高效液相色谱法测定吡拉西坦片的含量

高效液相色谱法测定吡拉西坦片的含量
俞信真
【摘要】目的:探讨灵敏、准确测定吡拉西坦片含量的方法.方法:采用Alltima C8
柱(250.0 mm×4.6 mm,5 μm),以甲醇-水(50∶50)为流动相,流速1.0 mL*min-1,
检测波长210 nm.结果:吡拉西坦的线性范围为25～150 mg*L-1,r＝1.000,平均回收率99.7%,RSD＝0.37%(n＝9).结论:该方法灵敏、准确,可作为吡拉西坦片含量测定的方法.
【期刊名称】《医药导报》
【年(卷),期】2003(022)008
【总页数】2页(P572-573)
【关键词】吡拉西坦;高效液相色谱法;含量测定
【作者】俞信真
【作者单位】浙江省绍兴市药品检验所,312000
【正文语种】中文
【中图分类】医药卫生
•572· 青藤碱对照品 25.0mg 于 100 mL 量瓶中，以甲醇溶解并稀释至刻度，得250 mg• L-1 的青藤碱标准液。

精密称取氯霉素对照品 20.0 mg 于 100 mL 量
瓶中，以甲醇溶解并稀释至刻度，得200 mg· L1 的内标液。

精密量取青藤碱标准液 0.5, 1.0, 2.0, 3.0, 4.6了5.0mL 于 50 mL 量瓶中，精密加入内标液 2.5 mL，加甲醇至刻度，取20 µL 进样，记录峰面积。

以青藤碱峰面积与内标峰面积比
（ S ）对浓度（ C ）回归，得标准曲线方程： S = -0.026 09 +0.06919C( r = 0.999 9 ），线性范围为2.5~ 25.0 mg•L1 。

2.4.3回收率测定按处方比例配成
空白基质，精密加人不同量的青藤碱，混合均匀，称取 0.5 g 于 100 mL量瓶中，用适量甲醇振摇，超声提取 30 min ，使青藤碱溶解，过滤，取续滤液 5.0 mL 于50 mL 量瓶中，加入内标2.5mL，加甲醇至刻度，冰箱放置 4 h ，取出迅速用
微孔滤膜过滤，取滤液20 µL 进样，记录峰面积，计算回收率。

结果见表 1。

2.4.4样品的测定取样品约 0.5 g，精密称定，按2.4.3项处理后测定峰面积，代人回归方程，计算样品含量， 3 批含量结果分别为 9
3.79 %, 98.969毛， 98.01% 。

3讨论青藤碱凝胶剂中含 2% 青藤碱，由于凝胶基质的Herald of Medicine Vol.22 No.8August 2003 表 1 青藤碱回收率测定结果n=3 编号投入量测得量
回收率平均回收率RSD/mg_: L·1 /% i 句。

1 5.06 4.99 98.61 210.1210.08
99.60 99.6 1.3 320.2420.49 101.23 干扰，我们采用高效液相色谱法测定青藤碱
的含量，方法简便，快速。

流动相为甲醇－0.01mol • L1NaH2P04(50:50），按此比例可使峰分离完好，能分开青藤碱、内标和杂质峰，基质和分解产物也不干
扰主药的测定。

根据试验，在此条件下青藤碱理论塔板数在 2 删以上。

根据青藤碱具有生物碱的性质，与腆化铅饵反应能生成紫红色沉淀，但由于基质中存在干扰，本项鉴别采用薄层色谱法，对青藤碱凝胶剂中主要成分青藤碱进行定性鉴别。

此法操作简便，重现性好，专属性强，可作为凝胶剂的有效成分鉴别手段之一。

紫外扫描中基质虽有较小的吸收，但不影响青藤碱的最大吸收波长，因此可以用于青藤碱的鉴别。

［参考文献］[ 1J 刘强，周莉玲，李锐，等．青藤碱的研究概
况［ J].中苹药，1997 ,28(4) :247 -248.[2] 王隶书，金向群，孙亚冬，等．薄层
扫描法测定复方青藤片中青藤碱的含量［ J］.中成药， l俐， 18(7):10-11.高效
液相色谱法测定毗拉西坦片的含量俞信真（浙江省绍兴市药品检验所， 312删）［摘要］目的：探讨灵敏、准确测定，比拉西坦片含量的方法。

