上海元析UV5100紫外-可见分光光度计的使用

UV/VIS5100紫外-可见分光光度计的使用UV5100是由上海元析仪器有限公司生产的紫外-可见分光光度计，因波长范围是：200～1000nm的连续光谱，所以能在紫外、可见、近红外光谱区区域对样品物质作定性和定量分析。

一、UV/VIS-5100型分光光度计的性能指标
波长范围：200nm-1000nm
光谱带宽：4nm
波长精度：≤±2nm
波长重复性：≤0.5nm
光度准确度：±0.5%T
光度重复性：0.3%T
稳定性：0.003A/h
杂散光：≤0.2%T
数据输出：USB
打印输出：并行口
显示系统：128×64位液晶显示器
光源：钨灯、氘灯
透射比范围：0.0－200%(T)
吸光度范围：-0.3－3（A）
浓度显示范围：0-9999（C）
外形尺寸：430×300×160mm
二、仪器的外部结构
功能键描述：
按钮功能
用于测量模式（T，A，C，F）
切换
用于系统参数设定
用于波长设置
校空白键，用于调0.000Abs和
100.0%T
用于打印测试结果及数据删除
上键，选择向上移动
下键，选择向下移动
返回上级菜单和停止键
确认键，用于数据和菜单的确认
三、仪器的基本操作
1、开启和自检
（1）仪器开启
用电源线连接上电源，打开仪器开关（位于仪器的后右侧），仪器开机后进入系统自检过程。

（2）系统自检
在自检状态，仪器会自动对滤光片、灯源切换、检测器、氘灯、钨灯、波长校正、系统参数和暗电流进行检测。

注：如果某一项自检出错，仪器会自动鸣叫报警，同时显示错误项，用户可按任意键跳过，继续自检下一项。

（3）系统预热
仪器开机后，因电器件需要预热一定的时间后方可达到稳定状态；另外氘灯周围环境也需要一定时间方能达到热平衡，所以仪器需要预热约20分钟后，方可正常使用。

自检结果后，仪器进入预热状态，预热时间为20分钟，预热结束后仪器会自动检测暗电流一次。

预热时可以按任意键跳过。

（4）进入系统主菜单
仪器自检结束后进入主界面。

按“MODE”键可以在T、A、C、F间自由转换，分别实验透过率测试，吸光度测试工，标准曲线和系统法等功能。

2、透过率测试
在此功能下，可进行固定波长下的透过率测试，也可以将测量结果打印输出。

（1）设定工作波长
在系统主界面下，系统的默认功能项为透过率测试，此时直接按“GOTO λ”键可以进入波长设定界面，用上下键来改变波长值，每按一次该键则屏幕上的波长值会相应增加或减少0.1nm，按“ENTER”键确认。

提示：可以长按此二键，则数字会快速变化，直至所需的波长值为止，近“ENTER”键确认。

波长设定完成后自动返回上级界面。

（2）按“ZERO”键对当前工作波长下的空白样品进行调100.0%T。

注意：在调100.0%T之前记得将空白样品拉（推）入光路中，否则调100.0%T的结果不是空白液的100.0%T，使得测量结果不正确。

（3）进行测量
当调100.0%T完成后，把待测样品拉（推）入光路中，按“ENTER”键进入测量界面（若已经在测量界面下，则无须此项操作，直接进行后面的操作即可），按“ENTER”键即可在当前工作波长下对样品进行透过率的测量。

每按下一次“ENTER”键，系统会自动将当时所显示的数值记录到数据据存储区，但当查看时，液晶显示屏的每一屏只可显示5行数据，其余数据可通过按上下键进行翻页显示。

（4）数据打印与清除
数据存储区最多可存储200组数据。

如果要打印或消除已测量数据，可在测量结果显示界面下，按“PRINT/CLEAR”键，进入打印或删除除界面，用上下键选择对应的操作即可。

按“ESC”键即出该界面。

3、吸光度测试
（1）按“MODE”键切换至A模式（即吸光度测量模式）
（2）设定工作波长，设定方法同“透光率测试”。

（3）按“ZERO”键对当前工作波长下的空白样品进行调0.000A。

（4）进行测量。

当调0.000A完成后，把待测样品拉（推）入光路中，按“ENTER”键进入测量界面，并按“ENTER”键将测量的数据存入数据存储区。

4、标准曲线法
标准曲线法是用已知浓度的标准样品，建立标准曲线，然后用所建立的标准曲线来测量未知样品浓度的一种定量测试方法。

（1）进入标准曲线法主界面（C模式）
按“MODE”键至光标切换到“C”上即可进入标准曲线模式。

在此功能下，可以利用标准样品建立标准曲线，并可用所建标准曲线对未知样品浓度进行测试。

（2）标准曲线法功能框架图。

（3）新建曲线
在标准曲线法主界面下，用上下键选定“新建曲线”，按“ENTER”键进入建立标准曲线步骤，根据仪器界面的提示逐步操作。

①进入标准样品个数设定界面。

选定“新建曲线”后，按“ENTER”键，进入标准样
品个数设定界面。

根据需要，按下下键选择标准样品个数，并按“ENTER”键确认。

注意：标样数的设定范围为：1～12，在此界面下进行波长设定。

②标准样品浓度设定
当样品个数输入完成后自动进入浓度设置界面。

A）此时请将参比样拉入光路，然后按“ZERO”键校空白。

B）根据提示将1号标样拉入光路，并输入1号标准样品的浓度，输入方法如下：
光标最初停留在第一位上闪烁，此时按上下键，则该位数字会在0～9和小数点间变化，选择所需的数字并按“ENTER”键确认，则光标会自动移到第二位上，用同样的方法输入第二位及以后的各位数字。

