 ： 甲醇 ＝５． ：５ ３ 检 测 波 长 ：８ ｍ； 敏 ４７ ４ ． ； ２ ８ｎ 灵
度 ：． ０ Ｕ Ｓ 柱 温 ：０Ｃ； 样量 １ ｌ ０ ０ １Ａ Ｆ ； ４ｏ 进 ０ 。
１４ ２ 血 浆７ ７ ６钠盐 （ ． ７ １２ 上海欣 凯 医药 化
工 中间体 有 限公 司 ， 纯度 ９ ．％ ）Ａ ７７６标 准 品 ９９ ； ７ １２
（ 海 欣 凯 医 药 化 工 中 间 体 有 限 公 司 ， 号 上 批 ００ ０ ） ６ ６７ 。甲酸铵（ 分析纯 ） 甲醇（ ， 色谱纯 ） 双蒸水 ， （ 自制 ） 。
１２ 实验 动物 ．
～
主题词
自由词
色谱法 ， 高压 液相 ； 异恶 唑类／ 物代谢 动力学 ； 药 异
Ａ ７７ ６ 肠 肝 循 环 ７ １２ ；
恶 唑 类／ 药 和剂 量 投 中 图分 类 号 Ｒ９ ９ １Ｒ ３ １３ ； １ ． ６ ． ； ３ ．７ Ｒ９ ６４
Ｓｒ ｕ．ａｌ ｐａ ｅＤｗｅ 鼠， ｇ ｙ大 雄性 ， 体重 ３０ ５
关节 炎 、 统 性 红 斑 狼 疮 、 移 植 排 斥 反 应 。 系 抗 Ａ ７ ７ ６能 够抑制 嘧 啶从头合 成过 程 中关键 酶 一二 ７ １２
量管 ２ ｌ ０ ， 色谱柱 ：Ｄ １ ， ０ ４６ Ｏ ＳＣ ８２ ． ｍ（ ０Ｘ 大连伊 利特公 司） 。色谱 数据 Ｌ ．Ｏ Ｏ ＴＯ ＣＳ Ｌ Ｕ ＩＮ软 件 。
取 血 浆 ５ ｌ分 别 加入 ０ ，
甲醇 ２ ｌ生理 盐 水 ５ ｌ涡 旋振 荡 混 匀 ， 加入 ５ ， ０ ， 再 乙 酸 乙酯 ０ ５ｍ ， ． ｌ涡旋 振荡 约 ４ ， ０ ｍｎ离心 ５Ｓ２００ｒ ｉ ／ １ ｎ取有 机层 ， ０ｍｉ， 重复 一次 ， 并有 机 相 ，０Ｃ氮气 合 ４￣
Ａｔ ｎ ｅ ｉ ｔ ｄｃ ａｉＡ ｈｉ ００ｌｎ４ （ ） ｃ Ｕ ｉ ｒｔ ｉＭｅｉｎ ｌ ｎ ｕ ２ １ ｕ ；５ ３ ａ ｖ ｓａ ｓ ｉ ｓ
◇药 学研究 ◇
Ａ ７ ７６在 大 鼠体 内肝 肠 循 环 的研 究 ７ １２
程
摘要 目的
娟， 李
俊， 宋
珏， 郑世 瑞 ， 李
浩， 孔一 帆
吹干 ， 流动相 重溶 ， 移 至 Ｅ 转 Ｐ管 中 ， ０ ／ ｉ ， ４０ ０ｒｍ ｎ 离
心 １ ｎ １ 进 样 。 ０ｍｉ，０
（ｎｅｏｅｔ ｙｌ）是药 物在 体 内的一 种 特殊 的药 ｅｔ ｈｐｉ ｃｃ ， ｒ ｃ ｅ 动学 现象 。指 由肝细胞 分泌 到胆 汁 中的某些药 物 与 葡萄 糖醛 酸结合 转化 为 代 谢 产物 ， 排泄 人 小肠 后 被
从 胆 汁重 吸 收 的药 动 学 过 程 ， 用 Ｈ Ｌ 采 Ｐ Ｃ法 测 定 血 浆 中
Ａ ７７６ ７ ２ 浓度 ， １ 药动学参数用 Ｄ Ｓ软件统计矩法计算 。结果 Ａ 配对大 鼠肝肠循环模型表明 ， 胆汁供体大 鼠和胆汁受体大 鼠的 Ａ Ｃ分别 为 （ ３２ ８ Ｕ １５ ．５±１４ ５ ） ／ Ｌ・ ） （ １．４ ８ ． １ ｍｇ （ ｈ 、 ３４ ９ ±２ ．５ ｍ，（ ・ ） １１ ） ｒ Ｌ ｈ 。结论 ／ Ａ ７ ７ ６静脉注 射后 存在肝 ７ １２ 肠循环现象 ， 约有静脉注射给药量的 ２ ． ％进入肝肠循环 。 ３８
大鼠腹腔注射10水合氯醛03ml100g麻醉后背部固定于手术台上沿腹白线打开腹腔分离出胆管和十二指肠分别做胆汁供体大鼠胆管插管和胆汁受体大鼠十二指肠插管棚o胆管插管采用硬膜外麻醉导管加热拉制而成oto使供体大鼠的胆汁流人受体大鼠十二指肠同时用手术线结扎供体大鼠十二指肠上胆管开口
・
３ ８・ ３
安徽 医科 大学学报
峰 面积 （ ） Ｙ 与样 品浓度 （ 作线 性 回归 。 ）
可以延长药物在体 内的滞留时间从而增加药物的利 用效率 ， 延长 多少 取决 于进 入 肝肠 循 环 的量 与 给药 量 的 比例 。
４０ｇ普通级 ， ０ ， 安徽医科大学实验动物 中心提供 。 岛津 高效 液 相 色 谱 仪 Ｃ Ｏ １Ａ Ｔ 一０ Ｓ系 统
文献 标 识 码 Ａ 文 章 编 号 １０ ０ ０—１９ （０ ０ ０ ０ ３ ０ ４ ２ ２ １ ） ３— ３ ８— ４
１３ 仪器 ．
控制 器 ，Ｃ２Ａ Ｌ － Ｔ输 液 泵 ，Ｐ 一０ ０ Ｓ Ｄ２ Ａ紫 外 检测 器 ， 定 Ａ ７７６是 免疫调 节药来 氟米 特 在机 体 内 的活 ７ １２ 性代 谢产 物 ， 者在 临 床 上 主要 用 于 治疗 类 风 湿性 后