方法：采用
Alltima 乌拉（250.0 mm x 4.6 mm,5 µm), 以甲醇·水（50:50）为流动相，流这1.0 mL· min斗，检测波长 210 nm。

结果：吭拉西坦的线性范围为 25 ～ 150 mg· L·1, r= I.仅灿，平均回收率 99.7% ，而：n = 0.37 % ( n = 9）。

结论：该方法灵敏、准确，可作为，比拉西坦片含量测定的方法。

［关键词］吮拉西坦；高效液相色谱法；含量测定［中图分类号］R97l;R927.2 ［文献标识码］ A ［文章编号］I 004-0781 ( 2003) 08-0572-02 Determination of theContent of Piracetam in theTabletswith HPLCYUXin-zhen( Institute forDrngControlofShaoxingC时， Z问·叫 P阴阳， Shaoxi咆 312侧， China) ~TRACTObj“创刊： To determine the content of piracetam in the tablets wi由 HPLC.Meth础： h Alltima Cs (250 mm x4.6 mm,5 阳） column was used as the 蛐onary ph跚地e mobile ph甜 was composed of methanol and water ( 50: 50 by volume) ;theflowrate1.0 mL·min·';detection wavelength,210 nm.Resul也： The linerarityof pirace出 was goodwi副n the range of 25 ～ 150 吨• L·' ( r=I.000) ,Theavera吕e rateofrecoveηwas 99.7% ，而V = 0.37% ( n = 9).Cooclusi佣： The me由od w筒 shown tobesensitive,ace山百te andreproducible.It shouldbeadopted m 出e determinationof thecontent of piracetam m 由e tablets.KEY WORDSPiracetam;Highpertormance liqi且 d chromatography;Content determination ［收稿日期］200胁。

2-09［修回日期］2003-03-10 ［作者简介］俞信真（ 1962 - ），女，浙江绍兴人，副主任药师，学士，从事药品检验工作。

口比拉西坦为脑代谢改善药，临床主要用于脑动脉硬化症及脑血管意外所致的记忆和思维功能减退的治疗。

毗拉西坦含量测定《卫生部药品标准》［！）采用凯氏• 572 · 青藤碱对照品 25.0mg 于 100 mL 量瓶中，以甲醇溶解并稀释至刻度，得250 mg• L-1 的青藤碱标准液。

精密称取氯霉素对照品 20.0 mg 于 100
mL 量瓶中，以甲醇溶解并稀释至刻度，得200 mg· L1 的内标液。

精密量取青藤碱标准液 0.5, 1.0, 2.0, 3.0, 4.6了5.0mL 于 50mL 量瓶中，精密加入内标液 2.5 mL，加甲醇至刻度，取20µL进样，记录峰面积。

以青藤碱峰面积与内标0.026 09 +0.06919C( r = 0.999 9 ），线性范围为2.5~25.0 mg•L1 。

2.4.3 回收率测定加人不同量的青藤碱，混合均匀，称取 0.5 g 于 100 mL 量瓶中，用适量甲醇振摇，超声提取 30 min ，使青藤碱溶解，过滤，取续滤液 5.0 mL 于 50 mL 量瓶中，加入内标mL，加甲醇至刻度，冰箱放置 4 h ，取出迅速用微孔滤膜过滤，取滤液20 µL 进样，记录峰面积，计算回收率。