当输入完最后一位数字按“ENTER”键，则系统会自动记录其吸光度并转入2号标样输入界面。

C）此时将2号标样拉入光路，并参照1号标样的输入方法输入2号标样的浓度。

D）重复上述步骤。

直至最后一个标样的浓度输入完成。

③绘制标准曲线
当最后一个标样的浓度输入完成并按“ENTER”键确认后，系统会自动显示所建立的标准曲线与曲线方程和相差系数R。

注意：
A）浓度的设定范围为：0～9999.9，否则视为无效，需要重新输入，标准样品一般按照浓度由低向高依次放入光路中，即1号样品往往是配制的标准样品中浓度最低的。

B）仪器在曲线建立过程中，若系统认为采入的数据有误（有可能是操作错误，也有可能是是溶液配制有问题），则会蜂鸣3声后返回主界面，且标准曲线无法正常绘出。

④进入浓度测试界面
在标准曲线显示界面下，按“ENTER”键即可进入浓度测试界面。

⑤未知样浓度测定
将参比溶液拉（推）入光路，调0.000A/100.0%T，再将未知浓度的样品拉（推）入光路中，按“ENTER”键，显示器上便可显示相应样品的浓度。

重复上述步骤，可以完成多个样品的浓度测试。

⑥数据的打印或删除
系统最多可以存储200组测试数据，若按“ENTER”键即可进入打印选择界面。

如果仪器连接了打印机，可以选择“打印数据”，然后按“ENTER”进行数据打印；如果系统未连接打印机且用户仅想消除数据，可直接选择“删除数据”后按“ENTER”键确认。

按"取消"键退出。

注意：打印数据后，系统内的存储数据将被清除。

（4）打开曲线
所有建立的曲线都会被自动存储在系统里并按顺序自动编号。

下次使用时可以直接调出曲线进行测试，无需重复建立。

当想调出曲线时，在标准曲线法主界面下，用上下键选定“打开曲线”，按“ENTER”键即可进入已建曲线选择界面。

系统共可存储50条标准曲线，进入曲线选择界面后，用上下键将光标移动到所需要的曲线上，按“ENTER”键确认，则系统会显示出曲线，再按“ENTER”键即可用选定的曲线对未知浓度样品进行测试。

（5）删除曲线
此功能用来删除已保存的曲线，若要删除某条曲线，在标准曲线法主界面下，用上下键选定“删除曲线”，按“ENTER”键进入删除曲线选择界面。

用上下键选定所要删除的曲线方程，
按“ENTER”进入删除再确认界面，选择“是”并按“ENTER”键后曲线方程即被删除，同时返回上级菜单。

按“ESC”返回上级菜单。

5、系统法（F模式）
系统法是工作曲线法的简单应用，如果用户已知曲线方程，可以直接将方程的系数K和B输入仪器，并利用该方程进行未知浓度样品的测试。

（1）进入系统法
在定量测量主界面下，按“MODE”键即可进入系数数测量主界面。

（2）设定系数K
用上下键将光标移动到“曲线参数K”上，按“ENTER”键确认，系统即进入K设定界面。

K值的设定方法同前面建立标准曲线中浓度的输入方法相同，在此不再详述。

需要指出的是在输入K值前，首先要对K值的正负进行选择。

（3）设定系数B
用上下键将光标移动到“曲线参数B”上，按“ENTER”键确认，系统进入参数B设定界面。

方法同K值设定。

（4）测试
B值设定并确认后，系统自动返回到上级界面。

用上下键将光标移动到“测试”上，并按“ENTER”键确认，则系统进入到预测试界面，继续按“ENTER”键进入到数据记录界面，此时将参比溶液放入光路，按“ZERO”键调100%T，然后把待测样品接入光路，近“START”键进行测试，系统将测试结果自动存储。

系统共可存储200组数据。

注意：如果波长未设定，需要在预试界面或测试界面进行波长设定。

四、如何校正0%T？
UV-5100型分光光度计属于全自动型仪器，在测试过程中不需要每次测量都校正0%T，仪器中校正0%T对应的操作为“暗电流校正”。

如果仪器的使用环境发生改变（如：温度、工作电压、环境光线发生变化），则需要进行暗电流校正操作，在“系统应用”中选择“暗电流校正”，确认即可。

(杨明园，武汉大学生命科学学院)。