结果见表 1。

2.4.3项处理后测定峰面积，代人回归方程，计算样品含量， 3 批含量结果分别为 93.79 %, 98.969毛， 98.01% 。

3Herald of Medicine Vol.22 No.8August 2003 表1青藤碱回收率测定结果编号投入量测得量i句。

1 2 10.12 10.08 3 20.24 20.49 干扰，我们采用高效液相色谱法测定青藤碱的含量，方法简便，快速。

流动相为甲醇－
0.01mol • L1NaH2P04 (50:50），按此比例可使峰分离完好，能分开青藤碱、内标和杂质峰，基质和分解产物也不干扰主药的测定。

根据试验，在此条件下青藤碱理论塔板数在 2 删以上。

根据青藤碱具有生物碱的性质，与腆化铅饵反应能生成紫红色沉淀，但由于基质中存在干扰，本项鉴别采用薄层色谱法，对青藤碱凝胶剂中主要成分青藤碱进行定性鉴别。

此法操作简便，重现性好，专属性强，可作为凝胶剂的有效成分鉴别手段之一。

紫外扫描中基质虽有较小的吸收，但不影响青藤碱的最大吸收波长，因此可以用于青藤碱的鉴别。

[ 1 J刘强，周莉玲，李锐，等．青藤碱的研究概况［ J].中苹王隶书，金向群，孙亚冬，等．薄层扫描法测定复方青藤片中青藤碱的含量［ J］.中成药， l俐， 18(7):10-11.［摘要］目的：探讨灵敏、准确测定，比拉西坦片含量的方法。

方法：采用 Alltima 乌拉（250.0 mm x 4.6 mm,5 µm), 以甲醇·水（50:50）为流动相，流这1.0 mL· min斗，检测波长 210 nm。

结果：吭拉西坦的线性范围为 25 ～150 mg· L·1, r=
Determination of theContent of Piracetam in theTabletswith HPLC YUXin-zhen( Institute forDrngControlofShaoxingC时， Z问·叫 P阴阳， Shaoxi咆312侧，China)~TRACTObj“创刊： To determine the content of piracetam in the tablets wi由 HPLC.Meth础： h Alltima Cs (250 mm x 4.6 mm,5 阳）column was used as the 蛐onary ph跚地e mobile ph甜 was composed of methanol and water ( 50: 50 by volume) ;the flowrate1.0 mL·min·';detection wavelength,210 nm.Resul也： The linerarityof pirace出 was goodwi副n the range of 25 ～ 150 吨L·' ( r=I.000) ,Theavera吕e rateofrecoveηwas 99.7% ，而V = 0.37% ( n = 9).Cooclusi佣： The me由od w筒 shown tobe sensitive,ace山百te andreproducible.It shouldbeadopted m 出e determinationof thecontent of piracetam m 由e tablets.KEY WORDSPiracetam;Highpertormance liqi且 d chromatography;Content determination 口比拉西坦为脑代谢改善药，临床主要用于脑动脉硬化症及脑血管意外所致的记忆和思维功能减退的治疗。

医药导报 2003 年 8 月第 22 卷第 8 期定氮法，也有非水滴定法的报道［2］，还有用高效液相色谱法测定毗拉西坦原料的报道［3］，但对毗拉西坦片尚未见到报道。

笔者采用高效液相色谱法对口比拉西坦片进行含量测定。

1仪器与试药 1.1仪器 HPllOO 型高效液相色谱系统，岛津 UV-2550 紫外分光光度计。

1.2试药毗拉西坦对照品（由扬州制药厂提供原料，精制后经归一化法测定含量，含量大于 99.5% ，作为工作对照品），毗拉西坦片（天津金世制药，简称 A 厂，批号： 020211 ；杭州民生药业，简称 B 厂，批号： 020478 ；浙江瑞新药业，简称 C 厂，批号： 20020521 ）。

甲醇为色谱纯，水为重蒸水。

21i法与结果 2.1色谱条件及测定结果 AlltimaCg 柱（250.0 mm x 4.6mm, 5µ.rn）；流动相：甲醇－水（ 50 : 50 ）；流速：
1.0mL·min-1 ；检测波长： 210 m；进样量20 µLo 测得对照品和样品的色谱图
见图 1 。

0246O24•'6t/min A t/minB图日比拉西坦对照晶（ A）及片剂（ B）
色谱图2.2对照品溶液的配制精密称取毗拉西坦对照品适量，加流动相制成每 1 mL 中含 0.1 mg 的溶液，摇匀，即得。

2.3供试品溶液的配制取毗拉西坦片 10 片，精密称定，研细，精密称取适量（约相当于毗拉西坦 0.1 g),置50mL 量瓶中，加流动相适量，超声使毗拉西坦溶解并稀释至刻度，摇匀，洁、过，取续滤液，
稀释至0.1g·LI ，作为供试品溶液。

2.4线性关系考察精密称取以五氧化二磷为干燥剂减压干燥至恒重的对照品 62.5 吨，置 50 mL 量瓶中，加流动相溶解并稀释至刻度，摇匀，精密吸取此溶液1,2,3,4,5,6 mL 分别置 50 mL 量瓶中，加流动相稀释至刻度，摇匀，进样 20 件，以浓度为横坐标，峰面积为纵坐标，绘制标准
曲线，结果毗拉西坦在 25 ～150 mg·L-1 范围内呈良好的线性关系，回归方程：Y = 24.743X+42.144,r=l.α泪。

精密度和稳定性试验精密吸取同一供试品溶•573• 液 20 件，连续进样 5 次，测得峰面积积分值的 RSD 为0.30%(n =5 ）。

精密吸取同一供试品溶液20 µL，分别于0,4,8, 12,24 h 依法测定，测得峰面积积分值的时D为0.51%(n =5 ），表明供试品溶液在 24 h 内稳定。

2.6重复性试验取同一供试品 5 份，精密称定，依法重复测定 5 次，结果 RSD 为 0.489毛
（ n= 5 ），表明本法具良好重现性。

2.7 回收率试验精密称取对照品适量（约含毗拉西坦80, 100, 120mg）各 3 份，分别置 50 mL 量瓶中，按处方（由 B 厂提供）加入空白辅料，按供试品同法制备后测定，结果见表 1 。

表 1 含量测定回收率试验结果试验号加样量／mg测得量Im回收率／%81.9 81.7 99.76 82.l 82.5 100.50 81.1 80.9 99.75 4 100.2 99.9 99.70 5 100.5 100.1 99.创6 105.6 104.7 99.15 7 121.4 120.8 99.51 8 121.8 121.0 99.34 9 124.4 124.0 99.68 由上表可知：平均回收率＝ 99.7% ；而：v = 0.37% ( n= 9)2.8 样品测定取口比拉西坦片3 批，按上述色谱条件，依法进行测定，并与卫生部颁布的定氮滴定法比较，结果见表 2。

表 2 样晶含量测定结果9毛， n =2厂家批号本法定氮滴定法020211
96.7 97.8 B 020478 98.8 98.3 c 2α)20521 96.4 96.9 由上表可知：高效液相色
谱法测定结果与定氮滴定法结果基本一致。

3 讨论对毗拉西坦对照品溶液在
200 ～ 300 nm 波长范围内扫描发现，在 208 nm 处有最大吸收，故选择 210
nm作为检测波长。

用 C1s 柱的出峰时间太短，峰形与柱效不理想，改用 Cs 柱
效果较好。

保留时间为 3.0 min，理论塔板数可达 10 900。

本法灵敏，准确，
重现性好，辅料不干扰其测定，可替代较为繁琐费时的凯氏定氮法。

［参考文献］[1] 国家药典委员会．卫生部药品标准（二部）［ Z］.第 3 册．北京：化学工业出版社， 1994.28.彭文兵，杨纯华，王菊芳．非水滴定法测定毗乙酌胶含量的探讨［ J］.药物分析杂志， 1990, 10(1) :49- 50.[3] 熊发高，汪若跃．毗拉西坦含量的 HPLC 测定 [JJ.中国医药工业杂志，2α泊， 31(9) :410.定氮法，也有非水滴定法的报道［2］，还有用高效液相色谱法测定毗拉西坦原料的报道［3］，但对毗拉西坦片尚未见到报道。

笔者采用高效液相色谱法对口比拉西坦片进行含量测定。

仪器与试药1.1 仪器HPllOO 型高效液相色谱系统，岛津 UV-1.2 试药毗拉西坦对照品（由扬州制药厂提供原料，精制后经归一化法测定含量，含量大于 99.5% ，
作为工作对照品），毗拉西坦片（天津金世制药，简称 A厂，批号： 020211 ；
杭州民生药业，简称 B 厂，批号：020478 ；浙江瑞新药业，简称 C 厂，批号：20020521 ）。

甲醇为色谱纯，水为重蒸水。

1i法与结果2.1 色谱条件及测定结
果 AlltimaCg 柱（250.0 mm x 4.6mm, 5µ.rn）；流动相：甲醇－水（ 50 :
50 ）；流速：1.0 mL·min-1 ；检测波长： 210 m；进样量20 µLo 测得对照品
和样品的色谱图见图 1 。

0 O •' t/min 图对照品溶液的配制精密称取毗拉西坦对
照品适量，加流动相制成每 1 mL 中含 0.1 mg 的溶液，摇匀，即得。

供试品溶
液的配制取毗拉西坦片 10 片，精密称定，研细，精密称取适量（约相当于毗拉
西坦 0.1 g), 置mL 量瓶中，加流动相适量，超声使毗拉西坦溶解并稀释至刻度，
摇匀，洁、过，取续滤液，稀释至0.1 g·LI ，作为供试品溶液。

线性关系考察精
密称取以五氧化二磷为干燥剂减压干燥至恒重的对照品 62.5 吨，置 50 mL 量瓶中，加流动相溶解并稀释至刻度，摇匀，精密吸取此溶液1,2,3,4,5,6 mL 分别置50 mL 量瓶中，加流动相稀释至刻度，摇匀，进样 20 件，以浓度为横坐标，峰面积为纵坐标，绘制标准曲线，结果毗拉西坦在 25 ～150 mg ·L-1 范围内呈良好的线性关系，回归方程：Y = 24.743X +42.144,r=l.α泪。

573 件，连续进样 5 次，测得峰面积积分值的 RSD 为重复性试验取同一供试品 5 份，精密称定，依法重复测定 5 次，结果 RSD 为 0.489毛（ n= 5 ），表明本法具良好重现性。

80, 100, 120mg）各 3 份，分别置 50 mL 量瓶中，按处方（由 B 厂提供）加入空白辅料，按供试品同法制备后测定，结果见表 1 。

含量测定回收率试验结果( n= 9) 2.8样品测定取口比拉西坦片 3 批，按上述色谱条2样晶含量测定结果9毛，n=2 厂家对毗拉西坦对照品溶液在 200 ～ 300 nm 波长范围内扫描发现，在 208 nm 处有最大吸收，故选择 210 nm 作为检测波长。

用 C1s 柱的出峰时间太短，峰形与柱效不理想，改用 Cs 柱效果较好。

保留时间为 3.0 min，理论塔板数可达 10 900。

本法灵敏，准确，重现性好，辅料不干扰其测定，可替代较为繁琐费时的凯氏定氮法。

彭文兵，杨纯华，王菊芳．非水滴定法测定毗乙酌胶含量的探讨［ J］.药物分析杂志， 1990, 10(1) :49- 50.[3]
【文献来源】https:///academic-journal-cn_herald-medicine_thesis/0201241908923.html
【相关文献】
1.高效液相色谱法测定奥拉西坦注射液中奥拉西坦的含量 [J], 唐燕
2.高效液相色谱法测定左乙拉西坦片的含量 [J], 肖拥军，罗湘冀
3.高效液相色谱法测定注射用奥拉西坦的含量 [J], 姜卫东，卢凯旋，万顺，周玲，任荣军
4.高效液相色谱法测定吡拉西坦注射液的含量 [J], 朱传华，高金玲，刘桂荣，张淑文
5.高效液相色谱法测定吡拉西坦制剂的含量 [J], 任淑玲，欧阳晓玫。